Repblica Bolivariana de Venezuela

Ministerio del Poder Popular para la Educacin Superior

Asignatura: Bioqumica





Bioqumica




Profesora:








Bachilleres:
NDICE
Pgs.
Desarrollo
1.Tcnicas Instrumentales de la bioqumica:
Fraccionamiento Celular 1
La Autorradiografa 1
Microscopio Electrnico 2
ELISA 3
2.Descubrimientos ms importantes de la Bioqumica :
Dilisis 4
Proyecto Genoma Humano 5
Factor Rh 5
Bibliografa 8












1. TCNICAS INSTRUMENTALES QUE PERMITEN EL AVANCE DE LA BIOQUMICA.

Fraccionamiento celular
Es una tcnica bioqumica utilizada para separar los distintos orgnulos y
componentes celulares para su estudio.
Tcnica
Tras la hemogeneizacin de las clulas en un triturador, se separan los componentes
celulares en una serie de centrifugaciones a velocidades cada vez mayores. Al finalizar cada
centrifugacin se sepan el sobrenadante, se coloca en un tubo nuevo de centrifuga mayor.
El sedimento recogido puede resuspender en un lquido y observarse por microscopa o
pruebas bioqumicas.
Esto permite el estudio de los orgnulos celulares de una forma relativamente
intacta fuera de las clulas. Por ejemplo, las mitocondrias funcionantes pueden utilizarse
para estudiar la generacin celular de energa. En estas tcnicas las clulas se rompen
suavemente y se separan en diversas fracciones que contienen los orgnulos. La
hemogeneizacin es un mtodo en el que se coloca una suspensin celular en un tubo de
vidrio que lleva ajustado en presin de vidrio especialmente diseado o en un triturador
elctrico. El homogeneizado resultante se separa a continuacin en varias fracciones
durante un procedimiento denominado centrifugacin diferencia. Un instrumento
refrigerado que se denomina ultracentrfuga genera fuerzas centrfugas enormes que
separan los componentes celulares de acuerdo con el tamao, superficie y la densidad
relativa.
La autorradiografa
Imagen obtenida sobre una placa fotogrfica por la aplicacin de un corte
de tejido que contiene un cuerpo radiactivo: ste, por su radiacin, impresiona la
placa y revela as su distribucin en el tejido
Se utiliza para estudiar la localizacin intracelular y el comportamiento de los
componentes celulares. Ha sido una herramienta muy valiosa en bioqumica. Por ejemplo,
se ha utilizado para determinar los lugares precisos de la sntesis del DNA, RNA y protenas
dentro de las clulas eucariotas. En este procedimiento, las clulas se exponen a molculas
precursoras marcadas radiactivamente. El istopo que ms se emplea es el tritio (H). Por
ejemplo, el nucletido timidina tritiado se utiliza para estudiar la sntesis de DNA, debido a
que la timidina solo se incorpora a las molculas de DNA. Tras la exposicin al precursor
radioactivo, se procesan las clulas para observarlas mediante microscopa ptico y
electrnica. Los portaobjetos se sumergen en una emulsin fotogrfica. Tras almacenarlos
en la oscuridad, se revela la emulsin mediante tcnicas fotogrficas estndar. La
localizacin de las molculas marcadas radiactivamente viene indicada por el patrn
producido por los granos de plata.
Microscopio Electrnico
Durante los primeros 50 aos, los conocimientos sobre el funcionamiento de los
seres vivos han experimentado una revolucin. La mayor parte del conocimiento actual de
los procesos bioqumicos se debe directamente a las innovaciones tecnolgicas. Por ejemplo,
el diseo del microscopio electrnico como instrumento biolgico por Keith Porter y sus
colegas en los aos 1940 fue responsable de la revolucin de la estructura fina de los
orgnulos. Estructuras como las mitocondrias y los lisosomas no se descubrieron hasta ese
momento. El microscopio electrnico descubri tambin que las membranas del Aparato de
Golgi suelen ser continuas con las del Reticulo Endoplasmtico. Este descubrimiento es
especialmente significativo, debido a la funcin que desempean ambos orgnulos en la
sntesis de protenas.
El microscopio electrnico permite observar la ultraestructura de la clula que no es
posible hacer con el microscopio ptico ms habitual. Se han obtenido con el microscopio
electrnico 1.000.000x. Las microfotografas pueden agrandarse de forma fotogrfica hasta
10.000.000x.
El microscopio electrnico utiliza una corriente de electrones en lugar de luz para
iluminar los especmenes o las muestras biolgicas. Debido a que esta corriente de
electrones tiene una longitud de onda mucho ms corta que de la luz visible, pueden
obtenerse imgenes ms detalladas.
Existen dos tipos de Microscopio electrnico:
o Microscopio electrnico de transmisin: Se utiliza para visualizar especmenes finos,
dado a que su imagen depende de las variaciones de la absorcin de luz, para
aumentar el contraste entre los componentes celulares se utilizan metales pesados
como el osmio o el uranio.
o Microscopio electrnico de barrido: Se utilizan para obtener imgenes
tridimensionales de la estructura celular. Este utiliza electrones que son emitidos
por la superficie del espcimen. ste se recubre con una capa fina de un metal
pesado y luego se barre con una corriente estrecha de electrones. Los electrones
emitidos por la superficie de los especmenes, que se denominan electrones
secundarios, forman una imagen en una pantalla de televisin. Aunque slo pueden
observarse con este tipo de microscopio, es muy til ya que proporciona
informacin sobre la estructura y las funciones celulares por medio de su
visualizacin.

ELISA
Es el acrnimo en ingls para enzimoinmuno anlisis de adsorcin y es un examen
de laboratorio comnmente usado para detectar anticuerpos en la sangre. La sangre se
extrae tpicamente de una vena, por lo general de la parte interior del codo o del dorso de la
mano. Esto se denomina venopuncin. Cuando se inserta la aguja para extraer la sangre,
algunas personas sienten un dolor moderado, mientras que otras slo sienten un pinchazo o
sensacin de picadura. Posteriormente, puede haber algo de sensacin pulstil.
La muestra se enva a un laboratorio donde se vincula el anticuerpo
o antgeno objeto de estudio a una enzima. Si la sustancia a estudiar est presente en la
muestra, la solucin de la prueba se torna de un color diferente.
2. DESCUBRIMIENTOS DE LA BIOQUMICA MS IMPORTANTES.

DIalisis
El mdico holands Willem Kolff construy la primera mquina de dilisis en 1943
durante la ocupacin alemana de Holanda. En los dos aos siguientes, Kolff us esta
mquina para tratar a 16 pacientes de fallo renal agudo, pero no obtuvo buenos resultados.
Entonces, en 1945, una mujer en coma de 67 aos recuper la conciencia tras 11 horas de
hemodilisis, y vivi otros siete aos antes de morir de una enfermedad no relacionada. Fue
la primera paciente tratada exitosamente con dilisis.
Las membranas semipermeables artificiales se utilizan habitualmente en los
laboratorios bioqumicos para separar los pequeos solutos de los solutos ms grandes. Por
ejemplo, esta tcnica que se denomina dilisis, se utiliza como un primer paso importante
en la purificacin de protenas. Un espcimen que contiene protenas impuras se coloca en
una bolsa de dilisis celofn, que luego se suspende en un flujo de agua destilada o en una
disolucin amortiguada. Tras un tiempo todos los solutos pequeos abandonan la bolsa. La
solucin protica, que puede contener muchas impurezas de peso molecular elevado, est
lista para una posterior purificacin.
La hemodilisis es una aplicacin clnica de la dilisis que elimina los desechos
txicos de la sangre en los pacientes con insuficiencia renal transitoria o permanente. Todos
los constituyentes de la sangre, excepto las clulas sanguneas y las protenas plasmticas,
se mueven libremente entre la sangre y el lquido de dilisis. Dado que los tubos de dilisis
permiten el paso de nutrientes (glucosa, aminocidos) y electroltica esenciales (Na, K) se
incluyen stas y otras sustancias vitales en el lquidos de dilisis. Su inclusin permite la
perdida neta de estos materiales de la sangre. Dado a que no estn en el lquido de la
dilisis, los productos de desecho, como la urea y el cido rico, se pierden en grandes
cantidades.
Aunque la hemodilisis es muy eficaz para eliminar las sustancias txicas de
desechos del cuerpo, no resuelve todos los problemas que ocasiona la insuficiencia renal.
Por ejemplo, hasta hace poco, los pacientes con insuficiencia renal con frecuencia sufran
anemias debido a su carencia de una hormona protica denominada eritropoyetina, que
segrega normalmente el rin.
Proyecto Genoma Humano
El proyecto de secuenciacin del genoma humano ha sido el mayor proyecto de
investigacin biomdica de la historia. Se descubri en el ao 1990. Andr Rosenthal y
Yoshiyuki Sakakila informacin contenida en los cromosomas, que hacen que el ser
humano sea como es y que se pueda diferenciar de otros seres vivos. El genoma humano es
lo que da identidad a cada uno de nosotros y tiene que ver con nuestra historia gentica as
como tambin con rasgos fsicos y psicolgicos que puedan estar determinados de ante
mano. Obviamente, el conocimiento del genoma humano es un paso fundamental para
terminar de conocer exactamente cmo se constituye un ser humano desde el punto de
vista biolgico y gentico.
Factor Rh
En fue descubierto en el ao de 1940 por Landsteiner y Wiener.
De acuerdo con el tipo de sangre, cada persona tiene protenas especficas de ese
tipo de sangre en la superficie de los glbulos rojos. Existen cuatro grupos sanguneos: A, B,
AB y O.
A su vez, cada uno de los cuatro grupos sanguneos se clasifica segn la presencia en
la superficie de los glbulos rojos de otra protena que determina el factor Rh. Si alguna
persona es portador de esta protena, es Rh positivo. Y las personas que no son
portadores, son Rh negativo.
La mayor parte de las personas (el 85%) es Rh positivo. Cuando una mujer Rh
negativo y un hombre Rh positivo conciben un hijo, existe la posibilidad de que el beb
tenga problemas de salud.
Los factores Rh se determinan genticamente. Un beb puede tener el grupo
sanguneo y el factor Rh de cualquiera de sus padres o bien una combinacin de ambos. Los
factores Rh siguen un patrn comn de herencia gentica. El gen Rh positivo es dominante
(ms fuerte) e incluso cuando se junta con un gen Rh negativo, el positivo prevalece.
Su importancia radica en que es til determinar el factor Rh del padre y de la madre
embarazada, ya que si la madre es Rh negativo y espera un beb Rh positivo (al igual que el
padre del beb), el sistema inmune de la madre considera a los glbulos rojos factor Rh
positivo del beb como extraos.
De igual manera que cuando una bacteria invade el cuerpo, el sistema inmune
responde desarrollando anticuerpos para combatir y destruir estas clulas extraas.
El sistema inmune de la madre guarda esos anticuerpos por si las clulas extraas
vuelven a aparecer, incluso en un embarazo futuro y es entonces cuando se produce lo que
se llama sensibilizacin al Rh de la madre.
Por lo general, la incompatibilidad Rh no es un problema cuando se trata de un
primer embarazo ya que, a menos que haya algn tipo de anormalidad, la sangre del feto no
entra en el sistema circulatorio de la madre durante el embarazo.
Sin embargo, durante el parto, la sangre de la madre y del beb puede
entremezclarse. Si esto sucede, el cuerpo de la madre reconoce la protena Rh como
una sustancia extraa y comienza a producir anticuerpos para atacar a las protenas Rh
que entran en su sangre.
Esta mezcla de sangre puede ocurrir tambin por transfusiones de sangre con Rh
positivo, por aborto espontneo o provocado, embarazo extrauterino, con una cada o
durante un procedimiento de examen prenatal invasivo (por ejemplo, una amniocentesis o
un muestreo de vellosidades corinicas).


















BIBLIOGRAFA

McKee James R. Bioqumica la base molecular de la vida Editorial McGraw-Hill
Interamericana 3 Edicin. Traducido en Espaa-Madrid. 2003.