BASES BIOFSICAS DE LOS PROCESOS DE COMUNICACIN CELULAR

POTENCIAL DE REPOSO DE LA MEMBRANA CELULAR- POTENCIAL DE ACCIN

Prof. Dra. Mara Isabel Spengler. Ctedra Fsica Biolgica.

Para poder acceder a la lectura de este material se deben poseer conocimientos adquiridos en la escuela sobre:
campo elctrico, potencial elctrico, corriente elctrica, intensidad de corriente, resistencia elctrica, energa
elctrica, condensador.
Es importante, adems, que el alumno recupere los conceptos, ya vistos, sobre estructura y funcin de la
membrana celular.

os tejidos animales estn constituidos por clulas rodeadas por una solucin que las baa: el fluido
intersticial.
Las clulas vivientes tienen la habilidad de mantener muchas sustancias en concentraciones
interiores diferentes de las concentraciones exteriores. Esto es algo inesperado para aquellas molculas
que pueden atravesar la membrana celular porque parece oponerse a la natural tendencia de las
molculas a igualar sus concentraciones a ambos lados de la membrana.
L
La membrana celular es la parte de la clula que presenta mecanismos de transporte peculiares
de los sistemas vivientes y que mantiene diferencias en la concentracin de muchas sustancias a su
travs. As, en la mayora de las clulas, el K
+
est ms concentrado en el interior celular y el Na
+
y el
Cl
-
en el exterior.
La mayora de las clulas animales tienen una diferencia de potencial elctrico (voltaje) a travs de sus
membranas plasmticas. El citoplasma es, por lo general, elctricamente negativo en relacin con el
lquido extracelular. La diferencia de potencial elctrico a travs de la membrana plasmtica en una
clula se denomina potencial de reposo de la membrana. El potencial de reposo de la membrana
desempea un papel fundamental en la excitabilidad de las clulas nerviosas y musculares y en otras
respuestas celulares determinadas.
En esta bibliografa vamos a estudiar cmo se genera y cmo se mantiene el potencial de reposo de la
membrana y, en la ltima parte introduciremos el tema del potencial de accin.

Flujo
Definimos Flujo (J) como el nmero de moles que atraviesan la membrana, por unidad de superficie
perpendicular al flujo y por unidad de tiempo. Unidades:
J =moles
cm
2
seg


Difusin.Ley de Fick
En una solucin las molculas estn sometidas a continuos movimientos de translacin. Si las
propiedades de la disolucin son iguales en todo su volumen, la translacin de cada molcula en cada
direccin del espacio ser igualmente probable. En consecuencia, el desplazamiento neto de las
molculas ser nulo. Si hay diferencias de concentracin, las molculas tendrn una tendencia a
desplazarse desde la zona de mayor concentracin hacia las de menor concentracin.
Consideremos ahora dos disoluciones de concentracin diferentes separadas por una membrana con un
dado espesor y permeabilidad selectiva. Cada una de ellas es homognea, pero la membrana interpuesta
estar atravesada por una diferencia de concentracin. Las molculas de soluto que penetren en la
membrana, en su movimiento al azar, resultarn dirigidas por esa diferencia y atravesarn la membrana
en el sentido de anular la diferencia. Este fenmeno, en virtud del cual las molculas disueltas
atraviesan la membrana, se denomina difusin simple, mecanismo pasivo, es decir, sin gasto de energa
1
La ley de Fick aplicada a la difusin de una sustancia en solucin a travs de la membrana dice
que: la cantidad de sustancia que atraviesa un cm
2
de rea seccional por segundo (el flujo), es
directamente proporcional al gradiente de concentracin de la sustancia.
La ley de Fick se puede enunciar como:

J =P. C
P =coeficiente de permeabilidad (cm /seg)

C =C
2
- C
1
diferencia de concentracin entre los
medios que separa la membrana (mol /lt ; m.moles / cm
3
)


2
J =P. C J
Graficando J en funcin de la diferencia P
3

de concentracin tenemos: P
2
J es la variable dependiente. P
1
C la variable independiente
y P la pendiente, P
3
>P
2
>P
1
C

P: facilidad de un soluto especfico para atravesar una dada membrana; P
1
, P
2
, P
3
corresponde a 3
membranas con distinta Permeabilidad para un dado soluto o a 3 solutos diferentes para una misma
membrana.
El grfico demuestra que la velocidad del flujo de un soluto crece proporcionalmente con la
diferencia de concentracin entre los medios que separa la membrana.
La ley de Fick me permite calcular el flujo para el caso de sustancias sin carga elctrica.


Rol del transporte de sustancias a travs de la membrana
El rol del transporte a travs de la membrana celular es mantener una apropiada composicin
intracelular necesaria para el ptimo funcionamiento de los sistemas enzimticos de las clulas.
Por ejemplo en el caso de una sustancia como la glucosa, si sta est ms concentrada dentro de
la clula que en el intersticio que rodea a dicha clula, la sustancia tender a salir de la clula hasta que
las concentraciones se igualen a ambos lados de la membrana, como analizamos anteriormente. En este
caso la fuerza que mueve a la sustancia sin carga elctrica es la diferencia de concentracin.
Pero, como dijimos arriba, existe una diferencia de potencial elctrico a travs de la membrana
plasmtica denominado potencial de reposo de la membrana, por lo tanto, la fuerza que mueve a los
iones a travs de la membrana, no slo es la diferencia de concentracin, sino tambin la diferencia de
potencial elctrico a travs de la membrana. Por ejemplo analicemos el Cloruro (Cl
-
)

en las clulas del
msculo esqueltico: El Cl
-
est ms concentrado en el extracelular, por lo cual tiene tendencia a
ingresar a la clula por diferencia de concentracin, pero al ser un in negativo tiene tendencia a salir
por diferencia de potencial elctrico (interior celular negativo). Como en este caso las 2 fuerzas,
diferencia de concentracin (C) y diferencia de potencial elctrico (V), tienen igual magnitud y
sentido opuesto, resulta que (Fig. 1), para mantener las concentraciones de Cl
-
en las clulas del
msculo esqueltico no se necesita energa metablica, por lo que dicho in est en equilibrio, es
decir no tiene tendencia a modificar su situacin.












C
V


Figura 1


Estado de equilibrio y estado estacionario


Cuando el flujo neto de una sustancia es cero, pueden darse dos situaciones:

a)Estado de equilibrio: El flujo neto es cero y es mantenido en forma pasiva es decir sin
aporte de energa metablica. Ejemplo del Cl
-
analizado anteriormente.
b)Estado estacionario: El flujo neto es cero y es mantenido en forma activa es decir con
aporte de energa metablica.
El ejemplo de estado estacionario lo veremos a continuacin con el ejemplo del sodio
Transporte de sodio (Na
+
)
-
en las clulas del msculo esqueltico. El Na
+
est ms concentrado en el
extracelular, por lo cual tiene tendencia a ingresar a la clula por diferencia de concentracin, pero al ser
un in positivo, tambin tiene tendencia a ingresar por diferencia de potencial elctrico (interior celular
negativo). Como en este caso las 2 fuerzas tienen igual sentido, resulta que el flujo es al interior celular.
Es decir que para poder mantener las concentraciones de Na
+
, se necesita un mecanismo que lo
mueva hacia el exterior celular con la misma intensidad con que ingresa, el cual se realiza con la
energa aportada por el metabolismo celular y se llama bomba sodio-potasio-ATPasa. En este caso
decimos que el sodio se encuentra en estado estacionario. (Fig. 2)



Figura 2
Hay un flujo pasivo producido por la diferencia de concentracin y/o la diferencia de potencial
elctrico en un sentido, que es balanceado por un flujo activo (con consumo energtico) en el sentido
opuesto. De este modo el flujo neto es nulo pero para mantenerlo hay gasto de energa metablica.



3
4
Para el potasio (K
+
)

en las clulas del msculo esqueltico. El K
+
est ms concentrado en el
intracelular, por lo cual tiene tendencia a salir de la clula por diferencia de concentracin, pero al ser
un in positivo tiene tendencia a ingresar a la clula por diferencia de potencial elctrico (interior
celular negativo). En este caso las 2 fuerzas tienen distinto sentido y distinta magnitud (mayor la fuerza
de concentracin), de ello resulta que el flujo es al exterior celular.
El K
+
est en estado de equilibrio o en estado estacionario? J ustifique.

POTENCIAL DE EQUILIBRIO
En el estado de equilibrio la fuerza que tiende a provocar el flujo de un mol de iones por
diferencia de concentracin debe ser igual a la fuerza que tiende a moverlo en sentido contrario por
diferencia de potencial elctrico. Ambas fuerzas se compensan exactamente.

Cmo podemos calcular cul es la diferencia de potencial elctrico que contrarresta la
diferencia de concentracin en el equilibrio?
La ecuacin de Nerst permite calcular la diferencia de potencial que produce un flujo de
sustancia igual al que produce la diferencia de concentracin. Esa diferencia de potencial se denomina:
potencial de equilibrio para un determinado in.

V
eq
= R . T ln C
e

Z . F C
i


Por lo tanto, el potencial de equilibrio es el potencial que debe tener la membrana para
compensar una diferencia de concentracin en sentido contrario.

Significado de cada sigla:
V
eq
: diferencia de potencial trasmembrana que equilibra la diferencia de concentracin (del
compartimiento interior con respecto al exterior) es decir el potencial de equilibrio. Sus unidades son
voltios o milivoltios.
C
i
: concentracin de la sustancia en el compartimiento interior.
C
e
: concentracin de la sustancia en el compartimiento exterior.
R: constante general de los gases =8,3 joules/mol K.
T: temperatura absoluta (K).
ln: logaritmo neperiano.
Z: nmero de cargas por in con su signo.
F: Constante de Faraday =96.500 culombios/mol: carga transportada por un mol de iones
monovalentes.


Por lo tanto, el potencial de equilibrio es el potencial que debe tener la membrana para
compensar una diferencia de concentracin en sentido contrario, es decir es el potencial elctrico que
produce una tendencia al flujo de iones que contrarresta exactamente la tendencia al flujo originado por
diferencia de concentracin.

Si el potencial de membrana medido es igual al potencial de equilibrio calculado significa que
ese in est en condicin de equilibrio, es decir que mantiene constante su concentracin intracelular
sin necesidad de aporte energtico. El flujo del in ser igual a cero ya que la tendencia originada por la
diferencia de concentracin es igual y de sentido contrario a la tendencia originada por la diferencia de
potencial.

Otra forma de determinar si un in est en estado de equilibrio o estacionario:

Si el potencial de transmembrana medido es distinto del potencial equilibrio calculado y las
concentraciones a ambos lados de la membrana no se modifican en el tiempo, significa que dicho in
est en estado estacionario.
El potencial de equilibrio de Na
+
es de 66 mV (con el interior celular positivo) en el msculo
esqueltico. Dicho potencial para el K
+
vale 96 mV y para Cl
-
vale 90 mV.
Teniendo en cuenta una clula cuyo Vm (diferencia de potencial elctrico a travs de la
membrana) es de -90mV:
Vamos a analizar, para el caso del Na
+
:
V eq. Na Vm
66 mV - 90 mV
El resultado implica que el in Na
+
distribuido a travs de la membrana de la clula del msculo
esqueltico est en estado estacionario y que necesita de energa metablica para mantener sus
concentraciones.
Realice el anlisis para el K
+
y el Cl
-
.



GENERACIN DEL POTENCIAL DE MEMBRANA
Todas las clulas presentan una diferencia de potencial elctrico a travs de la membrana.
5

Figura 3
Cmo se genera y mantiene la diferencia de potencial transmembrana?
flujo de iones a travs de
mem
otencial de difusin
Es importante recalcar que no todo el citoplasma es negativo ni todo el intersticio positivo, sino
que ambos son electroneutros y que las cargas se disponen sobre la membrana polarizndola.


El principal responsable de la generacin del potencial de reposo es el
la brana con diferente facilidad a favor de sus gradientes de concentracin. Para entender esto
analizaremos a que se llamaPotencial de difusin

P

6
Se tienen dos soluciones de distinta concentraciones separados por una membrana de permeabilidad
electiv



Si la membrana es permeable a los cationes pero no a los aniones, se mueve Na
+
de A a B por
diferen
cesar cuando se igualen las fuerzas elctricas y de concentracin, es decir cuando la

s a (que es aquella membrana que deja pasar algunas sustancias y retiene otras) (Fig 4a)





Figura 4a Figura 4b
cia de concentracin, el Cl
-
no puede fluir porque la membrana es impermeable a aniones, el
Na
+
que pas queda sobre la membrana atrado por la carga neta negativa del Cl
-
que no puede
seguirlo; entonces el transporte de Na
+
deja una carga neta positiva en el lado B y una carga neta
negativa en el lado A, es decir que A es elctricamente negativo con respecto a B. A medida que se
carga la membrana, el Vm va frenando el movimiento de Na
+
producido por la diferencia de
concentracin (Fig 4b)
Este flujo de Na
+
diferencia de potencial elctrico sea igual al potencial de equilibrio para el Na
+
.
iente inico de Na El grad equilibrio no
plica
l Cl, se
stable
Qu ocurre en las membranas biolgicas? .Ecuacin de Goldman
e trata de forzar el potencial de
portes de los iones presentes. La expresin que
Vm

= R . T
+
ha creado una diferencia de potencial elctrico. El
im anulacin de la diferencia de concentracin, sino que ambas fuerzas estn balanceadas.
Con un razonamiento similar se puede deducir que si la membrana es slo permeable a
e cer un Vm igual al Veq del Cl
-
, con el lado B negativo respecto de A.

En las membranas biolgicas hay ms de un in permeante, cada especi

membrana hacia su particular potencial de equilibrio.
El potencial de membrana resulta de la suma de los a
relaciona el Potencial de membrana con las concentraciones inicas y sus permeabilidades, y se la
utiliza para determinar dicha diferencia de potencial de membrana es la Ecuacin de Goldman

ln P
K
[K
+
]
1
+ P
Na+
[Na
+
]
1
+ P
Cl
[CL
-
]
2


a ecuacin de Goldman se desarroll considerando a los ines en estado estacionario y al potencial de
plicarse con todo rigor al clculo del potencial de membrana en
entan las permeabilidades de los
adoptada para cationes y aniones.
F P [K
K+
+
] + P [Na
2 NA+
+
] + P [Cl
2 Cl
-
]
1

L
la membrana constante en el tiempo. Es una funcin de todas las especies inicas monovalentes y
difusibles presentes en el sistema.
Esta ecuacin nicamente puede a
rgimen estacionario y en ausencia de procesos activos electrgenos.
El subndice 2 representa al compartimento interior, y el 1 al exterior.
V, R, T y F tienen su significacin habitual, P
k
, P
Na
, P
Cl
repres
iones K
+
, Na
+
, Cl
-
, respectivamente y los ndices 1 y 2 se refieren a los dos compartimientos. Si existen
otros iones monovalentes en solucin deben figurar tambin en la ecuacin segn la disposicin
7
e la diferencia de potencial: cuanto mayores son las concentraciones
gas positivas salen ms rpido
iene el bombeo activo?
erencias de concentracin necesarias a travs de la
cos) para que tengan lugar los flujos pasivos y como
jimos
El examen de la ecuacin permite tambin comprender que no todos los iones tienen la misma
importancia en la determinacin d
y la permeabilidad de una especie inica, mayor es la influencia que la distribucin de esta especie
ejerce sobre el valor del potencial de membrana. Es decir canto ms permeable sea un in, ms se
parecer el potencial de membrana al potencial de equilibrio de ese in.
Experimentalmente se ha demostrado que en condiciones de reposo la permeabilidad al K
+
es varias
veces mayor que la permeabilidad al Na
+
, por lo arriba sealado, las car
de lo que entran y as el interior celular se vuelve ms negativo. Entonces, el flujo pasivo de los iones y
su diferente permeabilidad son los principales determinantes de la diferencia de potencial de
transmembrana, pero tambin es necesario el bombeo activo.

Potencial por bombeo
De qu manera interv
El bombeo activo crea y mantiene las dif
membrana (denominadas tambin, gradientes ini
di antes: el flujo pasivo de los iones y la diferente permeabilidad a cada uno de ellos son los
principales determinantes de la diferencia de potencial de transmembrana

La fuente de energa de la bomba de Na
+
y K
+
En las clulas la fuente de energa es la
(LIBERA ENERGA), se hidroliza en difosfato
hidrlisis del ATP que, en una reaccin exergnica
de adenosina (ADP) y ortofosfato inorgnico (Pi).
La bomba Na - K a protena integral de la
membrana que sufre camb metablica y mueve iones
antiene los gradientes inicos
ATP
i
+H
2
O ADP +Pi +energa
+ +
- ATPasa de la membrana plasmtica es un
ios conformacionales gracias al aporte de energa
a su travs. Mayores detalles del mecanismo se vern en la prxima rea.
La bomba Na
+
- K
+
- ATPasa de la membrana plasmtica es la responsable de la concentracin
intracelular elevada de K
+
y baja de Na
+
, es decir que el bombeo crea y m
necesarios para que pueda tener lugar la difusin pasiva de los iones.

La bomba es electrognica, cuando produce un desplazamiento neto de cargas a travs de la
embrana; en muchos casos transporta un nmero mayor de iones Na
+
que K
+
, y contribuye al m
potencial de reposo de la membrana. La cuanta de la contribucin electrgena de la bomba al potencial
de reposo vara en las distintas clulas.
En algunas clulas, la bomba electrgena de sodio es responsable de una importante fraccin
del potencial de reposo; sin embargo, en las clulas nerviosas y fibras musculares esquelticas de los
vertebrados, la contribucin directa de esta bomba al potencial de reposo es pequea, inferior a 5 mV.
En este tipo de clulas, el potencial de reposo se debe principalmente a la difusin de los iones a favor
de sus gradientes de potencial electroqumico. Los gradientes inicos se mantienen mediante bombeo
activo. El Cl
-
, si bien es el ms permeable, por carecer de un bombeo activo que determine un
gradiente de concentracin a travs de la membrana, no es determinante del potencial de la membrana
y sus concentraciones a ambos lados de la membrana estn determinados por el potencial de membrana
que establecen los cationes sodio y potasio(en las clulas exitables).




8
Medio
extracelular ATP
3 Na
+
DP +P
Cambios en el potencial de membrana
ba Na-K-ATPasa saca 3Na
+
y entra 2 K
+
, es decir, saca
s positivas, por lo tanto saca una carga positiva ms de la que

clula 2 K
+



A i

Figura 5

Como observamos en la figura 5, la bom
3 cargas positivas mientras entra 2 carga
entra, por ello, si se incrementa el bombeo activo, el interior de la membrana se hace ms negativo
(hiperpolariza) y, a la inversa, si disminuye el bombeo activo, el interior de la membrana se hace menos
negativo (despolariza).
Si se modifica la permeabilidad pasiva o conductancia de la membrana a Na
+
y a K
+
tambin se
modifica el Vm del est
+
ado estacionario. As, si aumenta la permeabilidad a K , el K sale pasivamente,
fav
inuye la permeabilidad o
rpido cambio en el potencial de membrana, seguido de un retorno
original. El tamao y la forma difieren de un tejido excitable a otro (Fig. 6).
ntal de las clulas excitables: la
capacidad de transportar seales.
pulso propagado. La reduccin del potencial
se orece la prdida de ste, salen cargas positivas y la clula se vuelve ms negativa, se
hiperpolariza. Viceversa, si disminuye la permeabilidad a K
+
, se despolariza.
Si aumenta la permeabilidad o conductancia a Na
+
, se favorece la entrada de Na
+
, entran ms
cargas positivas y la clula pierde polaridad, la clula se despolariza. Si dism
conductancia a Na
+
ocurre lo inverso.

Potencial de accin
Un potencial de accin es un
al potencial de reposo


Figura 6
Un potencial de accin es la base de la propiedad fundame
Un potencial de accin se propaga sin decremento (tiene igual valor y duracin) a lo largo de
toda la fibra muscular o nerviosa y es tan veloz que logra, por ejemplo, que todas las partes de una
clula muscular larga se contraiga casi simultneamente.
Un nervio responde a la estimulacin elctrica si el estmulo tiene suficiente intensidad y
duracin como para reducir el potencial de membrana desde su valor de reposo a un voltaje crtico que,
cuando se logra, da como resultado el desarrollo de un im
9
mem
e accin. El potencial de accin, produce la inversin de la polaridad del potencial de
embr
de brana se denomina, como ya dijimos, despolarizacin y el voltaje crtico requerido se denomina
umbral.
Cuando la despolarizacin es suficientemente grande como para que el potencial de membrana
alcance el valor umbral (aproximadamente -60 mV para el caso del msculo de rana) se produce un
potencial d
m ana (el interior se hace positivo con respecto al exterior), y se propaga sin decremento a lo largo
de la fibra muscular. Cuando se aplica sobre la clula un estmulo mayor que el estmulo umbral, el
tamao y la forma del potencial de accin no cambian, el potencial de accin no vara al incrementarse
la fuerza del estmulo.
Por eso se dice que es un fenmeno de todo o nada porque si no se alcanza el valor umbral
(respuestas subumbrales en Fig. 7) no se produce un potencial de accin y si lo alcanza produce un
potencial de accin que no depende de la intensidad del estmulo.

Cuando la me
brusca y repentina de la membrana que incl
membrana se polariza en el sentido inverso (interior positivo), sta es la fase de despolarizacin. Luego
el pote
La forma de potencial de accin:

Figura 7

mbrana se despolariza alcanzando el valor umbral, se verifica una despolarizacin
pasa el valor de cero mV, de modo que la uso sobre
ncial de la membrana vuelve a los valores de reposo (fase de repolarizacin) casi tan rpido
como cuando la membrana se despolariz, y se observa una hipepolarizacin transitoria llamada
Potencial hiperpolarizante.

Mecanismo inico

Figura 8
elular hay un cambio transitorio de la perm
ios transitorios en el potencial de m
Durante la excitacin c eabilidad a Na
+
y K
+
que
determina camb mbrana. El estmulo umbral produce la apertura de
los canales de Na
+
, permitiendo su entrada a mucho ms rpidamente que en el estado de
reposo. Se encontr que la conductancia al Na
+
aumentaba muy rpidamente durante la fase ascendente
e
la clula
10
del pot
anza dicho valor a causa del aumento de la
ego, lentamente retorna a los valores de reposo.
n la tendencia para que
V
larizacin la
e reposo
encial de accin es muy pequeo ( 10
-12

IBLIOGRAFA
HILIPPE MEYER. Fisiologa.
ERNE LEVY. Fisiologa.
sporte a travs de membranas celulares.
encial de accin (fase de despolarizacin) y alcanza su pico casi al mismo tiempo que lo hace el
potencial de accin y luego diminuye muy rpidamente.
Como consecuencia del aumento de la conductancia al Na
+
, el interior celular se hace positivo y
tiende a mover los iones Na
+
en sentido opuesto al gradiente de concentracin; si ambos gradientes se
igualan, se equilibran sus fuerzas y el flujo cesa, el potencial de membrana sera igual al potencial de
equilibrio para el Na
+
. El potencial de accin nunca alc
conductancia al K
+
.
Un aumento de la conductancia al K
+
deja escapar el in ms rpidamente y el interior celular
se vuelve negativo, es decir comienza la fase de repolarizacin. El aumento de la conductancia al K
+

comienza ms tarde que el de sodio, ocurre de manera ms lenta, alcanza su pico en la mitad de la fase
de repolarizacin y lu
El potencial de membrana es el resultado de las tendencias opuestas de: el gradiente de K
+
para que
el potencial de membrana est en el valor potencial de equilibrio para el K
+
, y las tendencias del gradiente
de Na
+
para llevar el potencial de membrana hacia el valor del potencial de equilibrio del Na
+
.
Al aumentar la conductancia para un dado in, se incrementar

membrana
se acerque al potencial de equilibrio de ese in.
El retorno del V
membrana
a los valores de reposo se debe a la rpida disminucin de la
conductancia al sodio y al aumento en la conductancia al K . Durante la fase de repo
+
conductancia al K
+
permanece elevada y el V
membrana
se hace ms negativo que el potencial d
acercndose al potencial de equilibrio para el K
+
(figura 8).
Se ha demostrado que la entrada de sodio a la clula desempea un papel preponderante para
generar el potencial de accin.
La bomba Na
+
- K
+
bombea el sodio que entra y vuelve acumular el K
+
que se perdi. Como el
N de iones que atraviesa la membrana durante cada pot
moles de iones/cm
2
) las concentraciones macroscpicas de estos iones no se modifican.




B
P
B
GARRAHAN. Tran