1) CONSTRUCCIN DE CANTEROS

El procedimiento consiste en colocar materiales, bien sea bloques de cemento,

preferiblemente, varas de bamb o cualquier otro material de desecho, formando un
rectngulo con las dimensiones que se deseasen para el cantero. Para proporcionar las
condiciones adecuadas a los rubros que sern explotados, se toman en cuenta las siguientes
consideraciones: ubicacin, orientacin, dimensin, trazado del terreno y mezcla del sustrato.

Se caracteriza por el uso de herramientas agrcolas como escardillas y rastrillos, con la
finalidad de mover hacia arriba elsustrato que se encuentra en el fondo, para despus
nivelarlo. Se acota, que se procede primero a retirar de ellos los restos de malas hierbas, esto
con la finalidad de dejarlos limpios, antes de dar inicio a un nuevo ciclo productivo.

1.1. PREPARACIN DEL SUSTRATO

Se realiza mezclando partes iguales de tierra negra, estircol de bovino (bosta) y aserrn, para
el llenado posterior de los canteros. Otros materiales a usar pueden ser gallinaza y arena de
ro.

1.2. LLENADO DE LOS CANTEROS

Se procede primero a picar la tierra dentro del rea destinada para el cantero hasta una
profundidad de diez (10) cm, para luego agregar el sustrato, hasta llenar el cantero
completamente a la altura de los bloques.

1.3. DESINFECCIN DEL SUSTRATO

Se reemplaza el sustrato por prdida o aprovechamiento de nutrientes, desinfectando el
mismo una vez que haya sido esparcido en el cantero y esperando entre 7 y 10 das para
sembrar. Esta actividad consiste en aplicar al sustrato de los canteros, el producto qumico
Basamid granulado (en polvo), para desinfectarlo de aquellos microorganismos patgenos que
pudiesen desfavorecer el crecimiento y desarrollo de los cultivos a ser sembrados all
posteriormente. Una vez que se aplica el producto, se procede a regar l... ..


2) l mtodo de siembra a emplear depender de los objetivos que se pretendan alcanzar con el
cultivo, ya que en ocasiones se requiere que el desarrollo del microorganismo se produzca de
forma masiva, mientras que en otras resulta indispensables que las colonias queden aisladas o
que las manifestaciones del metabolismo tengan lugar con tensiones reducidas o privadas de
oxgeno, los mtodos de siembra ms empleados son los siguientes:
1. Siembra por estras.
2. Siembra por puncin.
3. Siembra volumtrica.
4. Siembra masiva.
Siempre que se utilicen instrumentos de siembra de platino o nicrn, deben ser calentados en la
llama del mechero hasta el rojo vivo, antes y despus de realizar la siembra, con el objetivo de
destruir a los microorganismos contaminantes de la superficie del instrumento.
Con independencia del tipo de medio y el mtodo de siembra a emplear sta debe realizarse en
las proximidades de la llama del mechero y a que el calor emanado reduce el nmero de
microorganismos presentes en sus inmediaciones, lo cual es utilizado como un recurso a favor
del proceder asptico.
Siembra por estras
Este mtodo de siembra se realiza sobre la superficie de los medios de cultivo slidos
distribuidos en placas de "Petry" o en tubos de ensayo solidificados en forma de cua.(Slam)
Instrumentos de siembra a emplear.
Para la siembra por estra se utiliza el asa de platino o el hisopo. En algunas ocasiones, como
explicaremos ms adelante, se utilizan ambos instrumentos en la misma siembra.
Procedimientos
Cuando se utilice exclusivamente el asa de platino o nicrn.
1. Coger el asa por el cabo, en forma similar, a cuando tomamos el lpiz para escribir.
2. Introduzca el asa de alambre de platino o nicrn directamente en la zona de color azul
de la llama del mechero, hasta que se ponga al rojo vivo. Seguidamente, proceda a
introducir lentamente el resto del alambre para lograr el mismo efecto.
3. Retire el instrumento de la llama y espere de 4 a 5 segundos con el objetivo de que el
asa se enfre.
4. Con el asa estril y fra tome el volumen o fragmento de la muestra que ser sembrado
y trasldelo de inmediato para el medio del cultivo seleccionado.
5. Si la siembra se fuera a producir en un medio solidificado en forma de cua en tubo de
ensayo, proceda del siguiente modo:
a. Con la mano opuesta a la que sujeta el asa, tome el tubo por l porcin inferior.
b. Con el dedo meique de la mano que sostiene el asa, retire del tubo el tapn de algodn
o la tapa de rosca y retngala(no colocar el tapn o la tapa sobre la mesa de trabajo)
c. Flamee de inmediato la boca del tubo de ensayo, pasndola una o dos veces por la llama
del mechero, con el objetivo de eliminar por incineracin, los microorganismos
contaminantes que se encuentran en esa zona, por la parte externa del tubo. Esta accin
calrica, provoca adems una conveccin del movimiento del oxgeno presente en el
interior del tubo hacia afuera, debido a la desigualdad de calor, lo cual favorece que
decrezca el riesgo de contaminacin.
d. Introduzca el asa con el volumen o fraccin de la muestra en el tubo, hasta el fondo de
la cua. A partir de este momento, la siembra puede realizarse de diferentes maneras,
en dependencia del tipo de microorganismo que pretendemos que se desarrolle en ese
medio de cultivo:

Fig. 119: Siembra microbiolgica en medios de cultivos distribuidos en tubos de ensayo: 1) y 2)
Retirar el tapn del tubo; 3) Flamear la boca del tubo; 4) Introducir el instrumento de siembra
con la muestra y realizar la siembra; 5) Retirar el instrumento y flamear nuevamente la boca del
tubo; 6) Taponar el tubo.
Deslizando el asa, desde el fondo hacia arriba, por toda la superficie de la cua, trazando
una lnea longitudinal.
Deslizando el asa por la superficie de la cua desde el fondo hacia arriba, imprimindole
un movimiento de zigzag.
Motiando toda la superficie de la cua con hisopo.
Efectuando cualquiera de las tres variantes explicadas pero adicionalmente roturando el
medio con el asa, haciendo un pequeo corte longitudinal.
Al concluir la siembra se flamea la boca y se taponea nuevamente el tubo procediendo a
esterilizar el asa en las llama del mechero.

Fig. 120: Siembra en medios slidos en cuas (tubos de ensayo): a) Trazando una lnea
perpendicular desde el fondo hacia arriba; b) Deslizando el instrumento con el inculo de abajo
hacia arriba en forma de zigzag; c) Roturando el medio

Si la siembra se fuera a realizar en la superficie de un medio solidificado en placa de Petry,
proceda de la siguiente manera:
a. Con la mano opuesta a la que sujeta el asa de platino, tome la placa de Petry, de
manera que la tapa quede hacia arriba. Con ayuda del dedo pulgar abra parcialmente la
placa.

Fig. 121: Apertura manual de la placa de Petra con medio de cultivo.
b. Introduzca el asa con la muestra y proceda a deslizarla suavemente en forma de zigzag,
desde la pared, hasta cubrir aproximadamente un tercio de toda la superficie.
c. Cierre la placa y grela varios cm, en contra de las manecillas del reloj, procediendo a
abrirla nuevamente por igual procedimiento.
d. Introduzca nuevamente el asa y haga un segmento similar al anterior, de manera que
las bacterias sembradas en el primer segmento sean removidas para el segundo.
e. Repita esta operacin una o dos veces ms.

Fig. 122 : Mtodo de siembra por estrias en medios de cultivo slidos distribuidos En placas de
Petra
f. Finalmente cierre la placa y colquela sobre la mesa de trabajo boca abajo.
g. Esterilice el asa de platino a la llama del mechero, en la forma explicada antes de dejarla
en el puesto de trabajo.
Cuando la muestra es tomada con hisopo.
1. Si la siembra se va a producir en una cua de agar, se procede en forma similar que la
siembra con asa en este tipo de medio de cultivo.
2. Si la siembra se fuera a producir en medios slidos en placas, el primer segmento se
hace con el mismo hisopo con que se tom la muestra y los restantes se realizan con
asa estril, para lograr una diseminacin por agotamiento, que posibilite el desarrollo
aislado en los ltimos segmentos del microorganismo en estudio. Otra variante es la
diseminacin cruzada, en este caso, en lugar de hacer un primer segmento en zig zig
con el hisopo, se procede a trazar en el centro de la plaza una letra "Z" y a continuacin
con el asa esteril se procede a deslizarse con un movimiento ondulatorio sobre la "Z".

Fig. 123: Siembra por diseminacin cruzada: a) Trazar con el hisopo que contiene el inculo una
"Z"en la superficie del medio; b) Completar la siembra con un asa de platino estril, imprimiendo
movimientos ondulatorios sobre la "Z"
Siembra por puncin
Como es obvio, el instrumento de siembra a emplear ser la aguja de platino y el medio de
cultivo slido, generalmente, en tubo de ensayo. Las manipulaciones y la observancia de las
precauciones de asepsia, son similares que cuando se utiliza el asa. La particularidad que tiene
este mtodo, es que la aguja (con el inoculo) debe atravesar perpendicularmente el medio de
cultivo.

Fig. 124: Siembra por puncin
Siembra volumtrica
Este mtodo de siembra consiste en sembrar una muestra liquida cuyo volumen no puede ser
predeterminado, en medio de cultivo slidos o lquidos. Por ejemplo: En las muestras de
exudado vaginal tomadas con pipetas de Pasteur, no puede determinarse el volumen, ya que
este tipo de pipeta carece de escala de graduacin, sin embargo, la orina empleadas en el
urocultivo o la sangre para el hemocultivo se puede determinar con pipeta o jeringuilla
respectivamente el volumen que ser sembrado.
Siembra masiva
Cuando se desea realizar una siembra masiva se puede utilizar la esptula de Driglaski. En este
caso la gota de muestra liquida se esparce con la esptula por toda la superficie del medio de
cultivo slido imprimindo un movimiento en espiral. La siembra masiva tambin se puede
realizar con un hisopo grueso embebido de un cultivo liquido, procediendo a su deslizamiento
sobre toda la superficie de una placa de agar.

2metodo ambiente es el conjunto de componentes fsicos, qumicos, biolgicos, sociales,
econmicos y culturales capaces de causar efectos directos e indirectos, en un plazo corto o
largo sobre los seres vivos. Desde el punto de vista humano, se refiere al entorno que afecta y
condiciona especialmente las circunstancias de vida de las personas o de la sociedad en su
conjunto.
1
Comprende el conjunto de valores naturales, sociales y culturales existentes en un
lugar y en un momento determinado, que influyen en la vida del ser humano y en las
generaciones futuras. Es decir, no se trata slo del espacio en el que se desarrolla lavida, sino
que tambin comprende seres vivos, objetos, agua, suelo, aire y las relaciones entre ellos, as
como elementos tan intangibles como la cultura
[cita requerida]
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