PRCTICA N5

MICROSCOPIA DE LAS CLULAS

I.

OBJETIVOS

1. Identificar y caracterizar las partes del microscopio ptico.

2. Observar y caracterizar la clula mediante e1 microscopio.

II.

MARCO TEORICO

El estudio de las ciencias biolgicas siempre ha estado acompaado del uso del
microscopio; su uso contribuyo en la formulacin de la teora celular. Hooke estudi
las clulas de la superficie de una hoja, y las paredes celulares del corcho,
consideradas por primera vez como unidad del organismo. El microscopio ptico
estn formados por tres sistemas fundamentales: 1) el sistema mecnico, que es e1
sostn de los sistemas complementarios y que permite e1 ajuste del punto focal y la
muestra; 2) el sistema ptico, que permite magnificar a diferentes grados la
muestra observada y 3) el sistema de iluminacin, que permite iluminar y
concentrar los haces luminosos en e1 punto de inters, as como regular la
intensidad de la iluminacin.
Hay dos tipos distintos de clulas: las procariotas y las eucariotas. Las clulas
procariotas carecen de ncleos limitados por membrana y de la mayora de las
organelas que se encuentran en las clulas eucarsticas. Las clulas eucariotas
poseen una membrana citop1asm:itica, ncleo envuelto por una membrana y
organelas como mitocondrias, aparato de Golgi, retculo endoplasmtico liso y
rugoso, ribosomas, lisosomas, centriolos, cloroplastos y vacuolas.

III.

MATERIALES Y METODOS

MATERIALES
Microscopio ptico

Aceite de inmersin

 Pipetas Pasteur
Pizeta con etanol
agua destilada
Algodn
Portaobjetos
Cubreobjetos
Hisopillos

Muestra
de
agua
estancada
Azul de Metileno
Lugol
Cristal de Violeta
Alcohol acetona
Safranina


1.

2.

ACTIVIDADES

Identifique las partes del microscopio y verifique su funcionamiento.

Observaciones de muestras en el microscopio ptico

Antes de iniciar las observaciones revisar que el cable de conexin a la energa elctrica
se encuentre en buen estado; comprobar que el microscopio se encuentre limpio y se
encuentren fijas sus partes.
Conectar el cable a la alimentacin elctrica. Colocar la muestra en la platina.
Poner la muestra a la distancia focal apropiada para el alumno; se logra observando por
los oculares y manipulando los tomillos micromtricos y cuando se tiene localizada la
imagen se afina el enfoque con e1 tornillo micromtrico.
Se debe realizar el enfoque personal de oculares: una vez enfocada la muestra se realiza
el enfoque de cada uno de los oculares, para ello se cierra e1 ojo izquierdo y se ajusta e1
enfoque del ojo derecho con el micromtrico, despus se procede a realizar lo mismo con
el ojo derecho.

 Observar las distintas partes de la preparacin moviendo la platina, con ayuda del
carro.
Observar la muestra con objetivos 4X, 10X, 40X y 100X

IV.

EXPERIMENTACIN

OBSERVACIN DE CELULAS ANIMALES

A. OBSERVACIN DE POTOZOARIOS

1. MATERIALES Y MTODOS

Microscopio
Portaobjetos
Cubreobjetos
Vidrio de reloj
Pinza
Escalpelo
Azul de metileno
Agua destilada
Cebolla
Lugol

i. En un portaobjetos limpio y seco coloca una gota de agua estancada, cubre

con el cubreobjetos y observa al microscopio, retira el exceso de agua con el
ii.

papel filtro.
Observa primero con el objetivo seco dbil (10x) y por ltimo con el seco
fuerte (40x)

iii.

Dibuja y esquematiza lo observado.

2. RESULTADOS

VISTAS AL 40X
VISTAS
AL 100X

VISTAS AL 40X

En las muestras de agua estancada observadas, nicamente se observaron

Euglenas y flagelados. Los protozoos son los animales ms sencillos ya que estn
formados por una sola clula y mediante esa nica clula realizan todas las
funciones vitales.
Mediante esta prctica de laboratorio, se observaron FLAGELADOS, grupo de
protozoos que con muchas especies viven como parsitos de plantas y de
animales. Estos estn provistos de uno o varios flagelos que les permiten
moverse.
Tambin se observaron euglenas. Las euglenas pertenecen al reino Protista,
junto con otros organismos unicelulares. Muestra caractersticas tanto del mundo
vegetal como del animal. La euglena, tiene forma ovalada y vive en las aguas
dulces. Las Euglenas presentan cloroplastos. Los cloroplastos contienen un

pigmento verde que la euglena utiliza durante la fotosntesis. Los cloroplastos

ayudan a este microorganismo a generar su propia fuente de nutricin y le dan su
color verde. La euglena usa el flagelo como medio de locomocin, pero no lo usa
para impulsarse en el agua.

Tambin se observaron
microalgas fueron los primeros organismos con
capacidad de fotosntesis y uno de los principales agentes en la creacin de la
actual atmsfera terrestre. Estos organismos son claves en el equilibrio
planetario, ya que la dinmica del dixido de carbono en la Tierra est, en gran
medida, determinada por ellos.

3. CONCLUSIONES

Los protozoos son microorganismos unicelulares.

Los protozoarios son ms grandes que los procariotas, y son mviles.
Los flagelados son una clase de protozoos del subfilo de los plasmdromos,
formados por clulas aisladas o en colonias, y, la caracterstica de este
grupo, estn provistos de uno a ocho flagelos, que les sirven para la
locomocin, la alimentacin y, a veces, tambin de pseudpodos.
Euglena es un gnero de algas unicelulares perteneciente al grupo de los
Euglnidos, con numerosos cloroplastos.
Las micro algas son un conjunto heterogneo de organismos microscpicos
fotosintticos.
Son muy importantes en la evolucin de la vida en el planeta.
Son los principales productores primarios en muchos sistemas acuticos
siendo parte fundamental de su trama trfica.
Las micro algas habitan el agua (acuticas), las zonas hmedas
(aerofticas), el suelo, y el hielo o la nieve.

OBSERVACIN DE CLULAS VEGETALES

A. OBSERVACIN DE LA EPIDERMIS DE LA CEBOLLA (LUGOL)

1. MATERIALES Y MTODOS

i. Con la ayuda del bistur corta un fragmento de cebolla y desprende la

epidermis, que es la tela delgada y transparente de la superficie.

ii.
iii.
iv.

Coloca una gota de lugol sobre el portaobjetos y sobre ella extiende la

epidermis.
Cubre la muestra y obsrvala al microscopio con el objeto de 10x o 40x.
Dibuje y esquematiza lo observado.

2. RESULTADOS Y DISCUSIN

VISTAS AL 10X
VISTAS AL 40X

VISTAS AL 100X

Observamos las clulas vegetales y su forma hexadrica (en celdas) y alargadas.

En 4x logramos diferenciar la membrana y el citoplasma; en 10x vimos en las
celdas que tenan ms proporcin de lugol uno diminutos puntos (ncleo). En 40x
y 100x aunque divisbamos ms grandes las clulas no pudimos ver el ncleo en
su mayor proporcin.

3. CONCLUSIONES

Al utilizar el colorante para la visualizacin de muestras a travs del microscopio

ptico, podemos identificar estructuras propias de las clulas que sin teir no se
veran.
El empleo de colorantes en la observacin de clulas representa una gran ventaja
ya que permite identificar con mayor facilidad las estructuras bsicas de la
misma Tambin hemos podido observar la estructura clsica de una clula
vegetal.

 Las clulas de la epidermis de la cebolla se observan celdas alargadas

organizadas en forma lineal.
Con el correcto uso del microscopio lo gramos tener una mejor imagen de las
clulas vegetales.

B. OBSERVACIN DE LA EPIDERMIS DE LA CEBOLLA (AZUL DE

METILENO)

1. MATERIALES Y MTODOS

Microscopio
Portaobjetos
Cubreobjetos
Vidrio de reloj
Pinza
Escalpelo
Azul de metileno
Agua destilada
Cebolla
Azul de metileno

i. Separamos una de las capas internas de la cebolla, desprendiendo con la

pinza la membrana adherida por la capa inferior cncava de una de sus
capas, llevndola al vidrio de reloj para humedecerla con un poco de agua
ii.

destilada y evitando que se enrosque.

Aadir un poco de azul de metileno sobre el vidrio de reloj y sobre ella

iii.

extiende la muestra de cebolla previamente escurrida del agua destilada.

Se deja 2 min para que la muestra se tia y despus se enjuaga con un

iv.

poco de agua destilada, para retirar el exceso de tincin.

Dibuje y esquematiza lo observado.

2. RESULTADOS Y DISCUSIN

VISTAS AL 10X
Observamos las clulas vegetales y su forma hexadrica (en celdas) y alargadas.
VISTAS AL 40X
VISTAS AL 100X
En 4x logramos diferenciar la membrana y el citoplasma; en 10x vimos en las
celdas que tenan ms proporcin de azul de metileno uno diminutos puntos
(ncleo). En 40x y 100x aunque divisbamos ms grandes las clulas no pudimos
ver el ncleo en su mayor proporcin.
El empleo de colorantes en la observacin de clulas representa una gran ventaja
ya que permite identificar con mayor facilidad las estructuras bsicas de la
misma, siempre y cuando se empleen concentraciones bajas, de lo contrario se
convierte en problema porque si el colorante es muy concentrado no deja
diferenciar nada en la clula. De acuerdo con las observaciones realizadas a la
clula vegetal de la epidermis de la cebolla, solo se pudo observar la pared celular
delimitando al citoplasma que a su vez rodea al ncleo No se observ aparato de
golgi, retculo endoplasma tico, vacuolas, ribosomas ni mitocondrias entre otros.

3. CONCLUSIONES

Comenzamos a observar la muestra con el objetivo de menor aumento.

Observamos que est formada por clulas alargadas poligonales, con un ncleo
pequeo en un lateral. Se distingue bien lo que es la membrana vegetal y el
citoplasma.
La membrana celular es de celulosa. Los ncleos son oscuros y visibles y en el
interior de los mismos se puede percibir granulaciones, son los nuclolos. El
citoplasma tiene aspecto claro y suele contener vacuolas.

 Al utilizar el colorante para la visualizacin de muestras a travs del microscopio

ptico, podemos identificar estructuras propias de las clulas que sin teir no se
veran.
Tambin hemos podido observar la estructura clsica de una clula vegetal.

CONCLUSIONES EN GENERAL

De acuerdo a lo que has observado menciona que organelos pudiste observar en

la clula animal y vegetal?

CLULA ANIMAL

CLULA VEGETAL

Membrana celular

Pared celular

ncleo

ncleo

Citoplasma

citoplasma

Qu organelos no pudieron ser observados con el microscopio de luz?

CLULA ANIMAL

CLULA VEGETAL

Retculo endoplasmatico

Retculo endoplasmatico

Membrana plasmtica

Membrana plasmtica

Aparato de Golgi

Aparato de Golgi

Mitocondrias

Mitocondrias

Ribosomas

Ribosomas

Vesculas

----------- NO tiene

membranosas

Centriolo
--------- NO tiene
---------- --------- NO tiene
----------

---------- ----------- NO tiene

---------- Cloroplastos
Vacuolas

 Qu criterios utilizaras para clasificar las clulas vegetales y animales?

La diferencia de lmite celular que para la clula animal es la membrana celular
y para la vegetal es la pared celular.La presencia organelos en la vegetal:
cloroplastos y vacuolas no presentes en la animal; a su vez la presencia en la
animal: centriolos y vesculas membranosas no presentes en la vegetal.

Despus de la observacin de las dos clases de clulas (Animal y Vegetal), se

puede concluir que tiene diferente forma, pero en si realizan una misma funcin
en los organismos.
Un ser vivo es un conjunto de tejidos, a la vez estos estn formados por un
conjunto de rganos y estos por un conjunto de clulas. De lo anterior se infiere
que la unidad ms pequea de un ser vivo es la clula.
La clula acta como un sistema abierto en el que hay un constante intercambio
de materia y energa con el entorno. La clula es capaz de admitir selectivamente
esos materiales organizarlos y aprovecharlos en su interior y, despus, eliminar
residuos resultantes de su metabolismo.
A partir de esta prctica ya estamos en condiciones tanto tericas como
experimentales para determinar la caracterstica y la diferencia entre la clula
animal y vegetal.
Las clulas tanto vegetal como animal para poder ser observadas mediante el
microscopio deben ser previamente preparadas empleando reactivos que tian las
clulas en la muestra.
Cabe sealar que con un microscopio de mayor definicin como es el microscopio
electrnico se podran haber visto todos los elementos celulares.

OBSERVACIN DE CLULAS BACTERIANAS

A. COLORACION DE GRAM

1. MATERIALES Y MTODOS

i.
ii.

Tomamos una muestra del epitelio bucal.

Al portaobjetos le agregamos una gota de agua, extendemos la muestra.

iii.

Fijamos con calor (mechero), pasar 3 veces la lmina sobre el mechero.

iv.

Agregar cristal violeta en cantidad suficiente y dejar actuar 1 minuto.

v.
vi.
vii.
viii.
ix.
x.
xi.
xii.
xiii.

Lavar con el mnimo de agua para eliminar el exceso de colorante.

Agregar lugol en cantidad suficiente y dejar actuar 1 minuto.
Lavar con el mnimo de agua para eliminar el exceso de mordente.
Decolorar con alcohol 95% o acetona hasta que el efluente salga incoloro.
Lavar con agua para eliminar el exceso de disolvente.
Agregar safranina hasta cubrir el frotis y dejar actuar 1 minuto.
Lavar con agua.
Dejar secar la preparacin a temperatura ambiente.
Observar al microscopio con los objetos 10x,40x y 100x

xiv.

Esquematizar lo observado y describir los microorganismos e indicar si son

Gram positivas o Gram negativas.

2. RESULTADOS Y DISCUSIN
FOTOS DE WHATSAPP

U
ES
T
R
A

En

R
ES
U
LT
A
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O
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esta

En

esta

muestra

muestra

se puede

observamos

observar

una

clula

que

de

tejido

dio

positivo

epitelial

gran

(eucariotas,

negativa

las

s,

epiteliales

en

clulas

Aqu
observa
mos ms
grampos
itivas es
decir
ms
bacteria
s

que

menor

de boca se

proporci

tieron

n se vio

rosado

clulas

gran

(gramnegati

positivas

vos)

procariot

bacterias

las

(procariotas)

Las
gramneg
ativos
tienen
una capa
de
petidogl
ucano
mucho
ms
delgada
es

de

por

se

tieron

de color azul
o

morado

(Grampositi
vas).se
observa ms
gran
positivas
que

lo

quiere

decir que la
capa

de

son

as
porque
la

capa

de
peptidigl
ucano
como es
gruesa
el
colorant
e

que

utilizam
os

se

ello que

peptidigluca

no

no es gruesa

retiene

esta rodea a

el violeta

la clula y el

cristal y

colorante se

por esto

queda

las

atrapado.

clulas

queda
atrapado
,
podemos
ver en la
imagen
que

se

encuentr

se tien

con

en

forma de

safranin
a y las

crculos

observa

unidos.

mos
rojas

rosadas

3. CONCLUSIONES

En la segunda muestra observamos claramente una clula epitelial (clulas eucariotas)

que se tieron gramnegativas

y bacterias (clulas procariotas) que se tieron

grampisitivas.Entonces esto se hizo para determinar clulas bacterianas y con la tincin de

Grm identificamos si son grampositivas o gramnegativas.

Tanto las bacterias Gram positivas como las Bacterias Gram negativas se presentan
morfolgicamente como cocos o bacilos, sin embargo al ejecutar tincin de Gram en estas
para identificar su grupo taxonmico, las Gram positivas se tien de color violeta mientras
que las Gram negativas se tien de color rosado.

Mediante la tincin de Gram se identifican bacterias Gram positivas y Gram negativas

gracias al color que tornan despus de ser teidas; en el caso de las bacterias Gram
positivas se tien de violeta, esto se debe a que gracias a que contienen una pared gruesa de
peptidoglicano y gran cantidad de cidos teicicos que permiten fijar y retener rpidamente
el colorante inicial el cual es, el cristal violeta de Hucker, y adems son resistentes a la

decoloracin. Lo contrario ocurre con el caso de las Gram negativas, las cuales poseen una
pared delgada con menos cantidad de peptidoglicano y lpidos, la cual requiere de un
colorante de contratincion como la safranina o la fucsina en este caso, ya que el colorante
inicial es fcilmente retirado en la decoloracin con alcohol, debido a que por su delgada
pared celular no lo retienen.

La tincin de Gram permite conocer la morfologa celular, el tamao, la forma y su

clasificacin taxonmica (Gram positivos o Gram negativos) de acuerdo al color que tornan
las bacterias despus de la tincin, sin embargo no permite conocer la especie o gnero de la
bacteria al cual pertenece.

DIFERENCIAS MOLECULARES ENTRE UNA BACTERIA GRAN

POSITIVA Y OTRA GRAN NEGATIVA.

BACTERIAS GRAM POSITIVAS

BACTERIAS GRAM
NEGATIVAS

Poseen una pared celular interna y una

pared de peptidoglucano.
*Peptidoglucano: es un exoesqueleto que
da consistencia y forma esencial para
replicacin y supervivencia de la
bacteria.

No tiene membrana externa

Poseen una pared celular ms

compleja:
-pared celular interna
-pared de peptidoglucano
- bicapa lipdica externa
Membrana externa: forma un saco
rgido alrededor de la bacteria,
mantiene estructura y es barrera
impermeable a macromolculas,
ofrece proteccin en condiciones
adversas

Espacio periplasmtico: espacio entre

la superficie externa de la membrana
citoplasmtica y la interna de la
membrana externa.

No tiene espacio periplasmtico

La red de murena est muy

desarrollada y llega a tener hasta 40
capas

La red de murena presenta una sola

capa

La penicilina mata a las gram positivas,

ya que bloquea la formacin de enlaces
peptdicos entre las diferentes cadenas
del peptidoglucano

La penicilina no mata a las Gram

negativas, a causa de la capa de
lipopolisacridos situada en la parte
externa de la pared celular.

Contiene LPS: estimulador de

respuestas inmunes: activa clulas B,
liberacin de IL, FNT, IL 6 por
macrfagos.

No contiene LPS

En la tincin de Gram, retienen la

tincin azul

Quedan decoloradas.

Conservan el complejo yodocolorante

Pierden el complejo yodocolorante

Pueden ser anaerobios o aerobios

Poseen protenas con concentraciones

elevadas.

Son esporulantes y no esporulantes,

como Streptococcus, Cisteria, Franki
Poseen otros componentes: cidos
teicoicos y lipoteicoicos, y polisacridos
complejos.

V.

CUESTIONARIO

1. DESCRIBIR LOS DIFERENTES TIPOS DE MICROSCOPIO EXISTENTE

2. HACER UN CUADRO CON LAS DIFERENCIA ENTRE LAS CELULAS

PROCARIOTAS Y EUCARIOTAS

CLULA ANIMAL

CLULA VEGETAL

Membrana celular

Pared celular

ncleo

ncleo

Citoplasma

citoplasma

Retculo endoplasmatico

Retculo endoplasmatico

Membrana plasmtica

Membrana plasmtica

Aparato de Golgi

Aparato de Golgi

Mitocondrias

Mitocondrias

Ribosomas

Ribosomas

Vesculas membranosas

----------- NO tiene -----------

Centriolo

----------- NO tiene -----------

--------- NO tiene -----------

Cloroplastos

--------- NO tiene -----------

Vacuolas

3. DESCRIBIR EL FUNDAMENTO DE LA TINCIN DIFERENCIAL DE GRAM


La tincin de Gram permite conocer la morfologa celular, el tamao, la forma y su
clasificacin taxonmica (Gram positivos o Gram negativos) de acuerdo al color que tornan
las bacterias despus de la tincin, sin embargo no permite conocer la especie o gnero de la
bacteria al cual pertenece. Las Gram positivas se tien de color violeta mientras que las
Gram negativas se tien de color rosado.

4. NOMBRAR Y DESCRIBIR EJEMPLOS DE MICRORGANISMOS DE LA

CALIDAD AMBIENTAL

Los principales grupos de plantas y animales empleados como indicadores de la calidad

ambiental incluyen algas, fitoplancton, poliquetos, moluscos, crustceos, insectos y peces
(De la Lanza y col., 2000; Segnini, 2003).
En ambientes acuticos, la regulacin y rectificacin de cauces, la contaminacin por
materia orgnica, la eutrofizacin y las actividades mineras, entre otros, producen cambios
en la estructura y funcionamiento de las comunidades biolgicas que albergan los ros
(Alonso y Camargo, 2005). Los ros transportan a los ambientes marinos microorganismos
patgenos y no patgenos; los microorganismos patgenos pueden llegar hasta la poblacin
humana y con ello, constituirse en indicadores del deterioro de la calidad del agua,
definiendo zonas de mayor aporte de materia orgnica, de dispersin de contaminantes y
zonas de riesgo de contaminacin; una constante en estos estudios de calidad ambiental la
representa la evaluacin de la influencia de factores como temperatura del agua, pH,
oxgeno disuelto y salinidad, los cuales inciden sobre la permanencia de los organismos en
biotopos acuticos (Gmez y col., 2008).
En ambientes terrestres, uno de los problemas crticos para implementar polticas y
programas sobre desarrollo sustentable es la disponibilidad de indicadores que permitan
evaluar el impacto de las diferentes prcticas productivas sobre los ecosistemas (Abril,
2003). Por lo tanto, los cientficos se enfrentan al triple desafo de intensificar, preservar
e incrementar la calidad de la tierra y, para ello, es necesario contar con una slida
concepcin de la calidad y con indicadores de calidad o salud de la tierra y de manejo
sostenible de la misma, tal como se cuenta para dar seguimiento a variables sociales y
econmicas (Bautista y col, 2004).

BIBLIOGRAFIA
http://saber.ucv.ve/ojs/index.php/revista_abv/article/viewFile/5256/5060
http://centros.edu.xunta.es/iesastelleiras/depart/bioxeo/lgazon/presen/bac2/bio/pd
f/micros.pdf
http://biomundociencia.blogspot.pe/2014/04/practica-2-observacion-decelulas.html

https://es.scribd.com/doc/92182239/Practica-2-Reconocimiento-de-microalgas

http://www.monografias.com/trabajos91/observacion-celulas-epidermiscebolla/observacion-celulas-epidermis-cebolla.shtml

http://biologiamedica.blogspot.pe/2010/09/bacterias-gram-positivas-y-gram.html

UNIVERSIDAD

CATLICA DE SANTA MARIA

FACULTAD DE ARQUITECTURA E
INGENIERAS CIVIL Y DEL AMBIENTE

PROGRAMA PROFESIONAL DE INGENIERIA

AMBIENTAL

CURSO: BIOLOGA LABORATORIO

TEMA: MICROSCOPIA DE LAS CLULAS

PROFESOR: Natalia Lpez

PRESENTADO POR: Zea Yagua Mara Mercedes

AREQUIPA
2016