Objetivos Que el alumno comprenda las maneras de representar y manejar datos experimentales. Verificar la necesidad de luz para promover la germinacin y determinar los parmetros de germinacin (capacidad y velocidad de germinacin) de semillas fotoblsticas y no fotoblsticas.
Se ha sealado la importancia de realizar correctamente las mediciones, sin embargo el propsito del experimento no queda ah, ya que la medicin por si misma poco puede aportar al conocimiento de los fenmenos. Tan importante como la obtencin de los datos es el anlisis de los mismos, para lo cual es necesario organizarlos, compararlos, relacionarlos entre s. Ser necesario presentar los datos de una manera ordenada si pretendemos (como en todo trabajo cientfico) que otras personas puedan entender fcilmente lo que hemos realizado; con este fin podemos elaborar grficas o tablas. En una tabla simplemente se enlistan los valores obtenidos en los experimentos de investigacin, lo que nos permite una comparacin en forma general. En una grfica, en cambio, no solo mostramos los valores obtenidos sino que adems podemos relacionar entre s los datos de los experimentos. La comparacin y la relacin de los datos entre s, debe ser llevada a cabo con el mayor rigor posible. El crecimiento se define como el incremento irreversible de biomasa sea en peso, masa, volumen o tamao de un individuo en funcin al tiempo, y puede ser evaluado con diferentes parmetros. La germinacin de semillas tambin es un proceso de crecimiento. Al iniciarse la germinacin el embrin utiliza las sustancias almacenadas en la semilla: almidn, aceite, protenas entre otros, para iniciar el proceso de germinacin, que consiste en la reactivacin del crecimiento hasta que el embrin se transforma en una plntula que puede realizar la fotosntesis y obtener sus nutrientes del medio. El crecimiento del embrin una vez iniciada, ya no puede interrumpirse; por ello, cuando se inicia la semilla deja de ser una estructura de resistencia y persistencia comenzando la vida de una nueva planta. La germinacin de las semillas depende de factores: intrnsecos y extrnsecos. Entre los primeros se encuentra la viabilidad, que depender de las condiciones de almacenamiento, tipo de semilla y su longevidad. Entre los factores extrnsecos se encuentran los del medio: agua, CO 2 , O 2 , temperatura y luz. El requerimiento de luz para germinar no es general, hay semillas que germinan bien con luz u oscuridad (ej. los cereales), se llaman semillas "no fotoblsticas". En los casos en que la luz regula la respuesta, si la accin es promotora, se llaman semillas "fotoblsticas positivas"; y si la accin es inhibidora son "fotoblsticas negativas".
Material por equipo 12 cajas de Petri de plstico estriles (En uso durante 1 a 3 semanas) 3 bolsas de plstico transparente tamao 30X40 cm 1 colador 1 Matraz Erlenmeyer de 500 mL 1 Agitador de vidrio 3 vasos de precipitados de 100 mL 3 agujas de diseccin 1 piceta con agua destilada 1 pinzas de diseccin papel aluminio 9 palillos de madera 1 franela servilletas de papel absorbente
Equipos 1 Plancha para calentar Incubadora Precisin a 25 C, fotoperiodo 12/12 h luz/oscuridad Balanza analtica 1 microscopio de diseccin
Material biolgico Semillas de cactceas y/o hortalizas
Reactivos Agar Bacteriolgico (Marca Nacional Bioxon)
Procedimiento
1. Preparar 300 mL de agar bacteriolgico al 1%, disolverlo en agua destilada fra y luego calentar sin dejar ebullir, controlando el calor para que no se suba y mantenerlo por 3 min. Vaciarlo en 12 cajas de Petri de plstico estriles, aproximadamente 25 mL por caja. Dejarlo solidificar con las cajas tapadas. 2. Sembrar 50 semillas de cada especie por lote (cuatro lotes por especie). Distribuir las semillas cuidadosa y regularmente en el agar. Pueden servirse de pinzas o un palillo de madera para sembrar. Tres lotes de cada especie se colocarn a la luz y otro lote se cubrir con papel aluminio para precisar si las semillas son capaces de germinar a la oscuridad. 3. Colocar las cajas de Petri con las semillas dentro de una bolsa de plstico en una incubadora a 25 C y fotoperodo 12/12 h luz/oscuridad. 4. Cuantificar diariamente el nmero de semillas germinadas.
Resultados
Construir una tabla con datos de germinacin en donde se indique el nmero de semillas que germinan diariamente y el porcentaje de germinacin acumulado de cada lote de semillas durante 14 a 21 das, como se muestra el ejemplo en la tabla 1. Tabla 1. Germinacin de semillas de la especie 1 durante 14 das. Especie1 Parmetros DDS* 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 Lote 1 Luz No. de semillas germinadas por da
No. de semillas acumuladas
Porcentaje acumulado de geminacin (%)**
Lote 2 No. de semillas Luz germinadas por da No. de semillas acumuladas
Porcentaje acumulado de geminacin (%)**
Lote 3 Luz No. de semillas germinadas por da
No. de semillas acumuladas
Porcentaje acumulado de geminacin (%)**
Lote 4 Oscuridad No. de semillas germinadas por da
No. de semillas acumuladas
Porcentaje acumulado de geminacin (%)**
*DDS, Das despus de la siembra **El porcentaje acumulado de germinacin representa la capacidad de germinacin de un lote de semillas.
Calcular y graficar en excel la capacidad de germinacin (%) contra el tiempo (das). Se considera que una semilla ha germinado cuando la radcula emerge a travs de los tegumentos de la misma. La capacidad de germinacin se determina en porcentaje (%). Determinar la velocidad de germinacin, mediante el clculo del Tiempo Medio de Germinacin (TMG) durante 14 a 21 das despus de la siembra.
*TMG = (Dn) / n
Donde: n = nmero de semillas que germinan en el da D y D es el nmero de das a partir de la fecha de siembra. Comparar los resultados de germinacin de las semillas de las diferentes especies colocadas a la luz y a la oscuridad. Elaborar un reporte con los resultados obtenidos. Cuestionario 1. Cmo influye la luz sobre la germinacin de semillas? 2. Defina qu es una semilla fotoblstica positiva o fotoestimulada 3. Qu es una semillas fotoblstica negativa o fotoinhibida? 4. Mencione cinco ejemplos de semillas fotoblsticas positivas, cinco negativas y cinco de semillas indiferentes o fotoindependientes. 5. Considera que las condiciones de estrs del ambiente pueden ejercer un efecto sobre la germinacin de semillas y la respuesta a la luz?
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Medidas de seguridad 1. El alumno, deber leer en las etiquetas de los envases de los reactivos las medidas de seguridad, el manejo y toxicidad, as como las recomendaciones especficas para su utilizacin. 2. Los remanentes de reactivos utilizados no deben regresarse a los envases originales, y deben manejarse con pipetas y esptulas limpias y secas. 3. La transferencia de un lquido con pipeta nunca ha de realizarse succionando con la boca, sino que deber utilizarse perilla de hule o perilla de seguridad. 4. Cualquier quemadura con lquido caliente o fuego, requiere que se ponga la parte afectada bajo el chorro de agua fra durante 15 minutos.