Crecimiento y cinética microbiano

Cuantificación del crecimiento

 Métodos para medir el crecimiento microbiano
CUANTIFICACIÓN DE LA MASA MICROBIANA

Métodos Balance de materia

Indirectos
Fte de C + Fte de N + Pi + O2 = Masa Celular + CO2 + H2O + Productos
+ Energía

Cuantificación de componentes celulares:

 Proteínas
 ADN
 ARN
Métodos para medir el crecimiento microbiano
Determinación del consumo de nutrientes
Se selecciona un nutriente que no se parezca a ningún
metabolito sintetizado como:
 Fuente de Carbono
 Oxígeno
 Fosfato, Sulfato, Magnesio

Determinación de los Productos Formados

Esto depende del tipo de fermentación o producción de
metabolitos:
 CO2
 Etanol
 Ácido Láctico
 Ácidos Orgánicos
 Colorantes
 Enzimas
Métodos para medir el crecimiento microbiano
Volumen de células
 Los microorganismos del mismo tipo tienen tamaño similar bajo
las mismas condiciones de crecimiento.

 Se centrifuga bajo condiciones Standard de velocidad y tiempo,

utilizando tubos graduados en los que se ve el volumen por las
células.

Viscosidad del cultivo

 No es un método muy utilizado.

Determinación de ATP
 El contenido de ATP es 1 mg. de ATP/gr. de células secas. Se
determina por una reacción catalizada por la enzima luciferasa,
se genera un fotón. Se mide la emisión de luz en presencia de
luciferina y O2, se puede determinar 10-12 gr. de ATP/lt.
 Métodos para medir el crecimiento microbiano
Métodos CUANTIFICACIÓN DEL NÚMERO DE CÉLULAS
Directos Recuento microscópico de microorganismos totales.
 Recuento en placa de microorganismos viables.
 Recuento microscópico de microcolonias.
 Contador electrónico de microorganismos totales.

CUANTIFICACIÓN DE LA MASA CELULAR

Peso seco.
 Turbidimetría.
CINÉTICA DE CRECIMIENTO MICROBIANO

Fases del crecimiento.

X2
X1

Log X I Lag
II Aceleración
III Exponencial
IV Desaceleración
X2 V Estacionaria
X0
VI Declive
I II III IV V VI
t0 t1 t2 t3 t4

Tiempo (hr)
CINÉTICA DE CRECIMIENTO MICROBIANO

Fase Lag, de latencia o de inducción.

Es la expresión de un período de adaptación para iniciar el
crecimiento. Su presencia y su extensión depende de:
Inóculo
 Estado fisiológico
 Fase de crecimiento
 Tamaño
 Tipo de microorganismos

Composición del medio en el que se inocula

 Condiciones fisicoquímicas del medio

Fase Lag aparente: con inóculos pequeños

CINÉTICA DE CRECIMIENTO MICROBIANO

Fase Lag, de latencia o de inducción.

Cinética
(dX/dt) = 0
X = Concentración de células
X = X0
t = Tiempo
X0 = Biomasa inicial

Incidencia Industrial
Costo del tiempo de fermentación
Tamaño del fermentador
Riesgo de contaminación
CINÉTICA DE CRECIMIENTO MICROBIANO

Fase de aceleración

Parte de las células comienzan a dividirse

(dX/dt) = µX

X = Biomasa microbiana
µ = Constante especifica del crecimiento microbiano en hr -1.
T = Tiempo en hrs.
CINÉTICA DE CRECIMIENTO MICROBIANO

Fase exponencial.
 El cultivo esta en estado autocatalítico
 Es un período relativamente corto
 Se cumple que:
N = N 0 * 2n
 Cinética de crecimiento
Se caracteriza por ser una fase de crecimiento constante
(dX/dt) = µX

X = Biomasa microbiana
µ = Constante especifica del crecimiento microbiano en hr-1.
t = Tiempo en hrs. (t = td = tiempo de duplicación)
CINÉTICA DE CRECIMIENTO MICROBIANO

Fase exponencial.
(dX/dt) = µX (1)

(dX/X) = µdt (2)

µ = ln2/td (3)

µ = 0.693/td (4)

td = 0.693/µ (5)
CINÉTICA DE CRECIMIENTO MICROBIANO

Constante especifica de la velocidad de crecimiento

microbiano.

 La constante especifica de la velocidad de crecimiento

microbiano (µ) se utiliza para caracterizar el
comportamiento de una población microbiana.

 Su valor depende de las condiciones ambientales en que

se encuentra el microorganismo.

 Existe una gran dependencia de la fuente de carbono y

energía tanto en calidad como en cantidad.
CINÉTICA DE CRECIMIENTO MICROBIANO

Fase de declinación o retardo

 Representa el fin del período exponencial

 Esta dado por:
 Agotamiento de un sustrato
 Acumulación de un inhibidor
 Otras causas ajenas al crecimiento

Cinética:
(dx/dt) = µ(Xm – X)

Xm = Concentración de biomasa máxima