Resultados y discusin Los espectros de absorcin UV-vis de tequila se caracterizan por una amplia banda de absorcin en la regin cerca

de UV, con una seal muy fuerte a alrededor de 2 ! nm, y casi nula absorcin de "## nm$ %ig$ La figura & muestra los espectros medidos, de &# muestras de tequila$ La mitad de ellos son de tequilas &##' agave, y la otra mitad de tequilas mi(tos$ )n aras de la claridad que slo se incluye una reduccin del n*mero de espectros en la figura, pero a partir de ellos podemos reconocen claramente la banda de absorcin anc+a ,+ic+,as com*n a todas las muestras de tequila$ )sta banda revela la presencia de restos de compuestos org-nicos vol-tiles y se origin en la cocina proceso de agave y de la fermentacin de su .ugo /",01$ Vale la pena sealar que el espectro de otras bebidas alco+licas, tales como el brandy, coac, ron y ,+is2y, tambi3n muestran una similar banda de absorcin /&!1$ 4or otra parte, los componentes m-s importantes 5en volumen6 de tequilas, el agua y el etanol, tienen casi nula absorcin en el rango de longitudes de onda que se utiliz en nuestras mediciones$ 7omo consecuencia, la relacin agua 8 etanol en las muestras no se refle.a en estas mediciones$ 9unque la forma de todos los espectros para el con.unto de 0# tequilas 4arece bastante simple, +ay algunas caracter:sticas claramente distintivas en que$ 4or e.emplo, encontramos que todos los tequilas que +emos analizado, incluso los que pertenecen a la misma marca, mostraron valores diferentes de la absorbancia en su pico caracter:stico$ )n la densidad ptica 5;<6, estas absorbancias pas de un m:nimo de #,2&, con una m-(ima de 2,==, como se muestra en la >abla &$ 9dem-s, no todos los espectros tuvieron su pico de absorcin en la misma longitud de onda$ ?u posicin vari 2 ",= a 2!&,= nm$ 4or *ltimo, algunos espectros mostraron m-s fuertes +ombros alrededor de @=# nm, y, como veremos cada curva espectral ten:a un comportamiento distinto en torno a uno de sus puntos de infle(in$ )stas caracter:sticas 5ubicacin de pico, la infle(in punto y +ombro6 son marcados con flec+as en la figura$ &$ )l +ec+o de que en los tequilas de la misma categor:a 5&##' de agave omi(tos6 +ab:a picos de absorcin de distinto tamao no nos sorprendi, ya que las muestras de tequila, vino de diferentes destiler:as, y cada destiler:a produce el esp:ritu en condiciones diferentes$ 4or e.emplo, el contenido y la concentracin de compuestos org-nicos, detectable en el espectro de absorcin de tequilas, puede variar de acuerdo a la maduracin de las plantas de agave en la etapa de cosec+a, y al procedimiento de coccin posterior$ La fermentacin y procesos de destilacin tambi3n pueden variar de una destiler:a a otra, e incluso en la destiler:a misma si el control de buena calidad que falta en la planta$ Ao es raro, por lo tanto, para encontrar diferencias en los espectros de absorcin de tequilas de la misma marca, pero que pertenece a los lotes de produccin diferentes$ Ref$ /2@1 informa de los resultados de una investigacin sobre ,+is2ies con la espectroscopia de absorcin$ ?e concluye que espec:fica ?cotc+ marca de ,+is2y, +ab:a rangos de absorcin consistente, de modo que, por la definicin de un rango de absorbancia preestablecidos, es posible identificar adulteraciones o falsificaciones del producto original$ )n otras palabras, cualquier muestra que se prob fue considerada como un la falsificacin de potencial si mostraron valores de absorbancia que se fuera de un rango de absorbancia preestablecidos$ )n nuestra propia investigacin, tambi3n encontramos que cada marca de tequila tiende a tener su propio rango de absorbancia caracter:stico$ 7omo +emos mencionado anteriormente, dos c-lculos multivariados, la 974y 4L?-;9, se llevaron a cabo para diferenciar una muestra de tequila del resto, y entre el &##' de agave y tequila mi(to$ ?e encontr que utilizando espectros derivados y la aplicacin de 479 a los resultados, una forma muc+o me.or de diferenciar entre diferentes marcas de tequila se logr$ 4ara ello, tomamos la primera, derivados de un espectro de absorcin de tequila 5%ig$ &6 y, a continuacin, normalizado el resultado con el valor absoluto de la m-(ima salida de la curva de derivados en el e.e +orizontal, que ocurri en el punto de infle(in entre el m-(imo y el el +ombro de la curva espectral 5%ig$ &6$ %ig$ La figura 2 muestra los espectros normalizados derivados de la absorcin espectros de la figura$ &$ Ban sido trazados en la gama entre 2!# y @&# nm, donde todos los puntos de infle(in se muestran en la figura$ & lie$Ce claramente se nota el desplazamiento de la m:nima de los espectros derivados a lo largo del e.e +orizontal, con los espectros de las muestras de tequila

&##' agave en el lado izquierdo de la parcela, y los espectros de las muestras de los tequilas mi(tos en el derec+o, aunque esto no siempre ser:a el caso si los espectros de las 0# muestras de tequila se +ab:an trazado$ >endencias especiales para las &# muestras son, evidentemente, m-s marcada en el lado derec+o de cada espectro$ ?in embargo, las caracter:sticas distintivas que est-n presentes en los espectros derivados de las 0# muestras de tequila me.or revelado con la ayuda de la 974$ Los resultados que +emos obtenido por medio de la 974 mostr que los cinco primeros componentes principales, 47&-47=, representaron el !D, ', $0"', 2$@!', #$& "' y #,#22', respectivamente, de la variacin total de los 0& principales componentes, 5que es igual al n*mero de valores de densidad ptica entre 2!# y @&# nm, con un intervalo de #$= nm entre las longitudes de onda de dos mediciones consecutivas6$ Las primeras dos de ellos podr:an por lo tanto bastante bien representan las esenciales caracter:sticas de los espectros derivados$ %ig$ La figura @ muestra el diagrama de dispersin de 47& y 472$ )n esta trama los tequilas &##' agave y mi(tos identificados con los n*meros en negrita y subrayado, respectivamente, y los cinco grupos de muestras correspondientes a las marcas de tequila E&-E= 5>abla &6 est-n inscritos en c:rculos, cuadrados y tri-ngulos con tres orientaciones diferentes$ ?e puede observar que casi todas las muestras de una ca:da marcan en particular dentro de una elipse de confianza /2"1$ Las coordenadas del centro de la elipse son los valores medios de 47& y 472 para el grupo de muestras que pertenecen a esa marca$ La elipse se incluye el rango de valores de 47& y 472 que una muestra de la misma marca que tiene con una probabilidad del !=', suponiendo una distribucin normal bivariada$ 9 pesar de que estas elipses se construyeron con muestras de muy pocas muestras, nos dan una idea apro(imada de la variabilidad en la composicin qu:mica de cada marca$ 4or lo tanto, de la figura$ @, es evidente que las marcas de tequilas 4resentan variabilidad E&-E@ inferiores a las marcas de la E" y E=$ 4odemos corroborar este de las parcelas en la figura$ ", donde se muestra los espectros derivados de las muestras pertenecientes a las marcas E&, E@ y E"$ )n aras de la claridad, slo tres marcas se incluyeron en esta cifra$ Los tequilas agrupados en la marca E" definitivamente muestran grandes diferencias en el espectro de los derivados agrupados en las marcas E& y E@$ Una vez m-s, estos gr-ficos muestran que algunas destiler:as logran una me.or reproducibilidad de las distintivas caracter:sticas de sus tequilas 5es decir, de la concentracin de las diferentes mol3culas org-nicas6 que otros$ 9 partir de estos resultados est- claro que si contamos con un con.unto de entrenamiento 5base de datos6, con el gr-fico de dispersin de la figura$ @ se puede predecir si una muestra de tequila pertenece a una determinada marca de tequila en la formacin profesional$ Vale la pena agregar que en el mercado me(icano de las marcas E&-E" son consideradas como marcas de buena calidad, debido al sabor de sus tequilas, el prestigio de sus productores, y sus precio 5el m-s alto de todas las marcas analizadas6$ ?in embargo, de acuerdo a nuestros resultados 5%ig$ @6, slo las marcas de tequilas E&-E@ mostr una pequea dispersin en el principio de 47& y 472 componentes, lo que indica que sus correspondientes normalizadas curvas eran bastante similares, mientras que el tequila de la E" marca tuvo una gran dispersin en los mismos componentes, y por lo tanto, casi con toda seguridad un pobre control de calidad en su proceso produccin$en cambio, >equilas de la E= marca, que son percibidos como tequilas de calidad regular, mostraron, como era de esperar, dispersiones grandes en los dos componentes principales$ ?obre la base de estos resultados, sostienen que la radiacin UV-vis la espectroscopia de absorcin, combinado con el an-lisis de 479, se puede utilizar en una destiler:a de tequila para me.orar su control de calidad$ 4ara lograr esto, el proceso de produccion debe ser a.ustado de modo que la medida de la confiada elipse 5fig$ @6 se reduce a un m:nimo$ ;e esta forma, el productor se conf:a en que el producto final de la planta sea de calidad similar$ )l proceso de seguimiento se puede +acer en tiempo real 5ya que no es necesario que la muestra este preparada para una prueba6, y en varias etapas del proceso de produccin 5debido a los relativamente precios m-s ba.os y la portabilidad de los aparatos que son necesarios6$

7on el fin de discriminar tequilas por categor:as 5&##' de agave o mi(to6, que en lugar de 4L?-;9$ )sta vez, sin embargo, el espectros derivados no se normalizaron, y la longitud de onda rango fue de entre 2=# y =## nm$ ;ado que los derivados no se normalizaron, este an-lisis refle.a las diferencias en el pico valor de los espectros de absorcin$ 7on estas disposiciones se fueron capaz de predecir la categor:a de cada uno de tequila$ 4ara visualizar el resultado, se calcul una l:nea de decisin a trav3s de la lineal de %is+er discriminante 5%L;6 m3todo /2=1, aplicado a los punta.es obtenidos a partir de 4L?-;9$ Los resultados se muestran en la figura$ =, donde, de nuevo, el &##' de agave tequila se representan con n*meros en negrita y tequilas mi(tos con n*meros subrayados$ La l:nea de la decisin est- representada por la l:nea de puntos$ >equilas encima de esta l:nea se clasifican como mi(ta, y los que m-s aba.o, &##' de agave$ 4L?-;9 identific correctamente el =' de los tequilas &##' agave, y el !#' de los tequilas mi(tos$ )n particular, la categor:a de los tequilas adquiridos en la destiler:a 5con los n*meros 2D y @# en la >abla &6 fue correctamente identificada$ Fencionamos esto porque )stos dos fueron los tequilas slo para los que sab:amos de su categor:a con certeza$ 4ara clasificar a los dem-s, nos basamos en la etiqueta de su botella, como ya +emos mencionado$ ;espu3s de estos resultados, nos confiamos de que en el espectro de absorcin de un tequila +ab:a suficiente informacin para discriminar entre las categorias &##' y mi(tas con 4L?-;9$

"$ 7onclusiones Los resultados presentados muestran que es posible discriminar entre las diferentes marcas de tequila por medio de la radiacin UV-VG? espectroscopia de absorcin y el an-lisis de componentes principales 54796$ 9dem-s, utilizando por lo menos parcial cuadrados discriminante an-lisis 54L?;96, tambi3n se demostr que es posible diferenciar entre el &##' de agave y tequila mi(to$ ;ado que ni preparacin de la muestra ni instrumentos sofisticados son necesarios, y adquisicin de datos y an-lisis son relativamente simples, una versin automatizada del m3todo descrito aqu: puede ser que se implementa en una destiler:a de tequila como un medio econmico de el seguimiento del proceso de produccin$ )ste m3todo tambi3n se puede implementar como una t3cnica r-pida y de deteccin port-til para la autenticacin de tequilas 5+oy en d:a, de mano, UVVG? baratos Los espectrmetros est-n ampliamente disponibles en el mercado6$ 9unque este m3todo es de una precisin limitada, y por lo tanto, debemos recordar que otros m3todos que proporcionan una mayor precisin y previsibilidad, como la cromatograf:a de gas, son caros, demandan una cantidad considerable de tiempo para la preparacin de la muestra, y una aplicacin port-til ser:a inviable$

RESULTADOS Y DISCUSION:

Los espectros de absorcin UV-vis de tequila se caracterizan por una amplia banda de absorcin en la regin cerca de UV, con una seal muy fuerte alrededor de 2 ! nm, y casi nula en "## nm$ )l +ec+o de que en los tequilas de la misma categor:a 5&##' de agave o mi(tos6 se encuentren en picos de absorcin de distinto tamao se debe a que las diferentes muestras de tequila provienen de diferentes destiler:as y cada destiler:a produce el licor en condiciones diferentes$

Los resultados que se obtuvieron por medio de la 974 5an-lisis de componentes principales6 mostr que los cinco primeros componentes principales, 47&-47=, representaron el !D, ', $0"', 2$@!', #$& "' y #,#22', respectivamente, de la variacin total de los 0& principales componentes, 5que es igual al n*mero de valores de densidad ptica entre 2!# y @&# nm, con un intervalo de #$= nm entre las longitudes de onda de dos mediciones consecutivas6$

)n el gr-fico de dispersin se puede observar que casi todas las muestras se marcan en particular dentro de una elipse de confianza$ Las coordenadas del centro de la elipse son los valores medios de 47& y 472 para el grupo de muestras que pertenecen a esa marca$

Los tequilas agrupados en la marca E" definitivamente muestran grandes diferencias en el espectro de los derivados agrupados en las marcas E& y E@$ Una vez m-s, estos gr-ficos muestran que algunas destiler:as logran una me.or reproducibilidad de las distintivas caracter:sticas de sus tequilas$ la radiacin UV-vis y la espectroscopia de absorcin, combinado con el an-lisis de 479, se puede utilizar en una destiler:a de tequila para me.orar su control de calidad$

Eibliograf:aH Caracterizacin de compuestos vlatiles de sotoles y tequilas(2010) Pruebas Colorimtricas para Asegurar la Calidad del equila! "etAs # "etrlogos Asociados(01$ 2011)