MTODOS CROMATOGRFICOS La cromatografa se puede definir como una tcnica utilizada inicialmente para la separacin de los componentes de una

muestra en la cual los componentes se distribuyen en 2 fases, una de las cuales es estacionaria y la otra es mvil. La fase estacionaria puede ser un slido, un lquido sobre un soporte slido, o un gel .La fase estacionaria puede estar contenida en una columna, extendida en forma de capa o dispuesta en forma de pelcula. La fase mvil puede ser gaseosa o lquida. Los principales mtodos cromatogrficos son: En columna: la fase estacionaria se introduce en una columna estrecha a travs de la cual pasa la fase mvil por efecto de la gravedad o de una presin aplicada. Plana: la fase estacionaria reviste una lmina plana de vidrio, metal o plstico que se coloca en una cmara de revelado. La fase mvil se desplaza por accin capilar Cromatografa de gases La cromatografa de gases(CG) es el mtodo utilizado para la separacin de sustancias voltiles y trmicamente estables. La muestra se volatiza y se inyecta en la cabeza de una columna cromatogrfica. La elucin se produce por el flujo de un gas inerte que es la fase mvil cuya funcin es transportar el analito a travs de la columna sin interaccionar con el. Existen dos tipos de cromatografa de gases: la cromatografa gas-slido (CGS) y la cromatografa gas-lquido (CGL). En la CGS la fase estacionaria es un slido. Se produce la retencin de los analitos en esta como consecuencia de la adsorcin fsica. No es muy utilizada. En la CGL la fase estacionaria es un lquido inmovilizado sobre un soporte slido o las paredes de la columna. Es la ms utilizada, tiene una gran aplicacin en todos los campos de la ciencia Tcnicas de cromatografa lquida de alta resolucin La cromatografa de lquidos de ultra-alta resolucin (UHPLC) es una tcnica que permite separar, identificar y cuantificar los componentes de una mezcla compleja. La separacin se basa en la diferente distribucin de los componentes entre dos fases inmiscibles, una mvil y una estacionaria, esta ltima retenida dentro de una columna.

Tcnicas diversas

Anlisis trmico Espectrometra de masas Tcnicas cinticas http://books.google.com.mx/books?id=J0jTpDZdSDAC&pg=PA123&dq=clasificaci%C3%B3 n+de+las+t%C3%A9cnicas+instrumentales+de+analisis&hl=es&sa=X&ei=2HYIUZjqGOM2gXw6oHoAQ&ved=0CDsQ6AEwAw#v=onepage&q=clasificaci%C3%B3n%20de%20las %20t%C3%A9cnicas%20instrumentales%20de%20analisis&f=false

http://es.scribd.com/doc/45363942/Apuntes-Anlisis-Instrumental-09

Cromatografa en columna: Se emplea para la separacin de mezclas o purificacin de sustancias a escala preparativa. Como fase e s t a c i o n a r i a s e u s a , generalmente, gel de slice o almina dentro de una columna. L a e l e c c i n d e l disolvente es crucial para una buena separacin. Dicho disolvente pasa a travs de la columna por efectode la gravedad o bien por aplicacin de presin (cromatografa flash). La columna se prepara mezclandoel soporte con disolvente y se rellena la columna poniendo en el fondo de sta un poco de algodn o lanade vidrio, para evitar que la slica o la almina queden retenidas en la columna y que el disolvente seengrasada hasta el nivel del soporte. A continuacin se introduce la muestra por la parte superior de la columna y se eluye con el disolvente elegido, recogindose por lo general en tubos de ensayo.Una columna de cromatografa es un tubo de vidrio relleno con una sustancia slida de propiedades adsorbentes constituida por pequeas partculas: gel de slice y almina son las ms usadas. Este rellenoes lo que se conoce en cromatografa como la fase estacionaria . A travs de la columna se har pasar una corriente de un disolvente o mezcla de disolventes denominada eluyente y/o fase mvil .La mezcla de compuestos a separar se disuelve en una pequea cantidad de disolvente y se coloca sobreel adsorbente, en la parte superior de la columna, quedando adsorbida por el mismo. A continuacin se p a s a un flujo de eluyente a travs de la columna. Los compuestos c o n s t i t u y e n t e s d e l a m e z c l a s o n arrastrados por el eluyente a su paso, hacindoles avanzar a lo largo de la columna. Sin embargo, notodos los compuestos avanzan a la misma velocidad , y esta es precisamente la clave de la cromatografa.Algunos compuestos se ven ms fuertemente retenidos por el adsorbente ( fase estacionaria ) y p o r l o tanto avanzarn ms despacio. Por el contrario, o t r o s a p e n a s s o n r e t e n i d o s y a v a n z a r n a m a y o r velocidad.En general se dice que la separacin en la cromatografa se basa en la afinidad diferencial de los distintoscompuestos por la fase mvil o la fase estacionaria .

La cromatografa en papel es un proceso muy utilizado en los laboratorios para realizar unos anlisis cualitativos ya que pese a no ser una tcnica muy potente no requiere de ningn tipo de equipamiento. La segunda fase estacionaria est constituida simplemente por una tira de papel filtro. La muestra se deposita en un extremo colocando pequeas gotas de la solucin y evaporando el disolvente. Luego el disolvente empleado como fase mvil se hace ascender por capilaridad. Esto es, se coloca la tira de papel verticalmente y con la muestra del lado de abajo dentro de un recipiente que contiene fase mvil en el fondo. La cromatografia en papel es la tcnica de separacin e identificacin de sustancias qumicas mediante un disolvente que se mueve sobre hojas o tiras de papel de filtro. Se toma una pieza de papel de filtro y cerca de uno de sus extremos se deposita una gota de la solucin que contiene la mezcla de las sustancias que se quieren separas. Se deja secar la gota y quedara la mancha de las sustancias mezcladas. El extremo del papel mas proximo a la mancha se introduce en un disolvente apropiado, pero sin que la mancha llegue a introducirse en l. Existen muchos tipos de cromatografia sobre papel, una primera divisin de las variadas clases podra ser: 1- Cromatografia ascendente: el disolvente se encuentra en el fondo del recipiente que sostiene al papel y va subiendo a traves de el por capilaridad. 2- Cromatografia descendente: el disolvente esta en un recipiente esta en un recipiente del que cuelga el papel, fluye por l hacia abajo por una combinacion de capilaridad y gravedad.

Cromatografa de Capa Fina (TLC CCF) La cromatografa de capa fina se conoce normalmente p o r s u s s i g l a s e n i n g l s ( T L C , t h i n l a y e r chromatography). Es una tcnica muy utilizada para la identificacin y determinacin de pureza de compuestosTambin puede utilizarse como tcnica de separacin (cromatografa de capa fina TLC preparativa) a muy pequea escala.E n esta tcnica la fase estacionaria es una capa fina de gel de s l i c e u o t r o s o p o r t e c o n p r o p i e d a d e s adsorbentes (en nuestro caso de 25 mm de espesor) dispuesta sobre un soporte de vidrio o aluminio quedenominaremos placa . El eluyente o fase mvil ser la mezcla de disolventes adecuada.L a c r o m a t o g r a f a d e c a p a f i n a e s u n p r o c e d i m i e n t o q u e s e u t i l i z a p a r a s e p a r a r m o l c u l a s r e l a t i v a m e n t e pequeas. La separacin de mezclas de molculas mediante la cromatografa de capa fina se basa en el principio del reparto entre dos fases. Al igual que otras cromatografas, consiste de una fase estacionaria y unafase mvil y el principio es el mismo: la sustancia de inters se adherir a la fase estacionaria o se mover conla fase mvil, viajando una distancia que es inversamente proporcional a la afinidad por la fase estacionaria. Lafase estacionaria puede ser variada. Puede ser de papel, de celulosa o de un gel de silicato (vidrio molido bienfino) unido a una superficie slida (una placa de vidrio, aluminio, plstico o papel). Esta superficie slida puedes e r r g i d a o f l e x i b l e . E l t i p o d e f a s e e s t a c i o n a r i a que se utilice en un experimento depender del tipo d e molculas que se quieran separar. Incluso vienen algunas placas con indicadores fluorescentes. La fase estacionaria consiste de un solvente que puede ser agua, un solvente orgnico o una mezcla de ambos

Cromatografa por Permeabilidad en Gel.

Es til para la separacin de protenas. La Cromatografa de exclusin molecular, tambin llamada de filtracin en gel, separa en funcin de su tamao. La matriz de la columna esta formada por un polmero entrecruzado con poros de tamaos determinados. Las protenas de mayor tamao migran ms deprisa a lo largo de la columna que las de pequeo tamao, debido a que son demasiado grandes para introducirse en los poros de las bolas de polmero y por tanto siguen una ruta ms corta y directa a lo largo de la longitud de la columna. Las protenas de menor tamao, entran en los poros y su marcha a lo largo de la columna es ms lenta.

http://www.javeriana.edu.co/Facultades/Ciencias/neurobioquimica/libros/celular/cro matografia.htm