Bilirrubina total

1. Se extrajeron 3ml de sangre venosa

2. Colocamos la muestra e un tubo de ensaye y esperamos a que esta coagulara por
completo.
3. Centrifugamos a 3500 rpm durante 5 minutos.
4. Separamos el suero
5. se rotulo un tubo como blanco de ractivo y se le agrego 2ml de reactivo de bilirrubina, 2
goas de antioxidante y 100µ de agua destilada.
6. Se rotulo otro tubo con el nombre de blanco de muestra al cual se le agrego 2ml de
reactivo de bilirrubina y 100µ de suero sanguíneo.
7. Se rotulo otro tubo con el nombre de control y agregamos 2ml de reactvo de bilirrubina, 2
gotas de oxidante y 100µ de calibrador.
8. Se rotulo el ultimo tubo y se agrego 2ml de reactivo de bilirrubina, 2 gotas de oxidante y
100µ de suero sanguíneo.
9. Los tubos se incubaron a temperatura ambiente durante 3 minutos.
10. Se ajusto a cero el espectofotometro a 540nm con el reactivo.
11. Se leyeron las absorbancias de los tubos y se procedió a hacer los cálculos.

M −BM
BilirrubinaTotal= X 10=mg /dL
C

Abs M= 0.014

Abs C= 0.030

Abs BM= 0.024

0.014−0.024
BilirrubinaTotal= x 10=−3.33 mg/dL
0.030

Valores de referencia: 0.5 mg/dL

NOTA: VALORES MODIFICADOS

Bilirrubina directa

1. Se rotulo un tubo como bilirrubina directa y se le agrego 2ml de blanco de reactivo, 2

gotas de oxidante y 100µ de agua destilada.
2. Se rotulo otro tubo con el nombre de Control y agregamos 2ml de reactivo de bilirrubina
directa, 2 gotas de oxidante y 100µ de clibrador.
3. Se rotulo un tercer tubo con el nombre de blanco de muestra y se le agrego 2ml de
reactivo de bilirrubina directa y 100µ de suero sanguíneo.
4. Se rotulo un cuarto tubo con el nombre de muestra y a este se le agrego 2ml de bilirrubina
directa, 2 gotas de oxidante y 100µ de suero sanguíneo.
5. Se incubaron los tubos a temperatura ambiente (37°C) durante tres minutos.
6. Se ajusto a cero el espectofotometro a 540 nm con el reactivo.
7. Se leyeron las absorbancias un transcurso de 30 min.
8. Se interpretaron los resultados:

M −BM
BilirrubinaTotal= X 10=mg /dL
C

 M: 0.011
 BM: 0.044
 C: 0.030

0.011−0.044
BilirrubinaTotal= X 10=−11 mg/dL
0.030

Bilirrubina Indirecta:

Conforme a los cálculos obtenidos en la bilirrubina totl ydirecta se obtuvo la bilirrubina indirecta

Bilis total – bilis directa = Bilis indirecta

-3.33-(-11)= 7.67 mg/dL