APLICACIONES EN BIOLOGA CELULAR

CULTIVOS CELULARES Y SUS APLICACIONES

OBTENER Y AILAR LAS CLULAS DE UN TEJIDO TRASPASAR LAS CLULAS A UN MEDIO DE CULTIVO (FUENTE DE NUTRIENTES Y EL SUSTRATO DONDE LAS CLULAS VAN A CRECER) MANTENCIN DEL CULTIVO BAJO CONDICIONES ADECUADAS DE ACUERDO AL TIPO CELULAR (TEMPERATURA, CONCENTRACIN DE CO2, PH, ETC.)

APLICACIONES EN BIOLOGA CELULAR

CULTIVOS CELULARES Y SUS APLICACIONES

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CULTIVOS CELULARES Y SUS APLICACIONES
LINEAS CELULARES TUMORALES (INMORTALES)

CLULAS QUE PRESENTAN UNA CAPACIDAD INDEFINIDA DE CRECIMIENTO EN MEDIOS DE CULTIVO, INCLUSO ANTE MANIPULACIN GNICA O DE MUTACIONES DIRIGIDAS.

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CULTIVOS CELULARES Y SUS APLICACIONES
ENZIMAS ANTICUERPOS FACTORES DE CRECIMIENTO AGENTES CANCERGENOS ENTRE OTROS

GEN
PROTENA

BACTERIA

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CULTIVOS CELULARES Y SUS APLICACIONES
EN EUCARIONTES, LAS PROTENAS ESTN CONSTITUIDAS NO SOLAMENTE POR UNA LARGA CADENA DE AMINOCIDOS, SINO QUE TAMBIN CONTIENEN COMPLEJOS MOLECULARES UNIDOS A ELLA, FRECUENTEMENTE CARBOHIDRATOS.

TRADUCCI N

COMPLEJOS MOLECULARE S CULTIVOS CLULAS ANIMALES

INCORPORACIN DEL ADN

TRANSFECCIN
INCORPORACIN DE ADN DENTRO DE CLULAS DE UN CULTIVO, CON EL OBJETO DE QUE ESTAS SINTETICEN UNA PROTENA EN PARTICULAR.

TRANSFECCIN

ELECTROPORACIN
FORMACIN DE POROS EN LA SUPERFICIE CELULAR POR ESTIMULACIN ELCTRICA.

TRANSFECCIN

BIOBALSTICA
DISPARO DE MICROPROYECTILES RECUBIERTOS DE ADN DENTRO DE LA CLULA.

TRANSFECCIN

TRANSFECCIN VIRAL
INCORPORACIN DE ADN FORNEO A TRAVS DE VIRUS

ANTICUERPOS MONOCLONALES
CIERTAS PROTENAS SON ALTAMENTE ESPECFICAS EN SU UBICACIN, HACIENDOLO SOLAMENTE EN CIERTOS TEJIDOS E INCLUSO EN ALGUNOS ORGANELOS CELULARES.

LOCALIZACIN DE PROTENAS

INMUNOLOCALIZACIN

ANTICUERPOS MONOCLONALES
SE UTILIZA LA CAPACIDAD DE LOS ANTICUERPOS PARA UNIRSE, DE FORMA BASTANTE ESPECFICA, A MOLCULAS EXGENAS.

LOS CIENTFICOS HAN DESARROLLADO TCNICAS DE INMUNOLOCALIZACIN.

TCNICA DE LOCALIZACIN POR ANTICUERPOS MONOCLONALES

1
INMUNIZACIN

SE INYECTA LA PROTENA DE ESTUDIO A UN ANIMAL DE LABORATORIO EL SISTEMA INMUNE DEL ANIMAL SE ACTIVA Y GENERA ANTICUERPOS ESPECFICOS PARA LA PROTENA INYECTADA

TCNICA DE LOCALIZACIN POR ANTICUERPOS MONOCLONALES

2
PRODUCCIN DE HIBRIDOMAS

HIBRIDOMAS: FUSIN DE CLULAS PLASMTICAS (INMUNE) Y TUMORALES (CNCER) CAPACIDAD DE PRODUCIR ANTICUERPOS REQUERIDOS Y MULTIPLICARSE RPIDAMENTE.

TCNICA DE LOCALIZACIN POR ANTICUERPOS MONOCLONALES

3
SELECCIN DE CLULAS HBRIDAS

LOS HIBRIDOMAS SON CULTIVADOS EN UN MEDIO ESPECIAL DENOMINADO HAT. EN ESTE MEDIO, SOLO LAS CLULAS HBRIDAS PUEDEN SOBREVIVIR, POR LO TANTO, SE ELIMINAN LAS CLULAS TUMORALES Y LAS CLULAS PLASMTICAS NO FUSIONADOS.

TCNICA DE LOCALIZACIN POR ANTICUERPOS MONOCLONALES

4
IDENTIFICACIN DE CLULAS PRODUCTORAS DE ANTICUERPOS
TODAS LAS CLULAS HBRIDAS SOBREVIVIENTES DEL CULTIVO HAT SON HBRIDAS, PERO SOLO UNAS POCAS PRODUCE EL ANTICUERPO NECESARIO.

PARA LA DETECCIN SE UTILIZAN PRUEBAS BIOQUMICAS. UNA VEZ DEFINIDAS SE AISLAN Y SE MANTIENEN EN CONDICIONES DE CULTIVO, PARA GENERAR UNA GRAN CANTIDAD DE ANTICUERPOS.

TCNICA DE LOCALIZACIN POR ANTICUERPOS MONOCLONALES

5
MARCACIN DE ANTICUERPOS
LOS ANTICUERPOS GENERADOS SE MARCAN CON UNA SUSTANCIA FLUORESCENTE. ESTO PERMITE DETECTAR LA PRESENCIA DE LA PROTENA A TRAVS DEL COLOR DEL ANTICUERPO QUE FUE MARCADO.

GENERALMENTE SON MARCADOS CON REACTIVOS FLUORESCENTES, LAS QUE PUEDEN VISUALIZARSE EN MICROSCOPIOS DE FLUORESCENCIA.