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EL ADN, BI OTECNOLOG A e I NGENI ER A GENTI CA

La
Biotecnologa
es todo el conjunto de tcnicas que emplea seres vivos o
compuestosprocedentes de ellos (como las enzimas) para la obtencin de
productos, bienes y servicios de distinto tipopara la humanidad.La
Biotecnologa abarca:


Biotecnologa tradicional:
utilizada desde hace cientos de aos y que emplea, por ejemplo, procesosde
fermentacin microbiana para la elaboracin del pan, bebidas alcohlicas o
yogur.


Biotecnologa moderna:
nacida en los ltimos 30 aos, gracias a los progresos de la biologa
celular,bioqumica, microbiologa, inmunologa e
ingeniera gentica
.
I NGENI ER A GENTI CA
Comprende todo el conjunto de mtodos y tcnicas que permiten el acceso y
manipulacin delADN y la transferencia de genes de un organismo a otro. De
este modo se han podido obtener
organismostransgnicos
u
Organismos Modificados Genticamente (OMG)
.Existen varias tcnicas de ingeniera gentica, entre las que destacan:


Obt enci n de ADN r ecombi nant e.
Tcnica que permite cortar el ADN de un organismos enmltiples fragmentos,
aislar alguno de ellos, e introducirlo, mediante un vector, en otro
organismo,originando un organismo transgnico.


Cl onaci n del ADN.
Permite la produccin de mltiples copias de un gen especfico o de
unfragmento de ADN.


Reaccin en cadena de la polimerasa (PCR).
Tcnica in Vitro, que permite obtener de forma muyrpido un elevado nmero
de copias de un fragmento de ADN.


Secuenci aci n del ADN.
Tcnica que permite conocer el orden de los nucletidos que forman partede
un gen, o incluso del genoma completo de un organismo. (ya vista en el tema
de cidos nucleicos)
Tecnol og a del ADN r ecombi nant e
El ADN formado por la unin de fragmentos de ADN procedente de organismos
distintos sedenomina
ADN r ecombi nant e
. Por eso todo el conjunto de tcnicas que utiliza la ingeniera gentica
paraconseguirlo recibe el nombre de
tecnologa del ADN recombinante
.Los pasos que implica esta tecnologa son, en esencia, estos:1.

Las molculas de ADN de dos organismos diferentes se cortan en fragmentos
con
ENDONUCL EASAS DE RESTRI CCI N
. Las endonucleasas de restriccin son enzimas fabricadas por bacterias y
soncapaces de cortas el ADN de cualquier organismo por secuencias
especficas, dando lugar a fragmentoscon extremos de una sola cadena,
llamadas
ext r emos cohesi vos
. Actualmente se conocen ms de1200 endonucleasas de restriccin que
reconocen y cortan el ADN por distintas secuencias.Una de ellas de la
endonucleasa
EcoRI
, que reconoce la secuencia GAATTC y corta entre losnucletidos G y A de
cada una de las cadenas de las molculas de ADN.


Biologa 2 Bachillerato
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2.

Una vez obtenidos los fragmentos de ADN con extremos cohesivos
complementarios, se ponen encontacto y se someten a la accin de la enzima
ADN LI GASA
, que une los extremos cohesivos, yforma una molcula de
ADN r ecombi nant e
, que contiene ADN de los dos organismos.
Cl onaci n del ADN
La clonacin de un gen consiste enintroducirlo en una clula, de manera que
puedaser copiada. Para ello se inserta en una molculade ADN, llamado
vect or de cl onaci n
, capaz deentrar y replicarse independientemente en unaclula husped. El
resultado es la formacin deADN recombinante y el vector de clonacin
actacomo medio de transporte.Para clonar genes se utilizar diferentesvectores
de clonacin, como los plsmidosbacterianos, pequeas molculas de ADN
circularque se pueden replicar independientemente en lasbacterias.El proceso
de clonacin de un gen en bacteriasincluira las siguientes etapas:1.

Obtencin del
plsmido recombinante
formadopor un plsmido que contenga un gen deresistencia a un antibitico y
el gen que sedesea clonar.2.

Transformacin
de las bacteriasincorporndoles el plsmido recombinante.3.

Seleccin
de las bacterias transformadas,aadiendo al medio el antibitico que4.

Crecimiento
de las bacterias en medio decultivo.5.

Aislamiento
de los plsmidos recombinantes yde las copias del gen de inters.


Biologa 2 Bachillerato
3
Reaccin en cadena de la polimerasa (PCR)
La r
eaccin en cadena de la polimerasa (PCR)
es un mtodo que permite obtener obtener mltiplescopias de un fragmento de
ADN en muy poco tiempo, lo que se denominan
amplificacin del ADN
. Es unatcnica in vitro, donde se reproduce la duplicacin del ADN.Para
amplificar el ADN se aaden en un tubo de ensayo los siguientes
componentes:


La
muest r a de ADN
a amplificar


Cebadores:
pequeas cadenas de nucletidos complementarias a las secuencias de ADN
que flanqueanal gen que queremos copiar.


Los cuatro tipos de
desoxirribonucletidos trifosfato
(ATP. GTP, CTP, TTP).


Una
ADN pol imerasa
resistente al calor, obtenida a partir de la bacteria termfila
Thermus aquaticus
(Taq-polimerasa).