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Practico N2 Determinacin de cafena en coca cola

Integrantes: Noemi Caro Carolina Puentes Jorge Silva Judith Vergara

16 enero 2013

Resumen La cafena es un alcaloide del grupo de las xantinas, que acta como droga estimulante y psicoactiva. Se encuentra en muchas especies de plantas, y el contenido vara enormemente de unas plantas a otras.La fuente habitual de cafena es el caf, pero tambin se encuentra en el t (tena), guaran (guaranina), mate (matena), cacao y refrescos de cola, entre otros. La determinacin de cafena ha adquirido mucha importancia, debido a su uso en la industria farmacutica y en la industria de alimentos; ya sea como ingrediente en la elaboracin de refrescos y bebidas energticas o por su presencia en productos como el t, el mate, el cacao y el caf. En todos estos casos, el control de calidad del parmetro cafena es necesario en los productos. Por esta razn, se han desarrollado nuevos mtodos instrumentales para su determinacin en diversas matrices, especialmente en alimentos. Para elegir una tcnica de separacin de la cafena, adems de tener en cuenta los criterios econmicos y de accesibilidad, hay que atender a dos tipos de consideraciones: unas tienen que ver con las propiedades fsicas y estructurales de las molculas que se pretende separar, o de las caractersticas de la matriz en que se encuentran; otras se derivan de los objetivos del anlisis (sensibilidad, resolucin, tiempo de anlisis, necesidad de una deteccin especfica). Las tcnicas analticas ms empleadas en la actualidad pueden englobarse en dos grandes grupos: tcnicas de separacin y tcnicas espectroscpicas. En la actualidad, las separaciones analticas se efectan fundamentalmente por cromatografa y electroforesis. La cromatografa no solo permite la separacin de los componentes de una mezcla, sino tambin su identificacin y cuantificacin. El anlisis cualitativo est basado en la medida de parmetros cromatogrficos (tiempos y volmenes de retencin) mientras que el anlisis cuantitativo est basado en la medida de alturas o reas de picos cromatogrficos que se relacionan con la concentracin. La columna cromatogrfica y la forma con la que se disea, constituye el corazn de la separacin. El detector, situado al final de la columna es el que garantiza la respuesta de los componentes que se separan. La determinacin de la cafena se suele llevar a cabo mediante tcnicas de separacin como HPLC (Cromatografa lquida de alta eficiencia), CE (Electroforesis capilar), TLC (Cromatografa de capa fina) o GC (Cromatografa de gases). Estos mtodos realizan la deteccin mediante tcnicas electroqumicas (potenciomtricas, conductimtricas, amperomtricas, etc.), pticas (espectrofotomtricas, fluorimtricas, etc.) y otras (termoqumicas). La eleccin de una u otra tcnica depende del problema a resolver, del volumen de muestra y de su concentracin. La cromatografa es un mtodo de separacin y anlisis basado en el uso de una fase estacionaria y una mvil. Los componentes de una muestra se hacen pasar por una fase estacionaria mediante el flujo de una fase mvil de manera que las sustancias se distribuyen entre las dos fases; aquellos solutos cuya relacin de distribucin sea favorable a la fase estacionaria quedan retenidos por sta, mientras que los solutos

que se encuentran preferentemente en la fase mvil sern los primeros en arrastrar. De esta forma los solutos sern separados en orden creciente a sus coeficientes de distribucin con respecto a la fase estacionaria. El conjunto de tcnicas que se valen de una fase mvil que se desplaza a lo largo del sistema y una fase estacionaria que permanece fija reciben el nombre de cromatografa.

Materiales y Mtodos En el prctico N 2 se determino la concentracin de cafena una muestra de coca cola light, utilizando el mtodo analtico de curva de calibrado utilizando HPLC o cromatografa liquida de alta precisin. Se realizo cromatografa inversa con una columna C18.

Preparacin de la muestra: Se desgasific la bebida de cola (Coca-Cola light) en un bao de ultra sonido. Para su anlisis cromatogrfico se realizo una dilucin con agua nanopura (FD=2).

Preparacin de la curva de calibracin: En primer lugar se realizo la curva de calibracin de la muestra de cafena. Se prepararon estndares en matraces aforados de 25 mL, para esto se extrajeron alcuotas en las siguientes concentraciones: 12,5 mg/lt, 20 mg/Lt, 25mg/lt, 50 mg/Lt y 100 mg/Lt. Mediante la ecuacin de la recta, obtenida en la curva de calibrado se calcula la concentracin de la bebida cola.

Resultados

Conclusin

CAPTULO 10: MTODOS ANALTICOS PARA LA DETERMINACIN Y CARACTERIZACIN DE LA CAFENA

La cafena es un alcaloide del grupo de las xantinas, que acta como droga estimulante y psicoactiva. Se encuentra en muchas especies de plantas. La fuente habitual de cafena es el caf, pero tambin se encuentra en el t (tena), guaran (guaranina), mate (matena), cacao y refrescos de cola, entre otros. El contenido de cafena vara enormemente de unas plantas a otras. Dentro de una misma especie tambin existe gran variabilidad. As, el contenido en cafena del caf vara dependiendo de la variedad, del tipo de grano y del mtodo de preparacin. Las plantas producen cafena como pesticida natural, a modo de proteccin mecnica a travs de la cual logran paralizar y matar ciertos insectos que se alimentan de la planta.

La determinacin de cafena ha adquirido mucha importancia, debido a su uso en la industria farmacutica y en la industria de alimentos; ya sea como ingrediente en la elaboracin de refrescos y bebidas energticas o por su presencia en productos como el t, el mate, el cacao y el caf. En todos estos casos, el control de calidad del parmetro cafena es necesario en los productos. Por esta razn, se han desarrollado nuevos mtodos instrumentales para su determinacin en diversas matrices, especialmente en alimentos. Para elegir una tcnica de separacin de la cafena, adems de tener en cuenta los criterios econmicos y de accesibilidad, hay que atender a dos tipos de consideraciones: unas tienen que ver con las propiedades fsicas y estructurales de las molculas que se pretende separar, o de las caractersticas de la matriz en que se encuentran; otras se derivan de los objetivos del anlisis (sensibilidad, resolucin, tiempo de anlisis, necesidad de una deteccin especfica). El mtodo de seleccin incluye los pasos necesarios para la obtencin, preparacin y posible fraccionamiento de la muestra, la aplicacin de la tcnica analtica adecuada y el tratamiento de los datos obtenidos. Las tcnicas analticas ms empleadas en la actualidad pueden englobarse en dos grandes grupos: tcnicas de separacin y tcnicas espectroscpicas. Las tcnicas espectroscpicas proporcionan, para cada compuesto analizado, una informacin compleja, relacionada con sus caractersticas estructurales especficas, por otro lado las tcnicas de separacin se utilizan para resolver los componentes de una mezcla y la seal obtenida puede utilizarse con fines analticos cuantitativos o cualitativos. En la actualidad, las separaciones analticas se efectan fundamentalmente por cromatografa y electroforesis. La cromatografa no solo permite la separacin de los componentes de una mezcla, sino tambin su identificacin y cuantificacin. El anlisis cualitativo est basado en la medida de parmetros cromatogrficos (tiempos y volmenes de retencin) mientras que el anlisis cuantitativo est basado en la medida de alturas o reas de picos cromatogrficos que se relacionan con la concentracin. La columna cromatogrfica y la forma con la que se disea, constituye el corazn de la separacin. El detector, situado al final de la columna es el que garantiza la respuesta de los componentes que se separan. La determinacin de la cafena se suele llevar a cabo mediante tcnicas de

separacin como HPLC (Cromatografa lquida de alta eficiencia), CE (Electroforesis capilar), TLC (Cromatografa de capa fina) o GC (Cromatografa de gases). Estos mtodos realizan la deteccin mediante tcnicas electroqumicas (potenciomtricas, conductimtricas, amperomtricas, etc.), pticas (espectrofotomtricas, fluorimtricas, etc.) y otras (termoqumicas). La eleccin de una u otra tcnica depende del problema a resolver, del volumen de muestra y de su concentracin. Mtodos cromatogrficos La cromatografa es un mtodo de separacin y anlisis basado en el uso de una fase estacionaria y una mvil. Los componentes de una muestra se hacen pasar por una fase estacionaria mediante el flujo de una fase mvil de manera que las sustancias se distribuyen entre las dos fases; aquellos solutos cuya relacin de distribucin sea favorable a la fase estacionaria quedan retenidos por sta, mientras que los solutos que se encuentran preferentemente en la fase mvil sern los primeros en arrastrar. De esta forma los solutos sern separados en orden creciente a sus coeficientes de distribucin con respecto a la fase estacionaria. El conjunto de tcnicas que se valen de una fase mvil que se desplaza a lo largo del sistema y una fase estacionaria que permanece fija reciben el nombre de cromatografa. Los mtodos cromatogrficos pueden ser clasificados: 1. Segn el dispositivo utilizado para conseguir poner en contacto la fase estacionaria y fase mvil: Cromatografa en columna: consiste en columnas huecas de longitud y dimetro variable en cuyo interior hallamos la fase estacionaria. La fase mvil se hace pasar por ellas ya sea por gravedad o aplicacin de presin. Cromatografa plana: la fase estacionaria se encuentra sujeta por una placa plana o en papel (cromatografa en capa fina y en papel, respectivamente) y la fase mvil se desplaza por ella mediante capilaridad o influenciada por la gravedad. 2. Segn los estados de las fases implicadas, en especial de la fase mvil: Cromatografa de gases: gas-lquido gas-slido Cromatografa de lquidos: lquido-slido lquido-lquido intercambio inico exclusin molecular Cromatografa de fluidos supercrticos (cualquier sustancia que se halle en condiciones de presin y temperatura superiores a su punto crtico). 3. Segn el mecanismo de interaccin del soluto con la fase estacionaria: Cromatografa de adsorcin: el soluto presente en una fase mvil lquida o

gaseosa se adsorbe a las partculas slidas de la fase estacionaria. La separacin de los diferentes solutos se debe al equilibrio entre las fases estacionaria y mvil. Cromatografa de reparto: se vale de una fase estacionaria lquida que forma una pelcula sobre un soporte slido. La distribucin del soluto vienen dada por el equilibrio entre la fase estacionaria y mvil. Cromatografa de intercambio inico: consiste en hacer pasar una fase mvil lquida sobre una fase estacionaria que presenta grupos inicos en su superficie de modo que los iones de signo opuesto quedarn retenidos por fuerzas electrostticas. Cromatografa de exclusin molecular: Se basa en la habilidad de materiales de porosidad controlada para separar los componentes de una mezcla de acuerdo al tamao y forma de las molculas. Cromatografa de afinidad: emplea interacciones especficas entre una clase de molculas de soluto y una segunda molcula unida covalentemente a la fase estacionaria.