tero efecto relajante de los agonistas b2 en combinacin con

inhibidores de la fosfodiesterasa : Estudios en ratas embarazadas

en vivo y en el miometrio humano embarazada en vitrojog_1929 31 .. 39
Judit Verli1 , Anna Klukovits1 , Zsolt Kormnyos2 , Judit Hajagos - Tth1 , Eszter Ducza1 ,
Adrienn B. Seres1 , George Falkay1 y Rbert Gspr1
1 Departamento de farmacodinmica y Biofarmacia de la Facultad de Farmacia y 2
Departamento de Obstetricia y Ginecologa,
Centro Clnico de Albert Szent - Gyrgyi , Facultad de Medicina General, Universidad de
Szeged, Szeged , Hungra
abstracto
Objetivos: Nuestro objetivo fue examinar los efectos de una estimulacin simultnea de los
receptores b2- adrenrgicos y
la inhibicin de las fosfodiesterasas (PDE) uterinas , en el tero de rata embarazada in vivo y en
el tejido uterino humano
in vitro . Tambin nos pusimos en marcha para medir los niveles de cAMP y detectar las
expresiones de la PDE4B isoenzimas y
PDE4D en muestras de tejidos uterinos humanos .
Material y Mtodos : El parto prematuro se indujo en ratas Sprague -Dawley con
lipopolisacrido bacteriano.
Los efectos uterinos de terbutalina solos o en combinacin con el rolipram se ensayaron in
vivo . miometrio humano
tiras de cesreas en embarazos a trmino y en trabajo de parto prematuro fueron estimulados
con oxitocina y
Se estudiaron los efectos inhibitorios de la teofilina , rolipram y terbutalina . La acumulacin de
miometrial
AMPc en presencia de rolipram y la terbutalina se determin mediante inmunoensayo
enzimtico . Las expresiones
de protenas PDE4B y PDE4D se detectaron por transferencia de Western .
Resultados : El selectivo inhibidor de PDE4 rolipram fue ms eficaz que el inhibidor de la PDE
no selectivo
teofilina en la inhibicin de las contracciones inducidas por la oxitocina en el tero humano .
Los efectos tero - relajante
de dosis bajas de terbutalina fueron notablemente potenciados por el rolipram , tanto en las
ratas y en los tejidos humanos . la
cambios en los niveles de AMPc uterinos correlacionados con estos resultados . Al trabajo de
parto prematuro , PDE4B fue el predominante
forma de PDE4 expresa ; a trmino , PDE4D se expres con ms fuerza.
Conclusiones: Una combinacin de los inhibidores selectivos de PDE4 y los agonistas b2 deben
ser considerados para la
tratamiento de contracciones prematuras .
Palabras clave : B2 -mimticos , la fosfodiesterasa , trabajo de parto prematuro , rolipram ,
terbutalina .
introduccin
El nacimiento prematuro , a menudo asociada con la inflamacin genital ,
es la causa principal de mortalidad perinatal y
morbidity.1 Aunque la gestin de especies amenazadas
trabajo de parto prematuro mediante tratamiento tocoltico puede prolongar
gestacin , 2 pruebas con respecto a su eficacia es limitada.
Una importante va de sealizacin implicada en el mantenimiento de
la relajacin del miometrio es la cAMP / cAMPdependent
la protena quinasa A ( PKA) Mientras pathway.3
los receptores b2- adrenrgicos ( b2- AR) agonistas estimulan la
generacin de cAMP en el miometrio , 4 y por lo tanto
son comnmente utilizados para tratar el trabajo de parto prematuro , fosfodiesterasas locales
(PDE ) garantizar la terminacin de sealizacin
por la degradacin de AMPc a la inactiva
5' - AMP 0,5
PDE4 (anteriormente conocido como cAMP -PDE ) es el predominante
isoenzima en la mayora de inflamatoria
clulas y en el myometrium.6 humano Los cuatro genticamente
subtipos de PDE4 diferentes , denominadas PDE4A - D , 7 son
codificada por los empalmes de ARNm alternativos que impliquen por lo
menos 35 diferentes proteins.8 PDE4 A principios de 1970 ,
rolipram , un inhibidor de la PDE de AMPc , se desarroll como una
antidepresivo , aunque sus efectos secundarios ( nuseas y
alteraciones gastrointestinales) descartaron su clnica
desarrollo.7 emesis se asocia con la inhibicin
de PDE4D , mientras que 9 de PDE4B ha demostrado ser
requerido para el lipopolisacrido ( LPS ) - evoc inflamatoria
respuestas . LPS, una endotoxina de bacterias gramnegativas
bacterias , las causas del parto prematuro en animales y ha sido
implicado como un factor desencadenante en trabajo de parto prematuro
humans.10 El inhibidor selectivo de PDE4 prototipo
rolipram y tambin agonistas b - AR se han notificado a
modular la produccin de mediators.11 inflamatoria
En un estudio anterior , hemos demostrado que el rolipram
potenci el efecto tero - relajante de la b2 -AR
terbutalina agonista en intacto y en ratas tratadas con LPS en
in vitro , la relajacin ms pronunciada se detect en
Ratas tratadas con LPS . En el presente estudio, se investig
los efectos tocolticos del rolipram y la terbutalina en intacta
y LPS tratada con ratas finales embarazadas en vivo y en
uterino humano especmenes in vitro. Niveles de AMP cclico
y las expresiones de protenas PDE4B y PDE4D
Tambin se determinaron en los tejidos uterinos humanos de
plazo y trabajo de parto prematuro .
Mtodos
Animales
Los animales fueron tratados de acuerdo con la Comisin Europea
Directivas del Consejo de las Comunidades ( 86/609/ECC ) y
la Ley Hngara para la Proteccin de los Animales
en Investigacin ( XXVIII.tv.32 . ) . Los experimentos con
sujetos animales se llevaron a cabo con la aprobacin de
el Comit tico de Investigacin Animal de Hungra
(nmero de registro : IV./01758-2/2008 ) .
Sexualmente maduros ratas Sprague -Dawley hembras (cuerpo
masa : 140-160 g, 50 a 60 das de edad) se aparearon en el
horas de la madrugada . La copulacin fue confirmada por
la presencia de un tapn de copulacin o espermatozoides en el
la vagina . El da de la copulacin fue considerado como el
primero das de embarazo . Los animales fueron alojados en
temperatura ( 20-23 C ) , la humedad ( 40-60%) y de la luz -
( 12 h de luz y 12 h de oscuridad ) habitaciones regulados , con agua
y la ingesta de alimentos disponibles ad libitum .
En los tratamientos in vivo
Los animales se dividieron en dos grupos ( n = 10 en
cada uno) : ( i ) las ratas embarazadas intactos en el da 22 del embarazo
( trmino) , y ( ii ) las ratas tratadas con LPS ( IP 125 mg /
da , Sigma -Aldrich , Budapest , Hungra ) para 3 consecutiva
da fromday 18 de embarazo, en la madrugada
horas , para evocar el nacimiento prematuro , que se produjo en el
principio de la tarde del da 20.12
En los estudios in vivo miogrficas
Los estudios miogrficas in vivo se realizaron en ratas intactas
(en el da 22 del embarazo; a trmino ) y sobre LPStreated
ratas ( en el da 20 de la gestacin , al parto prematuro ), en el
horas de la maana entre las 08.00 y las 10.00 horas. ratas
se anestesiaron con una mezcla de ketamina y xilazina
( 36 y 4 mg / kg, respectivamente ) IP , y la yugular
Se canul la vena para la administracin i.v. la administracin del frmaco . despus
laparotoma , el cuerno uterino izquierdo fue expuesto , y un
transductor de fuerza implantable / desplazamiento ( SEN- 04 -
FSG2 ; Experimetria , Budapest , Hungra ) se sutur
sobre la superficie del miometrio , dejando la amnitico
membranas intactas . No hubo fuga de amnitico
fluido durante los experimentos . Los animales con la
sensores se colocaron en una jaula de Faraday hecho
de hierro para filtrar electromagntica ambiental
ruido.
Los desplazamientos mecnicos provocados por las contracciones
de las tero se convirtieron a elctrica
impulsos por el transductor , y amplificada por un
amplificador de puente ( AMP- 01 -SG , Experimetria , Budapest,
Hungra). Se detect la seal elctrica amplificada
y analizada por el S.P.E.L. ISOSYS avanzadas
Sistema de Adquisicin de Datos ( Experimetria , Budapest,
Hungra). El tono basal se registr durante 4 min . la
rea bajo la curva (AUC ) de este 4 min fue siempre
utilizados como control , y los inhibitionwas calculan como
el porcentaje de este perodo inicial . El AUC de 4 min
Se evaluaron periodos ; los efectos de la terbutalina o la
terbutalina + rolipram se expresaron como porcentajes
de la actividad espontnea .
Las dosis de terbutalina ( Sigma - Aldrich , Budapest ,
Hungra ) , y rolipram ( Sigma - Aldrich , Budapest ,
I.v. Hungra ) , se administraron y la contraccin
se registraron seales . Dos dosis de 0,5 mg / kg de terbutalina
fueron seguidos por 10 dosis de 1 mg / kg a 5 - min
se administr 0,25 mg / kg de rolipram ; intervalos
de manera similar a la terbutalina solo. En combinacin , rolipram
fue dado en una sola dosis de 500 mg / kg. El aplicada
dosis se ha elegido en la curva de dosis - respuesta de los
rolipram , por lo tanto, la dosis de provocar 30 % de relajacin . este
dosis ( 500 mg / kg ) es de acuerdo con algn anterior
en estudios in vivo har sobre rats.13 , 14
En los estudios in vitro de la contractilidad
Treinta muestras de biopsia de tejido del miometrio humano
se obtuvieron en la cesrea en el tercer trimestre del embarazo en dos grupos: en el embarazo
a trmino
( 37 a 41 semanas de gestacin , n = 19 ) y en el nacimiento prematuro
(32-36 semanas , n = 11 ) . En cesrea embarazo a trmino
la entrega se indica mediante un parto por cesrea anterior ,
presentacin de nalgas , sospechoso desproporcin cfalo-plvica
o miopa . Paridad vari de 0 a 3 , y significa
la edad materna fue de 30,8 aos ( 22-41 aos ) . Ninguno de los
las mujeres recibieron un agente tocoltico , y no hubo
signos de trabajo de parto.
Parto pretrmino ocurri en madres con doble
embarazos , o la mano de obra se sealan con un curso
infeccin, leucocitosis, toxemia , sufrimiento fetal o
la restriccin del crecimiento . En el grupo de prematuros , la paridad vari
de 0 a 3 , la edad materna promedio fue de 32,7 aos ( 26 -
42 aos) . Tres de cada 11 pacientes recibieron tocolticos
terapia (sulfato de magnesio) para detener uterina pretrmino
contracciones , que han demostrado ser ineficaces . Todo el
las operaciones se llevaron a cabo bajo anestesia espinal .
El Comit tico de la Universidad de Szeged
aprobado el protocolo clnico (nmero de registro :
114/2009 ) .
Las muestras de tejido ( 10 10 20 mm) desde la parte superior
borde de una incisin transversal inferior segmento se redujeron
despus de entregar al nio , pero antes de que la oxitocina era
dado a las madres. Los tejidos se almacenaron en solucin de Krebs-
Henseleit (que contiene en mM : 118 NaCl , 5 KCl,
2 CaCl2 , 0,5 MgSO4 , 1 K2SO4 , 25 de NaHCO3 , 10 de glucosa ;
pH 7,4) a 4 C , y se tuvieron en el experimento
dentro de las 12 h de la coleccin. Cada tejido se cort en al
menos cuatro tiras ( aprox. 3 5 10 mm ) , montados verticalmente
en un bao de rganos ( solucin de Krebs - Henseleit a
37 C; perfundido con 95 % de O2 + 5 % de CO2 ) , y probado en
paralelas. Despus del montaje, se equilibraron las tiras
durante ~ 2 h antes de los experimentos se llevaron a cabo , con una
solucin cambia cada 15 min . Los especmenes expuestos
contracciones espontneas durante el perodo de incubacin .
La tensin inicial se fij a 3,00 g, que se relaj
a 1,5 g al final de la equilibracin . La tensin de la
tiras del miometrio se midi con un isomtrica
transductor de fuerza ( SG- 02; Experimetria , Budapest,
Hungra) y grabado con un S.P.E.L. avanzado
Sistema de Adquisicin de Datos ISOSYS .
Contracciones rtmicas fueron provocados por 10-6 M oxitocina.
Despus de la estimulacin , la teofilina , rolipram , o
terbutalina se aadi en forma no acumulativa.
Despus de cada concentracin de frmaco ensayado , las tiras
se lavaron tres veces , se dejaron recuperar durante 5 min ,
y, a continuacin contrado de nuevo con oxitocina . tejido ligero
fatiga slo se observ antes de la ltima dosis
que no influy en nuestras mediciones de manera significativa.
El efecto de la terbutalina tambin fue probado en el
presencia de 10-6 M rolipram . AUC de perodos de 4 min
se evaluaron ; los efectos del rolipram y terbutalina
se expresaron como porcentajes de la oxitocina inducida por el
contracciones .
Medicin de la acumulacin de AMPc uterina
Muestras de tejido uterino humano desde el embarazo a trmino
y el parto prematuro se incubaron bajo la
mismas condiciones en un bao de rganos como se describe anteriormente .
Se detectaron acumulaciones basal de cAMP en presencia
del rolipram slo ( 10-6 M ; 10 min ) . En la presencia
del rolipram ( 10-6 M ; 10 min ) , la acumulacin de AMPc
fue estimulada por la terbutalina (10-8 , 10-6; 10-4 M;
10 min ) y, finalmente, la forskolina se aadi al bao
( 10-5 M ; 10 min ) . Despus de la estimulacin , las muestras fueron
se congelaron inmediatamente en nitrgeno lquido en el que
se almacenaron hasta la extraccin de cAMP.15 uterino
la acumulacin de AMPc se midi con un EIA de AMPc
Kit ( Sigma- Aldrich , Budapest , Hungra ) y el tejido
los niveles de cAMP se expresan en pmol / mg de tejido .
Western Blot
Las protenas se aislaron a partir de muestras uterinos humanos
con la Nucleospin Kit de Macherey - Nagel ( Izinta ,
Budapest, Hungra ) de acuerdo con el fabricante de
instrucciones . Se determinaron las concentraciones de protenas
por BioSpec - nano ( Shimadzu , Budapest, Hungra).
Sesenta microgramos de protena por pocillo fue sometido a
electroforesis en 4-12 % NuPAGE Bis - Tris gel en
XCell SureLock Unidades Mini -Cell (Invitrogen , Hungra) .
Las protenas se transfirieron de los geles a nitrocelulosa
membranas, utilizando el Sistema de Transferencia de iBlot gel ( Invitrogen ,
Hungra). Los blots se incubaron en un agitador
con PDE4B , PDE4D y policlonales b -actina
(Santa Cruz Biotechnology, CA, EE.UU. ; 1:200 ) en el
tampn de bloqueo , la inmunorreactividad se detect con
la mancha inmunodeteccin WesternBreeze Chromogenic Western
kit ( Invitrogen, Hungra). La ptica
Se determin la densidad ( DO) de cada banda inmunorreactiva
con software de anlisis de Kodak 1D Imgenes . sobredosis
Se calcularon los valores en unidades arbitrarias luego de rea local
sustraccin de fondo .
Los anlisis estadsticos
En los estudios en animales y la contractilidad humana , AUC
fueron evaluados estadsticamente y inhibitoria mxima
efectos ( Emax ) se calcularon con el Prism 4.0
( GraphPad Software Inc San Diego , CA, EE.UU. ) computadora
programa . Para las evaluaciones estadsticas , los datos fueron
analizada mediante el uso de la prueba t no apareado o de un solo sentido
ANOVA comprueba con el post-test de Newman- Keuls .

Resultados
En los estudios de contractilidad in vivo en ratas
Los efectos de la terbutalina y el rolipram - B2 agonista
fueron investigados in vivo. Las contracciones fueron inhibidas
dependiente de la dosis por ambos compuestos . mximo
efecto inhibidor del rolipram en ratas intactas fue
96.7 ? 3,1 error estndar de la media (SEM ) %
( CI50 = 0,8 0,1 mg / kg ; ? . Fig. 1a ) . Las inhibiciones mximas
consigue con terbutalina + rolipram no fuera
estadsticamente diferente en ratas intactas en el da 22 del embarazo
( ? 86,1 8,9 SEM % ; . Fig. 1b ) y en tratados con LPS
ratas en el da 20 (89,0 % ; 9,5 SEM ? . Fig. 1c ) . En el caso de la
combinacin , rolipram ( 500 mg / kg iv ) potenci el
efecto de terbutalina , y este efecto prevaleci principalmente
a las dosis bajas de terbutalina . En la presencia de rolipram
y en la dosis ms baja de terbutalina ( 0,5 mg / kg ) ,
Sin embargo , la inhibicin de las contracciones fue significativamente
mayor (P < 0,001 ) en las ratas tratadas con LPS
( 48,1 % 4,7 SEM ; ? . Fig. 1c ) que en las ratas intactas
( ? 33,3 1,4 SEM % ; . Fig. 1b ) .
En ratas intactas a trmino , los valores de IC50 para la terbutalina
( IC50 = 2,94 ? 1,31 mg / kg ) no eran diferentes de la
combinacin de terbutalina y rolipram ( CI50 =
3.53 ? 1,54 mg / kg ) . Del mismo modo , en las ratas tratadas con LPS en
da 20 , los valores de IC50 para la terbutalina ( IC50 =
2.69? 0,98 mg / kg ) no eran diferentes de la combinacin
de terbutalina y rolipram ( IC50 = 5,05 ?
2,71 mg / kg ) .
En los estudios de contractilidad in vitro en humanos
muestras uterinas
La actividad uterina se caracteriz por las AUC de
las curvas de concentracin-respuesta de uterino humano
tiras . Tiempo de experimentos de control mostraron que el
contracciones estimuladas oxitocina no disminuyeron significativamente
a travs del experimento . La teofilina y
rolipram reduce las contracciones inducidas por la oxitocina -
un 24,9 ? 3.6 SEM % y 61,9 ? 4,5 SEM % , respectivamente .
El efecto de contraccin de inhibicin del rolipram
fue significativamente mayor que la de teofilina
( P < 0,001 ) (Fig. 2 ) .
Los efectos de la combinacin de terbutalina y
rolipram se ensayaron tambin . Mientras que la terbutalina solos
inhibe las contracciones oxitocina estimulada por
71.6 ? 4.5 SEM % , en el embarazo a trmino , en el adicional
presencia de rolipram M 10-6, las contracciones
fueron inhibidas en un 78,3 ? 4,7 % de SEM (Fig. 3a ) . en
parto prematuro , la mxima contraccin de inhibicin
efecto de terbutalina solo era 39,7 ? 4,6 SEM % , pero
este se increment a 63,5 ? 4,7 SEM % en presencia del rolipram . El efecto de 10-10 M
terbutalina era ms
que duplicado en presencia de 10-6 M rolipram
( P < 0,001 ) (Fig. 3b ) .
niveles de cAMP en las muestras uterinas humanos
Los niveles de cAMP en las muestras de tejido uterino humano de
Se midieron el parto prematuro y de un embarazo a trmino
en la presencia de 10-8 , 10-6 , 10-4 M terbutalina en
combinacin con 10-6 M de rolipram . Niveles basales de AMPc
(Slo 10-6 M de rolipram ) no fueron significativamente diferentes
entre los grupos de natalidad embarazadas y prematuros plazo.
Hubo un aumento dependiente de la concentracin de la
terbutalina estimulado los niveles de cAMP en ambos grupos. en
Concentracin de 10-6 M , terbutalina provoc significativa
elevacin de los niveles de cAMP ( P < 0,01 ) en comparacin con los
el nivel basal , en el grupo de parto prematuro. Adems , en
10-8 M concentracin terbutalina provoc significativa
elevacin de los niveles de cAMP ( P < 0,01 ) en comparacin con los
el nivel basal , tanto en el trmino y el parto prematuro
grupos . En las muestras de nacimientos prematuros de los niveles de cAMP
fueron significativamente mayores ( P < 0,05 ) en la presencia de
M terbutalina 10-6, que en los que desde el embarazo a trmino.
No hubo diferencias significativas entre los
los grupos de 10-8 M o 10-4 M terbutalina ( fig. 4 ) .
Estudios de Western blot
Western blot revel la presencia de PDE4B
y PDE4D en los tejidos uterinos de plazo y
trabajo de parto prematuro . La expresin de PDE4B ( fig. 5a ) fue
significativamente mayor en trabajo de parto prematuro que a trmino
embarazo . La DO del PDE4D , sin embargo , fue significativamente
mayor en los tejidos uterinos del trmino
embarazos ( Fig. 5b ) que en trabajo de parto prematuro .
discusin
En vista de las relativamente altas tasas de mortalidad materna adversa
y eventos fetales durante toclisis , y con la esperanza de mejorar el resultado perinatal, existe
una creciente
inters en los estudios experimentales en el uso de diferentes
combinaciones de frmacos. Numerosos experimentos han sugerido
las combinaciones de agentes tocolticos, tales como la
PDE5 sildenafil inhibidor con el bloqueador de los canales de Ca2 +
nifedipina, 16 el atosiban antagonista de la oxitocina con
progesterona, agonistas b2-17 AR con nifedipina, 18 y
agonistas b2-AR con gestagens.19 Ahora hemos probado
los efectos tocolticos de combinaciones de la B2-AR
terbutalina agonista y el inhibidor de PDE4 rolipram.
Los agonistas b2 -AR ejercen una inmediata y profunda
efecto sobre el muscle.20 liso uterino relajante Recientemente
revisiones sistemticas publicadas (Lancet , Base de Datos Cochrane)
estn de acuerdo en que los agonistas b2 -AR pueden retrasar la entrega por
48 h , pero la terapia de larga duracin con los agonistas b2 -AR a menudo
falla. Las razones por las que la administracin a largo plazo con frecuencia
conduce a un resultado teraputico ms pobres son una
desensibilizacin inducida por medicamentos de la b2 -AR , y el
cambios fisiolgicos en pregnancy.21 tarde, 22 A pesar de
sus efectos secundarios ( taquicardia desfavorable y el riesgo
de la hipertensin pulmonar) , los agonistas b2 -AR todava
tienen un papel insustituible en therapy.23 tocoltico , 24
Por otro lado , el potencial efecto beneficioso de
el inhibidor selectivo de PDE4 rolipram como tocoltico
agente an no ha sido confirmada . Nos planteamos anteriormente
evidencia de que el rolipram potencia el efecto tocoltico
de terbutalina tanto en intacto y en mujeres embarazadas tratadas con LPS
ratas , debido a la mayor levels.25 campamento en el
presente estudio, nos propusimos investigar sus efectos
en ratas embarazadas en vivo. La deteccin de la miometrial
actividad in vivo se acompaa de la ventaja de permitir
estudios de la eficacia de estos frmacos de acuerdo
a los principios de pharmacology.26 integrador
Los experimentos en ratas anestesiadas revelaron que la
la co-administracin de rolipram potenci el uterusrelaxing
efecto de la terbutalina . Este efecto fue ms pronunciado
a dosis ms bajas de terbutalina . El grado de
relajacin logrado con la primera dosis de terbutalina
era de 2-2,5 veces mayor en el intacta y en el LPStreated
ratas , respectivamente , cuando era coadministrar
con rolipram . En cuanto a las tres primeras dosis de
terbutalina , la combinacin fue ms eficaz en la
tiempo de trabajo de parto prematuro inducida por LPS que en normales
plazo , que est de acuerdo con nuestra anterior in vitro
hallazgos .
En experimentos humanos , teofilina ejerci una muy
efecto limitado , de manera similar a los estudios anteriores sobre PDE4
transfectadas cells.27 El selectivo rolipram inhibidor de PDE4 ,
sin embargo , ha demostrado ser mucho ms eficaz en
la inhibicin de las contracciones uterinas inducidas por la oxitocina . estos
resultados se corresponden con hallazgos anteriores sobre el ser humano
tero en embarazo.6 a trmino ,28 - 31 Bardou et al. reportado
en el primero que los inhibidores de PDE potencian los efectos de
agonistas b2 -AR en el miometrio humano a corto plazo
en vitro.28 franova et al. investigado los efectos in vitro
de la combinacin de rolipram y el agonista B2 - AR
salbutamol , ambos administrados en una sola dosis de 10-4 M , en
el miometrio humano en term.32 Se encontr que
las contracciones inducidas por la oxitocina - fueron inhibidas por
aproximadamente el 70 % por la combinacin de estos dos frmacos ,
aunque las dosis aplicadas fueron muy altas . Sin embargo ,
ningn estudio se ha realizado con rolipram y
terbutalina en muestras humanas de parto prematuro.
Rolipram tambin potenci el efecto tero - relajante
de terbutalina en el corto plazo y el tero humano prematuro,
siendo su efecto ms pronunciado en menor terbutalina
concentraciones y en el nacimiento prematuro. Las conclusiones relativas
los niveles de cAMP tejido estaban en armona con
los resultados de los ensayos in vitro de la contractilidad en , lo que sugiere
que la principal interaccin se produce en un intracelular
nivel de cAMP.
Estudios previos han demostrado que los cuatro
Subtipos de PDE4 se expresan en la fraccin citoslica
del trmino humano miometrio , 6 y PDE4 selectivos
inhibidores han sido reportados para exhibir una mayor eficacia
en la embarazada que en el miometrio no embarazada .
31 Las isoenzimas de PDE4 juegan un papel en
procesos inflamatorios, 32 pero no se ha registrado ningn dato
en cuanto a si estas protenas se expresan en la
prematuro tero humano . Nuestro estudio de Western blot demostr
la regulacin al alza de PDE4B en humanos
muestras en el nacimiento prematuro. Esto bien podra ser una consecuencia
de procesos inflamatorios que conducen en curso
de trabajo de parto prematuro . La infeccin intrauterina ha sido
reconocida como la causa primaria de delivery.33 prematuro
En el parto prematuro , la expresin de PDE4D fue menos
pronunciada que la de la PDE4B , que es similar a
hallazgos anteriores en term.34 Por lo tanto , la inhibicin de la
PDE4D probablemente no es necesaria para la toclisis efectiva ,
lo que permitira el desarrollo de PDE4Bselective
inhibidores , con el beneficio de ningn efecto adverso
efectos emticos .
agonistas b2 - AR y los inhibidores de PDE4 pueden ser de gran
valor para la toclisis , dado que tanto alivian la inflamacin
y prolongar pregnancy.33 Aunque la expresin
de PDE4 ha sido reportado en el cardiaco
ventrculos , los inhibidores de PDE4 no produjeron ningn positivo
efectos inotrpicos , que es una accin tpica de la PDE3
inhibitors.35 Adems del efecto favorable de la tocoltico
por encima de combinacin , una menor incidencia de sideeffects cardacos
Tambin se puede esperar .
Dada la baja frecuencia de cesrea prematura
secciones , creemos que todas las muestras prematura
debe considerarse como una posibilidad casi nico
para la investigacin. Reconocemos que nuestro tamao de la muestra es
relativamente bajo , y las razones de dicha intervencin
son diversas . Sin embargo , a pesar de la patologa diversa ,
las expresiones de PDE4B fueron siempre mayores en el
tejidos prematuros , lo que sugiere que esta enzima puede
ser considerado un objetivo fundamental para el desarrollo de frmacos .
Llegamos a la conclusin de que las combinaciones teraputicas putativas
de los agonistas b2 -AR y los inhibidores selectivos de PDE4 puede mejorar la eficacia de la
terapia tocoltico humana. Rolipram
solo muestra un fuerte efecto inhibidor in vivo,
aunque, en la terapia humana una dosis tan altas pueden
dar lugar a efectos secundarios graves. Por otro lado, la
la co-administracin de rolipram en una dosis baja con terbutalina
dado lugar a una relajacin tero equivalente a la que
del rolipram solo. Tales combinaciones de frmacos tambin pueden
tienen la ventaja de permitir la administracin de
dosis ms bajas de agonistas B2-AR, retrasando de este modo la
desensibilizacin de los receptores b2-AR. Partimos de que
el desarrollo de nuevos inhibidores de PDE4B selectiva
puede mejorar an ms la eficacia de la toclisis.