BIOTECNOLOGA La biotecnologa es un rea multidisciplinaria, que emplea la biologa, la

qumica y sus procesos, con gran uso en agricultura, farmacia, ciencia de los alimentos, ciencias forestales y medicina. Probablemente el primero que us este trmino fue el ingeniero hngaro Karl Ereky, en 1919. La biotecnologa se refiere a toda aplicacin tecnolgica que utilice sistemas biolgicos y organismos vivos o sus derivados para la creacin o modificacin de productos o procesos para usos especficos.

OBJETIVOS DE LA BIOTECNOLOGA VEGETAL El empleo de la ingeniera gentica en el mejoramiento vegetal es lo que se denomina agro biotecnologa o biotecnologa vegetal. Sus objetivos consisten en aumentar la productividad de los cultivos, mejorar los alimentos y poder las plantas como fbricas para la produccin de medicamentos,

emplear a

vacunas, polmeros y otras molculas. Se pueden distinguir tres olas de cultivos transgnicos: Primera ola: se refiere al mejoramiento de rasgos agronmicos, como el tamao del grano o la resistencia a plagas. Son ejemplos de esta ola los cultivos

transgnicos que se comercializan en el mundo: soja tolerante a herbicida, maz resistente a insectos, papaya resistente a virus, entre otros. Segunda ola: se refiere a los cultivos que generan alimentos ms sanos y nutritivos que los convencionales. Son ejemplos el arroz con alto contenido betacaroteno, papas que absorben menos aceite, man hipoalergnico, etc. Tercera ola: se refiere al empleo de las plantas como fbricas de molculas de inters industrial, como medicamentos, vacunas, biopolmeros, etc.

INGENERA GENTICA La ingeniera gentica es la tecnologa del control y transferencia de ADN de un organismo a otro, lo que posibilita la creacin de nuevas especies, la correccin de defectos genticos y la fabricacin de numerosos compuestos y aplicaciones. En la dcada de 1970 se abrieron nuevas perspectivas en el campo de las biotecnologas gracias a la elaboracin de nuevas tcnicas que permiten llegar directamente al material que est en el origen de todas las caractersticas y procesos vitales, es decir, el ADN. Este conjunto de tcnicas moleculares de manipulacin gentica recibe el nombre de ingeniera gentica. Su objetivo es la manipulacin in Vitro del ADN, la introduccin de este ADN as modificado en clulas vivas y la incorporacin del mismo como parte del material hereditario de dichas clulas. De este modo, ADN de diversas procedencias, por ejemplo, la fraccin de ADN humano regula la sntesis de insulina, puede introducirse en bacterias de manera que pasa a formar parte de su genoma y lograr as que la bacteria adquiera la capacidad de elaborar insulina.

ALIMENTOS TRANSGNICOS Se denominan alimentos transgnicos a los obtenidos por manipulacin gentica que contienen un aditivo derivado de un organismo sometido a ingeniera gentica; tambin se llaman as a aquellos que son resultado de la utilizacin de un producto auxiliar para el procesamiento, creado gracias a las tcnicas de la ingeniera gentica La biotecnologa de alimentos aplica los instrumentos de la gentica moderna a la mejora de localidad de los productos derivados de las plantas, animales y microorganismos. Desde tiempos remotos, el hombre ha seleccionado, sembrando y cosechado las semillas que permiten la obtencin de los alimentos necesarios para el mantenimiento de su metabolismo. De la misma manera, se ha fabricado pan, cerveza, vino o queso sin conocimiento alguno acerca de la ciencia gentica involucrada en estos procesos. Los caracteres introducidos mediante ingeniera gentica en especies destinadas a la produccin de alimentos buscan, tambin, el incremento de la productividad (por ejemplo, mediante una resistencia mejorada a las plagas) as como la introduccin de caractersticas de calidad nuevas. Debido al mayor desarrollo de la manipulacin gentica en especies vegetales, todos los alimentos transgnicos corresponden a derivados de plantas. Las tcnicas de ingeniera gentica consisten en aislar segmentos del ADN (el material gentico) de un ser vivo (virus, bacteria, vegetal, animal e incluso humano) para introducirlos en el material hereditario de otro. Por ejemplo, el maz transgnico que se cultiva en Espaa lleva genes de bacteria que le permiten producir una sustancia insecticida.

Algunos de los peligros de estos cultivos para el medio ambiente y la agricultura son el incremento del uso de txicos en la agricultura, la contaminacin gentica, la contaminacin del suelo, la prdida de biodiversidad, el desarrollo de resistencias en insectos y malas hierbas o los efectos no deseados en otros organismos. Los efectos sobre los ecosistemas son irreversibles e imprevisibles. El trmino alimento transgnico hace referencia generalmente a aquel que deriva de un organismo transgnico o genticamente modificado. Un organismo genticamente modificado (OGM) es aquella planta, animal, hongo o bacteria a la que se le ha agregado por ingeniera gentica uno o unos pocos genes con el fin de producir protenas de inters industrial o bien mejorar ciertos rasgos, como la resistencia a plagas, calidad nutricional, tolerancia a heladas, etc.

En su sentido ms amplio, un alimento puede ser transgnico porque est formado en gran parte por materiales derivados de un OGM (por ejemplo polenta de maz GM), o bien porque en su fabricacin se emplean microorganismos GM (levaduras, bacterias cido-lcticas) o ingredientes que provienen de OGM, como aceites, aminocidos, cidos orgnicos, enzimas, jarabe de alta fructosa (el que a su vez se obtiene por accin de enzimas derivadas de microorganismos GM).

La polmica El debate surge del siguiente dilema: los alimentos transgnicos pueden permitir aumentar la productividad y el valor nutritivo de estos productos, lo cual ayudar a la reduccin del hambre en el mundo y al incremento de la seguridad alimentaria en los pases desarrollados. Sin embargo, se temen los hipotticos riesgos a largo plazo que pueda tener su utilizacin masiva para la salud humana y el medio ambiente. Las consecuencias sobre la biodiversidad tambin son motivo de discusin, por ejemplo el mejoramiento gentico pesquero se puede ver beneficiado, en trminos de mayor productividad gracias a la modificacin gentica, pero no se sabe como interaccionarn las reservas de peces naturales y los nuevos individuos modificados. Dado que los animales transgnicos no se estn empleando todava en la alimentacin humana, la controversia sobre los alimentos transgnicos se restringe por el momento a los cultivos genticamente modificados. El cultivo de vegetales que contienen genes de resistencia a plagas permite reducir la cantidad de sustancias qumicas necesarias para proteger los cultivos. De este modo se asegura una mayor productividad y adems se reduce la contaminacin por pesticidas utilizacin se relacionan del medio ambiente. Las dudas acerca de su el desconocimiento de las

especialmente con

consecuencias que pueden tener sobre otras especies vegetales, y sobre poblaciones del ecosistema. Hasta ahora, el desarrollo de los alimentos transgnicos se ha dirigido a la obtencin de alimentos bsicos ms nutritivos (introduccin de genes en cultivos como el arroz para incrementar su valor alimenticio, modificacin gentica de frutas y hortalizas para aumentar el tiempo de conservacin, reduciendo el enorme desperdicio que tiene lugar durante esas operaciones, as como mejora de las oportunidades comerciales, etc).

POSTURAS A FAVOR DE LOS AGM: Se argumentan ventajas como: Mejorar el hambre en pases en vas de desarrollo, abasteciendo con mayor nmero de alimentos y cultivndolos en lugares con condiciones difciles (sin agua, suelos cidos) Mejoras nutricionales (alimentos enriquecidos en vitaminas, aminocidos, minerales, etc.) Aumento de la variedad y calidad de los productos, como en el tomate que tarda ms tiempo en reblandecer. Proteccin del medio ambiente al disminuir la necesidad de utilizar herbicidas y pesticidas. Mejoras en los animales de granja, ej.: potenciar la tasa de crecimiento o la resistencia a parsitos y enfermedades Mejoras en los cultivos como: Resistencia a enfermedades y plagas. Resistencia a sequas y temperaturas extremas. Aumento en la fijacin de nitrgeno (se reduce el uso de fertilizantes). Resistencia a suelos cidos y salinos. Resistencia a herbicidas (se eliminan malezas sin afectar al cultivo). Modificaciones para obtener cosechas ms tempranas. Alimentos ms frescos, se mejora en el manejo de alimentos despus de recoger la cosecha (por la resistencia a temperaturas extremas o retraso en la putrefaccin). Se reduce el coste de produccin.

POSTURAS EN CONTRA DE LOS AGM: Se argumenta: La preocupacin por la seguridad alimentaria. Puede atentar contra la salud de la poblacin, por la posible aparicin de alergias o resistencias a antibiticos.

 Los posibles impactos ambientales. Organismos modificados que se pueden cruzar con organismos naturales y los pueden superar, llevando a la extincin del organismo original. Aspectos biolgicos, plantas y animales modificados que pueden tener cambios genticos inesperados y dainos. Aspectos ticos, no se puede utilizar la modificacin gentica para interferir en la naturaleza y en la evolucin. Cambios culturales. Exigencia de etiquetados e informacin. Beneficios econmicos para algunas empresas, obtienen mayor rentabilidad y productividad, pero dejan en segundo plano la calidad alimentaria.

LA BIOTECNOLOGA Y LAS PLANTAS ORNAMENTALES

BIOTECNOLGA EN EL FLORERO

La belleza de las flores ha sido inspiracin de artistas de todos los tiempos, desde los tradicionales versos Las rosas son rosas, las violetas son azules,

incluyendo a los creadores de los perfumes, que emplean aromas florales en sus exclusivas pociones. El regalo de flores de los enamorados, o a las flamantes madres, o simplemente la decoracin de casas con perfumadas y vistosas flores ha hecho de la floricultura una importante industria en el siglo XX. Pero, cul es el origen de tanta belleza? Cmo se pueden aprovechar los ltimos avances de la ciencia para ofrecer ms variedades de flores, con ms perfume, ms ptalos, ms colores, ms duraderas, y ms resistentes a enfermedades? Precisamente de eso se viene ocupando la Biotecnologa Ornamental en las ltimas dcadas. Pero... biolgicamente, qu son las flores? Para entender cmo la biotecnologa puede ayudar a la floricultura, es necesario conocer la biologa floral. La flor es un tallo de crecimiento definido en el que se insertan hojas modificadas (hojas florales), y se desarrolla en el pice superior de la planta (flor terminal) o en las yemas laterales (flor axilar). En la flor tienen lugar los procesos esenciales de la reproduccin sexual: la meiosis y la fecundacin. Es decir, la flor es el rgano reproductivo sexual de las plantas angiospermas (angios: vaso, que alude a la cavidad ovrica de la flor).

Como muestra la anterior figura, la flor est formada por cuatro ciclos que forman sus respectivas estructuras: el cliz, la corola, el androceo y el gineceo. Las dos ltimas son los rganos reproductivos masculino y femenino, respectivamente.

De las cuatro estructuras mencionadas, los ptalos son los principales responsables del color, el perfume y la belleza de la flor. Estas caractersticas ofrecen una ventaja adaptativa que favorece la supervivencia y evolucin de las plantas. Los ptalos atraen a los polinizadores (aves, insectos, etc.), los cuales se acercan atrados por el color. Esta interaccin se ha desarrollado a tal punto en la evolucin, que en la actualidad se pueden observar relaciones flor-polinizador muy especficas, y plantas que prosperan slo si su polinizador se encuentra presente. Otro factor importante en esta interaccin es la dulzura del nctar, sustancia sintetizada en el nectario, que se encuentra en la base del ovario. El desarrollo floral ocurre mediante un programa gentico complejo, en el que participan los productos de muchos genes, y es influenciado por mltiples factores (temperatura, luz, hormonas, concentracin de nutrientes, disponibilidad de agua, etc.) En la actualidad, los cientficos han dilucidado gran parte del mecanismo por el cual la planta origina los ptalos, qu genes estn involucrados en controlar su formacin, nmero, forma, color y aroma.

BIOTECNOLOGA APLICADA AL DESARROLLO FLORAL A continuacin se describen algunas de las mejoras en floricultura obtenidas por ingeniera gentica: i) Cantidad de ptalos. Se conocen varios genes involucrados en el desarrollo de los ptalos (y de los otros ciclos florales). Esto se ha aprovechado para obtener por ingeniera gentica flores con mayor cantidad de ptalos, ii) Color de los ptalos. Un mismo color puede estar dado por distintos tipos de pigmentos, e incluso cambiar segn las condiciones del entorno. Cada uno de los pigmentos de las flores son los encargados de darle un color caracterstico a las mismas.

En este sentido, la biotecnologa moderna ha dado buenos resultados. Empresas dedicadas al ramo en Europa han creado claveles de distintas gamas de azul mediante la introduccin por ingeniera gentica de genes de del pigmento

obtenidos de las flores de pensamiento. De la misma manera, la empresa Flores Colombianas produce y exporta desde el ao 2000 claveles azules transgnicos generados por insercin de un gen de petunia. Adems de crear colores por insercin de genes de otras especies, se puede suprimir la formacin de un color por silenciamiento gentico, expresando, por ejemplo, una forma del mismo gen endgeno responsable del color que se quiere inhibir. As se ha logrado la tan ansiada rosa azul, desarrollada por australianos y japoneses y que an no ha llegado al mercado (se encuentra atravesando el proceso de bioseguridad en Australia, y se espera que prontamente sea aprobada para comercializacin). En este caso, para lograr el color azul por insercin del gen de pensamiento, fue necesario apagar antes un gen de la rosa responsable del color rojo, porque de lo contrario resultaban colores lilas o agrisados. iii) Retardo de la marchitez o senescencia. Tambin se ha logrado por ingeniera gentica aumentar el tiempo que una flor puede perdurar sin marchitarse, una vez cortada de la planta. La sustancia endgena de las plantas responsable de su marchitamiento es principalmente el etileno, una hormona voltil. Por lo tanto, fue necesario inhibir por silenciamiento gnico la sntesis de una enzima que participa en la ruta biosinttica del etileno, para as disminuir la concentracin de esta molcula en la planta transgnica. As se obtuvieron, por ejemplo, claveles transgnicos que duran ms en el florero. Adems de las flores, la biotecnologa tambin est tratando de modificar la arquitectura de las plantas ornamentales para que sean ms vistosas, aumentando el nmero de hojas por planta o acortando la longitud de los entrenudos. En definitiva, Las flores modificadas genticamente tienen un mayor nmero de ptalos, colores que la naturaleza no puso en ellas y resistencia an mayor, que hace posible que rosas azules cultivadas genticamente en Japn puedan llegar al otro extremo del mundo u orqudeas negras, cultivadas en Colombia, puedan llegar a Japn.

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OTRAS TCNICAS DE BIOTECNOLOGA APLICADAS A LA FLORICULTURA Adems de las variedades obtenidas por tcnicas de ADN recombinante, en la actualidad la floricultura tambin se ve beneficiada por la aplicacin de otras tcnicas de biotecnologa, entre ellas: i) El cultivo de tejidos. Se lo emplea en el mejoramiento de numerosas especies, como crisantemos, gladiolos, jacarand, gardenia, orqudeas, etc., tanto con fines de micro propagacin a mayor escala, como tambin para obtener plantas libres de patgenos y producir nuevas variedades en cultivo in vitro. ii) Cruzamientos convencionales para obtener hbridos. Esta tcnica es la misma que se utiliza en el mejoramiento de cultivos, que consiste en cruzar dos variedades con fenotipo diferente para analizar la descendencia que se obtiene y elegir la de mejor posicionamiento en el mercado. En el caso de plantas para macetas, se busca que tengan buena cantidad de flores de diferentes colores, y que la planta sea compacta; mientras que para plantas que se usan para plantar en la tierra (en jardines, canteros, etc.) se busca tambin la cantidad y calidad de flores, pero a diferencia de las de maceta, se busca que las de tierra tengan gran capacidad de cobertura de superficie. iii) Tcnicas de marcadores moleculares. Los marcadores moleculares permite evaluar la diversidad disponible en cada especie y tambin identificar variedades, genotipos y el lugar de origen (muchas de las especies comercializadas son originarias de Amrica Latina). Ya existen desarrollos de marcadores moleculares para especies como geranio, dalia, petunia, rosa y violeta y orqudea.

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El Laboratorio de Biotecnologa Vegetal de la Universidad central de Venezuela ha realizado proyecto de Investigacin biotecnolgica en especies florales como la Orqudea, Calas, Crisantemos, helechos, entre otros, prestando especial atencin en las Orqudeas, toda vez que es la flor nacional y la biotecnologa permite reproducir las orqudeas preferidas o salvar aquellas en etapa de extincin.

El principal objetivo de la propagacin de las orqudeas por medio de la biotecnologa o cultivo in vitro es reproducir las plantas preferidas o salvar aquellas en etapa de extincin. Este tipo de cultivo permite: - Multiplicacin vegetativa: Se logra a travs del cultivo de tejidos utilizando el meristemo como explante inicial. La ventaja que presenta este sistema es que las plantas son idnticas a los progenitores. - Multiplicacin por semilla: Con este mtodo se obtiene gran cantidad de plantas, las cuales tendrn variacin con respecto a sus progenitores. - Multiplicacin por pednculos florales: Se utilizan las yemas de varas florecidas, y las plntulas resultantes tienen las mismas caractersticas genticas que su progenitor.

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FUNDAMENTACIN LEGAL

Normativa internacional
Esta tecnologa ha generado controversias en cuanto a cmo controlar y regular la introduccin de los OGM en los diferentes mercados del mundo. Seguidamente se enumeran tres de los instrumentos internacionales relacionados con el tema. Declaracin de Ro de Janeiro En 1992 la Declaracin de Ro de Janeiro, se establece en el principio N 15 lo que se conoce como Principio Precautorio, el cual se formul para asegurar el resarcimiento al menoscabo de la vida humana originado por efectos nocivos de productos qumicos respecto de los cuales los daos no son visuales sino despus de transcurrido un perodo de 20 o 30 aos. Este principio dice lo siguiente: Con el fin de proteger el medio ambiente, los Estados debern aplicar ampliamente el criterio de precaucin conforme a sus capacidades. Cuando haya peligro de dao grave o irreversible, la falta de certeza cientfica absoluta no deber utilizarse como razn para postergar la adopcin de medidas eficaces en funcin de los costos para impedir la degradacin del medio ambiente. El principio se articula en base a dos presupuestos: por una parte, la posibilidad de que conductas humanas causen daos colectivos vinculados a situaciones catastrficas que puedan afectar un conjunto de seres vivos, y por la otra, la falta de evidencia cientfica (incertidumbre) respecto a la existencia misma del dao temido. La nocin de Precaucin responde al concepto de deteccin precoz de todos los peligros para la salud y el medio ambiente mediante una investigacin multidisciplinar y sincronizada basada en la relacin causa efecto. Sin embargo, este marco conceptual de la prevencin fue eliminado en el Protocolo de Bioseguridad (del ao 2000), al plantearse que basta que un Estado seale que posee sospechas, no probadas cientficamente, que un producto

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puede causar un dao a la poblacin, para que se lo autorice a prohibir la importacin de un OGM. Convenio sobre Diversidad Biolgica Tambin en 1992, en la Cumbre de la Tierra de Ro de Janeiro, se firm el Convenio sobre Diversidad Biolgica, el cual estableci sus objetivos en el artculo 1: ... la conservacin de la diversidad biolgica, la utilizacin sostenible de sus componentes y la participacin justa y equitativa en los beneficios que se deriven de la utilizacin de los recursos genticos, mediante, entre otras cosas, un acceso adecuado a esos recursos y una transferencia apropiada de las tecnologas pertinentes, teniendo en cuenta todos los derechos sobre esos recursos y a esas tecnologas, as como mediante una financiacin apropiada . Mediante los artculos 15, 16 y 19 se pretende la integracin del libre comercio de los recursos genticos, reglando el acceso adecuado a los mismos, con la transferencia de tecnologas, (reconociendo que la tecnologa incluye la biotecnologa, y que el acceso a la tecnologa como su transferencia entre Partes Contratantes son elementos esenciales para el logro de los objetivos del Convenio, comprometindose, a asegurar y/o facilitar a otras Partes Contratantes el acceso a tecnologas pertinentes para la conservacin y utilizacin sostenible de la diversidad biolgica o que utilicen recursos genticos y no causen daos significativos al medio ambiente), y la compensacin justa por el acceso a los recursos biolgicos de otros. Protocolo de Cartagena La elaboracin y firma de este protocolo estaba prevista desde el origen de la firma del Convenio sobre Diversidad Biolgica. Pero los pases productores de transgnicos, con Estados Unidos y Canad a la cabeza, se dedicaron desde sus orgenes a sabotear la firma del mismo y a vaciar sus contenidos en forma sistemtica, colocando los intereses de lucro de las empresas por arriba del inters incluso de sus propias poblaciones.

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Finalmente el protocolo se firm, tiene algunos puntos interesantes, como la inclusin del principio de precaucin y la posibilidad de que los pases importadores puedan rechazar cargamentos de transgnicos basados en este principio, que bsicamente dice que frente a la duda sobre los riesgos, mejor abstenerse. Es el primer Tratado Internacional que reconoce los organismos modificados genticamente como una categora separada de organismos que requieren un marco regulador especfico. El artculo 1, establece cul es su objetivo de conformidad con el Principio 15 de la Declaracin de Ro: ... contribuir a garantizar un nivel adecuado de proteccin en la esfera de la transferencia, manipulacin y utilizacin seguras de los organismos vivos modificados resultantes de la biotecnologa moderna que puedan tener efectos adversos para la conservacin y la utilizacin sostenible de la diversidad biolgica, teniendo tambin en cuenta los riesgos para la salud humana, y centrndose concretamente en los movimientos transfronterizos. Establece las bases de una legislacin internacional sobre el movimiento transfronterizo de OGM, hace referencia principalmente a los mecanismos de notificacin por adelantado por parte del exportador y al consentimiento que concede un pas importador de semillas u otras muestras vivas derivadas de manipulacin biotecnolgica, antes de permitir su trnsito transfronterizo, detalla los requerimientos para la evaluacin y gestin de los riesgos, las medidas de emergencia, el manejo, transporte, etiquetado e identificacin del material. Sin embrago, resulta insuficiente ya que slo abarca a los organismos vivos modificados, quedando excluidos los productos derivados de organismos transgnicos, productos transgnicos farmacolgicos e insumos agrcolas transgnicos. Algo similar ocurre con el etiquetado, ya que solamente exige mencionar en una carga que puede contener organismos vivos modificados y no ordena al instante de la importacin, individualizarlos, cuantificarlos ni describir los procesos. Esta

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omisin afecta sobre todo a los consumidores, que no tienen acceso a las notificaciones previas que intercambian los estados y abre una brecha amplia para introducir sin controles los mencionados organismos. Venezuela suscribi todos estos instrumentos internacionales. ORDENAMIENTO JURDICO VENEZOLANO En nuestro pas se contaba con poca experiencia en cuanto a las legislaciones en materia de bioseguridad. Sin embargo poseemos documentos legales como la Constitucin de la Repblica Bolivariana de Venezuela y un conjunto de leyes: Ley de Diversidad Biolgica, Ley Orgnica del Ambiente, Ley Orgnica de Ordenacin del Territorio, Ley Orgnica de Ciencia, Tecnologa e Innovacin, Ley sobre la Defensa Sanitaria, Vegetal y Animal, Ley Forestal de Suelos y Aguas y Ley de Semillas y Materiales de Reproduccin. Adicionalmente, contamos con normas reglamentarias relacionadas con la biotecnologa y la bioseguridad tales como el Reglamento General de Plaguicidas, Normas sobre Coordinacin de Competencia en materia de Tramitacin de Contratos de Acceso a los Recursos Genticos, Decreto por el cual se crea la Comisin Nacional de Bioseguridad y el Cdigo de Biotica y Bioseguridad, entre otros. Es por ello, que la Repblica Bolivariana de Venezuela, debi poner en marcha un conjunto de estrategias que involucrara los diversos aspectos relacionados con el mbito nacional e internacional. La complementacin y sinergia de estos aspectos, hizo posible que el pas desarrollara un Marco Nacional de Bioseguridad, apoyado por la comunidad cientfica venezolana especializada. Este conjunto de estrategias, debidamente apoyadas financieramente, debi ser insertada dentro de las propuestas de desarrollo y las necesidades nacionales. Ello fue posible ya que el Estado venezolano cuenta con instrumentos jurdicos vinculados, directa e indirectamente, con la materia de seguridad de la biotecnologa y que deben ser revisados, completados y armonizados para construir un marco regulatorio y una red legal organizada, que permita el control y la fiscalizacin en materia de biotecnologa y bioseguridad.

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Es as como en el ao 2005 nace El Marco Nacional de Seguridad de la Biotecnologa Moderna en la Repblica Bolivariana de Venezuela (MNB), el cual fue un proyecto desarrollado por el Ministerio del Poder Popular para el Ambiente, con el apoyo financiero del Fondo Mundial del Ambiente. El mismo, se realiz teniendo como referencia las leyes nacionales ambientales relacionadas con la prevencin de cualquier riesgo que amenace la diversidad biolgica, particularmente aquellos riesgos relacionados con los Organismos Modificados Genticamente (OMG) o transgnicos. El MNB, es un documento basado en conocimientos cientficos, principios bioticos, valores humanos y equidad social.

VENEZUELA Y LA BIOTECNOLOGA

Desde el ao 1962 viene funcionando en Venezuela el Laboratorio de Biotecnologa Vegetal, adscrito al Instituto de Biologa Experimental de la facultad de Ciencias de la Universidad Central de Venezuela, cuya misin desarrollar investigacin y formar recursos humanos en el rea de la Biotecnologa Vegetal, tanto en la parte Biotecnologa Tradicional, como la Moderna, basada en la manipulacin del ADN recombinante. Su objetivo es la regulacin de la diferenciacin y morfognesis de tejidos creciendo in vitro. Propagacin clonal masiva de variedades selectas, a fin de obtener plantas resistentes a

enfermedades as como obtencin de plantas transgnicas. Este es el instituto que mayormente se ocupado de la investigacin y elaboracin de proyectos biotecnolgicos. Desde el ao de su fundacin hasta la actualidad han realizado proyectos en diferentes especies vegetales. Entre dichos proyectos se encuentra el de MICROPROPAGACIN CLONAL DE TRES VARIEDADES DE PIA NATIVAS DE LA REGIN AMAZNICA MEDIANTE CULTIVO DEYEMAS AXILARES Y APICALES, el cual tomaremos como base para nuestro estudio. Dicha investigacin fue realizada por los cientficos Hctor A. Blanco F.,
Teresa E. Vargas y Eva de Garca.

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En Venezuela la Pia (Ananas comosus) es uno de los frutos autctonos que ha mantenido su aceptacin y conservado su cultivo, compitiendo con otras frutas exticas. En la regin Amaznica venezolana, el cultivo de la pia es llevado a cabo, principalmente, por aborgenes de la etnia Piaroa, Esta actividad econmica forma parte de su cultura ancestral.

El mecanismo reproductivo de la especie Ananas comosus es vegetativo y la tasa de crecimiento y multiplicacin es lenta. El tiempo requerido para la fructificacin, a partir de la siembra de es cercano a un ao La propagacin por el mtodo convencional (vegetativo) de las plantas de pia produce un nmero muy limitado de propgulos, lo cual restringe la disponibilidad de material vegetal para la plantacin a gran escala. Adems de la limitacin del mtodo convencional, los cultivos son atacados por insectos y hongos que producen marchitamiento, la pudricin de la base del tallo, enfermedades que perjudican el cultivo afectando negativamente la produccin comercial del fruto El cultivo in vitro es una alternativa biotecnolgica que permite la propagacin masiva de plantas de pia libres de enfermedades y en tiempos relativamente cortos. El mtodo de micropropagacin ha sido utilizado por diferentes productores obtenindose diversos protocolos para el establecimiento de cultivo in vitro de la pia. En el trabajo que nos sirve de base, se tuvo como objetivo establecer un protocolo eficiente de multiplicacin clonal masiva de tres variedades de pia autctonas del Amazonas venezolano, a partir del cultivo in vitro de yemas axilares y/o apicales, aisladas de plantas provenientes de esa regin. El material producido en dicha investigacin fue entregado a la comunidad Piaroa para su evaluacin en campo y posterior industrializacin de los frutos.

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Materiales y Mtodos
El material vegetal utilizado en el establecimiento (Figura 1) estuvo constituido

Figuras 1 y 2: Muestras de pia tradas del Amazonas. Figura 3: se observan las coronas e hijuelos basales de la infrutescencia. En GOB se muestran varios hijos basales pasados a tierra.

por coronas e hijuelos basales de infrutescencias de tres variedades de pia amaznicas, provenientes de los sembrados de pia cultivados por los Piaroa en Betania del Topocho, estado Amazonas, Venezuela.

MTODO: 1 Desinfeccin del material vegetal

A las coronas e hijuelos basales se les elimina totalmente las hojas para exponer las yemas. Los tallos desnudos son lavados en solucin jabonosa por 20 min., transferidos a una solucin diluida al 20% (v/v) de cloro comercial por 10min., luego lavados tres veces en agua destilada estril. Finalmente, los explantes se sumergen en desinfectante esterilizador.

2 Aislamiento
De seguidas se procede al aislamiento e inoculacin de las yemas axilares y apicales en los medios de iniciacin, bajo un ambiente estril en la cmara de flujo laminar.

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3 Cultivo in vitro de yemas

Fase de iniciacin e induccin decrecimiento: Las yemas aisladas son cultivadas en medio con sales, sacarosa, tiamina y diferentes concentraciones de los reguladores de crecimiento. Los medios de cultivo son esterilizados en una autoclave bajo condiciones estndar de presin y temperatura. Despus de

inoculados en los medios, los explantes son incubados bajo luz blanca continua.

4 Fase de multiplicacin y alargamientode los brotes.

Los brotes obtenidos en la fase de iniciacin son cuidadosamente separados y transferidos a medios de multiplicacin y bajo dos condiciones fsicas: a) en constante agitacin y b) en recipiente de inmersin temporal automatizada. Este equipo se regula para sumergir los brotes en el medio lquido por el periodo de tiempo necesario para luego evaluar el nmero de brotes y la longitud de vstagos formados por cada una de las variedades estudiadas, en los diferentes medios de crecimiento.

Vstagos de pia formados a partir de brotes cultivados en medios de multiplicacin durante ocho semanas. a: agitacin continua, b: inmersin temporal en recipiente de inmersin temporal automatizada

5 Fase de enraizamiento.

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Los vstagos obtenidos,

son

transferidos a medio slido sin reguladores de

crecimiento para la induccin de formacin de races. Todos los cultivos son incubados bajo luz blanca. Despus de las ocho semanas de crecimiento en medios slidos se evala el nmero y longitud de las races formadas.

Figura 2. Brotes obtenidos por la supresin de latencia en los explantes. a: brote colocado sobre un puente de papel de filtro en contacto con medio lquido dentro de un tubo de ensayo, b: vstago con races cultivado en medio slido, c: vstago en medio slido,

RESULTADOS 1) Fase de iniciacin

En la etapa de iniciacin del cultivo se observ una alta contaminacin de los explantes por hongos y bacterias. A las cuatro semanas de cultivo se observ el brote de una yema axilar. Despus de permanecer cuatro semanas adicionales en sus respectivos medios, hubo alargamiento de las hojas y alargamiento del vstago y formacin de races.

2) Fase de multiplicacin
El brote obtenido en la fase de iniciacin es transferido a un medio slido a fin de obtener la multiplicacin clonal de las pias, observndose que algunos medios slidos permiten una multiplicacin ms eficaz que otros medios.

3) Fase de enraizamiento
Los Vstagos obtenidos por multiplicacin, fueron recultivados en medio slido sin reguladores de crecimiento. Entre las 8-10 semanas de crecimiento las plantas in vitro adquieren ms vigor debido al desarrollo de races.

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Vitro-plantas de pias amazonenses en fase de enraizamiento.

RESULTADOS
Los resultados sugieren que las concentraciones endgenas de ciertos elementos proteicos son diferentes en cada variedad de pia y en consecuencia no se observa un patrn comn en relacin a las proporciones de esos elementos (auxinas y citocininas) requeridas para la induccin de formacin de brotes en los explantes en las diferentes variedades de pia. Se estableci que para la multiplicacin de los brotes se requiere la presencia de auxinas y citocininas en proporciones equivalentes. El sistema de inmersin temporal es altamente recomendable para incrementar la tasa de multiplicacin de los brotes. Los vstagos resultantes del proceso de multiplicacin son independientes de la presencia de auxina en el medio para la formacin de races in vitro.

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