Dulce Maria De Len Angulo 4to G Biometra hemtica

Anticoagulantes
Un anticoagulante es, como su nombre lo indica, una sustancia qumica que retrasa o
impide la coagulacin de la sangre, ya sea en el interior de un organismo (In Vivo) o en
el exterior (In Vitro)
Existen diferentes tipos de anticoagulantes que actan dificultando o impidiendo alguno
de los pasos de la cascada de coagulacin.
Existen dos tipos principales de anticoagulantes, los anticoagulantes para uso "In Vitro" y
los que tienen empleo "In Vivo", entre estos ltimos se encuentran los medicamentos con
accin anticoagulante.
En general los anticoagulantes para uso In Vitro actan como quelantes del ion Ca
2+
, de
manera tal que este no puede participar en la formacin de los complejos que activan al
factor X, y por lo tanto se interrumpe la cascada de coagulacin casi en su inicio.
Los anticoagulantes para uso In Vivo actan de maneras un poco ms complicadas. La
adicin de algunos agentes quelantes tales como el EDTA entraan un grave riesgo para
la salud del individuo sometido a tratamiento, ya que estos agentes son capaces de
acomplejar gran cantidad de iones con alta afinidad, algunos de los cuales desempean
importantes funciones en el organismo tales como el Cu
2+
, Fe
3+
, Zn
2+
, etc; mientras que
otros agentes acomplejantes del calcio tales como el citrato, no tienen gran utilidad ya
que son rpidamente metabolizados perdiendo su capacidad anticoagulante.
Entre los anticoagulantes para uso in vivo encontramos sustancias tales como la heparina
o los anticoagulantes dicumarnicos.

Para uso In Vitro
EDTA (C
10
H
16
N
2
O
8
) o sal disdica, dipotsica o tripotsica del cido
etilendiaminotetraactico.
8
Esta sustancia acta mediante un efecto quelante sobre
el ion calcio (Ca
2+
, lo que impide la formacin de los complejos procoagulantes en los
que este ion participa. Este anticoagulante se utiliza fundamentalmente para la
realizacin de recuentos celulares, sobre todo en autoanalizador. Tiene la ventaja de
permitir la realizacin del hematocrito y de frotis sanguneo hasta dos horas despus
de la extraccin de la muestra. Tambin impide la aglutinacin de las plaquetas.
Heparina Sdica. Heparina de Litio, es un anticoagulante fisiolgico que acta
impidiendo que la protrombina se transforme en trombina. Estructuralmente es un
mucopolisacrido cido que posee grupos sulfato. Esta ltima caracterstica no la
hace adecuada para muestras que van a ser examinadas al microscopio luego de
tincin, ya que altera notablemente las coloracines obtenidas.
Citrato Trisdico (C
6
H
5
O
7
Na
3
) acta impidiendo que el calcio se ionice, evitando as
la coagulacin. Se utiliza principalmente para realizar pruebas de hemostasia; as
como tambin para medir la velocidad de eritrosedimentacin.
ACD, es un anticoagulante formado por una mezcla de compuestos (cido
citrico Citrato y Dextrosa en una proporcin de 0.9, 2 y 2 g respectivamente en 120
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ml de agua destilada) se emplea fundamentalmente en bancos de sangre para
conservar las unidades de sangre y para realizar estudios metablicos eritrocitarios ya
que permite una buena conservacin de los hemates.

Anticoagulantes para uso In Vivo (medicamentos anticoagulantes)
Este grupo de anticoagulantes se definen como "medicamentos que impiden la
coagulacin o la agregacin plaquetaria"
Este tipo de medicamentos tienen utilidad en aquellas patologias causadas por un
trombo sanguneo, ya sea para facilitar su disolucin (trombolisis) o bien para prevenir
que los trombos se repitan.
En este rticulo vamos a centrarnos en aquellos que impiden la cascada de coagulacin:
La heparina alarga el tiempo de coagulacin, se administra generalmente mediante
inyeccin subcutnea o endovenosa.
Ya que es un compuesto fisilgico presente en gran cantidad en los mamiferos,
comnmente se utiliza heparina obtenida de pulmn de vaca o de mucosa intestinal de
cerdo convenientemente purificada. La potencia difiere segn el origen, pero hoy en da
vienen estandarizadas en UI, por lo que se pueden comparar solo con este ndice.
Comercialmente se obtiene en forma de dos sales (clcica y sdica) que no guardan
demasiada diferencia en su actividad. Las clcicas se usan preferentemente por va
subcutnea, ya que resultan menos dolorosas, pero por via endovenosa pueden utilizarse
ambas. La heparina NUNCA se administra va intramuscular.
La Heparina se utiliza cuando se precisa de accin anticoagulante rpida y por poco
tiempo. En la prevencin de trombosis venosas de ciruga se utiliza a bajas dosis, 5.000UI,
dos horas antes de la intervencin y despus cada 12 horas hasta el alta del paciente.
Las heparinas de bajo peso molecular son fragmentos de peso molecular entre 3.500 y
6.000, con ello tiene una vida ms larga y aumenta su biodisponibilidad. Tiene una
menor inhibicin de la agregacin plaquetaria. No sustituyen a las heparinas
tradicionales sino que en terapias de baja dosis son ms cmodas por que se aplican 1
sola vez al da.
En terapias de altas dosis se utilizan las heparinas tradicionales.

Hirudina

Anticoagulantes dicumarnicos. Reciben este nombre genrico un grupo de
compuestos derivados del Dicumarol (un compuesto extrado del trbol dulce) entre
los que se encuentran el Acenocumarol (el de uso ms frecuente en Espaa, bajo el
popular nombre de Sintrom) y la Warfarina. Estos medicamentos presentan la
ventaja de poder ser administrados por va oral y de poseer un efecto prolongado en
el tiempo, con gran variabilidad interindividual, por ello necesitan controles
peridicos para su ajuste teraputico.
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Todos ellos son inhibidores de la vitamina K (aVK). Debido a que la vitamina K
interviene como cofactor enzimtico en la sntesis de los factores II,VII,IX y X
(concretamente en la gamma-carboxilacin de estos); el resultado es que provoca la
aparicin en sangre, de unas formas inactivas de los mismos denominadas PIVKAs
(Proteins Induced by Vitamin K Antagonists).
Dada la diferente vida media que presentan los factores de coagulacin (el tiempo que
pemanecen en sangre antes de ser degradados), por ejemplo el VII comienza a descender
en 6 horas pero el II tarda cerca de 70, no se consigue una anticoagulacin efectiva hasta
el 3-4 da de tratamiento y el efecto no se estabiliza hasta despus de una semana.
Curioso es que la activacin de dos inhibidores fisiolgicos de la coagulacin como son las
Protenas C y S de importancia fundamental(inhiben a los Factores V y VIII activados),
tambin depende de la Vit. K, por lo que los cumarnicos originan una paradoja
bioqumica anticoagulante-procoagulante.
No obstante, su efecto anticoagulante supera ampliamente al procoagulante, por lo que
solo puede tener consecuencias clnicamente significativas en raros casos (Dficits
congnitos de Protena C o S) y de forma transitoria al inicio del tratamiento.




















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Biometra hemtica (Complete Blood Count)
La biometra hemtica es el trmino con el que se describe la prueba de laboratorio que
consiste en diferenciar y cuantificar los diferentes componentes celulares de la sangre. Los
componentes celulares que integran la biometra hemtica son: glbulos blancos (y sus
subdivisiones: neutrfilos, basofilos, eosinfilos, moncitos), glbulos rojos y las plaquetas.
Adems, en la biometra hemtica se determina la cantidad de hemoglobina que
contiene la sangre, se compara el total de hemoglobina con el nmero de glbulos rojos
(hematocrito), y se mide el tamao (volumen corpuscular medio, MCV) y la
concentracin de hemoglobina dentro de cada glbulo rojo (concentracin media de
hemoglobina corpuscular, MCHC).
introduccin
La Biometria Hemtica tambin denominada Hemograma, es uno de los estudios de
rutina de mayor importancia, ya que la informacin que de aqu se deriva nos
proporciona una idea muy confiable del estado general de la salud del paciente, consta
de 2 bloques:
Formula Roja: Determina los parmetros relacionados con el eritrocito.
Formula Blanca: Determina los parmetros relacionados con los leucocitos.
Formula Roja:La determinacin de la frmula roja se compone de los siguientes
parmetros:
A. Hematocrito (Ht): Es el porcentaje de la sangre que est compuesta por eritrocitos.
B. Hemoglobina(Hb): Es determinada la cantidad de esta protena expresada en g./dl.
C. Conteo eritroctico(Eri): Es la cantidad total de eritrocitos circulantes por microlitro
de sangre.
Algunos factores que afectan hematocrito, hemoglobina y conteo eritroctico son:
1. Cambios que inciden directamente en la circulacin de eritrocitos:
Valor disminuido: Se denomina anemia, los tres parmetros disminuyen aunque este
decremento puede ser desproporcionado cuando existen cambios en el tamao
eritroctico y/o la cantidad de hemoglobina contenida en ellos, por lo que el clculo e
interpretacin de los ndices de la formula roja son de ayuda en estos casos.
Valor aumentado: Denominado policitemia, donde aumente el nmero de eritrocitos
circulantes denominado policitemia absoluta, tambin puede darse un aumento
transitorio en los eritrocitos circulantes denominado policitemia relativa (descritos
posteriormente).
2. Cambios en el volumen plasmtico:
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Valor aumentado: Se presenta en estados de deshidratacin.
Valor disminuido: Se presentan en sobrehidratacin con fluidos administrados
parenteralmente dando una lectura que simula anemia.
D. Indices eritrocticos: Determinados mediante clculos matemticos.
1. Volumen Globular Medio (VGM): (Ht. x 10 / Eri), Es el tamao eritroctico
expresado en femtolitros y se comporta de la siguiente forma:
Valor aumentado: Se presenta en anemia macroctica en la que la interferencia en la
sntesis del ADN causa inhibicin de la divisin celular y la resultante es la aparicin de
eritrocitos de gran tamao (como ocurre en los casos de deficiencia de vitamina B12 y
cido flico). Tambin aumenta transitoriamente en los casos de reticulocitosis
(anemia regenerativa).
Valor disminuido: Se presenta en casos de deficiencia de hierro
2. Hemoglobina Globular Media (HGM): (Hb. x 10 / Eri.), Se refiere a la cantidad de
hemoglobina depositada en el eritrocitos expresada en picogramos.
Valor aumentado: En los casos de hemolisis tanto in vivo como in vitro; la hemoglobina
extracelular tambin est implcita, aunque el ndice asume que toda la hemoglobina es
intracelular por lo que se debe interpretar con reservas. Durante la reticulocitosis
permanece normal o ligeramente elevado.
Valor disminuido: En los casos de deficiencia de hierro.
3. Concentracin de Hemoglobina Globular Media (CHGM): (Hb x 100 / Ht) Es la
cantidad de hemoglobina que est relacionada directamente con el eritrocito. Es el
ndice ms preciso, ya que no requiere del conteo total de eritrocitos circulantes.
Valor aumentado: En los casos de hemolisis tanto in vivo como in vitro, as mismo
puede incrementarse en los casos de esferocitosis marcada.
Valor disminuido: En los casos de reticulocitosis y deficiencias de hierro.
E. Morfologa eritroctica: Es determinada en el frotis sanguneo.
1. Rouleaux: Es el agrupamiento de eritrocitos a manera de monedas amontonadas, es
debido a una tendencia de sedimentacin en forma paralela, trastorno que se relaciona
con el incremento en la concentracin de fibringeno y/o el cambio en las
concentraciones de globulinas. En caninos y felinos puede presentarse en condiciones
normales en un grado moderado y es muy marcada en casos de enfermedad
inflamatoria y neoplasias. En equinos sanos es comn desapareciendo en casos
de anemia.
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2. Aglutinacin eritroctica: Cuando se forma un acumulo de eritrocitos, ocurre
generalmente en los casos de anemias inmunomediadas, puede ser observada en las
paredes del tubo colector como pequeos grumos.
3. Anisocitosis: Es la variacin en el tamao de los eritrocitos donde aparecen
macrocitos y/o microcitos a lado de clulas de tamao normale, se presenta como
respuesta en anemias de tipo regenerativo.
Macrocitos: Son eritrocitos de gran tamao que provocan incremento en el VGM,
(reticulocitos) aparecen generalmente en anemiasregenerativas.
Microcitos: Son pequeos eritrocitos con un VGM disminuido que son observados en
casos de anemias dadas por deficiencia de hierro y piridoxina generalmente.
4. Esferocitos: Son considerados microcitos que cuentan con una membrana celular
reducida, lo que incrementa la permeabilidad hacia el sodio, son casi exclusivos de
caninos y se presentan generalmente en anemias de tipo autoinmune y
en anemias hemolticas isoinmunes as como despus de una transfusin. Son removidas
rpidamente de la circulacin por los macrfagos esplnicos, debido a su falta de
elasticidad y a que no estn habilitadas para traspasar los poros capilares esplnicos.
5. Policromasia: Es una variacin en la afinidad eritroctica hacia el colorante, donde
existe un tono azuloso en las clulas que contienen residuos de ARN, eritrocitos que
generalmente son grandes y se consideran reticulocitos. La presencia de policromasia est
asociada con el incremento de la actividad eritropoyetica como respuesta a una anemia,
catalogada como regenerativa cuando esta presente.
6. Hipocromia: Se refiere a la presencia de palidez marcada en la regin central del
eritrocito dado por la disminucin en la concentracin de hemoglobina dentro de la
clula, la causa ms comn en la que se presenta es la deficiencia de hierro.
7. Poiquilocitosis: Son clulas anormales en su forma comnmente encontradas
en anemias debidas a la prdida crnica de sangre o a enfermedades caracterizadas por
fragmentacin eritroctica, clulas que son retiradas prematuramente de la circulacin
agudizando el estado anmico. Los acantocitos, son un tipo de poiquilocitosis.
8. Leptocitos: Son clulas delgadas que cuentan con una membrana celular grande
observadas en enfermedades crnicas debilitantes que producen anemia.
9. Estomatocitos: Son eritrocitos con una forma oval hacia el centro que se observa en
la estomatocitosis hereditaria del Alaska malamut y en enfermedades hepticas.
10. Clulas en diana: Son clulas con forma de tiro al blanco que se presentan en
anemias de tipo regenerativo junto con policromasia, aunque cuando se presentan y no
existe policromasia se pueden relacionar con enfermedad renal, heptica o esplnica.
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11. Cuerpos de Howell-Jolly: Son remanentes nucleares observados frecuentemente
como consecuencia de un estado anmico en procesos regenerativos, no obstante si son
numerosos pueden indicar hipoesplenismo..
12. Cuerpos de Heinz: Son estructuras localizadas en la membrana eritroctica
producto de la desnaturalizacin de la hemoglobina causada por la accin oxidante de
ciertas drogas o qumicos, estos cuerpos desorganizan la membrana eritroctica y se
asocian con hemolisis intravascular.
13. Cuerpos eritrocticos refrctiles: Se localizan en estados normales en
aproximadamente el 10% de los eritrocitos del gato, se incrementan en la presencia de
diversas enfermedades, en muchas ocasiones juegan un papel importante en el desarrollo
de la anemia.
14. Eritrocitos nucleados (Rubrocitos y Metarrubrocitos): Se deben a la liberacin
de clulas eritroides inmaduras hacia la circulacin sangunea en los casos de anemia,
aunque pueden ser observadas en casos de enfermedad de la mdula sea donde existe
dao en el parnquima que afecta la barrera capilar, as como en casos de leucemia.
F. Determinacin de Reticulocitos (Ret):
Los reticulocitos son clulas eritroides inmaduras que en su citoplasma cuentan con
remanentes nucleares de ARN, en el canino, felino y suino, representan
aproximadamente el 1% en la circulacin sangunea en condiciones normales, presentan
un incremento en los casos deanemias de tipo regenerativo. En algunos laboratorios el
conteo de reticulocitos se hace por medio del uso de tinciones como Giemsa en un frotis
sanguneo ordinario, aunque la determinacin ms exacta se realiza por medio de
tinciones supravitales especificas como la de azul de cresil o la de nuevo azul de metileno,
su valoracin se realiza en base a los siguientes parmetros:
1. Porcentaje relativo de reticulocitos (PRR): Se obtiene al realizar varios conteos
de 100 clulas eritroides, obteniendo el porcentaje correspondiente a aqullas que son
compatibles con reticulocitos, en la mayora de las ocasiones expresa un valor que no es
real, dando una falsa impresin diagnstica debido a lo siguiente:
xiste menor nmero de eritrocitos maduros
circulantes que se mezclan con reticulocitos recin liberados de la mdula sea y una
relativa reticulocitosis es observada.
a
a un estado anmico los reticulocitos ms inmaduros son liberados, clulas que persisten
como reticulocitos por periodos ms prolongados en la sangre antes de convertirse en
eritrocitos maduros.
Para lograr una correccin del porcentaje relativo de reticulocitos cuando se presentan
los problemas descritos anteriormente se determina lo siguiente:
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2. Conteo absoluto de reticulocitos (CAR): (PRR x Eri). Este parmetro corrige la
falsa impresin de reticulocitosis expresada en el inciso anterior (1,a) debido a que se
determina la cantidad total de reticulocitos circulantes.
3. Porcentaje corregido de reticulocitos (PCR): [(Ht obtenido / Ht normal) x PRR]
Con la ayuda de este calculo se obtiene un porcentaje ms adecuado a la realidad en los
casos donde no se conoce el conteo de eritrocitos circulantes, ya que se ajusta el
porcentaje de reticulocitos observados en la muestra problema con respecto a un
parmetro normal (considerado de 45%), sirve para determinar el IPR.
4. Indice de produccin de reticulocitos (IPR): (PCR / Tiempo de maduracin) Este
ndice de correccin ha sido adaptado en el canino especficamente para corregir el
problema descrito en el inciso (1,b), ya que se utilizan diferentes tiempos de maduracin
del reticulocito basndose en el hematocrito observado, algunos de estos tiempos son:
Hematocrito
Tiempo de
maduracin
45% 1 da
35% 1.5 das
25% 2 das
15% 2.5 das
5. Interpretacin de los parmetros reticulocitarios:
En el gato solamente son utilizados el PAR y el PCR debido a que la respuesta
reticulocitaria de esta especie es menor a la del canino.
Un incremento absoluto de reticulocitos indica una respuesta de la mdula sea, es
comn en anemias hemorrgicas o hemolticas, aunque la reticulocitosis es ms marcada
en la anemia de tipo hemoltico debido a que en esta no hay prdida de hierro y es
fcilmente reciclable durante el proceso eritropoyetico.
La reticulocitosis no se hace evidente hasta despus de 72 horas de que ocurre
la anemia y puede alcanzar su mximo hasta los 7 das posteriores a su presentacin.
Un ndice de produccin de reticulocitos mayor de 1 sugiere una anemia de tipo
regenerativo.
Indices entre 1 y 3 sugieren prdida sangunea.
Indices mayores de 3 son indicativo de un proceso hemoltico.

G. Determinacin de plaquetas:
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Son estructuras producidas por los megacarioicitos en la mdula sea mediante el
proceso de fragmentacin citoplasmtica, juegan un papel muy importante en la
hemostasis, su variacin puede ser:
1. Trombocitopenia: Disminucin en el nmero de plaquetas circulantes, es el trastorno
ms comn en los animales, generalmente acompaada con severos problemas de
coagulacin, se puede deber a:
n trombocitopenias
inmunomediadas (autoinmunes, isoinmunes o inducidas por drogas), Lupus Eritematoso,
hiperestrogenismo, Afecciones por Ehrlichia, enfermedad causada por Riketsia, o
secuestro esplnico, as como neoplasias como hemangiosarcoma.
en la produccin plaquetaria que ocurre en anemias aplsticas, enfermedad de
la mdula sea y quimioterapia citotxica. Adems la trombocitopenia puede dar un
cuadro de coagulacin intravascular diseminada, un sndrome que casi siempre
acompaa a una enfermedad sistmica.
2. Trombocitosis: Incremento del nmero plaquetario.
sndromes mieloproliferativos.
procesos parasitarios donde intervienen parsitos succionadores de sangre y
en casos de neoplasia.
anemias por deficiencias de hierro.
Siempre que existan trastornos en la cuenta plaquetaria se debe considerar la
determinacin de parmetros que intervienen en la coagulacin sangunea.
Enfermedades hemorrgicas en los animales estn asociadas con la disminucin en el
nmero plaquetario, as mismo las alteraciones en la morfologa del trombocito se
observa en anemias regenmerativas, desordenes mieloproliferativos en el felino y en otros
trastornos en la mdula sea.
H. Velocidad de Sedimentacin globular media (Wintrobe): Es la precipitacin
de los eritrocitos en un lapso de tiempo estandarizado (1 hora), se relaciona directamente
con la tendencia eritroctica hacia la formacin de rouleau as como a la concentracin
plasmtica de globulinas y fibringeno.
OBJETIVOS:
- Saber realizar las pruebas correspondientes a la sangre para saber el estado de salud
de un paciente.
- Conocer los trastornos y complicaciones que puede traer una deficiencia en la sangre
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MATERIAL:
o 5 ml de sangre venosa
o 1 Spectronic
o 1 microscopio
o 1 ligadura
o 1 microcentrfuga
o 1 boquilla
o 1 frasco con torundas alcoholadas
o 1 jeringa desechable de 5 ml
o 1 pipeta de Thoma para glbulos rojos
o 1 pipeta de Shalli 80.02 ml
o 1 tubo de ensaye o frasco con anticoagulante
o 1 cmara de Neubauer
o 1 tubo de Wintrobe
o 4 portaobjetos
o 2 tubos capilares
o 1 pipeta Pasteur con bulbo
o 1 gradilla para tubos de Wintrobe
o Solucin salina isotnica
o Reactivo de Drabkin
o Solucin buffer
o Colorante de Wright
o Aceite de inmersin
MTODO:
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o Obtuvimos sangre de un voluntario
o Se coloco en el tubo de ensaye con anticoagulante
o Despus se tomo una parte y se coloco en el tubo de Wintrobe y se llevo a
la gradilla
o Se obtuvo con esto la velocidad de sedimentacin eritrocitaria
o Despus para obtener el recuento total de eritrocitos se tomo otro poco de
sangre y se aspiro con una boquilla en la pipeta de Thoma
o Se le agrego solucin salina isotrpica.
o Se agito y se depositaron 2 gotas en la cmara de Neubauer
o Se llevo a microscopio y se cont por cuadrantes el nmero de eritrocitos.
o Se toma la muestra en capilares para obtener el nivel de hematrocitos
o Por decantacin se coloca en los capilares y se lleva a la microcentrfuga
o Con la pipeta de Shalli se obtiene la determinacin de hemoglobina
o Se lee en el Spectronic
o El estudio morfolgico se realiz por medio de un frotis
o Se toma una o dos gotas de sangre y se colocan en un extremo del
portaobjetos y con otro se extiende
o Se lleva al microscopio y se observa, en los objetivos ms pequeos
primero y por ltimo en el de 100x, colocando previamente aceite de
inmersin
o Se lleva la cuenta de los tipos de clulas en la sangre hasta alcanzar un
total de 100
RESULTADOS:
Velocidad eritrocitaria (sedimentacin): 12ml/hr
Hematocrito: 5.5 = 100%
2.5 roja, 3.0 blanca
Hemogloina: 16.9 - 17.0 g/100 ml
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Cmara de Neubauer: A - 75
B - 90
+ C - 86
D - 69
E - 115
Total: 435
Estudio morfolgico (frotis): Leucocitos: 33
Neutrofilos: 18
Basolfilos: 14
Eritrocitos: 7
Monocitos: 7
Volumen Globular Medio (VGM) =
Hemoglobina Globular Media (HGM)=
Concentracin de Hemoglobina Globular Media (C. Hb. G. M.)= 37. 4%
ANLISIS DE RESULTADOS:
Velocidad eritrocitaria: En este caso la velocidad eritrocitaria est debajo de lo normal.
Hematocrito: 45.45 % roja
54.54 % blanca (dentro de lo normal)
Spectronic: Niveles dentro de lo normal
Recuento total de eritrocitos: 4,350,000 millones/mm3 (dentro de lo normal)
CONCLUSIONES:
El paciente se encuentra bien dentro de los niveles a medir en esta prctica.