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Tecnicas de Esterilizacion Del Agua
Tecnicas de Esterilizacion Del Agua
DESINFECCIN DE AGUA
Jos Roberto Guimares, Jorge Ibez, Marta I. Litter y Ramn Pizarro
1. PROBLEMTICA DE LA CONTAMINACIN
Las aguas utilizadas en los procesos productivos retornan contaminadas a los cursos de
agua; en la mayora de los casos se deteriora su calidad para usos posteriores, inclusive la
irrigacin. Dependiendo del grado de contaminacin, el agua residual puede ser nociva para la
vida, causando por ejemplo, la mortandad de peces. Tambin puede producirse una liberacin
de compuestos voltiles, que provocan mal olor y sabor acentuado, y que podran traer
problemas en una nueva operacin de purificacin y tratamiento del agua [1].
Segn el Banco Nacional de Desarrollo Econmico y Social Brasileo [2], el 65% de
las internaciones hospitalarias de nios menores de 10 aos estn asociadas a la falta de
saneamiento bsico. En los pases en desarrollo, se estima que el 80% de las enfermedades y
ms de un tercio de las muertes estn asociadas a la utilizacin y consumo de aguas
contaminadas [3]. La hepatitis infecciosa, el clera, la disentera y la fiebre tifoidea son
ejemplos de enfermedades de transmisin hdrica, que representan un serio problema de salud
pblica.
Las enfermedades infecciosas son transmitidas primariamente por la contaminacin de
las fuentes de agua con deposiciones de animales, las cuales pueden ser agentes muy activos
para el transporte de enfermedades. El uso de tales aguas para beber o cocinar, el contacto con
la misma durante baos, o la inhalacin de pequeas gotitas (aerosoles) pueden resultar en
infecciones.
La desinfeccin de aguas de abastecimiento se define como el proceso integrante de una
estacin de tratamiento de agua que tiene como objetivo la inactivacin de microorganismos
presentes en el medio, minimizando la probabilidad de transmisin hdrica de enfermedades,
y el manejo del agua tratada [4].
2. TIPOS DE MICROORGANISMOS
Se reconoce que el agua es uno de los principales vehculos transportadores de
microorganismos causante de enfermedades provenientes del aparato digestivo del hombre y
de otros animales. Las coliformes fecales son un grupo grande de microorganismos,
habitantes usuales de los intestinos de los animales superiores. Estos microorganismos son de
fcil identificacin comparados con los microorganismos patgenos, que normalmente se
encuentran en mucho menor nmero y cuya identificacin es laboriosa [5]. La presencia de
coliformes en una muestra no siempre indica que el agua est contaminada con
microorganismos patgenos, sino que, en trminos estadsticos, su concentracin puede y
debe servir como parmetro para alertar sobre la existencia de contaminacin fecal y de
microorganismos patgenos.
Los microorganismos patgenos estn relacionados con enfermedades especficas de
transmisin hdrica. La fiebre tifoidea, las fiebres paratifoideas, la disentera bacteriana y el
clera son causadas por bacterias, la amibiosis o disentera amebiana por protozoarios, la
esquistosomosis por gusanos (helmintos) y larvas, en tanto que ciertos virus originan la
hepatitis infecciosa y la poliomielitis [5].
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Guimares y Litter
3. ESTERILIZACIN Y DESINFECCIN
La esterilizacin de un material implica que se realiz un proceso de eliminacin de
todas las formas de vida en ese medio, es decir que est completamente libre de grmenes
vivos, y no puede hablarse de un material quasi o semi-estril [6-7]. La esterilizacin es
importante en aplicaciones medicinales, bioindustriales y agrcolas. Por su parte, el proceso de
desinfeccin se usa slo para destruir microorganismos patgenos (infecciosos), sin que
necesariamente se hayan destruido todos los microorganismos. Puede haber destruccin de las
formas vegetativas, pero no obligatoriamente de las esporuladas. Por lo tanto, la esterilizacin
es un caso particular de la desinfeccin.
La evaluacin de la eficiencia de distintas tcnicas para la desinfeccin y esterilizacin
de efluentes, es decir, para la inactivacin de microorganismos, demuestra que cada una de
ellas presenta ventajas y desventajas. La esterilizacin se realiza utilizando, principalmente,
agentes fsicos (calor seco o hmedo) y, en algunos casos, membranas de filtracin. Puede
usarse tambin irradiacin UV-C directa, oxidacin electroqumica y fotocatlisis heterognea
con TiO2. El calor y la luz UV, si bien son efectivas, pueden daar tambin a animales y
plantas presentes junto a las bacterias. El mtodo electroqumico es lento. En los ltimos
tiempos, la fotocatlisis heterognea con TiO2 ha sido objeto de varios estudios para evaluar
su eficiencia en la inactivacin de microorganismos y esterilizacin en comparacin con otras
tcnicas.
En contraposicin, en un proceso de desinfeccin normalmente se utilizan sustancias
qumicas, denominadas desinfectantes.
4. MECANISMOS DE DESINFECCIN Y REINFECCIN
Mientras que la mayora de los agentes desinfectantes normalmente utilizados en aguas
inactiva los microorganismos por una interaccin (reaccin) qumica, la inactivacin de los
microorganismos por irradiacin se debe a la absorcin de radiacin ultravioleta (UV) de alta
energa, que causa reacciones fotoqumicas de los componentes fundamentales de las clulas,
perjudicando as su funcionamiento normal. Por ejemplo, se interrumpe el mecanismo de
duplicacin, o se provoca la muerte de la clula [8].
Segn Bolton [9], el mecanismo de desinfeccin por UV depende de la absorcin de la
radiacin por las protenas, y por los cidos nucleicos (RNA y DNA) de un dado
microorganismo. La absorcin de dosis altas de UV por las protenas presentes en las
membranas celulares lleva a la ruptura de esas membranas y, consecuentemente, a la muerte
de la clula. En cambio, la absorcin de dosis ms bajas de UV por el DNA puede interrumpir
la capacidad del microorganismo de reproducirse, impidindole infectar el medio. El DNA es
un cido nucleico que contiene una secuencia de cuatro bases nitrogenadas (adenina, citosina,
guanina y timina), secuencia que constituye el cdigo gentico. Las dos hlices que
constituyen el DNA permanecen unidas por los enlaces de hidrgeno que se establecen entre
bases apareadas de ambas hlices (por ejemplo, adenina con timina y citosina con guanina).
Algunas molculas presentes en el DNA, como las purinas y pirimidinas, absorben
fuertemente la radiacin ultravioleta (con un mximo en 254 nm) y sufren cambios qumicos,
como formacin de dmeros e hidratos. La dimerizacin de la timina ha sido considerada
como la causa principal del efecto mutagnico de la radiacin UV. Si una de dos timinas
adyacentes absorbe un fotn UV, se forma el dmero y se romper la estructura del DNA; se
bloquea as la elongacin de las cintas hijas durante la replicacin del DNA y se inhibe la
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O
CH3
HN
H3C
NH
+
O
N
H
timina
N
H
timina
HN
CH3 CH3
NH
N
H
N
H
dmero de timina
Efecto bactericida
+++
++
++
+
++
+
+++
Esterilizacin
Efecto remanente
0
+
+
++
0
En estudio
+++
En estudio
Tabla I. Efecto bactericida y remanente de algunos de los tratamientos comunes de aguas y aire.
El cloro molecular se dismuta en agua formando cido hipocloroso (HclO, pKa = 7,54)
o anin hipoclorito (ClO-).
Cl2(ac) + H2O = HClO(ac) + Cl- + H+
(1)
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(2)
La dismutacin ocurre en mayor grado en medio alcalino, pero el cloro posee un poder
de desinfeccin mayor en medio cido. El desinfectante tambin puede ser utilizado en forma
de sales. Su uso est muy extendido porque tiene varios aspectos atractivos: logra la
inactivacin efectiva de una gran gama de patgenos comnmente encontrados en las aguas,
su costo es bajo, y tiene un efecto residual fcilmente controlado y monitorizado que protege
al agua de una reinfeccin [8]. Una de las desventajas de la utilizacin del cloro es la posible
formacin de compuestos orgnicos clorados, como triclorometano por reaccin con los
contaminantes orgnicos.
Las cloraminas se forman por reaccin del cloro con amonaco. De las varias especies
formadas en esta reaccin, la monocloroamina (NH2Cl) es la activa para la desinfeccin de
agua potable. En comparacin con otros desinfectantes menos eficientes para la inactivacin
de virus y protozoarios, la mezcla cloro/amonaco provee un efecto residual que la hace til
como desinfectante secundario, para evitar el crecimiento biolgico en los tanques de
almacenamiento y puntos finales de redes. En sistemas donde se utiliza la cloroaminacin, la
presencia de triclorometano es muy baja.
El dixido de cloro tambin es un oxidante eficiente. Se obtiene normalmente por
reaccin del Cl2, HClO HCl con el clorito de sodio. Puede obtenerse tambin por reaccin
de clorato de sodio, NaClO3 con HCl. Debe producirse in situ, ya que el gas es explosivo a
altas presiones, y no puede comprimirse ni transportarse. No produce triclorometano, pero
genera como subproducto ClO2- y ClO3-, iones sospechosos de causar anemia. El ClO2 es
efectivo en la destruccin de patgenos como Giardia y Cryptosporidiun [16].
El ozono, al igual que el dixido de cloro, es inestable y no puede ser transportado ni
almacenado y, por lo tanto, debe ser producido in situ. Las especies oxidantes son el propio
O3 o los radicales hidroxilo (ver Capitulo 1). En comparacin con Cl2, ClO2 y las cloraminas,
es muy eficiente en bajas concentraciones, y ms efectivo en la inactivacin de patgenos,
incluyendo bacterias, protozoarios y virus. Tambin slo debe ser utilizado como
desinfectante primario, pues no tiene efecto residual en agua. El O3 no forma subproductos de
desinfeccin (SPD) organoclorados, pero pueden aparecer compuestos bromados si el agua
contuviera bromuros, adems de otros productos orgnicos tales como aldehdos o cetonas [8,
16].
El permanganato (MnO4-) se obtiene a partir del dixido de manganeso (MnO2). Se trata
de un compuesto bastante oxidante, y es utilizado principalmente en el control de olor y sabor,
remocin de color y control de crecimiento de microorganismos en estaciones de tratamiento
de aguas. Tambin remueve hierro y manganeso, y puede ser til en la remocin y en el
control de precursores de THM y otros subproductos antes del uso de otros desinfectantes. El
permanganato de potasio inhibe el crecimiento de bacterias (por ejemplo, coliformes, Vibrio
cholerae, Salm. Typhi y Bact. Flexner) y virus (polivirus, bacterifagos) [8].
La radiacin UV es una alternativa de creciente aplicacin en la desinfeccin de aguas
de abastecimiento y residuales. Se ha comprobado fehacientemente que la radiacin UV es
eficiente en la inactivacin de bacterias, virus (colifago, virus de la hepatitis A, polivirus y
rotavirus) y protozoarios (por ejemplo, cistos de Giardia lambia y Giardia muris,
Acanthamoeba rhysodes y Cryptosporidiun). No se forman subproductos durante la
desinfeccin, y para mantener un efecto residual es habitualmente necesaria la adicin de
otros agentes qumicos [8].
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Microorganismo
Saccharomyces cerevisie
Escherichia coli
Lactobacillus cidophilus
Chorella vulgaris
Tabla II. Eficiencia del poder de inactivacin del TiO2/PtUV para varios microorganismos.
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Tambin se realizaron algunos ensayos con aguas superficiales, con color, algas y
carbono orgnico total en el rango de 20 mg L-1. Se alcanz un factor de reduccin de
coliformes totales de 1,7102 en 6 minutos de exposicin cuando la concentracin inicial era
1 UFC/100mL, y en 18 minutos para concentraciones ms bajas (<1 UFC/100mL). La
reduccin de bacterias heterotrficas fue menor. La concentracin inicial baj por paso de 3,4
x 103 a 2,3 x 102 UFC/100mL. Para aumentar el poder de desinfeccin en ese medio, se
aument la concentracin de radicales hidroxilo agregando perxido de hidrogeno (H2O2) en
cantidades adecuadas para mantener una concentracin de 6,5 mmol L-1 durante el ensayo.
Despus de 9 minutos de exposicin, los coliformes y bacterias heterotrficas se redujeron
tres rdenes de magnitud; despus de 28 minutos se observ tambin una reduccin del color
del agua.
En otro experimento, se irradiaron 25 galones (unos 100 L) de una suspensin de
Escherichia coli HB101, que contena alrededor de 106 clulas/mL, con un conjunto de una
lmpara fluorescente (F40/CW, Sylvania) y otra de haluro de tungsteno (DEK/DFW,
Sylvania). en un reactor de vidrio termostatizado, en presencia de TiO2 (Degussa P-25) 1 g/L.
Menos del 5% de la energa radiante relativa corresponda la luz de longitud de onda corta, es
decir, UV. Despus de 30 minutos de irradiacin (~ 1660 Y s-1 m-2) se produjo una
inactivacin total de las clulas, o sea, la desinfeccin de la muestra de agua [28]. Al
disminuir la concentracin de TiO2 a 0,1 g L-1, se duplic el tiempo requerido para alcanzar la
inactivacin prcticamente total. Tambin se observaron efectos sinrgicos entre el calor, la
luz y la propia fotocatlisis heterognea en la inactivacin de las clulas.
Zhang y colaboradores [29] realizaron experimentos para evaluar el potencial de
inactivacin fotocataltica de bacterias (Escherichia coli #W0400) en agua utilizando luz
solar. Observaron una inactivacin de las clulas en el orden de 99% despus de 23 minutos
de exposicin a la luz solar, con una concentracin de 0,2 g L-1 en TiO2. Como no se utiliz
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Figura 3. Eficiencia en la inactivacin de colifago en dos condiciones. (o) TiO2 y () TiO2 + Fe.SO4; No(1103
y 1102 PFU/mL, respectivamente) y N son las concentraciones inicial e instantnea del fago, respectivamente.
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100%, para el mismo tiempo de irradiacin. El fenmeno fue atribuido a la ruptura de las
cadenas de DNA presentes en las clulas por las especies fotogeneradas, tales como HO,
HO2 y H2O2. Cuando se agreg catalasa en la suspensin, disminuy el efecto de
inactivacin, pues esa enzima degrada el agua oxigenada [20].
Figura 4. Eficiencia del proceso de fotocatlisis en diferentes condiciones: () TiO2 a oscuras; () luz UV; y
() TiO2 y luz UV.
En otro trabajo [12], se coloc una suspensin bacteriana de Escherichia coli (2105
clulas/mL) sobre un vidrio plano cubierto con una pelcula de aproximadamente 0,4 m de
TiO2, y se irradi con una lmpara de luz negra de 15 W e intensidad 1,0 mW cm-2 a 360 nm.
Despus de 1 hora de ensayo se consider que se haba producido la completa esterilizacin
del medio. Cuando las clulas fueron irradiadas nicamente con luz ultravioleta slo se
alcanz una inactivacin de 50% despus de 4 horas, mientras que no hubo inhibicin en
ausencia de luz UV. En una segunda etapa, se aislaron las bacterias (1,5104 clulas/mL) de
la pelcula de TiO2 colocando sobre sta una membrana hidroflica de PTFE (50 m de
espesor y poros de 0,4 m), la cual retena las bacterias, pasando prcticamente slo agua. El
sistema fue irradiado desde la cara trasera de la pelcula de TiO2. Aunque la intensidad
luminosa en la superficie de la capa de TiO2 fue menor, 0,4 mW cm-2(ver Captulo 10), y a
pesar de la membrana, se observ un efecto de inactivacin de las clulas bacterianas
semejante al caso anterior y se constat una concentracin de 210-7 mol L-1 de H2O2 en el
agua en contacto con la pelcula de TiO2 despus de 2 horas de irradiacin [12].
Con el objetivo de demostrar el potencial del proceso de fotocatlisis heterognea,
Dillert y colaboradores [31] realizaron un estudio de desinfeccin en presencia de sustancias
txicas, en un agua residual municipal pretratada. Tambin se hicieron ensayos con cultivo
puro de Escherichia coli. Se irradi TiO2 (Degussa P-25, 5 g L-1), con dos tipos de lmparas,
ambas de mercurio de alta presin. Las concentraciones iniciales de microorganismos estaban
en el rango de 1-20 104 y entre 300-1000 104 UFC mL-1, en las aguas residuales y en el
cultivo puro, respectivamente. En algunos casos, se produjo una reduccin microbiana de 5
rdenes de magnitud en la primera hora de irradiacin, llegando a 7 en cinco horas de ensayo.
Melin y colaboradores [32], realizaron trabajos de desinfeccin con desecho sanitario
urbano, utilizando fotocatlisis heterognea y slo luz UV (fuente artificial y natural). Los
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organismos monitorizados fueron las bacterias del grupo de las coliformes totales y Faecal
streptococci. La irradiacin con una lmpara UV de 800 W de potencia por un perodo de 3
horas en presencia de 0,25 g L-1 de TiO2 (Degussa P-25) produjo una variacin de 205.000 a
900 UFC/100 mL-1, y en 1 hora hubo una reduccin de dos rdenes de magnitud. Cuando se
us luz solar se encontr una eficiencia un poco menor, debido la menor fraccin de UV en
esa fuente. No se detectaron diferencias significativas en los sistemas irradiados con y sin
fotocatalizador. Los resultados de inactivacin de Faecal streptococci fueron similares a los
encontrados en los ensayos con coliformes totales. Con luz artificial, con o sin catalizador, la
mayor cada de concentracin celular ocurra en los primeros 30-60 minutos. Con luz solar, la
desinfeccin es muy lenta.
Se encuentran en marcha estudios de desactivacin de distintos microorganismos,
Escherichia coli K12K, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella typhimurium y Enterobacter
cloacae (existe poca o ninguna informacin previa sobre estas ltimas tres), que han indicado
buena eficiencia de la tcnica. Los resultados se muestran en la Figura 5 [33].
Efecto de UV-A + visible en presencia de TiO2sin
y con pre-irradiacin en Escherichia coli K12K
10
10
-1
Fraccin de supervivencia
Fraccin de supervivencia
10
-2
10
-3
10
-4
10
contsin
TiO2sin
contpre
TiO2pre
-5
10
-6
10
10
20
30
10
-1
10
-2
10
-3
10
-4
contsin
TiO2sin
contpre
TiO2pre
0
40
10
20
30
40
-1
Fraccin de supervivencia
Fraccin de supervivencia
10
-2
10
-3
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contsin
TiO2sin
contpre
TiO2pre
-4
10
10
-1
10
-2
10
-3
10
-4
contsin
TiO2sin
contpre
TiO2pre
-5
10
10
20
30
40
10
20
30
40
Figura 5. Desinfeccin de aguas contaminadas con diversos microorganismos. Las curvas superiores muestran
resultados de experimentos de control sin fotocatalizador. La pre-irradiacin del catalizador no produce
mejoras en la eficiencia de la desinfeccin.
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8. CONCLUSIONES
Los trabajos descritos en este captulo muestran que las distintas tcnicas de
desinfeccin y esterilizacin de efluentes, tienen ventajas y desventajas. Los desinfectantes
ms frecuentemente usados, como O3, Cl2, ClO2 y cloraminas pueden conducir a la formacin
de compuestos residuales nocivos, no tienen efecto residual, etc. La fotocatlisis heterognea
muestra una serie de ventajas, ya que evita la formacin de compuestos halogenados, que
pueden ser peligrosos (carcinognicos o mutagnicos) o malolientes; por otra parte, no es una
tcnica cara, parece actuar sobre todos los tipos de bacterias, incluyendo Gram (+) y (-), y
sobre otros microorganismos. El fotocatalizador es abundante y barato y su recuperacin es
fcil o puede ser inmovilizado sobre soportes adecuados. Es particularmente conveniente para
instalaciones rurales y remotas (campamentos, instalaciones militares), y para la desinfeccin
de aguas municipales. No requiere suministro de alto voltaje como el ozono y puede ser usado
aun con luz solar. Sin embargo, puede observarse que la materia orgnica interfiere con el
mtodo. Para evitar tiempos de irradiacin excesivamente largos, es entonces aconsejable usar
la desinfeccin fotocataltica como paso final de un tratamiento de ms de una etapa.
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