Genética+ (1)

06/10/2010
Genética
Ciencia que estudia todo lo referente a

la herencia de los caracteres
anatómicos, fisiológicos y funcionales de
la descendencia.
L.N. Karla J. Nuño Anguiano
Historia de la genética
Los genes son factores particulares
Cromosomas son unidades hereditarias

Toda la información genética esencial para la
Los genes residen en los cromosomas vida de la célula bacteriana, está contenida en
Cromosomas contienen arreglos lineares de genes una única molécula de ADN de doble cadena,
Las mutaciones son cambios físicos en los genes
circular y covalentemente cerrado, a la que
La recombinación es causada por entrecruzamiento de genes
podemos referirnos como “cromosoma
El DNA es el material genético
Un gen codifica para una proteína bacteriano”

El DNA es una doble hélice
La replicación del DNA es semi-conservativa
El código genético esta dado por tripletes
El DNA pudo ser secuenciado
Inicio la secuenciación del genoma humano
ESTRUCTURA DEL MATERIAL GENETICO
Un componente importante es el azúcar, la ribosa

que se encuentra en su forma mas estable
β-ribofuranosa
1
06/10/2010
La ribosa, la base nitrogenada, más fosfatos = La estructura primaria es en

NUCLEOTIDOS forma de cadenas formadas
por la unión de nucleótidos
Es el monómero constituyente del DNA mediante enlaces covalentes
3´-5´ fosfodiéster
La secuencia siempre se
índica en dirección 5´ 3´,
de izquierda a derecha
El apareamiento de bases se lleva cabo a través de la unión de

un nucleótido con base purínica con otro con una base Como consecuencia de el apareamiento completo da lugar a
pirimidínica un ácido nucleico de doble hebra que va girando adoptando
una disposición helicoidal
CARACTERISTICAS DEL DNA BACTERIANO
Gen Contiene la información necesaria para su supervivencia:

 Segmentos específicos de
DNA que controlan las
estructuras y funciones •Formación de pared celular
celulares. •Plásmido
 Unidad funcional de la •Flagelo
herencia. •Pili
 Unidad de DNA que codifica •Síntesis de enzimas
para una enzima. •Mecanismos de defensa
•Factores de virulencia
2
06/10/2010
Genoma humano
 Intrones Genoma bacteriano
 Exones  Circular
Localización Función  Histonas  Disperso en el
Eucariotas Procariotas Virus  Organizado en citoplasma
DNA Núcleo celular
Dentro de la estructuras llamadas  Superenrollado
(cromosomas) en Citosol (un Depositario y transmisor de la
matriz cromosoma,
cápside
información genética, cromosomas  Plásmidos
(solo en
mitocondrial y en varios organizada en genes que
estroma de plásmidos)
algunos
codifican productos génicos  Rodeado por una
virus)
cloroplastos
membrana
RNA Núcleo celular
(temporalmente), Interviene en la transmisión
en citosol, matriz de la información desde el
Citosol Cápside
mitocondria y DNA hasta los productos
estroma de génicos
cloroplastos
Moléculas circulares de DNA con doble cadena que

constituyen una unidad de replicación independiente del
cromosoma.
Generalmente se encuentran en más de una copia y

contienen información de resistencia a antibióticos y/o
síntesis de nutrientes o enzimas específicas.
REPLICACION BACTERIANA
El pili ayuda a el intercambio de fragmentos de
AND durante la conjugación
1. Existe el replicón, que es una
unidad que puede replicarse de OriC
forma autónoma
2. En el cromosoma circular único de

procariotas comienza siempre en
Proteínas DnaA
un punto determinado,
denominado de origen (oric) que
tiene Proteínas DnaA que atrae a
otras proteínas de inicio
(helicasas).
3
06/10/2010
3. Helicasa: Separan las hebras,

creando horquillas de replicación que
avanzan en sentidos opuestos.
4. Proteínas de unión de hebra

sencilla estabilizan y mantienen las
horquillas abiertas
60 pb
5. Topoisomerasas: disminuye la tensión del
XXXXXX
superenrrollamiento de la hebra. Cebador de RNA
XXXXXX 50 pb
Proteínas de enlace
de una sola cadena RNA polimerasa
6. La Primasa un cebador que es sintetizado por una o primasa
RNA polimerasa es necesaria para iniciar la síntesis del
DNA, para que la DNA polimerasa comience la
elongación XXXXXX
XXXXXX
Topoisomerasa
DNA Polimerasa
DNA polimerasa, tiene 3

subunidades, se extiende del
En la elongación una de las cadenas corre en el
extremo 3´ sentido de 3á 5ý se le llama cadena molde, la
a) DNA Polimerasa I:
otra va de 5á 3´ y se le denomina discontinua
Degrada los cebadores de
RNA y los sustituye por
DNA
b) DNA Polimerasa II:

Repara el DNA sintetizado
c) DNA Polimerasa III:

Sintetiza el DNA de la
cadena
4
06/10/2010
Para la discontinua se van formando bucles, fragmentos de okasaki
Una serie de DNA (ligasa) sella los fragmentos de

Okazaki
DNA RNA
3´ 5´
Tabique
intercelular
La replicación de la bacteria es continua durante todo U

el ciclo celular
Tiempo de generación de E. coli 20 min

C. perfringens 8 min
5
06/10/2010
 Formación de RNA a partir del DNA

 Requiere una hebra 3á 5ý zona
consenso
 No requiere cebador
 Uracilo
 Promotor: secuencia de inicio de la
transcripción. Sitio para unir a RNA pol
Se clasifica en tres etapas:

Iniciación: reconocimiento del promotor,
apertura del ADN, reconocimiento del sitio
de inicio y la incorporación de los primeros
10 nucleótidos.
Elongación: incorporación de los nucleótidos
subsiguientes hasta antes del
reconocimiento del asa de terminación
Terminación: reconocimiento del asa de
terminación.
Rho dependiente
Rho independiente.
Regulación de la Expresión Génica Regulación de la Expresión Génica
6
06/10/2010
Regulación de la Expresión Génica
ATC GAC GGT AC GAC GGT
ATC GAC GGT GATC GAC GGT
ATC GAC GGT ATC GGC GGT
ATC GAC GGT ATC GTC GGT
Mutaciones silenciosas Mutaciones no silenciosas
Cambian la secuencia del DNA sin haber cambios en la Alteran la secuencia de nucleótidos y afecta la secuencia
secuencia de su producto. proteica
Afecta a la 3ª base de un codón de tal forma que el nuevo

triplete es sinónimo del original, codificando el mismo a) Mutaciones que alteran el sentido: sustituyen una base
aminoácido codificando un nuevo aminoácido
AUA =AUC = AUU
7
06/10/2010
Mutaciones que cambian el marco de lectura.

Sustitución conservadora El a.a. es sustituido por otro con una
cadena lateral similar
Existe un desplazamiento, desfase por inserción o deleción
Aspartato GAC, GAU de nucleótidos cambiando la forma en que se leen los
Glutamato GAA, GAG
tripletes alterando la secuencia de la proteína.
No Conservadora El a.a. Es sustituido por otro no similar
Sucede en las sustituciones en la 1ª y 2ª

posición Mutaciones que no cambian el marco
CGN = Glicina
CCN= Prolina Hay inserción o deleción de 3pb en el DNA y el resto de la
CUN= Leucina secuencia del a.a. se lee normal
Mutaciones con terminación prematura de la

proteína Mutaciones con terminación retrasada
Sustituyen de uno o varios nucleótidos apareciendo un Puede provocar la aparición de un codón de terminación o
codón de terminación o de paro (UAA, UAG, UGA en el eliminar uno existente, sustituyéndolo por otro que codifica
RNAm) obteniéndose una proteína acortada un aminoácido
Originalmente A
ATG CAC GAG TAG TCT
TAC GTG CTC ATC AGA
AUG CAC GAG UAG STOP RNAm
CAUSAS DE MUTACIONES
Radiación UV
Agentes Químicos:
Provoca reacción entre las T adyacentes formando dobles
transfieren grupos metilo en un átomo de enlaces impidiendo su apareamiento con las A
la base nitrogenada ejemplo: Dimetilsulfato correspondientes
se insertan distorsionando la
esctructura al desplzar la lectura ejemplo Naranja de
acridina
se incorpora en lugar de la Timina
8
06/10/2010
RAYOS X REPARACION DE DNA
Puede provocar apertura de los anillos, fragmentación de 1. Eliminación de agentes mutagénicos

las bases y rotura del esqueleto de DNA
Se evitan las lesiones antes de que sucedan neutralizando
los agentes mutágenos a través de la superóxido
dismutasa.
2 O2 + 2H O2 + H2O2 ½ O2 + H2O
Superoxido
Catalasa
dismutasa
Anion
superóxido
2. Reparación de fotodímeros 4. Reparación de apareamientos incorrectos

La enzima fotoliasa reconoce a los dímeros de Timina a Corrige errores después de la replicación y se elimina la
través de coenzimas y un cromóforo que absorbe la luz, base errónea
ejemplo: Saccharomyces cerevisiae
3. Reparación por escisión
Se elimina el nucleótido o segmento de DNA defectuoso y

se remplaza con el correcto
9
06/10/2010
RECOMBINACIÓN GENETICA RECOMBINACIÓN GENETICA
 Requiere de secuencias idénticas o casi idénticas de

Proceso mediante el cual los elementos genéticos dos moléculas recombinantes.
de dos orígenes diferentes se reúnen en una sola
unidad.
 Creciente producción de metabolitos reunidos en una
sola cepa
Es el intercambio genético entre secuencias homólogas
de DNA a partir de dos orígenes diferentes.
 Los mutantes que son enriquecidos selectivamente
pueden desarrollar mutaciones que no se detectan y
ser reemplazados por los alelos de uno de los padres

Elementos moleculares en la recombinación
general
 Las cepas de alta producción pueden aumentar el coste
de la fermentación debido al cambio de las 1. Se inicia con una mella en una de las moléculas de DNA
propiedades fisiológicas
(espuma, cambio en los requerimientos) 2. Formación de un segmento monocatenario.
Mella
DNA DNA
Donador Donador

3. La proteína
desestabilizadora de  Al final hay intercambio de moléculas homólogas de
Proteína
hélice se combina con el desestabilizante DNA formando estructuras de DNA recombinante
sitio para ayudar a la
apertura de la doble hélice. DNA
Receptor
Proteina RecA
4. La proteína RecA se une al DNA

Donador
fragmento y lo sitúa con una
secuencia adyacente
desplazando la residente
Intercambio de cadenas DNA
entrecruzadas recombinante
10
06/10/2010

Recombinación genética en bacterias.
Proceso en el cual el DNA libre se incorpora a la célula

Los mecanismos incluyen: receptora y provoca un cambio genético.
a) Transformación
b) Transducción Descubrimiento
como piedra
c) Conjugación angular de la
biología
molecular

Integración del DNA
 Se han encontrado bacterias
Gram + y – transformables 1. El DNA se une a la
superficie a través de
una proteína de
superficie de unión
 Solo ciertas cepas
transformables son 2. Se pasa de una de las
competentes dos cadenas mientras
que la nucleasa
degrada la otra
RECOMBINACIÓN GENETICA
3. El DNA incorporado
se une a una
proteína de
competencia
4. En el cromosoma es
capturado por la
proteína RecA
11
06/10/2010

Cada bacteria difiere como adquieren el DNA.
 El fenómeno de transformación es mas eficiente
cuando hay menor cantidad de DNAsas Haemophilus solo se introduce a la célula el DNA de
cadena doble
 Cuando el DNA llega a la bacteria se fija de forma
irreversible en las bacterias que son competentes E. coli y Bacillus solamente se fija el DNA
monocatenario y la cadena complementaria se degrada
simultáneamente.

Transfección
El DNA es transferido de una célula a otra mediante la

Las bacterias se pueden participación de un virus por dos formas
transformar con DNA
extraído de virus a) Transducción especializada
bacteriano b) Transducción generalizada
Transducción generalizada
Transducción generalizada
 El fago infecta a la célula
 El DNA del huésped se degrada en fragmentos del tamaño

de un virus y algunos se incorporan dentro de las partículas
virales.
 La célula se lisa y los lisados contienen una mezcla de

partículas virales e infectan a células receptoras
12
06/10/2010

Transducción especializada
Solo una pequeña  Se inserta el fragmento del fago como un gen (profago)
parte de los lisados y la célula infectada como lisogénica
contienen capacidad
de recombinar
 Solo ciertos genes del donador pueden ser transferidos
al receptor.

 Escisión del profago
y
un poco del DNA del
 Cambios en el
huésped
ambiente que
induce a la
liberación del
 Se queda latente profago
produciendo células
hijas lisogénicas  Muerte celular.
Implica la transferencia de DNA mediante un contacto

real entre la célula receptora y la donadora.
Plásmido
13
06/10/2010

PLASMIDO  Los plásmidos que pueden conjugar es controlado por
una región tra para movilizar la transferencia de DNA
 Elemento genético circular que se reproduce de forma
de una célula a otra
autónoma y tienen una existencia extracomosomica.
 Las cepas que transfieren gran cantidad de DNA se les
 Pueden llevar genes para:
denomina Hfr (alta frecuencia de recombinación)
 Resistencia a antibióticos
 Metales pesados
 Catabolismo de compuestos poco usuales

Replicación de plásmido.
•Participa en la transferencia de célula-célula
 Plásmido F (fertilidad) de E. coli Pelos F •Resistencia a algunos antibióticos
•Transferencia del factor F
•Transferencia de plásmido de célula-célula

Pelos I
 Tienen secuencias específicas que le permiten •Resistencia a antibióticos
recombinarse con el cromosoma bacteriano y formar •Resistencia a antibióticos y a inhibidores de
crecimiento
cepas Hfr a) Sulfoniulreas
Factores de
Transferencia de b) Estreptomicina
Resistencia (Plásmido) •Cepas resistentes
 Se replican de manera similar al cromosoma pero con •Se puede transferir entre géneros Escherichia,
Klebsiella, Proteus, Salmonella.
mayor rapidez

Origen de los plásmidos.
•Son codificadas por los plásmidos  No existe evidencia del origen de los plásmidos
•Inhiben o matan a especies relacionadas o

Bacteriocinas
inclusive de diferentes especies Se encontró una cepa de E. coli congelada con hielo seco
E. coli = colicina codificada por plásmidos Col en 1946 contenía un plásmido con resistencia a
Bacillus subtilis = subtilisina
tetraciclina y estreptomicina, aun cuando no se habian
usado esos antibióticos
14
06/10/2010

Eliminación de plásmidos
 En la conjugación debe ocurrir un apareamiento
Se puede dar de manera espontánea pero aumenta con: específico entre las célula donadora y receptora.
1. colorantes de acridina
 La célula donadora posee en la superficie un pelo
2. tratamiento con bromuro de etidio sexual
3. Radiación UV

Mecanismo de  Si los genes del plásmido se
conjugación pueden expresa en el receptor,
el mismo se convierte en
donador y puede transferir el
1. El donador marca su
plásmido
DNA
2. Solo una cadena marcada es  Cuando el Factor F esta en el

transferida plásmido no solo es
conjugativo, puede movilizar
3. La célula donadora todo el cromosoma
duplica sus plásmidos
al momento de su
transferencia  Cepas receptoras de factor F =
F-

Tecnología recombinante in vivo Ventajas
 Mejora en el rendimiento del producto

Permite la aislación, manipulación y recombinación de
fragmentos muy pequeños de ADN lo que permite  Mejora en las caraterísticas del crecimiento
realizar verdaderas construcciones génicas.
 Producción de nuevos resultados
15
06/10/2010

Metodología Metodología
1. Enzimas de restricción cortan bases para producir 2. Unir fragmentos

extremos cohesivos obtenidos (ligasas)
3. Seleccionar un vector
como un plásmido
digerida con la misma
enzima de restricción y
con extremos cohesivos
Metodología RECOMBINACIÓN GENETICA
5. Se produce una quimera. Ventaja
Vector de cromosoma 1. Producción de compuestos de manera eficaz,

clonación (plasmido) eucarionte
económica y limpia.
ruptura con ruptura con
endonucleasas endonucleasas
de restricción de restricción
1. Insulina recombinante
2. Vitaminas
Vector 3. Hormonas
Recombinante (infección viral)
transformación
ADN ligasa

2. Tratamientos de desecho 3. Manipulación de vías enzimáticas
Introducción de la glutamato deshidrogenasa a

Transferencia de genes para la utilización de
partir de E. coli en la levadura metalotrófica
fuentes de carbono residuales como la Methylophilus aumentando la eficacia de la
celulosa en Saccharomyces cerevisiae conversión de carbono en 4-7% para la producción de
una proteína a partir del metanol
16
06/10/2010

4. Ingeniería de proteínas 4. Ingeniería de proteínas
Logros en cambios en la actividad, estabilidad al calor, Logros en cambios en la actividad, estabilidad al calor,
pH óptimo entre otras características pH óptimo entre otras características
FIN
17

Genética+ (1)

Cargado por

Información del documento

Título original

Derechos de autor

Formatos disponibles

Compartir este documento

Compartir o incrustar documentos

Opciones para compartir

¿Le pareció útil este documento?

¿Este contenido es inapropiado?

Copyright:

Formatos disponibles

Genética+ (1)

Cargado por

Copyright:

Formatos disponibles

06/10/2010

Ciencia que estudia todo lo referente a

Los genes son factores particulares

Cromosomas son unidades hereditarias

Un gen codifica para una proteína bacteriano”

La replicación del DNA es semi-conservativa

El código genético esta dado por tripletes

El DNA pudo ser secuenciado

Inicio la secuenciación del genoma humano

ESTRUCTURA DEL MATERIAL GENETICO

Un componente importante es el azúcar, la ribosa

La ribosa, la base nitrogenada, más fosfatos = La estructura primaria es en

El apareamiento de bases se lleva cabo a través de la unión de

CARACTERISTICAS DEL DNA BACTERIANO

Gen Contiene la información necesaria para su supervivencia:

Moléculas circulares de DNA con doble cadena que

Generalmente se encuentran en más de una copia y

2. En el cromosoma circular único de

3. Helicasa: Separan las hebras,

4. Proteínas de unión de hebra

DNA polimerasa, tiene 3

b) DNA Polimerasa II:

c) DNA Polimerasa III:

Para la discontinua se van formando bucles, fragmentos de okasaki

Una serie de DNA (ligasa) sella los fragmentos de

La replicación de la bacteria es continua durante todo U

Tiempo de generación de E. coli 20 min

 Formación de RNA a partir del DNA

Se clasifica en tres etapas:

Regulación de la Expresión Génica Regulación de la Expresión Génica

Regulación de la Expresión Génica

ATC GAC GGT AC GAC GGT

ATC GAC GGT GATC GAC GGT

ATC GAC GGT ATC GGC GGT

ATC GAC GGT ATC GTC GGT

Mutaciones silenciosas Mutaciones no silenciosas

Afecta a la 3ª base de un codón de tal forma que el nuevo

AUA =AUC = AUU

Mutaciones que cambian el marco de lectura.

Sucede en las sustituciones en la 1ª y 2ª

Mutaciones con terminación prematura de la

AUG CAC GAG UAG STOP RNAm

se incorpora en lugar de la Timina

RAYOS X REPARACION DE DNA

Puede provocar apertura de los anillos, fragmentación de 1. Eliminación de agentes mutagénicos

2. Reparación de fotodímeros 4. Reparación de apareamientos incorrectos

3. Reparación por escisión

Se elimina el nucleótido o segmento de DNA defectuoso y

RECOMBINACIÓN GENETICA RECOMBINACIÓN GENETICA

 Requiere de secuencias idénticas o casi idénticas de

RECOMBINACIÓN GENETICA RECOMBINACIÓN GENETICA

RECOMBINACIÓN GENETICA RECOMBINACIÓN GENETICA

4. La proteína RecA se une al DNA

RECOMBINACIÓN GENETICA RECOMBINACIÓN GENETICA

Proceso en el cual el DNA libre se incorpora a la célula

RECOMBINACIÓN GENETICA RECOMBINACIÓN GENETICA

RECOMBINACIÓN GENETICA RECOMBINACIÓN GENETICA

RECOMBINACIÓN GENETICA RECOMBINACIÓN GENETICA

El DNA es transferido de una célula a otra mediante la

 El DNA del huésped se degrada en fragmentos del tamaño

 La célula se lisa y los lisados contienen una mezcla de

RECOMBINACIÓN GENETICA RECOMBINACIÓN GENETICA

RECOMBINACIÓN GENETICA RECOMBINACIÓN GENETICA