ESTRUCTURA MOLECULAR DE LOS CIDOS NUCLEICOS

Una estructura para el cido Desoxirribonucleico

Deseamos sugerir una estructura para la sal del cido Desoxirribonucleico (A.D.N.). Esta
estructura tiene aspectos novedosos que son de un inters biolgico considerable.
Una estructura para el cido nucleico ya ha sido propuesta por Pauling y Corey(1). Amablemente
han puesto el manuscrito a nuestra disposicin antes de su publicacin. Su modelo consiste en tres
cadenas entrelazadas, con los fosfatos cerca del eje de la fibra, y las bases hacia fuera. En nuestra
opinin, esta estructura es poco satisfactoria por dos razones: (1) creemos que el material del que se
obtienen los diagramas de rayos-X es la sal, no el cido libre. Sin los tomos de hidrgeno del
cido no est claro qu las fuerzas puedan mantener la estructura unida, especialmente porque los
fosfatos cargados negativamente cerca del eje se repeleran el uno al otro. (2) Algunas de las
distancias de van der Waals parecen ser demasiado pequeas.
Otra estructura en cadena triple ha sido sugerida por Fraser (en prensa). En su modelo los
fosfatos, estn hacia fuera y las bases hacia dentro, mantenindose unidas por enlaces de hidrgeno.
Esta estructura as descrita est ms bien mal definida por lo que no la comentamos.
Deseamos ofrecer aqu una estructura radicalmente distinta para la sal del cido
desoxirribonucleico. Esta estructura tiene dos cadenas helicoidales cada vuelta en torno al mismo
eje (ver diagrama). Hemos hecho las suposiciones qumicas usuales, ms especficamente, que cada
cadena consiste en grupos fosfato-dister uniendo residuos de -D-desoxirribofuranosa con enlaces
3',5'. Las dos cadenas (pero no sus bases) se relacionan por una dada perpendicular al eje de la
fibra. Ambas cadenas siguen una hlice dextrgira, pero debido a las dadas las secuencias de
tomos en las dos cadenas corren en direcciones opuestas. Cada una de las cadenas, por separado
se parece al modelo N 1 de Furberg (2); esto es, las bases estn sobre la parte interna de la espira y
los fosfatos en la externa. La configuracin del azcar y los tomos cercanos se aproxima a la
"configuracin estndar" de Furberg, el azcar se dispone perfectamente perpendicular a la base
adjunta. Hay un residuo sobre cada cadena cada 3,4 en la direccin-z. Hemos asumido un ngulo
de 36 grados entre residuos adyacentes en la misma cadena, para que la estructura se repita despus
de 10 residuos sobre cada cadena, esto es, despus de 34 . La distancia de un tomo de fsforo
desde el eje de la fibra es 10 . Como los fosfatos estn sobre la parte externa, los cationes tienen
fcil acceso a ellos. La estructura es abierta, y su contenido de agua es ms bien alto. Para nosotros,
a contenidos bajos las bases se acercaran y la estructura sera ms compacta.
El aspecto novedoso de la
estructura es la manera en
que las dos cadenas se
mantienen unidas por bases
pricas y pirimidnicas. Los
planos de las bases son
perpendiculares al eje de la
fibra. Se renen en pares,
una base de una de las
cadenas unida mediante
enlaces de hidrgeno a una
base de la otra cadena, y as
las dos se unen lado a lado
con idntica coordenada z.
Una del par debe ser purnica
y la otra pirimidnica. Los
enlaces de hidrgeno se
hacen como se indica a
continuacin: purina en
posicin 1 con pirimidina en
posicin 1; purina en
posicin 6 con pirimidina en
posicin 6 [etc.]
Esta figura es puramente esquemtica.
Las dos cintas simbolizan las cadenas
azcar-fosfato, y las varillas horizontales
los pares de bases que sostienen las
cadenas unidas. La lnea vertical marca
el eje de la fibra.

Si se asume que las bases slo aparecen dentro de la estructura en la forma tautomrica ms
plausible (que es, con la configuracin ceto ms que con la enol) se encuentran los pares especficos
de bases que pueden unirse. Estos pares son: la adenina (purnica) con timina (pirimidnica), y
guanina (purnica) con citosina (pirimidnica).
En otras palabras, si una adenina es uno de los miembros de un par, sobre una cadena,
entonces el otro miembro debe ser timina; algo similar ocurre para la guanina y la citosina. La
sucesin de bases sobre una cadena nica no parece estar restringida de ninguna forma. Sin
embargo, si slo pueden formarse determinados pares de bases, se sigue que conociendo la sucesin
de bases sobre una de las cadenas, entonces la sucesin sobre la otra cadena queda determinada
automticamente.
Se ha encontrado experimentalmente (3,4) que la relacin de adenina a timina, y la relacin
de guanina a citosina, estn siempre muy cerca de la unidad para el cido desoxirribonucleico.
Probablemente es imposible construir esta estructura con un azcar ribosa en lugar de desoxirribosa,
el tomo extra de oxgeno la hara demasiado cerrada y formara un enlace de van der Waals.
Los datos de rayos-X anteriormente publicados (5,6) sobre el cido desoxirribonucleico son
insuficientes para una prueba rigurosa de nuestra estructura. Hasta el momento lo que podemos
decir es a grosso modo compatible con los datos experimentales, pero debe observarse como
improbado hasta que se haya verificado con resultados ms exactos. Algunos de estos se aportarn
en las siguientes comunicaciones. Nosotros no ramos conscientes de los detalles de los resultados
presentados cuando ideamos nuestra estructura, que descansa principal aunque no enteramente
sobre datos experimentales ya publicados y argumentos estereoqumicos.
No se escapa a nuestra comunicacin que el emparejamiento especfico que hemos postulado
sugiere inmediatamente un mecanismo copiador para el material gentico.
Todos los detalles de la estructura, incluyendo las condiciones presumidas para su
construccin, junto con un conjunto de coordenadas para los tomos, se publicarn con
posterioridad.
Estamos en deuda con el Dr. Jerry Donohue por las constantes crticas y consejos,
especialmente sobre distancias interatmicas. Tambin hemos sido estimulados por el conocimiento
general de la naturaleza y los resultados experimentales inditos as como ideas del Dr. M.H.F.
Wilkins, la Dra. R.E. Franklin y sus colaboradores del King's College, en Londres. Uno de nosotros
(J.D.W.) ha sido subvencionado por una beca de la Fundacin Nacional para la Parlisis Infantil.

Experimento de morgan
En 1910, descubri un mutante de ojos blancos entre individuos silvestres de ojos rojos. La
progenie del cruzamiento de un macho de ojos blancos con una hembra de ojos rojos
present ojos rojos, lo que indicaba que el carcter "ojos blancos" era recesivo. Morgan
denomin white al gen correspondiente, iniciando as la tradicin de nombrar a los genes
segn el fenotipo causado por sus alelos mutantes. Al cruzar estas moscas entre s, Morgan
se percat de que slo los machos mostraban el carcter "ojos blancos". De sus
experimentos, concluy que (1) algunos caracteres se heredan ligados al sexo, (2) que el
gen responsable del carcter resida en el cromosoma X, y que (3) probablemente otros
genes tambin residan en cromosomas especficos. l y sus estudiantes contaron las
caractersticas de miles de moscas y estudiaron su herencia. Empleando la recombinacin
de los cromosomas, Morgan y Alfred Sturtevant prepararon un mapa con la localizacin de
los genes en el cromosoma. Morgan y sus estudiantes tambin escribieron el libro
Mechanisms of Mendelian Heredity. Morgan se traslad a CalTech en 1928. Morgan muri
en Pasadena, California.
Experimento de chase y hershey
Hershey y Chase llevaron a cabo experimentos con el fago T2, un virus cuya estructura
haba sido recientemente investigada mediante microscopio electrnico. El fago consiste
nicamente en una cubierta proteica o cpside que contiene su material gentico, e infecta a
una bacteria cuando se adhiere a su membrana externa, inyecta dicho material y le deja
acoplado el cpside. Como consecuencia, el sistema gentico de la bacteria reproduce el
virus.
En un primer experimento, marcaron el ADN de los fagos con el istopo radiactivo fsforo-
32 (P-32). El ADN contiene fsforo, a diferencia de los 20 aminocidos que forman las
protenas. Dejaron que los fagos del cultivo infectaran a las bacterias Escherichia coli y
posteriormente retiraron las cubiertas proteicas de las clulas infectadas mediante una
licuadora y una centrfuga. Hallaron que el indicador radiactivo era visible slo en las
clulas bacterianas, y no en las cubiertas proteicas.
En un segundo experimento, marcaron los fagos con el istopo azufre-35 (S-35). Los
aminocidos cistena y metionina contienen azufre, a diferencia del ADN. Tras la
separacin, se hall que el indicador estaba presente en las cubiertas proteicas, pero no en
las bacterias infectadas, con lo que se confirm que es el material gentico lo que infecta a
las bacterias
Experimento de tatum
Los experimentos de George Wells Beadle y Edward Lawrie Tatum implicaban exponer el
Moho Neurospora crassa a rayos X, causando mutaciones. En varias series de
experimentos, demostraron que esas mutaciones causaron cambios en las enzimas
especficas implicadas en las rutas Metablicas. Estos experimentos, publicados en 1941
los llevaron a proponer un vnculo directo entre los genes y las reacciones enzimticas
conocida como la hiptesis Un gen, una enzima.
Experimento de meelsson Stahl
El experimento de Meselson y Stahl en 1958 permiti demostrar que el mecanismo real se
ajusta a la hiptesis de replicacin semiconservadora. Para ello se hicieron crecer clulas de
Escherichia coli en presencia de nitrgeno-15, un istopo del nitrgeno ms pesado de lo
habitual. En consecuencia, el istopo se incorpor a las cadenas de ADN que se iban
sintetizando, hacindolas ms pesadas.
Una vez conseguido el primer objetivo, las clulas fueron transferidas a un medio que
contena nitrgeno-14, es decir, un medio ms ligero, donde continuaron su crecimiento
(divisin celular, que requiere la replicacin del ADN). Se purific el ADN y se analiz
mediante una centrifugacin en gradiente de cloruro de cesio, en donde hay ms densidad
en el fondo del tubo que en la parte media del mismo.
En la primera generacin (figura 2.b) se obtuvo una nica banda de ADN con densidad
intermedia. En la segunda generacin (figura 2.c) se obtuvieron dos bandas, una con
densidad ligera y otra con densidad intermedia o hbrida. En la tercera generacin se
obtuvieron dos bandas, una ligera (con una abundancia del 75%) y otra intermedia (con el
25% restante).
La banda intermedia o hbrida representa una molcula de ADN que contiene una cadena
pesada (original) y otra ligera (recin sintetizada). Las cadenas ligeras representan una
molcula de ADN en la que las dos cadenas han sido sintetizadas (no existan aun cuando
las clulas se pusieron en presencia de nitrgeno-15.
El hecho de que cada vez haya ms molculas ligeras y se mantenga el nmero de
molculas intermedias demuestra que la replicacin del ADN es semiconservadora. Si fuera
conservadora, aparecera siempre una banda pesada y el resto ligeras (figuras 1.a, 1.b, 1.c) .
Si fuera dispersante slo apareceran bandas hbridas de densidad intermedia en todas las
generaciones.