GENETICA Y MEJORA VEGETAL: INTRODUCCION

II.1 Introduccin En este captulo se aborda la definicin de la Mejora Vegetal, se establecen sus objetivos y se determina el objeto sobre el que acta. De acuerdo con estas premisas se describen sus actividades propias, su evolucin y perspectivas, as como las materias que le sirven de base. II.2 Definicin de la Mejora Vegetal La Mejora gentica vegetal se puede definir como "la ciencia cuyo objetivo es cambiar el genotipo, mejorndolo para un determinado medio y segn el aprovechamiento para el que se vaya a destinar de acuerdo con las necesidades del hombre" (Frankel, 1958). Smith (1986), la define como "El arte y la ciencia de mejorar el genotipo de las plantas en relacin con su utilizacin econmica". Johnson (1981) la define de forma similar pero ms concreta como "la utilizacin de un sistema organizado de manipulacin gentica para modificar una especie vegetal, con el fin de hacerla ms til o aceptable para un uso especfico". La mejora gentica vegetal es esencialmente una eleccin hecha por el hombre de las mejores plantas escogidas dentro de una poblacin en la cual exista variabilidad. En otras palabras es una seleccin, posible gracias a la existencia de variabilidad (Sanchez Monge, 1993). A partir de todas estas definiciones, estamos en condiciones de establecer las tres premisas ms importantes para el planteamiento de cualquier programa de mejora gentica vegetal: 1La existencia de variabilidad o bien la capacidad para crearla se convierte de esta forma en el primer requisito de todo programa de mejora. 2La capacidad de detectar dicha variabilidad, o lo que es lo mismo, la habilidad del mejorador para observar las diferencias, que puedan tener valor econmico entre plantas de la misma especie y/o la existencia de tcnicas capaces de medirlas. 3La capacidad para manipular dicha variacin para producir un nuevo cultivar estable. II.3. La evolucin de la mejora gentica vegetal Se puede decir que la mejora gentica vegetal comenz con el inicio de la agricultura sedentaria y la domesticacin de los primeros cultivos. Los primeros cultivos domesticados fueron los cereales, y en ellos se observa ya en los primeros tiempos una rpida eliminacin de caractersticas indeseables como la dehiscencia 1

o la latencia de sus semillas. Es lgico asumir que la necesidad de recolectar los frutos, semillas y races para la alimentacin humana, debi de ir acompaada de un aumento en el conocimiento de la biologa de las plantas sobre todo de aquellas caractersticas relacionadas con el potencial alimentario del cultivo. Esta hiptesis esta corroborada por evidencias arqueolgicas y as se observa en un bajo relieve Asirio que data del siglo IX a. de C. que muestra la polinizacin de una palmera. Sin embargo, el gran despegue de la mejora gentica vegetal, se ha producido durante el presente siglo, como consecuencia lgica del desarrollo espectacular que se ha producido en el campo de la gentica. Hasta el primer decenio de este siglo la mejora gentica vegetal estaba en manos de "expertos" que en muchos casos fueron incapaces de conseguir grandes progresos debido a la falta de conocimientos cientficos, siendo ms bien la mejora gentica vegetal un "arte" basado en la pericia del mejorador que una ciencia. Uno de los eventos, quiz y con seguridad el de mayor trascendencia, fue el redescubrimiento de las trabajos de Mendel (1865) por Tschremak, Correus y Vries, entorno a (1900) en los que se determinaron las leyes de la herencia. Estos autores ya indicaron la importancia de los mismos para el desarrollo de la gentica como disciplina independiente, as como para la mejora de los organismos sobre la base de sus principios. Para entonces, ya se conocan los rasgos generales de los procesos de mitosis y meiosis. En 1902, Sutton Y Boveri, por separado cayeron en la cuenta de que el comportamiento de los caracteres de Mendel durante la produccin de gametos tiene un paralelo preciso con la conducta de los cromosomas en la meiosis. La teora cromosmica de la herencia estableci una conexin entre el concepto abstracto del factor mendeliano y el cromosoma. El primer rasgo atribuido a un cromosoma fue el sexo: Stevens y Wilson descubrieron en 1905, los llamados cromosomas sexuales. Era natural suponer que todos los genes y no slo los responsables del sexo estuvieran en los cromosomas. La primera confirmacin vino pronto, con las experiencias con moscas del vinagre, Drosophyla, realizados en el laboratorio de Morgan entre 1910 y 1915. Los primeros experimentos situaron en el cromosoma X una mutacin que causaba ojos blancos en vez de rojos. En los aos siguientes se localizaron otras muchas mutaciones en cromosomas no sexuales. Si bien esta primera etapa del desarrollo de la Gentica, como ciencia, estuvo llena de disputas. La variacin continua haba sido objeto de estudio a finales del siglo XIX, por Galton y Colaboradores, y a pesar de no lograr descubrir su modo de transmisin, demostraron por medio del anlisis de regresin que al menos era parcialmente heredable. Cuando se redescubren los trabajos de Mendel, estos investigadores no estn dispuestos ha aceptar las sencillas proporciones mendelianas, y por otro lado la escuela Mendeliana, haba asumido que la existencia de variabilidad continua, era una prueba de no heredabilidad del carcter. En 1906 Yule sugiri que no era necesario considerar contradictorios ambos tipos de herencia, si se postulaba la existencia de genes con efectos pequeos y semejantes para explicar la variacin continua. Los trabajas siguientes de Johansen y NilsonEhle fueron un paso ms hacia la reconciliacin, aunque todava no se lleg a aceptar un modelo general que incluya a ambos tipos de herencia. Hasta 1916 no se produce la reconciliacin definitiva entre las dos Escuelas (biomtrica y mendeliana), como consecuencia de los trabajos publicados por East, en los que logr demostrar que la herencia de caracteres cuantitativos podra ser explicada por la segregacin de varios genes con efectos semejantes (hiptesis del factor mltiple).

En paralelo con la controversia entre las escuelas biomtrica y mendeliana se desarrollaron los principios fundamentales de la Gentica de Poblaciones. En 1908, Hardy, en Inglaterra y Weimberg, en Alemania demuestran que las frecuencias gnicas no dependen de factores tales como la dominancia y la recesividad sino que, bajo ciertas condiciones permanecen esencialmente invariables. Esta "ley de equilibrio" de HardyWeimberg constituye el teorema bsico de la gentica de poblaciones, rama de la Gentica que est conectada o incluso puede considerarse como base fundamental de la Gentica evolutiva. Otros hechos importantes, en el desarrollo de la materia que nos ocupa pueden considerarse: El descubrimiento de la sexualidad en las plantas, ya en 1694, Camerarius aporta las primeras evidencias, aspecto que es aceptado plenamente cuando en 1760, cuando Linneaus descubre los rganos sexuales en especies vegetales. Los trabajos de Darwin sobre el papel de la seleccin natural, en el origen de las especies (1859) impulsaron tambin de forma notable la mejora vegetal. El nacimiento de la Gentica estuvo intimamamente ligado con la Mejora Vegetal, como lo demuestra el hecho de que, lo que hoy se consideran los tres primeros congresos internacionales de gentica tuvieran como ttulos "International Conference of Hibridization" (Londres, 1899), "Conference of Plant Breeding and Hibridization" (New York, 1902) y "international conference of Hibridization and Plant breeding" (Londres, 1906). En este ltimo congreso, Bateson afirm "que la actividad de los mejoradores de plantas y animales haba dejado de ser un misterio para convertirse en una ciencia" y propuso el nombre de Gentica para dicha ciencia. A estos primeros descubrimientos, en el campo de la Gentica y de especial trascendencia para la mejora, siguieron otros muchos, entre ellos destacar: El descubrimiento de la transformacin en Diplococus pneumoniae por Grifiith (1928) permiti demostrar a Avery, Macclod y McCarty (1944) que el ADN era el principio transformante. Aunque los resultados parecan contundentes, los genticos de la poca fueron al principio reacios a aceptar que una sustancia diferente a las protenas fuera el soporte qumico de la herencia. Como todo, las evidencias posteriores tanto directas como indirectas, condujeron a la conclusin de que el ADN, en la mayor parte de los organismos, y el ARN, en algunos virus, son las molculas encargadas de portar la informacin gentica. En 1953 Watson y Crick proponen el podelo de la doble hlice para la estructura secundaria de la molcula de ADN. El modelo se acept de inmediato. Las razones fueron evidentes: la estructura propuesta encajaba con algunos de los principales requisitos exigibles a la molcula informacional: La capacidad de almacenar informacin, la capacidad de autoperpetuacin y la capacidad de variacin. Una cuestin fundamental no explicada por el propio modelo de la doble hlice consista en cmo el gen lograba transmitir su informacin a la clula. En 1941, Beadle y Tatum haba emitido su hiptesis "un gen un enzima". Ms tarde, en 1957, Ingram modific la hiptesis original que, de un modo ms general, pas a formular como "un genuna cadena polipeptdica". Establecida la relacin entre genes y protenas, la cuestin segua siendo explicar la forma en que el gen consegua transmitir la informacin a su producto. Las investigaciones efectuadas a lo largo de ese periodo llevan a Crick (1958) a formular lo que se vino a denominar como el "dogma central de la biologa molecular": La informacin contenida en el ADN es transferida desde ste al ARN y de aqu a protena. 3

En 1964 Temin y Baltimore descubren la existencia de enzimas capaces de sintetizar ADN utilizando como molde el ARN, es decir las transcriptasas inversas. As pues tambin puede haber flujo de informacin desde el ARN al ADN. En todo caso el, el presupuesto bsico permanece invariable, o sea la informacin gentica siempre fluye del cido nucleico a la protena. Una vez conocido que el gen transmite la informacin surgi la necesidad de descifrar el cdigo que establece la relacin entre la secuencia de nucletidos especificada en el cido nucleico y la secuencia de aminocidos de la protena. Por fin en 1966, gracias a los esfuerzos de Ochoa, Niremberg y Khorama, entre otros, se lleg a disponer de la tabla completa del cdigo gentico. Se conoce pues la funcin del gen, el modo en que se transmite su informacin y como est codificado el mensaje gentico. Pero Cmo se regula su expresin?. Los organismos ms simples para el estudio gentico son los mas adecuados para abordar los problemas complejos y, en consecuencia, las primeras investigaciones sobre la regulacin de la accin gnica se realizaron en bacterias. En 1961, Jacob Y Monod propusieron el primer modelo de regulacin, conocido como el modelo del "Opern" que corresponda al estudio del "Opern Lac". El modelo bsico se generaliz y se estableci un marco general que ofrece un panorama coherente de los mecanismos bsicos de la regulacin de la accin gnica en bacterias. Si el estudio de la regulacin en bacterias represent un esfuerzo digno de admiracin, la comprensin de los mecanismos de regulacin en eucariotas pareca una empresa que superaba las capacidades de los mtodos analticos empleados hasta la fecha. Por fortuna, a principios de la dcada de los setenta se produce un salto cualitativo a nivel metodolgico que abre un nuevo camino para el estudio de ste as como de otros muchos problemas genticos. El aislamiento en 1970 de la primera endonucleasa de restriccin inagura una nueva era de la gentica. De inmediato los investigadores caen en la cuenta de la extraordinaria importancia de esta poderosa herramienta, abrindose un nuevo camino para el anlisis gentico a nivel molecular. En los tres aos siguientes se consigue la primera molcula de ADN recombinante y se desarrolla el primer mtodo para clonar un segmento genmico. La introduccin de la tecnologa del ADN recombinante tiene un impacto trascendental en la Gentica. Se han abierto nuevos caminos que permiten analizar en profundidad la estructura de la regulacin de los genes, quedando abierta tambin la va para Producir organismos que sern de gran beneficio para la humanidad. Hasta el advenimiento de la tecnologa del ADN recombinante, la va normal para estudiar un gen consista en detectar un alelo mutante del mismo y, a travs del anlisis de ste, proceder a la identificacin de su situacin as como al estudio de la funcin del alelo normal, es decir, el alelo de tipo salvaje, La tecnologa del ADN recombinante ofrece caminos alternativos. Ahora es posible llegar directamente a la identificacin y aislamiento del propio gen de tipo salvaje, mas an, los genes se pueden clonar, y mutar en sitios especficos, produciendo el cambio voluntario de uno o varios nucletidos. Se puede estudiar as el efecto fenotpico de estas mutaciones y comprobar el efecto de la sustitucin de uno o pocos aminocidos sobre la funcin de la protena en cuestin.

Una aproximacin parecida se basa en el empleo de genes antisentido, su transcripcin anula de forma total o 4

parcial, la funcin del gen normal, y de esta forma se puede estudiar el efecto del gen sobre el fenotipo del individuo. De forma alternativa, las propiedades especficas de unin de las transcriptasas a las regiones de control del gen permiten el aislamiento de dichas regiones, su secuenciacin y estudio. El cambio dirigido de nucletidos en estas regiones permite desvelar las secuencias claves en los procesos de regulacin de la accin gnica. La aplicacin de estos mtodos en estudios de regulacin en eucariotas conduce a una comprensin primaria de la enorme complejidad de este tipo de procesos en los organismos ms evolucionados. Otro aspecto en el que se ha avanzado de forma considerable es el que se refiere a la organizacin del genoma en eucariotas. Entre ellos destacar el descubrimiento de Breathnacht (1977) de la interrupcin de las secuencias codificantes (exones) de eucariotas por otras no codificantes (intrones). La existencia de genes interrumpidos obligo a postular un mecanismo adicional para el procesamiento de los productos de transcripcin primarios de los genes eucarticos. La aplicacin de las nuevas tcnicas de anlisis a nivel molecular en organismos cmo Drosophila etc.., ha permitido intrincarnos en un proceso complejo extremadamente difcil de diseccionar: el desarrollo de los eucariotas superiores entendido desde una perspectiva gentica. En trminos generales el desarrollo parece estar controlado por una cascada de genes reguladores, de modo que cada uno de ellos acta, en el momento y lugar preciso para promover la expresin del siguiente conjunto de genes en cascada. Los estudios en este rea de trabajo estn todava muy poco avanzados en vegetales. Estamos muy lejos de entender todava en su totalidad el desarrollo en los vegetales superiores (in vivo e In vitro). Este tema es uno de los retos ha desarrollar en la gentica actual. No se trata slo del beneficio que se obtendr en cuanto al avance del conocimiento mismo. La comprensin del desarrollo tiene un enorme inters desde el punto de vista aplicado, por poner algn ejemplo, un mayor conocimiento en ciertos aspectos del desarrollo se traducira en un control ms adecuado de lo polinizacin a travs de mecanismos de androesterilidad o de inhibicin de la floracin, impidindola en ciertas hortalizas cmo las lechugas que se consumen por sus partes vegetativas, o incrementando el nmero de rganos florales en especies como el azafrn, en la que slo interesan los estambres. Por otro lado si llegramos a la comprensin de los procesos de desarrollo in vitro, se habra logrado un salto cualitativo en la mejora. Bsicamente todas las aplicaciones del cultivo in vitro de clulas vegetales en la mejora dependen de nuestra capacidad de regenerar plantas enteras a partir de explantes, clulas o protoplastos. En consecuencia, es preciso entender el desarrollo a este nivel a fin de extrapolar algunas de las tecnologas que ahora son tiles a algunas especies al conjunto de especies cultivadas. No querra acabar esta primera parte sin referirme de nuevo a uno de los retos de la Gentica no resuelto totalmente: La diseccin gentica de los caracteres que muestran variacin continua. Hasta ahora, la gentica molecular ha aportado poco o nada a este tema. Pero por fin parece que se ha abierto una va para abordar un problema aparentemente insoluble. Este aspecto no slo resulta esencial desde el punto de vista de la gentica, tambin lo es en el contexto de la mejora. A este respecto los nuevos mtodos de anlisis molecular RFLPs (Restriction fragment lengh polymorfism), PCR (Polimerasa chain reaction), o los basados en esta ltima, RAPDs (Random amplified polymorphic DNA), etc.. pueden servir para aumentar la eficiencia de los mtodos clsicos. Simplificando de forma extrema, uno de los problemas bsicos con los que se encuentra el mejorador, La necesidad de identificar a los mejores gentipos sobre sus manifestaciones fenotpicas, en lugar de ello, tomando como criterio de seleccin algn tipo de marcador molecular, se estara trabajando con valores de heredabilidad prximos a la unidad. Los primeros intentos para llevar a cabo tal tipo de marcaje a nivel 5

molecular, se basaron en el empleo de polimorfismos isoenzimticos. El problema de este tipo de marcadores radica en que, a pesar del esfuerzo que se ha hecho, su nmero es claramente insuficiente para reflejar, siquiera mnimamente, la diversidad gentica real. Con el advenimiento de las tcnicas de anlisis RFLP, la situacin cambi drsticamente. La realizacin de mapas de restriccin en algunas especies vegetales condujo a la obtencin rpida de muchos marcadores. La disponibilidad de estos marcadores ha permitido realizar asociaciones de tipo estadstico entre ciertos marcadores moleculares y alelos de loci que regulan rasgos cuantitativos (QTLs, quantitative trait loci). De esta manera, estos marcadores moleculares pueden ser empleados, con un nivel de eficacia potencialmente muy alto, para proceder a la seleccin de individuos que portan QTLs favorables (Linde, 1992). Desde luego, la tecnologa esta todava en un estado incipiente, pero se ha iniciado un camino que puede tener una trascendencia muy importante desde el punto de vista de la mejora. El principio es igualmente vlido para caracteres discretos. Como ya se ha indicado en esta breve exposicin, desde los trabajos de Mendel hasta hoy la gentica ha experimentado un rpido crecimiento. La mejora vegetal ha estado en no pocos casos, en ntima relacin con este desarrollo y, sobre todo, se ha beneficiado prcticamente de todas las ramas de la gentica. As por ejemplo, los avances de la gentica considerados como clsicos (Gentica Mendeliana, Cuantitativa y de poblaciones), dieron origen ha lo que hemos venido llamando "mtodos convencionales de mejora". Los resultados alcanzados por estos mtodos han sido patentes e indiscutibles. Ms an son vlidos y lo seguirn siendo durante muchos aos. Adems el desarrollo cada vez mayor de la estadstica ha dotado a los mtodos tradicionales de poderosas herramientas para el estudio de los caracteres cuantitativos. Aunque dichos mtodos han sido los nicos tiles para dichos caracteres, la seleccin para los mismos no ha dejado de ser difcil y costosa en tiempo y trabajo. A este respecto los mtodos clsicos de mejora pueden verse favorecidos por las nuevas tcnicas de anlisis molecular (RFLP, PCR, RAPDs). Tambin quiero destacar, que durante los ltimos veinte aos se han desarrollado mtodos para obtener plantas completas, a partir de clulas vegetales. A estas tcnicas hay que aadir de forma ms reciente, el descubrimiento de que partes de los plsmidos de ciertas bacterias (Agrobacterium tumefaciens), del suelo se integran de manera natural en los cromosomas de las plantas a las que infectan (fundamentalmente dicotiledoneas). El resultado ha sido un mtodo revolucionario para introducir genes en las plantas que puede tener mucha trascendencia en mejora gentica. Aunque sea el empleo de Agrobacterium el mtodo mas avanzado, se esta investigando en otros muchos, podramos citar por ejemplo, el empleo de microproyectiles, que adems permite salvar el aspecto causado por la incapacidad de emplear Agrobacterium en monocotiledoneas. El progresivo desarrollo de estos mtodos, permitir salvar las barreras sexuales, y evitar las limitaciones que presentan los mtodos clsicos a la introduccin de genes procedentes de otras especies o gneros. Si bien, este desarrollo no ha sido, ni ser, tan espectacular, como muchos pronosticaron, algunos investigadores en este campo de trabajo (sin duda, con pocos conocimientos de los problemas reales que implica la mejora) se atrevieron a pronosticar que, en breve, las tcnicas tradicionales quedaran obsoletas y seran sustituidas por los "nuevos mtodos" que seran mas eficaces y rpidos. Durante los ltimos aos se ha estado dibujando de manera cada vez mas precisa el cuadro de la potencialidad y tambin los lmites de la aplicacin de estas nuevas tcnicas.

Todava existen limitaciones, a la regeneracin de la mayor parte de las especies a partir de protoplastos, o callos, base de la potencialidad de aplicacin de todas estas "nuevas tcnicas". Adems an en el caso de especies en el que se pueden regenerar plantas, sin demasiada dificultad, normalmete requieren a continuacin un proceso de seleccin para volver a alcanzar el ideotipo preestablecido. Con lo que el proceso esta muy lejos de alcanzar la rapidez predicha. La transferencia de genes entre especies distintas, de momento tiene una aplicacin slo para algunos caracteres muy especficos, y fundamentalmente monognicos, como pueda ser, por poner un ejemplo, la introduccin de genes de resistencia a herbicidas. Por ello las tcnicas clsicas de seleccin y de anlisis cuantitativo permanecern siendo el eje principal de la mejora gentica para la mayor parte de los caracteres de inters agronmico. Sin embargo, pese a que estas ideas comienzan a estar claras en la conciencia de todos, el cambio de mentalidad entre los investigadores, sigue siendo lento, en parte favorecido por las polticas de investigacin de la mayor parte de los paises que todava siguen priorizando las nuevas tecnologas, frente a otros proyectos ms clsicos en su planteamiento pero de una mayor aplicacin prctica inmediata (Collins & Philips, 1991). No quiero dar a entender que tengo una visin descorazonadora de las nuevas tecnologas, que siguen teniendo un inters a nivel de investigacin, y como ya he apuntado, tendrn un papel importante en el futuro. Pero no es posible todava una completa sustitucin de los mtodos clsicos de mejora por los nuevos biotecnolgicos. Los mejores resultados podrn derivar del injerto correcto e inteligente de las nuevas tecnologas en las estrategias convencionales de mejora, eventualmente revisadas y adaptadas para obtener el mximo partido. Por todo lo anteriormente expuesto, en este momento, la mejora gentica vegetal es una "ciencia de diseo" en la cual los mejoradores han de buscar la cooperacin con otras materias cientficas para la consecucin de un tipo de planta determinado y as ha sido definida por Jensen (1983). En la actualidad la mejora gentica vegetal, como ya hemos visto, se ha convertido en una disciplina amplsima, particularmente debido a los avances producidos tanto en la biologa como en la gentica molecular, desarrollndose nuevas tcnicas y surgiendo nuevas posibilidades de actuacin, basadas en las tcnicas de ADN recombinante o Ingeniera gentica. Otro aspecto a destacar es el cambio producido en la concepcin de los sstemas agrcolas, mientras que en el pasado la mejora conseguida en cuanto a rendimiento, haba pasado a un segundo trmino (a pesar de que la mitad de la ganancia en los ltimos 50 para los llamados "cultivos mayores" es atribuible a la mejora gentica) en comparacin con los avances producidos gracias a los nuevos procesos de fertilizacin, sistemas de irrigacin, y uso extensivo de agroqumicos. En la actualidad la necesidad de preservar el medio ambiente para las generaciones futuras, junto con los nuevos condicionantes econmicos en la produccin agrcola, en los cuales el rendimiento no es ya, el objetivo exclusivo, tendindose a unos sstemas mas armonizados de produccin, que se engloban dentro del recientemente acuado concepto de Manejo Integrado de Cultivos. II.4. Objetivos de la mejora gentica vegetal Los objetivos de la mejora gentica vegetal, van ligados y son inseparables de los problemas de la alimentacin humana y animal. Hay dos hechos constatados:

1) Los hombres y los animales necesitan alimentarse para sobrevivir. 2) Los vegetales son la piedra angular en la cadena alimenticia de los organismos superiores. El problema del hambre padecido en muchos paises, podra ser consecuencia de la falta de un orden mundial que conlleva a una psima distribucin de los alimentos, mas bien que a un dficit en la cantidad disponible de los mismos. Mientras este orden no se alcance, el reto de producir ms tendr que estar presente. Por tanto un objetivo prioritario en este momento sigue siendo aumentar la produccin de alimentos. Otro aspecto destacable en relacin con la alimentacin reside en la calidad y valor nutricional de los alimentos, tanto si se consumen directamente como si sufren previamente una trasformacin industrial. Existen diversas soluciones tericas para la consecucin de estos objetivos: Variedades ms eficaces (productivas, resistentes a enfermedades, tolerantes a herbicidas, con aptitud para cultivo mecanizado, ciclos ms cortos etc.. Empleo de sstemas de control integrado contra las plagas y enfermedades ms eficaces. Uso mas racional de los fertilizantes. Estructura de las explotaciones mas adecuada: parcelas de cultivo ms grandes, con la consiguiente utilizacin de forma ms rentable de la maquinaria agraria. Empleo de sstemas de cultivo ms variados: Cultivo hidropnico, lana de roca, arena. Aumento de la superficie de produccin. Aumento de la produccin de animales marinos. Produccin de animales sintticos. Sin embargo alguna de las soluciones anteriormente planteadas no sern alcanzadas ni a medio ni a largo plazo. Con relacin a la superficie cultivada, slo el 11 % de la superficie mundial de tierras corresponde a la superficie hasta ahora cultivada. El 59% del total esta formado por desiertos, terrenos salinos, montaas o tierras cubiertas de hielo. Del resto una gran parte no es apta para el cultivo. Hay que aadir el problema de la desertizacin, con lo que se preve que la escasez de tierras supondr un serio obstculo para el 75 % de la poblacin de los paises en desarrollo. Los peces marinos proporcionan en la actualidad aproximadamente el 15% de la provisin mundial de protenas de origen animal. Sin embargo si no se pone remedio a la utilizacin de los procedimientos de pesca tendentes a conseguir slo buenas capturas y a la contaminacin creciente de las aguas, esta reserva, se ver seriamente amenazada. Los alimentos sintticos y su utilizacin en alimentacin humana, implica un cambio profundo en las costumbres de vida, y no parece una va convincente sobre todo para los paises ms industrializados, al contrario los gustos van orientados en una direccin bien opuesta. Por lo tanto, a la vista de lo expuesto, es la va del incremento de los rendimientos unitarios es, la que con mayor probabilidad podr solucionar de forma ms inmediata el dficit alimentario mundial. As lo consider 8

la Organizacin de las Naciones Unidas para la Alimentacin y la Agricultura (FAO), que ha tomado como base del plan indicativo Provisional Mundial para el desarrollo de la Agricultura. Por lo tanto podemos decir que los dos objetivos fundamentales de la Mejora Gentica Vegetal son, produccin y calidad.

Se puede incrementar la produccin desde un punto de vista gentico desde diversos ngulos:

Mejorando la capacidad fisiolgica de los cultivos, que se manifie sta a traves del mejor aprovechamiento de la energa, nutrientes, agua y otras fuentes naturales. Mejorando el potencial intrnseco, que se expresa en condiciones normales de cultivo, por ejemplo produciendo ms grano por pancula. Protejiendo a la planta de los factores adversos (ambientales, plagas y enfermedades, resistencia al transporte etc..)

Aunque la produccin ha sido el primer objetivo de mejora, la calidad ha sido tambin mejorada en muchos casos, a pesar de que an queda mucho camino por recorrer en este apartado debido a su determinacin gentica, en general ms compleja. Tambin en la actualidad, y debido a que la agricultura moderna esta altamente mecanizada, muchos programas actuales de mejora se realizan con el objetivo de conseguir un cultivo ms adaptado a los requerimientos de la maquinaria agrcola empleada. Para finalizar esta breve relacin de objetivos, conviene resaltar la importancia actual del mantenimiento de los recursos fitogenticos como la fuente de variabilidad esencial en los programas de mejora del futuro. Los recursos fitogenticos son los recursos naturales constituidos por cultivares locales y poblaciones naturales de plantas. Estos recursos proporcionan la materia prima (los genes) que, debidamente utilizados por los mejoradores de plantas, permiten obtener mejores variedades. Durante miles de aos, la naturaleza y la agricultura tradicional han permitido su conservacin espontnea y el aumento de la riqueza de estas fuentes naturales. Sin embargo, ciertas prcticas agrcolas "modernas" y la accin del hombre, han invertido estos fenmenos, dando lugar a una prdida enorme e irreparable de materiales de inters. Los recursos fitogenticos son limitados y perecederos. Han sido definidos como la despensa del mundo. Si la alimentacin humana es un derecho inalienable de la persona humana, es preciso considerar los recursos fitogenticos como patrimonio de la humanidad y garantizar su libre disponibilidad, lo cual exige su recoleccin, conservacin, evaluacin, documentacin e intercambio.

II.5. Objeto sobre el que acta la Mejora Vegetal

Queda patente que los objetos sobre los que acta, son las plantas, consideradas como objetos productivos; ya que la mejora vegetal pretende obtener genotipos vegetales que cumplan bien su finalidad en cada caso concreto. Para ello es necesario un conocimiento profundo de la especie en cuestin, su gentica, fisiologa, cultivo y aprovechamiento.

II.6. Disciplinas relacionadas con la Mejora Vegetal Para la mejor comprensin de esta asignatura se precisa de ciertos conocimientos previos relacionados con otras disciplinas; esto es consecuencia de la propia naturaleza de la asignatura: el material vegetal como objeto de ella, su interrelacin con el sistema general de produccin agrcola (variedades, labores de cultivo, abonado, sstemas de riego, maquinaria disponible etc.), repercusin en la dinmica del mercado de productos agrcolas, etc. En este punto hemos de diferenciar entre las disciplinas que la fundamentan (Gentica mendeliana, gentica molecular, citogentica y gentica de poblaciones y cuantitativa), y las disciplinas que la apoyan como puedan ser, qumica, botnica, fisiologa, fitotecnia, patologa, entomologa, estadstica y biometra etc. Gentica mendeliana y citogentica: proporcionan el conocimiento de los mecanismos de la herencia de los caracteres, base de los modernos mtodos de mejora. Gentica molecular: ha permitido un mejor conocimiento de la estructura y funcin gnica y hoy en da sus avances permiten el empleo de tcnicas de ADN recombinante para la creacin de nuevos genotipos. Gentica de poblaciones y cuantitativa: la primera nos da las pautas para la comprensin de los mecanismos evolutivos y de estabilidad de las poblaciones y la segunda nos permite conocer y aprovechar mejor las diferencias entre los individuos de grado, ms que de clase, cuantitativas. La qumica proporciona, por una parte los procedimientos analticos que permiten evaluar y seleccionar individuos (por ejemplo, contenido en azcar de la remolacha, contenido proteico y de aminocidos en semillas de cereales y leguminosas, toxinas etc. La bioqumica, fundamentalmente y gracias a sus avances en los ltimos 30 aos, ha interactuado de forma muy favorable con diferentes aspectos genticos y de mejora; as los estudios de isoenzimas repercuten en el conocimiento evolutivo y taxonmico adems de la identificacin del genotipo; se han identificado muchas rutas biosintticas de metabolitos importantes, por ejemplo los cidos grasos en Brassica etc. La Botnica y en especial la taxonoma, al estudiar la diversidad de los cultivos y sus relativos silvestres, que son los materiales bsicos de la mejora. Es la taxonoma basada en los conocimientos citogenticos y evolutivos la que menos ambigedad presenta y la que ms utilidades reporta. La fisiologa, que asociada con los avances producidos en la bioqumica a nivel celular, de tejido o de rgano, nos permitir conocer y entender mejor el desarrollo normal de las plantas, y su respuesta a medios ambientales de "stress". Aspectos relacionados con la fotosntesis, fijacin del nitrgeno atmosfrico, respiracin, osmoregulacin, fijacin de nitrgeno atmosfrico, absorcin de iones, transpiracin, trasporte de solutos en la planta importan enormemente a la mejora, y su conocimiento profundo permitir definir el ideotipo ms adecuado para cada circunstancia. 10

Enfermedades y plagas juegan un papel sustancial en la prctica agrcola, la mayora de los planes de mejora contemplan la resistencia o la tolerancia a los principales agentes que causan dao al cultivo (hongos, bacterias y virus, al igual que insectos y caros). Se investiga sobre la especificidad de los patotipos, sobre las patoxinas y la respuesta del husped, fitoalexinas, aspectos epidemiolgicos de la enfermedad, tcnicas de identificacin del patgeno, tcnicas de inoculacin artificial etc. La estadstica y la biomtria desempean en la mejora tambin un papel primordial. Permiten disear experiencias, analizar los resultados, predecir estrategias de mejora encaminadas a optimizar la respuesta a la seleccin etc. La fitotecnia, al suministrar conocimientos sobre los cultivos y sus producciones. Proporcionando la capacidad para evaluar crticamente el material disponible, establecer los objetivos agronmicos de la mejora y planificar as un programa eficiente.

II.7. Mtodos propios de la Mejora Vegetal. II.7.1 Mtodos clsicos tradicionales o convencionales: Estos mtodos estn basados fundamentalmente en la gentica mendeliana. Hacen uso de la Hibridacin para conseguir recombinacin y segregacin en la poblacin y posteriormente seleccionar los mejores individuos. Fueron los primeros utilizados y los que ms se utilizan actualmente, habindose conseguido con ellos los mayores logros en el campo de la mejora. Sin embargo han tenido dificultades en el manejo y utilizacin de la variacin cuantitativa; estos problemas se van viendo solventados gracias a nuevos y ms apropiados mtodos de anlisis gentico. Por otro lado el proceso de mejora es largo, lo que implica que el mejorador deba intuir varios aos antes los cambios que hipotticamente van a producirse en las preferencias del mercado. Pero quiz el mayor inconveniente resida en la imposibilidad de conseguir con xito hibridaciones entre especies afines y ms an si son muy distanciadas.

II.7.2 Mtodos citogenticos: El desarrollo de la citogentica permiti una primera manipulacin de cromososmas. Dentro de este apartado son, quizs, los cambios numricos en los cromosomas (autopoliploides y alopoliploides) los que han proporcionado los logros ms sobresalientes.

II.7.3. Mtodos de cultivo in vitro. El cultivo de rgano, tejidos y clulas en un medio y condiciones apropiadas tratan de resolver en menor tiempo algunos de los problemas planteados en la mejora. Del cultivo de rganos el ms interesante es el de embriones ya que permite la obtencin de nuevos hbridos interespecficos e intergenricos y sirven como sistema experimental para estudiar la bioqumica y biologa molecular de los productos acumulados en la semilla. 11

El cultivo de tejidos organizados, en forma de meristemos o pequeos vstagos, ha llegado a ser ya una tcnica til y prcticamente general en mejora. Permite la rpida multiplicacin, mejora de la sanidad de las plantas que se propagan vegetativamente, multiplica plantas con limitaciones en su sistema reproductivo etc.. Del cultivo de clulas, los agregados celulares en forma de callos han sido los ms experimentados; la obtencin de homozigotos mediante el cultivo de granos de polen, la obtencin de lineas celulares resistentes o tolerantes a fitotoxinas fngicas, herbicidas, salinidad etc. ha sido posible, pero presentan dificultades importantes como son la inestabilidad gentica, dificultad de regenerar plantas, y en algunos casos una expresin diferente de clulas cultivadas in vitro con respecto a la planta adulta y ms an imposibilidad en algunos casos de regenerar planta adulta. Las clulas vegetales a las que se ha eliminado la pared (protoplastos) pueden someterse a fusin. Cuando se trata de protoplastos pertenecientes a dos especies diferentes, su fusin puede conducir a la obtencin de un hbrido (somtico), quiz imposible de conseguir por va sexual. Slo en contados casos se ha conseguido regenerar planta adulta. II.7.4. Mtodos de gentica molecular: Se trata de identificar, aislar y multiplicar secuencias especficas de ADN, siguiendo su transferencia a un medio gentico extrao, de manera que ese ADN se integre en el genoma de husped se replique se transcriba y exprese fenotipicamente. Estas manipulaciones moleculares estn bien establecidas en microorganismos, pero no se ha conseguido demasiado xitos de importancia econmica en plantas superiores.Otro mtodo sera el empleo de marcadores moleculares como ayudas a la seleccin.

II.8. Estado actual, perspectivas y limitaciones de la Mejora Gentica Vegetal. Multitud de nuevas variedades han sido obtenidas hasta ahora desde que a finales del siglo XIX se cre en Svalov (Suecia) la primera estacin de mejora de plantas. Importantes logros se han conseguido en el incremento de la productividad, resistencia o tolerancia a enfermedades, plagas, ambientes adversos y adaptacin a la mecanizacin. Los ejemplos ms notables los constituyen el trigo, el arroz y el maz. En los paises desarrollados, especialmente Estados Unidos, los mtodos de mejora gentica iniciados en el siglo XX dieron sus primeros resultados con el maz; la obtencin de variedades hbridas ha sido uno de los hitos en esta especie, y su utilizacin generalizada desde 1950 en USA hizo que la produccin llegase a multiplicarse por cinco en menos de 20 aos. En los paises en vas de desarrollo el esfuerzo se centr fundamentalmente en trigo y arroz. La famosa Revolucin verde, capitaneada por Norman Bourlaug (Premio Nobel de la Paz en 1970), se inici con el trigo en Mxico en 1943 con la aplicacin de un plan subvencionado por la fundacin Rockefeller y el gobierno mexicano para la transformacin de la agricultura tropical. El objetivo de disponer de variedades adaptadas a una agricultura intensiva (sobre todo con relacin al empleo de fertilizantes) condujo a la obtencin de variedades enanas o semienanas capaces de ser sembradas a una alta densidad y resistentes al encamado; la productividad pas de 750 Kg/ha a 3200 Kg/ha. El segundo triunfo de la mejora vegetal en los trpicos se consigui con el arroz, como resultado de la fundacin en 1960 del International Rice Research Institute (IRRI) en Filipinas. Se han obtenido variedades enanas, insensibles al 12

fotoperiodo, con resistencias a plagas y enfermedades, tolerancia a la sequa y a las condiciones adversas del suelo, con mayor contenido proteico, de ciclo corto, etc. Pero otros muchos cultivos tambin se han visto beneficiados. Por ejemplo, las leguminosas (sobre todo la juda ) por disponer muchas de sus variedades de genes de resistencia contra enfermedades importantes como"antracnosis","virus del mosaico comn" etc. Por el contrario,hay pocos ejemplos de mejora en el valor nutritivo de los alimentos, si exceptuamos, los que se refieren a la eliminacin de sustancias nutricionalmente perjudiciales y es este junto con la calidad uno de los mayores retos para el futuro. Dentro del grupo de las plantas hortcolas, las innovaciones varietales se suceden con rapidez para adaptarse al gusto de los consumidores, de la industria y de la tecnologa agrcola (tomates con resistencias a Fusarium, Verticillium,TMV, Cladosporium, exhibiendo una amplia gama de formas y tamaos de fruto; sandias con resistencias, distintos colores de carne (rojo, amarillo), con o sin semillas, etc.; cebollas ms precoces, etc. En otros cultivos, colzas carentes de 'cido ercico' (variedades 00); maices dulces y superdulces blancos o amarillos; remolacha azucarera con mayor rendimiento en azcar; uvas sin semillas; etc. Todo esto junto a un aumento de la productividad. Junto a notables xitos tambin se han producido grandes fracasos, Esto es debido a que existen an limitaciones que impiden que podamos dirigir el proceso de mejora con suficiente precisin. A nivel de la poblacin, se tiene un conocimiento incompleto de su estructura gentica (qu genes hay y cmo se asocian en los individuos); la prediccin del comportamiento de la poblacin sometida a la seleccin (natural o artificial) para muchos caracteres es insuficiente; y en algunos casos no se dispone de un procedimiento adecuado de seleccin. A nivel de individuo, se desconoce el nmero de genes y todav menos la estructura molecular de la mayora de los genes que controlan los caracteres agronmicos ms importantes (produccin, precocidad, respuesta al fotoperiodo,adaptacin,etc). Existen mltiples interacciones entre todos los niveles de organizacin del individuo y el medio externo (y todo ello implica una inseguridad en el proceso de seleccin). A nivel de ciertos caracteres tambin existen limitaciones por ejemplo, la resistencia gentica a enfermedades, que ha conseguido numerosos y notables xitos, mantiene el problema de su falta de estabilidad o durabilidad o el desconocimiento en algn caso de las fuentes de resistencia que puedan ser utilizadas por un mtodo de mejora convencional. Otro ejemplo significativo lo encontramos en cereales con relacin al contenido proteico, dado que ste est en relacin inversa con la capacidad productiva; en maz, los mutantes opaco2 y harinoso2 producen mayor cantidad de lisina, pero esto viene asociado con una mala productividad, peor calidad de cocido y mayor susceptibilidad a plagas y enfermedades. Hasta mediados del siglo XIX los objetivos de la mejora vegetal se centraban prioritariamente alrededor del incremento de la produccin, aspectos ecolgicos, preferencias del consumidor y resistencia a enfermedades y plagas se encontraban en un segundo lugar. No es de extraar que slo unas pocas especies fueran objeto de atencin al principio: trigo, avena, arroz, patata, remolacha azucarera y lino, ya que en conjunto suplan las necesidades ms inmediatas del hombre: alimentacin humana, fibras y forraje; tambin algunos cultivos hortcolas fueron tomados en consideracin tratando de complementar la dieta alimentaria bsica con ciertos aminocidos y vitaminas.

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Con el tiempo se ampli el abanico con nuevos objetivos y especies y se exigi algo mas para otros objetivos ya considerados. As, hacia la mitad del siglo XX la produccin ya se meda como produccin por unidad de superficie cultivada (productividad), se hacia hincapi en las caractersticas nutritivas y de calidad y se ampliaban los objetivos hacia la resistencia o tolerancia a condiciones ambientales adversas.

En este momento se han producido cambios importantes que han de afectar necesariamente a la Mejora Vegetal, ya que podemos redefinirla de acuerdo con Frankel, como una acomodacin gentica a las componentes fsicas, biolgicas, tcnicas, econmicas y sociales del medio, lo cual obliga a reconsiderar y revisar de forma permanente los parmetros en mejora. Con relacin a la productividad, aunque el techo potencial todava no se han alcanzado, los esfuerzos se dirigen ms bien a incrementar las partes de la planta que van a utilizarse (hojas, races, yemas, etc). Con relacin a la biomasa total,se tratar de hacer aprovechables algunos rganos hasta ahora no utilizados, las mayores utilidades en este sentido estn siendo para cereales, seguidos de cultivos de raz y finalmente para cultivos forrajeros. Del mismo modo se pretende aprovechar mejor la capacidad fisiolgica mediante el mejor aprovechamiento de la energa, nutrintes agua, y otras fuentes (por ejemplo trasferencia de genes que permitan la asimilacin del nitrgeno atmosfrico, mejora del transporte de solutos, tolerancia al stress ambiental, edfico y climtico. La lucha contra las enfermedades y plagas habr de seguirse indefinidamente, nuevas razas patgenas y nuevas especies antes no perjudiciales para los cultivos estn apareciendo de forma continuada. El mejorador habr de estar siempre en guardia. La aplicacin de todos los mtodos utilizables en mejora sern necesarios. Las nuevas variedades tendrn que irse adaptando a las innovaciones tecnolgicas en los campos de la agronoma y de la industria agroalimentaria, tales como diferentes sistemas productivos, cultivo mecanizado etc. Las nuevas variedades debern ser tales que permitan una estabilidad en la produccin (concepto este diferente al de produccin bajo el punto de vista gentico). La estabilidad viene determinada por una adaptacin general del cultivo a distintas condiciones atmosfricas, reas geogrficas, sequa, baja fertilizacin etc. unida a resistencia o tolerancia a enfermedades, plagas, y malas hierbas). Habr de hacerse un esfuerzo notable con relacin a la mejora de la calidad. Los mtodos clsicos, utilizados cada vez con ms garantas de xito, se complementarn con los potentes mtodos basados en la gentica molecular y en el cultivo "in vitro". II.9. PARTES DE UN PROYECTO DE MEJORA Un plan de mejora debera tener en cuenta los siguientes aspectos: 1.Visin general del problema. Delimitacin de los objetivos Estimacin de los recursos (vegetales, humanos y econmicos) 14

Posibles procedimientos a utilizar. Eleccin de la mejor alternativa.

2. Diseo definitivo del programa de mejora. Concrecin del objetivo de mejora: tipo de variedad y caracteres a mejorar. Conocimiento de la biologa reproductiva (alogamia, autogamia, o apomixis o multiplicacin vegetativa) de la especie/s o variedades a mejorar. Conocimiento de la biologa floral (autoincompatibilidad, hibridaciones) de la especie/s o variedades a mejorar. Disponibilidad de suficiente variabilidad gentica (ya existente o crendola) para que la seleccin posterior sea efectiva. Conocimiento de la gentica de los caracteres: tipo de herencia, influencia ambiental, interaccin genotipo x ambiente, correlacin con otros caracteres. Determinacin del criterio de seleccin para el carcter o caracter/es. Eleccin del mtodo de mejora ms adecuado en funcin de la informacin anterior. 3. Evaluacin de los resultados. Multiplicacin a escala comercial. TEMA 2 BIOLOGIA REPRODUCTIVA Y FLORAL Y MEJORA GENETICA El conocimiento de los mecanismos reproductivos de un cultivo (si es de forma sexual o asexual, y en el primer caso si se autopoliniza o no) y su biologa floral (que incluye la apertura de las floresantesis, dehiscencia de anteras, viabilidad del polen y receptividad del estigma) constituye un conocimiento bsico para que puedas proyectar convenientemente un plan de mejora. Si no tienes esos conocimientos has de averiguarlos. De lo contrario estaras dando "palos de ciego". Ambas, biologa floral y biologa reproductiva, inciden en un programa de mejora porque: a) afectan a la manipulacin del material vegetal durante el proceso de mejora. b) determinan fundamentalmente la estructura gentica de una: poblacin (es decir, que genes y que genotipos hay presentes y con que frecuencia) y, en consecuencia,delimitan en buena parte el tipo de nueva variedad que conviene tratar de conseguir (lineas puras, hbridos, variedades abiertas o de polinizacin libre, etc.) y el esfuerzo requerido para ello. (Otras causas que tambin afectan a las frecuencias gnicas y genotpicas, como deriva gentica, mutacin, 15

migracin y seleccin las veremos ms adelante). Con relacin a a), no es lo mismo manejar especies donde fcilmente puedan verificarse hibridaciones o autofecundaciones controladas (caso del maz y meln, por ejemplo entre las plantas algamas, y el tabaco o tomate entre las autgamas) como otras especies donde una u otra tcnica se vean:dificultadas por sus caractersticas biolgicas (avena, trigo, cebada, juda especies autgamas donde los hbridos pueden producirse pero con elevado trabajo y gasto; o alfalfa, fleo, dactilo,poa, etc. donde por el tamao de sus flores o incluso por problemas de autoincompatibilidad la autofecundacin o el cruzamiento controlado son difcil). Con relacin a b),haremos algunas consideraciones generales ahora, profundizando mas en lecciones posteriores. Cuando se dispone de una poblacin de plantas autgamas normalmente estn formadas por una mezcla de lineas altamente homocigticas. El objetivo de la mayora de los programas de mejora para este grupo de plantas consistir en la obtencin de una lnea pura. La conservacin de las variedades mejoradas es relativamente fcil, pues basta con eliminar las mezclas mecnicas y las mutaciones que puedan producirse y evitar la alogamia ocasional (ya que la autogamia puede no ser absoluta). Las especies algamas , por el contrario, cuya fecundacin cruzada es lo habitual, presentan un alto porcentaje de heterocigosis, y la consanguinidad prolongada produce casi siempre una disminucin de vigor y otros efectos perjudiciales (existe alguna excepcin como es el caso de las cucurbitceas, que siendo algamas son menos sensibles a la consanguinidad). Esto induce a que uno de los objetivos de mejora sea el de conservar esa heterocigosis o restaurarla en la fase final del proceso. En estas especies pueden presentarse problemas de autoincompatibilidad, que dificultan la obtencin de homocigotos. La conservacin de variedades exige aqu un mayor control del aislamiento cuando se trata de obtener semillas. Cuando la plantas que se manejan se propagan asexualmente , es tambin general que los individuos sean altamente heterocigticos. Pueden introducirse adems nuevos esquemas, ya que puede mantenerse intacto el genotipo (a no ser que se produzcan mutaciones gnicas o variaciones cromosmicas) ya sea homocigoto o heterocigoto, y por tanto, Conservar las Caractersticas conseguidas en los nuevos individuos sin peligro de segregacin. Su conservacin es sencilla, reducindose a la eliminacin o eventual seleccin de mutantes. Supon que deseas mejorar la especie Phaseolus vulgaris (juda). Esta se reproduce sexualmente,y fundamentalmente por autofecundacin. Te costara poco esfuerzo obtener lnea puras, ya que bastara que la dejaras reproducir por si sola. Si quisieras crear previamente variabilidad para seleccionar despus, podras hacerlo mediante cruzamientos intra e interespecficos, necesitando en estos casos dirigir el cruzamiento; es decir, enmascular o castrar el parental femenino y polinizar despus con polen del parental masculino. Esta operacin es factible, aunque algo lenta y relativamente eficiente si se hace manualmente, dado el tipo de flor de las leguminosas y su tamao en esta especie, la influencia de las condiciones climticas (ms efectiva: en invernadero que al aire libre, T ptima 2225C, 6575% de hr, 15 Klux/m2 y 1012 h. de fotoperiodo) y la tcnica de hibridacin utilizada (sin enmascular ms efectiva que con emasculacin); aunque se conocen factores genticos que determinan androesterilidad, estos no renen por ahora todos los requisitos exigidos para su utilizacin a gran escala. Podemos decir, pues, que en esta especie el tipo de variedad ms conveniente seria un genotipo homocigtico que se obtendra tras sucesivas generaciones de autofecundacin, utilizando la hibridacin slo en las primeras etapas del programa. Se han hecho avances en este campo de la biologa pero todava queda camino por recorrer. Es un rea de estudio sugerente donde la profundizacin del conocimiento a nivel qumico y molecular de los mecanismos implicados y la ampliacin de las experiencias a una mayor diversidad de condiciones ambientales beneficiarn, sin duda, a la mejora entre otras ciencias. OBJETIVOS 1. Los distintos mecanismos reproductivos de las plantas superiores. 16

2. Cmo determinar, a efectos de utilizacin prctica, el modo de reproduccin de los individuos que estas manejando. 3.. Cmo estimar la frecuencia de fecundacin cruzada natural y la distancia mnima entre dos poblaciones, lo cual servir para separar/reunir convenientemente los individuos en el tiempo o en el espacio, y as evitar/permitir polinizaciones no deseadas/deseadas.

Para centrarnos mas rpidamente en los contenidos que siguen, recuerda que una flor individual con relacin a sus rganos sexuales puede ser de tres tipos:

* Hermafrodita, si tiene estambres y carpelo/s. * Estaminada o androica, si tiene estambres nicamente. * Pistilada o ginoica, si tiene carpelos nicamente.

Mientras que si nos referimos a una planta completa , sta puede tener uno o varios tipos de flores dando lugar a las siguientes posibilidades de expresin del sexo: Figura 1

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Finalmente, si nos referimos a la expresin del sexo de un grupo de plantas , la nomenclatura sera (para los casos ms comunes): * Hermafrodita, cuando todas las plantas del grupo son hermafroditas. * Monoico, cuando todas las plantas del grupo son monoicas. * Dioico, cuando en el grupo hay plantas androicas y plantas ginoicas. * Androdioico, cuando el grupo esta formado por plantas androicas y plantas hermafroditas. * Ginodioico, cuando el grupo est formado por plantas ginoicas y plantas hermafroditas . 1. MECANISMOS DE REPRODUCCION Definiremos cada uno de los trminos utilizados y analizaremos cmo afecta cada mecanismo a la estructura gentica de las poblaciones y a su variabilidad . Reproduccin sexual En la reproduccin sexual, caracterstica de los seres superiores, un gameto femenino y un gamento masculino se fusionan para dar lugar al zigoto, el cual por sucesivas divisiones dar un nuevo ser. En las plantas superiores implica la formacin de gametos (macrosporognesis gametos femeninos y microsporognesis gametos masculinos) a travs de la meiosis, y la fecundacin a travs de la polinizacin, normalmente. Permite crear gran cantidad de variabilidad por recombinacin gnica. Reproduccin asexual La reproduccin asexual implica el crecimiento y desarrollo de partes vegetativas de la planta (clulas, tejidos, 18

rganos) o de clulas del gametofito no fecundadas, hasta obtener un individuo nuevo y completo a travs de mitosis sucesivas. La estructura gentica depender de cmo sea la planta madre de partida; sin embargo, se espera que en general exista una alta proporcin de individuos heterocigticos, teniendo en cuenta la general superioridad agronmica de estos individuos. Las poblaciones podrn estar formadas por individuos del mismo genotipo (clon) o por individuos de distinto genotipo (mezcla de clones). Si el cultivo se reproduce exclusivamente por va asexual se genera escasa o nula variabilidad (exceptuando la que se genera por mutacin. Cleistogamia Este mecanismo est basado en el hecho de que la fecundacin se realiza dentro de la flor cerrada . las flores cleistgamas no se abren y se caracterizan por una reduccin en el nmero y tamao de partes de la misma, como estambres, y por modificaciones del periantio. Por tanto, la autofecundacin queda asegurada. El mecanismo contrario se denomina chasmogamia. Puede tratarse de una cleistogamia ecolgica , cuando las flores cleistgamas se producen en condiciones ambientales desfavorables (frio, calor, humedad, sequa, etc.), pudiendo alternarse con flores normales; el sorgo produce flores chasmgamas en la base y centro de la pancula y cleistgamas en su extremo bajo condiciones de stress; el arroz var. Japnica sufre un retraso en la apertura de la espiguilla o cierre completo con alta humedad etc. Los procedimientos que conducen a la cleistogamia pueden ser variados: A veces, los granos de polen germinan ya en el interior de sus anteras, atravesando los tubos polnicos las paredes de las mismas en direccin al estigma (ej.: Violeta odorata) Otras veces la antera dehiscente queda atrapada en los pelos estigmticos. La estructura gentica es la propia de una especie autgama; individuos altamente homocigticos forman la poblacin. Autopolinizacin en preantesis ("bud pollination"). La polinizacin se produce antes de que se abra la flor.Lolium temulentum ). Monoeca . En un mismo individuo los rganos sexuales femeninos estn separados en el espacio de los rganos sexuales masculinos. Son ejemplos de especies monoicas o con variedades monoicas: maz, nogal, pltano, vid, avellano, pepino, calabaza, meln. Dicogamia . Son plantas dicgamas aquellas en las que Los estambres y estigmas de una misma flor alcanzan la madurez para la polinizacin en poca distinta. Si los estambres llegan a sazn antes que los estigmas, habr protandria (ej.:camo:la, frambuesa, cebolla etc.); en caso contrario habr protoginia ( pimienta negra, fresa, pimiento, etc.). La protandria es ms frecuente que la protoginia. ~ Heterostilia

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Hace referencia al distinto nivel que ocupan en la misma flor los estambres con relacin al estigma. Si el estigma est por encima de las anteras, se trata de longistilia (ej.: algunas variedades de tomate, Si ocurre lo contrario, brevistilia En Primula sinensis se dan los dos tipos. Hercogamia Hace referencia a la distinta situacin en el espacio dentro de una misma flor de estambres y estigma (ej.: lirio). Es similar a la heterostilia, pero teniendo en cuenta la conformacin de la flor. Los mecanismos de monoecia, dicogamia, heterostilia y hercogamia, implican una alta frecuencia de fecundacin cruzada, aunque permiten tambin un cierto porcentaje variable de autofecundacin. Por tanto, la estructura gentica resultante se aproxima ms a la de las poblaciones completamente algamas (elevada heterocigosis), pero sin olvidar la homocigosis determinada por autofecundacin. Dioecia . Implica diferenciacin sexual y gentica. los rganos sexuales femeninos y masculinos estn separados en distintos individuos. En plantas superiores es un mecanismo poco frecuente. Se conoce bastante bien el control gentico de la dioecia en las plantas superiores. Este mecanismo impide, por tanto, la autofecundacin, pero no el apareamiento entre hermanos o entre formas menos emparentadas. Son ejemplos de especies dioicas: palmera datilera, lpulo, espinaca, papaya, esprrago.

Androesteri1idad Los gametos masculinos no son funcionales. Este mecanismo que puede ser determinado por genes nucleares, factores citoplsmicos o por interaccin gnicocitoplsmica, impide tambin la autofecundacin. Los mutantes de androesterilidad aparecen con frecuencia y regularmente en las especies autgamas; en algunos casos ciertos caracteres que les acompaan impiden su utilizacin prctica. Autoincompatibilidad Una planta bisexual es autoincompatible cuando an produciendo gametos perfectamente funcionales no se produce descendencia por autofecundacin. Si se debe a cambios morfolgicos en los rganos sexuales (ya sea como efecto primario o secundario) , se trata de una incompatibilidad heteromrfica (ej.: Primula , Linum , Lythrum , Narcissus , etc). Si no se ocasionan cambios morfolgicos ser una incompatibilidad Homomrfica y esta a su vez podr ser gametoftica o esporoftica. Multiplicacin por partes vegetativas Se trata de un mecanismo de reproduccin asexual. Distintas estructuras clulas u rganos pueden constituir el material adecuado. Gran cantidad de especies pueden reproducirse de este modo. Finalmente, en funcin de los mecanismos que acten, las plantas cultivadas desde el punto de:vista de aplicacin a la mejora podrn clasificarse en tres grupos: .

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A) Autgamas: Si fundamentalmente se reproducen por autofecundacin (frecuencia de autofecundacin igual o mayor a 90 %). B) Algamas: Si fundamentalmente se reproducen por fecundacin cruzada

C) De reproduccin vegetativa y apomcticas:. Si su reproduccin es asexual en la prctica agrcola, aunque puedan producir semillas normales por fecundacin sexual.

DETERMINACION DEL MODO DE REPRODUCCION Si desconoces si una planta es autgama o algama puedes averiguarlo siguiendo todos o alguno de estos pasos: 1. Observa la estructura floral. Como se aprecia en el cuadro sinptico,ciertos mecanismos conducen fundamentalmente a un modo concreto de reproduccin por ejemplo, cleistogamia, autogamia funcional y, autopolinizacin en preantesis conducen a autogamia; dioecia conduce a alogamia etc. 2. Aisla plantas individuales y observa si producen o no semillas. El aislamiento ms conveniente es en el espacio, ya que la confinacin de la planta mediante bolsas u otros dispositivos pueden crear un microclima desfavorable. Si la planta no produce semillas > alogamia con alta probabilidad. Autogamia. Si la planta produce semillas alogamia (plantas autofrtiles) 3. Observa el efecto de .la consanguinidad (consecuencia de autofecundacin o cruzamiento entre parientes). Las plantas algamas toleran mal la consanguinidad. Lo contrario sucede a las plantas autgamas. Una vez clasificadas nuestras plantas en uno u otro grupo, tendrs que conocer: El porcentaje de fecundacin cruzada natural y las distancias mnimas entre dos poblaciones para controlar la polinizacin.

3. ESTIMACION DE LA FRECUENCIA DE FECUNDACION CRUZADA Y DE LAS DISTANCIAS MINIMAS ENTRE DOS POBLACIONES DE LA MISMA ESPECIE Utilizando los mismos procedimientos es posible contestar a ambas cuestiones. Su conocimiento tiene una aplicacin importante no slo durante el desarrollo del programa de mejora, sino tambin durante la conservacin y multiplicacin del material mejorado (nueva variedad) con vistas a su certificacin comercial. Procedimientos para la estimacin de cruzamientos naturales:

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Una experiencia sencilla es estudiar la descendencia para un carcter en la poblacin. Si situamos en lneas dos variedades con un gen marcador, Pej: la coloracin de la flor en borraja (azul o blanca, siendo el azul dominante sobre blanco). Despus se recoge la semilla de la lnea de flor blanca, toda la descendencia que muestre flor blanca proceder de autofecundacin (porcentaje de autofecundacin, mientras que la de flor azul corresponder al porcentaje de fecundacin cruzada. Si disponemos de un gen marcador la experiencia para el clculo de la distancia mnima no es demasiado complicada. Por ej: Utilizando el mismo marcador, la coloracin de la flor en Borraja. En este caso el color azul es dominante sobre blanco. Podemos disponer entorno a una lnea de color azul otra de flor blanca formando crculos concntricos. Posteriormente recogeremos la semilla de flor blanca y analizaremos la descendencia. La distancia mnima ser aquella a partir de la cual el nmero de descendientes de flor azul, este por debajo de un valor mnimo prefijado. RESUMEN Previamente a la planificacin de un proyecto de mejora hay que conocer la biologa reproductiva y floral del material vegetal que va a manejarse y las condiciones ambientales que le afectan. Los mecanismos reproductivos que obligan o favorecen la fecundacin cruzad dan lugar a poblaciones con individuos altamente homozigoticos. Los mecanismos reproductivos que obligan o favorecen la fecundacin cruzada dan lugar a poblaciones con mayor porcentaje de heterocigoticos (este valor depender del porcentaje de fecundacin cruzada). La cantidad total de variabilidad a nivel de poblacin en especies de reproduccin sexual es independiente, a priori, de que la especie se autofecunde o no. Las especies de multiplicacin vegetativa y apomcticas dan lugar en general, a poblaciones altamente heterocigotas, aunque su variabilidad puede ser casi nula en algunas poblaciones. Es necesario conocer tanto el valor de fecundacin cruzada, como la distancia mnima, no slo para el desarrollo del programa de mejora, sino tambin para la multiplicacin y distribucin de la nueva variedad a escala comercial. TEMA 3 GENETICA MENDELIANA. Introduccin: La gentica es la rama de la biologa que se ocupa de la herencia. La informacin hereditaria se encuentra situada en los cromosomas, que estn formados por una sustancia llamada ADN. Esta molcula y en concreto la disposicin ordenada de sus diferentes componentes, es decir los nucletidos es la portadora de toda la informacin hereditaria. La estructura de esta molcula corresponde a una doble hlice (modelo descubierto por Watson y Crick y representado en la figura 1. El ADN se organiza en la clula formando cromosomas, que se encuentran en el ncleo de las clulas. Los genes son una parte de dichos cromosomas, es decir una porcin de ADN, que codifica para una protena. Ocupan por tanto un espacio fsico en el cromosoma denominado locus = Gen (Loci en plural).

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Las caractersticas resumidas de esta sustancia tan importante para la vida seran: 1. El ADN, es capaz de transferir su informacin codificada para formar las diferentes protenas. Estas a su vez son las responsables del fenotipo y funcionamiento de los individuos. 2. El ADN, posee la capacidad de replicarse durante los procesos de divisin celular, creando una copia idntica que ser transmitida a las clulas hijas. Cada individuo u organismo superior posee un nmero determinado de cromosomas que es propio de cada especie y una infinidad de genes situados en ellos a modo de cuentas de un collar. Cada clula somtica (no sexual) de ese individuo posee una copia idntica. Estos cromosomas forman parte de dos juegos heredados, un juego materno y otro paterno (Cromosomas homlogos). En un principio en cada cromosoma homlogo exista un gen que era idntico al presente en el otro homlogo. Es decir cada gen estaba representado dos veces en el individuo.

Pero en algunas ocasiones debido a que la autorreplicacin pudo y puede no ser correcta, se presenta un cambio espontneo o inducido en una parte de dicha molcula. A este proceso se le denomina mutacin (que puede incluso, si es viable, provocar la aparicin de nuevos caracteres en el individuo transferibles a la descendencia). Por ello las mutaciones han sido responsables de la aparicin de formas alternativas de un gen que se denominan alelos.

Figura 1. Representacin esquemtica del modelo de doble hlice. Proceso de transcripcin a RNA, y traduccin a protena.

El nmero total de cromosomas (Paternos y maternos) se denomina nmero diploide (2n). Las clulas sexuales contienen un nico juego, por tanto son haploides (n). Ej: el pepino tiene 14 cromosomas y por tanto sus gametos 7, que al unirse para formar el zigoto volvern a ser 14. El proceso por el cual vulo y polen reducen su dotacin cromosmica se denomina meiosis y debes repasarlo en cualquier libro de biologa o gentica. Cada cromosoma homlogo posee un alelo para el carcter que define, por tanto la expresin fenotpica resultante, en un individuo, ser el resultado de las interacciones que se produzcan entre la pareja de alelos que porten sus cromosomas paternos y maternos. Por ejemplo, supongamos que el color de una especie de flores, pueda ser blanco o rojo (es decir de fenotipo blanco o rojo). El color blanco se produce cuando los dos cromosomas homlogos llevan el mismo alelo que denominaremos a. El individuo ser de genotipo (a, a). El color rojo se produce cuando un cromosoma lleva el alelo que da color rojo A pudiendo llevar el otro homlogo o bien A o a. de qu genotipo podr ser un individuo rojo?...............................................Esta interaccin se denomina fenotipo dominante o Dominancia para Rojo y fenotipo recesivo o recesividad para el color blanco. 23

Las posibilidades son: ____A___ Cromosoma materno Color Rojo ____A___ Cromosoma paterno ____a____ Paterno Color: ____a____ Materno ____A___ Cromosoma materno Color Rojo ____a___ Cromosoma paterno

Aqu aparecen dos conceptos clave, el de fenotipo o apariencia externa, es decir sera el aspecto del carcter que observamos al mirar al individuo. El otro sera el de genotipo es decir los alelos que porta dicho individuo.

Continuando con el ejemplo, en ocasiones puede aparecer otro fenotipo. Flores de color rosa, que no seran el resultado de alelos distintos, sino de una interaccin nueva: la codominancia entre los dos alelos. El genotipo de un individuo de color rosa sera................

3.1. Herencia de un solo gen. Antes de describir este apartado es conveniente repasar algunas definiciones: La unin de gametos que portan alelos idnticos, produce un genotipo homozigoto. Mientras que la unin de gametos que portan alelos distintos, dar lugar a un genotipo heterozigoto. Lnea pura: es el individuo o grupo de individuos que son homozigotos para todos sus caracteres. Las relaciones entre alelos como ya hemos visto con anterioridad pueden ser de dominancia, recesividad o codominancia.

Leyes de Mendel:

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Fueron elaboradas por Gregor Mendel a finales del siglo pasado y como se explic en el tema de introduccin, fueron uno de los acontecimientos mas importantes en el desarrollo de esta ciencia. . Primera ley de mendel: Es la ley de la uniformidad en la primera generacin filial del cruzamiento de dos lneas puras. A esta generacin se le denomina F1. AA x aa _______ Aa (F1) Como observareis toda la variabilidad que observemos en esta generacin sera debida al ambiente ya que todas las plantas son genticamente iguales.

. Segunda ley de Mendel: Es la ley de la segregacin en la segunda generacin Es decir la resultante de cruzar la F1 por si misma: F1 x F1 Aa x Aa________ 1/4 AA 1/2 Aa 1/4 aa A diferencia de la generacin anterior existen tres genotipos distintos, no todos los individuos sern iguales y aparecern 3 clase genotpicas y dos o tres fenotpicas. de qu depende el nmero de clases fenotpicas?

3.2. Dos o mas genes: . Tercera ley de mendel: Es la ley de transmisin independiente de los caracteres a la descendencia, siempre que no haya ligamiento del cual hablaremos mas adelante. A efectos prcticos (para resolver problemas) recordad que si dos variables son independientes la probabilidad de que se presenten juntas es el producto de la probabilidad de cada una de ellas.

3.3 Ligamiento y recombinacin: El ligamiento se produce cuando los genes se encuentran en el mismo cromosoma, esto hace que se transfieran con mayor probabilidad juntos. Este ligamiento no es absoluto y depende de la distancia a la que se encuentren en el cromosoma. Cuanto mas alejados estn con mayor frecuencia se podr producir el fenmeno conocido como recombinacin. 25

Por ejemplo: Imaginad que nos interesa obtener una planta de altura elevada y resistente a una enfermedad. Si realizamos el cruzamiento entre una planta enana y resistente por una susceptible y gigante. Si observamos que a pesar de los cruzamientos que realicemos no aparece la descendencia que buscamos (Alta y Resistente), lo que estar sucediendo es que dichos caracteres estn ligados en el mismo cromosoma. AABB (enana y resistente) x aabb (alta y susceptible) F1 AaBb Posibles gametos: A____B a______b La F1 Formar los dos tipos de gametos que aparecen arriba. y por tanto las plantas descendientes sern: A_______B A_______B a______b A_______B a_______b a______b

Si se produjera durante la produccin de gametos la recombinacin, la situacin cambiara ya que adems de la dotacin gamtica anterior, apareceran dos nuevas combinaciones gamticas como resultado de la recombinacin: 1)A______B 2)a______b 3)A________b 4)a________B Los nuevos gametos recombinantes son (3 y 4) Ahora las plantas descendientes podran ser: A______b A______b a______B A______b a______B a______B Enana y Susceptible Enana y resistente Alta, resistente Existe otro fenmeno que podra confundirse con el ligamiento. Se denomina pleiotropa pero es de naturaleza muy diferente. Decimos que existe pleiotropa cuando un solo gen afecta a varios caracteres. Un ejemplo es el albinismo, que causa entre otras cosas ausencia de pigmentacin en ojos, pelo y piel. Cmo afectara a la marcha de un programa de mejora el ligamiento?

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3.4. Series allicas: Hablamos de series allicas cuando hay mas de dos alelos distintos para un mismo locus. Ej: El color del pelaje de los conejos, o los grupos sanguneos en humanos. Estos alelos pueden presentar una gradacin de dominancia y/o codominancia. Lo ilustraremos con el ejemplo de los grupos sanguneos: Dicho carcter se encuentra controlado por una serie allica (A>O, B>O, O recesivo, A= B). qu grupo sanguneo (fenotipo) presentarn los siguientes fenotipos: AO, AB? Se puede tener un hijo de fenotipo 0, si el padre es A y la madre es B?

3.5. Interaccin gnica o epistasias: Recordad que la segregacin mendeliana para dos genes sera: 9:3:3:1. Las relaciones epistsicas alteran esta segregacin, como consecuencia de la enmascaracin de un gen por el efecto de otro. No todas las interacciones son el resultado de una enmascaracin, tambin existen otras, como las causadas por efectos aditivos y cuya segregacin corresponde a una proporcin 9:6:1. Intente explicarla? Existen muchos tipos de relaciones epistsicas conocidas, pero nos limitaremos a los modelos dignicos mas conocidos: . Epistasia Dominante (12: 3:1): Se produce cuando el Gen A (dominante) es epistsico sobre B o b. B Prpura (3) aa Cromgeno p bb Rojo (1) A Albino (12)

.Epistasia recesiva (9:3:4) El recesivo en homocigosis es epistsico:

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R Rojo (9) Ee, EE Cromgeno p rr amarillo (3) ee Albino (4)

. Epistasia doble dominante (9:7) Se produce cuando existen dos controles alternativos para la produccin del producto final: AB PQR aa(bloquea) bb(bloquea) La segregacin observada es por tanto 7 blancos y 9 con color. . Epistasia doble recesiva (15:1) Es necesario que los dos genes recesivos estn en homocigosis para la manifestacin fenotpica del carcter, en este caso deficiencia cloroflica. EL nico individuo albino ser (aa,bb).

. Epistasia doble dominante y recesiva (13:3) Uno de los genes acta como inhibidor del otro. EJ; Herencia de la resistencia de una variedad de avena a la roya del tallo. A: Factor de resistencia B: Inhibe la resistencia y es dominante Para que la planta sea resistente tiene que poseer A y adems ser bb. TEMA 4 EL MEDIO Y LA HERENCIA

4.1 Importancia del genotipo y del medio ambiente No siempre existe una clara relacin gen carcter. Los genes son los elementos para la fabricacin de nuevas variedades, siendo esencial en la mejora de plantas tener en cuenta la relacin entre genes y caracteres, es decir la relacin entre genotipo y fenotipo. 28

En la actualidad se acepta comunmente que en las plantas superiores no todos los efectos fenotpicos estn relacionados de forma sencilla con un gen, sino que son mas bien el resultado de una cadena de relaciones e interacciones fisicoqumicas iniciadas por los genes, que conducen a travs de complejas cadenas de acontecimientos controlados o modificados por otros genes y el mundo exterior, al fenotipo final. En mayor o menor grado, el funcionamiento de cualquier gen depende del genotipo de que forma parte y del medio exterior al que est expuesto. Hay numerosos casos en que caracteres morfolgicos o fisiolgicos estn controlados por un nico gen y resultan poco afectados por el medio fsico o gentico. Estos caracteres son fcilmente identificables y muy estables, y cuando afectan a caracteres de inters agronmico son muy valiosos para los mejoradores. Por desgracia otros muchos caracteres de inters son complejos y altamente influenciables tanto por el medio gentico como por el medio externo (caracteres cuantitativos). No siempre esta interrelacin es negativa desde el punto de vista de la mejora, en ocasiones puede proporcionar incluso una herramienta indirecta de seleccin. Pej, ya en 1948 Suneson y colaboradores observaron que la introduccin de aristas en una variedad mocha de trigo, aument su rendimiento en un 7%. Este fenmeno es debido al ligamiento entre la presencia de aristas y algunos genes de efectos importantes sobre el rendimiento. Pero recordad que tambin se puede dar la situacin contraria, con ligamientos que complicarn la marcha de un programa de mejora. Otro camino por el que el medio gentico puede alterar la relacin gen carcter es el de los genes con efectos pequeos que ejercen su principal influencia intensificando o disminuyendo los efectos de los genes principales. A estos genes se les denomina modificadores. Sus efectos son fundamentalmente cuantitativos y solo pueden describirse mediante mediciones. Otro aspecto que preocupa notablemente a los mejoradores es el fenmeno conocido como interaccin genotipo por ambiente, y que estudiaremos mas detalladamente cuando nos ocupemos de la mejora del potencial productivo. Este fenmeno se expresa con un comportamiento diferencial de la misma variedad al ser expuesta a distintos ambientes. Es fcil entender que si todo progreso real que se obtiene con la mejora es causado nicamente por factores genticos, esta interaccin nos dificultar el conocer que parte de esa variedad es aprovechable para un programa de mejora y que parte no, ya que la medicin de dicho carcter va a depender del medio externo. Por ello es necesario siempre, y en especial cuando se trabaja con caracteres cuantitativos, realizar ensayos previos en distintos ambientes, para eliminar posteriores sorpresas desagradables.

2. Umbrales, Penetracin y expresividad Los umbrales son otro fenmeno que puede oscurecer la relacin GenCarcter. Collins (1927) descubri una cebada albina, en la que dicho carcter solo se expresaba a temperaturas inferiores a 7 C. Penetracin: Puede definirse como la habilidad de un gen para manifestarse en los individuos que son portadores de el. As una variedad de juda de Lima llamada Ventura, lleva un gen dominante que hace que los pices y mrgenes de las hojas unifoliadas de las plntulas sean deficientes en clorofila. Sin embargo, rara vez se presenta en mas del 10% de las plantas. Se puede decir que este gen posee una penetracin del 10%. Adems hay una variacin en la expresin del carcter en las diferentes plantas. En algunos individuos todas las hojas estn desprovistas de clorofila, pero en algunas la situacin revierte con el tiempo hacia la normalidad, y en otros casos no llegan a sintetizar clorofila y mueren. Por lo tanto este gen no slo tiene una penetracin incompleta, sino adems una expresividad variable.

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RESUMEN La funcionalidad de un gen en un individuo, su expresin y estabilidad va a depender del medio interno (gentico) y del externo (medio ambiente). El mejorador tendr que ser capaz de descubrir estas interacciones para poder aprovechar en profundidad los genes presentes en el material vegetal susceptible de ser empleados en los programas de mejora. Todas estas interacciones son la causa de que no siempre los mejores fenotipos son los mas adecuados. No siempre el mejor fenotipo da la mejor descendencia, ni los cruzamientos entre los mejores fenotipos darn descendencias mejores que sus parentales. podras decirme si esta ltima afirmacin es debida a causas genticas o ambientales? pon un ejemplo? Hay que tener en cuenta que tampoco es lo mismo que las plantas sean algamas, autgamas o de reproduccin vegetativa. podras relacionar el sistema de reproduccin con este tema y aadir algo importante?

IMPLICACIONES PARA LA MEJORA Intenta despus del estudio de estos cuatro primeros temas resumir lo que consideres de inters para la marcha de un proyecto de mejora. Ponte en la mentalidad de un mejorador y razona adecuadamente la respuesta. Te puede resultar mas sencillo si piensas en cultivos y caracteres concretos. En la Biblioteca puedes buscar informacin sobre la mejora de cultivos concretos y sus tcnicas en revistas de divulgacin en castellano como Surcos, Sustrai, Hortofruticultura, Investigacin y Ciencia etc...

TEMA 5 IMPORTANCIA DE LA VARIABILIDAD GENETICA. ANALISIS DE CARACTERES QUE MUESTRAN VARIACION CONTINUA.

El objetivo fundamental de esta unidad temtica es estudiar la importancia relativa que el genotipo y el ambiente tienen sobre la expresin de un carcter e inculcar la necesidad de conocer la influencia de cada uno de de estos factores en la programacin de un plan de mejora gentica vegetal. La unidad temtica se introduce recordando que los caracteres pueden variar de forma discreta o continua. Apoyndose en las experiencias de Johansen y de NilsonEhle (ambos trabajos considerados como una de las contribuciones mas importantes a la gentica) se analiza como la variacin continua puede estar motivada por causas genticas, ambientales o por el concurso de ambas, mientras que la variacin discreta es debida slo a causas genticas. Para comprender el papel que estos factores juegan sobre el tipo de variacin discreta o continua. La unidad concluye con el estudio del modelo biomtrico de Mather y Jinks. Guin de la unidad: 1.Tipos de variacin. 30

2.Componentes de la variacin continua, lneas puras de Johansen. 3.Influencia del ambiente en la expresin fenotpica de un carcter. 4.Experiencias de NilsonEhle 5.El modelo de los poligenes 6.Anlisis mendeliano de la variacin. 7.Modelo biomtrico de Mather y Jinks. 8.Estima del nmero de genes

1. Tipos de variacin Los dos tipos de variacin, discreta y continua, quedan perfectamente definidos en las experiencias realizadas por Mendel con el carcter altura de la planta en guisante En la segregacin de la F2 descendiente de un cruce entre plantas normales y enanas, observa dos clases claramente diferenciadas con un intervalo de variacin determinado para cada clase: Plantas enanas Plantas normales

Dentro de las enanas existe una pequea variacin entre la altura de las diferentes plantas, lo mismo ocurre dentro de la clase de plantas normales. La variacin que existe dentro de cada una de las clases se llama variacin continua, mientras que la que existe entre clases es lo que llamamos variacin discreta. 31

Un carcter muestra variacin discreta cuando es posible adscribirlo a una clase u otra. En este caso concreto no es necesario medir el carcter, es suficiente con adscribirlo a la clase correspondiente. Este es el modo como se toman normalmente los caracteres cualitativos. Si es posible trabajar con caracteres cualitativos la metodologa es mas sencilla. Si no hay clases netamente separadas, de modo que no es posible establecer clases de forma natural, decimos que el carcter muestra variacin continua. En este caso es necesario medir el carcter, puesto que es la nica manera de estudiarlo de una forma precisa. A estos caracteres se les denomina cuantitativos o mtricos. 2.Componente de la variacin: Lneas puras de Johansen: Johansen parte de una poblacin de plantas de juda de la variedad comercial princesa en la que haba una gran variabilidad para el peso de cada juda. Escoge las judas ms pequeas y las ms grandes y las cultiva, obteniendo por autofecundacin las descendencias. Figura 1

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Johansen, observa que las semillas procedentes de las plantas de judas pequeas de la poblacin inicial, tenan un peso medio inferior al de las semillas de las plantas procedentes de judas grandes. Esta primera seleccin (seleccin entre lineas) pareca ser eficaz puesto que se mantena en las descendencias. Sin embargo cuando coge la semilla ms grande y la ms pequea de una planta proveniente de la semilla ms grande del lote inicial b' es decir de la poblacin original princesa, las descendencias de estas dos semillas tienen el mismo peso medio. En este caso no se mantiene la eficacia de la seleccin (seleccin dentro de linea) La poblacin original (a), proveniente de plantas de una variedad comercial no seleccionada por el peso de sus semillas, constituye una mezcla de formas genticamente diferentes las unas de las otras. Como la juda es autgama esta mezcla corresponder a individuos homozigticos, capaces de dar lugar cada uno de ellos a una linea pura sobre la cual la seleccin es ineficaz. La variacin encontrada dentro de una linea es de tipo ambiental por que todos los individuos pertenecientes a una misma linea son genticamente idnticos, ya que por autofecundacin continuada se llega rpidamente a la homocigosis. Por el contrario las diferencias observadas entre las lineas son de origen gentico. Las consecuencias de este experimento son importantes porque permiten comprender la importancia conjunta del genotipo y el ambiente en la expresin de los caracteres y por otra parte suministra los fundamentos para la mejora de autgamas. La seleccin pretende elegir los mejores genotipos, por tanto si la variabilidad dentro de la linea es debida al ambiente y no gentica, la seleccin no resultar eficaz. Es por tanto de suma importancia distinguir si la variabilidad gentica es debida al ambiente o a causas genticas.

Fundamentos de la estructura gentica de autgamas: El sistema reproductivo que depende a su vez de la biologa floral (estudiado en el tema 2) La disminucin de heterozigotos partiendo de Aa disminuir en 1/2 cada generacin el nmero de heterozigotos, por tanto cada planta individual ser una linea pura, homocigota. Una poblacin de planta autgamas esta compuesta por una mezcla de lineas puras.

Factores que modifican la rapidez con que se alcanza la homocigosis Mutacin: es una fuente constante de variacin que estar dificultando el proceso de fijacin. (para que un gen pueda considerarse fijado en una poblacin el 99% de los individuos debern llevarlo en homocigosis). Recombinacin y ligamiento: Cuanto mayor sea el desequilibrio de ligamiento mas se retrasa la homocigosis. Seleccin: Si no todos los genotipos tienen la misma supervivencia, sino que existe una supervivencia que 33

favorece a los heterocigotos, se retrasar la consecucin de la homocigosis. Si por el contrario se da una seleccin a favor de los homocigotos favorecer y acortar el proceso de fijacin. Normalmente la fuerza debido a la autofecundacin es arrolladora y tiene un efecto mucho mayor hacia la homocigosis que la producida por la perturbacin de la seleccin cuando esta acta en contra. Deriva: Este fenmeno dirige hacia la fijacin de unos pocos tipos homocigotos. Migracin: Retrasa el proceso de fijacin en la poblacin receptora, debido a la introduccin de nuevos genes que favorecen la heterocigosis. 3.Influencia del ambiente en la expresin fenotpica de un carcter Como acabamos de ver, la influencia ambiental puede producir variacin del valor de un carcter en un genotipo dado. Cuanto mayor es la influencia ambiental, mayor ser la dispersin de la media del carcter que se producir en torno a un valor medio. Es necesario formarse una idea clara del efecto del ambiente y del genotipo sobre la variabilidad del carcter. Asumamos un caso hipottico en el que un carcter estuviera controlado por un gen y dos alelos y en el que la diferencia del valor medio entre dos parentales fuera de 12 (P1= 50 y P2=62). En la F2, si la situacin gentica es constante (si el ambiente no produce perturbacin en el valor del genotipo) la distribucin del carcter, segn exista herencia intermedia o dominancia, ser como se indica en la figura 2a. Cuando exista influencia ambiental en torno a los valores anteriores se producir dispersin. Cuanto mayor sea la influencia ambiental, mayor ser la dispersin que se producir en torno al valor medio (figuras 2b, 2c, 2d y 2e), solapndose progresivamente las curvas correspondientes a cada genotipo. El parmetro que mide la importancia relativa de la herencia y del medio ambiente en la determinacin de la expresin de los caracteres se denomina Heredabilidad que se define como la proporcin de la variabilidad total que es debida a causas genticas (heredabilidad en sentido amplio) y puede expresarse: s2g H = s2g + s2E Las curvas de la figura 2 han sido dibujadas asumiendo que los valores de heredabilidad eran respectivamente 100, 87.5, 75, 50, 25. La varianza gentica se obtuvo en todos los casos de la figura a partir de los valores medios del carcter en cada genotipo. Figura 2. Distribucin terica de la F2 asumiendo un modelo monognico y un aumento progresivo de la influencia ambiental. Sin dominancia Dominancia

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4.Experiencias de NilsonEhle En una de sus experiencias en la que cruz dos variedades de trigo, una de glumas blancas y otra de glumas rojas, demuestra que un carcter sencillo puede estar controlado por varios genes. En la F1 todos los individuos son de color rojo, aunque menos intenso que el parental rojo. En la F2, las 78 plantas tenan glumas rojas de diversas intensidades, no encontrndose ningn individuo con glumas blancas. Al estudiar las descendencias de estas 78 plantas se observa que 8 plantas segregaban en la proporcin 3: 1, 15 plantas que segregaban en la proporcin 15: 1, 5 plantas en la proporcin 63:1 y 50 plantas dieron rojos todos los individuos. Las proporciones observadas en la descendencia sugirieron el genotipo de cada familia. As las plantas cuya descendencia segregaba 3:1 debern ser simples heterocigotos, las familias con segregacin 15:1 correspondern a dobles heterocigticos y las de segregacin 63:1 a triples heterocigticos. Puesto que los genes para color rojo dominan sobre color blanco, las 50 plantas que no muestran segregacin debern ser homocigotas dominantes para alguno de estos genes. Segn esto los genotipos asignables a cada una de las clases seran: Clase Plantas Genotipos 1 8 Aabbcc o aaBbcc o aabbCc 2 15 AaBbcc o aaBcCc o AabbCc 3 5 AaBbCc 4 50 AA____ o __BB__ o ____CC

En las 78 plantas de la F2 estudiadas no se encontr ninguna con glumas blancas como consecuencia del pequeo nmero de plantas estudiadas.

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Las previsiones mendelianas para este modelo seran: Clase Descripcin Genotipo O Blanco aabbcc 1 Rojo: Segregacin 3:1 Aabbcc o aaBccc o aabbCc 2 Rojo: Segregacin 15:1 AaBbcc o aaBcCc o AabbCc 3 Rojo: Segregacin 63:1 AaBbCc 4 Rojo AA____ o __BB__ o ____CC Clase Prob. de encontrar estos individuos en la F2 Frecuencia esperada (Individuos que difieren en tres genes) 0 1/4 x 1/4 x 1/4 = 1/64 1 1 3 x (1/2 x 1/4 x 1/4 )= 6/64 7 2 3 x (1/2 x 1/2 x 1/4) = 12/64 15 3 1/2 x 1/2 x 1/2 = 8/64 10 4 6427/64 = 37/64 46 ________ 79 No se detectan diferencias significativas entre valores observados y los esperados (C2= 3.39 con 4gl a= 0.05), luego podemos aceptar la hiptesis de un modelo trignico. Con lo que el experimento de NilsonEhle demuestra que un carcter sencillo como es el color de las glumas en el trigo puede ser controlado por varios genes. En este momento se consigue eliminar la controversia entre las dos escuelas (la biomtrica y la mendeliana). La variacin continua fue estudiada durante la ltima parte del siglo XIX por Galton y colaboradores (ALLARD, 1980), aunque no consiguieron descubrir su modo de transmisin, demuestran que es heredable en parte. Cuando se redescubren los trabajos de mendel en 1900, estos investigadores no aceptan las sencillas proporciones mendelianas. Entre ambas escuelas mendeliana y biomtrica surge un fuerte enfrentamiento. Algunos autores de la primera llegan a afirmar que la existencia de variacin continua es una prueba de no heredabilidad. La segunda considera puras excepciones las formas mendelianas de herencia discontinua. La dificultad de armonizar inicialmente con una base mendeliana la discontinuidad de los genotipos con la continuidad fenotpica con la que se expresan los caracteres mtricos, fue resuelta gracias a las clsicas experiencias de Johansen y NilsoEhle, que plasmaron respectivamente la teora de las lineas puras y la teora de los factores mltiples 5. Modelo de los poligenes 36

La existencia de varios genes controlando un carcter permite comprender como incluso en ausencia de variabilidad ambiental puede generarse una distribucin continua. 6.Experiencias de East La variacin continua fue objeto de estudio a finales del siglo XIX por Galton y sus discpulos. A pesar de que no consiguieron descubrir su modo de transmisin, demostraron por medio del anlisis de regresin que al menos era parcialmente heredable. En 1900 se redescubren los trabajos de mendel en los que se demuestra la forma de transmisin de los caracteres discretos. Como consecuencia de ello se crea una gran polmica entre los grupos (biometrcos y Mendelianos). Incluso los mendelianos llegaron a afirmar que la existencia de variacin continua era una prueba de no heredabilidad. En 1906 Yule, sugiri que no era necesario considerar contradictorios ambos tipos de herencia si se postulaba la existencia de genes con efectos pequeos y semejantes para explicar la herencia continua. Los trabajos publicados por Johansen y NilsonEhle dan otro paso hacia la reconciliacin, pero a pesar de ello no se llega a establecer un modelo general que incluya a ambos tipos de caracteres. Hasta 1916 no se produce la reconciliacin definitiva, gracias a los trabajos publicados por East. En ellos se demuestra que la herencia de caracteres cuantitativos poda ser explicada por la segregacin de varios genes con efectos semejantes. Hiptesis del factor mltiple. East trabaj con Nicotiana longiflora, estudiando la longitud de la corola. Seleccion dos lneas puras que diferan claramente en la longitud. Corta (P1) y Larga (P2). Obtuvo las generaciones F1 y la F2. El razonamiento de East correlacionado con sus datos experimentales fue el siguiente: 1) Los padres difieren claramente en la longitud de la corola cuando son cultivados en ambientes semejantes y estas diferencias se mantienen entre rplicas dentro de un mismo ao y en experiencias en distintos aos. Las diferencias entre los padres tienen una base gentica. 2) Aunque parti de lineas puras se observan pequeas diferencias dentro de cada grupo, debidas al efecto ambiental. 3) La variabilidad dentro de la generacin F1 es comparable a la de los parentales. Al partir de lineas puras la generacin F1 ser genticamente homognea. 4) La variabilidad observada en la F2 era significativamente muy superior a la que presentaban los genotipos genticamente homogneos de la F1, P1 y P2. Si se asume que el ambiente afecta con igual medida a la F2 que a las otras generaciones, la variabilidad excedente no puede ser atribuida al efecto ambiental sino a causas genticas. A partir de la F2 obtuvo generaciones mas avanzadas por autofecundacin (familias F3), y basndose en el esquema de mendel hizo las siguientes predicciones adicionales 5) Los individuos provenientes de los distintos puntos de la curva de la distribucin F2 producirn descendencias que diferirn notablemente en su tamao medio. 6) A su vez estos individuos de la F2 originarn descendencias con diferentes variabilidades, que podrn ser tan altas como las de la F2 o tan bajas como las de los parentales. 7) En las generaciones sucesivas de autofecundacin la variabilidad de las familias ser siempre igual o menor que la de la generacin F2 pero nunca mayor, como consecuencia de la autofecundacin que ira aumentando 37

el nmero de homozigotos (fijacin de los genes). De esta forma qued aclarado que la herencia de caracteres cuantitativos se puede explicar por la segregacin de varios genes mendelianos. El siguiente paso era determinar el nmero y la naturaleza de dichos genes.

7.Modelo Biomtrico de Mather Y Jinks Para el estudio de los caracteres cuantitativos y la obtencin de una informacin suficiente para su aplicacin a la mejora de plantas, que nos permita conocer las estrategias de seleccin a seguir en el desarrollo de nuevas variedades mas productivas o con mejores caractersticas agronmicas, se han diseado diferentes modelos biomtricos. A continuacin exponemos el de Mather y Jinks de especial inters en la mejora de planta autgamas, y empleable tambin en el caso de plantas algamas, si disponemos de lneas puras para su utilizacin. Anlisis balanceado de las medias: Asumamos un modelo monognico con dos alelos (A1 y A2). Consideremos dos lneas puras homocigticas P1 (A1 A1) y P2 (A2 A2), y el hbrido a partir de ambas F1 (A1 A2). Utilizaremos como referencial el valor medio de los parentales: m= G11+G22/2 A1A1mA1A2A2A2 GENOTIPOS dmh+d VALOR GENOTIPICO A d se le denomina valor aditivo, sera la variabilidad fijable, y h se le denomina dominancia y corresponde a la variabilidad no fijable. Se pueden definir los parmetros d y h del siguiente modo: d= (G11 G22) / 2 h= G11 + G22 /2 Asumimos que P1> P2. lo que implica que d > 0. Los valores genotpicos a de all son: LINEAS GENOTIPO VALOR GENOTIPICO P1 A1 A1 P1= m + d P2 A2 A2 P2= m d F1 A1 A2 F1 = m + h La comparacin entre el valor de h y d indica el modo de accin gnica subyacente. Si h= d existe dominancia completa. Si h = 0 herencia intermedia.

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y si 0> h < d dominancia incompleta. Consecuencias: Si es mas importante la variabilidad no fijable (es la que corresponde a los genes en heterocigosis), la mejor variedad que podemos obtener ser el Hbrido F1. Si es mas importante la variabilidad fijable, nos esta indicando que podremos obtener lineas puras mejores que los parentales, por combinacin de los genes que se encuentran dispersos entre los dos parentales. Siguiendo este mismo modelo, nos permite hacer predicciones del valor que poseer la media en generaciones mas avanzadas (F3, F4 etc..) Anlisis balanceado de las varianzas: En este primer modelo slo hemos tenido en cuenta las medias de cada generacin. Pero igual de importante en la descripcin de lo que esta ocurriendo es la varianza de cada generacin. El empleo de este segundo anlisis nos dar una informacin complementaria y mas precisa sobre lo que esta ocurriendo en la realidad. Los nuevos parmetros que estimamos con este modelo son: D = varianza aditiva H = dominancia. F= (D x H) E= Efecto debido al ambiente. Con estos nuevos parmetros podemos estimar la heredabilidad en sentido estricto: He = (1/2 D)/ Vp F2 La varianza aditiva segn Falconer, es la componente mas importante puesto que es la causa principal del parecido entre parientes, y por lo tanto la que mejor define las propiedades genticas de una poblacin, y es una indicacin de la respuesta que se puede obtener a la seleccin. Cuanto mayor sea su valor, mas probabilidades de xito tendr nuestro programa de mejora. Recordar que la heredabilidad en sentido amplio era: Ha = Vg F2/ Vp F2 * Nota: La estimacin de estos parmetros se realizar en prcticas, con ayuda de un programa de ordenador.

8.Estima del nmero de genes La estimacin del nmero de genes, tiene menor importancia de cara a un programa de mejora que involucre caracteres cuantitativos, que el conocimiento de la aditividad, dominancia o la Heredabilidad. Pero existen algunas formulas para ello, aunque ninguna alcanza demasiada precisin. Idea intuitiva: 39

La presencia de individuos con rasgos parecidos a los parentales en las generaciones segregantes permite estimar el nmero mnimo de genes que controlan un carcter. En el caso concreto de las experiencias de East (Tabla 1) si asumimos un modelo en el que el carcter esta controlado por un slo gen, en la generacin F2, deberan aparecer 1/4 de individuos como cada parental. Para su tamao muestral de 444 individuos este nmero debera ser superior a 100. Si el control fuera ejercido por dos genes se debera esperar 1/16 por cada parental, si lo fuera por 3 sera 1/64, alrededor de 7 individuos como cada parental. Si fuera de 4 genes tendran que aparecer 1/254 es decir 2 individuos como cada parental, y si fuera de 5 genes este nmero sera inferior a 1. Como no aparece ningn individuo en la tabla, estadsticamente no se puede aceptar ningn modelo inferior a 5 genes. Algunas frmulas: N de genes = (P1 P2) 2 / 8 (VpF2 VF1) N de genes = ( 1/2 ( P1P2)) 2/ D

ANEJO TEMA 5

TEMA 6 PRINCIPIOS DE GENETICA DE POBLACIONES

1. Introduccin: Esta unidad es de especial trascendencia para la comprensin del funcionamiento y de la respuesta a la seleccin en poblaciones de plantas algamas. Como consecuencia de su sistema reproductor y de su historia evolutiva previa, se cree que toda poblacin de este tipo posee una estructura gentica que est, por lo menos en parte, determinada en cuanto a las frecuencias gnicas se refiere. Dobzhansky (1951) defini esta clase de poblaciones como "Una comunidad reproductiva de organismos de fecundacin cruzada y reproduccin sexual que comparten un mismo conjunto de genes". Para comprender la respuesta a la seleccin y conocer que mtodos de mejora son mas adecuados para este grupo de plantas, es imprescindible adentrarnos en el estudio de los principios de gentica de poblaciones.

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2.Evolucin de las frecuencias genotpicas en poblaciones con alogamia (Ley de HardyWeimberg). Sea una poblacin de plantas algamas infinitamente grande y con apareamiento libre al azar y, dado el caso de que un gen est representado por los alelos A/a de igual adaptabilidad; y en proporcin tal que qA = (1 q) a, es decir, que el nmero de veces que est el alelo A, habr (1 q) de a. La frecuencia de estos alelos permanece constante segn las proporciones genotpicas que aparecen en la siguiente expresin: (1) q2 (AA) + 2q (1 q) Aa + (1 q)2 aa = 1 Y esto permanece constante a no ser que haya variaciones debidas a la seleccin, apareamiento no efectuado al azar, migracin diferencial o mutacin.

Demostracin de la ley de Hardy Weimberg.

Partimos de una poblacin suficientemente grande con apareamiento al azar y vamos a ver alelos con la proporcin de la expresin (1). Llamaremos D al nmero de homocigticos dominantes. H al nmero de hetergocigticos. R al nmero de homocigticos recesivos y N al nmero de individuos de la poblacin.

En la poblacin habr: alelos A : D + 1/2 H = q N

alelos a : 1/2 H + R = 1q=P N

Los individuos que vamos a tener son: AA, Aa, aa.

Los cruces que pueden aparecer son:

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AA x AA Aa x Aa AA x aa AA x Aa Aa x aa aa x aa

y por tanto: Si sumamos todas las frecuencias de descendientes obtenemos: (D+1/2H)2 + 2(D+1/2H)(R+1/2H) + (R+1/2H)2 Si sustituimos con q y (1 q), nos queda la frmula demostrada: q2 (AA) + 2q (1q) Aa + (1q)2 aa = 1

* Corolario: Para un solo par de genes, la composicin de la poblacin permanece constante de generacin en generacin, y cualquier alteracin que se produzca hace que se recobre el equilibrio en una sola generacin. Si hay mas de un par de genes, se tarda mas, pero tiende al equilibrio y se vuelve a l rpidamente. La seleccin en algamas no tiene el mismo sentido que en autgamas, porque la poblacin tender a volver al equilibrio. (esta es la principal diferencia con la seleccin en autgamas). 3.Evolucin de las frecuencias genotpicas en poblaciones autgamas: Asumiremos el mismo modelo que en el caso anterior, un gen con 2 alelos A1 y A2. Por el sistema reproductivo de estas plantas, la autofecundacin, todas las plantas homozigotas van a dar individuos homozigotos, ya sean de tipo A1 A1 o A2 A2. Los heterozigotos A1 A2 van a segregar y originaran 1/4 de A1 A1 A2 A2 y 1/2 de A1 A2. Al cabo de una generacin las frecuencias genotpicas sern: P' 11 = P11 + 1/4 P12 P' 12 = 1/2 P12 P' 22 = P22 + 1/4 P12 De lo que se observa, que en cada generacin el nmero de heterozigotos se reduce a la mitad y en consecuencia en el equilibrio: P' = P1 = P2

4.Evolucin de las frecuencias genotpicas en poblaciones de plantas con alogamia parcial: Plantas con alogamia parcial son aquellas que poseen un sistema reproductivo en el que coexisten tanto la autofecundacin como la fecundacin cruzada. Las frecuencias genotpicas despus de una generacin de autofecundacin sern:

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P' = a ( p2 q2 2pq) + 1/2 (1 a) (P + ( P q))

Siendo a la tasa de alogamia en el equilibrio y llamando a F = 1 a/ 1+ a Pe = P2 + pq F 2pq (1F) q2 + pqF Es decir la frecuencia en el equilibrio depende de la tasa de alogamia. 5.Efecto de la seleccin en algamas para caracteres monognicos o regidos por pocos genes. Definimos Presin de seleccin (P): como la fuerza con la que podemos aplicar la seleccin y esta vara a nivel terico entre 0 y el 100% (si slo dejamos reproducir a aa, la presin de seleccin sera del 100. Si queremos seleccionar AA, nunca llegaramos al 100% porque es difcil eliminar Aa. Por tanto depender de si el carcter es dominante o recesivo. ej: Supongamos que las frecuencias gnicas en una poblacin mendeliana, compuesta por los genotipos aa, Aa, AA son: (1q)a y qA. Supongamos adems que la seleccin hace que los tres genotipos se reproduzcan en una proporcin (1P)aa: (1ZP)Aa: 1AA. La proporcin del nmero de dominantes a recesivos es (1: 1P), que es una medida de los grados de reproduccin de los alelos A y a. Z es una medida del grado de dominancia. Por ejemplo si los valores reproductivos de aa, Aa, AA, son 90, 95, 100 respectivamente, P= 0.10, ZP = 0.05 y por tanto Z= 0.5. Esto representa una situacin en donde no existe dominancia y donde la desventaja selectiva frente al alelo aa es de un 10%. Si existiera dominancia completa de tal forma que la seleccin no distinguiera entre AA y Aa, Z tendra un valor nulo y la proporcin de los valores reproductivos sera (1P: 1:1). Haciendo uso de las relaciones anteriores para investigar los efectos de la seleccin, consideraremos primero el caso en que se seleccionan slo los individuos AA qu valores tienen aqu P y Z?. La siguiente generacin ser homocigota para Ay la frecuencia del alelo A ser del 100. De igual forma, si slo se permite la reproduccin de los individuos aa, la frecuencia de a en la siguiente generacin ser del 100%. En cualquiera de los dos casos anteriores la seleccin habr producido el efecto total en una sola generacin y ser intil continuar seleccionando ya que no obtendremos ningn progreso posterior. Sin embargo las situaciones reales no se ajustan a los dos extremos anteriores y con esa exactitud. Por ello para aquellas situaciones en que la seleccin no es completamente eficiente, se puede estimar el incremento de la frecuencia de un slo alelo por la seleccin mediante la siguiente ecuacin, y por tanto dicho incremento va a depender de: la presin de seleccin, del grado de dominancia y de su frecuencia en la poblacin inicial. Aq= Pq(1q) ((1q) + Z(2q1) P= Presin de seleccin q= frecuencia y Z= grado de dominancia. De esta ecuacin podemos deducir que la seleccin tiene un efecto importante en el cambio de la frecuencia de los genes en las primeras generaciones de seleccin, cuando se parte de frecuencias iniciales medias y muy poca si estos valores iniciales son muy altos o muy bajos. Con frecuencia se oye la afirmacin de que el progreso con la seleccin es rpido al principio y lento en las generaciones posteriores. Esto no es necesariamente cierto. Si el alelo se encuentra en la poblacin inicial con 43

una frecuencia muy baja, el progreso al principio ser muy lento, en el momento en que alcance una frecuencia media, en las siguientes generaciones este progreso ser rpido para volver a disminuir al final. Tambin de estos supuestos se puede deducir otra afirmacin importante. La dificultad de eliminar por completo un alelo recesivo defectuoso en los casos en que exista dominancia completa. Aunque eliminemos a todos los individuos aa, seguirn permaneciendo en la poblacin individuos Aa, ya que no son distinguibles de AA. Slo cuando es posible llevar la presin de seleccin al extremo, es decir mediante esquemas fuertes de consanguinidad (autofecundacin) es factible la eliminacin completa de los recesivos defectuosos. Estos esquemas son factibles en autgamas pero suelen plantear dificultades en muchas especies algamas que sufren fuerte depresin por consanguinidad. 6. Clculo del avance terico esperable, mediante la seleccin en poblaciones de plantas algamas y/o caracteres polignicos. La respuesta a la seleccin que se define: Como la diferencia entre el valor medio de la descendencia de la poblacin seleccionada y el valor medio de la generacin parental y se representa por R. Puede estimarse mediante la siguiente ecuacin: R= S (a)(H) S= seleccin diferencial, depende de la presin de seleccin y est tabulada1 a= desviacin tpica de las lneas o familias H= Heredabilidad. Los diferentes parmetros de la expresin anterior pueden calcularse mediante ensayos experimentales, a los que luego se aplica un tratamiento estadstico denominado anlisis de la varianza y que estudiaremos en las clases prcticas. En la figura 1, se observa el avance terico obtenido mediante la seleccin, y se puede observar como el efecto ms importante de la seleccin es cambiar la media de la poblacin. Tabla 1. Diferente valores de S, para las presiones de seleccin ms usuales.

Lneas seleccionadas S 1% 2,64 2% 2,42 5% 2,06 10% 1,76 20% 1,40 30% 1,16

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Figura 1: Avance obtenido mediante la seleccin de las mejores lneas en la generacin anterior.

Es decir el efecto mas importante de la seleccin es desplazar la media de la poblacin como muestra la figura 1.

4.Algunas consideraciones acerca de la respuesta a la seleccin: 45

1) La respuesta a la seleccin sera mayor cuanto mayor sea la varianza genotpica de la poblacin de partida, la intensidad de seleccin y la heredabilidad del carcter seleccionado. 2) En algamas no se puede aumentar en exceso la intensidad de seleccin porque pueden aparecer problemas debidos al aumento de la consanguinidad, ya que reducimos el tamao de la poblacin. 3) La varianza genotpica depende de la variabilidad existente en la poblacin de partida, a mayor variabilidad mayor ser la respuesta a la seleccin. 4) la heredabilidad puede ser maximizada si se controlan bien las condiciones de cultivo, evitando la influencia de ciertos factores ambientales. 5) Para pocos genes, la respuesta a la seleccin depende de la frecuencia con que se encuentren en la poblacin de partida. Si es baja al principio el progreso sera lento, pero con los sucesivos ciclos se acelerar el progreso en cada generacin. 6) Debido a su estructura gentica y a su modo de reproduccin es mas sencillo conseguir variedades estables en autgamas que en algamas, ya que en estas ltimas, debido a la ley de HardyWeimberg existe una tendencia a volver al equilibrio inicial. Por ello la seleccin en algamas podr ser til para reducir el nmero de recesivos indeseados, y nunca para su eliminacin completa en la poblacin. Conclusin: La seleccin en algamas es un sistema muy poco apto y dbil, para alcanzar la fijacin de caracteres monognicos aun siendo altamente heredables, y por lo tanto mucho menos apta en casos de baja heredabilidad o de caracteres cuantitativos. El Polimorfismo equilibrado, favorece a los individuos heterocigotos, ya que es la forma de mantener muchos alelos distintos en la poblacin y es una ventaja adaptativa a las condiciones fluctuantes del medio. Adems la segregacin, hace que las descendencias de las plantas seleccionadas se desven del tipo de sus genitores, situacin agravada cuando existe imposibilidad de controlar la polinizacin (el polen puede provenir de un genotipo superior o inferior al de la planta seleccionada y esto afecta a la calidad de la descendencia). Debido tambin a la segregacin, al vigor hbrido, y a la depresin producida por consanguinidad, existe tambin una extremada dificultad en la identificacin de los mejores genotipos a partir de los mejores fenotipos. TEMA 7 DINAMICA EVOLUTIVA DE LAS PLANTAS CULTIVADAS La mejora vegetal es un proceso paralelo aunque artificial, al de la evolucin vegetal. Las plantas cultivadas sufren los mismos procesos de evolucin que las silvestres: generacin de variacin, recombinacin seleccin y aislamiento. En esta unidad se intenta explicar estos componentes de la microevolucin, acompaado con algn ejemplo de cultivo actual cuya domesticacin haya tenido origen en alguno de estos procesos. De esta forma se ve como surgen nuevos cultivos y el paralelismo existente entre el hombre y la naturaleza. El conocimiento de estos mecanismos microevolutivos permite introducir los conceptos bsicos sobre los mtodos a emplear en mejora gentica, justificando los mtodos utilizados por el hombre. La unidad se introduce con una discusin sobre la domesticacin vegetal como origen de las especies cultivadas. Domesticacin que se lleva a cabo dentro de un necesario entorno de variabilidad gentica que permite a su vez la domesticacin de varios cultivares. Una vez recalcada la importancia de esta variabilidad 46

para un aprovechamiento directo o indirecto, se esquematiza el proceso microevolutivo definiendo brevemente las fuerzas que lo conforman. El guin de la presente unidad es el siguiente: Variabilidad gentica en plantas cultivadas. Esquema del proceso microevolutivo. Fuerzas microevolutivas: Seleccin. Mutacin Recombinacin. Deriva gentica. Migracin: Hibridacin intraespecfica. Hibridacin intraespecfica y duplicacin: Autopoliploides. Hibridacin interespecfica y duplicacin: Alopoliploides. Hibridacin interespecfica: introgresin. 1. Variabilidad gentica en plantas cultivadas. La domesticacin vegetal, la transformacin de una especie silvestre en otra cultivada por la accin del hombre, ha sido el origen de todas nuestras especies agrcolas. De Wet y Harlan ya sugirieron que la domesticacin de las plantas era la evolucin de las mismas en un habitat creado por el hombre. Los cultivos han evolucionado bajo domesticacin hasta el punto en que dependen del hombre tanto para el habitat como para la propagacin. El proceso de domesticacin tiene como resultado una serie de cambios fenotpicos y reproductivos, debidos a la presin de seleccin ejercida por el cultivo, que las hace ms aceptables para el hombre. Algunos autores (FordLloyd y Jackson, 1986) citan entre otros: reduccin de las prdidas de semilla disminuyendo el desgrane y la dehiscencia espontnea; aumento del tamao de las semillas en las especies que se cultivan por sus semillas; aumento de la uniformidad en la maduracin, aumento de la fertilidad floral, aumento del tamao y nmero de inflorescencias; la sincronizacin de la floracin y un aumento del volumen del gineceo; disminucin del contenido proteico y aumento del contenido en hidratos de carbono, aumento de la rapidez de germinacin por eliminacin de inhibidores y por reduccin y desaparicin de las envolturas de las semillas; supresin de mecanismos defensivos; reduccin de la fertilidad sexual en cultivos que se propagan vegetativamente; cambio del habitat anual a perenne; cambio en la biologa reproductiva de alogamia a autogamia lo cual ha permitido a las plantas cultivadas explotar totalmente el habitat hecho por el hombre, adems se ha observado que las tasas de polen y vulos son menores en las especies autgamas. Las plantas silvestres deben adaptarse al ambiente en el cual crecen y las que divergen significativamente sern seleccionadas en contra. Aunque las plantas cultivadas estn tambin sujetas a los rigores de la presin de seleccin tanto natural como artificial, en algunos casos, han sido liberadas de algunas de estas presiones 47

de seleccin y han acumulado gran diversidad, particularmente morfolgica. Otro aspecto de importancia de la evolucin en los hbitats artificiales es la formacin de razas de malas hierbas. Las especies domesticadas estn casi siempre caracterizadas por razas cultivadas, malas hierbas y silvestres. Estas malas hierbas comunmente se originan como derivadas de hbridos entre razas silvestres y cultivadas, y a menudo acompaan a los cultivos a lo largo de su distribucin natural. Estos hbridos son a menudo totalmente frtiles y aunque se produce algn intercambio de genes a travs de la hibridacin introgresiva, incrementndose la adaptacin fisiolgica de las plantas, no es extensivo debido a la seleccin disruptiva. Cualquiera que sea su modo de formacin estos complejos cultivomalas hierbas como se denominan, pueden afectar a la cantidad de diversidad gentica en un cultivo, dependiendo de las relaciones filogenticas y del grado de intercambio gnico entre el cultivo y la mala hierba. En cualquier caso existe, tanto dentro de la propia especie cultivada, como en especies silvestres relacionadas una variabilidad gentica que permite la domesticacin de nuevos cultivares. Por un lado, hoy en da es posible encontrar en algunos cultivos accesiones aprovechables de forma directa para la obtencin de tipos agronmicos que responden a nuevas caractersticas deseables por el mejorador o incluso introducir alternativas a los cultivos actuales. Por otra parte, el inters puede centrarse en el aprovechamiento indirecto de esta variabilidad, en la domesticacin a nivel gnico. Es decir, la introduccin de genes de especies silvestres y especies relacionadas que controlan la resistencia a enfermedades o a condiciones crticas para las especies cultivadas. Esta posibilidad es la principal razn de inters de que estn recogidas en los bancos de germoplasma las especies filigenticamente relacionadas con las que en cada caso se trata de mejorar. De hecho, existe el riesgo de perder muchos genes de inters para la mejora dado que los genotipospos obtenidos por el mejorador van desplazando en muchas reas a las variedades indgenas.

Esquema del proceso microevolutivo. Desde el punto de vista gentico, la mejora vegetal y la evolucin de las plantas cultivadas y silvestres tiene algunas caractersticas en comn. Requieren variabilidad gentica, alguna forma de seleccin y cierto grado de aislamiento para preservar los tipos que surjan. Las poblaciones de plantas aumentan en variabilidad gentica mediante mutacin y migracin. La mutacin es la nica fuente primaria de variacin, es el nico mecanismo que genera varios tipos. Por otra parte la migracin tambin permite aumentar la variabilidad jugando un papel similar al de la mutacin, en tanto que no exista uniformidad gentica entre ambas poblaciones. Este mecanismo ha tenido un papel decisivo en la formacin de gran parte de las plantas cultivadas. Adems de estos dos, existe otro mecanismo que si bien no genera variabilidad, juega un papel de modificacin de la misma, es el proceso de Recombinacin, asociado a la sexualidad. Esquema del proceso microevolutivo:

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Migracin Mutacin Recombinacin

Poblacin Seleccin

Microevolucin

Poblacin adaptada

El proceso microevolutivo de las plantas se desarrolla actuando las fuerzas microevolutivas sobre la variabilidad gentica que presentan las poblaciones. Se considera fuerza microevolutiva cualquier fuerza capaz de cambiar la frecuencia de un gen, y fundamentalmente se puede hablar de MUTACION, MIGRACION, DERIVA, Y SELECCION. MUTACION Cualquier cambio gnico, estructural o cromosmico heredable. Si un gen concreto muta, se cambia la frecuencia del gen previamente existente. Pero aunque se trate de una mutacin sistemtica es de poca importancia como fuerza microevolutiva. SELECCION Se entiende por seleccin cualquier fuerza capaz de modificar la eficacia biolgica de los individuos, es decir, el nmero de descendientes, y su contribucin gnica a la generacin descendiente. Por tanto la seleccin natural tiende a que se reproduzca ms aquello que tiene capacidad para reproducirse ms, la poblacin ms adaptada. Se evoluciona hacia la adaptacin, lo que no esta adaptado no prevalece. Sin embargo la seleccin por parte del mejorador no centra el inters en la eficacia biolgica, sino en caracteres atractivos agronmicamente que en algunos casos pueden no ser estructuras funcionales adaptadas, cualquier tipo de seleccin direccional conduce a la prdida de variabilidad. DERIVA Fenmeno que produce cambios en frecuencias gnicas y genotpicas en poblaciones pequeas debidas a procesos de azar. Este mecanismo conduce a una prdida de variabilidad. A la larga la poblacin que experimenta un proceso de deriva evoluciona hacia la fijacin, que en algunos casos debido al muestreo estocstico que conlleva, puede ser la fijacin del genotipo menos adaptado. Es un factor importante, a tener en cuenta, en la decisin del tamao poblacional a mantener, en orden de la conservacin de recursos fitogenticos. 49

RECOMBINACION Es el mecanismo por el cual la variacin se ordena de diferente modo. Combina los genes preexistentes y da lugar a una ampliacin de la variacin. Es una fuente secundaria de variacin, no genera nueva pero aporta plasticidad, flexibilidad adaptativa. MIGRACION Se conoce como migracin el flujo de genes entre poblaciones genticamente distintas. Estos genes se introducen en la poblacin en mayor o menor grado segn la compatibilidad existente para hibridar. Hibridacin intraespecfica: Permite aumentar la diversidad de la poblacin resultante, creando nuevas posibilidades para que acte la seleccin. Ha tenido importancia en el origen de muchos cultivos. Harlan, consider que la evolucin de las plantas cultivadas se desarrolla principalmente como un sistema cclico de hibridacindiferenciacin. La hibridacin entre dos variedades de una planta domesticada presupone un periodo de seleccin que conduce a la diferenciacin de las dos variedades. La longitud del ciclo de hibridacindiferenciacin es un ndice del grado de divergencia que puede tener lugar entre dos formas sin hibridacin previa, y depende de la capacidad de tamponamiento del genotipo implicado, para permitir una funcin gnica razonablemente normal en un entorno gentico modificado. En este sentido las plantas algamas (tipo maz), poseen mayor capacidad de tamponamiento que las especies autgamas (Ej: cebada). De igual forma la condicin de poliploida, es decir especies que poseen mas de dos juegos cromsomicos, fortalece el grado de tamponamiento gentico, y tales especies pueden resistir dosis masivas de germoplasma extrao, sin sufrir efectos negativos. Los cruces alejados de esta manera producen un aumento de la varianza gentica. Hibridacin Interespecfica: Un ejemplo de este tipo de migracin, es el arroz. El arroz es una planta herbcea anual que pertenece a la misma familia que la avena, el centeno o la cebada y el trigo, con las que comparte muchas caractersticas. Hay dos especies de arroz; El arroz asitico (Oriza sativa), que surgi a partir de formas silvestres perennes, dando lugar a formas anuales a partir de las cuales se han seleccionado las formas domesticadas. Su secuencia ha sido: O. rufipogoon y O. nivara, adems de algn intercambio gentico con algunas razas de malas hierbas. En el caso del arroz asitico ha habido una posterior diferenciacin en tres subespecies instada por las condiciones geogrficas, Indica, Javnica y japnica. Las diferenciacin se manifiesta por caractersticas como el requerimiento de fotoperiodo y morfologa, y el desarrollo de barreras reproductivas. En el caso del arroz africano, su secuencia evolutiva sera O longiestaminata, O barthii. dando lugar O glaberrima. Hibridacin intraespecfica y duplicacin (Autopoliploide): La autopoliploida es la duplicacin de gnomas idnticos dentro de una misma especie. Los autopoliploides no han tenido gran importancia en la evolucin natural, debido probablemente a que se caracterizan en general por un comportamiento anormal de los cromosomas, que suele producir un alto grado de esterilidad, pero si en 50

la evolucin de las especies cultivadas. Su limitada produccin de semillas hace que se propaguen, en general asexualmente. Pero por otra parte esta ausencia de semillas puede ser ventajosa para el comercio de los frutos, por ej: la banana (triploide). Los autopoliploides tienen, con frecuencia, unas flores, frutos y otras partes de la planta mayores que sus antecesores diploides y por ello en algunos casos, como por ejemplo ornamentales, son tiles e interesantes, a pesar de su baja fertilidad y de su lento desarrollo. Son ejemplos conocidos de autopoliploides algunas variedades de manzanas, peras, la remolacha azucarera etc. Hibridacin interespecfica y duplicacin (alopoliploida): La alopoliploida tiene lugar cuando dos especies con gnomas diferentes se cruzan entre si (produciendose un hbrido) seguida de una duplicacin del material cromosmico. El hbrido es estril debido a que sus dos juegos genmicos son tan distintos que no pueden emparejarse los cromosomas. La duplicacin posterior a la hibridacin, restablece la fertilidad. Una gran proporcin de los cultivos actuales son alopoliploides, quizs el 50% entre los que se encuentran, el trigo, el algodn, el tabaco y muchas especies forrajeras. Un buen ejemplo para estudiar es el trigo panadero: El trigo forma las clsicas series poliploides, basadas en x= 7, con diploides, tetraploides y hexaploides con x= 14, x= 28, y x= 42 respectivamente. En los niveles diploides y tetraploides hay tanto especies silvestres como cultivadas, pero en el hexaploide no se conocen especies silvestres, lo cual indica que el trigo panadero se form despus de la domesticacin de los trigos diploides y tetraploides. Como no existen especies hexaploides silvestres, el trigo panadero debe haberse originado por hibridacin entre especies cultivadas y silvestres. El trigo es un excelente ejemplo del papel de la hibridacin y poliploida en la evolucin de la agricultura. es evidente que el trigo cultivado se desarroll por la seleccin para caracteres tales como el rquis desnudo a partir de especies del mismo nivel plodico, y que los diferentes poliploides se formaron siguiendo la hibridacin entre especies de trigo y especies relacionadas de herbceas para pasto. Estas especies pertenecen al gnero Aegilops con gran afinidad biolgica con Triticum.

Esquema de la evolucin del trigo:

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A los diploides se les ha asignado el genoma A, a los tetraploides el genoma AB, y a los hexaploides el genoma ABD. Los trigos poliploides se comportan como diploides gracias a un gen que proviene de T. aestivum, que asegura el apareamiento de cromosomas homlogos, segregacin regular del material gentico, alta fertilidad y estabilidad gentica. Otro ejemplo de hibridacin interespecfica y duplicacin es el caso del tabaco comercial o la fresa. Hibridacin interespecfica (introgresin): Implica la transferencia de una pequea cantidad del germoplasma de una especie a otra. Es el resultado de la hibridacin de dos especies y retrocruces de los productos de recombinacin durante varias generaciones hacia una de las especies parentales. 52

Un ejemplo lo encontramos en el caso del maz (figura 2). TEMA 8 DISTRIBUCION GEOGRAFICA Y ORIGEN DE LAS PLANTAS CULTIVADAS Una vez vista en unidades anteriores la importancia de la existencia de fuentes de variacin como requisito imprescindible para llevar a cabo cualquier programa de mejora, en esta unidad se pretende mostrar al alumno la distribucin geogrfica de dicha variacin, el origen de las plantas cultivadas y los mecanismos y fuerzas evolutivas que, actuando sobre la diversidad existente en un principio en los lugares de origen de las plantas, han ido dando lugar a travs de los siglos a nuestros cultivos actuales. 1. Origen de la Agricultura La agricultura surgi hace aproximadamente 10.000 aos en varios lugares al mismo tiempo, sin existir relacin cultural con entre ellos.Ha habido varias hiptesis para explicar estos hechos, siendo probable que no sea una de ellas la que los clarifique totalmente. Al final del ltimo periodo glaciar en el pleistoceno el clima comenz a mejorar, primero en las reas ms cercanas al ecuador. A medida que fueron desapareciendo los hielos las condiciones para el desarrollo de las plantas fueron mejorando y empez la expansin de las poblaciones humanas. Sigue surgiendo la duda de si la agricultura surgi tras una consciente experimentacin o fue como propone Haukes (1983) un golpe de inspiracin. Sin embargo cualquiera que sea la razn, la llegada de la llamada revolucin Neoltica y la domesticacin de las plantas fue el evento mas importante en la evolucin cultural del hombre. Hasta la revolucin neoltica, debi de haber una preagricultura, el hombre debi de ser un explorador de los ecosistemas naturales. Harris (1969) reconoce dos tipos de economa de subsistencia preagrcolas, la de los cazadores, cuya subsistencia dependa de una explotacin intensiva de un nmero relativamente pequeo de especies silvestres y las comunidades recolectoras cazadoras pescadoras que explotaban menos intensamente un espectro mas amplio de recursos alimenticios. Harris sugiere que es en estas ltimas comunidades donde se inici la domesticacin, debido a una existencia menos nmada y a su mayor familiaridad con los terrenos circundantes. Los orgenes de la agricultura y la subsiguiente evolucin de los cultivos pueden ser situados en el tiempo gracias a las evidencias arquolgicas de las que disponemos. De esta forma podemos estudiar los cambios evolutivos que han tenido lugar durante un periodo de 10 a 15.000 aos. Sin embargo este trabajo es imposible de realizar con las especies silvestres debido a la falta de fsiles. 2Hiptesis de Engelbrecht (1916) Anderson (1969) sobre los orgenes de la agricultura. Una de las hiptesis sobre los orgenes de la agricultura es la de los vertederos o basureros, enunciada primero por Engelbrecht y posteriormente por Anderson. Esta explica que las malas hierbas colonizaban los alrededores de los ncleos humanos, algunas de ellas eran recolectadas y eventualmente se empezaba el cultivo. De esta forma se estableca y reforzaba una relacin entre las plantas y el hombre. Lgicamente muchas de las malas hierbas eran superfluas y no llegaron a domesticarse. Cuando y dnde se origin la agricultura Los avances en las investigaciones arquolgicas en varios lugares del mundo han contribuido a la posibilidad de conocer con gran certeza los lugares de origen de la agricultura y la domesticacin de las plantas tanto en lo que se refiere al tiempo como a la localizacin geogrfica. Los humanos primitivos eran extremadamente desordenados y los depsitos arqueolgicos' son prueba de 53

ello. A menudo han aparecido restos orgnicos junto a lozas, herramientas y textiles, lo cual nos revela algo acerca de nuestros antepasados. En muchos lugares, sobre todo en zonas ridas y semiridas, hay restos de plantas carbonizadas pero que aun conservan algunas de sus principales caractersticas morfolgicas. La comparacin con las plantas actuales nos capacita para saber si se trata de restos de plantas silvestres o quizs de plantas procedentes de una incipiente agricultura. Hay una concordancia sorprendente entre las investigaciones acerca de donde se origin la agricultura, de las llamadas "cunas de la agricultura". A partir de estas "cunas" agricultura se extendi por todo el mundo. Hay evidencias arqueolgica~ considerables de una incipiente agricultura en Tahilandia, hace aproximadamente unos 13000 aos Gorman, 1966), en el Oriente Prximo hace 11000 aos (Cambel, 1970) y en Mxico hace 10.000 aos (MacNeish, 1964). Hay indicaciones de que la agricultura tuvo un origen independiente en China (Ho, 1969), basada en cultivo de mijo, pero es posible que proviniera de Tahilandia e igualmente pudo ocurrir en Europa y algunas partes de ~frica desde el Oriente Prximo y Sudoeste de Asia. Hay tambin inicios muy precoces de la agricultura en Per, concretamente en las costas, que han sido datados de hace 7000 a 8000 aos, con evidencias de cultivo de calabacines y cultivos aprovechables por sus races como mandioca y batata. Mientras que la evidencia para los orgenes de la agricultura de cultivos de semilla es grande, para los cultivos en los que la parte importante es la vegetativa no ocurre lo mismo. Frutos y semillas se preservan muy bien en climas ridos o semirido como el Oriente Prximo donde la historia de los orgenes de los cereales y legumbres de grano ha sido descifrada en gran parte. En los lugares calurosos y hmedos, condiciones propias de tierras bajas, los restos orgnicos de races y tubrculos se descomponen rpidamente y como consecuencia las evidencias arqueolgicas son pobres y frecuentemente slo las herramientas Y otros utensilios pueden sugerir la utilizacin de algunas plantas que podan haber sido cultivadas accidentalmente pero que no son actualmente cultivadas. De Candolle (1882) y Vavilov (1916) pusieron de manifiesto que la domesticacin de los cultivos haba tenido lugar en distintos y bien definidos lugares del mundo, principalmente en los trpicos y subtrpicos y generalmente aunque no siempre en regiones montaosas.

Dinmica evolutiva de la domesticacin Las plantas domesticadas estn adaptadas a los hbitats hechos por el hombre especialmente para ellas. De hecho, de wet y Harlan (1975) y de Wet 1979) sugieren que la domesticacin de las plantas es evolucin en un ambiente creado por el hombre. Los procesos de domesticacin han dado lugar a una cantidad de cambios fenotpicos y de la biologa reproductiva, siempre orientadas a ser mas aceptables a los humanos. Adems de la perdida de mecanismos de dispersin tales como los mutantes de raquis no quebradizos en cereales, existen otras caractersticas propias de las plantas cultivadas como por ejemplo, el gigantismo especialmente en partes de inters para el hombre como las semillas y frutos. Las plantas cultivadas estn pues expuestas a presiones de seleccin natural y artificial. Estas presiones de seleccin han dado lugar a una gran diversidad, particularmente morfolgica, que se ha acumulado en la mayora de los cultivos. si, existen miles de cultivares de cereales de importancia econmica en la actualidad. Lo mismo sucede con la gran variedad de formas y colores en los tubrculos como la patata, en frutos de Cucurbitaceas y en general en casi todas las plantas cultivadas. Durante la domesticacin, los cultivos estuvieron en contacto con plantas silvestres, con las que intercambiaron genes mediante hibridacin. As se incremento la capacidad de adaptacin fisiolgica de las plantas. Un ejemplo puede ser el trigo panadero, que combina tres genomas del trigo diploide y dos especies de Aeegilops . Como consecuencia, la aptitud 54

adaptativa del trigo creci enormemente llegando a ser uno de nuestros cultivos ms importantes. Otras caractersticas que han cambiado a travs del proceso de domesticacin son la supresin de mecanismos de defensa, la reduccin de fertilidad sexual en cultivos propagados vegetativamente y cambios en el hbito como por ejemplo de perennes a anuales. Los cambios en la biologa reproductiva desde alogamia a autogamia han hecho a las plantas capaces de desarrollar completamente el hbitat creado por el hombre. En reas de clima mediterrneo hay una gran abundancia de origen. El concepto de Vavilov viene a decir en pocas palabras que "el lugar de origen de las especies de plantas tiene que encontrarse en las reas que contienen la mayor cantidad de diversidad gentica de estas plantas".Como propuso Stebbins ~1950), esta idea expuesta por 'vavilov puede ser debida a la influencia de este por la teora de "Edad y Area" de Willis (1922). Esta teora postula que, en comparacin con las especies silvestres, cuanto ms tiempo ha estado un organismo en un rea, mas diversidad existir de el. Sin embargo, esta idea ha sido actualmente modificada. Zohary (1970) ha indicado que aunque la existencia de los centros de diversidad en ciertas partes del mundo es demostrable, el llamarlos "centros de origen" no deja de ser mas que una interpretacin biolgica de los hechos. Centros de origen y de diversidad (aportaciones de Vavilov) Los trabajos del investigador ruso Vavilov (19871942) fueron pioneros en el estudio de la variacin a nivel mundial. El observ grandes zonas o centros en los que para una especie vegetal, exista una mayor concentracin de genotipos diferentes de ella. Denomin a estas zonas Zonas de diversidad gentica o centros de origen. Supuso que cuanto ms tiempo haya permanecido una especie en un lugar, mayor ser el nmero de mutantes acumulados. Sin embargo no siempre coinciden centros de origen y centros de diversidad. En el centro de origen deben existir los antecesores silvestres de la especie cultivada, y este est a veces muy lejos del centro de diversidad. A este respecto ya Vaviliv matiz entre centros primarios (donde se dio la domesticacin de la especie) y centros secundarios donde se diversific posteriormente la especie domesticada. Microcentros de diversidad (aportaciones de Harlan) Harlan, durante un viaje a Turqua en 1948, observ una enorme diversidad en zonas de superficie muy reducida. La evolucin en esas zonas parece avanzar con mayor rapidez que en otras zonas. Harlan los llam microcentros. Varias pueden haber sido las causas por las que han surgido estos centros, entre otras hibridacin entre variedades y por introgresin con formas silvestres. Para el gnero Solanum, se han encontrado microcentros en Amrica central, Mxico, Guatemala, Sureste de Argentina y Chile (siendo su gran centro de diversidad Per, Ecuador Bolivia y Chile). Se observa pues, que junto a grandes reas de diversidad existen otras mucho menos extensas situadas en diferentes lugares, y pueden presentar una elevada variabilidad, aprovechable tanto para estudiar la evolucin de las plantas como con fines de mejora.

Emancipacin de recesivos Vavilov parti de la idea de que la diversificacin de los cultivos ocurri en lugares donde las buenas 55

condiciones climatolgicas hicieron que la seleccin natural fuera dbil dando esto lugar a una riqueza mxima al haber poca eliminacin de genes desfavorables . Cuando se produce un cambio de lugar de una especie por efecto de la migracin ya sea por accin del hombre o de manera natural, se produce un aumento de la diversidad de especies en el nuevo lugar pero una disminucin en el acervo gentico de 105 individuos de la especie introducida. Si en el nuevo ambiente la seleccin natural acta en contra de los genes dominantes, estos desaparecern rpidamente al no poderse mantener en heterocigosis. esto da lugar a la "emancipacin de los recesivos" que sucede cuando se produce la migracin de una especie y el fenmeno asociado a esta de deriva gentica. As pues, la frecuencia de homocigotos recesivos, es superior en las zonas lejanas que en los centros de origen. Se han hecho experiencias comparando guisantes europeos con otros de tipo asitico. En estas poblaciones se han encontrado genes dominantes sobre los europeos, que fueron las poblaciones migratorias. estos resultados vienen a corroborar la teora expuesta. Cultivos primarios y secundarios Frecuentemente se ha atribuido a Vavilov el establecimiento de la hiptesis de los cultivos primarios y secundarios cuando en realidad debe ser atribuido a Engelbrecht (1916). Engelbrecht puso de manifiesto que la mayora de cultivos en los primeros tiempos tenan asociados otros silvestre o malas hierbas, pertenecientes a distintas especies o incluso gneros que imitaban caractersticas tales como el tamao de la semilla o el tiempo de maduracin. Estas eran recolectadas y trilladas junto con el cultivo principal. En zonas marginales donde podan competir las dos especies y se adaptaba mejor la silvestre es donde tuvo lugar la domesticacin de esta ltima. Centros nucleares y regiones de diversidad Desde la muerte de Vavilov, otros autores como Souer, Kupzov, Darlington y Harlan han contribuido al entendimiento de las ideas de Vavilov y esclarecimiento de confusiones que surgieron con algunos de su conceptos. De hecho se origin una polmica provocada por la confusin entre centros nucleares de los orgenes de la agricultura con las reas de evolucin y diversidad de los cultivos. Los centros nucleares son pues los lugares donde empezo la agricultura y las regiones de diversidad las arias en las cuales las plantas domesticadas se extendieron a partir de los centros nucleares Ley de las series homlogas de variacin Una de las primeras observaciones de Vavilov en relacin con la distribucin de la variacin de los cultivos es lo que l describi como "regularidades geogrficas en las formas cultivadas de las plantas". El significado es que con frecuencia se observa unos patrones similares de variacin en un rea dada para distintos cultivos no relacionados. As, es frecuente encontrar centeno y trigo no ligulado en la regin de Bokhara y formas desnudas de cebada, avena y mijo en China. existen tambin marcadas diferencias entre las razas de trigo, cebada, lino, guisante, lentejas y algunos otros cultivos del mediterrneo y del sur de Asia. Las formas mediterrneas tienen frutos, semillas y flores ms grandes por lo general que las asiticas. El mismo tipo de diferencias se observa entre las especies de Phaseolus del Viejo y Nuevo Mundo. Para sistematizar estos ejemplos de paralelismo, Vavilov estableci lo que el llam la ley de las series homlogas de variacin, la cual tiene tambin un valor predictivo. Esta ley establece que se encuentran normalmente variaciones similares en cultivos irrelacionados en las mismas reas geogrficas. Cuando una determinada caracterstica se aprecia en un cultivo pero no en otro en una misma rea, se puede predecir con ciertas garantas su aparicin. Este hecho tiene una gran importancia sobre todo en relacin con resistencias a 56

enfermedades: estrategias similares pueden suceder a varios cultivos frente a un patgeno comn.

TEMA 9 RECURSOS FITOGENETICOS Todo material vegetal, cultivado, silvestre o arvense es considerado como recurso fitogentico. Son considerados recursos naturales limitados. Han sido definidos como la despensa del mundo. Si la alimentacin es un derecho inalienable de la persona humana, es preciso considerar los recursos fitogenticos como patrimonio de la humanidad. Adems son la materia prima para la mejora gentica vegetal, tanto presente como futura. En ellos se encuentran los genes que han sido seleccionados o bien por el hombre, o bien por la naturaleza por su adaptacin, productividad o resistencia. A pesar del conocimiento sistemtico de su existencia de modo sistemtico desde los trabajos de Vavilov, no fue hasta los aos 60 cuando se tom verdadera conciencia de su importancia y se inici coherentemente su recoleccin y conservacin. Y este reconocimiento fue motivado por el hecho de un considerable deteriodo de la variabilidad (erosin gentica) que alert sobre el peligro de un deterioro irreversible y nefasto para la humanidad. Son varias las causas de esta erosin: 1.Demanda por parte del mercado de uniformidad para los productos agrarios. 2.Desaparicin de las pequeas unidades de cultivo de variedades autctonas para autoconsumo. 3.Desaparicin de muchas especies, debido a la desertizacin, contaminacin, incendios, sustitucin de suelo agrcola para otros usos etc. La conciencia creada a nivel internacional sobre la necesidad de conservar en lo posible la mayor parte de diversidad gentica, puso en marcha mecanismos adecuados para conseguir dichos objetivos: ayudas econmicas para la recoleccin, evaluacin, conservacin, y documentacin (informatizacin de los datos), para la formacin de personal tcnico y para hacer accesibles esos recursos a cualquier persona interesada. Para llevar a cabo estas acciones coordinadas se creo en 1974 un consejo internacional de Recursos Fitogenticos (CIRF) conocido tambin en paises de habla inglesa como (IBPRG) International Board for Plant Genetic Resources. Por poner un ejemplo de su importancia: La patata a mediados del siglo pasado constitua la base principal de la alimentacin en Irlanda. La produccin de patata estaba basada en un pequeo nmero de variedades 57

comerciales. Se produjo entonces un ataque de Phytophtora infestans al que resultaron susceptibles todas esas variedades. El desastre ocasion la muerte de dos millones de personas. Para resolver el problema fue preciso encontrar lneas resistentes a la enfermedad. Las fuentes de resistencia se localizaron en un material heterogeneo y primitivo procedente de la regin Andina, centro de diversidad de la especie. Casos como este se han multiplicado en los ltimos aos, debido a la conquista de los mercados por un pequeo nmero de variedades uniformes "multinacionales", que han empobrecido la riqueza gentica de muchas especies. Del ejemplo anterior podemos extraer dos conclusiones: La conveniencia de ampliar la base gentica de los cultivos. Es decir no limitar la produccin de una especie a un reducido nmero de variedades. La necesidad de colectar el material heterogeneo primitivo y silvestre (los recursos fitogenticos) en sus centros de origen y diversidad antes de que se pierdan. Bsqueda Las acciones coordinadas de bsqueda promovidas por el CIRF (IPGR) estn enmarcadas por un orden de prioridades con relacin a las especies y a las regiones, teniendo en cuenta el mayor o menor peligro de extincin, utilidad, recursos humanos disponibles etc. Las accesiones, o entradas obtenidas en las colectas son enviadas a distintos centros relacionados con el CIRF para su evaluacin, conservacin y multiplicacin. Cada entrada queda protegida en al menos dos centros distintos. Conservacin La conservacin es quiz la fase, dentro del manejo de los recursos, que requiere mayor ayuda, ya que precisa de instalaciones adecuadas (cmaras fras, estancias para la desecacin previa del material, procedimientos de congelacin, mtodos de propagacin del material etc.

Conservacin "in situ" Consiste en favorecer en aquellos sitios donde existe diversidad gentica, el mantenimiento de la misma de forma espontnea. El establecimiento de parques o reservas naturales, adems de permitir el mantenimiento de la integridad gentica de las poblaciones, posibilita la continuidad de la dinmica evolutiva de los mismos en su ambiente natural. Esta forma de conservacin est especialmente indicada para especies silvestres afines a las cultivadas, para especies forestales y para pastos. La conservacin "in situ" de cultivares primitivos o variedades locales de especies cultivadas podra realizarse incentivando a los agricultores para que siguieran explotando aquellos materiales que tradicionalmente han venido cultivando. La experiencia ha demostrado que este sistema no es realizable en la prctica. Para estos materiales el mtodo mas adecuado y seguro es la conservacin "ex situ" Conservacin "ex situ": Consiste en la conservacin de los recursos fitogenticos fuera de las zonas de diversidad u origen. En un sentido amplio comprende los jardines botnicos y los bancos de germoplasma. 58

Bancos de Germoplasma Son los lugares (cmaras, estancias) e instalaciones anejas donde se conserva el material vegetal. Se clasifican en tres tipos, segn su dinamismo: Bancos Base: En ellos el material ha de conservarse a largo plazo (muchos aos). Su finalidad es la conservacin y la proteccin. Las cmaras de conservacin han de estar entre 18 y 20 C y la hr, inferior al 6%. Las colecciones de los bancos base, son mantenidas como legados para las generaciones futuras y no puede extraerse de ellos entradas o accesiones, excepto para la realizacin de pruebas de viabilidad y subsiguiente regeneracin. El material que puede ser enviado a mejoradores e investigadores procede de los bancos activos. Bancos Activos: El material es multiplicado y sometido al menos a una preevaluacin. Su conservacin es a medio plazo. Las condiciones de conservacin oscilan entre 5 y 6C y la hr del 30 al 40%. Bancos de mejora: Son los que manejan los mejoradores cotidianamente, y por tanto precisan entradas y salidas de materiales cotidianamente, se adicionan generaciones segregantes y nuevos materiales segn las necesidades. La conservacin es a corto plazo. La FAO y otras organizaciones, se encargan de editar directorios para que que cada uno pueda saber a donde acudir, en funcin de las especies con que uno trabaje. Procedimientos para la conservacin del material vegetal. Depender de cual sea la clase de material (semilla, polen, partes vegetativas) y del tiempo deseado de conservacin. a) La conservacin de semillas conlleva el procedimiento mas sencillo, siendo por otra parte el mas utilizado. El fundamento consiste en desecar las semillas, y mantenerlas en bolsas o tarros cerrados hermeticamente dentro de cmaras frigorficas. Las cmaras de conservacin han de estar entre 18 y 20 C y la hr, inferior al 6%. El proceso se realiza de forma gradual. Cuando la semilla est almacenada los dos parmetros mas importantes que deben ser controlados, con el fin de maximizar el mantenimiento del poder germinativo, son la humedad y la temperatura. Temperaturas y humedades altas afectan muy negativamente a su conservacin. Pero no todas las semillas pueden someterse a esas condiciones sin peligro de ser destruidas. Las semillas ortodoxas son aquellas que se pueden conservar en dichas condiciones. Las semillas recalcitrantes (mango, nogal etc.) que son aquellas que slo pueden ser conservadas de la manera anterior, por espacios muy cortos de tiempo y con un gran riesgo para su viabilidad posterior. Las especies recalcitrantes se conservan en campos de multiplicacin ("in situ" o "ex situ") o bien mediante cultivo "in vitro". b) Almacenaje "in vitro" del germoplasma:: Tiene un gran inters para las especies de reproduccin vegetativa 59

y recalcitrantes. La base de estos mtodos consiste en la introduccin de explantes (partes de tejido vegetal), en medios de cultivo estriles, mantenindolos en los mismos el mximo tiempo posible antes de ser regenerados. Los tejidos cultivados "in vitro" pueden ser mantenidos en principio, indefinidamente bajo condiciones normales de crecimiento, sin ms que suministrar los nutrientes requeridos. Sin embargo, esto implica una alta multiplicacin celular del tejido, lo cual no es deseable desde el punto de vista de conservacin del germoplasma, ya que la tasa de mutaciones es entonces alta. Es necesario mantener el tejido en unas condiciones de crecimiento mnimo, con el fin de reducir la variacin somaclonal (variacin originada por el cultivo "in vitro"). La induccin de condiciones de crecimiento mnimo puede alcanzarse del siguiente modo: Reduccin de la temperatura. Alternando el medio mediante la omisin o reduccin en el mismo de algn factor esencial para el crecimiento. Usando retardadores del crecimiento. Criopreservacin: La conservacin del material vegetal a ultrabajas temperaturas ha abierto la posibilidad del almacenaje indefinido de germoplasma. Esto se consigue mediante la inmersin del material en nitrgeno lquido (196 C). En general se piensa que se debe congelar de forma brusca y descongelar lentamente. Es conveniente el uso de crioconservantes para evitar daos en los tejidos. Utilizacin Los recursos fitogenticos son considerados patrimonio de la humanidad, y por tanto deben estar a disposicin de quienes los necesiten. Para que su utilizacin pueda ser efectiva es necesario completar las siguientes fases. Multiplicacin, Evaluacin, Documentacin. El volumen total de una coleccin de germoplasma y de la informacin descriptiva asociada a ella es uno de los factores clave en el manejo de los recursos fitogenticos. Es necesario disponer de una informacin descriptiva del material, debidamente organizada, para conocer que existe almacenado y sus caractersticas. Sin esta informacin los mejoradores no podran hacer uso de este material y estaramos conservando por conservar. Adems una informacin detallada tambin permitir conocer si los nuevos materiales que van entrando ya estaban conservados. Si conservamos 80 variedades y resulta que lo que creamos que eran 80 pertenecen todas a la misma variedad, estaremos ocupando espacio y desperdiciando dinero y recursos para la conservacin de otras variedades que si son de inters. Esta informacin descriptiva se almacena y procesa mediante el empleo de unidades de informacin que se denominan Descriptores. Existen diferentes categoras de descriptores: Datos de pasaporte: Consisten en los datos registrados en el momento de realizar la colecta en el campo, junto con nombres y nmeros de identificacin. (Lugar, altitud, clima etc..) Datos de caracterizacin: Son datos sobre caracteres heredables, fcilmente apreciables visualmente y que se expresan en cualquier ambiente. Datos de evaluacin preliminar: Son descripciones de un nmero determinado de caracteres adicionales que se consideran de inters para los usuarios de dicho cultivo. Debe ser posible evaluarlos visualmente pero no es necesario que se expresen en todos los ambientes (reaccin frente a enfermedades, resistencia a sequa, frio, 60

enfermedades, tolerancia a salinidad etc.) Datos de evaluacin completa: Se trata de informacin sobre caracteres relacionados principalmente con programas de mejora. Existen Descriptores estandarizados para cada cultivo, publicados por el IPGR

La domesticacin de las plantas como mtodo de mejora Cuando una especie silvestre que vive espontneamente en un hbitat determinado es manipulada por el hombre con fines concretos (no siempre coincidentes con los intereses de la naturaleza), con aquella especie se inicia el proceso de domesticacin. Es considerado, pues, como un mtodo de mejora, con el que los objetivos se consiguen de manera paulatina y lenta. Tuvo gran importancia sobre todo en los primeros tiempos. Ej: La Discorea para cortisona.

Mejora por introduccin y adaptacin de nuevo material En la actualidad muchas especies no cultivadas en un pas, son objeto de introduccin y seleccin. Ejemplos de esto actualmente en Espaa han sido: Kiwis, mangos, aguacate. lichis etc.

TEMA 10 SELECCION INDIVIDUAL Y SELECCION MASAL EN AUTOGAMAS Conviene que recordes la estructura gentica de estas poblaciones y su forma de reproduccin. Como consecuencia de su sistema de reproduccin el mejorador puede suponer que cualquier planta que seleccione ser capaz de reproducirse a si misma con gran precisin. Es tambin conveniente conocer que estos dos mtodos fueron ampliamente empleados en el pasado, si bien no presentan el mismo inters en la actualidad. La mayor parte de las especies de inters agronmico han sufrido fuertes procesos de mejora, mejora que ha ido encaminada en su mayor parte a la obtencin de cultivares muy uniformes. Esto ha hecho que en la actualidad la variabilidad natural que poda existir en los cultivos este prcticamente agotada siendo por ello necesario recurrir a otros mtodos de mejora que introduzcan nueva variabilidad, pej mediante la hibridacin. 1. Seleccin individual: 61

Este mtodo se basa en la eleccin de las mejores plantas dentro de una poblacin en la que exista variabilidad. En esta primera etapa se ha de ser muy cuidadoso, pero se ha de conseguir eliminar de forma drstica la mayor parte del material, sobre todo cuando existen limitaciones de dinero, tiempo y espacio que restringen el nmero de lneas a cultivar en las siguientes generaciones. El segundo paso, consiste en cultivar para su observacin lneas de las descendencias de las plantas seleccionadas de forma individual (es decir la descendencia de cada planta individual dar lugar a una lnea). Se evaluarn de forma visual, durante algunos ciclos y se eliminarn aquellas lneas con defectos aparentes o que no respondan al ideotipo previamente establecido. Dependiendo del carcter que queramos seleccionar, habremos de recurrir al establecimiento de las condiciones idneas para poder realizar la seleccin.

P ej: si buscamos resistencia a una determinada enfermedad, tendremos que asegurarnos de su presencia durante los sucesivos ciclos de seleccin, lo podemos hacer provocando artificialmente la enfermedad, es decir inoculando las plantas a estudio. La tercera etapa y ltima comienza cuando el mejorador ya no puede decidir que lneas conserva basndose slo en la percepcin visual. En este momento se necesita recurrir al diseo de experiencias que permitan una evaluacin estadstica posterior. En este tipo de experiencias se evalan no solo las lneas seleccionadas entre si, sino tambin frente a algunos cultivares comerciales que permitan establecer si efectivamente nuestro nuevo material va a ser, al menos, igual que los preexistentes en el mercado. Este ltimo periodo necesita unos tres ciclos para su conclusin. El xito de este mtodo esta directamente relacionado con la cantidad de variabilidad existente en las poblaciones de partida. Por ello sus grandes logros fueron cuando an existan un gran nmero de variedades esperando su explotacin. La mayor parte de las caractersticas de las variedades locales de los paises de agricultura ms avanzada, han sido ya aprovechadas, y por ello el mtodo es menos valioso que en el pasado. Los nicos xitos actuales podran ser para algn carcter que hasta la fecha haya carecido de importancia y que todava est presente en estas variedades. Existe una modificacin de la seleccin individual, que incluye la prueba de la descendencia. En ella para contrastar si la seleccin de los individuos por su fenotipo ha sido adecuada, se estudia su descendencia de autofecundacin. La uniformidad dentro de cada descendencia pone de manifiesto la naturaleza homozigtica de la planta seleccionada. El buen comportamiento de la descendencia para los caracteres objeto de estudio, indica que la seleccin ha sido correcta..

2. Seleccin masal: 62

La principal diferencia con la seleccin individual, es que aqu se conservan la mayora de las lneas de la poblacin de partida. El proceso consiste en la eliminacin de las plantas que se desvan del ideotipo. No en la seleccin de plantas individuales. Presenta una ventaja importante frente a la seleccin individual, que se deriva de la seguridad y rapidez con que se puede realizar la mejora de variedades locales. Se ha demostrado que lo que resta despus de desechar las lneas claramente improductivas y defectuosas, conserva las mejores caractersticas de la variedad original, en cuanto a adaptacin general y a rendimiento, y puede entregarse a los agricultores sin necesidad de los ensayos extensivos que necesitan las lneas puras. No existe demostracin experimental que indique el tamao de la poblacin en que se han de realizar las selecciones o la proporcin de lneas que se han de conservar. Cuando las circunstancias lo permitan, es aconsejable trabajar con poblaciones de varios centenares. Si se eliminan muy pocas lneas el avance obtenido mediante la seleccin ser mnimo. Por otra parte si la eliminacin es drstica puede poner en peligro la capacidad de adaptacin de la nueva variedad. En general, seleccionando al principio en grandes poblaciones y no eliminando ms del 25% de las lneas, quedar el suficiente nmero de tipos para no alterar las caractersticas agronmicas de la variedad. Este criterio conservador tiene dos grandes ventajas: 1) El mejorador no tiene que ensayar el nuevo tipo y puede por tanto dedicar mas tiempo a otros programas de mejora. 2) La supresin de los ensayos estadsticos acorta mucho el tiempo que se tarda en entregar al mercado una nueva variedad. Existe otra funcin importante de la seleccin masal, y es su empleo en la purificacin de variedades. Para eliminar las mezclas, mutantes o hbridos no deseados que puedan aparecer en los ciclos de multiplicacin de estas variedades.

3. Aspectos a tener en cuenta y que condicionan el xito del proceso: 1) El efecto bsico de la seleccin es cambiar las propiedades genticas de una poblacin (respuesta a la seleccin), de modo artificial, por medio de la eleccin de unos individuos con ciertas caractersticas que van a utilizarse como progenitores de la siguiente generacin. La seleccin modifica las frecuencias gnicas. La variacin de dichas frecuencias nos dar una idea de la accin de la seleccin sobre la poblacin. Ahora bien esto slo es factible en aquellos caracteres que muestran una variacin discreta y una gran parte de los caracteres de inters agronmico muestran variacin continua. Para estos caracteres no es factible medir el cambio de frecuencias gnicas porque no se puede trabajar con un solo de los loci involucrados en el carcter. Por lo tanto tenemos que describir los efectos de forma diferente. Esta descripcin se realiza en trminos de parmetros poblacionales, medias varianzas y covarianzas. Para ello se estudia la distribucin de frecuencia del carcter en la poblacin. Se ha comprobado que esta puede ser modelizada como una distribucin normal. (figura 1). Figura 1. Funcin de densidad de una distribucin Normal de media () y desviacin (

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2) Definiremos Respuesta a la Seleccin, como la diferencia entre el valor medio de la descendencia de la poblacin seleccionada y el valor medio de la poblacin parental. Se simboliza por R (Figura 2) Figura 2. Respuesta a la seleccin. R= Pj+1 Pj

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El objetivo es obtener un R mximo por generacin, para ello hay que tener en cuenta: 3) Slo es aplicable la seleccin, cuando la poblacin de partida este formada por un conjunto de lneas puras, es decir cuando exista variabilidad gentica. 4) Si la heredabilidad es alta, la seleccin de los mejores fenotipos, conducir a la eleccin de los mejores genotipos y el mtodo ser eficaz. Adems como la heredabilidad se relaciona con la varianza genotpica de la poblacin de partida, cuanto mayor sea dicha varianza, mayor ser la respuesta a la seleccin que podamos obtener. 5) La heredabilidad puede ser maximizada, minimizando el efecto ambiental, planificando diseos con repeticiones y controlando muy bien las condiciones de cultivo. As unas buenas prcticas culturales pueden aumentar la respuesta a la seleccin. 6) La respuesta (R) dependa de la presin de seleccin (P), que representa el porcentaje total de individuos seleccionados en la poblacin parental. R tambin dependa de la Intensidad de seleccin o seleccin diferencial (S) que es la diferencia entre la media fenotpca de los individuos seleccionados y la media de la generacin parental. Cuanto mayor sea la seleccin diferencial mayor ser la respuesta a la seleccin. S= Ps Pg (en valor absoluto) Adems en el tema 6, vimos como la respuesta a la seleccin poda ser estimada mediante la ecuacin: R= S a H y que exista una relacin entre presin de seleccin (P) e intensidad de seleccin (S), de tal manera que al aumentar la presin de seleccin poda aumentar la intensidad de seleccin. Por tanto para aumentar la respuesta a la seleccin se puede actuar sobre S, disminuyendo el nmero de individuos seleccionados (aumentando as la presin de seleccin). Esto en autgamas no plantea problemas, pero si es importante en algamas, donde un descenso importante en el tamao poblacional, puede producir problemas de depresin debido a la consanguinidad. 8) Dadas las limitaciones existentes para maximizar la respuesta a la seleccin por generacin, puede interesar, si es posible, maximizar la respuesta por unidad de tiempo, es decir aumentar el nmero de generaciones al ao.

ANEJO TEMA 10 Figura 3. Esquema del proceso de seleccin individual para un carcter especfico. (seleccin individual)

Figura 4. Esquema del proceso de mejora de una variedad en su conjunto. (seleccin masal). TEMA 11 65

METODO MASAL (Bulk method)

1. Introduccin: Comenzamos en este momento a estudiar los mtodos de mejora de plantas autgamas que parten de una primera hibridacin. Esta hibridacin es necesaria para introducir nueva variabilidad cuando esta no existe en la variedad de partida o bien cuando el objetivo sea obtener una nueva variedad, mejor que las preexistentes. Esto se puede alcanzar desarrollando una nueva variedad que combine las buenas caractersticas de dos genitores diferentes. Por ello un aspecto muy importante de los cuatro mtodos que estudiaremos a continuacin es la eleccin de los genitores. 2. Tipos de cruzamientos: Para obtener los objetivos antes planteados, podemos optar por dos tipos de cruzamientos: 1) Cruces complementarios: Con estos se intenta obtener en las generaciones segregantes un nuevo genotipo homocigoto, que rena determinadas caractersticas de cada genitor. Los cruces complementarios consisten en realizar un cruzamiento entre dos genitores que difieren en caractersticas que se complementan y que nos interesan juntas. Un ejemplo de este tipo de cruzamientos, fue el que condujo a la obtencin de la variedad de trigo Pan 247(con las caractersticas subrayadas). Sus genitores fueron las variedades Mentana y L4 que presentaban las siguientes caractersticas complementarias: Montana L4 Precoz Tardo Paja dbil Paja fuerte Tendencia al desgrane No desgrane Altura de espiga poco uniforme Uniformidad Puede sembrarse tarde Hay que sembrarlo temprano Alta fertilidad floral Baja fertilidad floral 2) Cruzamientos transgresivos: Se intenta obtener por una segregacin transgresiva, genotipos que muestren un carcter cuantitativo, con mayor o menor intensidad que sus genitores. Los cruzamientos transgresivos han dado buenos resultados en la mejora de caracteres polignicos, ya que los genotipos que muestran igual intensidad en un carcter polignico pueden corresponder a distintas combinaciones de genes y en la segregacin posterior al cruzamiento, se pueden obtener nuevos genotipos que acumulen mayor nmero de poligenes favorables. Por ejemplo, supongamos en cereales dos genotipos que muestren la misma resistencia a las heladas y que genticamente sean; AABBccddEEff y aabbCCDDeeFF, siendo los alelos representados por las letras maysculas los que confieren mayor resistencia al frio, sin que ello implique dominancia, sino un modelo aditivo. La F1, ser AaBbCcDdEeFf, y por tanto con la misma resistencia que sus genitores (modelo aditivo). 66

En la segregacin de su hbrido, podrn obtenerse individuos con distinto nivel de resistencia al frio, desde el mas sensible (aabbccddeeff) al mas resistente (AABBCCDDEEFF). Si bien, no siempre el cruzamiento de dos lneas que muestren el carcter con mucha intensidad, darn como resultado descendencias transgresivas. En ocasiones tambin se ha observado como el cruzamiento entre una lnea buena y otra regular produce respuestas transgresivas. Sabras explicar el porqu de estas dos afirmaciones? 3. Eleccin de los genitores. En la seleccin de los posibles parentales, no debe existir ningn tipo de restriccin siempre y cuando haya posibilidad real de cruzamiento y posean variabilidad para las caractersticas deseadas. En realidad la nica restriccin nos viene impuesta por el propio objetivo del programa de mejora. Los dos genitores deben reunir, entre los dos, las caractersticas que buscamos. En cualquier caso, sera conveniente seguir las siguientes normas en cuanto a la eleccin de los parentales: 1) Un genitor se elige casi siempre por su buen comportamiento en la/s zona/s donde vaya a cultivarse la nueva variedad, pues ser portador de genes de adaptacin a las condiciones ambientales. Entre varios genitores se elige siempre el ms productivo. 2) El otro genitor deber ser complementario al primero, expresar los caracteres complementarios con la mxima intensidad posible, habida cuenta de que se produce siempre alguna prdida como consecuencia de su insercin en un nuevo medio gentico. 3) Cumpliendo ambos genitores los requisitos anteriores, se elegirn, si existen varias posibilidades, los ms parecidos entre si, pues de este modo se reduce el tamao poblacional ptimo, y con algn mtodo el tiempo del programa de mejora. 4) Conviene, cuando sea posible, utilizar como genitor masculino un genotipo que lleve un marcador dominante, para poder as verificar en la siguiente generacin el xito del cruzamiento. 4. Mtodo masal. Marcha del mtodo. En el mtodo de mejora por hibridacin con seleccin masal, se siembra la generacin F2, en una parcelela suficientemente grande para cultivar varios cientos de plantas. La parcela se cosecha en conjunto, y se siembra una parcela similar la generacin siguiente. Se repite el proceso tantas veces como sea necesario. El esquema del proceso puede seguirse en la figura 1. Durante el periodo de multiplicacin masal, la seleccin natural juega un papel importante, desviando las frecuencias genticas de la poblacin. Este hecho se puede acelerar ya que durante el ciclo vegetativo de la planta se pueden eliminar los fenotipos que presenten caractersticas desfavorables, individuos con caracteres que no interesan, y fenotipos inferiores en general.

Figura 1. Esquema del mtodo masal. En una generacin avanzada, F6, F7 F8, segn la amplitud de la segregacin, que depender a su vez del grado de diferencia gentica de los genitores, se realiza la siembra de plantas espaciadas, para elegir entre ellas a los genearcas.

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Como nos estamos refiriendo a especies autgamas, las siguientes generaciones (F7, F8) y por tanto los genearcas sern prcticamente homocigotas . Cada uno de ellos es potencialmente una nueva variedad, pero antes de su introduccin, deberemos realizar los correspondientes ensayos estadsticos para decidir su bondad. Como ya hemos expuesto con anterioridad, se habrn de probar los genearcas, no slo entre si, sino tambin frente a alguna variedad ya existente en el mercado, antes de decidir su multiplicacin a escala comercial. Este mtodo, no es un sistema rgido, existe cierta plasticidad que va a depender del material con el que estemos trabajando. Por ello el mejorador y en funcin de su experiencia ir haciendo modificaciones, tanto en la forma de practicar la seleccin como en lo referente al nmero de ciclos hasta obtener los genearcas. Es un mtodo burdo, pero muy eficaz en el que se deja actuar, incluso participando, la seleccin hacia la homocigosis para fijar as los genotipos. De esta manera se obtiene una poblacin heterognea de individuos homocigotos, de donde luego se seleccionan los mejores fenotipos. Esta seleccin nos conduce al final a unas parcelas uniformes, dentro de las que no existe variabilidad y por tanto la ltima seleccin se har entre parcelas. 5 Tamao poblacional No hay normas fijas para establecer el nmero de plantas con las que debemos trabajar en los distintos ciclos. Depende del nmero de genes y de la diferencia que exista entre los parentales. A ttulo de orientacin en las tablas 1,2,3,4 aparece representado el nmero de individuos por generacin, en funcin del nmero de genes implicados, de la probabilidad con que queramos trabajar, y de si realizamos o no seleccin en contra de los homocigotos recesivos. El problema habitual es la dificultad para estimar el nmero de genes que controlan el carcter/es que nos interesan y el nmero de genes en que difieren los dos genitores. En general trabajaremos con el nmero de plantas ms elevado que permitan nuestros recursos. 6. Incidencia de la seleccin natural. En el caso de que apliquemos este mtodo, sin efectuar ningn tipo de seleccin artificial, tendremos que tener en cuenta: a) La supervivencia de los alelos en competencia, no se efecta al azar, ya que los peores competidores suelen ser inferiores agronmicamente (al menos en capacidad de reproduccin). Es decir la seleccin natural tiende a favorecer a los individuos mas capacitados para la supervivencia, y en trminos de inters para la especie, a aquellos con mayor capacidad de reproduccin. Esto es importante para comprender las mayores utilidades de este mtodo, ya que hace que sea especialmente adecuado para aquellos cultivos que se aprovechan por su semilla y menos indicado para el resto. 2) Caractersticas tales como maduracin, altura de la planta y adaptacin, se ajustan rpidamente a la seleccin natural y al medio ambiente en el que se cultiva la poblacin. Sin embargo, algunas caractersticas que podran pensarse que tendran cierto valor de supervivencia, como resistencia a enfermedades suelen ser neutras a la hora de sobrevivir en la poblacin. En estos casos es obligado practicar la seleccin por parte del mejorador, previo establecimiento de la enfermedad, mediante inoculaciones artificiales, en todos los ciclos de cultivo. 3) El nmero de individuos superiores aumenta con periodos largos de multiplicacin masal (ms ciclos). 4) La uniformidad morfolgica tambin aumenta despus de periodos largos, pero an despus de 20 aos de seleccin natural persiste una importante variabilidad.

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5) El xito que podamos obtener sera mayor, cuanto ms elevada sea la heredabilidad del carcter/es a mejorar. 6) En ocasiones y dependiendo de la especie y del tipo de carcter/es a mejorar, se puede acortar el tiempo del proceso, realizado algunos ciclos en invernadero. Esto nos puede permitir obtener ms de una generacin por ao, pero no es demasiado aconsejable porque las condiciones van a ser muy diferentes y se pueden perder caractersticas que confieren adaptabilidad al medio para el que estamos desarrollando la nueva variedad. ANEJO TEMA 11

TEMA 12 METODO GENEALOGICO 1. Descripcin y utilidades. Como su nombre sugiere, este mtodo implica un control y conocimiento de los ascendientes y descendientes de cada individuo en las distintas generaciones, permitiendo as fundamentar ms que ningn otro mtodo las selecciones que se van realizando. El objetivo final del mtodo, como el anterior, es la obtencin de una variedad formada por una lnea pura a partir de un cruzamiento entre dos o ms parentales que se complementan o expresan herencia transgresiva para los caracteres deseados. El esquema del mtodo, puede seguirse en la figura 1. Para la seleccin durante las primeras generaciones, se tiene en cuenta en primer lugar el valor promedio de cada parcela; una vez seleccionadas las parcelas, se autofecundan las mejores plantas dentro de cada parcela y se recoge la semilla de las plantas autofecundadas separadamente (seleccin entre y dentro de cada parcela). Tambin es conveniente seleccionar los mejores fenotipos aunque no pertenezcan a la mejor parcela. En el ciclo siguiente, la descendencia de cada planta individual seleccionada constituir una nueva parcela. Estos ciclos se repiten hasta que se considere necesario. A medida que transcurren las generaciones va aumentando la homocigosis, alcanzando un momento en el que la uniformidad dentro de cada parcela es muy alta, las diferencias que se observan son ya fundamentalmente entre parcelas. Por tanto a partir de la F4, se suelen seleccionar exclusivamente parcelas y no plantas individuales. En las generaciones F6 a F9 la homocigosis es prcticamente completa y las plantas seleccionadas (genearcas) pueden ser ya el punto clave para obtener la nueva variedad. De nuevo deben de realizarse los ensayos comparativos durante cuatro o cinco aos y en varias localidades. Se ha de observar tambin la uniformidad de la descendencia de cada genearca. Los criterios de seleccin de las parcelas y plantas, son variables, se ha de tener en cuenta la herencia de los caracteres implicados y la generacin en la cual se estabilizan. Hay caracteres como por ejemplo los de resistencia a enfermedades que se fijan pronto, ya en las primeras generaciones, lo mismo sucede con la 69

precocidad, tamao del fruto, forma y color de las flores etc.. Hay otros como produccin, que suelen fijarse de forma ms tarda y por tanto su seleccin, no debe empezar hasta al menos la generacin F5. Con relacin a los criterios de seleccin en funcin de la herencia de los caracteres y de su momento de fijacin, se pueden hacer las siguientes recomendaciones generales: . Seleccionar las plantas en la F2, para caracteres muy heredables. .Seleccionar en F3 o F4, para caracteres de moderada heredabilidad. .La seleccin para rendimiento, se debe de limitar en las primeras generaciones a la eliminacin de las peores parcelas, o seleccionar la productividad a partir de caracteres relacionados con ella de mayor heredabilidad. (Recordad el ejemplo de la introduccin de aristas en una variedad mocha de trigo). El mtodo genalgico, ha sido de los ms importantes para combinar caractersticas de inters en una nueva variedad y da ms oportunidades que cualquier otro mtodo para evaluar los materiales de un cruzamiento, sobre todo si el mejorador conoce el cultivo y es capaz de estimar el comportamiento final a partir de plantas individuales. An as, ciertos caracteres requieren de tcnicas especiales para identificar las plantas deseables en las primeras generaciones (infecciones artificiales, condiciones climticas concretas obtenidas en cmaras climticas, tests de calidad etc.). El rbol genealgico que se construye a lo largo del proceso, nos permite desechar parcelas similares, estudiar la evolucin de los caracteres, sus posibles correlaciones, ligamientos etc. Esto proporciona ms seguridad en la seleccin, y permite futuros proyectos de mejora para objetivos muy distintos, sin tener que empezar por el principio. El problema es que al mismo tiempo conlleva una gran dedicacin y esfuerzo, lo que limita la cantidad de material con el que se puede trabajar. Existen algunas limitaciones al mtodo, debidas a la necesidad de practicar una seleccin dirigida durante todos los ciclos. Si el objetivo, por ejemplo, es resistencia o tolerancia al frio, tendrn que estar presentes las bajas temperaturas, si no se cumple esta condicin, es intil practicar la seleccin. Esta limitacin afecta menos al mtodo masal y nada al que estudiaremos a continuacin (SSD). 2. Comparacin entre el mtodos genealgico y el masal Cada uno de los dos mtodos tiene fuertes defensores, con opiniones basadas en la experiencia a lo largo de mucho tiempo. Pero la evidencia experimental es escasa y contradictoria. Las principales ventajas del mtodo genalgico son: 1) Permite la eliminacin de una gran parte del material no prometedor en las primeras generaciones. 2) Permite la evaluacin de las selecciones basndose en su buen comportamiento durante varios aos. 3) Permite un rpido alcance de la homocigosis. Inconvenientes del mtodo genealgico: 1) Las ventajas anteriores son aplicables principalmente para caracteres cualitativos, que pueden adems evaluarse visualmente sin dificultad. 70

2) La cantidad de material que puede ensayarse esta muy limitada, por la alta dedicacin que requiere el mtodo. Si el mejorador quiere obtener informacin de varios cruces, como fuentes de genotipos superiores, es casi inviable. Es decir es til en el caso de un nico cruzamiento. La eleccin de un mtodo u otro, tambin depender de la ayuda que nos pueda prestar la seleccin natural. En caracteres donde la seleccin natural elimine fcilmente a los fenotipos indeseables, es ms aconsejable el empleo del mtodo masal, ya que este nos ahorrar tiempo y dinero. Existen, adems, muchas modificaciones de estos mtodos que en ocasiones combinan aspectos de ambos.

Figura 1. Esquema del mtodo genalgico. TEMA 13 DESCENDENCIA DE SEMILLA UNICA (SSD) La estrategia de este mtodo consiste en obtener un gran nmero de lneas puras a partir de la F2, sin mediar seleccin artificial. Una vez obtenido un gran nmero de lneas puras se inicia el proceso de seleccin entre ellas. El esquema del mtodo, puede seguirse en la figura 1. En el la semilla de la F2, se siembra separada, en los mtodos anteriores se utilizan las siembras caractersticas del cultivo, se toma una nica semilla no seleccionada que dar lugar a una planta en la generacin F3, as sucesivamente hasta la generacin F6 a F8, en la cual ya se habr alcanzado la homocigosis. A partir de ahora se inician los ensayos de evaluacin de las lneas a las que da origen cada descendencia, de las plantas autofecundadas. El tamao poblacional de la F2, puede estimarse en funcin de la herencia de los caracteres implicados en el programa de mejora. As por poner un ejemplo, si el objetivo es introducir una resistencia monognica, empleando un tamao poblacional en la F2, de 75 plantas, nos podemos asegurar la existencia de una lnea homocigtica en la generacin F8 que lleve incorporada dicha resistencia, con un 99% de probabilidad de xito. Es muy importante para conseguir los objetivos, el mantenimiento del mismo tamao poblacional, durante todos los ciclos que abarca el mtodo. Este mtodo, permite reducir el periodo para la obtencin de lneas puras cultivando las generaciones en otras condiciones, no habituales del cultivo, como puede ser en invernadero, de tal manera que para algunos cultivos pueden obtenerse hasta 2,5 generaciones por ao, con lo que se acorta considerablemente el proceso de mejora. Como ves, la ventaja de este mtodo, es la rapidez en la obtencin de lneas puras, y el poco coste y dedicacin que requiere. Sin embargo, es el menos predecible en cuanto a resultados y posibilidades de xito. No es adecuado para mejorar variedades frente a varios caracteres, en especial si estos son cuantitativos, ni tampoco en el caso de que los dos genitores difieran considerablemente en sus caractersticas agronmicas. Figura 1. Esquema del mtodo SSD TEMA 14 EL RETROCRUZAMIENTO 71

1. Introduccin El empleo del retrocruzamiento en un programa de mejora tiene inters cuando disponemos de una variedad que tiene buenas caractersticas agronmicas pero que posee una deficiencia especfica que queramos superar. Esta deficiencia puede ir asociada a la aparicin en un momento de un elemento nuevo, como un nuevo gusto en el mercado, la aparicin de nuevas enfermedades, o bien de condiciones ambientales adversas, como podr ser la salinizacin de los suelos. En esta situacin es deseable incorporar a la variedad comercial los genes que permitan superar esta deficiencia especfica, a partir de otro genotipo, pero manteniendo al mximo el fondo gentico de la variedad. Al genotipo en el que deseamos introducir el nuevo carcter se le denomina recurrente, y al genotipo fuente de la variacin y a partir del cual se incorporan nuevos genes en el recurrente se le denomina donante. Aadir que este mtodo es aplicable tanto a autgamas como a especies algamas, con algunas matizaciones para el segundo caso y que veremos en su momento. 2. Factores que condicionan el xito del programa. . Nmero de genes: el mtodo tiene mayor probabilidad de xito y mayor facilidad de ejecucin, cuanto menor sea el nmero de genes que controlan el carcter. . Heredabilidad: Cuanto ms elevada mejor. . Facilidad de reconocimiento por parte del mejorador. Este aspecto es ms importante incluso que el nmero de genes y la heredabilidad. . Resulta ms sencillo la incorporacin de caracteres dominantes que si estos son recesivos. . Expresividad elevada: Es importante que se de en el genitor donante, ya que siempre se pierde algo de intensidad al incorporarse a un fondo gentico distinto. . Posibles ligamientos negativos en el genitor donante. Pero, an en este caso, debido a los distintos ciclos de retrocruzamiento, es factible que se presente la recombinacin y podamos seleccionar el genotipo buscado. En cierto sentido es ms sencillo la aparicin de los individuos recombinantes con este programa, que con aquellos en los que solo se practican autofecundaciones. . Si podemos elegir, escogeremos como donante la variedad que se parezca ms a la comercial, sobra decir que as acortaremos la duracin de nuestro programa de mejora. 3. Introduccin de un gen dominante. Vamos a suponer el caso ms simple en el que deseamos introducir un carcter controlado por un gen dominante, en una variedad comercial (R) de fondo gentico G, a partir de una fuente de variacin (V) de fondo gentico G'. El esquema del proceso lo podes seguir en la figura 1. El genotipo buscado ser G AA. Siempre el genitor recurrente ser el parental femenino y el donante el masculino. El material de partida ser G aa x G' AA. Obtendremos una F1 = 50% G Aa. 72

A continuacin retrocruzaremos dicha F1, con el genitor recurrente de tal manera que el resultado ser: BC1= 75% G (50% Aa + 50% aa). Las plantas que muestren el fenotipo recesivo aa se eliminan. Al retrocruzar vamos forzando la eliminacin de los genes del parental donante y recuperando los genes de la variedad comercial. Las plantas de fenotipo A, se vuelven a retrocruzar con el genitor recurrente para obtener la segunda generacin de retrocruzamiento. El ciclo se repite entre dos y cuatro veces. Depender de las similitudes o diferencias existentes entre el material de partida. Nunca ms de cinco, ya que como ilustra la figura 2, la incorporacin del genoma parental es mnima a partir de la BC4. Figura 1. Esquema para la introduccin de un gen dominante por retrocruzamiento. Figura 2. Incorporacin sucesiva de genoma parental recurrente a lo largo de un proceso de retrocruzamientos sucesivos.

Como resultado de toda la serie de retrocruzamientos, obtendremos al final plantas que sern de fenotipo 73

similar al parental donante para el carcter que queramos transferir, pero de genotipo heterocigoto, y similares al parental recurrente para el resto de los caracteres. A partir de estas plantas se obtiene una generacin de autofecundacin. Estas plantas al ser de genotipo Aa segregarn: (25% AA, 50% Aa y 25% aa). De los descendientes de la autofecundacin se eliminan los que no presentan el carcter buscado y se hace un cruzamiento prueba, por el genitor recurrente, que nos permita conocer que individuos son los homocigotos, que sern las que den origen a descendencias que no produzcan segregacin. Con las descendencias de los individuos homocigotos se realizan a continuacin los ensayos comparativos con el testigo, que obviamente ser la variedad comercial que ha actuado como genitor recurrente. Tambin durante la marcha del programa podemos eliminar aquellas plantas que difieren ms de la variedad comercial, con esto se consigue acelerar un poco el programa. El tamao poblacional con el que hemos de trabajar depender de la estructura de las poblaciones. En el caso de algamas con gran variabilidad intrapoblacional, ser necesario un nmero mucho ms elevado que si se trata de una lnea pura en autgamas, donde bastarn unas pocas plantas. 4. Introduccin de un gen recesivo. El manejo de los materiales en un programa de mejora para introducir un gen recesivo en una variedad comercial es diferente y algo ms complicado que el caso anterior. El programa se inicia como en el caso anterior, pero al llegar a BC1= 75% G (50% Aa + 50% aa) no podemos seleccionar en contra de los individuos de fenotipo dominante ya que sern idnticos Aa, que es el fenotipo que porta el alelo a, como AA. La forma de afrontar el programa sera mediante el retrocruzamiento seguido de autofecundaciones sucesivas: Autofecundacin de las plantas de la generacin BC1, que segregarn en la proporcin 75% G (50% AA + 50% Aa) = 75% G (12, 5 % aa + 25% Aa + 62,5% AA). Solamente el 12, 5% de las plantas mostrar el carcter, con lo cual es necesario aumentar el tamao poblacional con respecto al caso anterior. Tras seleccionar las plantas de genotipo aa, obtenemos la segunda generacin de retrocruzamiento: BC3= 93% % G (50% AA + 50% Aa). El proceso de retrocruzamientoautofecundacin puede repetirse, siendo ms o menos largo, en funcin de las diferencias genticas entre el donante y el recurrente. En el momento en que decidamos no realizar ms ciclos, seleccionamos despus de la ltima autofecundacin, aquellas plantas que presenten el fenotipo aa. El porcentaje oscilar en funcin de si partimos de una ltima poblacin Aa o de una en la que estn presentes AA y Aa. En el primer caso obtendremos un 25% de las plantas aa y en el segundo un 12,5%. A continuacin se realizan los ensayos comparativos igual que en el caso anterior. 5. Mejora escalonada. El mtodo de retrocruzamiento puede emplearse para introducir de forma sucesiva, distintos caracteres, en una variedad de inters agronmico.

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El ejemplo ms tpico de este tipo de mejora, es la introduccin sucesiva de resistencias a las distintas razas de un patgeno que van surgiendo en la dinmica evolutiva de la relacin husped patgeno. Otro procedimiento que puede utilizarse para mejorar una variedad en dos o ms caracteres, es transferir los genes necesarios simultneamente en el mismo programa. Este procedimiento tiene ciertas desventajas. En primer lugar se precisan poblaciones ms grandes para transferir dos genes juntos que si se hace de forma independiente. Adems, la experiencia ha demostrado, que no siempre se pueden dar las condiciones idneas que permitan la expresin correcta de los distintos genes, de forma que muchas veces se demora la introduccin de los otros genes en favor de uno slo. As pues, si bien el mtodo de mejora escalonada podr tener el inconveniente de una mayor lentitud, ofrece una mayor seguridad en la obtencin de resultados que la transferencia simultnea de distintos caracteres. TEMA 15 SELECCION MASAL EN ALOGAMAS 1. Introduccin y esquema del proceso Antes de comenzar este captulo, es bueno que recuerdes la estructura gentica de las plantas algamas y sus particularidades. En especial que en este caso la eleccin de la mejor planta, no siempre dar la mejor descendencia, y adems la posible existencia de depresin por consanguinidad que impide la reduccin drstica de los tamaos poblacionales, y por ello, a diferencia de lo que suceda con autgamas, no tiene ningn sentido la seleccin individual, y slo en algunos casos, como veremos en este tema, la seleccin masal. Cuando en una poblacin de plantas algamas existe variabilidad para uno o varios caracteres de inters, la forma ms sencilla de mejorarla es mediante la seleccin masal, autorizando slo la reproduccin de aquellos individuos cuya expresin genotpica sea ms interesante y rechazando el resto. La semilla de las plantas seleccionadas se mezcla formndose as la generacin siguiente (figura 1). Despus de varias generaciones sucesivas en las que se aplica esta seleccin, puede lograrse un aumento de la frecuencia de genes favorables, desplazando la media del carcter en cuestin hacia valores agronmicamente superiores. A lo largo del proceso de seleccin y, de forma simultnea, puede ser de inters la multiplicacin de la semilla obtenida en cada generacin, con objeto de realizar ensayos que permitan evaluar la mejora conseguida, o incluso para obtener en cada generacin la semilla comercial. La seleccin masal en algamas ha sido sin duda el primer mtodo de mejora utilizado, llevndose a cabo, de forma inconsciente desde la revolucin neoltica. Es lgico pensar que los agricultores de todos los tiempos han escogido de sus campos las plantas de mayor inters agronmico, para obtener de ellas la semilla para la siguiente generacin del cultivo. El efecto producido por esta seleccin masal efectuada durante muchas generaciones es muy probable que haya sido mayor que todos los mtodos de mejora basados conjuntamente, dando lugar a las variedades que se cultivan actualmente. 2. Casos en los que ha sido efectiva la seleccin masal. La seleccin masal ha sido efectiva en los casos donde ha sido posible la identificacin de los genotipos superiores a partir de los mejores fenotipos, y por tanto, ha sido til en la obtencin de variedades adaptadas a zonas especficas de produccin, con unas caractersticas ambientales concretas. 75

Figura 1. Esquema del proceso de seleccin masal en algamas. En maz, por ejemplo, la seleccin masal ha permitido la obtencin de variedades diferentes segn el color del grano, altura de la planta, tamao de la mazorca, emplazamiento de esta en la caa, fecha de maduracin, y contenido en protena y grasa del grano. En relacin con los dos ltimos caracteres son clsicas las experiencias llevadas a cabo en la estacin experimental de Illinois. Se parto de una poblacin sin seleccionar, cuyo contenido en aceite variaba entre 3,7 y 6%, y cuyo valor medio ra 4,64%. Tras diez generaciones de seleccin se obtuvo una poblacin en la que el contenido de aceite variaba entre el 6 y el 8,60%, con un valor medio de 7,50% (figura 2). Otro cultivo que podemos citar como ejemplo es la remolacha azucarera. Las remolachas utilizadas a principios del siglo XIX para la obtencin de azcar, tenan un contenido de sacarosa del orden del 7,5%. Las consecuencias de la seleccin masal fueron la elevacin del nivel de sacarosa hasta el 16,5%. Sin embargo, este ejemplo nos sirve para ilustrar la lentitud del proceso. ya que es cierto que se ha doblado el contenido en sacarosa, pero esa duplicacin se ha obtenido en 100 aos. Figura 2. Seleccin en maz por elevado contenido de aceite.

Este logro debo obtenerse gracias a que en las poblaciones de remolacha, deba de existir una variabilidad 76

importante, aunque esta fuera slo de forma potencial. El logro obtenido, debo de depender por un lado, de unos pocos genes directamente implicados con este carcter, cuyas frecuencias eran bajas, y de otro de combinaciones polignicas equilibradas que le confirieron adaptacin a las condiciones ambientales. La intensidad de seleccin realizada y los tamaos poblacionales utilizados en la misma, debieron de ser suficientemente benignos para lograr al mismo tiempo, un aumento de la frecuencia de los genes especficos y la formacin de nuevas combinaciones polignicas que mantuvieran el vigor, productividad y adaptacin. La adaptacin de las alfalfas introducidas en los EEUU, a las duras condiciones ambientales de algunas zonas de cultivo, son a la vez, ejemplo de los efectos de la seleccin masal y de la seleccin natural, que en este caso han actuado de forma paralela y podramos decir que equivalente. Efectivamente, las alfalfas originales provenan de zonas de climatologa benigna que la que se da en algunas zonas donde hoy se cultiva. A pesar de ello tenan una variabilidad gentica potencial alta. La seleccin natural elimin los genotipos no adaptados, es decir, los susceptibles a la dureza del clima, favoreciendo a los resistentes. Al igual que como se ha expuesto para el caso de la remolacha azucarera, la intensidad de la seleccin natural y los tamaos de las poblaciones sobre los que actu, debieron de ser lo suficientemente benignos como para elevar las frecuencias de unos determinados genes especficos y la formacin de nuevas combinaciones polignicas. 3. Causas de la ineficacia de la respuesta a la seleccin en algamas 1) La respuesta a la seleccin ser tanto ms ineficaz, cuanto menor sea la capacidad del mejorador de identificar los mejores genotipos a partir de los mejores fenotipos. En caracteres controlados por muchos genes, como el rendimiento, la seleccin masal no ha sido efectiva, ya que en su expresin influye mucho el ambiente, y por lo tanto no es suficiente valorar el fenotipo para juzgar al genotipo. Por tanto para que la respuesta a la seleccin sea eficaz, la heredabilidad ha de ser elevada.

2) Tampoco es suficiente una varianza gentica elevada para garantizar un resultado aceptable. En plantas algamas la respuesta a la seleccin R, es funcin directa de la heredabilidad en sentido estricto y de la seleccin diferencial. Es decir la respuesta a la seleccin depender fundamentalmente del valor de la varianza gentica aditiva, cuanto mayor sea esta, mayores logros podremos obtener. 3) La posibilidad de controlar la polinizacin, tambin influye directamente sobre este mtodo. As cuando la evaluacin del carcter se pueda realizar de forma previa a la antesis, ser posible seleccionar tanto a los padres como a las madres de la generacin filial. Entonces la seleccin ser mucho ms eficaz, ya que la semilla seleccionada se habr hecho en funcin de las buenas caractersticas maternas como paternas. Esto es sencillo cuando se trabaja con resitencias a enfermedades, que permiten la evaluacin temprana, en estados de dos hojas, pero imposible para otros muchos caracteres como por ejemplo el rendimiento. Existe la posibilidad de solventar este aspecto si se dispone de algn posible marcador. Si esto no es posible, la seleccin es mucho ms ineficaz, debe probarse la descendencia de las plantas seleccionadas y se alarga considerablemente el programa de mejora. 4) El efecto de la consanguinidad incide tambin en el xito o en el fracaso absoluto de este mtodo. La respuesta a la seleccin (R) poda aumentarse incrementando la presin de seleccin. Pero una presin de seleccin muy elevada disminuye demasiado el tamao poblacional y por consiguiente aumenta la consanguinidad. Para contrarestar este efecto, hay que trabajar con poblaciones de partida muy grandes, con las dificultades que implica su manejo, o bien aplicar una presin de seleccin menos estricta, con la consiguiente disminucin de la respuesta obtenida.

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5) La respuesta a la seleccin tambin depende de la frecuencia de los alelos en la poblacin. La mayor respuesta la obtendremos con frecuencias de moderadas a bajas, como ya vimos en el tema 10.

4. Seleccin masal con prueba de la descendencia. Ya hemos visto como la seleccin masal no es efectiva cuando el mejorador tiene problemas para distinguir los mejores genotipos a partir de los mejores fenotipos. Un mtodo eficaz para diferenciar los genotipos superiores cuando la influencia ambiental es importante, es mediante pruebas de la descendencia. El esquema de este mtodo queda ilustrado en la figura 3. Figura 3. Seleccin masal con prueba de la descendencia.

5. Utilidades actuales En la actualidad este mtodo slo se emplea en plantas algamas en unos pocos casos, ya que como veremos ms adelante, existen otros mtodos mucho ms rpidos y eficaces con este tipo de poblaciones. 1) Se utiliza para la purificacin de variedades, limitndose a eliminar aquellas plantas que se desvan negativamente de las caractersticas medias de la variedad.

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2) En cultivos minoritarios, y poco explotados desde el punto de vista de la mejora. En estos casos es asumible la existencia de una variabilidad gentica potencial muy elevada que puede permitir una respuesta importante a la seleccin, por ejemplo as ha sido el caso del desarrollo de la variedad "movera" de borraja. TEMA 16 VARIEDADES HIBRIDAS 1. Depresin consangunea y heterosis El aumento de consanguinidad, por ejemplo mediante autofecundaciones, en una poblacin algama, va asociado a una prdidas de vigor y fecundidad que se conoce como depresin consangunea. Esta depresin tiene como consecuencia una modificacin a veces profunda de muchos caracteres de la planta como son: Desarrollo vegetativo (menor biomasa) Reduccin de la tasa de crecimiento Descenso importante de la produccin etc. En ocasiones, adems, pueden existir grandes dificultades para conservar el genotipo; la aptitud reproductiva puede disminuir hasta el punto de no poderse mantener una lnea. Aparte de estas consecuencias a nivel externo, la poblacin tambin manifiesta una variacin en su estructura. En las primeras generaciones de autofecundacin se pierden muchas lneas potenciales, al aparecer un gran nmero de tipos letales y subletales. Se produce una diferenciacin rpida entre lneas al aumentar la homocigosis, y se pierde variabilidad. El vigor hbrido, es la situacin inversa. Se produce despus del cruzamiento de lneas consanguneas. Este vigor no tiene que existir para todos los caracteres, generalmente, se muestra para aquellos relacionados con la adaptacin o productividad. Desde un punto de vista biomtrico, se dice que existe heterosis cuando la poblacin hbrida, muestra ms acusado el carcter que sus parentales. La heterosis se mostrar cuando el valor medio del hbrido sea superior al parental de respuesta ms elevada.

2 Causas de la heterosis Existen dos hiptesis para explicar el fundamento gentico de la heterosis. . Hiptesis de la dominancia: Segn esta hiptesis los caracteres heterticos deben tener un control polignico y se debe de dar dominancia total o parcial hacia el parental de mayor valor. Consideremos un caso de efectos aditivos para un carcter controlado por cuatro genes, donde los alelos dominantes (maysculas) aportan al carcter un valor de 10 unidades, mientras que los recesivos (minscula) aportan dos unidades. Es decir, esta hiptesis, afirma que el hbrido es mejor como consecuencia de la accin aditiva de los genes con mayores efectos en el resultado final, por parte de los alelos dominates.

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Parentales AABBccdd x aabbCCDD Valor 24 24 F1 AaBbCcDd Valor 40 Como puedes observar, la respuesta de los cruces va a depender del genotipo de las lneas parentales. Segn la combinacin de genes dominantes y recesivos que reciba el hbrido, ser mejor o peor que la variedad original. . Hiptesis de la superdominancia: Esta hiptesis sostiene que siempre es superior la combinacin heterocigtica, que cualquiera de las combinaciones homocigotas, ya sean dominantes o recesivas. Esta hiptesis ha sido demostrada en muchos casos, ejemplos son la anemia falciforme en humanos. En las plantas tambin ha sido demostrado en numerosas experiencias con cebada. Tambin existen algunas evidencias a nivel molecular que apoyan esta hiptesis. As se ha observado que los estractos mitocondriales cultivados "in vitro" presentan una mayor tasa de actividad si provienen de individuos heterocigotos. Adems esta actividad es similar a la que presenta una mezcla alcuota de estractos procedentes de las dos lneas homocigotas (dominante y recesiva). . Implicaciones para la mejora: El hecho de que la hiptesis explicativa de la heterosis sea un modelo u otro tiene fuertes implicaciones en la mejora. Un modelo basado en la superdominancia, implica que para obtener el genotipo hetertico, el mejorador tendra que construir el hbrido heterocigtico puro, ya que este sera de por si el genotipo superior. Sin embargo, un modelo basado en la dominancia, implica que el mejorador no necesariamente debe obtener el hbrido, sino que una lnea pura homocigota para todos los alelos dominantes, constituir un genotipo tanto o ms vigoroso que el genotipo heterocigoto. Dominancia parcial AABBCCDD > AaBbCcDd Dominancia completa AABBCCDD = AaBbCcDd Si fuera cierta esta hiptesis tendra la ventaja, de que la lnea se puede autoperpetuar y se resolveran los problemas asociados a la produccin de semilla hbrida. Esta segunda teora ha sido demostrada en autgamas, si bien posee problemas en su ejecucin derivadas de la dificultades de concentrar todos los alelos favorables en un slo genotipo, sin arrastrar en el proceso aquellos alelos detrimentales que pueden estar ligados a los favorables. Existe la posibilidad de su separacin mediante los procesos de recombinacin, pero en funcin de la distancia puede ser un proceso muy lento. Adems existen condicionantes de polticas empresariales, que no favorecen precisamente este tipo de programas. En especies algamas existen algunas evidencias indirectas, fundamentalmente en maz. En este cultivo las selecciones actuales han llevado a lneas puras mejores que las existentes hace 15 aos. Al mismo tiempo la 80

mayora de los hbridos comerciales proceden en la actualidad de unas pocas lneas puras con excelente capacidad de combinacin. Una explicacin sencilla a este fenmeno, avalara la hiptesis de la dominancia. Las lneas actuales, habran acumulado mediante recombinacin genes dominantes frente a las antiguas. Es decir se habra pasado de modelo AABBccdd a los actuales AABBCCdd. Este avance hacia AABBCCDDEEFF...es lento debido a la fuerte carga de genes detrimentales presentes en las poblaciones de algamas. Por ello la obtencin de genotipos homocigotos produce una prdida de vigor, al avanzar hacia la homocigosis como consecuencia de la manifestacin de los alelos recesivos desfavorables. Es decir junto a los genes dominantes superiores, se mantendrn otros genes detrimentales ligados que impiden que se alcance el valor agronmico real. Sin embargo al cruzar dos lneas de distinto origen, con distintos genes detrimentales, los hbridos son superiores. De esta forma la posibilidad de obtener genotipos superiores homocigotos en algamas es menor que en autgamas. 3. Ventajas de las variedades hbridas La existencia de heterosis se ha utilizado como justificacin tcnica para la presencia de variedades hbridas. La primera ventaja sera la facilidad de obtencin. Es ms fcil obtener una variedad hbrida hetertica que una homocigtica por las razones antes citadas. En este punto hay que distinguir entre algamas y autgamas. Si bien en ambas es costoso obtener el individuo homocigoto superior, los hbridos son especialmente ventajosos en algamas, ya que debido a la existencia de un mayor nmero de genes detrimentales la probabilidad de encontrar la combinacin homocigota deseada es menor. Adems cuanto mayor sea el nmero de genes detrimentales, mayor ser el tamao de la poblacin necesaria. Otra razn de tipo tcnico es el manejo de las resistencias a enfermedades. Hay genes que confieren resistencia a algn patgeno y en muchos casos son genes dominates de modo que en heterocigosis el material es resistente. Para introducir estos genes se suelen efectuar programas de retrocruzamiento que suelen arrastrar un fondo gentico no deseable, junto con los genes de resistencia introducidos. El cruce de esta lnea con una agronmica superior puede disminuir los efectos de estos genes desfavorables y aprovechar la resistencia incorporada por el gen dominante. En relacin con este fenmeno es ms aconsejable la complementacin de las resistencias, es decir, no introducir todas las resistencias en una lnea, sino repartirlas entre los dos parentales. Esta complementacin nos permite obtener hbridos con un gran nmero de resistencias. As en la actualidad en algn hbrido comercial se han llegado a incorporar hasta doce resistencias distintas. Otra de las ventajas de tipo tcnico es la mayor homeostasis de los hbridos. La homeostasis gentica confiere una mayor insensibilidad a las condiciones ambientales. Esta superioridad se manifiesta ms en los hbridos de algamas ya que las autgamas han evolucionado de otra manera, eliminando los genes detrimentales y alcanzando un buen equilibrio homocigtico. Los hbridos tambin presentan una ventaja adicional frente a las variedades de polinizacin abierta, aunque no frente a las lneas puras, su uniformidad. Por ltimo, existen ventajas de naturaleza comercial. En muchos casos an no estando justificado el empleo de este tipo de variedades, ya que las tradicionales pueden ser tanto o ms rentables que los hbridos, se emplean variedades hbridas ya que estas permiten un mayor control por parte de la casa productora. 81

4 Tipos de Hbridos El hbrido simple, es el que se obtiene cruzando dos lneas puras. Se suele utilizar como genitor hembra a la lnea ms productiva, y si ambos tienen las mismas caractersticas, se utiliza como genitor masculino al mayor productor de polen. El hbrido simple, tiene como gran ventaja su uniformidad, pero esta uniformidad es una desventaja cuando se requiere plasticidad o adaptabilidad a condiciones ambientales fluctuantes. Tambin presenta una cierta desventaja el alto coste de produccin de su semilla. Sin embargo la mejora tambin ha avanzado en este aspecto, as en maz ya existen lneas altamente productivas por si mismas. Es el mejor tipo para aquellos caracteres que muestran un elevado grado de heterosis. El hbrido lnea por variedad: puede ser el primer paso antes de llegar a la obtencin de hbridos entre lneas bien adaptadas a una regin. Se obtiene con una lnea pura que hace de genitor masculino y como genitor femenino se emplea una variedad de polinizacin libre, bien adaptada a la regin. Va a existir una cierta heterogeneidad en el hbrido, pero este ser superior a la variedad de polinizacin abierta. El hbrido doble: se obtiene del cruzamiento entre dos hbridos simples, entrando por tanto en su composicin cuatro lneas puras diferentes. Sus principales ventajas son: a) el menor coste de su semilla, ya que se utiliza como genitor femenino un hbrido simple que tendr mas productividad que una lnea pura y lo mismo sucede con el parental masculino, que ser un buen productor de polen. b) Presentar mayor plasticidad que un hbrido simple. Sin embargo presentar una menor uniformidad. El hbrido de tres vas: Se obtiene del cruzamiento entre un hbrido simple, que hace de genitor femenino y una lnea pura, buena productora de polen que hace de genitor masculino. El coste de la semilla es menor que la del hbrido simple, presenta tambin mayor plasticidad que este, y menor variabilidad que el hbrido doble. Este ha sido muy utilizado en la prctica. Desde que los hbridos de maz, en 1921, empiezan ha introducirse en el mercado, en pocos aos ha aumentado exageradamente la superficie de variedades hbridas cultivada. Este procedimiento se ha ido extendiendo tambin a otros cultivos. Se emplea tanto en algamas como en autgamas siempre que la especie pueda absorber el elevado coste de produccin de este tipo de semilla. Existen por ejemplo, hbridos de cebada, altamente productivos, pero lgicamente nada rentables para su explotacin comercial. 5. Fases en la obtencin de hbridos. El objetivo final de la mejora para la obtencin de variedades hbridas, es obtener hbridos superiores a la poblacin original de polinizacin abierta, en donde por supuesto hay heterogeneidad gentica. Las mejores poblaciones para acometer este tipo de programas, son las de reas donde su cultivo es marginal. Si se toma al azar en una poblacin algama un cierto nmero de plantas, se obtienen por autofecundacin las correspondientes lneas consanguneas y se cruzan entre ellas al azar, los resultados obtenidos no supondrn ningn avance sobre la media de la poblacin inicial, puesto que se ha vuelto a reconstruir la primitiva estructura gentica de la poblacin original. Por tanto para que el proceso sea eficaz, se habrn de seguir los siguientes pasos: 1) Eleccin de la poblacin de polinizacin abierta. Seleccin dentro de ella de las plantas individuales que deberemos autofecundar. 2) Obtencin y mejora de las lneas puras obtenidas por autofecundacin de las plantas anteriores. 3) Eleccin e hibridacin de las lneas puras que den las mejores combinaciones hbridas.

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Como consecuencia de este proceso no se puede obtener un genotipo que, tericamente al menos, no estuviera presente en la poblacin original, pero si un genotipo mas favorable. 6. Valoracin de las lneas puras. Aptitud combinatoria. Una vez que hemos obtenido las lneas puras, es necesario conocer cuales sern adecuadas para la obtencin de una variedad hbrida. Es decir interesa encontrar la combinacin que de lugar al mejor hbrido. Por lo general al cruzar dos lneas puras elegidas al azar, el hbrido muestra un mayor vigor que sus genitores, pero casi nunca superior si se compara con la variedad de polinizacin abierta original. Si escogemos dos lneas puras poco emparentadas, es decir que procedan incluso de dos variedades distintas de polinizacin abierta, la situacin suele cambiar y normalmente el hbrido es superior a las dos variedades de las que se deriva.

Para conocer las mejores combinaciones, Davis, en 1927, hizo una sugerencia que posteriormente ha sido aceptada como la solucin ms sencilla y prctica. Davis, propuso la utilizacin de los "top crosses" lnea pura por variedad para probar la aptitud combinatoria general de las lneas puras. Para ello se siembra una variedad de amplia base gentica y se cruza con las lneas puras que queramos evaluar. La descendencia recogida de la lnea pura ser una familia de medios hermanos por parte de madre. Se siembra una parcela con esta semilla y se valora en su conjunto. La diferencia entre el valor de esta descendencia y el valor medio de la variedad de polinizacin abierta, ser una estimacin de la aptitud combinatoria general de esta lnea. A este tipo de cruzamientos se le denomina "top cross". Si el cruzamiento lo realizamos entre dos lneas puras, nos servir para escoger a las de mejor comportamiento combinado. En este segundo paso estamos seleccionando por aptitud combinatoria especfica. A nivel prctico, se suele estimar primero la aptitud combinatoria general, y en un segundo paso se prueban entre si todas las lneas que presentaban buena aptitud combinatoria general, realizando todos los cruzamientos posibles entre ellas y en los dos sentidos, para seleccionar despus las mejores combinaciones hbridas. 7. Dificultades en la obtencin de lneas puras. Autoincompatibilidad El procedimiento habitual, es el que comprende la autofecundacin, o la realizacin de cruzamientos lo ms consanguneos posible. Existen otros procedimientos ms biotecnolgicos que estudiaremos ms adelante, como son la obtencin de haplodiploides, mediante tcnicas de cultivo de tejidos. El proceso tradicional queda ilustrado en la figura 1. La ventaja de este mtodo frente a los biotecnolgicos, es que se puede introducir de forma paralela un "top cross", que utilizaremos como criterio de seleccin durante el mismo proceso de obtencin. Sin embargo, existen factores, como la existencia de autoincompatibilidad, que si bien sern una ventaja posterior importante en la produccin de semilla hbrida, son un claro inconveniente para la produccin de las lneas puras por los mtodos tradicionales.

Figura 1. Obtencin de lneas puras por autofecundacin. Existen diferentes estrategias para solventar los problemas derivados de la existencia de autoincompatibilidad: 83

1) En algunas solanaceas la irradiacin de las clulas madres del polen, restablece la autofertilidad. 2) Polinizar el pistilo, unos das antes de la antesis. ha dado resultados en brasicas. Tambin en otras especies de brsicas ha dado resultado la operacin contraria, es decir la polinizacin retrasada. 3) Tratamientos trmicos: exponiendo los pistilos a temperaturas de 60 grados. En tomate, trifolium y brsicas. 4) Tcnicas quirrgicas: Corte del estigma a diferentes niveles, incluso llegando a depositar el polen en la misma cavidad ovrica. 8. Mejora de las lneas puras. En muchas ocasiones se procede antes de la produccin de variedades hbridas, a la mejora de las lneas puras que van a actuar como genitores de hbridos. Los mtodos aplicables, son similares a los de mejora de autgamas. Los objetivos de mejora para estas lneas puras suelen ser: 1) Aumentar la productividad de las lneas para facilitar la produccin de semilla hbrida. 2) Introduccin de resistencias especficas, a enfermedades y plagas. 3) Aumentar la aptitud combinatoria de las lneas, para mejorar su hbrido. 9. Produccin comercial. Androesterilidad e hibridacin. La produccin de hbridos, de forma que sea econmicamente rentable, requiere a ser posible la existencia de tcnicas que eliminen la necesidad de realizar la emasculacin manual. Existen para ello diferentes sustancias gametocidas qumicas, el cuadro 1. ilustra una serie de gametocidas qumicos, con indicacin de los cultivos en los que han sido empleados. Cuadro 1. Algunos ejemplos de sustancias gametocidas con indicacin del cultivo donde han sido utilizadas. En los casos en que se ha encontrado androesterilidad gentica, es importante para ser utilizada con xito, que sea dependiente de alguna condicin externa, ya que es necesario tambin autoperpetuar la lnea pura. En el video que ilustra la obtencin de hbridos en arroz, podes observar como podra ser el gen de androesterilidad ideal Adems es necesario poder sincronizar la floracin entre los dos genitores. En el caso de que la polinizacin y la emasculacin haya de ser manual, es tambin necesario poner a punto la metodologa para cada cultivo. En este caso slo unos pocos cultivos son candidatos a la obtencin de este tipo de variedades. Es decir podra ser econmicamente rentable en los casos en los que se de un elevado tamao de sus flores y/o la alta produccin de semilla por fruto, o bien en especies donde exista un alto valor unitario del cultivo. Incluso en estos casos la produccin de materiales hbridos, slo es rentable si se realiza en paises donde el coste de la mano de obra no sea excesivamente elevado. TEMA 17 VARIEDADES SINTETICAS 1. Introduccin Las variedades sintticas, comparten con la seleccin recurrente y las variedades hbridas, el objeto bsico de aprovechar la heterosis en especies algamas. Pero frente a las variedades hbridas, las variedades sintticas 84

estn pensadas para evitar algunos inconvenientes importantes que acompaan al proceso de obtencin de las primeras. En muchas especies algamas es difcil completar todo el proceso de obtencin de hbridos F1. En unos casos la dificultad se encuentra en la anatoma floral (pequeo tamao se los rganos sexuales, flores hermafroditas) que hacen difcil la castracin, como en las gramneas forrajeras. En otros la existencia de alelos de autoincopatibilidad facilitan la produccin del hbrido pero no la obtencin de lneas puras homogneas. En otros casos nos encontramos con tasas reproductivas demasiado bajas para que la obtencin del hbrido sea econmicamente rentable. En estas especies una alternativa a los hbridos lo constituyen las variedades sintticas. Especies como graminea y leguminosas forrajeras y ciertas especies forestales para las que las generaciones son muy largas seran candidatas a este mtodo. Una variedad sinttica puede definirse como una generacin determinada (n) de una poblacin artificial resultante de una o varias multiplicaciones libres, entre un cierto nmero de estructuras parentales (K), las cuales se pueden reproducir de manera estable y que han sido seleccionadas por su aptitud combinatoria general. En la expresin multiplicacin libre, se quiere indicar que todos los cruzamientos entre las K estructuras parentales han de ser igualmente probables. Una estructura parental puede ser una lnea pura, un hbrido simple o doble, un clon, una poblacin procedente de seleccin masal o seleccin recurrente etc. La nica restriccin es que cuando sea reproducida mantenga sus caractersticas. El trmino variedad sinttica se utiliza, para designar una variedad que se mantiene por semilla de polinizacin libre, despus de su sntesis por hibridacin de todas las combinaciones posibles entre un nmero de genotipos previamente seleccionados por si aptitud combinatoria general. Esta seleccin por aptitud combinatoria general, es los que diferencia principalmente a una variedad sinttica de una variedad obtenida por seleccin masal. Por otra parte es similar a la obtenida por seleccin recurrente pero la diferencia estriba en que una variedad sinttica esta pensada para su utilzacin comercial directa. Las caractersticas que ha de cumplir una variedad sinttica son: 1) Expresin del vigor hbrido. 2) Alcanzar un cierto nivel de homogeneidad en la poblacin. 3) Fijacin de caractersticas fisiolgicas, agronmicas etc. 4) Conseguir una estabilidad de la variedad durante los diferentes aos de su cultivo y comercializacin. Su nomenclatura es k syn n, donde K es el nmero de estructuras parentales y n el nmero de generacin de la variedad sinttica. La primera generacin ser K syn 1. La generacin parental es K syn 0. No existen normas tericas bien definidas a la hora de construir una variedad sinttica, pero se podran dar las siguientes recomendaciones: 1) La consanguinidad de los parentales debe limitarse al mximo. 2) El nmero de padres debe limitarse todo lo posible. 85

3) Si se parte de posibles estructuras parentales de orgenes diversos, seleccionar los padres que muestren mayor heterosis y el mejor comportamiento en rgimen de consanguinidad. El comportamiento de la K syn 1 se predice a partir de los ensayos previos de aptitud combinatoria realizados con las estructuras parentales. Pero como una de las ventajas, de las variedades sintticas es la posibilidad de cultivar generaciones ms avanzadas desde la original K syn 1 hasta K syn 4, es necesario predecir el comportamiento de estas generaciones. El problema de predecir dicho comportamiento no es sencillo. En teora y en ausencia de fuerzas microevolutivas, epistasia, y con panmixia (apareamiento al azar) el valor de la K syn 1 representa el equilibrio de la ley de Hardy Weimberg, y por tanto las generaciones siguientes deberan tener un comportamiento anlogo, sin que hubiera disminucin de vigor, rendimiento ni prdida de otros caracteres de inters. Sin embargo estos requisitos no suelen cumplirse en la realidad, si hay interacciones epistsicas, seleccin gamtica etc. el equilibrio se alcanza ms lentamente y por tanto despus de varias generaciones la evolucin de una variedad sinttica es dificilmente previsible. Sin embargo, en experiencias reales realizadas con variedades sintticas de maz, obtenidas a partir de lneas puras, se puso de manifiesto que los rendimientos de las generaciones ms avanzadas, fueron similares a la K syn 1. Cuando se trata de cultivos forrajeros cuyas VS, se han obtenido a base de clones, la experiencia ha demostrado que la mayor productividad corresponde a la K syn 1, disminuyendo en la K syn 2 para volver a recuperarse a partir de la K syn 3. 2. Obtencin El esquema del proceso se ilustra en la figura 1. El procedimiento ms utilizado es realizar un plan de policruzamiento, que nos permita estimar la aptitud combinatoria de las posibles estructuras parentales. Como consecuencia de esta estimacin se eligen las estructuras parentales que formaran la variedad sinttica (K syn 0), La semilla que se produce despus de dejar polinizar libremente la K syn 0 , constituye la semilla comercial.

Figura 1. Esquema ilustrativo de la obtencin de una variedad sinttica. 3. Consideraciones prcticas para la obtencin de variedades sintticas 1) Las estructuras parentales han de ser estables. 2) Las generaciones comerciales han de ser estables. La legislacin de todos los paises desarrollados slo permite la inclusin en el registro de variedades, a aquellas en las que se puede demostrar su estabilidad. Estas dos exigencias bsicas conllevan la necesidad de controles muy rigurosos durante el proceso de obtencin, no siempre es fcil de conseguir. Con respecto a la estabilidad de las estructuras parentales hay que tener en cuenta: 1) La estabilidad de las estructuras parentales, puede mantenerse sin grandes problemas cuando se trata de lneas puras, o cuando se trata de clones que se reproducen de forma vegetativa.

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2) Cuando existan problemas a este respecto una forma de evitarlos es conservar grandes cantidades de k syn 1, en condiciones de larga duracin y utilizar cada ao una parte de esta semilla para obtener la que se vaya a comercializar. La estabilidad de las generaciones comerciales se puede conseguir: 1) Utilizando genotipos parentales homogneos en fecha de floracin, resistencias a agentes biticos y abiticos y con vigor comparable. 2) Conseguir la estabilidad de las estructuras parentales. 3) Respetar al mximo las distancias de aislamiento para evitar contaminaciones de otros genotipos. 4) Evitar la posibilidad de una polinizacin diferencial dentro de la parcela de policruzamiento. 5) Controlar la densidad de las diferentes estructuras parentales, estar alerta si se producen bajas. 5) Llevar unas buenas prcticas culturales. 6) definir con precisin el momento de la recogida de las semillas. 4. Principales utilidades de las variedades sintticas. 1. En paises con agricultura no desarrollada. 2 Para cultivos en los que no es posible, fundamentalmente debido a los costes de produccin, la obtencin de semilla hbrida. 3. Seran especialmente recomendables para el cultivo en ambientes fluctuantes. Seras capaz de explicar esta afirmacin? TEMA 18 SELECCION RECURRENTE 1. Introduccin El mtodo utilizado para la obtencin de variedades hbridas en plantas algamas comprende la seleccin de plantas deseables a partir de una poblacin heterocigota, la autofecundacin de las descendencias hasta llegar a la homocigosis y la utilizacin de las mejores lneas para producir hbridos F1 o de otra clase. Los primeros xitos conseguidos con el maz se obtuvieron con lneas puras aisladas directamente de variedades de polinizacin libre. A medida que se desarrollaron ms programas para la obtencin de hbridos en el maz, se tubo que dejar la obtencin de lneas consangunea a partir de variedades de polinizacin libre, debido a la baja frecuencia con que este sistema produce lneas extraordinarias. Al analizar el sistema clsico, se dedujo que la proporcin de lneas puras de gran valor dependa tericamente de dos factores: 1) De la proporcin de genotipos superiores en el material heterozigoto del que se haban aislado las lneas. 2) De la efectividad de la seleccin en incrementar la frecuencia de los genes o combinaciones de genes superiores durante el proceso de autofecundacin. Cuanto mayor sea la frecuencia de las combinaciones de 87

genes deseables tanto mayor ser la posibilidad de encontrar plantas con buenos caracteres agronmicos. En esta idea iba implcita la hiptesis de que exista un tope en el valor final de una lnea pura, dependiente de la planta original de la que se derivaba. La combinacin ms favorable de genes que se puede aislar de una planta, mediante el sistema clsico de la autofecundacin, depende de la efectividad de la seleccin durante el proceso de autofecundaciones. Si la seleccin es inefectiva se producir una fijacin de genes al azar. Por otra parte si esta seleccin es efectiva sera posible aproximarse al tope, determinado por la muestra particular de genes, que porta la planta original. Esto en la prctica tampoco es posible, debido al tamao limitado de las poblaciones con las que se trabaja, que limitan las posibilidades de la recombinacin para romper los ligamientos no favorables. Puesto que la autofecundacin no pareca ofrecer una buena oportunidad para la seleccin, se pens que una forma menos intensa de consanguinidad, podra servir de ayuda. Es decir, en vez realizar una serie se autofecundaciones seleccionando una planta en cada generacin para propagar la lnea, con la consiguiente prdida de genes no recuperables en cada seleccin. La alternativa sera practicar una forma menos intensa de consanguinidad, donde la propagacin de una lnea dada, se realizara despus de permitir los entrecruzamientos entre varios individuos seleccionados. De esta forma la probabilidad de producirse prdidas de genes favorables, por efectos del azar, queda reducida y as mismo, el entrecruzamiento dentro de una lnea dara mayores posibilidades para la recombinacin consiguindose as agrupar un mayor nmero de genes favorables. Estas ideas se fueron desarrollando y as entorno a 1940, surgi un nuevo mtodo de mejora denominado seleccin recurrente. Existen cuatro tipos de seleccin recurrente, segn la forma en las que se identifican las plantas con caracteres favorables: Simple, por aptitud combinatoria general, por aptitud combinatoria especfica y seleccin recurrente recproca. 2. Eleccin de los genitores La poblacin heterocigtica inicial puede establecerse de varias formas, con la finalidad de poder concentrar los genes favorables. Puede ser una variedad de polinizacin libre, una variedad sinttica, la descendencia de los cruzamientos entre varias lneas seleccionadas, un hbrido doble o sencillo etc. dependiendo del juicio del mejorador para estimar el material que necesita como fuente de genes. 3. Seleccin recurrente simple En la seleccin recurrente simple, se dividen las plantas en dos grupos, uno que se desechar y otro que se propagar posteriormente, teniendo en cuenta las puntuaciones dadas segn el fenotipo de las plantas individuales o de sus descendencias por autofecundacin. El procedimiento queda ilustrado en la figura 1. Puesto que en este mtodo no se realizan ensayos comparativos, su efectividad queda reducida a caracteres de alta heredabilidad, que permitan una evaluacin visual precisa. Es decir cuando sea fcil identificar a partir de los mejores fenotipos los mejores genotipos. No es apto por tanto para caracteres tipo rendimiento. Figura 1. Esquema de la seleccin recurrente simple. Las poblaciones que resulten de la seleccin recurrente se pueden utilizar de varias formas para obtener variedades mejoradas. Pueden ser autofecundadas para producir lneas homocigotcas para la produccin de variedades hbridas, pueden cruzarse con otras lneas puras, con hbridos simples o con otras poblaciones obtenidas por seleccin recurrente y tambin se pueden utilizar como material original para formar variedades sintticas. La seleccin recurrente evita tambin los problemas derivados de la consanguinidad. Estos pueden ser incluso minimizados en los casos de especies que se vean muy afectadas. La forma de hacerlo consiste en dejar 88

fecundar al azar la poblacin procedente del entrecruzamiento durante la siguiente generacin, antes de volver a seleccionar. Esta estrategia evita dicho problema, tiene el inconveniente de aadir un ao a cada ciclo, pero tambin aumenta las oportunidades de seleccionar genotipos favorables. La otra estrategia para minimizar los problemas derivados de la consanguinidad incluye el cultivo de las descendencias de los entrecruzamientos de forma separada con la conservacin de los datos completos de las ascendencias, con lo que luego se pueden seleccionar las muestras para hacer mnimo el parentesco. En general esto se puede hacer sin una reduccin apreciable de la seleccin diferencial que puede conservarse a expensas de un mayor trabajo que con el primer mtodo. 5. Seleccin recurrente por aptitud combinatoria general Este caso difiere del anterior en que se realizan cruzamientos de ensayo para medir la aptitud combinatoria general. Si se utiliza un "tester" de base gentica amplia las variaciones que se observen en el comportamiento de las plantas ensayadas sern debidas a la aptitud combinatoria general. En este mtodo se seleccionan un nmero determinado de plantas, que llamen la atencin del mejorador, de la poblacin original. Se autofecundan y en la siguiente generacin se cruzan con el "tester", para escoger a aquellas con buena aptitud combinatoria general. Se cultivan a continuacin la semilla de autofecundacin proveniente de los individuos seleccionados, se entrecruzan en todas las combinaciones posibles y se rene la semilla de los entrecruzamientos para establecer la poblacin en la que se practicar despus la seleccin.

5. Seleccin recurrente por aptitud combinatoria especfica Este mtodo es exactamente igual que el anterior, salvo que los cruzamientos prueba se hacen con un tester de base gentica ms reducida (normalmente una lnea pura). 6. Seleccin recurrente recproca Es un procedimiento que sirve para seleccionar tanto por aptitud combinatoria general como por especfica. El esquema del proceso aparece en la figura 2. Se parte de dos poblaciones heterocigotas A y B, que conviene que no estn relacionadas genticamente. Un nmero de plantas de la poblacin A se autofecunda y se cruza con una muestra de plantas de la poblacin B. De igual forma se autofecunda una muestra de plantas de B y se cruza con otra muestra de A. La seleccin posterior se basa en comparaciones experimentales estadsticas, de las descendencias de los cruzamientos de ensayo. Las descendencias de las plantas seleccionadas se entrecruzan y sirven para establecer las nuevas poblaciones A' y B' que sirven de inicio al siguiente ciclo. Se deben seleccionar suficientes plantas dentro de cada poblacin para mantener la consanguinidad a un nivel adecuado, ya que de otra forma puede quedar reducida la variabilidad sobre la que acta la seleccin. Por la misma razn las plantas seleccionadas en una generacin no deben proceder slo de unos pocos entrecruzamientos. 7. Comparacin de los mtodos 1) Si la dominancia es incompleta, la seleccin recurrente por aptitud combinatoria general y la recproca son igual de efectivas y ambas superiores a la especfica. 2) Si la dominancia es completa, los tres mtodos poseen la misma eficacia. 3) Si existe superdominancia el mtodo menos adecuado es la seleccin recurrente por aptitud combinatoria 89

general, siendo igual de efectivos los otros dos. Figura 1. Esquema de la seleccin recurrente recproca.

TEMA 19 METODOS DE MEJORA PARA ESPECIES DE REPRODUCCION VEGETATIVA Y APOMICTICAS 1. Introduccin: En este tema, vamos a estudiar las especies que se reproducen asexualmente, o por procesos donde no se ha producido una reproduccin sexual normal, ya sea de forma natural, ya sea por intervencin del hombre. Por ello vamos a subdividirla en dos grupos. 1) Especies de multiplicacin vegetativa, que son aquellas que an poseyendo rganos sexuales normales y capacidad de reproducirse sexualmente, en la prctica agrcola se reproducen de forma asexual. Ejemplos de estas especies son la mayora de los frutales. 2) Especies apomcticas: incluye tanto a aquellas que se reproducen por semillas formadas sin que intervenga la fecundacin "agamospermia", como a especies que presentando esterilidad sexual, determinada genticamente, se propagan por va vegetativa. 2. 1. Especies de multiplicacin vegetativa En general, su estructura gentica es altamente heterocigota, la explicacin es sencilla, ya que la heterocigosis suele ir asociada a heterosis, esto habr influido en los agricultores y mejoradores de cualquier poca a seleccionar estos individuos y propagarlos. La estructura gentica de estas poblaciones, simplificando, podra dividirse en dos tipos: a) Monoclonal, y altamente heterocigtica. Es decir, todos los individuos de la poblacin poseen el mismo genotipo, presumiblemente heterocigtico. En este caso la variabilidad observable no tiene causas genticas sino exclusivamente ambientales, y ser por tanto no heredable. b) Policlonal, y altamente heterocigtica. La poblacin estar constituida por una mezcla de varios clones, presumiblemente heterocigticos. La variabilidad observable en este caso puede tener causas tanto genticas como ambientales, y por tanto las genticas son susceptibles de ser aprovechadas mediante la seleccin. Adems, aunque se reproduzcan de forma vegetativa en la prctica agrcola, muchas conservan la facultad de reproducirse sexualmente, mas an el producto consumido, es consecuencia de la reproduccin sexual. Por ello en este grupo de especies, podemos encontrar segn su biologa reproductiva: especies autgamas, parcialmente algamas, y algamas. Dentro de estas ltimas, algunas son autofrtiles, y otras pueden presentar 90

alelos de incompatibilidad. De hecho en muchas de estas especies, uno de los objetivos de mejora, es la creacin de variedades autofrtiles, ya que esto independizara la produccin del fruto (pej; en el Almendro) de los requerimientos climticos necesarios para los insectos polinizadores, o la necesidad de establecer colmenas en las parcelas de produccin,y /o variedades polinizadoras con los consiguientes problemas de manejo y rentabilidad que esto implica. 2.2. Mtodos de mejora De lo dicho de su estructura gentica, se desprende que los mtodos de mejora podran enfocarse desde dos puntos de vista: a) Practicar la seleccin aprovechando la variabilidad gentica existente. b) Inducir nueva variabilidad y seleccionar posteriormente. 2.3. Seleccin clonal, y seleccin clonal sanitaria El procedimiento tendr sentido cuando la poblacin de partida, este formada por una mezcla de clones (poblacin policlonal). Muchas poblaciones de rboles frutales, vid, poco seleccionadas estn en esta situacin. Sin embargo, an en el caso de poblaciones monoclonales, pueden aparecer mutaciones espontneas que son de utilidad, al ser fcilmente aprovechadas mediante la seleccin. En este caso, se estudiar la descendencia, mediante el injerto (si fuera un rbol frutal) de la posible variedad mutante sobre un patrn y comparando su comportamiento frente a la variedad normal. El manejo del programa de mejora, en su primera fase, no difiere de la forma de realizar una seleccin individual en poblaciones heterogneas de autgamas. El manejo posterior es, sin embargo, diferente, ya que aqu intervienen las tcnicas de propagacin vegetativa. Es recomendable, aunque no se emplea en la prctica, la obtencin de variedades policlonales, ya que suelen proporcionar mayor plasticidad en los medios cambiantes. No estamos trabajando con especies anuales, donde si un ao se pierde el cultivo, no implica una prdida el siguiente. La mayora de los cultivos de reproduccin vegetativa, van a establecerse y utilizarse durante un cierto tiempo (aos). Adems la reposicin no produce beneficios inmediatos, ya que la entrada en produccin se suele producir al menos 5 aos despus del establecimiento del material vegetal. 2.4. Seleccin clonal sanitaria Lo ilustraremos con un cultivo de gran importancia en Espaa: la vid. En muchos viedos espaoles, todava existe variabilidad para muchos caracteres de inters agronmico como, produccin, resistencias, precocidad, contenido en slidos solubles, acidez, caractersticos que inciden en la vinificacin de los caldos, comportamiento frente a stresses edficos y climticos etc. Espaa, es el primer pas Europeo, en superficie dedicada al cultivo de la vid, pero ni en produccin ni en calidad alcanzamos el liderazgo. Una de las causas de esta situacin es la baja calidad del material vegetal. Muchos de los caracteres anteriores, seran posibles de seleccionar, mediante un programa de mejora relativamente sencillo.

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Uno de los objetivos ms interesantes y necesarios de abordar en nuestras variedades autctonas, sera el saneamiento del material vegetal, en especial frente a virosis, que como ya sabis o aprenderes en el futuro, no existen tratamientos fitosanitarios frente a ellas.

El objetivo de la seleccin clonal sanitaria, no es obtener una variedad diferente a las actuales, sino su saneamiento a partir de la seleccin de aquellos individuos sin virus, de una poblacin heterognea donde convive el material sano y el enfermo. El proceso de seleccin en especies leosas, es ms largo que en plantas anuales, por ello quiz despierta menor inters por parte de los mejoradores, ya que los resultados son a ms largo plazo, pero en el caso de la vid, es necesario, como en otros muchos cultivos, si no queremos que se pierdan nuestras variedades. Las fases del proceso, se esquematizan en la figura 1. Podemos distinguir tres fases en su ejecucin. 1) Preseleccin individual por caractersticas varietales y aparente sanidad. 2) Tests para las virosis ms importantes de la vid (entrenudo corto, enrollado y jaspeado, para las cuales el material certificado, segn la legislacin Espaola ha de estar exento. 3) Evaluacin taxonmica y agronmica de los clones sanos. Puede ocurrir que no exista ningn individuo libre de virus en los materiales estudiados. En este caso se podra estudiar el saneamiento de los clones, mediante tcnicas de termoterapia o cultivo "in vitro" que sern estudiadas ms adelante.

Figura 1. Esquema del proceso de seleccin sanitaria en vid.

2.5. Induccin de variabilidad Haya o no variabilidad en la poblacin de partida, un procedimiento eficaz de mejora, consiste en producir artificialmente una poblacin heterognea, en la que se pueda practicar posteriormente la seleccin, eligiendo plantas que sern el punto de partida para nuevos clones. En las especies de multiplicacin vegetativa se puede recurrir para crear variabilidad a tres tipos de procedimientos. a) Reproduccin sexual b) Mutagnesis c) Aprovechamiento de la variabilidad somaclonal La ventaja de estas especies, frente a aquellas de reproduccin sexual, es que independientemente del mtodo que se emplea para crear variabilidad, no es necesaria su fijacin por los mtodos convencionales que hemos estudiado con anterioridad. La principal consecuencia de la reproduccin vegetativa, es que en el momento que encontremos el tipo adecuado, automticamente podremos producir grandes poblaciones clonales. En este 92

sentido funcionan como las lneas puras de autgamas, es decir cada planta es capaz de reproducirse a si misma con gran precisin. 2.6. Especies de reproduccin por injerto En este caso los objetivos de mejora, no slo se limitan a la variedad, sino que tambin es importante la seleccin de patrones ms adecuados. Entre los principales objetivos de la mejora de patrones, podramos destacar: adaptabilidad edfica, climtica, mejor anclaje, mejor propagacin, ausencia de chupones, espinas etc.. Tampoco hay que olvidar la mejora de la relacin patrninjerto (compatibilidad, fructificacin adelantada, induccin o no de vigor sobre la variedad, patrones enanizantes etc). 3. Especies apomcticas La apomixis es un fenmeno por el cual las estructuras sexules, dan lugar a embriones sin que intervenga la fusin de los gametos msculino y femenino. Existen diversos mecanismos de apomixis, de los cuales los ms frecuentes en la naturaleza son: Apogamia: Se produce cuando se fusionan dos clulas haploides, o bien sinrgidas o bien antpodas. La planta resultante es diploide y se desarrolla con normalidad. Aposporia: Cuando el embrin se deriva de una clula del saco embrionario, sin reduccin cromosmica. El embrin es por tanto diploide. Diplosporia: Cuando el embrin se desarrolla a partir de la clula madre de la megaspora, sin reduccin cromosmica. Partenognesis: El embrin se desarrolla a partir de la ovoclula sin fecundacin. En la figura 1, se muestra un corte longitudinal de un pistilo, que servir para aclarar las diferentes formas de apomixis. Figura 1. Corte longitudinal de un pistilo. Las plantas apomcticas se dividen en dos grupos, obligadas y facultativas. En el primer caso, las progenies son clonales, esto presenta un beneficio para su propagacin, pero un inconveniente respecto a las posibilidades de mejora, ya que este mecanismo reduce la variabilidad, y es una traba a la recombinacin, que es la que nos permite desarrollar individuos superiores basndonos en la agrupacin de muchas caractersticas favorables en un slo genotipo. Las apomcticas facultativas, pueden alternar descendencias sexuales y asexuales incluso en una misma generacin y aunque presentan el inconveniente de controlar su propagacin clonal, presentan ms posibilidades de mejora, como consecuencia de sus descendencias sexuales. Para confirmar la presencia de apomixis, es necesario tanto el estudio de las descendencias, como la realizacin de los estudios citogenticos pertinentes. Observando slo la descendencia, no siempre podemos extraer conclusiones fiables por: 1) Si la descendencia es idntica a la madre, puede ser apomctica, pero si la especie fuera autgama y homocigota, no podramos diferenciar las dos posibilidades. 93

2) Si la apomixis es facultativa, encontraremos variacin en la descendencia, exceptuando el caso de las especies autgamas y las plantas homocigotas. Podramos sospechar de apomixis si en la descendencia aparecen excesivos individuos idnticos a la madre. 3) Slo en el caso de una especie algama, y una planta heterocigtica, si observamos una descendencia clonal, podremos afirmar que es apomctica. La apomixis es un fenmeno controlado genticamente, pero no se conocen, en general, los genes que intervienen. Casi la nica especie conocida es el "Buffelgrass", para ella se ha establecido un control dignico donde el gen dominante (B) produce apomixis y es epistsico sobre A, de tal forma que los genotipos sexuales son A_B_ aaB_ aabb y los apomcticos A_bb.

3.1. Mtodos de mejora Anlogamente a lo que ocurre en especies de reproduccin vegetativa, en las especies apomcticas podemos agrupar los mtodos de mejora en dos: 1) Los que aprovechan la variabilidad existente. 2) Los que inducen nueva variabilidad para seleccionar despus. El procedimiento ms importante para crear variabilidad es a traves de la hibridacin. Es posible en apomcticas facultativas, y en algn caso en las obligadas, si se encuentra algn individuo sexual. En caso contrario se puede recurrir a la hibridacin interespecfica. Al igual que sucede con las plantas de reproduccin vegetativa, los mtodos de mejora estn basados en la seleccin individual. Ya se trate de Apomixis obligada o facultativa, y cualquiera que sea el procedimiento para crear variabilidad, el objetivo final en estas especies es obtener genotipos apomcticos suficientemente estables, que adems presenten caractersticas agronmicas de inters. La importancia de mantener el mecanismo apomctico, es debido a que estas especies se multiplican por semillas, no por sus partes vegetativas como en el caso anterior, y por tanto es la nica forma de asegurar una reproduccin clonal estable, sin el efecto que causara la segregacin en la estabilidad de la nueva variedad. ANEJO PRINCIPALES ESPECIES DE REPRODUCCION VEGETATIVA Y

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INDICE Introduccion. Biologia reproductiva y floral y mejora genetica. P 23 Genetica Mendeliana. P 34 El medio y la herencia. P 43 Importancia de la variabilidad genetica. Analisis de caracteres que muestran variacion continua. P 46 Principios de genetica de poblaciones. P 61 Dinamica evolutica de las plantas cultivadas. P 70 Distribucion geografica y origen de las plantas cultivadas. P 80 Recursos fitogeneticos. P 87 Seleccin individual y seleccin masal en autogamas. P 94 Metodo masal ( bulk method). P 102 Metodo genealogico. P 109 Descendencia de semilla unica (SSD) . P 113 Retrocruzamiento. P 115 Seleccin masal en alogamas. P 121 Variedades hibridas. P 127 Variedades sinteticas. P 139 Seleccin recurrente. P 145 Metodos de mejora para especies de reproduccion vegetativa y apomicticas. P 151 Mejora para resistencia a enfermedades.

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