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INTRODUCCIN

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La actividad de una enzima, es decir, la velocidad con que cataliza la transformacin del sustrato, es directamente proporcional a su concentracin. Por tanto, la actividad es una medida directa de la concentracin enzimtica. En muchas ocasiones en el laboratorio de Bioqumica se requiere determinar la cantidad de enzima presente y ello, salvo muy contadas excepciones algunas sernproteasas, por ejemplo- slo puede hacerse mediante medidas de actividad. Tal es el caso de muchas enzimas de gran inters prctico en la clnica humana, como es el caso de la fosfatasa alcalina, cuya concentracin en suero aumenta en las enfermedades hepatobiliares y seas, entre otras. El grado de destruccin o dao celular guarda relacin con la cantidad de enzima presente en suero. Ahora bien, debemos tener en cuenta que la actividad de un enzima es la velocidad con que cataliza la reaccin. Por eso, todas las mediciones enzimticas se han de hacer referidas al tiempo (o bien aparicin de producto en la unidad de tiempo o bien desaparicin de sustrato en la unidad de tiempo), pero ello implica una serie de precauciones: a) En ningn momento el sustrato debe llegar a hacerse limitante, es decir, llegar a una concentracin lo suficientemente baja como para limitar la velocidad de la reaccin (lo que ocurrira en la parte ascendente de la curva de Michaelis); por eso es necesario conocer con antelacin las caractersticas cinticas del enzima que vamos a medir, concretamente su Km, dado que los ensayos para determinar concentracin enzimtica han de hacerse a concentraciones muy superiores a la Km del sustrato. b) En la medida de lo posible se deben emplear sustratos con caractersticas qumicas fijas y definidas: por ello se emplean sustratos sintticos, como en el caso que nos ocupa, en el que se utiliza el 4-nitrofenil fosfato, a pesar de que dicho compuesto no aparece nunca como biomolcula. c) La reaccin tiene que estar perfectamente cronometrada y se debe comprobar si es lineal con respecto al tiempo, si no lo fuera, la medicin no sera vlida ms que a tiempo cero, lo que es difcil de apreciar experimentalmente. La fosfatasa alcalina es una fosfomonoesterasa que cataliza la hidrlisis de monosteres orgnicos de fosfato, teniendo un pH ptimo de actividad alrededor de 9 10 (de ah su nombre). La medicin de su actividad se lleva a cabo siguiendo la hidrlisis del 4-nitrofenil fosfato, que en presencia del enzima e iones magnesio se hidroliza liberando 4-nitrofenol, compuesto cuyas soluciones tienen un color amarillento (a diferencia del ster que tiene mucho menos color) La Fosfatasa Alcalina (FA) es una enzima que se encuentra en casi todos los tejidos del cuerpo, pero es mayor su presencia en el hgado, las vas biliares y los huesos.

La fosfatasa alcalina tiene un gran variedad de isoenzimas con leves diferencias en su estructura, que sugieren diferentes orgenes por cada tejido (FA1 del hgado, FA2 del hueso). Estas isoenzimas pueden ser cuantificadas por separado si es necesario. Una de las mayores fuentes de fosfatasa alcalina es el hueso por ello en los nios y adolescentes con crecimiento seo esta enzima est normalmente elevada.

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Valores normales de fosfatasa alcalina En adultos En nios menores de 2 aos En nios entre 2 y 8 aos En nios entre 9 y 15 aos En adolescentes entre 16 y 21 aos 40 a 140 U/L 85-235 U/L 65-120 U/L 60- 300 U/L 30- 200 U/L

Resultados anormales Los niveles aumentados de Fosfatasa Alcalina pueden indicar: Alcoholismo Anemia Cncer de huesos Cncer de prstata Colestasis (obstruccin de va biliar) Curacin de fracturas seas Enfermedades de los huesos Enfermedades del hgado Enfermedades renales Enfermedad de Paget Hepatitis Hiperparatiroidismo Leucemia Osteomalacia Prostatitis Los niveles disminuidos de Fosfatasa Alcalina pueden indicar: Malnutricin Deficiencia de protenas

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REALIDAD PROBLEMTICA La fosfatasa alcalina es una enzima ampliamente distribuida en el organismo. Hidrolizado los monosteres del cido ortofosfrico en medio alcalino. En el adulto proviene en parte del hgado (fraccin termoestable) y en parte del hueso, sistema reticuloendotelial y vascular (fraccin termilbil), dando lugar a distintas isoenzimas. La actividad srica de fosfatasa alcalina sea, en condiciones normales, alcanza su mayor actividad en los nios en edad de crecimiento (llegando a triplicar los niveles del adulto) debido a que sea isoenzima se localiza en los osteoblastos ( relacionados con la calcificacin y formacin de estructuras seas). Tambin es fisiolgico el aumento que se produce al final del primer trimestre del embarazo, a expensas de la isoenzima placantaria que en ese perodo alcanza niveles mximos (aproximadamente el doble de los valores normales) Entre las patologas que afectan la actividad srica de fosfatasa alcalina, se pueden citar: carcinomas metastsicos en hgado y en hueso ( productores de enzima), colestasisi biliar, fenmenos osteoblsticos, trastornos de malabsorcin acompaados de lesiones ulcerosas ( donde la deficiencia de vitamina D produce osteomalacia con el consecuente aumetnto de fosfatasa alcalina sea) e incluso lesiones en vas de reparcin como infarto agudo de miocardio, infarto pulmonar o renal. La fosfatasa alcalina (FA o ALP) es una enzima localizada en la mayor parte de los tejidos, pero sobre todo en hgado, huesos y vas biliares.Se pide en el contexto de pruebas hepticas, junto a GPT-ALT, GOT-AST, Gamma-GT (GGT) y bilirrubina total (BT).Utilidad clnica de la Fosfatasa AlcalinaEs muy preciso en la determinacin de obstrucciones de los conductos biliares. Su elevacin suele ir asociada a la elevacin de la Gamma-GT, excepto en casos de problemas oseos, que elevan la Fosfatasa alcalina solo.Como el hueso es una de las principales fuentes de Fosfatasa Alcalina es habitual su elevacin en nios en periodo de crecimiento. Valores normales de fosfatasa alcalina Los valores normales estan de 45 a 145 UI/L (Unidades internacionales por litro), aunque estos valores cambian dependiendo de la edad y sexo del paciente. En nios estos valores pueden estar aumentados hasta 3 o 4 veces, debido a la actividad de crecimiento oseo. Alteraciones en los valores de fosfatasa alcalina

Fosfatasa Alcalina alta: Alcoholismo Anemia Cncer de huesos, de prstata. Curacin de fracturas seas. ROMANI BORJA LUIS JOSU Pgina 3

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Hepatitis. Enfermedades de hueso, de higado o renales.

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Fosfatasa alcalina baja: Ingesta insuficiente de proteinas. Malnutricion.

Examen de sangre para fosfatasa: Es una protena que se encuentra en todos los tejidos corporales. Los tejidos con cantidades particularmente altas de FA abarcan el hgado, las vas biliares y los huesos.Se puede hacer un examen de sangre para medir el nivel de FA,examen de isoenzimas de la fosfatasa alcalina Forma en que se realiza el examen: Se necesita una muestra de sangre. Para obtener informacin sobre la forma como se hace esto, ver el artculo: venopuncin.

Preparacin para el examen: Usted no debe comer ni beber nada durante un perodo de 6 horas antes del examen, a menos que el mdico d instrucciones para hacer otra cosa. Muchos medicamentos afectan el nivel de fosfatasa alcalina en la sangre y es probable que el mdico le aconseje dejar de tomar algunos de ellos antes del examen. Sin embargo, nunca deje de tomar ningn medicamento sin hablar primero con el mdico. Los frmacos que pueden afectar el nivel de fosfatasa alcalina pueden abarcar:

Alopurinol Antibiticos Pldoras anticonceptivas Algunos medicamentos para la diabetes Clorpromazina Cortisona Hormonas masculinas Metildopa Analgsicos narcticos Antinflamatorios no esteroides (AINES), empleados para la artritis y el dolor Propranolol Tranquilizantes Antidepresivos tricclicos

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Razones por las que se realiza el examen: Este examen se hace para diagnosticar enfermedad del hgado y del hueso o para ver si los tratamientos para dichas enfermedades estn funcionando. Puede incluirse como parte de las pruebas de la funcin heptica de rutina.

El aumento fisiolgico de los niveles plasmticos de fosfatasa alcalina se produce en animalesen fase de crecimiento (se est formando tejido seo) o en hembras gestantes (fosfatasa alcalinade la placenta). Esta enzima, tambin se utiliza como control de la adecuada pasterizacin de la l eche y crema,dado que la fosfatasa alcalina se inactiva por calentamiento.

SIGNIFICADO CLNICO:

La fosfatasa alcalina (ALP) es una enzima hidrolasa responsable de eliminar grupos de fosfatos devarios tipos de molculas como nucletidos, protenas y alcaloides. El proceso de eliminar el grupofosftico se denomina desfosforilacin. Como sugiere su nombre, las fosfatasas alcalinas son msefectivas en un entorno alcalino.La fosfatasa alcalina recibe el nombre de orto-fosfrico-monoster hidrolasa. stas enzimas procedende la ruptura normal de las clulas sanguneas y de otros tejidos, muchas de ellas no tienen un papelmetablico en el plasma excepto las enzimas relacionadas con la coagulacin y con el sistema delcomplementoLa fosfatasa alcalina es una hidrolasa con muy poca especificidad de sustrato. Se encuentra presente encasi todos los tejidos del cuerpo, especialmente, en epitelio intestinal, tbulos renales, hueso, hgado y placenta. Su localizacin celular es la membrana.Los individuos de los grupos sanguneos B y O secretores tienen la isoenzima intestinal aumentado ensus sueros.Presenta en circulacin isoenzimas: tejido inespecfico (constituida por las formas mltiples: heptica,sea, renal, glbulo blanco y otras), intestinal, placentaria.La fraccin heptica es termoestable, en cambio, la fraccin que proviene del hueso, sistemareticuloendotelial y vesicular, es termolbil. Las isoenzimas se diferencian por su estructura molecular, propiedades fsicoqumicas, antignicas y catalticas.Aparte de estas formas moleculares, la fosfatasa alcalina puede presentar algunas formas atpicas: comolas macroenzimas: de migracin rpida, fraccin biliar (fraccin heptica rpida o alfa rpida) y formasde migracin lenta (complejos moleculares constituidos por la enzima y una molcula de IgG).La fosfatasa alcalina (ALP) tiene identificadas por lo menos 9 isoenzimas. Cada una tiene varias propiedades de estabilidad al calor, inhibicin qumica, y mobilidad electrofortica. Entre ellas estn larpida (preheptica), la heptica, la ALP del hueso, placentaria, Regan, Nagao, renal, intestinal y PA

OBJETIVOS

Determinar la concentracin srica de fosfatasa alcalina en muestra de sangre. Aprender las tcnicas hechas en prctica.

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CALCULOS

B: 0.049 D:0.204 S:0.184

F=200 I/L S-B F= 0.18 200 4

Fosfatasa alcalina: UI/L = F * ( D B) = 1086.96 * 0.204 = 0221.74 UI/L

F= 1086.96

DISCUSION

FOSFATASA ALCALINA HEPATICA (FA): La funcin de esta enzima es desconocida. Se encuentra presente en variadas estirpes celulares tales como el hepatocito, el epitelio biliar, el osteocito, el enterocito y las clulas del trofoblasto placentario. Por lo tanto su elevacin en el plasma puede ocurrir en diversas patologas hepatobiliares, seas, intestinales y tambin en el ltimo tercio del embarazo. La mayora de las veces el contexto clnico permite suponer el origen de la elevacin de la fosfatasa alcalina. En el caso de las enfermedades hepatobiliares la elevacin de la actividad srica de la fosfatasa alcalina se relaciona generalmente a procesos en los que la capacidad excretora del hgado se encuentra afectada (colestasia). De este modo, la obstruccin biliar de cualquier causa (colestasia extraheptica ejs: coledocolitiasis, tumor de pncreas, estrechez de la va biliar, etc.+) o la alteracin de los procesos celulares de la secrecin biliar (colestasia hepatocelular *Ej. Colestasia por drogas, cirrosis biliar primaria, colestasias intrahepticas familiares, etc.) determinan importantes aumentos de la fosfatasa alcalina. Por otra parte, las patologas infiltrativas del hgado (ejs: tumores primarios, metstasis, linfomas, sarcoidosis, enfermedades granulomatosas) se asocian a elevaciones marcadas de la fosfatasa alcalina que pueden alcanzar hasta diez veces el valor normal. El mecanismo de elevacin de la fosfatasa alcalina no es del todo conocido. Se ha demostrado que la acumulacin de solutos biliares en el citosol del hepatocito determina un aumento de los niveles de RNA mensajero de la fosfatasa alcalina y por lo tanto un aumento de la sntesis de la protena. Adems, la obstruccin biliar determina una proliferacin de los canalculos biliares lo que aumenta en forma neta la masa de enzima y resulta en una elevacin de sus niveles plasmticos. En la mayora de las enfermedades hepatobiliares se observa una elevacin de las dos isoenzimas presentes en el hgado (heptica y biliar).

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Considerando que la fosfatasa alcalina no es rgano-especfica, ocasionalmente surge la pregunta clnica si su elevacin est o no relacionada a una enfermedad heptica. Esta pregunta se responde analizando el contexto clnico, los otros exmenes de laboratorio (particularmente la gamma-glutamil transpeptidasa) y en ocasiones determinando el patrn electrofortico de las fosfatasas alcalinas que puede discriminar entre las isoenzimas. Elevacin aislada de fosfatasa alcalina: Las personas con sangre tipo O y B pueden elevar niveles de FA en suero despus de comer una comida grasa, debido a la afluencia de la fosfatasa alcalina intestinal. Las enfermedades crnicas del hgado colestsico o infiltrativo debe ser considerado en pacientes en los que la fosfatasa alcalina se determina que es de origen heptico y persiste en el tiempo. Las causas ms comunes son la obstruccin parcial del conducto biliar, cirrosis biliar primaria (CBP), colangitis esclerosante primaria, ductopenia adultos bilis, y ciertos medicamentos como los esteroides andrognicos y fenitona. Enfermedades infiltrativas como la sarcoidosis, otras enfermedades granulomatosas, y con menos frecuencia, el cncer no sospechado con metstasis heptica. Ante la duda diagnstica, el exmen de eleccin debiese ser una ecografa adominal para evaluar parnquima heptico y vas biliares.

El diagnstico de la enfermedad de Paget es fundamentalmente radiolgico1 reforzado por el hallazgo de una FA srica aumentada. La radiografa simple muestra lesiones caractersticas (figura 1) que, junto al cuadro clnico y las alteraciones bioqumicas, suelen llevar al diagnstico: engrosamiento de las corticales, osteoporosis circunscrita, imgenes esclerticas y/o lticas, prdida de la diferenciacin corticomedular, aumento del tamao del hueso, engrosamiento de huesos anchos. Tambin es de eleccin en el estudio de nuevas localizaciones del dolor y en el diagnstico de complicaciones secundarias. Cuando no resulta determinante, la tomografa computarizada puede ser til, sobre todo si es de alta resolucin.La gammagrafa sea es ms sensible que la radiografa para detectar lesiones de enfermedad de Paget, pero su menor especificidad hace que el diagnstico requiera confirmacin con radiografa convencional en al menos una localizacin (grado de recomendacin C). La gammagrafa permite valorar la extensin y la actividad de la enfermedad.En muy pocas ocasiones se requiere la toma de una biopsia sea para establecer el diagnstico, aunque puede ser til para diferenciarlo de metstasis osteoblsticas u osteosarcomas (grado de recomendacin C)1,2.

La fosfatasa alcalina total est elevada en el 85-95%1,2 de los pacientes con enfermedad de Paget sin tratamiento. Hay una fuerte correlacin entre la magnitud del aumento de la fosfatasa alcalina y la actividad de la enfermedad medida por gammagrafa sea1. Por este motivo, se recomienda que la FA total se utilice como marcador estndar de la actividad de la enfermedad de Paget, tanto en el momento del diagnstico como en su seguimiento (grado de recomendacin B). Muchos enfermos con FA normal tienen enfermedad monosttica, pocos huesos afectados o enfermedad metablicamente inactiva1,2. ROMANI BORJA LUIS JOSU Pgina 7

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La FA tiene dos fuentes fundamentales, el hgado y el hueso. Un aumento aislado sin elevacin concomitante de la gammaglutamil transpeptidasa en una persona adulta no embarazada es probablemente de etiologa sea. La causa ms frecuente en ancianos es la enfermedad de Paget, a menudo subclnica13. En la tabla 3 aparecen las condiciones en que puede detectarse una FA elevada.Slo en pacientes con enfermedad confirmada radiolgicamente sin elevacin de la FA total srica y en aquellos con enfermedad hepatobiliar asociada se recomienda el uso de FA especfica del hueso como marcador de recambio seo (grado de recomendacin B)1. Otros marcadores especficos de resorcin sea tiles en estos casos2 son menos accesibles en Atencin Primaria (AP).

CONCLUSIONES

Se determin la concentracin srica de fosfatasa alcalina en muestra de sangre y fue de 221.74 ui/l lo cual est en el rango. Se Aprendi las tcnicas hechas en prctica.

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

MEDLINEPLUS.Informacin de salud para usted. Instituto Nacional de Salud. Fecha de acceso : 28/11/13. Disponible en: http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/003470.htm BRCENA ,A. Caracterizacin cintica de la fosfatasa alcalina. Departamento de Bioquimica y Biologia Molecular. Universidad de Rabanales. Crdoba. Fecha de acceso : 28/11/13. Disponible en: http://www.uco.es/dptos/bioquimica-biol-mol/pdfs/30%20FOSFATASA%20ALCALINA.pdf ALONSO, C. (2013).Cuales son las causas de la fosfatasa alcalina.Salud. . Fecha de acceso : 28/11/13. Disponible en: http://salud.uncomo.com/articulo/cuales-son-las-causas-de-la-fosfatasa-alcalina-baja-20794.html MAURICIO, B.Medicina Interna-Gastroenterologa.Universidad de la frontera. Chile. Fecha de acceso : 28/11/13. Disponible en: http://www.med.ufro.cl/clases_apuntes/medicinainterna/gastroenterologia/docs/15-higado-y-pruebas-hepaticas.pdf BORDAS,J.Enfermedad sea de Peaget.Actualizacin en Medicina de Familia.Barcelona. Fecha de acceso : 28/11/13. Disponible en:http://www.amf-semfyc.com/web/article_ver.php?id=212

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