Fisiologia Vegetal

1. NUTRICIN MINERAL EN PLANTAS Objetivo Fijacin del nitrgeno Fisiologa de la nutricin Elementos esenciales Mecanismos de absorcin de iones por lasFunciones de los nutrientes minerales clulas de la raz (macro nutrientes) Toma de nutrientes por las hojas y otrasFunciones de los nutrientes minerales estructuras areas (micro nutrientes) Mtodos para el estudio de la nutricin Deficiencias minerales mineral Soluciones nutritivas REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS 1.1 Objetivo El objetivo primordial del estudio de la nutricin mineral es entender como la planta absorbe, transloca y utiliza los diferentes iones para cumplir con todas sus funciones fisiolgicas. Para adquirir el conocimiento sobre las necesidades nutritivas de las especies vegetales se dar una mirada a la participacin del suelo, la composicin elemental, los elementos que le son esenciales para su adecuado funcionamiento, la forma como estos son tomados y empleados y la caracterizacin de sus deficiencias. Adicional a esto debe tenerse claridad sobre el mecanismo de transporte de sustancias a travs del floema y el ciclo de los elementos en la naturaleza. 1.2 Fisiologa de la nutricin La casi totalidad del organismo vegetal se compone de tres elementos: carbono, hidrgeno y oxigeno. Hemos visto que el primero de ellos procede del anhdrido carbnico atmosfrico, y que el hidrgeno contenido en las sustancias orgnicas vegetales tiene su origen en el agua absorbida por la raz, mientras que el oxigeno procede en parte de esta agua y en parte de los gases atmosfricos C0 y O . Las plantas, sin embargo, no pueden vivir solamente con el aire y el agua, sino que tambin necesitan cierto nmero de elementos qumicos, que por lo general, le son proporcionados a expensas de las sustancias minerales del suelo y a travs del sistema radicular. Aunque estos elementos constituyen solo una pequea porcin del peso anhidro de la planta, frecuentemente del orden del 2-10%, no dejan por ello de ser fundamentales para el bienestar del vegetal, lo que explica sean considerados como elementos esenciales para la nutricin. Los elementos qumicos esenciales para la planta son 17: carbono, hidrgeno, oxigeno, nitrgeno, fsforo, azufre, calcio, potasio, magnesio, hierro, zinc, manganeso, cloro, cobre, boro, nquel y molibdeno. Uno de estos elementos, el nitrgeno aunque absorbido del suelo por las plantas, procede en ltima instancia del nitrgeno

atmosfrico, pero los elementos restantes se encuentran y proceden, por tanto, de los minerales que integran las rocas de la corteza terrestre. Con pocas excepciones, los elementos qumicos esenciales para el desarrollo vegetal parecen ser los mismos en todas las plantas superiores, y muchos de ellos son tambin necesarios para los dems organismos vivos. En determinados casos existen, sin embargo, algunos elementos que no parecen ser esenciales para aquellos y solo son para otro grupo de seres. 1.3 Mecanismos de absorcin de iones por las clulas de la raz Transporte a corta distancia 1.3.1 Transporte a corta distancia Transporte a larga distancia (xilema y floema)

Las sales del suelo no pueden entrar a la clula por difusin simple, pues como la membrana es semipermeable no permite, por definicin, que la atraviesen los solutos, sino slo los solventes; si las sales pudieran pasar por la membrana, atravesndola con el flujo del agua, al cesar la absorcin, por ejemplo en la noche, saldran de la clula segn la ley general de difusin, de la zona de mayor a la de menor concentracin, ya que en la vacuola hay una solucin mucho ms concentrada que en el suelo. Por otra parte, se ha comprobado experimentalmente que las sales no ingresan en proporcin al agua absorbida; si as fuese, una planta en clima caluroso absorbera ms nutrientes que en clima fresco. Al hablar de la absorcin de nutrientes debe distinguirse, desde luego, entre la de molculas y la de iones. La planta toma sus nutrientes minerales en forma inica, pero eventualmente absorbe molculas, sea por la hoja o la raz; este proceso es importante en la aplicacin de ciertos fertilizantes y pesticidas de uso general. El tamao de la molcula, que hasta cierto punto se correlaciona con el peso molecular, afecta la penetracin; las molculas muy grandes tienen muy poca posibilidad de entrar a la clula, pero aun en el caso de molculas pequeas tienen mayor penetracin, en igualdad de coeficiente de particin. Las sales minerales que estn disponibles con mayor facilidad para las races son las que se encuentran disueltas en la solucin del suelo, si bien su concentracin suele ser baja. A excepcin del carbono, las plantas terrestres toman los componentes esenciales de su biomasa del suelo. As, macronutrientes y micronutrientes son incorporados desde la solucin salina del suelo hasta el interior de las clulas, donde son almacenados, metabolizados o transportados a otras clulas, tejidos u rganos. Una caracterstica que comparten todas las clulas vivas es su capacidad de mantener en su interior iones y molculas notablemente fuera del equilibrio. En gran medida, esa propiedad se debe a las caractersticas estructurales y funcionales de la membrana plasmtica, plasmalema en las clulas vegetales. El plasmalema es algo ms que una doble capa lipdica compuesta por distintos tipos de fosfolpidos y esteroles; contiene distintos tipos de protenas, algunas de ellas con una marcada actividad enzimtica, a

travs de las cuales existe un continuo trfico de iones que permite a las clulas incorporar y acumular nutrientes, excluir iones o sustancias txicas, o intervenir en distintas respuestas a estmulos hormonales o medioambientales. No todos los iones se transportan a travs del plasmalema de la misma forma o a travs del mismo tipo de protena. Algunos son transportados y acumulados en condiciones cercanas al equilibrio, otros se transportan y se acumulan muy por encima o muy por debajo del mismo. En el primer caso se habla de transporte pasivo o difusivo; en el segundo, de transporte activo. Un ion se mueve de forma pasiva si lo hace a favor de la fuerza fsica que acta sobre l, denominada fuerza ion motriz. Un ion es transportado de forma activa si su movimiento se realiza en contra de dicha fuerza, para lo cual las clulas vivas emplean energa metablica. Saber calcular la fuerza ion motriz es imprescindible para distinguir ambos tipos de transporte. El transporte de iones, ya sea pasivo o activo, requiere energa, fsica en el primer caso y metablica en el segundo. En una clula, la fuente de energa es el metabolismo, que produce energa qumica y poder reductor. La energa metablica se transforma en energa til para el transporte de iones en las membranas a travs de la actividad de las bombas primarias. Estas bombas son protenas de membrana que mueven iones (masa y carga) en contra de su gradiente de potencial electroqumico, utilizando energa metablica y generando gradientes tanto de concentracin como elctricos. El transporte de iones que tiene lugar a travs de las bombas primarias se denomina transporte primario. Debido a la capacidad de las bombas primarias para generar diferencias de potencial elctrico al tiempo que catalizan la hidrlisis del ATP, las bombas primarias reciben el nombre de electroenzimas. Las clulas vegetales no tienen bombas Na+-K+ La bomba primaria del plasmalema es una bomba de protones que los saca del citoplasma y los vierte al exterior consumiendo ATP (ATP fosfohidrolasa de protones o H (Fig.). La energa metablica, en el caso de las membranas vegetales, se acumula en forma de asimetra en la concentracin de H+ y como diferencia de potencial elctrico entre el citoplasma y el exterior, es decir, como gradiente de potencial electroqumico de protones o fuerza W motriz:

En el caso de las clulas vegetales, el componente elctrico es mucho ms importante que la asimetra de concentracin por dos razones. En primer lugar, en el funcionamiento de la H no existe un flujo aso ciado de otro ion que compense, ni siquiera parcialmente como en clulas animales, el dficit de carga positiva del citoplasma. Esto hace que el potencial de membrana de las clulas vegetales sea muy negativo, entre - 160 y -250 mV segn la especie. En segundo lugar, la asimetra de protones que genera la bomba se disipa parcialmente debido a la capacidad amortiguadora del me dio externo, por un lado, y a los mecanismos de homeostasis del pH del citoplasma, por otro (Fig.). En la literatura bioqumica, las H+ ATPasa del plasmalema se denominan de tipo P

porque forman una unin covalente con el fosfato, proveniente del ATP, durante cada ciclo de bombeo de W al exterior. Debido a la particular unin con el Pi durante la catlisis, las H+-ATPasas del plasmalema son sensibles a la presencia de ortovanadato, ya que este ion bloqueara el lugar de unin para el fosfato. En vesculas aisladas del plasmalema, la presencia de concentraciones de este ion del orden micromolar (mM) inhibe la actividad de

Figura. Bomba Na de clulas animales y bomba de H (H en clulas vegetales. En las clulas animales la salida de carga positiva asociada al Na se compensa parcialmente por la entrada de K En clulas vegetales, el bombeo de H no est acoplado al flujo de ningn otro ion.

Figura. Flujo de protones y regulacin del pH citoplasmtico de una clula vegetal. 1) H de tipo P, bomba primaria que transforma energa metablica (ATP) en fuerza protn motriz (A en el plasmalema. 2) H ATPasa, tipo V, del tonoplasto. 3) Pirofosfatasa. 4) Sistema de cotransporte (simporte). 5) Sistema de transporte invertido o antiporte. 6) Canal aninico permeable al malato. 7) Fosfoenolpiruvato carboxilasa. 8) Enzima mlica.

La bomba, si bien in vivo la inhibicin es mucho ms pequea debido probablemente a la escasa permeabilidad de las membranas a este ion. Por esta razn, cuando se pretende una inhibicin de la bomba se usan inhibidores de la respiracin, cianuro o azida por ejemplo, que cortan el suministro de ATP a la bomba, incluso en clulas foto- sintticas iluminadas. Es importante destacar que la actividad de la H -ATPasa y, en consecuencia, el Em de las clulas vegetales, sean fotosintticas o no, se mantiene en oscuridad; por tanto, igual que en las clulas animales, el ATP que usan proviene mayoritariamente del metabolismo respiratorio. Adems de la H -ATPasa, las plantas poseen en el plasmalema un segundo tipo de bomba primaria. Se trata de una Ca -H ATPasa, que saca Ca del citoplasma al tiempo que incorpora H en un proceso igualmente dependiente de ATP. Esta bomba es tambin del tipo P ya que el bombeo de Ca requiere la formacin de un intermediario fosfatado durante la catlisis. La contribucin de esta bomba a la acumulacin de energa en el plasmalema es muy pequea ya que, adems de ser menos electrognica que la H ATPasa, es mucho menos activa que sta. Su funcin es evacuar Ca del citoplasma, para mantener su concentracin en tomo a 0.1 MM en este compartimento celular. El transporte secundario consume la energa acumulada en las membranas por las bombas primarias. El consumo de energa debido a la actividad del transporte secundario se refleja en la despolarizacin de la membrana. A diferencia del transporte primario, que genera una diferencia de potencial elctrico y es, por tanto, electro gnico, el transporte secundario disipa la diferencia de potencial acumulada en la membrana y es, por tanto, electrofortico. El transporte secundario de iones se establece a travs de dos tipos de protenas de membraa: canales inicos, en el caso del transporte pasivo, y transportadores (carriers), en el caso del transporte activo. Los canales son protenas que funcionan como poros selectivos en la membrana. Su distribucin es prctica mente universal en las membranas de todas las clulas y orgnulos celulares. En plantas se han descrito hasta la fecha distintos tipos de canales para K para Ca y para CL . Recientemente se han descubierto canales para el agua, denominados acuaporinas, especialmente abundantes en membranas sometidas a un flujo grande de agua. Los canales inicos no slo aparecen en el plasmalema, sino que tambin estn presentes en el tonoplasto, retculo endoplsmico, mitocondria, membrana interna del cloroplasto y membrana tilacoidal. Un canal de K tpico estara constituido por cuatro subunidades de entre 65 y 100 kDa que formaran el poro y que contendran un filtro de selectividad y sensores a distintos tipos de estmulos. A finales de los aos setenta, dos investigadores ale manes, Neher y Sakmann, usaron una tcnica nueva para el estudio de los flujos inicos en las membranas. Se trataba de, en vez de insertar electrodos muy finos dentro de las clulas, adherir un electrodo de punta roma a la superficie de stas. La tcnica se denomin patch-clamp y su aplicacin a clulas vegetales requie re disgregar las clulas del tejido y eliminar la pared celular mediante un tratamiento con diversas enzimas celulolticas. Se obtiene entonces una clula vegetal sin pared que se denomina protoplasto. La adhesin firme del electrodo a la superficie del protoplasto se llama sellado y se detecta por la alta resistencia que presenta al paso de la corriente elctrica, que se sita

alrededor de lO ohmios ( ). Mediante esta tcnica es posible medir la corriente asociada al flujo de iones a travs de la pequea superficie que queda sellada por el electrodo y que se debe a la actividad de unos pocos canales. Tambin es posible, haciendo un agujero en la membrana del protoplasto, registrar el paso de la corriente a travs de todo el plasmalema (Fig). Los experimentos de patch-clamp revelan que los canales estn abrindose y cerrndose continuamente a una velocidad altsima (Fig.). A esta propiedad de abrirse y cerrarse se denomina gating y la probabilidad de apertura refleja la actividad del canal. El flujo de iones a travs de los canales es, pues, un proceso discontinuo. La cantidad de iones que fluyen a travs de un canal cuando est abierto, est determinada por su conductancia y por la magnitud de la fuerza ion motriz.

Figura. Esquema de la configuracin de la pipeta y del protoplasto en un experimento de patch-clamp. La pipeta debe quedar firmemente adherida al exterior de la clula (sellado) tras lo cual, succionando o tirando, se puede acceder al interior de la clula (A) o retirar una pequea porcin del plasmalema (B). En el primer caso se registra la actividad de los sistemas de transporte de toda la clula y, en el segundo, la actividad de los que se encuentran incluidos en el pequeo trozo que se retira. La representacin grfica de la intensidad de corriente que atraviesa los canales en funcin del voltaje que se aplica da lugar a las denominadas curvas I-V (intensidad voltaje), cuya pendiente es una medida de la conductancia del canal (Fig.). Asumiendo que el flujo de iones a travs de la doble capa lipdica de las membranas es prcticamente nulo, la permeabilidad de una membrana para un determinado ion es un valor integrado del nmero de canales, su conductancia y su actividad (gating). Tanto en el plasmalema como en el tonoplasto, los canales ms abundantes son los de K+ A diferencia de los canales de K+ de clulas animales, los de las plantas son

permeables a un gran nmero de cationes monovalentes. Por ejemplo, en Nitella, en orden decreciente, los canales de K son permeables a Rb+ NH Na4+ Li+ y Cs+. La actividad de los canales es sensible a una serie de estmulos ambientales o fisiolgicos. En el plasmalema existen canales aninicos que responden a la turgencia y a la hiperpolarizacin, de forma que cuando la membrana sobrepasa un determinado valor negativo de Em o la turgencia es demasiado alta, los canales aninicos se abren, dejan escapar una cierta cantidad de CI- que despolariza la membrana, se libera K y, como consecuencia, se elimina agua. La concentracin de Ca2+ en el citoplasma es determinante para la regulacin de los canales tanto del plasmalema como del tonoplasto. Un incremento en la concentracin de Ca2+ libre en el cito plasma de las clulas oclusivas, como respuesta a oscuridad o al ABA, induce el cierre de canales de entrada de K+ y la apertura de canales de salida de K+ y de canales aninicos, lo que determina la prdida de turgencia de las clulas oclusivas y, en consecuencia, el cierre del estoma. El mximo de Ca2+ que induce el cierre de los estomas puede estar ocasionado por la activacin de protenas G, inositol 1 ,4,5-trifosfato (IP3) o ABA, ya que inducen la entrada de Ca2+ en el citoplasma y, en el caso del IP3 la liberacin de Ca2+ de la vacuola (vanse Captulos 18 y 22). Los iones alcanzan la zona de absorcin de la raz por difusin a travs de la solucin salina del suelo, son arrastrados por el movimiento del agua hacia la raz o entran en contacto con las zonas de absoicin a medida que la raz creee. Los nutrientes minerales se distribuyen por toda la planta a travs del xilema. impulsados por la corriente ascendente de agua que genera el (lujo de transpiracin (vase Captulo 3). As. tic la misma forma que el agua debe tntnsportarse radialmente en la raz para alcanzar el xilema. los iones siguen un camino similar. Al igual que el agua. el transporte radial de iones por la raz tiene lugar a travs del apoplasto y del simplasto .

Figura. Esquema de las vas simplstica y apoplstica para la incorporacin de nutrientes a travs de la raz. En la primera, los iones son incorporados a travs de los pelos radicales u otras clulas de la epidermis y transportados clula a clula hasta los elementos conductores del xilema. La va apoplstica contempla la posibilidad de un transporte extracelular de los iones hasta la endodermis, donde la existencia de una banda impermeable en el apoplasto, la banda de Caspari, obliga al paso a travs del

plasmalema. Una vez en el periciclo, los iones pueden seguir la va extracelular hasta los elementos conductores del xilema. Las clulas vegetales estn separadas por la pared celular, que forma una matriz porosa continua denomina da espacio libre aparente, espacio periplsmico o apoplasto. Agua, iones y molculas de pequeo tamao pueden difundir libremente a travs del apoplasto, de forma que, en teora, un ion puede viajar radialmente en la raz por esta va (Fig.). A lo largo de este recorrido, los iones pueden ser absorbidos por las clulas tanto de la epidermis como del crtex. La existencia de la banda de Caspari en las clulas de la endodermis supone una barrera infranqueable en el camino hacia el xilema: tanto agua como nutrientes deben obligatoria mente atravesar el plasmalema de las clulas que componen la endodermis. La permeabilidad, selectividad y afinidad de los canales y transportadores localizados en el plasmalema de las clulas de la endodermis determinan, en ltima instancia, qu solutos y a qu velocidad se incorporan o se liberan. Otra va posible para la entrada de iones es la sim- plstica (Fig.). En este caso, los iones son primero incorporados a las clulas de la epidermis o, incluso, del crtex y luego son transportados, clula a clula, a travs del crtex, la endodermis y el periciclo hasta el xilema. El transporte de una clula a otra incluira el paso a travs del plasmalema, la pared celular, la lmina media que comparten ambas clulas o, de forma alternativa, los iones pueden transportarse de una clula a otra a travs de los plasmodesmos, que son conexiones tubulares (de 20 a 60 nm de dimetro) entre clulas, que atraviesan la pared celular y la lmina media y que ponen en contacto los citoplasmas de dos clulas adyacentes en la mayora de las plantas. Dentro de los plasmodesmos hay otro tubo que parece estar ocluido, de nominado desmotbulo, formado por membranas del retculo endoplsmico, que se extendera as de una clula a otra. La densidad de plasmodesmos es muy alta, unos 15 por im y, cuantitativamente, parecen ser la va principal para el transporte transcelular de agua e iones. La existencia de micorrizas confiere a las plantas cierta ventaja para la absorcin y el transporte de iones. En primer lugar, los sistemas de transporte del hongo tienen, con frecuencia, una mayor afinidad para determinados iones. En tal caso, una plan ta con micorrizas puede extraer del suelo algunos nutrientes a concentraciones ms bajas de lo que sera capaz una raz sin ellas. Tal es el caso del fosfato. En segundo lugar, las micorrizas representan una considerable extensin de la zona de absorcin, que no quedara ya reducida a la porcin subapical, con pelos radiculares, de la raz. Por ltimo, la distribucin intrarradical de las hifas del hongo, especialmente en el caso de las endomicorrizas, proporciona una va rpida de trans porte de agua e iones hasta el xilema como alternativa a la simplstica y la apoplstica.

1.3.2 Transporte a larga distancia Transporte a travs del xilema Transporte por el floema Transporte lateral Circulacin

1.3.2.1 Transporte a travs del xilema Los estudios realizados por Scout y Hoagland (1939), en los que se utilizo potasio radioactivo para que la planta lo absorbiera y luego observar a que sectores de la planta se haba trasladado y a travs de que tejido, se demostr claramente como el potasio es transportado a travs del xilema en direccin ascendente. Los iones son transportados disueltos en el flujo de agua producido cuando la planta transpira, aunque la movilidad de los iones pueda estar fuertemente influenciada por fuerzas de adhesin a las paredes de los vasos, o por gradientes de potencial entre sectores internos del sistema de flujo, se considera que el transporte de iones es pasivo a la corriente transpiratoria. Por otro lado cuando en plntulas la transpiracin es insuficiente para producir el flujo de agua, y cuando en las plantas se interrumpe la transpiracin, los solutos son transportados con direccin a los rganos de asimilacin, de aqu parte la idea de que la transpiracin no es esencial para el transporte de iones. Sin embargo Lophusinsky observo que cuando se incrementa la tasa transpiratoria, se incrementa la absorcin y el transporte de iones, aunque el flujo de nutrientes no incrementa de la misma forma que el flujo de el agua. Aun no se a podido explicar esta respuesta; no se sabe si solamente se debe a que aumenta el arrastre del solvente, o si se crea un gradiente de potencial entre el suelo y la estela, que incrementara la difusin de solutos al interior de la planta. 1.3.2.2 Transporte lateral En el experimento de Scout y Hoagland (1939) se observo un movimiento lateral de iones entre el xilema y el floema a travs del cambium, segn Biddulph (1959) esto se produce debido a la acumulacin de iones en las clulas de el cambium, obstruye el arrastre pasivo de iones en el xilema, arrastrando los iones a travs de el cambium, si hay diferencia de concentraciones entre el floema y el cambium, hay flujo de iones, mientras que si no hay diferencia, no se produce el flujo. 1.3.2.3 Transporte por el floema Estudios con marcadores radioactivos, muestran como el transporte descendente de iones es realizado a travs del floema, y tambin un transporte ascendente aunque muy poco. Biddulph y Markle (1944) estudiaron la procedencia de estos iones y concluyeron que los iones que son movilizados a travs del floema no tienen relacin la absorcin de la raz, sino que proceden de las hojas que movilizan los nutrientes para ser reutilizados por hojas jvenes, inmediatamente antes de que comiencen a caer. 1.3.2.4 Circulacin Generalmente los iones bsicamente se movilizan de manera ascendente por el xilema (los provenientes de la absorcin) y en menor medida por el floema (los provenientes de las hojas viejas), descienden por el floema (iones que salen de las hojas), y su

movimiento lateral (entre xilema y floema) a travs del cambium. Esta circulacin como patrn general de la forma como los nutrientes circulan en la planta, esta sustentada en los resultados obtenidos durante dcadas de experimentacin, lo que ha contribuido a establecer esta teora como un principio natural y general en las plantas 1.4 Toma de nutrientes por las hojas y otras estructuras areas Los nutrientes generalmente se aplican al suelo para ser absorbidos por la raz, pero la planta tambin lo hace por la hoja lo que tiene ciertas ventajas: economa, para evitar algn factor edfico, para tener una respuesta ms rpida, etctera, Ej. cuando la deficiencia del suelo en N o P es muy grande, no puede darse la cantidad total del elemento en aspersin foliar, pues resultara una solucin con excesiva presin osmtica y provocara efectos nocivos; pero en concentraciones menores y adiciones parciales de N, P y K pueden darse. La entrada de los fertilizantes en aspersin foliar ocurre a travs de los estomas y la cutcula, pero se discute cul camino es ms importante. Un factor importante es el ngulo de contacto con la solucin aplicada y la superficie mojada; en cambio, no juega papel importante la adicin de emulsionantes o humectantes, a diferencia de lo que ocurre con la entrada de molculas de pesticidas. En general, las hojas jvenes absorben mejor que las viejas. El N de la urea es absorbido y transportado rpidamente. Aunque sta es una aspersin muy usada, se conoce poco de sus mecanismos.El transporte de los iones absorbidos foliarmente no se hace por el xilema sino por el floema. Respecto a la respuesta de los cultivos con aspersin foliar; en pia, es tan efectiva como la aplicacin al suelo. La caa de azcar absorbe bien la urea, P y sacarosa. En rboles frutales vara la reaccin: en ctricos, las aplicaciones de urea, Mg y oligoelementos son muy efectivas: en manzano son eficaces, pero no por igual en todas las variedades; en perales y drupceos o frutos de hueso, la aplicacin de urea es inefectiva, sin conocerse la causa. En los frutales no se puede aplicar potasio, pues habra que aspersar con soluciones muy concentradas para dar la cantidad requerida. En hortalizas y otros cultivos se evitan deficiencias de Ca y Mn; los elementos N, P y K pueden darse, pero no parece ser ventajoso con respecto a la aplicacin al suelo; sin embargo, la aspersin foliar es til si se aplica al empezar la floracin o fructificacin. 1.5 Mtodos para el estudio de la nutricin mineral Desde 1804, los cientficos empezaron a darse cuenta de que las plantas requieren de calcio, potasio, azufre, fsforo y hierro. Despus, hacia 1860, fisilogos vegetales alemanes reconocieron la dificultad de determinar los tipos y cantidades de elementos esenciales para el crecimiento vegetal en un medio tan complejo como es el suelo. Por ello procedieron a cultivar plantas con la raz inmersa en una solucin de sales minerales (solucin nutritiva) de composicin qumica controlada y limitada solo por el grado de pureza de los compuestos disponibles en aquel entonces. El cultivo de plantas en esta forma se conoce como hidropona, cultivo sin suelo o cultivo en solucin. Mas tarde otros investigadores demostraron que muchas plantas crecen mejor si la raz esta ventilada. A medida que se desarrollaron tcnicas de purificacin de aguas y sales para cultivos hidropnicos se hizo posible un control ms exacto de los elementos accesibles

para la planta. Esto resulto de importancia especial para varios elementos que se requieren en cantidades muy pequeas (traza), la tcnica de cultivo en solucin tiene desventajas; una de ellas es la necesidad de airear la raz. Otra es la necesidad de reemplazar o complementar la solucin cada pocos das si s pretender conseguir el crecimiento mximo; esto se debe a que la composicin de la solucin cambia de manera continua, ya que ciertos iones se absorben ms rpido que otros. Para evitar algunos problemas en los cultivos lquidos muchos fisilogos utilizan arena de cuarzo blanco o perlita como soporte de las races. Las soluciones nutritivas simplemente se vierten o se les hace gotear a intervalos adecuados en cantidades considerables. Para algunos estudios en los que es necesario medir la captacin de iones por la raz los cultivos en solucin constituyen el nico mtodo adecuado. 1.6 Soluciones nutritivas El principal medio mineral de las plantas es el suelo: sin embargo. el suelo es un medio muy heterogneo que presenta de un lugar a otro grandes variaciones, tanto qumicas como fsicas y biolgicas dependiendo del material que forma la roca madre, del clima, topografa, edad y factores biolgicos. Por tanto, no tardaron mucho tiempo los cientficos en darse cuenta de la imposibilidad de emplear suelos como medio para el crecimiento de plantas. Si se quiere realizar algn tipo de estudio serio sobre nutricin mineral. Las soluciones nutritivas representan un medio excelente para regular la cantidad y la proporcin relativa de la sales minerales suministradas a las plantas en cualquier experimento. En una solucin de cultivo tpica, las plantas se mantienen con las races sumergidas en la solucin que contiene los elementos nutritivos. Es necesario que la solucin se mantenga oxigenada mediante burbujeo de aire, los nutrientes y el pH de la solucin dentro de niveles adecuados y otras condiciones como luz y temperatura. Desde comienzos del siglo XX, muchos investigadores concentraron sus esfuerzos en la consecucin de la mejor solucin nutritiva para el crecimiento de plantas en general o al menos para una especie dada. Pronto se hizo evidente que no exista tal frmula ptima. El anlisis de los resultados demostr que tal objetivo era imposible de conseguir ya que para una misma especie se encontraba que distintas soluciones podan ser las ptimas segn la estacin del ao en que se realizase el experimento o segn se modificasen las condiciones experimentales de longitud del da, temperatura, intensidad de iluminacin, etc. De hecho es lgico que as ocurra, ya que en condiciones naturales igual crecimiento ptimo puede obtenerse para un determinado cultivo en varios suelos frtiles, aunque su composicin sea distinta. En la tabla 1 se da la composicin de algunas de las soluciones nutritivas ms utilizadas. En todas las soluciones se suministran siempre tres macronutrientes en forma de cationes: potasio, calcio y magnesio. Otros tres aparecen siempre en forma aninica: nitrato, fosfato y sulfato. Todos los macronutrientes, por tanto, pueden ser suministrados por tres sales como nitrato clcico, fosfato potsico y sulfato magnsico: sin embargo, a la hora de preparar soluciones nutritivas se aaden al menos cuatro sales, ya que esto permite una mayor flexibilidad al establecer las proporciones entre los distintos iones. Adems de los macronutrientes, debe prepararse tambin una solucin de

micronutrientes. En las soluciones nutritivas ms antiguas, como las de Knop y Crone, no se tena en cuenta este factor, ya que por aquel tiempo se desconoca la necesidad de estos componentes; de todas formas, todos se suministraban en las soluciones nutritivas, bien aportadas por el agua que se utilizaba o bien como contaminantes de las sales que se aadan. El pH de las soluciones del suelo oscila entre valores por debajo de 4 en los suelos ms cidos, hasta valores algo por encima de 8 en los ms alcalinos. Algunas especies vegetales estn adaptadas a vivir en estos valores extremos de pH, aunque la mayora slo presentan un crecimiento aceptable para valores de pH entre 5 y 7, por lo cual estos son los valores de pH entre los que oscilan todas las soluciones nutritivas TABLA 1 Composicin de algunas soluciones nutritivas utilizadas en nutricin mineral

Solucin de Knop
KNO3 Ca (NO 3)2 KH2PO4 MgSO4 7 H20 FePO4

g/l
0,2 0,8 0,2 0,2 0,1

Solucin de Crone
KNO3 Ca3 (PO4)2 CaSO4 Fe3(PO4)2 7 H20 MgSO 7 H20

g/l
1 0,25 0,25 0,25 0,25

Solucin de Hoagland y Arnon (macronutrientes)

KNO3 Ca (NO 3)2 NH4H2PO4 MgSO 7 H20

g/l
1.02 0,492 0,23 0,49

Solucin de Hoagland Arnon (micronutrientes)

H3BO3 MnCl2 4 H20 CuSO4 5 H20 ZnSO4 7 H20 H2MoO4 H20 FeSO4 7 H20 0,5% Ac. tartrico 0,4%

mg/l
2,86 l,8l 0,08 0,22 0,09 0,6 ml l a 3 veces/semana

La importancia del pH en las soluciones nutritivas es grande, ya que ejerce una

influencia considerable en la solubilidad de varios componentes. As, el ion frrico (Fe 3+) a pH 8 precipita como hidrxido frrico Fe (OH) con lo que el hierro deja de ser asequible a la planta que crece en esa solucin y aparecen sntomas de carencia en ese elemento. Con valores de pH por encima de 7, ciertos elementos como Cu Zn o Mn tampoco son asequibles a la planta que crece en esa solucin. Sin embargo, el problema se resuelve si son aadidos como sales del agente quelante EDTA (Fig. 4). En estas condiciones se mantienen en solucin y, por tanto, son perfectamente asequibles para las plantas. Tambin pueden utilizarse para mantener el pH de una solucin nutritiva cambiadores inicos. Otro aspecto del pH es el efecto que los iones hidrgeno e hidroxilo tienen sobre las membranas de las clulas corticales de la raz, afectando la absorcin activa de iones.

Figura 4. Quelato Zn-EDTA. a) Estabilizan elementos estructurales; b) Neutralizan la carga elctrica en un metal, de modo que pueda ser llevado por fases lpidas, en concentraciones altas, que no se podran alcanzar de otro modo; c) Ayudan a controlar la reactividad del ion; d) Por su estabilidad contribuyen para acumular el ion. Otro aspecto importante a considerar en las soluciones nutritivas es su potencial osmtico. Cuanto mayor sea la concentracin de solutos menor ser el potencial hdrico del agua en la que estn disueltos; esto quiere decir que la tendencia del agua a difundir disminuye por la presencia de solutos. Los potenciales osmticos ms corrientes de plantas que crecen en medios no salinos oscilan entre -10 y -20 bares; mientras que los potenciales osmticos de las soluciones nutritivas oscilan entre -0,5 y -l bar. Los potenciales osmticos de las soluciones del suelo en reas no salinas y bajo condiciones de suministro adecuado de agua, raramente son inferiores a -2 bares. Por tanto, y teniendo en cuenta que el movimiento del agua entre dos soluciones siempre es en el sentido de mayor a menor potencial hdrico, los potenciales osmticos de las soluciones nutritivas en condiciones normales no suponen un obstculo a la entrada del agua en las plantas. A veces, ciertas dificultades aconsejan introducir algunas modificaciones al preparar las soluciones nutritivas. Las ms frecuentes son los llamados cultivos de arena o de grava, Que consisten en la preparacin de un medio de soporte inerte formado por arena lavada, grava o material plstico, cuya misin es actuar como soporte de la planta que es peridicamente irrigada con la solucin nutritiva, bien vertindola sobre su superficie, dejndola gotear sobre su superficie u obligndola a subir desde el fondo del recipiente mediante un sistema de bombeo. De los tres mtodos, el primero es el ms fcil de manejar pero permite poco control.

El cultivo por goteo puede regularse de modo que la cantidad de solucin que va entrando sea la misma que la que drena del recipiente. Este mtodo permite un suministro continuo de lquido nutritivo y un control parcial de la cantidad de nutrientes que llegan al sistema radicular. El ltimo Sistema, la subirrigacin, puede ponerse en marcha automticamente y suministra tambin un control parcial de la cantidad de nutrientes que llegan a las races de las plantas. Este sistema es el ms conveniente de los tres, pero es el que plantea ms dificultades y es el ms caro de los montajes. Estas tcnicas presentan dos grandes dificultades. En primer lugar no son aconsejables para estudios de micronutrientes, ya que los soportes inertes pueden aportar algn contaminante que invalida los resultados. En segundo trmino, cuando se quiera obtener races para analizarlas, parte del sistema radical puede perderse al tratar de separar lo del soporte slido. Estas tcnicas son particularmente aconsejables para la produccin comercial de plantas alimenticias u ornamentales. IMPORTANCIA DEL pH El pH del suelo es un factor muy importante en la nutricin y, en general, en la vida de la planta; los cultivos toleran mejor la alcalinidad y se considera que los suelos cultivables tienen un pH entre cinco y nueve. Puede considerarse que el pH del suelo es importante por cuatro razones: a) por causar deficiencias de algunos elementos en la planta; b) por inducir exceso nocivo de ciertos elementos en la planta; c) por favorecer a ciertos patgenos, y d) por un efecto directo en el desarrollo del vegetal. Con pH alcalino, el hierro adquiere forma inasimilable para la planta, y el calcio y sodio se concentran hasta en un 15% y al agregar NaOH y Ca(OH) producen presiones osmticas altas que impiden el crecimiento de las plantas, excepto de las halofitas. Por el contrario, en suelos con pH seis o menor, el fsforo se vuelve poco asimilable; el calcio, sodio y magnesio se lavan en exceso, y se puede producir intoxicacin por exceso de hierro y aluminio. Por otra parte, algunos patgenos son muy susceptibles al pH del suelo, como Plasmodiophora brassicae, que causa la "pudricin" de la col, y el hongo que produce la actinomicosis de la papa. Las sales del suelo no se encuentran en solucin, sino absorbidas en las partculas edficas; arcilla y materia orgnica pueden fijar en su superficie cationes o aniones que son intercambiados en la interfase slido-lquido. Cuando se agrega una solucin al suelo, los cationes de la solucin pueden reemplazar a los que estaban absorbidos. Solamente una fraccin del elemento en el suelo es activa y se busca en la solucin de equilibrio. La cantidad total del elemento en el suelo le da una presin de disolucin que interacciona con otros factores de solubilidad en el suelo (estructura, textura, etctera). A menudo no hay correlacin entre el fsforo del suelo y la respuesta de la planta, lo cual se debe a que con pH cido decrece la cantidad de fsforo disponible. El azufre proviene, en parte, de restos orgnicos y, por otra, de material inorgnico como yeso (CaSO 2H2 O) pirita y sulfatos de K+, Na+ y Mg.

En las soluciones nutritivas la importancia del pH es grande, ya que ejerce una influencia considerable en la solubilidad de varios componentes. As, el ion frrico (Fe 3+) a pH 8 precipita como hidrxido frrico Fe (OH) con lo que el hierro deja de ser asequible a la planta que crece en esa solucin 1.7 Fijacin del Nitrogeno Tradicionalmente, desde los tiempos de Liebig, los elementos encontrados en las plantas se dividen en mayores, si se encuentran en cantidades relativamente altas (N, P, K, S) y menores, cuando estn presentes en muy pequeas cantidades (Cu, Fe, Mg; etc.). Sin embargo, debe tenerse muy claro el concepto de que esta divisin no implica importancia metablica, pues si un elemento menor como el cobre o el molibdeno es esencial, su carencia determinar el desarrollo anormal de la planta aunque slo se necesitan pocos miligramos por kilogramo de tejido. Los elementos qumicos que se encuentran en las clulas vegetales pueden ser muchsimos, pero el hecho de encontrar un elemento en una planta no es suficiente para concluir que sea esencial para su vida, ya que los minerales son absorbidos principalmente por intercambio inico del medio, de acuerdo a leyes fsicas y no a la importancia que tengan en el metabolismo. Para considerar que un elemento dado es esencial, es preciso demostrar (criterio de Arnon): 1. Cuando en ausencia de un determinado elemento la planta no puede completar su ciclo biolgico. 2. La accin del elemento debe ser especfica, es decir, ningn otro elemento puede sustituirlo totalmente. 3. El elemento debe estar implicado directamente en la nutricin vegetal, bien como constituyente de un metabolito esencial, o que sea requerido para el funcionamiento de un enzima. Bollard y Butier diferencian entre elemento esencial segn el criterio de Amon y elemento funcional que es aquel que acta de modo preciso en el metabolismo, sea o no esencial. Si un trozo de material vegetal fresco se seca en una estufa a 105 C durante 24 horas, el material seco resultante constituir solo aproximadamente el 15 por l00 del peso fresco inicial. Entre el 90 y el 95 por 100 de este residuo seco estar constituido por tres elementos, carbono, oxgeno e hidrgeno, procediendo los tres del aire y del agua. El resto del material seco constituye lo que denominamos el contenido mineral de la planta y que es tomado por sta del suelo. Un anlisis qumico de un vegetal nos revelar la presencia de un gran nmero de elementos qumicos; algunos de ellos sern esenciales para la vida del vegetal mientras que otros no lo sern. La presencia de estos ltimos es debida a que los mecanismos de absorcin no son capaces de seleccionar entre uno y otros. Hasta mediados del siglo XIX los cientficos no dispusieron de un mtodo que les permitiera conocer qu elementos eran esenciales) cules no; este mtodo fue el de la preparacin de medios de cultivo de composicin conocida, en los cuales poda eliminarse un elemento y ver su efectos sobre el desarrollo vegetal. De esta forma ha

podido establecerse que adems del carbono, hidrgeno oxgeno otros 13 elementos (tabla 2) son esenciales para el desarrollo de las plantas. Estos elementos esenciales pueden a su vez subdividirse en macro nutrientes y micro nutrientes, segn que sean requeridos por los vegetales en grandes o pequeas cantidades. Entre los macro nutrientes tenemos: Nitrgeno, fsforo, potasio, azufre, calcio y magnesio. La lista de los micro nutrientes est formada por los siguientes elementos: manganeso, boro, hierro, zinc, cobre, cloro, nquel y molibdeno. TABLA 1 Elementos esenciales y concentraciones adecuadas en plantas Concentracin en Forma utilizable Numero relativo de tomos Elemento tanto por 100 en el por la planta en relacin con el molibdeno tejido seco Molibdeno Nquel Cobre Zinc Manganeso Hierro Boro Cloro Azufre Fsforo Magnesio Calcio Potasio Nitrgeno MoO4 Ni Cu Cu Zn Mn Fe , Fe BO , B O Cl SO4 H PO Mg Ca K HPO 0.00001 0.0001 0.0006 0.0020 0.0050 0.010 0.002 0.010 0.1 0.2 0.2 0.5 1.0 1.5 1 1 100 300 1.000 2.000 2.000 3.000 30.000 60.000 80.000 125.000 250.000 1.000.000

NO NH Oxgeno 45 30.000.000 O H O Carbono 45 35.000.000 CO Hidrogeno 6 60.000.000 H O Modificado de F. B. Salisbury y C. W. Ross, Plant Physiologv, Wadsworth Pu. Co. Inc. Belmont, 1969. Todo elemento esencial es tambin funcional, aunque a veces sea oscuro su papel y en cul molcula activa se incluye Los elementos pueden funcionar: a) como constituyentes celulares; b) como enzimas o coenzimas; c) como antagnicos en el balance metablico; d) como amortiguadores de pH, y e) como factores osmticos. 1.8 Elementos esenciales Tradicionalmente, desde los tiempos de Liebig, los elementos encontrados en las plantas se dividen en mayores, si se encuentran en cantidades relativamente altas (N, P, K, S) y menores, cuando estn presentes en muy pequeas cantidades (Cu, Fe, Mg; etc.). Sin embargo, debe tenerse muy claro el concepto de que esta divisin no implica

importancia metablica, pues si un elemento menor como el cobre o el molibdeno es esencial, su carencia determinar el desarrollo anormal de la planta aunque slo se necesitan pocos miligramos por kilogramo de tejido. Los elementos qumicos que se encuentran en las clulas vegetales pueden ser muchsimos, pero el hecho de encontrar un elemento en una planta no es suficiente para concluir que sea esencial para su vida, ya que los minerales son absorbidos principalmente por intercambio inico del medio, de acuerdo a leyes fsicas y no a la importancia que tengan en el metabolismo. Para considerar que un elemento dado es 1. Cuando en ausencia de un determinado elemento la planta no puede completar su ciclo biolgico. 2. La accin del elemento debe ser especfica, es decir, ningn otro elemento puede sustituirlo totalmente. 3. El elemento debe estar implicado directamente en la nutricin vegetal, bien como constituyente de un metabolito esencial, o que sea requerido para el funcionamiento de un enzima. esencial, es preciso demostrar (criterio de Arnon): Bollard y Butier diferencian entre elemento esencial segn el criterio de Amon y elemento funcional que es aquel que acta de modo preciso en el metabolismo, sea o no esencial. Si un trozo de material vegetal fresco se seca en una estufa a 105 C durante 24 horas, el material seco resultante constituir solo aproximadamente el 15 por l00 del peso fresco inicial. Entre el 90 y el 95 por 100 de este residuo seco estar constituido por tres elementos, carbono, oxgeno e hidrgeno, procediendo los tres del aire y del agua. El resto del material seco constituye lo que denominamos el contenido mineral de la planta y que es tomado por sta del suelo. Un anlisis qumico de un vegetal nos revelar la presencia de un gran nmero de elementos qumicos; algunos de ellos sern esenciales para la vida del vegetal mientras que otros no lo sern. La presencia de estos ltimos es debida a que los mecanismos de absorcin no son capaces de seleccionar entre uno y otros. Hasta mediados del siglo XIX los cientficos no dispusieron de un mtodo que les permitiera conocer qu elementos eran esenciales) cules no; este mtodo fue el de la preparacin de medios de cultivo de composicin conocida, en los cuales poda eliminarse un elemento y ver su efectos sobre el desarrollo vegetal. De esta forma ha podido establecerse que adems del carbono, hidrgeno oxgeno otros 13 elementos (tabla 1) son esenciales para el desarrollo de las plantas. Estos elementos esenciales pueden a su vez subdividirse en macro nutrientes y micro nutrientes, segn que sean requeridos por los vegetales en grandes o pequeas cantidades. Entre los macro nutrientes tenemos: Nitrgeno, fsforo, potasio, azufre, calcio y magnesio. La lista de los micronutrientes est formada por los siguientes elementos: manganeso, boro, hierro, zinc, cobre, cloro y molibdeno.

TABLA 1 Elementos esenciales y concentraciones adecuadas en plantas Numero relativo de tomos Forma utilizable Concentracin en tanto Elemento en relacin con el por la planta por 100 en el tejido seco molibdeno Molibdeno 0.00001 1 MoO Cobre 0.0006 100 Cu Cu Zinc 0.0020 300 Zn Manganeso 0.0050 1.000 Mn Hierro 0.010 2.000 Fe , Fe Boro Cloro Azufre Fsforo Magnesio Calcio Potasio Nitrgeno BO3, B4 O Cl SO4 H PO Mg Ca K HPO 0.002 0.010 0.1 0.2 0.2 0.5 1.0 1.5 2.000 3.000 30.000 60.000 80.000 125.000 250.000 1.000.000

NO NH Oxgeno 45 30.000.000 O H O Carbono 45 35.000.000 CO Hidrogeno 6 60.000.000 H O Modificado de F. B. Salisbury y C. W. Ross, Plant Physiologv, Wadsworth Pu. Co. Inc. Belmont, 1969. Todo elemento esencial es tambin funcional, aunque a veces sea oscuro su papel y en a) como constituyentes celulares; b) como enzimas o coenzimas; c) como antagnicos en el balance metablico; d) como amortiguadores de pH, y e) como factores osmticos cul molcula activa se incluye Los elementos pueden funcionar: 1.9 Funciones de los nutrientes minerales (macro nutrientes) Nitrgeno Fsforo Potasio Calcio Azufre Magnesio

Podemos definir el metabolismo mineral como el proceso mediante el cual los elementos nutritivos minerales se incorporan en metabolitos vegetales, o bien actan como cofactores o agentes catalticos en varios procesos metablicos en el interior de las clulas vegetales. A continuacin nos referirnos al papel que en el metabolismo vegetal desempean los elementos minerales esenciales.

1.9.1 Nitrgeno Es considerado como el cuarto elemento ms abundante en vegetales despus del carbono, hidrgeno y oxgeno. Como componente de protenas, coenzimas, nucletidos y clorofila est implicado en todos los procesos de crecimiento y desarrollo vegetal. Su principal sntoma de carencia, la clorosis, se debe a una inhibicin de la sntesis de clorofila. Las plantas pueden absorber el nitrgeno en forma catinica como ion amonio, o en forma aninica como ion nitrato. A menos que el medio de cultivo est tamponado, la absorcin de amonio tiende a disminuir el pH mientras que la absorcin de nitrato tiene efectos contrarios. En la mayora de los suelos bien aireados, los nitratos son la forma principal de reserva nitrogenada. La absorcin de amonio suele provocar en las plantas una gran demanda de carbohidratos, ya que al poder ser utilizado inmediatamente en la sntesis de aminocidos se requiere un suministro adecuado de esqueletos carbonados que por aminacin se transformarn en aminocidos. La absorcin de nitratos no provoca este efecto ya que tiene que ser primeramente reducido y, por ello, la demanda de carbohidratos es menor. El ion amonio puede actuar como activador de varios enzimas, generalmente los mismos para los que el potasio acta como catin activador. 1.9.2 Fsforo. Gran parte del fsforo del suelo se encuentra en forma inorgnica, especialmente en forma de iones fosfato H HPO La cantidad de una y otra forma depende del pH de modo que a pH bajo se favorece la forma HPO3 y a pH elevado, la forma HPO Fundamentalmente es absorbido en la forma cida. Al contrario que otros elementos tomados tambin en forma aninica, nitrato y sulfato, el fosfato, no necesita ser reducido en el interior de la clula antes de ser incorporado en compuestos orgnicos. Forma parte de los cidos nucleicos, adenosin-fosfatos (AMP, ADP, ATP) piridin nucletidos (NAD, NADP) por lo que participa en todas las reacciones energticas del metabolismo, procesos anablicos y transferencia de las caractersticas hereditarias. Su deficiencia, por tanto, provoca severas alteraciones del metabolismo y desarrollo vegetal. El fsforo forma parte tambin de otros componentes de las plantas como el piridoxal fosfato, que acta como coenzima de los sistemas de transaminacin, y cido ftico, principal forma de reserva de fsforo en las semillas. 1.9.3 Potasio. Este elemento es el nico catin monovalente que es esencial no solamente para los vegetales, sino tambin para todos los seres vivos, con la excepcin de algunos microorganismos en los que puede ser sustituido por el rubidio. Aunque la mayora de las plantas requieren cantidades relativamente grandes de potasio, no ha sido aislado ningn metabolito vegetal que contenga este elemento. El principal papel del potasio es el de actuar como activador de numerosos enzimas entre los que podemos citar: actico tiokinasa, aldolasa, piruvato kinasa, succinil-CoA sintetasa, ATPasas, etc. No est an aclarado el porqu para una accin simplemente cataltica como es la de actuar como activador enzimtico requieren las plantas concentraciones relativamente elevadas de potasio. Se ha sugerido por algunos investigadores que el potasio mantiene un ambiente ionico apropiado para preservar la estructura tridimensional necesaria en orden a obtener una potasio tambin parece desempear un papel importante en el transporte de azcares por el floema, y de hecho el potasio est implicado en la teora electro-

osmtica de transporte de solutos por el floema (Cap. 7). Tambin durante los ltimos aos ha ido ganando cada vez ms aceptacin el papel del potasio en los mecanismos reguladores de la abertura y cierre de estomas.

Fig 3 Mecanismo de apertura y cierre de los estomas A) Bomba de protones y transporte de K+ y Cl B) Transporte de K+ y malato. PEP y OAA 1.9.4 Calcio. Este elemento puede actuar en plantas bajo dos formas: como componente estructural de paredes y membranas celulares y como cofactor de varios enzimas. Clsicamente, el calcio ha sido asociado con la estructura de la pared celular de la cual formara parte como pectato clcico localizado en la lmina media. La supuesta eliminacin de calcio mediante el agente quelante EDTA se ha utilizado como mtodo para el aislamiento de clulas vegetales. Su funcin en la pared celular se supone que es contribuir por algn mecanismo aun no conocido a la rigidez de la pared misma. Tambin se ha relacionado el calcio con la funcion de la membrana celular. Al microscopio electrnico puede comprobarse como en tejidos deficientes en este elemento, las membranas parecen desorganizadas. Tambin la eliminacin de calcio mediante agentes quelantes provoca un aumento en el flujo inico en uno otro sentido hacia ambos lados de la membrana. El calcio puede actuar como agente protector contra os iones hidrogeno, concentraciones salinas elevadas o bien contra otros iones presentes en el medio potencialmente txicos. Como cofactor enzimtico son conocidos los efectos termo-estabilizadores del calcio en las a-amilasas. Tambin acta Lomo activador de fosfatasas en patata, algunas ATPasas de cloroplastos y de la fosfolipasa D de col y zanahoria. 1.9.5 Azufre. Es absorbido por las plantas en forma de sulfato y debe ser reducido antes de poder ser incorporado en componentes orgnicos. Su funcin ms importante es la participacin en la estructura de las protenas formando parte de tos aminocidos azufrados. cisteina, cistina y metionina. Tambin forma parte el azufre de compuestos como tiamina, biotina y coenzima A, metabolitos esenciales en el metabolismo de las plantas, ya que actan

como cofactores o coenzimas de varios sistemas enzimticos. Otra funcin del azufre se encuentra en los grupos sulfidrilo presentes en muchas enzimas y que en muchos casos son necesarios para su actividad. 1.9.6 Magnesio. Al igual que el calcio, el magnesio puede encontrarse en plantas como elemento estructural o como cofactor enzimtico, Su panel estructural es formando parte de la molcula de clorofila, aunque bajo esta forma slo constituye el 10 por 100 del magnesio presente en las hojas. Como activador enzimtico, el magnesio es cofactor de casi todos las enzimas que actan sobre sustratos fosforilados, por lo que es de una gran importancia en el metabolismo energtico. El magnesio presenta fenmenos de antagonisnio con otros iones, fundamentalmente con el calcio y el potasio. Tal antagonismo es tan fuerte que la presencia de uno de ellos en el medio puede provocar deficiencia del otro elemento al impedir su absorcin. 1.10 Funciones de los nutrientes minerales (micro nutrientes) Hierro Manganeso Zinc Cobre 1.10.1 Hierro. Al igual que otros elementos que ya hemos visto, el hierro funciona como componente estructural y como cofactor enzimtico. Forma parte estructural de los citocromos, citocromo oxidasa, catalasa. Peroxidasa y ferredoxina. Se encuentra tanto en sistemas respiratorios como fotosintetizadores. Aproximadamente, el 75 por l00 del hierro celular est asociado con los cloroplastos, determinando el importante papel que este elemento desempea en la fotosntesis. El hierro es esencial para la sntesis de clorofila. Cuando se suministra a plantas hierro en diferentes concentraciones, se observa una buena correlacin entre contenido de hierro y contenido de clorofila. Trabajos realizados hace algunos aos, primero con el alga Euglena y despus en espinaca, parecen indicar que el hierro es necesario para la actividad de la enzima y aminolevulinato deshidratasa, se consider que este paso podra controlar la sntesis de clorofila en sistemas deficientes en hierro. 1.10.2 Manganeso. El papel del manganeso que ha sido estudiado ms intensamente durante los ltimos aos es el que desempea en la liberacin de oxgeno que tiene lugar en el fotosistema II durante la fotosntesis. La hiptesis ms aceptada es la de que acta como transportador de electrones entre el agua y el fotosistema II. La deficiencia de manganeso provoca tambin una desorganizacin en la estructura de la membrana de los cloroplastos lo que se traduce en una inhibicin del fotosistema II. La respiracin es tambin profundamente afectada por la deficiencia en manganeso ya que este elemento acta como activador de muchas enzimas del ciclo de Krebs. Otros enzimas activados por manganeso son la arginasa, que convierte la arginina en urea y ornitina y el enzima mlico dependiente de NAD en plantas C-4. Los requerimientos de manganeso, en Cloro Boro Molibdeno

general, no son muy especficos, ya que este elemento puede ser sustituido por magnesio, obtenindose casi la misma eficiencia. Cuando este elemento se encuentra presente en concentraciones elevadas puede inducir una deficiencia de hierro debido a los efectos competitivos que se establecen entre estos dos elementos. 1.10.3 Zinc. Los marcados efectos que la deficiencia de zinc tiene en el crecimiento vegetal se deben a las relaciones de este elemento con los niveles de auxinas. En plantas deficientes en zinc, la concentracin de cido indolcetico disminuye antes de que aparezcan los primeros sntomas. Gran cantidad de trabajos realizados sobre el efecto del zinc en la biosntesis de auxinas, parecen indicar que este elemento desempea un papel importante en la ruta metablica que desde triptfano conduce a la formacin de cido indolcetico. Adems de su papel en la biosntesis de las auxinas, el zinc participa en el metabolismo vegetal como activador de varios enzimas. La primera enzima que se descubri (anhidrasa carbnica) necesitaba zinc para su actividad. Otras enzimas que requieren zinc son: alcohol deshidrogenasa algunas piridin nucletido deshidrogenasas, glucosa-6-fosfato deshidrogenasa y triosa fosfato deshidrogenasa. Una caracterstica importante de la deficiencia de zinc es el acmulo de compuestos nitrogenados solubles, como aminocidos y aminas, lo que sugiere una inhibicin de la sntesis de protenas, probablemente por el efecto activador que la deficiencia de zinc tiene sobre a actividad ribonuclesica. 1.10.4 Cobre. Este elemento forma parte de un grupo de enzimas tales como tirosinasa, lacasa fenolasas y cido ascrbico oxidasa, todas ellas caracterizadas por la utilizacin directa del oxigeno en la oxidacin del sustrato. El cobre interviene tambin en la fotosntesis, formando parte de la plastocianina, protena que participa en el transporte de electrones fotosintticos. La deficiencia de cobre interfiere de alguna forma con la sntesis de protenas y al igual que la deficiencia de zinc provoca un acumul de compuestos nitrogenados solubles. 1.10.5 Cloro. Es probable que el cloro desempee ms de una funcin especfica en el metabolismo vegetal, pero por ahora la nica que se conoce es el desprendimiento de oxgeno en el fotosistema II. Su funcin exacta en este mecanismo no se conoce pero se ha sugerido que acta en el lado oxidante del fotosistema II probablemente protegindole contra la fotoinactivacin mediante la eliminacin de oxidantes perjudiciales producidos durante la fotolisis del agua. No se ha encontrado nunca deficiencia de cloro en condiciones naturales. 1.10.6 Boro. Aunque los sntomas de deficiencia en boro son espectaculares no se conoce con exactitud cual es el mecanismo de accin de este elemento. Uno de los sntomas caractersticos de la deficiencia en boro es la acumulacin de sustancias fenolicas formadas por la condensacin de eritrosa-4-fosfato, formado en la ruta de las pentosas fosfato y de piruvato formado en la gluclisis, el boro parece regular la degradacin de

glucosa por estas dos vas, ya que se ha demostrado que se combina con el cido-6, fosfo-glucnico, sustrato inicial de la ruta de las pentosas fosfato. Este complejo inhibe la actividad del enzima 6- fosfogluconato deshidrogenasa resultando en una disminucin de la formacin de eritrosa-4-fosfato: en ausencia de boro no se produce tal inhibicin y se favorece la formacin de fenoles. Probablemente el efecto mejor conocido sea su funcin en el transporte de azcares. Se supone que el boro forma un complejo con los azcares facilitando de esta forma el transporte de los mismos a travs de la planta. Otras sugerencias alternativas son las que suponen que el boro inhibe la sntesis de almidn mantenindose los azcares en formas solubles fcilmente transportables, si bien el boro aumenta la sntesis de sacarosa, que es el principal azcar transportado en vegetales. Tambin se ha sugerido que el boro puede desempear alguna funcin en el metabolismo del RNA y en la sntesis de cido giberelico ya que en plantas deficientes en este elemento se observa una disminucin en el contenido en cido ribonucleico y en cido giberelico. 1.10.7 Molibdeno. Desde hace algn tiempo se sabe que la funcin fundamental del molibdeno en el metabolismo vegetal esta en relacin con la fijacin de nitrgeno atmosfrico y con la asimilacin de los nitratos. La esencialidad de este elemento fue claramente establecida cuando se demostr que formaba parte de la enzima nitrato reductasa. Por ello, la sintomatologa es mucho ms acusada cuando el nitrgeno se suministra en forma de nitrato que en forma de ion amonio. En las plantas con deficiencia de molibdeno los niveles de azcares y cido ascrbico son generalmente mas bajos que en las plantas control. El molibdeno forma parte tambin de una de las protenas que constituyen el enzima nitrogenasa. 1.11 Deficiencias minerales Nitrgeno Fosforo Potasio Calcio Azufre Magnesio Hierro Manganeso Zinc Cobre Cloro Boro Molibdeno Interactuar con el Applet

Se considera que una planta es deficiente en un elemento cuando su concentracin en los tejidos cae por debajo de los niveles que permiten un crecimiento ptimo. Una deficiencia puede desarrollarse cuando la concentracin del elemento en cuestin en el suelo o en la solucin nutritiva es baja, o bien si el elemento est presente en una forma qumica que no puede ser utilizada por la planta. A veces puede tambin desarrollarse una deficiencia debido a los efectos antagnicos entre distintos elementos, de tal forma que la presencia de un elemento en una determinada concentracin puede impedir la absorcin de otro. Cuando un tejido es deficiente en un elemento esencial, se producen una serie de alteraciones metablicas que pueden retrasar o incluso interrumpir los procesos de crecimiento y desarrollo. Si las deficiencias son muy severas, se pueden desarrollar en la planta una serie de sntomas patolgicos que pueden permitir a los agricultores familiarizados con stos. Sin embargo, las alteraciones metablicas con la consiguiente disminucin en el rendimiento, pueden tener lugar sin que aparezca ningn

sntoma de deficiencia, o mucho antes de tales sntomas aparezcan, por lo que es necesario disponer de un mtodo que nos permita conocer en un momento dado el estado nutricional de una planta. El mtodo ms utilizado no es el del anlisis de tejidos. Este anlisis est basado en la determinacin de la concentracin crtica que es la concentracin de un determinado elemento que se encuentra justo por debajo de aquella que produce un crecimiento ptimo. Deben obtenerse curvas de cosecha para cada cultivo y para cada elemento, de tal manera que conozcamos cul es la concentracin crtica de cada elemento y poder compararla con los resultados obtenidos en el campo. Para cada cultivo es necesario determinar qu parte de la planta es la ms indicativa de su estado nutritivo, qu mtodo de muestreo en el campo es el ms adecuado y en qu momento del ciclo biolgico cuntas veces durante la estacin de crecimiento deben realizarse estos anlisis. Para elementos con gran movilidad dentro de la planta, como el potasio o nitrgeno, su concentracin en la hoja es un buen ndice de su estado nutricional. Pero para elementos que son muy inmviles dentro de la planta como el calcio, los anlisis foliares son irrelevantes con respecto al estado nutritivo de otras partes de la planta. Como hemos mencionado anteriormente, la identificacin de una determinada deficiencia slo est al alcance de especialistas muy familiarizados con los sntomas de deficiencia, y aun a veces esta identificacin es casi imposible de ser realizada con xito, ya que en condiciones de campo es muy raro que aparezca una deficiencia en un solo elemento: es ms normal que una deficiencia sea mltiple, lo que hace muy difcil dar un diagnstico basado exclusivamente en la sintomatologa. Otro factor que supone una complicacin ms para el diagnstico visual es el hecho de que muchos sntomas, como clorosis o amarillamiento, seguido por necrosis de las reas clorticas, son comunes en las deficiencias de varios elementos esenciales. Hay que tener en cuenta tambin que los sntomas de deficiencia en un determinado elemento pueden variar mucho entre plantas diferentes por lo que el conocimiento de la sintomatologa en una especie dada puede ser muy poca ayuda a la hora de tratar de identificar esa misma deficiencia entre otra especie. Una observacin muy importante al emitir un diagnstico es la de si los sntomas aparecen primero en las hojas jvenes o viejas, ya que esto nos puede dar una idea sobre la movilidad o inmovilidad del elemento dentro de la planta. Si durante el crecimiento se manifiesta una carencia, los elementos mviles presentes en las hojas viejas se desplazan a los meristemo, apareciendo los sntomas primero en estas hojas viejas, mientras que los inmviles permanecen fijos en ellas apareciendo los sntomas primero en las hojas jvenes. Vamos a describir a continuacin los sntomas de carencia ms caractersticos que aparecen en las plantas como resultado de las deficiencias en los elementos esenciales. 1.11.1 Nitrgeno. Exceptuando la sequa, no hay otra deficiencia que presente unos Sntomas tan dramticos como la de nitrgeno. La clorosis es el sntoma ms caracterstico y que debido a la gran movilidad de este elemento, aparece primero en las hojas viejas. En monocotiledneas la clorosis comienza en la punta de las hojas y avanza hacia la base. En casos de extrema deficiencia todas las hojas aparecen amarillentas.

Frecuentemente se forman pigmentos antocinicos como en las tomateras, en las que puede observarse una coloracin prpura en los pecolos y nervios de las hojas.

Planta normal y deficiente de nitrgeno

1.11.2 Fosforo. Uno de los primeros sntomas que se observan en muchas especies es una coloracin verde oscura o verde azulada de las hojas. Otro sntoma muy general es a formacin de pigmentos antocinicos adquiriendo las hojas una coloracin prpura. En maz, este color prpura aparece en los bordes de la hoja, mientras que en tomate aparece en las venas de la hoja. Debido a la gran movilidad del fsforo son las hojas viejas las primeras en presentar los sntomas. Se reduce el crecimiento de la planta y en condiciones de extrema carencia las plantas presentan un aspecto achaparrado.

1.11.3 Potasio. El sntoma general ms caracterstico de la deficiencia de potasio es la aparicin de un moteado de manchas clorticas seguido por el desarrollo de zonas necroticas en la punta los bordes de as hojas. Debido a la movilidad de este elemento los sntomas aparecen primero en las hojas maduras, en algunas especies las hojas presentan coloracin verde oscura o verde azulada confundindose con la deficiencia de fsforo. En general, una planta deficiente en potasio, presenta un aspecto achaparrado debido al acortamiento de los entrenudos. En condiciones extremas, las yemas terminales y laterales pueden morir.

1.11.4 Calcio. Los sntomas de deficiencia en calcio son fciles de observar y muy espectaculares. Las regiones meristemticas de los tallos, hojas y races son atacadas fuertemente y pueden acabar muriendo, cesando el crecimiento de estos rganos. Las races pueden acortarse, en los bordes de las hojas jvenes aparece clorosis seguida de necrosis. Tambin es un sntoma caracterstico la malformacin de las hojas jvenes, siendo el sntoma ms fcil de reconocer la forma de gancho que adquieren las puntas de las hojas. Debido a la inmovilidad del calcio dentro de la planta los sntomas aparecen primero en las hojas jvenes. Las deficiencias de calcio son ms frecuentes en los suelos cidos, de tal forma que la deficiencia en este elemento va acompaada por niveles txicos de iones hidrgeno y de iones de metales pesados como aluminio y manganeso que son solubles en medio cido. Las races daadas por la deficiencia de calcio son ms susceptibles a la infeccin de bacterias y hongos.

1.11.5 Azufre. Los sntomas de deficiencia en azufre son parecidos a los de la deficiencia en nitrgeno. Se presenta una clorosis general seguida en algunas especies por la produccin de pigmentos antocinicos. Sin embargo, hay una diferencia fundamental, ya que debido a la inmovilidad de este elemento los sntomas aparecen primero en las hojas jvenes. 1.11.6 Magnesio. La clorosis intervenal en las hojas es uno de los sntomas ms caractersticos de la deficiencia en este elemento, aunque la variedad de sntomas en especies es tan grande que se hace difcil el poder dar sntomas generales de deficiencia en magnesio. A veces se producen tambin, como en el algodn, pigmentos antocinicos en las hojas. Los sntomas, cualesquiera que sean, se presentan primero en las hojas maduras, dato indicativo de su movilidad dentro de la planta.

1.11.7 Hierro. Debido a la relativa inmovilidad de este elemento, el sntoma ms caracterstico es una clorosis general de las hojas jvenes, que puede comenzar como intervenal, pero al cabo del tiempo tambin los nervios acaban perdiendo la clorofila. La deficiencia en hierro es bastante frecuente en rboles frutales.

1.11.8 Manganeso. Los sntomas de deficiencia en manganeso varan mucho de unas especies a otras, aunque el ms frecuente suele ser una clorosis intervenal, pudiendo tambin aparecer manchas necrticas en las hojas. Generalmente, los sntomas suelen aparecer primero en as hojas ms jvenes, aunque tambin, se dan casos de aparicin anterior en las hojas viejas. En las semillas de leguminosas puede presentarse necrosis en los cotiledones o en el embrin.

1.11.9 Zinc. Los primeros sntomas corresponden a una clorosis localizada entre los nervios de las hojas ms viejas, que se suele iniciar en el pice y en los bordes. Se produce un retardo en el crecimiento que se manifiesta en forma de hojas ms pequeas y entrenudos ms cortos. El aspecto irregular de las hojas es quizs el sntoma ms fcil de reconocer. En casos extremos, la floracin y la fructificacin Son frecuentemente daados. La planta entera adquiere un aspecto de roseta o achaparrado.

1.11.10 Cobre. Aunque los sntomas pueden variar mucho en las distintas especies, esta deficiencia suele provocar una necrosis del pice de las hojas jvenes que progresa a lo largo del

margen de la hoja, pudiendo quedar los bordes enrollados. Las hojas pueden presentar clorosis, muriendo a menudo los brotes jvenes.

1.11.11 Cloro. El elemento cuya esencialidad para los vegetales ha sido confirmada ms recientemente. El marchitamiento de las hojas es el sntoma ms frecuente observado en la deficiencia de cloro. En tomate aparece un color bronceado en las hojas, seguido de clorosis y necrosis. 1.11.12 Boro. Debido a su inmovilidad, los sntomas se presentan en primer lugar en las zonas ms jvenes, tanto de races como de tallos, cuyos pices terminales pueden acabar muriendo. Las hojas presentan una textura dura y cobriza y los tallos quebradizos y agrietados. En general, las flores no llegan a formarse. Las infecciones bacterianas tanto de tallos como de races son, a veces, una consecuencia secundaria de la deficiencia de boro.

1.11.13 Molibdeno. Los sntomas de deficiencia comienzan con una clorosis intervenal pudiendo confundirse con una deficiencia de manganeso. Las zonas clorticas pueden necrosarse logrando que la hoja se seque por completo. La floracin se ve fuertemente inhibida y si llegan a formarse flores stas caen antes de producir fruto. En coliflor puede observarse un sntoma muy caracterstico de deficiencia de molibdeno, que consiste en que los tejidos de la hoja se secan por completo, quedando solamente el nervio central y algunos restos de lmina foliar se conoce a este sntoma como "cola de ltigo" por el aspecto que toma la hoja. Applet Clave para la Deteccin de Deficiencias de Nutrientes Este applet permite visualizar de acuerdo con una serie de caractersticas especificadas a lo largo del captulo, seleccionar y mostrar un ejemplo tpico de una deficiencia de nutrientes. Para ejecutarlo es necesario tener habilitado el soporte para Java.