PARTES DE MICROSCOPIO

1. Ocular, enchufado en forma suelta en el extremo superor del tu!o.

". Tu!o, puede ser #nco $O!ser%ac&n monocular' o do!le $O!ser%ac&n
!nocular'.
(. Re%&l%er, para cam!ar los o!)et%os.
*. O!)et%os, con dstntas denomnacones.
+. ,ra-o o columna.
.. Carro de desl-amento.
/. Platna, con modelo cuadrado de despla-amento en cru-.
0. Palanca, de dafra1ma rs $dafra1ma de condensador o de apertura'.
2. Condensador $sstema de lentes'.
13. Palanca, para retrar la lente frontal del condensador de la tra4ectora de
los ra4os, para lumnar campos ma4ores de o!)et%o.
11. Soporte re!at!le, para fltros de (" mm. de d5metro.
1". Soporte re!at!le, con lente auxlar centra!le.
1(. Tornllos para centrar el condensador.
1*. P6ones o tornllos de enfo7ue.
El dsco 1rande es el tornllo de enfo7ue aproxmado o Macrom8trco. El
p6&n stuado en el centro del anteror es el tornllo de enfo7ue de
precs&n o Mcrom8trco.
1+. Portada1ramas con dafra1ma rs en el campo lumnoso.
1.. Pe o !ase.
1/. 95mpara empotrada.
M I C R O S C O P I O
El mcroscopo es un nstrumento de &ptca consttudo esencalmente por un
sstema de lentes, 7ue dspuestas en forma especal, nos proporcona una
ma1en mu4 amplfcada de un o!)eto 7ue a smple %sta no es percept!le.
9a hstolo1:a es el estudo de la estructura mcrosc&pca de las c8lulas, te)dos,
&r1anos, aparatos 4 sstemas, por lo 7ue es !5sco en el empleo del
mcroscopo, para el estudo de 8sta cenca, por lo 7ue efectuaremos una
descrpc&n 1eneral de sus componentes 4 su mane)o.
MICROSCOPIO COMP;ESTO
El mcroscopo compuesto, es el 7ue 1eneralmente se utl-a, consta de tres
partes<
= Mec5nca
= >ptca
= Ilumnac&n
PARTE MECA?ICA O ESTATI@O DE9 MICROSCOPIO. Esta compuesto por<
Tu!o, Re%&l%er, ,ra-o, Platna, Carro de desl-amento, Tornllos Macro 4
Mcrom8trcos 4 Pe o ,ase.
E9 T;,O. Contene en el extremo superor el ocular $1' 4 en el extremo nferor,
tene forma ensanchada, a manera de una hemesfera $conocda como ca!e-a'
en cu4o nteror se encuentran unos espe)os 7ue des%:an la ma1en
proporconada por el o!)et%o haca el ocular o los oculares. En la porc&n
nferor de 8sta hemesfera se local-a el re%&l%er $?o. (', el cual es un dsco
1eneralmente cromado en el 7ue se nsertan por medo de una rosca los
dstntos o!)et%os. Este re%&l%er 1ra so!re un e)e, colocando los o!)et%os
drectamente so!re la preparac&n, facltando la o!ser%ac&n en los dstntos
aumentos proporconados por los o!)et%os.
9a lon1tud del tu!o, desde el !orde superor hasta la tuerca roscada de los
o!)et%os, se conoce como< A9on1tud Mec5ncaB 4 es de 1.3 mm. S no se
mantene la lon1tud del tu!o, las m51enes pro4ectadas por los o!)et%os, al
aumentar la apertura de los msmos, se hacen m5s po!res en contraste.
El !ra-o o columna, tene forma ar7ueada 4 parte de una porc&n del tu!o
$Ca!e-a' haca la !ase o pe so!re la 7ue descansa. 9a func&n de 8ste !ra-o
es para la toma de mcroscopo 4 su traslado.
En el extremo nferor del !ra-o 4 a am!os lados se encuentran los p6ones o
tornllos de enfo7ue. El p6&n 1rande, tam!8n llamado tornllo macrom8trco
$de enfo7ue aproxmado', permte el despla-amento r5pdo de la platna haca
el o!)et%o, con lo 7ue se lo1ra un punto aproxmado al enfo7ue. El p6&n
pe7ue6o conocdo como tornllo mcrom8trco $de enfo7ue precso o n:tdo', se
encuentra stuado en el centro del tornllo mcrom8trco, hacendo protrus&n
haca los lados. Su func&n es la de lle%ar a ca!o el enfo7ue n:tdo de la
preparac&n 7ue se est5 o!ser%ando.
9a platna, es una palanca de forma 1eneralmente cuadrl5tera, so!re la cual se
coloca el o!)eto 7ue se %a a o!ser%ar. Tene un orfco en el centro por el 7ue
pasa la lu- haca el o!)et%o.
So!re la platna se encuentra el carro de desl-amento el cual consta de un par
de pe-as, 7ue son las 7ue su)etan la preparac&n, 4 dos tronllos 7ue
despla-an el o!)eto en sentdo anteroposteror 4 lateral, para 7ue como su
nom!re lo dce despla-ar la preparac&n en estudo.
9a !ase o pe, es una placa de forma ha!tualmente cuadrl5tera, cu4a func&n
es la de sostener el mcroscopo. En los aparatos m5s recentes, lle%a
empotrada en la parte nferor, la fuente de lumnac&n. 9a l5mpara es de !a)o
%olta)e< . @ 1+C. la !ase es una placa pesada, lo 7ue permte la esta!ldad del
mcroscopo.
PARTE OPTICA.= Es la parte del mcroscopo encar1ada de o!tener una
ma1en aumentada de la muestra en estudo.
Antes de proceder a la descrpc&n de 8sta parte del mcroscopo 7ue es la m5s
mportante, de!emos hacer al1unas o!ser%acones so!re lo 7ue son los
fundamentos !5scos de la mcroscop:a.
Cuando se %e un o!)eto es por7ue los ra4os lumnosos procedentes de 8l,
est5n lle1ando a tra%8s de las estructuras anterores del o)o, a la retna. Cada
una de cu4as c8lulas tra!a)a como receptorD la suma de esas recepcones
nd%duales dar5n la ma1en completa del o!)et%o.
S la lu- procedente de un o!)eto es reco1da por una sola c8lula retnana, la
ma1en perc!da ser5 la de un punto.
Para 7ue dos o!)etos mu4 pe7ue6os $puntos' se puedan %er separados, es
necesaro 7ue la lu- pro%enente de casa uno de ellos hera una c8lula
retnana, 7uedando entre los dos una c8lula no exctada. Esta propedad, la
7ue dos o!)etos mu4 pr&xmos se puedan %er separados $resol%er la posc&n
de ellos' se conoce como APoder de Resoluc&n del O)oB. Se ha calculado 7ue
para o)o humano, el m5xmo poder de resoluc&n corresponden a un o!)eto 7ue
mda 3.1 mm., a una dstanca de "+ cm. s !en, se pueden %er o!)etos m5s
pe7ue6os acerc5ndolos m5s al o)o, 4a no se podr5n aprecar sus detalles 4
solo se %er5n como una mancha o!scura.
En resumen, para 7ue dos puntos %s!les separados uno de otro puedan %erse
as:, es necesaro 7ue la dstanca entre ellos oscle entre /3 4 1*3 mcras, con
o!)eto de 7ue se formen las m51enes en las c8lulas de la retna, cu4a
separac&n es de " a ( mcras. 9os o!)etos menores a las cfras menconadas
$/3 E1*3 mcras' de!en ser AAumentadosB para poder ser %stos. Esto se lo1ra
con el uno de lentes de aumentoD 7ue han %arado desde la smple lente
,con%exa $lupa' hasta los actuales mcroscopos compuestos.
Ahora !en, ha4 7ue tomar en cuenta 7ue la ma1en 7ue forma una lente de un
punto, no es un punto, sno un dsco pe7ue6o $de!do al fen&meno de
dfracc&n' por lo tanto, s se o!ser%a un o!)eto m5s pe7ue6o 7ue el poder de
resoluc&n del mcroscopo 7ue se est5 utl-ando, la ma1en de 8se o!)eto
$dsco' se so!repone con las de o!)etos pr&xmos.
El d5metro del o!)eto m5s pe7ue6o 7ue puede Aresol%erB un mcroscopo est5
dado por<
9O?FIT;D DE O?DA DE 9A 9;G EMP9EADA
APERT;RA ?;MERICA DE 9A 9E?TE
Se entende con esto, 7ue la resoluc&n no depende de la escala de
reproducc&n de los o!)et%os, sno de su Aapertura num8rcaB.
Tenemos 7ue entender ahora lo 7ue s1nfca Aapertura num8rcaB. En la f1ura
?o. + se ha representado es7uem5tcamente la lente frontal del o!)et%o 4 la
preparac&n. El 5n1ulo ;H 7ue forma el e)e &ptcos 4 los haces m5s exterores
7ue son )ustamente captados por el o!)et%o, consttu4e, una medda de la
AaperturaB de 8steD es el sem5n1ulo de apertura $del lat:n. apertus I a!erto'.
Sn em!ar1o, la ma1ntud de dcho 5n1ulo no es expresada en 1rados sno en
un %alor tr1onom8trco< el seno, es decr, un %alor num8rco. De ah: procede el
nom!re de apertura num8rca.
9a apertura num8rca es el seno del sem5n1ulo de apertura multplcado por el
:ndce de refracc&n n de la su!stanca 7ue se encuentra entre el cu!reo!)etos
4 la lente frontal del o!)et%o, donde tenemos<
A? I n sen uH
A? I Apertura num8rca
n I Jndce de refracc&n del medo &ptco< a1ua, acete.
uH I Apertura $5n1ulo 7ue forma el ra4o m5s externo reco1do precsamente por
el o!)eto'.
9a resoluc&n de los sstemas de lentes, 4a se mencon&D est5 lmtada por la
naturale-a de la lu- 4 por las propedades &ptcas de las lentes, expresando el
tama6o de los menores detalles 7ue pueden dstn1urse claramente con las
lentes. Tenemos por lo tanto la s1uente formula<
R I 1KKK
" A?
Donde R es la resoluc&n en mcrasD 1 la lon1tud de onda de la lu- en mcras, 4
A? la apertura num8rca de la lente. 9a apertura num8rca 1eneralmente
aparece 1ra!ada en la montura de los o!)et%os del mcroscopo.
;na %e- entenddo esto, procedemos ahora a estudar los componentes de la
parte &ptca del mcroscopo 7ue son< el ocular 4 los o!)et%os.
9os o!)et%os son pe7ue6os nstrumentos &ptcos, consttudos por seres de
lentes, colocados en una arma-&n met5lca $tu!o' con lon1tud total %ara!le 4
poder de resoluc&n 4 de aumento tam!8n %ara!les. Se llaman as:, por estar
mu4 pr&xmos al o!)eto 7ue se desea estudar.
Tenemos pues, %aros o!)et%os, 7ue son los 7ue s1uen<
= PA?ORAMICO
= SECO DE,I9
= SECO L;ERTE
= I?MERSIO?
PA?ORAMICO. Es el o!)et%o m5s pe7ue6o, el cual nos !rnda ".+, (.+ & *
aumentos.
9os aumentos son representados por una M. su nom!re lo dce, a!arca un
ma4or panorama del campo mcrosc&pco. $A? 3.30'.
SECO DE,I9. Se llama seco por7ue lo 7ue se encuentra entre la lente frontal
del o!)et%o 4 la preparac&n, es are. Este o!)et%o nos da 13 aumentos $13 M'
$A? I 3,"+'.
SECO L;ERTE. Es 1ual 7ue el anteror o!)et%o, solo 7ue el aumento 7ue
produce es de *3 M $A? I 3..+'
I?MERSIO?. Se llama as:, por7ue se coloca una 1ota de l:7udo transparente
con un :ndce de refracc&n superor al del are, entre el o!)et%o 4 la estructura
en estudo $acete de nmers&n', 1eneralmente acete de cedro. Este o!)et%o
nos da 133 aumentos $A? I 1."+'
Todos los o!)et%os tenen una nscrpc&n en el frente.
%1n< Seco fuerte I 1.3E3,1/
*3E3..+
9o 7ue s1nfca< L1. ?o. 11
= 1.3 9on1tud num8rca del tu!o.
= 3.1/ N 3.31 mm., espesor del cu!reo!)etos
= *3 Coefcente de aumento.
= 3..+ Apertura num8rca.
En lu1ar de 3.1/ puede estar marcado con E = lo 7ue s1nfca< nse(ns!le a
dferencas ma4ores del espesor en el cu!reo!)etosD o con E3 lo 7ue s1nfca
corre1do para Aespesor de cu!reo!)etos 3B, o sea, para preparacones sn
cu!rr.
9os o!)et%os 7ue no tenen m5s datos 1ra!ados son los acrom5tcos,
1eneralmente utl-ados.
Otras denomnacones !astantes frecuentes son<
= P9A? I Planacrom5tco, esto es, o!)et%o acrom5tco con ma1en plana.
= ?EOL9;AR I O!)et%o con apertura ncrementada, me)or reproducc&n
de los colores, con ele%ado contraste, pero sn ma1en plana.
9os o!)et%os de nmers&n traen cual7uera de las 1ra!acones s1uentes,
se1#n el materal 7ue se re7uera<
Oel I Acete $:ndce de refracc&n 1.+1+'
C I A1ua $:ndce de refracc&n 13((('
Fl4- I Flcerna $:ndce de refracc&n 1.*++'
Toda la sere de o!)et%os trae tam!8n un anllo de color, cerca del anllo
moleteado lo 7ue faclta su dentfcac&nD
= PARDO I ".+ = AMARI99O I 13
= ROOO I * = @ERDE C9ARO I 1.
=A?ARA?OADO I ..( = @ERDE O,SC;RO I "+
= AG;9 C9ARO I *3
OC;9ARES. El ocular est5 destnado a reco1er la ma1en dada por el o!)et%o,
de lo 7ue se or1na una ma1en aumentada, %rtual 4 derecho. Se llama as: por
ser el 7ue 8sta m5s cerca del o)o del o!ser%ador. Est5 compuesto de dos
lentes<
1' 9ente nferor de campo o colectoraD rec!e la ma1en real del o!)et%o, la
refracta 4 or1na en el campo del dafra1ma ocular una ma1en al1o m5s
pe7ue6a 7ue la anteror, mu4 lumnosa.
"' 9ente superor o lente ocular, act#a como una lupa 4 forma la ma1en
%rtual defnt%a del mcroscopo.
9os oculares se constru4en con dstnto 1rado de aumento propo sendo lo m5s
frecuente< 0M, 13M, 1".+M. El m5s utl-ado es el ocular de 13M.
PARTE DE 9;MI?ACIO? P CO?DE?SADOR. 9os aparatos de lumnac&n 4
condensadores son los sstemas de lentes 4 espe)os con los 7ue se lumnan
las preparacones, entend8ndose solamente por condensador en 1eneral, el
sstema puro de lentes, mentras 7ue el aparato de lumnac&n a!arca el espe)o
4 el dafra1ma. Se1#n el fn a 7ue se destne, se dstn1uen los condensadores
de campo claro 4 campo o!scuro.
En la lumnac&n de campo claro, la lu- procedente del condensador atra%esa
la preparac&n 4 penetra entonces en el o!)et%o. El modelo m5s com#n es el
de A!!e, compuesto de dos lentes. 9a nferor es ,con%exa 4 la superor o
frontal es plano con%exa, cas semesf8rca, con la cara plana dr1da haca
arr!a, la 7ue st#a )unto al orfco de la platna, cuando el condensador est5 en
su posc&n m5s alta.
El dafra1ma rs dspuesto por lo 1eneral de!a)o del condensador, sr%e para
1raduar la cantdad de ra4os lumnosos 7ue lle1an al o!)et%o.
Por #ltmo, el foco de la fuente de lumnac&n 4a se mencono, 1eneralmente
%ene empotrado en la !ase o pe.
MA?EOO P C;IDADO DE9 MICROSCOPIO.
Todo nstrumento del 7ue se ex1e extraordnara precs&n &ptca 4 mec5nca
necesta tam!8n ser cudado con esmero.
Mentras no se utlce el mcroscopo, de!er5 manten8rsele en una ca)a armaro
o cu!rrse por medo de la campana protectora de materal pl5stco.
Cuando se %a a utl-ar el mcroscopo, se extrae de d&nde lo tenemos
1uardado, tom5ndolo por el !ra-o.
Se coloca so!re una mesa sufcentemente ampla 4 s&lda e%tando los
mo%mentos !ruscos. ;na %e- hecho esto se s1uen los s1uentes pasos.
1. Conectar el mcroscopo al transformador 7ue 1eneralmente acompa6an
a los modelos m5s recentes, 4 8ste a su %e- se conecta al enchufe de la
corrente el8ctrca.
". se de!er5n 1rar los o!)et%os por medo del re%&l%er, hasta colocar el
m5s pe7ue6o $panor5mco' drectamente so!re la platna. ?o se de!e
1rar el re%&l%er su)etando los o!)et%os, 4a 7ue esto produce 7ue se
%a4a aflo)ando la rosca, con la s1uente alterac&n al momento de
enfocar, por no mantenerse la dstanca mec5nca.
(. Se procede a colocar la preparac&n so!re la platna, chocando sempre
7ue el cu!reo!)etos se encuentre haca arr!a, pues s 7uedara haca
a!a)o, ser:a mpos!le 7ue se enfocara en forma n:tda con los o!)et%os
de 1ran aumento.
*. Se encende el mcroscopo, 4 se 1ra el tornllo macrom8trco haca
delante, hasta el tope. Con esto se ele%ar5 la platna, acerc5ndose al
o!)et%o m5s pe7ue6o del mcroscopo, 4a 7ue s se hcera cuando el
o!)et%o de nmers&n %1r< se correr:a el res1o de romper la preparac&n.
+. Se o!ser%a la preparac&n 4 se 1ra lentamente el tornllo macrom8trco
haca atr5s hasta o!ser%ar un enfo7ue aproxmado de la preparac&n.
.. Se 1ra entonces el tornllo mcrom8trco, hasta 7ue se o!tene una
ma1en precsa. ;na %e- hecho esto, se recorre toda la preparac&n para
su dentfcac&n.
/. S se 7uere o!ser%ar a ma4or aumento, se 1ra el re%&l%er haca el
aumento nmedato superor, enfocando solamente con el tornllo
mcrom8trco, no se utl-a el macrom8trco, 4a 7ue los dstntos o!)et%os
%enen cal!rados para 7ue no se dstorsone mucho la ma1en 4 se
enfo7ue f5clmente.
0. S se desea %er el mcroscopo con el o!)et%o de nmers&n, se coloca
entonces una 1ota de acete de cedro, se 1ra el re%&l%er hasta colocar
el o!)et%o de nmers&n 4 se procede a o!ser%ar.
2. ;na %e- termnada la o!ser%ac&n, se %uel%e a 1rar el re%&l%er hasta
colocar el o!)et%o panor5mco so!re la platna. Se apa1a el mcroscopo.
Se descende un poco la platna. Se retra la preparac&n, 4 se procede a
desconectar el mcroscopo 4 el transformador.
13. Por #ltmo, s se utl-& el o!)et%o de nmers&n, se de!er5 9IMPIAR E9
O,OETI@O CO? ;? A9FOD>? CO? MI9O9, 4a 7ue es mu4 frecuente
7ue se 1uarde sn lmparse, sendo m5s df:cl su lmpe-a posteror pues
el acete se reseca, 4 lo 7ue es peor, al utl-arse de nue%o el
mcroscopo, frecuentemente sucede se manchan los dem5s o!)et%os.
;na %e- efectuado 8ste cudado del o!)et%o se le coloca su campana al
mcroscopo 4 se 1uarda en el lu1ar 4a destnado.
S se s1uen 8stos pasos, se facltar5 el enfo7ue del mcroscopo, 4 lo 7ue es
m5s mportante se e%tar5 la ruptura de la preparac&n 4 prncpalmente se
e%tar5 el da6o 7ue se le pudera ocasonar al o!)et%o.
9IMPIEGA DE9 MICROSCOPIO
El enem1o n#mero uno del mcroscopo, es el pol%o. Por eso es mportante
e%tar desde un prncpo 7ue se empol%e.
Cuando esto suceda ha!tualmente !asta con una lmpe-a de la superfce
exteror de las lentes, APRA lo cual se emplea un pncel l!re de 1rasa
$e%entualmente la%ado con 8ter', o un trapo lmpo, as: como un poco de a1ua
destlada. Esto puede o!tenerse smplemente echando el alento so!re la
superfce del crstal.
S no pudera prescndrse de los dsol%entes or15ncos, lo me)or es utl-ar
pe7ue6as cantdades de alcohol en lu1ar de a1ua.
Con relat%a frecuenca, la lente frontal del o!)et%o, prncpalmente seco fuerte
o la nmers&n, se ensuca con !5lsamo de canad5 & acete de cedro, por lo 7ue
APRA su lmpe-a se utl-ar5 el xlol, pero tenendo cudado de no aplcar en
exceso, pues 8sta su!stanca altera el cemento 7ue su)eta las lentes del
o!)et%o.
I9;MI?ACIO? SEFQ? ROS9ER
$Mcroscopo correctamente enfocado'
S se posee un mcroscopo compuesto como el 7ue aca!amos de descr!r, es
con%enente 7ue efectuemos la lumnac&n de Rohler+, para tener un enfo7ue
correcto. Con 8sto se cons1ue.
= ;n Campo %sual unformemente lumnado.
= ;na ma1en !rllante, sn refle)os o deslum!ramentos.
= Ampla protecc&n de preparac&n.
9os pasos a se1ur son los s1uentes<
1. Su!r completamente el condensador con la lente frontal ntroducda.
". Enfocar la preparac&n con los o!)et%os ..( & 13.
(. Cerrar el dafra1ma de campo lumnoso dspuesto en el pe del
mcroscopo.
*. ,a)ar al1o el condensador, hasta o!tener m5xma ntde- de la ma1en
del dafra1ma.
+. Centrar el dafra1ma de campo lumnoso en el campo %sual, recurrendo
a los " tornllos del condensador.
.. A!rr el dafra1ma de campo lumnoso hasta el !orde del campo %sual.
MICROLOTOFRALIA
El m8todo m5s f5cl para recordar una ma1en mcrosc&pca es la foto1raf:a,
a#n cuando 8sta o!ser%ac&n es parcal, 4a 7ue solo una a4uda de los estudos
de o!ser%ac&n mcrosc&pca, pues nunca ser5 lo msmo 7ue o!ser%ar
drectamente la preparac&n en el mcroscopo, donde se puede correr todo el
campo a %oluntad.
Recentemente se ha a%an-ado en forma mu4 mportante en 8ste aspecto, con
el perfecconamento del fotomcroscopo. El cual consta de un mcroscopo, al
cual se le han adaptado una c5mara, una sere de fltros para ma4or contraste 4
un dsparador autom5tco, o!ten8ndose as:, fotos de excelente caldad.
MICROPROPECCIO?
Otro de los m8todos utl-ados en el estudo de la Sstolo1:a, es el
mcropro4ecc&n, esto se lo1ra por medo del mcropro4ector.
9a mportanca de este aparato consste en 7ue pro4ecta la ma1en drecta de
la preparac&n 7ue se est5 estudando, so!re una pantalla, facltando la
ense6an-a de 1rupo. En la f1ura "" se o!ser%a este aparato.