PROTOCOLO DE MUESTREO DE FITOPLANCTON EN LAGOS Y EMBALSES

CDIGO: M-LE-FP-2011

Aprobado por circular de la Directora General del Agua de fecha 12 de Julio de 2011
SECRETARA DE ESTADO DE MEDIO RURAL Y AGUA

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DIRECCIN GENERAL DEL AGUA SUBDIRECCIN GENERAL DE GESTIN INTEGRADA DEL DOMINIO PBLICO HIDRULICO

NDICE

1. Aplicabilidad ............................................................................................................. 5 2. Objetivo .................................................................................................................... 5 3. Normativa de referencia........................................................................................... 5 4. Equipos, reactivos y conservantes .......................................................................... 6 4.1. Trabajo de campo ............................................................................................. 6 5. Determinacin del nmero y localizacin de puntos de muestreo........................... 8 6. Determinacin del nmero y tipo de muestras por punto de muestreo ................... 9 7. Frecuencia y poca de muestreo........................................................................... 10 8. Procedimiento de muestreo ................................................................................... 11 8.1. Toma de Muestras .......................................................................................... 11 8.2. Volumen necesario para cada anlisis ........................................................... 12
8.2.1. Filtrado en campo de la muestra destinada al anlisis de pigmentos .......................... 12

8.3. Muestreos adicionales. Muestreo cualitativo de toplancton con red............. 13 8.4. Conservacin, etiquetado y transporte de las muestras................................. 13 Anexo I: Ficha de campo para muestreo ................................................................... 15

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1. APLICABILIDAD
Este protocolo de muestreo es de obligada aplicacin en la explotacin de las redes ociales de evaluacin del estado / potencial ecolgico en cumplimiento de la Directiva 2000/60/CE, Directiva Marco del Agua, que explotan las Confederaciones Hidrogrcas (CCHH), bien directamente o a travs de contratos de servicios. Las estaciones en las que se utilizar este protocolo son las pertenecientes al programa de control de vigilancia, programa de control operativo, programa de control de investigacin y redes de referencia. La toma de muestras para el anlisis de agua destinada al abastecimiento se realizar en el punto ms representativo de la calidad del agua en la captacin, por lo que no necesariamente coincidir con lo descrito en este protocolo. Este protocolo corresponde al muestreo de las masas de agua de la categora lagos (lagos, lagunas y humedales naturales), as como a las masas de agua articiales o muy modicadas asimilables a lagos que aparecen en la Orden ARM/2656/2008, de 10 de septiembre, por la que se aprueba la Instruccin de Planicacin Hidrolgica, siendo aplicable para la obtencin de muestras para la determinacin y el clculo de los siguientes indicadores de evaluacin del estado ecolgico o del potencial ecolgico para el elemento de calidad toplancton: Concentracin de clorola-a. Biovolumen total. ndice de grupos algales - IGA. Porcentaje de biovolumen de cianobacterias.

Asimismo se podr aplicar este protocolo de muestreo para el clculo de otras mtricas correspondientes al elemento de calidad toplancton que no se encuentren en la citada Orden Ministerial.

2. OBJETIVO
La Directiva 2000/60/CE, Directiva Marco del Agua, establece que los Estados miembros debern poner en marcha programas de seguimiento. Estos programas deben permitir controlar y evaluar la composicin, abundancia y biomasa de las comunidades toplanctnicas. La Directiva Marco del Agua establece que los mtodos empleados para controlar los indicadores de evaluacin de los elementos de calidad biolgicos sern conformes a las normas internacionales o nacionales que garanticen el suministro de informacin de calidad y comparabilidad cientca equivalentes. Por lo tanto, el objetivo de este protocolo es establecer un mtodo de muestreo de toplancton que garantice el cumplimiento de los requisitos mencionados anteriormente.

3. NORMATIVA DE REFERENCIA
La normativa de referencia de este protocolo es la que se enumera a continuacin: Directiva 2000/60/CE del Parlamento Europeo y del Consejo por la que se establece un marco comunitario de actuacin en el mbito de la poltica de aguas. RD Legislativo 1/2001 por el que se aprueba el Texto Refundido de la Ley de Aguas. RD 907/2007 por el que se aprueba el Reglamento de Planicacin Hidrolgica.

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Orden MAM/3207/2006 por el que se aprueba la ITC-MMA EECC1/06 Instruccin tcnica complementaria sobre determinaciones qumicas y microbiolgicas para el anlisis de las aguas. Orden ARM/2656/2008 por la que se aprueba la Instruccin de Planicacin Hidrolgica. Orden MAM/985/2006 por la que se desarrolla el rgimen jurdico de las entidades colaboradoras de la administracin hidrulica en materia de control y vigilancia de calidad de las aguas y de gestin de los vertidos al dominio pblico hidrulico.

La presente Instruccin se ha redactado teniendo en cuenta las siguientes normas: UNE EN 15204:2007 Gua para el recuento de toplancton con microscopa invertida (tcnica de Utermhl). UNE EN 14996:2007 Gua para el aseguramiento de la calidad de las evaluaciones biolgicas y ecolgicas en el medio ambiente acutico. Draft proposal of Water quality Phytoplankton biovolume determination by microscopic measurement of cell dimensions (CEN TC 230 / WG 2 / TG 3/N116 30/03/2008). Draft proposal for Water Quality Guidance on quantitative and qualitative sampling of phytoplankton from inland waters (CEN TC 230 / WG 2 / TG 3/ N118 15/04/2008). UNE EN 5667-1:2007 Parte 1: Gua para el diseo de los programas de muestreo y tcnicas de muestreo. UNE EN 7027:2001: Determinacin de la turbidez. UNE EN 25814:1992 Calidad del agua. Determinacin del oxgeno disuelto. Mtodo electroqumico. (ISO 5814:1990). UNE EN 27888:1993 Calidad del agua. Determinacin de la conductividad elctrica (ISO 7888:1985). ISO 10523:2008. Water quality Determination of pH.

As mismo se ha considerado la metodologa aceptada por la comunidad cientca internacional para la siguiente medicin: Perl uorimtrico de clorola-a

4. EQUIPOS, REACTIVOS Y CONSERVANTES

4.1. TRABAJO DE CAMPO Equipos y material para la recoleccin de muestras Botellas de vidrio de 125 - 250 ml traslcidas y de color mbar para proteger la muestra de la luz, se usarn para contener las muestras para la determinacin de toplancton. Botellas opacas de plstico (2 L) para contener las muestras para la determinacin de la concentracin de clorola-a y otros recipientes con cierres hermticos adecuados para contener las muestras de agua para anlisis qumicos. El material y los recipientes para anlisis qumicos debern estar previamente lavados con cido sulfrico 1N y aclarados tres veces con agua destilada.
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Botella hidrogrca para la toma de muestras discretas. Para la toma de muestras integradas se podr utilizar alternativamente: botella hidrogrca para la composicin de muestras integradas a partir de muestras discretas. muestreadores integradores. tubo exible de silicona lastrado de longitud predeterminada y entre 2 2,5 cm de dimetro.

Viales de vidrio o plstico con tapn hermtico para las muestras de toplancton tomadas con red. Red de nailon (manga de plancton) de 20 m de luz de poro para muestras tomadas con red. Disco de Secchi (DS). Sonda uorimtrica para la determinacin de la concentracin de clorola-a en el perl vertical, para el control operativo, control de investigacin y red de referencia. Sonda multiparamtrica con sensores de profundidad, temperatura, conductividad, pH y oxgeno disuelto. Ecosonda manual para determinar el punto de mxima profundidad. Solucin cida de Lugol (Willn, 1962) o solucin alcalina de Lugol (Utermhl, 1958 modicada). Formaldehdo (HCHO) comercial (37-40 %). Contenedor para la homogenizacin de muestras discretas para componer la muestra integrada, cuando stas se tomen con botella hidrogrca. Neveras porttiles para transporte de la muestra. Bolgrafo o rotulador permanente (o cualquier otro mtodo para etiquetar las muestras). Si se usan etiquetas, stas deben ser resistentes a la humedad. Barca y equipo adicional para la navegacin o el vadeo, adecuados para las condiciones locales, con el equipo de seguridad apropiado.

En caso de ltrado en campo de las muestras para el anlisis de clorola-a (apartado 8.2.1.) ser adems necesario el siguiente equipo: Equipo de ltracin. Este equipo estar compuesto de portaltros (reutilizables, tipo swinnex) para ltros de 47 mm de dimetro y jeringa adaptable. Alternativamente podr utilizarse un equipo de ltracin con kitasatos, embudo y soporte para ltros de 47 mm de dimetro y bomba de vaco manual o elctrica adaptable al kitasatos. Todo el equipo deber lavarse con agua destilada antes de ltrar una nueva muestra. Filtros de microbra de vidrio, de 47 mm de dimetro, con capacidad para retener todas las partculas de tamao superior a 0,7 m. Probeta para la medicin del volumen de muestra a ltrar. Pinzas de punta roma para la manipulacin de los ltros. Tubos de vidrio con tapn de rosca para depositar los ltros una vez ltrada la muestra. Equipo de congelacin (temperatura inferior a -20C) para la conservacin del ltro para el anlisis de clorola-a.
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Equipos y material complementario Protocolo de muestreo. Estadillos de campo. Libreta de campo. Fundas impermeables para las chas de campo. Cmara digital. Telfono mvil. Cartografa adecuada. GPS.

Todo el material usado en campo deber estar convenientemente limpio y desinfectado para evitar el transporte y la dispersin de propgulos o individuos de especies invasoras, siguiendo los protocolos establecidos por el Organismo de cuenca competente. Reactivos jadores (conservantes) Las muestras para el recuento de toplancton (cuantitativas) se jarn con solucin de Lugol (mezcla de yoduro potsico y yodo), tal como se especica en el apartado 8.4. Para la preparacin de la solucin de Lugol, en la norma EN 15204 (2006) se incluyen dos formulaciones: Solucin cida de Lugol (Willn, 1962). Disolver 100 g de KI (yoduro potsico) en 1 litro de agua desmineralizada; aadir 50 g de cristales de yodo y agitar hasta que se disuelvan; aadir 100 g de cido actico glacial; decantar la solucin antes de su uso para eliminar los posibles precipitados. Esta solucin se utilizar para las muestras de toplancton procedentes de masas de agua con pH < 7. Solucin alcalina de Lugol (Utermhl, 1958 modicada). Se prepara como la anterior, excepto que, en lugar del cido actico glacial, se aaden 100 g de acetato de sodio (CH3COO-Na). Esta solucin se utilizar para las muestras de toplancton procedentes de masas de agua con pH 7.

El lquido resultante debe estar fuertemente coloreado y debe conservarse en un recipiente hermtico de vidrio y protegido de la luz para minimizar su sublimacin. Las muestras cualitativas de toplancton tomadas con red (apartado 8.3) se jarn con formaldehdo (HCHO), tal como se especica en el apartado 8.4. El reactivo que deber utilizarse ser formaldehdo comercial (37-40 %).

5. DETERMINACIN DEL NMERO Y LOCALIZACIN DE PUNTOS DE MUESTREO

El nmero de puntos de muestreo y nmero de muestras en el perl vertical por masa de agua depender de las caractersticas de la masa de agua. En general habr un punto de muestreo por masa de agua, pero se podr establecer ms de uno en los casos en que, en funcin de la morfometra de la masa de agua o de sus criterios de gestin, se considere oportuno, debiendo justicarse en cualquier caso la eleccin del nmero y localizacin de los puntos de muestreo. Se seleccionar siempre, como mnimo, un punto de muestreo localizado en la vertical de la parte ms profunda de la masa de agua y se evitarn las muestras litorales salvo razn especca que lo justique (nunca sustituyendo al punto de muestreo de la zona ms profunda).

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En el caso de embalses, cuando haya un nico punto de muestreo, ste se ubicar sucientemente separado de la presa para quedar aguas arriba de la atagua. La ubicacin de los puntos de muestreo adicionales, cuando los hubiera, tendr en cuenta las caractersticas de las masas de agua para que resulte lo ms representativa posible del conjunto teniendo en cuenta aspectos como la morfometra de la cubeta, profundidad, entrada de ujos, vegetacin acutica, usos y posibles vertidos puntuales, debiendo especicarse las razones de la eleccin. La recogida de muestras para los anlisis fsico-qumicos se realizar en los mismos puntos en los que se tomen muestras para la determinacin de toplancton.

6. DETERMINACIN DEL NMERO Y TIPO DE MUESTRAS POR PUNTO DE MUESTREO

En cada punto de muestreo se realizar, previamente al muestreo de toplancton, un perl vertical con el n de determinar la profundidad a la que se encuentra la termoclina (en su caso) y, por tanto, si la masa de agua se encuentra estraticada o no. En el perl vertical se determinarn las siguientes variables: Temperatura del agua (C). Conductividad elctrica a 20C (S/cm). Oxgeno disuelto (concentracin y saturacin) (mg O2 / L y % sat O2). pH (ud pH). Perl uorimtrico de la concentracin de clorola-a, a determinar en el control operativo, control de investigacin y en las masas de agua pertenecientes a la red de referencia (mg/m3 clorolaa).

El nmero de determinaciones de las variables incluidas en el perl ser funcin de la profundidad mxima de la masa de agua: Profundidad mxima < 10 m: al menos cada medio metro. Profundidad mxima 10 m: al menos cada metro.

Tambin se determinar la profundidad de visin del Disco de Secchi (DS). En cada punto de muestreo, el nmero y tipo de muestras depender de las caractersticas de la masa de agua, segn el siguiente criterio: Lagos y embalses de profundidad mxima 3 m y humedales: se tomar una muestra integrada de la columna de agua desde la supercie hasta unos 20-30 cm del fondo, evitando acercarse excesivamente al sedimento o a la cobertura de macrtos. Lagos y embalses de profundidad mxima > 3 m, no estraticados: se tomar una muestra integrada desde la supercie hasta la profundidad correspondiente a 2,5 DS (2,5 veces la profundidad de visin del Disco de Secchi). Cuando la profundidad del lago o embalse sea inferior a 2,5 DS se tomar una muestra integrada de toda la columna de agua desde la supercie hasta unos 20-30 cm del fondo, evitando acercarse al sedimento o a la cobertura de macrtos. Lagos y embalses de profundidad mxima > 3 m, estraticados: se presentan dos posibilidades, una para el control de vigilancia y otra para el control operativo, el control de investigacin y redes de referencia.

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Control de vigilancia: se realizar del mismo modo que para los no estraticados. Control operativo, control de investigacin y redes de referencia: se proceder igual que en el control de vigilancia, y adems se tomarn muestras discretas en las profundidades en las que la sonda uorimtrica detecte picos de clorola-a, donde las concentraciones sean al menos 10 veces superiores a las detectadas a 1 metro de profundidad.

7. FRECUENCIA Y POCA DE MUESTREO

La frecuencia intraanual y la poca del ao en la que se tomarn las muestras depender de las caractersticas de la masa de agua: Lagos de profundidad mxima > 3 m y permanentes (tipos 1-4, 6-10, 12, 14-15 y 22) y embalses de cualquier profundidad. Se realizarn dos muestreos al ao a lo largo del periodo de posible estraticacin estival, el primero aproximadamente en la primera mitad del periodo estival, en torno al mes de julio; y el segundo en la segunda mitad del periodo estival, en el mes de septiembre. Estas fechas de muestreo sern tambin aplicables, para los lagos y embalses con estas caractersticas hidromorfolgicas, en el caso de que la masa de agua no se estratique. Lagos y humedales someros de profundidad mxima 3 m y permanentes (tipos 11, 16, 18, 20, 27-29 y los que presenten hidroperiodo permanente de los tipos 24-26). Se realizarn dos muestreos al ao, el primero aproximadamente a mitad de primavera, y el segundo en torno a la mitad del periodo estival. Lagos y humedales temporales (tipos 5, 13, 17, 19, 21, 23, 30 y los que presenten hidroperiodo temporal de los tipos 24-26). Se realizarn dos muestreos durante el hidroperiodo, el primero, al menos, un mes despus del comienzo del llenado y se retrasar hasta nales del invierno, siempre que sea posible, mientras que el segundo se realizar en torno a la mitad de primavera, antes de que se inicie el periodo de desecacin estival. En el caso de masas de agua con hidroperiodo ms efmero, los dos muestreos se distribuirn de forma equitativa a lo largo del hidroperiodo, con criterios similares a los del resto de masas de agua temporales, a menos que el hidroperiodo sea demasiado corto, en cuyo caso se realizar un nico muestreo.

En casos excepcionales, que debern ser justicados, se podra alterar la poca de muestreo para, por ejemplo, hacerlo coincidir con las fases de inicio y de mxima estabilidad de la estraticacin de la masa de agua que en el caso de los embalses puede depender del criterio de explotacin. En cualquier caso, se deber motivar la variacin en la poca de muestreo a la entrega de resultados. Cuando en la masa de agua se den situaciones tales que dos muestreos anuales sean insucientes (ej. frecuentes oraciones algales masivas, masas de agua estratgicas), se podr aumentar el nmero de muestreos por ao hasta cuatro. El aumento del nmero de toma de muestras por ao deber ser justicado a la entrega de resultados. No se podr realizar el muestreo cuando haya habido aportes excepcionales de slidos en suspensin que afecten de forma signicativa a la turbidez del agua. Se debe esperar a que las condiciones de turbidez por partculas en suspensin inorgnicas en la masa de agua vuelvan a la normalidad. El control de investigacin tendr unas frecuencias variables en cada estacin de muestreo segn su problemtica especca.

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8. PROCEDIMIENTO DE MUESTREO
En cada punto de muestreo se tomarn una muestra integrada y una o varias discretas cuando corresponda, segn se indica en el apartado 6. De stas se extraern alcuotas para realizar los anlisis correspondientes a: Concentracin de clorola-a. Identicacin, recuento y determinacin del biovolumen de toplancton.

Adems, de cada una de las muestras (integradas y discretas), se medirn in situ pH y conductividad, y como anlisis complementarios, se tomarn alcuotas para realizar los siguientes anlisis: Fsforo total (mg P/L). Nitrgeno total (mg N/L). Fosfatos (mg PO4/L). Amonio total (mg NH4 /L). Nitratos (mg NO3/L). Alcalinidad (mg CaCO3 /L).

Las muestras para los anlisis de fosfatos, amonio total y nitratos se ltrarn a travs de un ltro de microbra de vidrio (como el descrito en el apartado 4.1.) inmediatamente despus de su recogida y se depositarn, una vez ltrados, en los recipientes correspondientes. Se rellenar la hoja de campo del anexo I de este protocolo. 8.1. TOMA DE MUESTRAS Las muestras discretas, correspondientes a cada profundidad de la columna de agua, se obtienen mediante una botella hidrogrca que se sumerge a la profundidad deseada y se cierra mediante mensajero. En el caso de muestras integradas, las submuestras tomadas a cada una de las profundidades se integran nalmente en una nica muestra. Las submuestras tomadas deben cubrir de manera equidistante la columna de agua muestreada, dependiendo del espesor de la capa ftica: Zona ftica (2,5*DS) < 10 m: la equidistancia no deber ser mayor de 1 metro. Zona ftica (2,5*DS) 10 m: la equidistancia no deber ser mayor de 2 metros.

Se debern tomar volmenes iguales a cada una de las profundidades y homogenizarlos bien, pero de manera suave, en un recipiente de mezcla, para dar lugar a la muestra integrada de la que luego se toman las alcuotas mediante un recipiente adecuado, manteniendo bien la mezcla. Al igual que cualquier utensilio usado en la toma de muestras, tanto el recipiente de mezcla como el dispensador debern estar bien limpios, de manera que no aporten ningn tipo de contaminacin a la muestra. Alternativamente se podrn utilizar muestreadores integradores homologados por normas internacionales, o bien un tubo de silicona, en cuyo caso deber prestarse atencin para que la cada del tubo por la columna de agua sea vertical y para conseguir una buena limpieza del mismo. Cuando se utilice el tubo de silicona, ste debe ser de longitud adecuada para la masa de agua y con un dimetro exterior de entre 2-2,5 cm. El tubo debe disponer de un lastre en uno de los extremos para que la cada del tubo por la columna de agua sea vertical y ser almacenado limpio y seco entre los distintos muestreos, y no deber ser usado para otro propsito que para muestrear toplancton u otros parmetros acompaantes.

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En funcin de las caractersticas del sistema el procedimiento de muestreo, acorde con el apartado 6, ser el siguiente: Lagos y embalses someros de profundidad mxima 3 m y humedales: Se podr utilizar la botella hidrogrca para tomar muestras discretas a diferentes profundidades que nalmente se homogenizarn en una nica muestra integrada. Alternativamente, tambin podr usarse un muestreador integrador, o bien un tubo exible de 2-2,5 cm de dimetro exterior y longitud adecuada a la profundidad de la masa de agua. Lagos y embalses de profundidad mxima > 3 m, no estraticados: Se utilizar la botella hidrogrca para tomar muestras discretas a diferentes profundidades, que nalmente se homogenizarn en una nica muestra integrada, o bien un muestreador integrador. Lagos y embalses de profundidad mxima > 3 m, estraticados: Control de vigilancia: Se utilizar la botella hidrogrca para tomar muestras discretas a diferentes profundidades, que nalmente se homogenizarn en una nica muestra integrada, o bien un muestreador integrador. Control operativo, control de investigacin y redes de referencia: Se utilizar la botella hidrogrca para tomar muestras discretas a diferentes profundidades, las cuales nalmente se homogenizarn en una nica muestra integrada, o bien un muestreador integrador. Adems se tomarn muestras discretas con botella hidrogrca a las profundidades de la columna de agua donde la sonda uorimtrica haya detectado picos de clorola-a (apartado 6).

8.2. VOLUMEN NECESARIO PARA CADA ANLISIS De la muestra integrada, y de las discretas cuando corresponda, se extraern las siguientes alcuotas: Para el anlisis de clorola-a: recoger un volumen de agua suciente que oscila de 1 a 2L. Guardar la muestra en recipientes opacos y refrigerada (4C) hasta el momento del anlisis. Cuando la muestra se ltre in situ se seguir el procedimiento sealado en el apartado 8.2.1. Para identicacin y recuento de toplancton: recoger un volumen de agua de entre 125 ml y 250 ml. Guardar, una vez jada (apartado 8.4), en recipientes traslcidos de vidrio de color mbar, en lugar fresco y protegido de la luz. En cuanto a la muestra cualitativa tomada con red (apartado 8.3), se guardar en el vial correspondiente el volumen en el que haya quedado recogido el contenido del copo de la manga de plancton. Una vez jada (apartado 8.4), se guardar en las mismas condiciones, resguardndola de la luz y las altas temperaturas. Para los anlisis qumicos: tomar el volumen que indiquen las respectivas normas nacionales o internacionales.

8.2.1. FILTRADO EN CAMPO DE LA MUESTRA DESTINADA AL ANLISIS DE PIGMENTOS En el caso de que el transporte al laboratorio de la muestra de agua no pueda realizarse en el mismo da y su procesado antes de 24 horas, es conveniente realizar in situ el ltrado de la muestra para anlisis de pigmentos fotosintticos (clorola-a), y preservar congelado el ltro que contiene la muestra recogida. Existen diversos tipos de dispositivos que pueden ser utilizados para el ltrado in situ de la muestra, que estn descritos en el apartado 4.1. El ms sencillo corresponde a portaltros porttiles, tipo swinnex, en los que se puede colocar el ltro de microbra de vidrio y, mediante una jeringa, ir ltrando la muestra

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hasta que el ltro comience a estar saturado y tome un marcado color verde o amarillento. La adicin de muestra a la jeringa debe hacerse con una probeta, de manera que se pueda medir exactamente el volumen ltrado, el cual debe anotarse convenientemente. Alternativamente al swinnex y la jeringa se pueden utilizar sistemas clsicos de ltracin como los utilizados en laboratorio, con un matraz kitasatos y un embudo de ltracin con portaltros. En este caso la fuerza de succin debe ser realizada por una bomba de vaco manual o por una bomba mecnica accionada por batera, si no se dispone de toma de corriente. Los ltros utilizados para la ltracin deben ser de microbra de vidrio de 47 mm de dimetro, con capacidad para retener todas las partculas de tamao superior a 0,7 m, tal como se especica en el apartado 4.1. Los portaltros debern ser, consecuentemente, los adecuados para ese dimetro de ltro. 8.3. MUESTREOS ADICIONALES. MUESTREO CUALITATIVO DE FITOPLANCTON CON RED Para ayudar en la identicacin del toplancton se realizar adems un muestreo cualitativo de toplancton con red, utilizando una manga de plancton de 20 m de luz de malla. La red se arrastra en el seno del agua, verticalmente si la profundidad lo permite o si no horizontalmente, hasta conseguir un ltrado visible. El volumen en el que haya quedado recogido el contenido del copo de la manga de plancton se guardar en un vial de vidrio o plstico con tapn hermtico, jndose la muestra con formol comercial (37-40 %) a una concentracin nal de 4 % (v/v) de formol en la muestra. Esta muestra no tiene como objeto la obtencin de un inventario de taxones, sino simplemente proporcionar material adicional para la identicacin de estos. 8.4. CONSERVACIN, ETIQUETADO Y TRANSPORTE DE LAS MUESTRAS Todas las muestras y preparaciones deben estar convenientemente etiquetadas de forma que se identiquen mediante un cdigo. Se usar un rotulador resistente al agua. Para la conservacin y transporte de las muestras se seguir el siguiente procedimiento. Muestras para anlisis de clorola-a Las muestras se refrigerarn a 4C y se mantendrn en oscuridad hasta el momento del ltrado, en el caso de que las muestras puedan ltrarse en el laboratorio antes de 24 horas. Si no fuese posible respetar este plazo, el ltrado de la muestra se realizar in situ, tal y como describe el apartado 8.2.1, en cuyo caso el ltro deber congelarse para su traslado al laboratorio, mantenindose congelado hasta el momento de aadir el solvente. El sistema de congelacin deber garantizar en todo momento la conservacin a una temperatura inferior a -20C. Esto podr conseguirse de diversas formas, tanto mediante el uso de congeladores porttiles autnomos o instalados en vehculos con compartimento isotermo, o en recipientes con aislamiento trmico conteniendo nieve carbnica, o en nitrgeno lquido usando contenedores homologados. No ser vlido para la congelacin el uso de hielo, que tan slo resulta til para la refrigeracin de la muestra previamente a su ltrado. Muestras para identicacin y recuento de toplancton Para la jacin de estas muestras se utilizar una solucin de Lugol preparado tal y como se describe en el apartado 4.2. Para ello se aade de 0,5 a 1 ml de Lugol por cada 100 ml de muestra hasta obtener un color miel (la cantidad a aadir depender siempre del contenido de materia orgnica u otros reductores en la muestra, siendo necesaria una mayor cantidad a mayor presencia de stos). El Lugol se evapora y se degrada por foto-oxidacin, por tanto las muestras se deben conservar en lugar fresco y a oscuras. Hay que controlar peridicamente la prdida de color de la muestra, aadiendo ms
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conservante si se requiere, siendo preferible la determinacin de las muestras en un plazo inferior a 6 meses para evitar su degradacin. Las muestras cualitativas de toplancton tomadas con red (apartado 8.3) se jarn, por el contrario, con formol comercial (37-40 %) a una concentracin nal de 4 % (v/v) de formol en la muestra. Muestras para analtica de variables qumicas Las muestras destinadas a la analtica de las variables qumicas se refrigerarn a 4C y se preservarn de la luz y, en su caso, se aadir en cada una el conservante o reactivo adecuado y se realizar el procesado que corresponda siguiendo lo que indiquen las respectivas normas nacionales o internacionales.

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ANEXO I: FICHA DE CAMPO PARA MUESTREO

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TOMA DE DATOS MUESTREO FITOPLANCTON EN LAGOS Y EMBALSES

DATOS IDENTIFICATIVOS DEL MUESTREO NOMBRE DE LA MASA DE AGUA: ORGANISMO/EMPRESA: MUESTREADOR: Operativo: CODIGO MUESTRA: Hora inicio: FECHA: ___/___/______ Hora n: Descripcin de acceso y localizacin del tramo: __:__ Referencia: __:__ Programa: Investigacin: Vigilancia:

CARACTERSTICAS HIDROMORFOLGICAS Profundidad mxima (m): Supercie (ha): Permetro (km): Si: Estraticacin: No: Si: Presencia de blooms: No: Olor: Profundidad termoclina (m): Color del agua: Longitud mxima: Nivel del agua respecto a la escala (m): Temperatura del aire (C): Profundidad de DS (m).

MUESTREO Coordenadas UTM X UTM Y Huso Tipo de muestra (Integrada / discreta) Profundidad mxima columna de agua (m) Filtro In situ Profundidad Clorola a (S/ n (m) No) Recogida de alcuotas (S/ No)

Cdigo PM

Profundidad inicio (m)

Observaciones

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SITUACIN DE LA TERMOCLINA Profundidad (m) (*) Temperatura Clorola pH (C) a (mg/l) Conductividad elctrica a 20C (S/cm) O2 disuelto (mg O2/l) % saturacin O2

Dibujo del perl de la termoclina

(*) En el programa de vigilancia no se realizar perl uorimtrico, pero se rellenarn los datos sicoqumicos a profundidad ----. Observaciones

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