Material N 08 Unidad I. Organizacin, estructura y actividad celular.
Ncleo y material gentico.
INTRODUCCIN.
La reproduccin es una propiedad inherente a los seres vivos. Induce a la autoperpetuacin. Cada organismo metacelular es producto de una reproduccin incesante a partir de una nica clula inicial, que se form en la unin de 2 clulas especiales. La reproduccin celular est centrada en el ncleo celular. Por estar contenida cierta informacin gentica.
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Figura 1. Vista de clulas eucariticas al microscopio ptico. Se puede observar una pequea esfera que corresponde al ncleo. 1. ALGUNOS ANTECEDENTES HISTRICOS.
Los primeros registros sobre el ncleo fueron realizados por:
Francis Bauer (1800) en orqudeas, sin percibir su relacin con la estructura celular. Robert Brown (1828), considerado el descubridor del ncleo celular, estableci su constante presencia en clulas eucariontes vegetales y animales (figura 1). Los cromosomas y la mitosis fueron descritos en la segunda mitad del siglo XIX. El redescubrimiento de los trabajos de G. Mendel en 1900, llev a algunos investigadores como W. Sutton y T. Boveri, de acuerdo a observaciones realizadas en erizos, a plantear la existencia de una relacin entre los cromosomas y el desarrollo embrionario. T. H. Morgan y A. H. Sturtevant, (1910) trabajando en, Drosophila melanogaster, establecieron que los genes, o factores de Mendel, que determinan los rasgos hereditarios, se encuentran en los cromosomas distribuidos en forma lineal.
Existe alguna relacin entre la presencia de ncleo y la actividad celular?, qu sucede con la capacidad del ncleo de generar individuos completos a medida que las clulas se especializan en distintos tejidos?
Esta informacin tiene bsicamente dos funciones:
1. provee las instrucciones que definen el funcionamiento de la clula, y en conjunto del organismo. 2. acta como molde original para obtener copias que perpetan esta informacin en las clulas hijas.
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Hans Spemann en 1938 publica los resultados de sus experimentos realizados en huevos de salamandra (anfibios con cola). Utilizando un cabello, liga huevos recin fertilizados separando el ncleo en un lado y el citoplasma en el otro (ver figura 2A). Despus que las clulas nucleadas se dividieron 4 veces, es decir al estado embrionario de 16 clulas, solt la ligadura y dej pasar un ncleo hacia el citoplasma sin ncleo (ver figura 2B). Vuelve a separar as la nueva clula nucleada del resto del embrin. Una serie de divisiones celulares se iniciaron a partir de la clula aislada. Con este procedimiento obtuvo dos embriones gemelos, uno ligeramente ms joven que el otro (ver figura 2C).
El hecho que un ncleo de una clula obtenida de un embrin maduro pudiera controlar el desarrollo de un organismo completo, sustent la idea de que la informacin gentica no haba disminuido con las divisiones celulares sucesivas. A partir de estos resultados, Spemann propuso, en 1938, el experimento fantstico de duplicar los organismos a partir de clulas especializadas, lo que hoy conocemos como clonacin.
Joachim Hmmerling, bilogo dans, estudi la influencia del ncleo en la actividad celular (1943). Para ello utiliz el alga verde del gnero Acetabularia (Figura 3). Son unicelulares, y es posible identificar tres regiones en ellas: una inferior, parece un rizoide, o base, en la que se encuentra el ncleo celular; una media o talo; y una superior o sombrero. El tamao de las algas es de 4 a 5 cm de alto y el sombrero cerca ce 1 cm. de dimetro. Hmmerling consigui intercambiar los sombreros. As cambiados permanecieron algn tiempo en los talos, luego de un corte las algas regeneraron los sombreros de sus respectivas especies. Conclusin, el control de la diferenciacin del sombrero es dependiente del ncleo sobre el cual se realice el transplante.
Figura 2. Demostracin de Spemann de que los ncleos son totipotentes hasta el perodo de 16 clulas. Un cigoto contina dividindose nicamente en la mitad que contiene el ncleo. Si se afloja la constriccin en el perodo de 16 clulas, un ncleo puede escapar hacia el otro lado. Este ncleo todava puede dar origen a un embrin completo, aunque su desarrollo estar retardado con respecto a la otra mitad. Segn H. Spemann. 3
Figura 3. Una especie de Acetabularia tiene un sombrero en forma de sombrilla (A. mediterrnea) y la otra tiene un sombrero rasgado (A. crenulata) propios de cada especie.
Robert Briggs y Thomas King (1952) consiguieron el primer transplante exitoso de ncleos a partir de clulas embrionarias tempranas de Rana pipiens irradiadas con UV. Estos trabajos pioneros, adems de confirmar la propiedad totipotencial de los ncleos de clulas de blstulas y gstrulas, abrieron el camino para estudios que llevaron a la clonacin de ratones, monos, ovejas y otros mamferos.
J. Gurdon (1962) consigui, en Xenopus laevis (rana africana), implantar ncleos de epitelio de intestino de la larva y obtener larvas y adultos. Estos ltimos se produjeron en una proporcin muy pequea respecto del nmero inicial de ncleos transplantados (Figura 4).
Acetabularia crenulata Sombrero removido Se regenera el mismo sombrero Pies con ncleos intercambiados Sombrero intermedio que se remueve Sombrero con la forma de: Acetabularia mediterrnea Acetabularia crenulata Acetabularia mediterrnea Sombrero Pi Ncleo Rizoides Figura 4. Experimento de J. Gurdon (1962). 4 Qu le sucede al genoma (es decir al conjunto de los genes de un individuo) cundo el huevo fertilizado, o cigoto, se desarrolla generando un embrin?
Un cigoto es totipotente, es decir capaz de formar todos los tipos celulares del cuerpo. Conforme el huevo se divide, las clulas se diferencian o especializan en tejidos tales como hueso, piel o clulas intestinales, y pueden as realizar conjuntos de funciones distintas entre s. Las hiptesis de cmo las clulas se diferencian, se reducen a dos:
a. las clulas pierden los genes a lo largo del desarrollo, excepto aquellos que codifican las estructuras y tareas especficas, o b. ellas mantienen el genoma completo y activan o inactivan los genes en forma selectiva durante el desarrollo, mediante mecanismos de regulacin de expresin gnica.
2. EL NCLEO INTERFSICO.
Considerado como un compartimiento o como organelo, es el lugar fsico donde se encuentra el material gentico o DNA, responsable del control metablico y de la continuidad de la vida.
Su tamao y posicin son variables, dependiendo de las necesidades de la clula, su nmero vara de acuerdo al tipo de clulas, en general se acepta que un determinante de sto es la necesidad de control metablico por parte de la clula, por ejemplo, clulas hepticas grandes pueden tener 2 3 ncleos, lo mismo ocurre con clulas musculares estriadas. En el ncleo interfsico se distinguen:
Componentes Descripcin estructural
Membrana nuclear (Carioteca)
Es doble, en su cara que mira hacia el citoplasma se observan ribosomas adheridos, se postula como parte del sistema de endomembranas. Est atravesada por el complejo del poro, lo que permite el transporte en ambas direcciones a travs de la membrana (figura 5).
Cariolinfa
Es la matriz nuclear (cariolinfa) o nucleoplasma. Es la parte lquida del ncleo que puede tener en estado soluble minerales, nucletidos u otro componente necesario para la conformacin de la cromatina.
Cromatina
Presenta dos estados que es posible observar al microscopio: heterocromatina y eucromatina (Figura 5).
Heterocromatina: es la forma condensada en que se organiza la cromatina. Se ve como manchas densas de cromatina, frecuentemente est adherida a la membrana nuclear donde presenta espacios ms claros sobre los poros de dicha membrana. La heterocromatina es considerada inactiva desde el punto de vista de la transcripcin.
Eucromatina, tiene el aspecto de granulacin fina y homognea. Es ms abundante en clulas que estn en activa transcripcin o replicacin de DNA. Esto requiere que la cromatina est desenrollada, tal que exista el mximo contacto entre los compuestos del nucleoplasma, como sistemas enzimticos para la lectura del cdigo gentico, o sustancias a incorporar a las cadenas de DNA, como los nucletidos.
Nuclolo
Subestructura que no posee membrana, es la porcin del DNA, de los cromosomas que contienen genes para que se realice la transcripcin de RNA ribosomal (rRNA), estas zonas especiales del DNA se llaman zonas organizadoras nucleolares (ms conocidas como zonas o regiones NOR.
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Figura 5. Ncleo celular interfsico.
2.1. La fibra de cromatina
A partir de la doble hlice de la molcula de DNA y la incorporacin progresiva de protenas, se organiza la fibra de cromatina y desde sta los cromosomas. Los cromosomas no tienen ningn tipo de membrana
Figura 6. La secuencia de figuras a la izquierda corresponde a las estructuras inferidas a partir de las fotografas obtenidas en el microscopio electrnico que se muestran a la derecha.
6 2.2. La paradoja del valor C.
Cada especie tiene un contenido de DNA caracterstico, constante en todos los individuos de esa especie y, por eso se le denomina valor C. El demostrar la constancia de DNA en los ncleos celulares de un individuo fue un importante descubrimiento de la biologa celular. Esto sugiri al DNA como la molcula que contena la informacin gentica y la no prdida de informacin en los distintos tejidos somticos desde la diferenciacin. Esto se logr coloreando el DNA por la reaccin de Feulgen y midiendo luego la cantidad de colorante en ncleos aislados. Todas las clulas somticas de un organismo diploide contienen la misma cantidad de DNA (2C), y en interfase los cromosomas estn estructurados por una cromtida la que a su vez est formada por una molcula lineal de DNA bicatenario. Los gametos son haploides y, por lo tanto, tienen la mitad de DNA (1C) o slo C.
2.3. Cariotipos.
Para estudiar la constitucin cromosmica de un individuo, y, por extensin, la de la especie a la cul pertenece, los cromosomas fotografiados a partir de clulas detenidas en metafase, se ordenan de mayor a menor tamao en parejas de homlogos. Este ordenamiento se denomina cariotipo. Luego se usa un segundo criterio que corresponde a la ubicacin del centrmero, as en los primeros lugares se ubican los metacntricos y al final los acrocntricos (todos de un mismo tamao). Finalmente los pares homlogos se numeran (Figura 8).
Cariotipo masculino normal. Cariotipo femenino normal Figura 7. Componentes estructurales de un cromosoma obtenido en metafase. Las dos cromtidas se originan de una nica cromtida, por lo que son cromtidas hermanas. El centrmero define segmentos de las cromtidas llamados brazos, cuya longitud puede ser distinta entre cromosomas no homlogos. El brazo corto es llamado p (del francs petit) y el brazo largo es q (letra siguiente en el alfabeto).
Figura 8. Cariotipo humano.
7 Preguntas.
1. Hmmerling a partir de sus experimentos con Acetabularias, pudo concluir que la actividad celular est controlada por
A) el ncleo. B) las cromtidas. C) el citoplasma. D) los nucletidos E) la cromatina
2. La heterocromatina a diferencia de la eucromatina
A) posee genes activos. B) est asociada a la carioteca. C) est formada por DNA y protenas. D) se encuentra dispersa en el nucleoplasma. E) constituye a los cromosomas.
3. La existencia de poros en la envoltura nuclear hace posible para el ncleo
A) su adherencia a la clula. B) ingresar RNA ribosomal. C) el traslado de sustancias qumicas diversas. D) la presencia de ribosomas en su cara externa. E) formar heterocromatina.
4. Un cromosoma metacntrico duplicado, a diferencia de los no duplicados, presenta
A) 2 centrmeros. B) 2 cromtidas. C) 2 telmeros. D) 1 cromatina. E) 1 molcula de DNA.
5. La mayor contribucin de los experimentos de Briggs y King fue la demostracin de que
A) los huevos de las ranas se destruyen con los rayos X. B) los genes se pierden selectivamente durante el desarrollo. C) las clulas activan y desactivan los genes durante el desarrollo. D) el ncleo controla los rasgos del individuo. E) las clulas embrionarias pueden ser clonadas.
6. Cul(es) de las siguientes frmulas de cariotipo humano corresponden a un sndrome autosmico?
A) 44 A + XXY hombre, sndrome de Klinefelter. B) 45 A (21, 21, 21) + XY hombre, sndrome de Down. C) 44 A + X0 mujer, sndrome de Turner. D) 44 A + XYY hombre duplo Y. E) 44 A + XXX mujer triple X.
8 7. Qu elemento(s) cromosmico(s) de los que se menciona(n) aportara(n) informacin til al momento de definir los pares homlogos?
I) El tamao. II) El patrn de bandas. III) La posicin del centrmero.
A) Slo I B) Slo I y II C) Slo I y III D) Slo II y III E) I, II y III
8. Si se extrae el ncleo de una especie unicelular A y se implanta en un organismo unicelular de la especie B, al que previamente se le quita su ncleo lo ms probable es que
A) mueran las 2 clulas. B) sobreviva slo la especie A. C) B mantenga sus caractersticas. D) A adquiera las caractersticas de B. E) B adquiera las caractersticas de A.
9. El anlisis histrico de los estudios que llevaron a identificar el ncleo y, su importancia en la actividad celular, se obtiene desde clulas de origen muy diverso, tales como algas, flores, moscas, erizos de mar, salamandras, ranas y finalmente el hombre. El fundamento biolgico que valida la comparacin de dichos estudios entre s est en que
I) el tamao del ncleo es constante en eucariontes. II) las clulas tienen estructuras y mecanismos compartidos. III) cada tipo celular tiene mecanismos nicos de funcionamiento.
A) Slo I B) Slo II C) Slo I y III D) Slo II y III E) I, II y III
10. Con respecto a la cromatina se puede afirmar que
I) su unidad molecular son los nucleosomas. II) en interfase se diferencia en eucromatina y heterocromatina. III) el 10% del genoma humano corresponde a eucromatina.
A) Slo I. B) Slo II. C) Slo I y II. D) Slo II y III. E) I, II, III.