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Desarrollo El espectro de absorcin de la clorofila fue determinado a partir de hojas de espinaca, las cuales se trabajaron de la siguiente manera:

1. 50 gramos de hojas fueron finamente cortadas y maceradas en un mortero, hasta la obtencin de una pasta. 2. osteriormente se adicionaron 50 ml de acetona y la me!cla fue transferida a un tubo de propileno, el cual se cubri con papel aluminio para e"itar la e#posicin a la lu!, y por ende la descomposicin de la clorofila. $. %e agit la me!cla durante dos minutos, para e#traer la mayor parte de la clorofila. &. 'a me!cla fue centrifugada a 12() a $000 rpm *re"oluciones por minuto+ durante 15 minutos. 5. El sobrenadante fue transferido a otro tubo, el cual fue cubierto y sellado r,pidamente con papel aluminio, para proteger la muestra de la e#posicin a la lu! y e"itar la e"aporacin del disol"ente. -. 'a absorcin de la clorofilas a, fueron determinadas en un espectrofotmetro .ilton /oy %pectronic 20D. 0. El e#tracto fue colocado en $0 diferentes cubetas *tubos de "idrio especiales para el espectrofotmetro+, las cuales fueron cubiertas y selladas con papel aluminio. 1. 'as muestras fueron le2das en un rango de &00 a 000 nm, "ariando la longitud en 10 unidades, cambiando la cubeta en cada medida y utili!ando como blanco acetona. 3. Es importante mencionar 4ue cada "e! 4ue se "ariaba la longitud de onda, el aparato era calibrado a cero de absorbancia, utili!ando el blanco.

Tabla 1. Absorbancias de clorofila de espinaca a diferentes longitudes de onda

'ongitud de onda *nm+ &00 &10 &20 &$0 &&0 &50 &-0 &00 &10 &30 500 510 520 5&0 550 5-0 500 510 530 -00 -10 -20 -$0 -&0 -50 --0 -00 -10 -30 000

5bsorbancia 0.02 0.05 0.15 0.31 0.10.-5 0.0.55 0.$1 0.20 0.11 0.05 0.0& 0.0& 0.0& 0.05 0.00 0.03 0.11 0.11 0.12 0.1$ 0.15 0.10.22 0.$2 0.21 0.1$ 0.0& 0.01

6rafi4uen los datos, utili!ando E#cel o papel milim7trico.

'ongitud de onda de m,#ima absorbancia

85 4u7 longitud de onda corresponde9


'a longitud de onda de m,#ima absorbancia corresponde a un "alor de &$0 nm con una absorbancia de .31

8De acuerdo a la longitud de onda, 4ue color del espectro absorbe mejor9
5bsorbe mejor el color a!ul:"ioleta

;nterpreten 4u7 importancia tiene la obtencin de espectro de absorcin de la clorofila dentro de tu preparacin acad7mica.
'as t7cnicas espectrofotom7tricas :<isible han recibido gran aceptacin, de tal forma 4ue se utili!an de manera rutinaria en casi todos los laboratorios de an,lisis *=ern,nde! y 6on!,le!, 2002+. 5lgunas de sus "entajas son: >ienen un amplio campo de aplicacin: gran parte de los analitos son coloridos o son capaces de formar alg?n complejo colorido, el cual es cuantificable en la regin "isible. De igual manera, e#iste una gran cantidad de sustancias 4ue absorben en la regin. @uena e#actitud y precisin: en la reali!acin de estas metodolog2as ocurren errores relati"os del 1A al $A, por lo cual se puede considerar 4ue se tendr,n resultados anal2ticos con un m2nimo de incertidumbre si se procede en forma adecuada. En nuestra carrera no ayudara bastante para la identificacin y cuantificacin de sustancias, mediante las t7cnicas espectrofotom7tricas en la regin "isible y poder tener una informacin m,s confiable para tomar decisiones m,s acertadas con respecto a las muestras obtenidas en ciertos problemas.