Protocolo:

Instrumentacin:
Balanza analtica: de sensibilidad igual o mayor a 0,1mg.
Espectrofotmetro de absorcin molecular UV-VIS Jasco v- (me falta el numero q no me acorde)
Materiales:
Pipetas volumtricas: 1ml, 2ml, 3ml, 5ml, 10ml, 20ml, 25ml.
Matraces de aforo: 3 matraces de 100ml; 11 matraces de 50ml.
Vidrio de reloj: 1
Varilla de agitacin: 1
Probeta de 10ml: 1
Vaso de precipitado de 50ml: 4
Piseta: 1
Reactivos:
Agua grado reactivo para anlisis exenta de nitrito
Patrn de NO
2
1000 ppm
cido ortofosfrico
Sulfanilamida
N- (1-naftil)-etilendiamina diclorhidrato
Procedimiento preparacin de los patrones intermedios:
Patrn intermedio de 10pppm de NO
2
:
Adicionar 1 ml del patrn de 1000ppm de NO
2
a un matraz de 100ml y enrasar con agua grado
reactivo para anlisis exenta de nitrito.
Patrn intermedio de 0,100pppm de NO
2
:
Adicionar 1ml del patrn de 10ppm de NO
2
a un matraz de 100ml y enrasar con agua grado
reactivo para anlisis exenta de nitrito.

Preparacin de la muestra:
Adicionar 1ml de la muestra entregada por la profesora a un matraz de 50 ml enrasar con agua
grado reactivo para anlisis exenta de nitrito.
Muestra 1: (dilucin 1)
Adicionar 5 ml de la muestra preparada anteriormente a un matraz de 50 ml enrasar con agua
grado reactivo para anlisis exenta de nitrito.
Muestra 2: (dilucin 2)
Adicionar 1 ml de la muestra preparada anteriormente a un matraz de 50 ml enrasar con agua
grado reactivo para anlisis exenta de nitrito.
Procedimiento preparacin reactivo color:
A 40ml de agua grado reactivo para anlisis exenta de nitrito, adicionar 5 ml de cido ortofsforico
y 0.5 g de sulfanilamida disolver completamente la sulfanilamida y agregar 0.05 g de N- (1-naftil)-
etilendiamina diclorhidrato. Mezclar para disolver y luego diluir a 50 ml con agua grado reactivo
para anlisis exenta de nitrito.
Ajuste y calibracin del instrumento:
1- Encender el espectrofotmetro.
2- Seleccionar longitud de onda de trabajo, 543nm.
3- Estabilizar el sistema.
4- Ajustar el control cero de transmitancia.
5- Ajustar el control cero de absorbancia con la solucin trmino cero.
6- Seleccionar el modo de lectura (absorbancia, transmitancia, o concentracin)
7- Leer el set de estndares, registrando los valores de absorbancia.
Anlisis de las muestras:
Una vez calibrado el instrumento determinar la concentracin de la muestra de acuerdo al
siguiente protocolo:
1- Leer las muestras en lotes de 5 en 5, verificando la calibracin y la estabilidad del cero,
entre lotes de muestras. Repetir las lecturas en caso de ser necesario.
2- Despus de introducir cada muestra, blanco o estndar, esperar a que el sistema se
estabilice.
3- Hacer diluciones apropiadas de la muestra cuando las concentraciones caen fuer de la
curva de calibracin.


Control de calidad analtica:
Por cada set de anlisis llevar en forma paralela a las muestras, los siguientes controles:
1- Un blanco reactivo preparado a partir de agua para anlisis grado reactivo exenta de
nitrito.
2- Un ensayo duplicado de una muestra.