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Analisis de Liquidos Biolc3b3gicos PDF
Analisis de Liquidos Biolc3b3gicos PDF
BIOLLGICOS EN EL
LABORATORIO
ENCARNACIN ROMERO
NARVEZ
MARTA ROJAS JIMENEZ
M. PAZ CARMONA ROBLES
INTRODUCCION
LQUIDO CEFALORAQUDEO.
El lquido cefalorraqudeo, que normalmente es transparente, acta
como un amortiguador, protegiendo el cerebro y la columna de una lesin. El
examen tambin se utiliza para medir la presin en dicho lquido.
El LCR, es un
que
La puncin lumbar con recoleccin de lquido puede ser tambin una parte
de otros procedimientos, particularmente de una mielografa (radiografa o
tomografa computarizada despus de que se ha introducido el medio de
contraste en el LCR).
Los mtodos alternativos para obtener el LCR rara vez se utilizan, pero
pueden ser necesarios si la persona tiene una deformidad o infeccin en la
espalda.
La puncin cisternal o suboccipital implica colocar una aguja debajo del
hueso occipital (parte posterior del crneo). Esto puede ser peligroso porque
est muy cerca del tronco enceflico. Siempre se realiza con una fluoroscopia.
La puncin ventricular es an menos comn, pero se puede recomendar en
personas con posible hernia cerebral. Este examen se realiza generalmente en
el quirfano. Se perfora un orificio en el crneo y se introduce una aguja
directamente en uno de los ventrculos del cerebro.
El LCR tambin se puede recoger de una sonda que ya est puesta all,
como una derivacin o un drenaje ventricular. Estos tipos de sondas
generalmente se colocan en la unidad de cuidados intensivos.
Habitualmente tambin se puede recoger en tres o cuatro tubos con objeto
de realizar el anlisis biolgico, microbiolgico y celular del mismo. Los tubos
han de marcarse con arreglo a su secuencia de recoleccin y se aconseja que
el primer tubo se dedique al anlisis bioqumico y serolgico. En general no se
precisa anticoagulante, ya que el lquido espinal no forma cogulos, a no ser
que la puncin haya sido traumtica. No se debe extraer ms de 10- 20 ml en
adultos, y de 5 u 8 ml en nios.
Manipulacin y transporte
Los especmenes de LCR deben enviarse al laboratorio tan pronto como
finalice la extraccin, ya que la degeneracin celular puede empezar en menos
de 1 hora, por lo que el recuento debe realizarse de forma inmediata.
Los tubos deben transportarse a temperatura ambiente. Las muestras para
microbiologa no deben refrigerarse nunca antes de ser procesadas, ya que
algunos de los microorganismos que se van a estudiar son sensibles al frio y
ste podra inhibir su crecimiento en el cultivo.
En cuanto al transporte se recomienda su transporte y entrega en mano
Examen macroscpico
Este examen incluye observaciones como la claridad, el color del lquido
antes de centrifugar, el color del sobrenadante y la formacin de cogulo.
Este lquido biolgico es claro y transparente. El aumento del recuento
celular (pleocitosis) causa turbidez, que es apreciable cuando el recuento de
clulas nucleadas est prximo a 200/ul. El color ha de informarse como
incoloro, amarillento, anaranjado, rosado o marrn, que corresponderan a la
bilirrubina la oxihemoglobina y la metahemoglobina respectivamente.
Examen microscpico
La muestra ha de mezclarse bien antes del anlisis. Generalmente se
cuenta tanto las clulas nucleadas como los hemates utilizando una cmara
hemocitomtrica, para el recuento de clulas. Si el recuento de clulas
nucleadas es demasiado elevado se debe proceder a diluir la muestra.
Los constituyentes celulares del LCR normal incluyen linfocitos, monocitos y
ocasionalmente, clulas neuroectodrmicas. Los linfocitos son principalmente
clulas T. Si el
de
Concentracin de glucosa.
Actividad de la adenosina-desaminasa
Investigacin
de
organismos
infecciosos:
las
determinaciones
Valores normales
Los valores normales normalmente fluctan de la siguiente manera:
Resultados anormales
Si el LCR luce turbio, eso podra significar que hay una infeccin o una
acumulacin de glbulos blancos o protena.
Si el LCR luce sanguinolento o rojo, puede ser un signo de sangrado u
obstruccin de la mdula espinal. Si es marrn, naranja o amarillo, puede ser
un signo de aumento de la protena en el LCR o un sangrado previo (hace ms
de 3 das). Ocasionalmente, puede haber sangre en la muestra proveniente de
la puncin raqudea en s, lo cual hace ms difcil la interpretacin de los
resultados del examen.
PRESIN DEL LCR:
PROTENA EN EL LCR:
GLUCOSA EN EL LCR:
LIQUIDO SINOVIAL
El estudio de este lquido tiene gran importancia en la valoracin de la
artritis,
y otras
posibles causas.
El lquido sinovial es un ultrafiltrado del plasma qu ese acumula en las
cavidades articulares al que las clulas sinoviales del
tipo B le agregan
Manipulacin y transporte
Una vez obtenida la muestra, debe transportarse al laboratorio a la mayor
brevedad posible para evitar la degeneracin celular. Si existe demora en el
transporte es necesario conservar la muestra refrigerada a una temperatura
entre 2 y 8 C para reducir el metabolismo celular, e excepcin de aquellas
muestras destinadas al estudio microbiolgico, que deben transportarse a
temperatura ambiente.
Anlisis macroscpico
El anlisis del lquido sinovial debe comenzar en el mismo momento de
la toma de la muestra, ya que su observacin macroscpica puede aportar una
informacin de gran valor, que permite orientar su clasificacin en uno de los
cuatro grupos etiolgicos con inters en el diagnstico: no inflamatorio,
inflamatorio, infeccioso y hemorrgico.
Un lquido sinovial no patolgico ha de ser incoloro y transparente, la
presencia de turbidez se debe asociar a un incremento de su celularidad. Muy
a menudo puede tener un color amarillento plido que suele deberse a la
diapdeis de algunos eritrocitos e incluso puede estar asociada a un pequeo
traumatismo.
Los lquidos que proceden de derrames no inflamatorios suelen contener un
nmero bajo de clulas y su aspecto es transparente. La presencia de turbidez
se asocia a un incremento en el nmero de leucocitos o hemates, que se debe
confirmar
mediante
un
estudio
microscpico.
La
turbidez
suele
ser
Estudio microscpico
Es una parte fundamental del estudio del lquido junto con el anlisis
microbiolgico. Este deber incluir un recuento celular total y diferencial, as
como la investigacin de la presencia de cristales.
-
en el
Recuento diferencial:
Para este recuento debe usarse la tincin de May Grnwald-Giemsa. En
el lquido sinovial se observan los mismos elementos celulares que en la
sangre, aunque en diferentes proporciones y con morfologa variable en
funcin de la intensidad de la respuesta inflamatoria articular.
La eosinofilia
Cristales:
de
esteroides.
Son
frecuentes
generalmente
Colesterol
Aumentado en la artritis reumatoide crnica.
Factor reumatoide
Anticuerpos antinucleares
La beta-2-microglobulina est aumentada en el lquido sinovial de
pacientes con artritis reumatoide
Estudio microbiolgico
La artritis sptica es una reaccin inflamatoria del espacio articular
producida por el crecimiento de un microorganismo.
La tincin de Gram constituye una de las pruebas de mayor inters en el
estudio microbiolgico del lquido sinovial.
Los microorganismos que con mayor frecuencia se aslan en la artritis
infecciosa
son
los
pertenecientes
al
gnero
de
Staphylococcus
Streptococcus.
Streptococcus pyogenes es el microorganismo que con mayor
frecuencia
LIQUIDO PLEURAL
El acumulo o incremento del lquido pleural se denomina derrame pleural.
Cuando ste existe, en cantidad apreciable, en general est indicado su
estudio, en el laboratorio.
En condiciones normales, el espacio pleural contiene de 1 a 10ml de
fluido. Se considera patolgico un volumen de lquido pleural que pueda ser
detectado radiolgicamente.
La obtencin del espcimen para su estudio se realiza por
toracocentesis con aspiracin del lquido mediante una jeringa heparinizada y
separacin inmediata en diferentes tubos para:
- recuento celular
- estudio bioqumico
- microbiolgico
- anatomopatolgico
Exudado y trasudado
Clsicamente los derrames pleurales se clasifican como trasudados o
como exudados.
Los trasudados son consecuencia de un aumento de la presin
microvascular o de la disminucin de la presin onctica de la sangre o de la
combinacin de ambos:
- las protenas son inferiores a la mitad de los valores hallados en suero,
clsicamente menos de 3 g/dl.
- la glucosa no est disminuida
Causas
Si el derrame pleural es un trasudado no hay que investigar ms, pero si
es un exudado, se debe investigar su etiologa.
TRASUDADO:
insuficiencia cardaca
hipoproteinemias (desnutricin, nefrosis)
mixedema.
EXUDADO:
Infecciones (neumonas de diversa etiologa, abscesos supra e infra
diafragmticos, tuberculosis, infecciones micticas, complicaciones infecciosas
del SIDA)
Tumorales (tumores parenquimatosos pulmonares, mesotelioma,
tumores metastsicos, linfomas, tumores ovricos)
-
Enfermedades
dermatomiositis,
polimiositis,
esclerodermia,
vasculitis,
derrames
Digestivas:
(pancreatitis
aguda
pseudoquistes
pancreticos,
Examen microscpico
Concentracin de eritrocitos
Se realiza en cmara hematocitomtrica (Neubauer, Burker o Thoma) o
en contador hematolgico automtico en funcin de la concentracin de
eritrocitos y el lmite de deteccin del instrumento.
Si el lquido es hemorrgico se debe medir su hematocrito. Si ste es
superior al 50% del hematocrito de sangre perifrica es diagnstico de
hemotorax. Un lquido hemorrgico sugiere la presencia de una neoplasia, un
traumatismo o una embolizacin pulmonar.
Recuento de leucocitos
Debe realizarse cuando la concentracin es superior a 0.25 x 106
leucocitos / ml mediante examen microscpico de las extensiones celulares
teidas por los mtodos de May-Grunwald-Giemsa , Wright o Trk.
En lquidos con menos de 2 x 106 leucocitos / ml es til concentrar las
clulas antes de la tincin por medio de centrifugacin a 28-30 g, decantacin
del sobrenadante y posterior resuspensin del botn celular, o por
citocentrifugacin
Predominio de neutrfilos
Es el componente celular de respuesta inflamatoria aguda e indica
inflamacin aguda de la pleura.
Los neutrfilos tienen como factor quimiotctico a la interleukina 8 (IL8)
que se correlaciona con el nmero de neutrfilos por lo que la IL8 est elevada
en los empiemas.
Los neutrfilos predominan en neumonas, pancreatitis, embolismo
pulmonar, absceso subfrnico, tuberculosis en estadios precoces, LES,
Dasbestsico, Dp maligno en fase inicial.
Predominio de eosinfilos
Porcentajes superiores al 10% de eosinfilos pueden ser debidos a la
presencia de aire o sangre en el espacio pleural (otras causas menos
frecuentes son la asbestosis, las reacciones a frmacos, las enfermedades
parasitarias (hidatidosis, amebiasis o ascaridiasis.
Adems se puede observar eosinofilia en el sndrome de Churg Strauss
y en la enfermedad de Hodgkin.
Predominio de linfocitos
Si hay ms del 50 % en LP hay que sospechar tuberculosis o
enfermedad maligna y se debe valorar la realizacin de biopsia pleural para
llegar al diagnstico.
Otras causas son: linfomas, pleuritis reumatoideacrnica y sarcoidosis
La separacin en linfocitos T y B es poco til. Aproximadamente el 70%
son linfocitos T, el 10% son linfocitos B.
Puede ser til su determinacin ante la sospecha de leucemia linftica
crnica o linfoma. Mediante anticuerpos monoclonales se puede hacer la
separacin OKT4 y OKT8 sin claro valor diagnstico.
Anlisis bioqumico
El estudio bioqumico puede ser muy amplio pero en general es
suficiente la valoracin de pH, protenas, glucosa, urea, amilasa, LDH y
colesterol. Cuando se presume un quilotrax es conveniente medir los
triglicridos.
Concentracin de glucosa: es determinante en el diagnstico diferencial
de los derrames pleurales exudativos.
Anlisis inmunolgico
Factor reumatoide: Su indicacin debe responder a la sospecha clnica
de pleuritis secundaria a artritis reumatoidea, entonces debemos obtener ttulos
iguales o mayores al nivel del suero, en rango > 1:320. Ttulos inferiores
pueden corresponder a derrames paraneumnicos o malignos.
Anticuerpos antinucleares: Los ttulos > 1:160 (o una relacin entre
lquido pleural y suero superior a 1), son sugestivos de derrames pleurales
reumatoideos y lpicos, respectivamente.
Marcadores tumorales
Constituyen uno de los parmetros ms estudiados en los ltimos aos,
pero los resultados contradictorios en su aplicacin, han limitado su utilidad en
la prctica clnica, por lo que no han podido desplazar a la citologa y/o la
histologa.
Antgeno carcinoembrionario (CEA), de particular valor en el diagnstico
de los adenocarcinomas, sobre todo de pulmn, mama y tracto gastrointestinal
si el nivel de CEA es > 12 ng/mL.
Otros marcadores como orosomucoide, antgeno hstico polipeptdico,
fosfohexosaisomerasa, AFP, enolasa neuroespecfica, factor de crecimiento
se
pueden
detectar
antgenos
bacterianos
para
LIQUIDO ASCITICO
El lquido asctico, tambin denominado peritoneal, es un fluido que se
acumula en la cavidad peritoneal normalmente debido a la existencia de
cirrosis heptica y con menor frecuencia secundaria a patologas malignas.
La cavidad peritoneal contiene los rganos abdominales y las
membranas serosas que a recubren se denominan peritoneo y son las ms
extensas del organismos. Existen dos membranas: El peritoneo parietal, que
recubre la cavidad abdominal plvica, y el peritoneo visceral, que recubre los
rganos abdominales. Estas dos membranas serosas conforman una capa de
tejido conectivo que e presenta numerosos capilares y vasos linfticos y que
est cubierta por un epitelio con una capa superficial de clulas mesoteliales.
Por lo general, la cavidad peritoneal contiene unos 50 ml de lquido
claro, color pajizo, que facilita la lubricacin de las membranas, Su existencia
depende de un proceso dinmico continuo de formacin y reabsorcin
continuas.
La acumulacin de lquido patolgico se produce cuando hay un
aumento de la produccin o una disminucin de la reabsorcin. Y se produce lo
que es conocido como ascitis, que no es otra cosa que Acumulacin de lquido
libre, producido por ultrafiltracin del plasma, en el interior de la cavidad
peritoneal. La causa ms frecuente es la cirrosis heptica.
El lquido se acumula cuando:
Aumenta la permeabilidad capilar
Aumenta la presin hidrosttica
Disminuye la presin coloidosmtica
Se obstruye el drenaje linftico
en
Exudado y trasudado
EXUDADO: Lquidos inflamatorios (aumento de la permeabilidad capilar)
PT> 25-30 g/l
TRASUDADO: Lquido no inflamatorio que se origina por factores
sistmicos que afectan a la formacin o reabsorcin del lquido ( PH o Pc)
PT< 25-30 g/l
Examen macroscpico
En general un lquido asctico no patolgico es transparente.
Un aspecto turbio o purulento
encima de 50000/mm3
se observa un lquido de
aspecto purulento.
Una elevada concentracin de triglicridos da al lquido un aspecto
opalescente-lechoso.
Examen microscpico
Hemates
Sugiere acontecimiento traumtico, proceso maligno...
Debe conocerse si se deben a parecentesis traumtica
Contaje se realiza en cmara y, si estimamos que es superior al lmite
de deteccin del contador automtico podr ser analizado en el mismo.
Leucocitos
Recuento de leucocitos > 250/mm3 (S=85%, E= 93%) y neutrfilos >
50%: diagnstico de presuncin de peritonitis bacteriana espontnea
Cuando la concentracin de eosinfilos es superior a 100/mm3: ascitis
eosinoflica
Concentracin aumentada de linfocitos (>200 mm3): peritonitis crnica,
p.tuberculosa y carcinomatosis peritoneal.
Neutrfilos
Como los procedimientos microbiolgicos son lentos y presentan
muchos falsos negativos, su cuantificacin se hace esencial en las peritonitis
bacterianas espontneas que complican la cirrosis, caracterizada por no
presentar una fuente primaria de infeccin. Normalmente, en ausencia de
infeccin, los leucocitos no superan los 300/l y predominan los linfocitos,
siendo la proporcin de polimorfonucleares inferior al 25 %. Si se supera este
porcentaje se considera que existe infeccin, aunque hay casos en que aun as
el lquido se mantiene estril. Ms especfica es la cantidad de neutrfilos, que
es superior a los 250/l en los procesos spticos, dato definitivo si se
acompaa de clnica. No obstante, los casos con ms de 250/l pero sin
sntomas (ascitis neutroflica) han de considerarse tambin como peritonitis
bacteriana y se deben tratar como tales.
Clulas mesoteliales
Pueden aumentar sobre todo en procesos extraperitoneales como en la
insuficiencia cardiaca congestiva o el sndrome nefrtico.
Anlisis bioqumico
Gradiente de albmina
SAAG= Calbs - Calblias
Estudio Inicial
Si SCCA 11 g/l Hipertensin portal (90%) Gradiente de albmina
alto. Causa ms frecuente: cirrosis
Si SCCA 11 g/l Descarta Hipertensin portal (90%) Gradiente de
albmina bajo. Causa ms frecuente: carcinoma peritoneal.
SGGA puede estar falsamente elevado:
tumorales
(neoplasias
ginecolgicas,
quiste
ovrico,
Lpidos
Su incremento ocasiona la ascitis quilosa, que es secundaria a
obstruccin linftica de cualquier etiologa, que en la actualidad suele ser un
linfoma. Tienen una alta concentracin en triglicridos y baja en colesterol.
Lactato
Bilirrubina
Es el mejor marcador de la presencia de lquido biliar en la cavidad
peritoneal. Debido a la presencia de bilirrubina conjugada en la bilis puede ser
vlida tanto la medicin de bilirrubina total como directa. Una concentracin
superior a 6 mg/dl, o mayor a la presente en suero, sugiere la presencia de bilis
o bien una perforacin de intestino proximal.
Glucosa
En el lquido asctico de la cirrosis no complicada la concentracin de
glucosa es similar a la del suero. En infecciones bacterianas puede haber
valores disminuidos de la proporcin de glucosa en liquido/suero.
Triglicridos
Se debe realizar cuando encontramos un lquido opalescente o con
aspecto lechoso. Nos ayuda al diagnstico de ascitis quilosa que puede estar
causada por bloqueo linftico secundario a tumores (linfomas) o traumatismos
cuando.
Creatinina
Su medicin se considera un test de sensibilidad y especificidad
elevadas para demostrar la existencia de orina.
Fosfatasa alcalina
Pueden encontrarse valores muy elevados en caso de infarto intestinal y
puede ayudar a diferenciar una PBe de una peritonitis secundaria a una
perforacin intestinal.
Anlisis microbiolgico
Siempre que se realice una paracentesis diagnstica se deben recoger
muestras para microbiologa. El rendimiento aumenta cuando se hace la
inoculacin directamente en frascos de hemocultivo, ya que las bacterias
suelen ser escasas y dejan de ser viables en el tubo al cabo de pocas horas.
En la peritonitis bacteriana espontnea (PBE) del cirrtico la positividad
de los estudios bacteriolgicos no supera el 70%. De ah la necesidad de tratar
las ascitis neutroflicas. Por el contrario, hay casos con bacteriologa positiva
pero sin neutrofilia (bacterioascitis). Slo el 38 % de estos casos evolucionan a
PBE y por lo tanto se puede mantener una actitud expectante.
Si se sospecha peritonitis tuberculosa se deben realizar cultivos en
medios especficos e investigar la presencia de ADN micobacteriano, ya que la
tincin de Ziehl-Neelsen raras veces es positiva.
LIQUIDO PERICARDICO
El pericardio es una membrana consistente
Recogida de la muestra
Recoger tres tubos:
- uno de ellos con anticoagulante para prevenir la coagulacin
espontnea
- otro que se mantendr estril para posibles cultivos.
- Otro para estudio bioqumico.
Anlisis macroscpico
- Color amarillo plido, claro, escaso.
- Si hay turbidez indica presencia de leucocitos.
- Si tiene un aspecto lechoso es caracterstico de derrames quilosos.
- Si tiene un aspecto hemorrgico hay que diferenciar si se trata de una
puncin traumtica o del propio derrame. Si procede de una puncin
traumtica, al seguir aspirando el lquido se aclara.
Anlisis microscpico
La concentracin celular y el examen citolgico del lquido pericardio
desempean un papel importante en la bsqueda del diagnstico etiolgico.
Adems la primera manifestacin de la presencia de un tumor puede ser la
aparicin de un derrame pericardio, y la observacin de clulas tumorales en el
mismo confirma el diagnstico de sospecha.
Concentracin de eritrocitos: su presencia sugiere el sangrado como la
causa
del
derrame.
Su
cuantificacin
puede
realizarse
en
cmara
Anlisis bioqumico
Glucosa: la cantidad de glucosa es igual que la del plasma pero tarda
ms horas en llegar al lquido. La glucosa est disminuida en los lquidos
inflamatorios.
Protenas: los derrames serosos se clasifican segn su contenido
proteico en trasudados cuando las protenas son menores a 20 g / L y
exudados cuando son mayores de 20 g / L.
LDH: la actividad de la enzima LDH en derrames tipo exudado es mayor
de 300 UI/L, con una proporcin entre lquido y suero mayor de 0,6. Suele ser
un marcador de inflamacin.
PH: Los derrames pericrdicos tipo trasudados presentan cifras de pH
fisiolgicas (7,42+- 0,06) frente a los de tipo exudado, cuyo pH es claramente
cido.
Adenosina desaminasa (ADA): es de gran ayuda en el diagnstico de
pericarditis tuberculosa.
Antgeno carcinomaembrionario (CEA): se usa para el diagnstico de
derrames de etiologa neoplsica. Una concentracin superior a 5 ng/ml
presenta una sensibilidad del 75%, con una especificidad del 100%, en el
diagnstico de pericarditis malignas.
TSH, T3, T4L: para descartar hipotiroidismo asociado.
Anlisis microbiolgico
Hemocultivos seriados, para detectar bacteriemias y endocarditis
asociada.
Baciloscopia en esputo (3 muestras), mediante frotis teidos y cultivo.
Serologa de virus, brucella, Salmonella, Toxoplasma y Mycoplasma.
Bacteriologa del lquido: Cultivos (aerobios, anaerobios, micobacterias y
hongos): Lwenstein-Jensen, Middlebroock, Ziehl-Neelsen, etc.
Tincin de Gram: para detectar la presencia de bacterias.
Anlisis inmunolgico
Anticuerpos antinucleares (ANA) y anti-DNA
Ttulo de antiestreptolisinas: sobre todo en nios para descartar fiebre
reumtica.
Factor reumatoide: si sospecha de enfermedad reumatolgica o
autoinmune.
Anlisis citolgico
La citologa exfoliativa permite acrecentar la seguridad diagnstica al
evaluar este tipo de lquidos ya que los hallazgos citolgicos caracterizan
procesos no inflamatorios, inflamatorios neoplsicos.
En pacientes con una neoplasia previamente diagnosticada, la
deteccin de clulas malignas en una efusin, muestra la evolucin
desfavorable del proceso.
Los especmenes diagnosticados como trasudados mostraron escasa
celularidad. Los exudados muestran celularidad marcada con predominio de
leucocitos polimorfonucleares, frecuentes histiocitos espumosos, cantidades
variables de linfocitos y plasmocitos as como de eosinfilos y mastocitos.
Bibliografa:
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Principios
de
urgencias
emergencias
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