Mblgo.

Vctor Guzmn Tripul

Microbiologa

MICROBIOLOGIA
Microbiologa, el estudio de los organismos microscpicos, deriva de 3 palabras griegas: mikros(pequeo), bios(vida) y logos (ciencia) que conjuntamente significan el estudio de la vida microscpica. Lo importante, como objeto de estudio, es su pequeo tamao y su naturaleza de organismos vivos (microorganismos), Su pertenencia a varios reinos como procariontes (bacterias), Eucariontes (Hongos y algas y protozoos microscpicos) y virus y viroides, aunque se incluyen tambin metazoos parsitos, no microscpicos. Todos estos seres microscpicos se encuentran en la naturaleza bajo descomportamiento bsicos de relacin con otros seres vivos, o son de vida libre, desenvolvindose como saprofitos o predadores, o mantienen una relacin estable con otros organismos vivos. Normalmente tendemos a asociar estos pequeos organismos con infecciones, enfermedades como el SIDA, o deterioro de alimentos. Sin embargo, la mayora de los microorganismos contribuyen de una forma crucial en el bienestar de la Tierra ayudando a mantener el equilibrio de los organismos vivos y productos qumicos en nuestro medio ambiente: Los microorganismos de agua dulce y salada son la base de la cadena alimentaria en ocanos, lagos y ros; los microorganismos del suelo destruyen los productos de desecho e incorporan el gas nitrgeno del aire en compuestos orgnicos, as como reciclan los productos qumicos en el suelo, agua y aire; ciertas bacterias y algas juegan un papel importante en la fotosntesis, que es un proceso que genera nutrientes y oxgeno a partir de luz solar y CO2 siendo un proceso crtico para el mantenimiento de la vida sobre la Tierra; los hombres y algunos animales dependen de las bacterias que habitan en sus intestinos para realizar la digestin y sntesis de algunas vitaminas como son la K y algunas del complejo B. Los microorganismos tambin tienen aplicaciones industriales ya que se utilizan en la sntesis de productos qumicos como son acetona, cidos orgnicos, enzimas, alcohol y muchos medicamentos. Esta diversidad de funciones ha suscitado la divisin de la microbiologa en ramas especializadas, segn lo que los microorganismos hacen, como Ciencia pura, la microbiologa es la parte de la Biologa que estudia el mundo de los microorganismos, por lo que son y lo que significan como tales seres vivos, su hbitat y comportamiento, y secundariamente si son o no beneficiosos o perjudiciales, y para quien como Ciencia aplicada ha dado lugar a especializaciones todas ellas importantes y activas. En estas ramas aplicadas de la Microbiologa pueden destacar tres objetivos o fundamentos: Controlar los microorganismos perjudiciales, Cultivar y seleccionar los beneficiosos (Biotecnologas), Conocer, respetar y no inferir en las actividades espontneas de los microorganismos en la naturaleza (ciclos de la naturaleza) EL MUNDO INVISIBLE Y NUESTRO MUNDO La microbiologa es el estudio de los microorganismos, el mundo subvisible de los seres vivos. a lo largo de la historia, los microorganismos han tenido un efecto tremendo en la actividad humana y en la mayora de los casos, abrumadoramente negativo. Antes del desarrollo de la microbiologa como ciencia, las enfermedades golpeaban, y controlaban los acontecimientos humanos. Con las epidemias venia el caos social y poltico, adems del sufrimiento humano. Para comenzar nuestro estudio de la microbiologa, trataremos brevemente algunos acontecimientos importantes en la larga historia del mundo subvisible y de nuestro mundo. Microorganismos y Enfermedades La peste bubnica, que devast Europa durante la Edad Media, mato alrededor de 25 millones de personas, un tercio de la poblacin. Cabe imaginar la confusin social y poltica que se produca como consecuencia de dichas muertes masivas. No fue hasta 500 aos despus, en 1890, cuando los microbilogos identificaron el agente causal, una bacteria denominada Yersinia pestis. Ataron cabos y fueron comprendiendo lo que ocurra: las pulgas de las ratas infectadas 1

Mblgo. Vctor Guzmn Tripul Microbiologa propagaban la plaga. La infeccin se transmita primero entre las ratas, que tienen escasa resistencia y generalmente mueren. Cuando las ratas hospedadoras escaseaban, las pulgas picaban a los humanos y comenzaba la epidemia de peste. La escasez de patatas una plaga de otro tipo, una enfermedad de las plantas, y no del ser humano, causo la gran emigracin de los irlandeses a los Estados Unidos en el siglo XIX. La patata era un componente elemental de la dieta irlandesa y por tanto, cuando el hongo Phytophthora infestans causo en irlanda una podredumbre que destruyo los cultivos de patatas, el resultado fue devastador. En 1846 la cosecha fue tan escasa que se extendi el hambre y las enfermedades relacionadas con la misma. Se estima que murieron 1 240 000 personas y 1 200 000 emigrantes a otros pases. La conquista de los incas unos de los casos mas trgicos de enfermedades que destruyeron casi completamente una poblacin ocurri en Amrica. Cuando el conquistador espaol Hernn Cortes desembarco en Mxico en 1519, la poblacin nativa americana de la regin central era de 25 a 30 millones. Al cabo de 50 aos la poblacin se haba reducido a 3 millones, un 10 por ciento de la que haba sido, debido a los estragos de las enfermedades tradas por los espaoles. Despus de siglos de exposicin, los europeos haban desarrollado cierto grado de tolerancia a la viruela y sarampin; pero los americanos nativos, sin un contacto previo, eran particularment5e vulnerables. Una vez que se establecieron en el nuevo mundo, las enfermedades europeas se propagaron como un relmpago. La viruela se extendi desde Mxico a Per, matando a millones de personas, incluyendo al inca reinante y as su heredero. Napolen en Rusia Guerra e infecciones han estado siempre ntimamente relacionadas; la escasa higiene, el desplazamiento de multitudes y la mala nutricin en zonas de guerra son los causantes de los brotes de enfermedades. Cuando Napolen invadi Rusia en 1812, perdi mas tropas debido al tifus que a todas las dems causas juntas, incluyendo la accin del enemigo. Los soldados heridos durante la batalla solan morir ms por las infecciones relacionadas con las heridas, tales como el ttanos o la gangrena gaseosa, que por la herida en s.

Los microorganismos y la vida en la actualidad Los microorganismos que causan enfermedades, denominados patgenos, son responsables de un enorme espectro de enfermedades humanas. Pero no perdamos la perspectiva. Como apunto el microbilogo norteamericano Otto Rahn, la fraccin de microorganismos que causan enfermedades en mucho menor que la fraccin de humanos que cometen asesinatos. Y an ms importante, el desarrollo de la microbiologa como ciencia significa que ahora sabemos cmo controlar muchos patgenos. Tambin hemos descubierto nuevas formas de utilizar los microorganismos para nuestro propio provecho, para mejorar la calidad de vida. Revisemos algunos de los avances y retos de la microbiologa en sus cuatro grandes reas de aplicacin: clnica, ambiental, industrial y agrcola. Microbiologa clnica Para evitar el contagio de muchos microorganismos perjudiciales tenemos vacunas, as como drogas y antibiticos para proporcionar un tratamiento. Adems, hemos conseguido un tremendo progreso en la prevencin de enfermedades infecciosas mediante la higiene pblica. Microbiologa ambiental Una de las primeras aplicaciones prcticas de nuestro conocimiento de la microbiologa ambiental ha sido proporcionar un sistema de agua potable, segura y de sabor agradable. Entre las aplicaciones ms recientes se encuentra el desarrollo de materiales biodegradables (que son desagrados rpidamente por los microorganismos presentes normalmente en agua y suelos). Los productos biodegradables son una respuesta al gran reto que supone para los microbilogos ambientales para combatir las montaas de desechos txicos que producen nuestras industrias. 2

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Microbiologa

Microbiologa industrial el primer uso que hizo el ser humano de los microorganismos fue obtener alimentos y bebidas fermentadas: pan, vino y vinagre, quesos y aceitunas. Las personas tambin aprendieron a conservar los alimentos para los difciles inviernos, controlando el desarrollo de microorganismos, mediante la desecacin de frutos y salados de la carne. En la actualidad, las industrias que dependen de los microorganismos son enormemente diversas. Adems de alimentos, utilizamos los microorganismos para obtener vitaminas, antibiticos y otros productos farmacuticos, tal como la insulina, para tratar la diabetes. Sin duda alguna, los mayores retos en microbiologa industrial vendrn de la aplicacin de la ingeniera gentica a problemas mdicos, ambientales y agrcolas. Microbiologa agrcola Gracias a la investigacin en microbiologa agrcola, en nuestros das el ganado y las plantas importantes para la agricultura se encuentran en gran medida protegidos de las enfermedades microbianas. Adems, se utilizan microorganismos capaces de matar insectos como pesticidas naturales y otros que ayudan a hacer el suelo ms frtil. Algunas investigaciones recientes en este campo verifican el uso de los microorganismos para producir suplementos alimenticios para animales y humanos. Aunque en ciertas partes del mundo no existen problemas de escasez de alimentos, en otras las personas podran beneficiar de una fuente de protenas particular, fcilmente disponible, barata y agradable.

ALCANCE DE LA MICROBIOLOGA Hay cinco grupos de microorganismos: bacterias, algas, hongos, protozoos y virus. Excepto por el tamao, estos grupos no estn relacionados entre s; solamente tienen una propiedad en comn: su pequeo tamao. De hecho, la diversidad de forma y funcin entre los grupos de microorganismos es tan grande como la diversidad total de todos los seres vivos. Las bacterias, por ejemplo, son menos parecidas a las algas, hongos, protozoos o virus, que un tiburn lo es a una jirafa o una orqudea a un guila. Si estos organismos no estn relacionados entre s, entonces Por qu se los agrupa en una materia denominado microbiologa para estudiarlos de manera conjunta? La respuesta es de tipo prctico: las tcnicas para identificar, cultivar y estudiar los grupos de microorganismos son semejantes. La microbiologa es una ciencia coherente por su metodologa y aproximacin a los problemas, no por la relacin entre los organismos que estudia. Las diferencias fundamentales entre los grupos radican en su estructura. Las bacterias son clulas, pero son procariotas, que significa antes del ncleo. Carecen de estructuras internas asociadas a membranas. Las algas, hongos y protozoos, al igual que las plantas y animales, son eucariotas, que significa ncleo verdadero. Tienen un ncleo rodeado por la membrana y otras estructuras internas definidas por membranas, denominadas orgnulos, u rganos diminutos. Los virus, el quinto grupo, son acelulares . Esto es, un virus no es una clula; es solamente un pequeo paquete de cido nucleico, la forma qumica de informacin gentica, envuelto en una cubierta, generalmente formada por protena. DESARROLLO HISTORICO DE LA MICROBIOLOGIA Aunque los microorganismos se originaron hace aproximadamente 4.000 millones de aos, la microbiologa es relativamente una ciencia joven. Los primeros microorganismos se observaron hace 300 aos y sin embargo pasaron unos 200 aos hasta que se reconoci su importancia La existencia de los microorganismos no se conoci hasta la invencin del microscopio. La primera persona en describir los microorganismos en detalle fue el holands Antony van Leeuwenhoek en 1684, a los cuales denomin animliculos. Sus magnficas dotes de observador le llevaron asimismo a describir protozoos (como Giardia, que encontr en sus propias heces), la estructura estriada del msculo, la circulacin capilar, a descubrir los espermatozoides y los 3

Mblgo. Vctor Guzmn Tripul Microbiologa glbulos rojos (por lo que tambin se le considera el fundador de la Histologa animal), as como a detallar diversos aspectos estructurales de las semillas y embriones de plantas. El debate sobre la generacin espontnea

Una vez descubiertos los microorganismos por Leeuwenhoek se empez a especular sobre el origen de estos animliculos. Se formaron dos escuelas. Una de ellas admita la existencia de estas estructuras pero apoyaban la teora que provenan de la descomposicin de los tejidos de las plantas o animales (eran el resultados de la descomposicin y no la causa). Los que apoyaban esta teora crean que la vida se generaba a partir de materia no viva, proceso que se denomin abiognesis. Bsicamente era el concepto de la generacin espontnea. Del otro lado estaba la teora de la biognesis. Los animliculos se originaban, como ocurre en formas de vida superiores, a partir de animliculos padres. En el siglo XVII el italiano Francesco Redi demostr en 1668 que los gusanos encontrados en la carne podrida eran las larvas que provenan de los huevos que previamente haban depositado en la carne las moscas y no el producto de la generacin espontnea. Sin embargo una cosa eran los huevos de moscas y otra los microorganismos que slo se podan ver con la ayuda del microscopio. En 1745 John Needham hirvi trozos de carne para destruir los organismos preexistentes y los coloc en un recipiente abierto. Al cabo de un tiempo observ colonias de microorganismos sobre la superficie y concluy que se generaban espontneamente a partir de la carne. En 1769, Lazzaro Spallanzani repiti el experimento pero tapando los recipientes, no apareciendo las colonias, lo que contradeca la teora de la generacin espontnea. Pero Needham argument que el aire era esencial para la vida incluida la generacin espontnea de microorganismos y este aire haba sido excluido en los experimentos de Spallanzani. Fue Louis Pasteur el que zanj definitivamente la controversia en 1864 al utilizar matraces con un tubo largo y curvado llamados "cuello de cisne". El aire pasaba libremente a travs del cuello, pero los microorganismos no aparecan en la solucin ya que las partculas de polvo y microorganismos sedimentaban en el recodo del cuello. Estos experimentos de Pasteur promovieron el reconocimiento de la biognesis. Posteriormente Pasteur empez a estudiar el papel de los microorganismos en la produccin de vino y como causa de enfermedades. Los ltimos escpticos quedaron silenciados cuando en 1877 John Tyndall (1820-1893) aplic su sistema de esterilizacin por calentamiento discontinuo (hoy conocida precisamente como tindalizacin), que evidenci la existencia de formas microbianas de reposo muy resistentes al calor, lo cual fue confirmado poco ms tarde por Ferdinand Cohn al descubrir las esporas bacterianas. El debate sobre los fermentos

Cagniard-Latour en 1836, y Schwann y Ktzing en 1837 haban sugerido que las levaduras eran las causantes de la fermentacin alcohlica por la que el azcar pasa a alcohol etlico y dixido de carbono, pero se encontraron con la crtica adversa de los grandes qumicos de la poca (Berzelius, Wohler y Liebig). . Puesto que se consideraba a las levaduras como plantas microscpicas, se supona que los procesos de fermentacin y putrefaccin se deban a fenmenos qumicos de descomposicin y muerte encuadrables en el marco de la teora mineral de la fisiologa vegetal. Su convencimiento de que toda actividad vital se poda explicar en trminos de qumica y fsica retras por algn tiempo la adscripcin de estos fenmenos a clulas vivas. 4

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Fue Pasteur, quien de nuevo intervino en el debate de forma decisiva. En 1857 demostr que los agentes de la fermentacion lctica eran microorganismos, trabajando sobre un problema que haba surgido entre los destiladores de Lille cuando en sus cubas la fermentacin alcohlica se vio sustituida por una indeseable fermentacin lctica. Una profundizacin en los fenmenos de fermentacin lleg cuando en 1897 Buchner obtuvo, a partir de levaduras, una preparacin enzimtica (zimasa) que era capaz de realizar la misma transformacin de "fermentacin" que las clulas vivas. Este descubrimiento, que evocaba las propuestas de Berzelius y Liebig, supuso en realidad la confluencia de los enfoques qumico y biolgico: las fermentaciones eran procesos qumicos catalizados por enzimas presentes dentro de clulas vivas, que podan ser estudiados extracelularmente. De esta forma, la Bioqumica, nacida como una rama de la qumica fisiolgica, que se vena especializando en la enzimologa, encontr una alianza fructfera y duradera con la joven Microbiologa. Los avances tcnicos

La doctrina del pleomorfismo, vigente durante buena parte del siglo XIX, mantena que los microorganismos adoptaban formas y funciones cambiantes dependiendo de las condiciones ambientales. A estas ideas se oponan frontalmente investigadores como Koch, Pasteur y Cohn, que estaban convencidos de la especificidad y constancia morfolgica y fisiolgica de cada tipo de microorganismo (monomorfismo). El pleomorfismo haba surgido como una explicacin a la gran variedad de formas y actividades que aparecan en un simple frasco de infusin. La solucin definitiva a esta cuestin dependa, de nuevo, de un desarrollo tcnico, que a su vez iba a suministrar una de las herramientas caractersticas de la nueva ciencia: los mtodos de cultivo puro. Los primeros cultivos puros fueron obtenidos por el miclogo Brefeld, quien logr aislar esporas de hongos y cultivarlas sobre medios slidos a base de gelatina. Lister, en 1878 realiz diluciones secuenciales de cultivos mixtos, hasta lograr muestras en las que exista una sola clula. Pero la tcnica era larga y tediosa y, adems, normalmente slo se lograban aislar clulas del tipo bacteriano ms abundante en el cultivo original. Por aquella poca Koch buscaba con ahnco mtodos ms sencillos de cultivo. Koch recurri a compactar el tpico caldo de cultivo a partir de carne (diseado por Loeffler aadindole gelatina (1881). El medio slido as logrado era transparente, lo que permita visualizar fcilmente los rasgos coloniales, y contena los nutrientes adecuados para el crecimiento de una amplia gama de bacterias. stas eran inoculadas en la superficie del medio con un hilo de platino pasado previamente por la llama, por la tcnica de siembra en estra. Sin embargo, la gelatina presentaba los inconvenientes de ser atacada por determinados microorganismos, y de tener un bajo punto de fusin; en 1882 el mdico alemn Walter Hesse, introdujo el agar-agar (polisacrido extrado de algas rojas) como nuevo agente solidificante. El trabajo de Koch ya citado tuvo la trascendental consecuencia de derribar las ideas pleomorfistas, y supuso la primera propuesta del concepto de especie dentro del mundo bacteriano. El desarrollo de los medios selectivos y de enriquecimiento fue una consecuencia de las investigaciones llevadas a cabo por Beijerinck y Winogradsky entre 1888 y los primeros aos del siglo XX, sobre bacterias implicadas en procesos biogeoqumicos y poseedoras de caractersticas fisiolgicas distintivas (quimioauttrofas, fijadoras de nitrgeno, etc.). Otra importante aportacin a este "perodo de cultivo" dentro del desarrollo de la Microbiologa surgi del uso de medios diferenciales, en los que se manifiesta algn rasgo bioqumico o metablico, lo que contribuye a la identificacin microbiana. Fue Wrtz quien, en 1892, 5

Mblgo. Vctor Guzmn Tripul Microbiologa introdujo el uso de indicadores de pH, incorporados en los medios, lo cual permita revelar la produccin de acidificaciones por fermentacin en ciertas bacterias. La industria ptica de Abb y Zeiss, que se mantena en conexin con la compaa vidriera Schott, pudo satisfacer la necesidad de Koch de perfeccionar el microscopio compuesto, introduciendo lentes acromticas y una iluminacin inferior provista de condensador. El mismo Abb desarroll en 1878 el objetivo de inmersin en aceite. Por otro lado, la industria qumica BASF, que por aquella poca se encontraba en pleno auge de patentes de nuevos colorantes, sumistr al laboratorio de Koch una serie de derivados de anilina que tean las bacterias permitiendo su fcil visualizacin al microscopio en frotis de tejidos infectados. . En aos sucesivos se fueron introduciendo el azul de metileno (Koch, 1877), la fuchsina, y el violeta cristal. En 1882-1883 Ziehl y Neelsen desarrollan su mtodo de cido-alcohol resistencia para teir Mycobacterium tuberculosis. En 1884 el patlogo dans Christian Gram establece una tincin de contraste que permite distinguir dos tipos bacterianos en funcin de su reaccin diferencial de tincin. En 1890 Loeffler logra visualizar flagelos bacterianos por medio de su tcnica de impregnacin argntica. Estas innovaciones tcnicas (mtodos de cultivo, microscopa y tinciones) fueron fundamentales (junto con los sistemas de esterilizacin abordados en el anterior apartado) para la consolidacin de la Microbiologa como ciencia, permitiendo eliminar las grandes dosis de especulacin que hasta entonces haban predominado. El papel de los microorganismos en las enfermedades.

Ya en 1546 Girolano Fracastoro haba sugerido que las enfermedades podan deberse a organismos tan pequeos que no podan verse y que eran transmitidos de una persona a otra. Oliver Wendell Colmes, medico exitoso, insista en 1843 que la fiebre puerperal, una grave y con frecuencia fatal enfermedad de la madre despus del parto , era contagiosa y que probablemente era causada por microorganismos transportados de una madre a otra o por comadronas y mdicos. Aproximadamente en la misma poca (1840) el medico hngaro Ignaz Phillip Semmelweis fue el pionero en el uso de procedimientos obsttricos que reducan las posibilidades de infecciones causadas por microorganismos. Es uno de lo pioneros en antisepsia Hacia mediados del siglo XIX otra enfermedad infecciosa (pebrina) comenz a diseminarse por los criaderos de gusano de seda de toda Europa. Pasteur llega finalmente, en 1869, a identificar al protozoo Nosema bombycis como el responsable de la epidemia, y por medio de una serie de medidas de control, sta comienza a remitir de modo espectacular. Pero fue Robert Koch (1843-1910), que haba sido alumno de Henle, quien con su reciente tcnica de cultivo puro logr, en 1876, el primer aislamiento y propagacin in vitro del bacilo del ntrax (Bacillus anthracis), consiguiendo las primeras microfotografas sobre preparaciones secas, fijadas y teidas con azul de metileno. Ms tarde (1881), Koch y sus colaboradores confirmaron que las esporas son formas diferenciadas a partir de los bacilos, y ms resistentes que stos a una variedad de agentes. Pero ms fundamental fue su demostracin de que la enfermedad se poda transmitir sucesivamente a ratones sanos inoculndoles bacilos en cultivo puro, obtenidos tras varias transferencias en medios lquidos. Esta serie de experimentos se ajustaban a los criterios necesarios para poder establecer la relacin causal entre un organismo especfico y una enfermedad especfica. Estos criterios se conocen como los postulados de Koch: 6

Mblgo. Vctor Guzmn Tripul Microbiologa 1. El microorganismo debe estar presente en todos los casos de la enfermedad. 2. El microorganismo debe ser aislado del hospedador enfermo y obtenerse en cultivo puro en el laboratorio. 3. La enfermedad especfica debe reproducirse cuando un cultivo puro del microorganismo se inocula a un hospedador susceptible sano. 4. El microorganismo debe ser recuperable de nuevo a partir del hospedador inyectado experimentalmente. Durante las dos dcadas siguientes la Microbiologa experiment una autntica edad de oro, en la que se aislaron y caracterizaron muchas bacterias patgenas. De esta forma, en la Escuela Alemana se aislaron los agentes productores del clera asitico ( Koch, 1883), de la difteria (Loeffler, 1884), del ttanos (Nicolaier, 1885 y Kitasato, 1889), de la neumona (Fraenkel, 1886), de la meningitis (Weichselbaun, 1887), de la peste (Yersin, 1894), de la sfilis (Schaudinn y Hoffman, 1905), etc. Igualmente se pudieron desentraar los ciclos infectivos de agentes de enfermedades tropicales no bacterianas que la potencia colonial se encontr en ultramar: malaria (Schaudinn, 1901-1903), enfermedad del sueo (Koch, 1906), peste vacuna africana (debida al ingls Bruce, 1895-1897), etc. Desarrollo de la asepsia, quimioterapia y antibioterapia

Los avances de las tcnicas quirrgicas hacia mediados del siglo XIX, impulsados por la introduccin de la anestesia, trajeron consigo una gran incidencia de complicaciones postoperatorias derivadas de infecciones. Un joven mdico britnico, Joseph Lister (1827-1912), que haba ledo atentamente los trabajos de Pasteur, y que crea que estas infecciones se deban a grmenes presentes en el aire, comprob que la aplicacin de compuestos como el fenol o el bicloruro de mercurio en el lavado del instrumental quirrgico, de las manos y de las heridas, disminua notablemente la frecuencia de infecciones post-quirrgicas y puerperales. Ms tarde, Paul Ehrlich (1854-1919), concibi la posibilidad de que algunos de los compuestos de sntesis que la industria qumica estaba produciendo pudieran actuar como "balas mgicas" que fueran txicas para las bacterias pero inocuas para el hospedador y en 1909 inform de que el compuesto 606 (salvarsn) era efectivo contra la sfilis. En 1874, el mdico ingls W. Roberts haba descrito las propiedades antibiticas de ciertos cultivos de hongos (Penicillium glaucum) contra las bacterias, e introdujo en Microbiologa el concepto de antagonismo. pero fue Fleming quien, en 1929, logr expresar ideas claras sobre el tema, al atribuir a una sustancia qumica concreta (la penicilina) la accin inhibidora sobre bacterias producida por el hongo Penicillium notatum. Fleming desarroll un ensayo crudo para determinar la potencia de la sustancia en sus filtrados, pudiendo seguir su produccin a lo largo del tiempo de cultivo, y mostrando que no todas las especies bacterianas eran igualmente sensibles a la penicilina. Inmediatamente comenz una bsqueda sistemtica de microorganismos del suelo que mostraran actividades antibiticas. En 1944 A. Schatz y S. Waksman descubren la estreptomicina, producida por Streptomyces griseus, En la dcada de los 60 se abri una nueva fase en la era de los antibiticos al obtenerse compuestos semisintticos por modificacin qumica de antibiticos naturales, palindose los problemas de resistencia bacteriana a drogas que haban empezado a aparecer, disminuyndose en muchos casos los efectos secundarios, y amplindose el espectro de accin. Desarrollo de la inmunologa 7

Mblgo. Vctor Guzmn Tripul Microbiologa El primer acercamiento a la inmunizacin con criterios racionales fue realizado por el mdico ingls Edgard Jenner (1749-1823), tras su constatacin de que los vaqueros que haban adquirido la viruela vacunal (una forma benigna de enfermedad que slo produca pstulas en las manos) no eran atacados por la grave y deformante viruela humana. El primer abordaje plenamente cientfico de problemas inmunolgicos se debi, de nuevo, a Pasteur. Estudiando la bacteria responsable del clera aviar (ms tarde conocida como Pasteurella aviseptica), observ (1880) que la inoculacin en gallinas de cultivos viejos, poco virulentos, las protega de contraer la enfermedad cuando posteriormente eran inyectadas con cultivos normales virulentos. De esta forma se obtuvo la primera vacuna a base de microorganismos atenuados. Fue precisamente Pasteur quien dio carta de naturaleza al trmino vacuna, en honor del trabajo pionero de Jenner. Aos despus, abordara la inmunizacin contra la rabia, enfermedad de la que se desconoca el agente causal. A finales del siglo XIX existan dos teoras opuestas sobre los fundamentos biolgicos de las respuestas inmunes. Por un lado, el zologo ruso Ilya Ilich Mechnikov (1845-1916), que haba realizado observaciones sobre la fagocitosis en estrellas de mar y pulgas de agua, estableci, a partir de 1883, su "Teora de los fagocitos", tras estudiar fenmenos de englobamiento de partculas extraas por los leucocitos de conejo y de humanos. Inform que existan fenmenos de eliminacin de agentes patgenos por medio de "clulas devoradoras" (fagocitos) que actuaban en animales vacunados contra el carbunco, y explic la inmunizacin como una "habituacin" del hospedador a la fagocitosis. Esta teora de los fagocitos constituy el ncleo de la teora de la inmunidad celular, de modo que la fagocitosis se consideraba como la base principal del sistema de defensa inmune del organismo. Por otro lado, la escuela alemana de Koch haca hincapi en la importancia de los mecanisnos humorales. Emil von Behring (1854-1917) y Shibasaburo Kitasato (1856-1931), a resultas de sus trabajos sobre las toxinas del ttanos y de la difteria, observaron que el cuerpo produce "antitoxinas" (ms tarde conocidas como anticuerpos) que tendan a neutralizar las toxinas de forma especfica, y evidenciaron que el suero que contiene antitoxinas es capaz de proteger a animales expuestos a una dosis letal de la toxina correspondiente (1890) La conciliacin de las dos teoras se debi a Almorth Wrigth y Stewart R. Douglas, quienes en 1904 descubren las opsoninas, anticuerpos presentes en los sueros de animales inmunizados y que, tras unirse a la superficie bacteriana, incrementan la capacidad fagoctica de los leucocitos. La inmunoqumica cobra un gran impulso en las primeras dcadas del siglo XX con los trabajos de Karl Landsteiner (1868-1943). Su primera contribucin de importancia haba sido la descripcin, mediante reacciones de aglutinacin, del sistema de antgenos naturales (ABC0) de los eritrocitos humanos (1901-1902), completada (en colaboracin con Von Dungern y Hirzfeld), con las subdivisiones del grupo A y el estudio de su transmsin hereditaria. Origen y desarrollo de la virologa

El botnico ruso Dimitri Iwanovski haba observado (1892) que la enfermedad del mosaico del tabaco poda ser reproducida experimentalmente usando el fluido que atravesaba los filtros de porcelana que normalmente retenan a las bacterias, pero siendo incapaz de aislar y crecer el supuesto microorganismo, abandon la investigacin. Pocos aos ms tarde (1898), y probablemente sin tener noticias del trabajo de Iwanovski, Beijerink realiz experimentos similares con el mismo sistema, y en otro rasgo de su genio, enfrentndose a los conceptos de la poca, avanz la idea de que el agente filtrable (un contagium vivum fluidum, segn su expresin), deba de incorporarse al protoplasma vivo del hospedador para lograr su reproduccin. Este tipo de agentes infectivos que atravesaban los filtros de porcelana fueron 8

Mblgo. Vctor Guzmn Tripul Microbiologa llamados en principio "virus filtrables", quedando ms tarde su denominacin simplemente como virus. Aquel mismo ao de 1898 Loeffler y Frosch descubren los virus animales al comprobar que un virus filtrable es responsable de la glosopeda del ganado. En 1901 Reed descubre el primer virus humano, el de la fiebre amarilla, y en 1909 Landsteiner y Pope detectan el de la poliomielitis. A comienzos de siglo Copeman desarrolla su tcnica de multiplicacin de virus animales en embriones de pollo, con la que P. Rous aisla y cultiva el virus del sarcoma aviar (1911). Los virus bacterianos fueron descubiertos en 1915 por F.W. Twort, si bien su trabajo no alcanz la elegancia y claridad del desarrollado poco ms tarde por el canadiense Flix d'Hrelle (1917); fue ste quien acu el trmino bacterifago Un importante avance metodolgico para el estudio de los virus animales se debi a Enders, Weller y Robbins (1949), al desarrollar por primera vez un mtodo para la multiplicacin virsica sobre cultivos de tejidos de mamferos, tcnica que fue perfeccionada ms tarde por el equipo de Renato Dulbecco. En aos recientes han sido descubiertos dos nuevos tipos de entidades infectivas, subvirsicas: T.O. Diener describi en 1967 la existencia de ARN desnudos infectivos en plantas, a los que llam viroides, y en 1981 Prusiner puso de manifiesto que determinadas enfermedades de mamferos se deben a partculas proteicas aparentemente desprovistas de material gentico, a las que bautiz como priones. El futuro La microbiologa, como ciencia experimental activa, tiene algo ms de 100 aos. Su pausa de progresos acelerados parece que contina. La microbiologa clnica y la virolgica necesaria resolver los problemas de resistencia a los antibiticos y la evolucin de nuevos virus; continua siendo un reto el control de las enfermedades infecciosas. La respuesta pueden ser nuevos antibiticos y otros agentes quimioterapicos, aunque algunos investigadores conceden mucha importancia a la mejora del sistema inmunitario natural. El camino que sigue los investigadores, cualquiera que sea, depender en gran medida de la tecnologa del DNA recombinante. Otra rea que se desarrollara rpidamente en el futuro es la microbiologa ambiental. Confiaremos de manera creciente en la biorremediacin, utilizando microorganismos para eliminar los compuestos qumicos txicos que hemos vertido a nuestro medio ambiente. El mundo subvisible de los microorganismos es enorme y diverso. Incluso, la mayora todava no han sido identificados o nombrados. Nos benefician de muchas maneras, pero persisten problemas no resueltos y surgen constantemente nuevos retos. Se requieren muchos ms microbilogos para atacar los problemas que aparecern seguramente a lo largo del siglo XXI.