Tcnicas de fabricacin de los liposomas

Existen diversas formas de elaborar liposomas. Todos los mtodos tienen en comn el siguiente fundamento: a partir de una suspensin de fosfolpidos en un medio hidrofbico, se elimina o se sustituye lentamente este disolvente por otro que sea hidroflico, por lo general una solucin acuosa, mediante procesos de dilucin, evaporacin o dilisis. Este cambio de disolvente provoca que los fosfolpidos se agrupen espontneamente entre ellos, y de esta manera forman bicapas esfricas y atrapan en el interior gran cantidad del medio acuoso en el que se encuentran. AL trabajar con frmacos o productos cosmticos hidroflicos, estos quedan atrapados en el interior de la bicapa; y los hidrofbicos quedan en la capa de fosfolpidos [10] Se deben tomar en cuenta varios aspectos a la hora de seleccionar los componentes y el mtodo de preparacin, para poder obtener liposomas con las caractersticas deseadas:

Cuanto ms elevada es la concentracin de los lpidos una mayor proporcin de la fase acuosa puede
ser atrapada.

La vida media de un liposoma se incrementa cuando aumenta la dosis de lpido. El ndice de encapsulacin aumenta al realizar la hidratacin ms lentamente. La adicin de fosfolpidos cargados incrementa la distancia entre las membranas lipdicas.
El mtodo de fabricacin deber elegirse, teniendo en cuenta sobre todo la composicin, el tipo de vescula y la naturaleza del principio activo que se pretende incluir en el sistema. [9] A continuacin se explicarn algunas tcnicas que son utilizadas para obtener liposomas MLV, SUV y LUV. La obtencin de liposomas del tipo MLV se puede llevar a cabo por el proceso de hidratacin, que consiste en la agitacin de una capa lipdica, formada previamente por evaporacin de una solucin de lpidos en un solvente orgnico. Este procedimiento se debe realizar por encima de la temperatura de transicin de fase de los lpidos. Este mtodo tiene la desventaja de que se obtienen vesculas heterogneas en cuanto a tamao y lamelaridad, pero con la tecnologa y procedimientos ms complejos se pueden obtener vesculas homogneas [11,12] Otro procedimiento muy rpido para la preparacin de liposomas consiste en la disolucin de una mezcla lipdica en etanol o ter, la cual se inyecta rpidamente en una solucin amortiguada apropiada, donde se van a formar espontneamente las vesculas, principalmente SUV. Posteriormente, se lleva a cabo una ultrafiltracin y se eliminan los restos de etanol o ter, segn sea el caso. [9,11] Una tcnica ampliamente utilizada para la obtencin de liposomas Unilamelares (SUV) es la eliminacin del detergente, consiste en la dispersin de los fosfolpidos en agua por formacin de micelas mixtas con la ayuda de agentes tensioactivos. La eliminacin del detergente se realiza, posteriormente, por centrifugacin, dilisis o filtracin. Mediante esta tcnica se obtienen poblaciones homogneas con

tamaos comprendidos entre 20 y 100 nm. Sin embargo, presenta la desventaja de la persistencia del tensioactivo en la preparacin, y genera problemas en las propiedades fsicas de los liposomas. [9] Para la obtencin de liposomas LUV, se utiliza la tcnica Infusin en ter, en la cual se debe inyectar una solucin etrea de un fosfolpido en otra solucin acuosa del agente activo a la temperatura de 55-66C o, a 30C a baja presin. Luego se elimina el disolvente por evaporacin, y as finalmente, se obtiene una cantidad heterognea de LUV (0,05 a 0,25 m), por ello se recurre generalmente a la filtracin para conseguir vesculas uniformes. [9] El mtodo de evaporacin inversin de fase (REV), basado en la rpida inyeccin de una solucin acuosa en una fase orgnica que contiene los lpidos, rinde vesculas en la suspensin acuosa con 0.1 a 1.0 m de dimetro y una capacidad de encapsular de hasta un 50%. Los pasos fundamentales de este mtodo son: la sonicacin, que resulta en una emulsin agua-en-aceite, seguida por un secado parcial a un gel semislido que es finalmente, convertido en una suspensin concentrada de vesculas mediante agitacin vigorosa. [11] Referencias [9] Clares, B. Tesis doctoral. Sistemas de Transporte y Liberacin de Frmacos de Aplicacin Tpica: Liposomas multilamilares portadores de Acetonido de Triamcinolona. Universidad de Granada, Espaa 2003. [10] Ball, E. Liposomas en Dermatologa. Dermatologa Venezolana, 1995; 33(1): 15-23. [11] Lanioa, M.E; Luzardoa, M.C; Labordea, R; et al. Las vesculas liposomales: obtencin, propiedades y aplicaciones potenciales en la biomedicina. Revista Cubana de Fsica, 2009; 26(1): 23-30.

Clasificacin de los liposomas

Los liposomas se clasifican segn su tamao, nmero de bicapas y la forma de obtenerlos. De acuerdo a sus caractersticas estructurales como nmero de bicapas y tamao se pueden clasificar en 2 tipos: Multilamelares (MLV) que tienen tamaos entre 0.110 m, estos a su vez se dividen en: REV (Vesculas obtenidas por Evaporacin en Fase Reversa), SPLV (Vesculas Plurilamelares Estables) y MVL (Liposomas Micromultivesiculares). El segundo tipo de liposomas son los Unilamelares, los cuales segn su dimetro se dividen en: Vesculas Unilamelares de dimetro pequeo (SUV) y Vesculas Unilamelares de dimetro grande (LUV). [8]

Liposomas Multilamelares Se caracterizan porque poseen mltiples compartimentos acuosos concntricos, separados entre s por un espacio acuoso de aproximadamente 5 nm de grosor. [9]

Liposomas Unilamelares Poseen un compartimento central polar y una sola bicapa lipdica. Vesculas Unilamelares de dimetro pequeo (SUV) Su tamao es menor q 100 nm. Suelen obtenerse por tratamiento de una suspensin de MLV con ultrasonidos.

Una elevada proporcin de fosfolpidos se encuentra en la capa externa. Dado que el porcentaje de encapsulacin es bajo, no se recomienda para molculas hidrosolubles puesto que el porcentaje de encapsulacin es bajo. Vesculas Unilamelares de dimetro grande (LUV) El tamao de estos liposomas vara entre 100500 nm. Presentan una elevada capacidad de encapsulacin. El elevado volumen del compartimento interno permite la encapsulacin de molculas hidrosolubles con eficacia. La importancia de estos liposomas es que son capaces de transportar una cantidad elevada de agua y por lo tanto, de principio activo hidroflico, por lo que son el tipo preferido como vehculo de frmacos [10] Referencias [8] Torell, M, Viscasillas, A, Del Pozo, A. Liposomas. Conceptos Generales y Relacin con las Estructuras Cutneas. Unidad de Tecnologa Farmacutica. Facultad de Farmacia. Universidad de Barcelona 2002; 21(9): 188-190. [9] Clares, B. Tesis doctoral. Sistemas de Transporte y Liberacin de Frmacos de Aplicacin Tpica: Liposomas multilamilares portadores de Acetonido de Triamcinolona. Universidad de Granada, Espaa 2003. [10] Ball, E. Liposomas en Dermatologa. Dermatologa Venezolana, 1995; 33(1): 15-23. noviembre 17, 2010 Publicado por eubamiranda | Uncategorized | Dejar un comentario Formacin de Liposomas En determinadas condiciones, los lpidos anfipticos, tales como los glicerofosfolpidos forman una estructura con dos capas de lpido. Los grupos de las cabezas polares estn en la interfase situada entre el medio acuoso y el lpido, y las colas hidrofbicas interaccionan formando un entorno que excluye el agua (Figura 12.19 c). Esta conformacin de bicapa es la estructura lipdica bsica de todas las membranas biolgicas. [7] Las bicapas lipdicas son estructuras extremadamente estables, mantenidas por las fuerzas hidrofbicas de las cadenas hidrocarbonadas y las interacciones inicas de las cabezas cargadas con el agua. De las interacciones de las cadenas hidrocarbonadas resulta la menor rea posible de stas que est en contacto con el agua, quedando as el agua excluida del interior de la bicapa. Si se disgrega, la bicapa muestra una tendencia a autoensamblarse, ya que los grupos hidrofbicos intentan establecer una estructura en la que se minimice el contacto entre el agua y las cadenas hidrocarbonadas, situacin que es la ms favorable desde el punto de vista termodinmico. Una bicapa lipdica se cierra sobre s misma formando una vescula esfrica que separa el espacio externo del compartimiento acuoso interno. Estas vesculas se denominan liposomas. Dado que las interacciones individuales lpido-lpido tienen bajas energas de activacin, los lpidos de una bicapa poseen una movilidad limitada: interrumpen y establecen

interacciones con las molculas circundantes, pero son incapaces de escapar fcilmente de la bicapa lipdica. (Figura 1). [7]

Figura 1. Lpidos en medio acuoso: a) anfiptico, b) seccin transversal de una micela, c) seccin trasversal de una bicapa lipdica, d) seccin transversal de un liposoma. [7]
Las molculas de fosfolpidos individuales intercambian fcilmente su posicin con la de molculas vecinas, lo que provoca una rpida difusin lateral en el plano de la membrana (vase Figura 12.20). Las cadenas aciladas grasas giran alrededor de sus enlaces carbono-carbono; de hecho, la rotacin es mayor cerca del metilo terminal, dando lugar a que la movilidad sea mayor en el centro que en la regin perifrica de la bicapa lipdica. Sin embargo, las molculas lipdicas individuales no pueden migrar fcilmente de una monocapa a la otra, movimiento transversal llamado flip-flop, a causa de las limitaciones ternodinmicas sobre el movimiento del grupo de la cabeza cargado a travs de la zona central lipoflica. As, las bicapas lipdicas, poseen una estabilidad y un estado de fluidez inherentes tales que las molculas individuales se desplazan rpidamentes por su propia monocapa, pero no se intercambian fcilmente con la monocapa adyacente. [7] El interior de las bicapas de la membrana es muy fluido y est en constante movimiento. Las cadenas acclicas de los fosfolpidos tienen un movimiento al azar y se intercalan con cadenas de la superficie opuesta. Cerca de los grupos de la cabeza de los lpidos la viscosidad aumenta significativamente. [7] Referencias [7] Devlin, T. Bioqumica: libro de texto con aplicaciones clnicas. Disponible en:http://books.google.com/books?id=p3DCb9lTLx8C&dq=formaci%C3%B3n+fisicoqu %C3%ADmica+de+liposomas&hl=es&source=gbs_navlinks_s. Reverte, 2004. Consultada el 15 de noviembre del 2010.