Aplicaciones de la

espectrometra de absorcin
molecular ultravioleta/visible
Cap. 14

 La absorcin de la radiacin UV/VIS

por una molcula puede considerarse
en dos etapas:
1. excitacin electrnica

2. relajacin
- El calor desarrollado no es detectable.
- Vida media de la especie excitada M* es de 10-8 a 10-9
segundos.

 La relajacin tambin puede ocurrir

por:
- descomposicin de M* en dos
especies nuevas (reaccin
fotoqumica)
- reemisin de fluorescenciaa o
fosforescenciab (recordar que a dura
menos tiempo que b)

 La absorcin de radiacin UV/VIS resulta de

la excitacin de los electrones de enlace;
los picos de absorcin pueden relacionarse
con los tipos de enlace (identificacin de
grupos funcionales en una molcula).
Sin embargo, la aplicacin ms importante
es la determinacin cuantitativa de
compuestos que contienen grupos
absorbentes.

Reconocemos tres tipos de

transiciones electrnicas:
1.Las que incluyen electrones , y n.
2.Las que incluyen electrones d y f.
3.Las de los electrones de
transferencia de carga.

Las especies absorbentes

son:
Iones y molculas orgnicas as como
algunos aniones inorgnicos.
TODOS los compuestos orgnicos son
capaces de absorber radiacin porque
todos contienen electrones de valencia
(, o n) que pueden ser excitados a
niveles de energa superiores.

Tipos de electrones
absorbentes
Aquellos que participan directamente
en la formacin del enlace entre
tomos.
Electrones no enlazantes o electrones
que no participan en ningn enlace
que estn en gran parte localizados
alrededor de tomos como oxgeno,
halgenos, azufre o nitrgeno.

Transiciones posibles

- Compuestos saturados con enlaces simples.

- : menor que 150 nm (UV de vaco, poco accesible).
- Metano max = 125 nm; enlaces simples C-H.
- Etano max = 135 nm; enlaces simples C-C y C-H, este
ltimo de mayor energa que el C-C, por eso max es
menor.
- Requiere mayor energa que cualquiera de las otras
transiciones permitidas.

- Compuestos saturados con pares de electrones

compartidos.
- : entre 150 a 250 nm.
- : es baja a intermedia, 100 a 3000 L cm -1 mol-1
- En presencia de solventes polares max se desplaza a
ms cortas.
- En pocos grupos funcionales se detecta con facilidad.

 Ambas requieren la presenci a de grupos

funcionales no saturados que aportan los
electrones .
Producen picos de absorcin dentro de
una regin espectral experimentalmente
accesible.
A estos centros absorbentes no saturados
se aplica el trmino cromforos.

- Compuestos no saturados con pares de electrones no

compartidos.
- : entre 200 a 700 nm.
- : es baja, 10 a 100 L cm-1 mol-1
- Al aumentar la polaridad del solvente max se desplaza a
ms cortas (desplazamiento hipsocrmico o hacia el
azul).
- En muchos grupos funcionales se detecta con facilidad.

- Compuestos no saturados.
- : entre 200 a 700 nm.
- : es media a alta, 1000 a 10000 L cm -1 mol-1
- Al aumentar la polaridad del solvente max se desplaza a
ms largas (desplazamiento batocrmico o hacia el
rojo).
- En muchos grupos funcionales se detecta con facilidad.

Efecto de la conjugacin de
cromforos
La absorcin de los multicromforos en una
molcula orgnica es aproximadamente
aditiva, siempre que estn separados por
ms de u enlace sencillo.
Si los cromforos estan conjugados las
propiedades espectrales cambian, max se
desplaza a ms largas (desplazamiento
batocrmico o hacia el rojo).

Absorcin por sistemas

aromticos
Los espectros UV de los aromticos se
caracterizan por tres grupos de bandas
debidas a transciones
.
Ej: benceno,
max = 184 nm, =60,000; Banda E2 dbil
= 204 nm, =7,000; Banda B +dbil = 256
nm, =200.
Se ven muy afectadas por la sustitucin
del anillo y por los disolventes.

Efecto de los disolventes

Tienden a reducir
o eliminar la
estructura fina de
los picos agudos
de los
aromticos.

Efecto de los sustituyentes

Auxocromo: grupo funcional que no
absorbe en la regin UV pero que
tiene el efecto de desplazar los picos
del cromforo hacia longitudes de
onda ms largas, e incrementar sus
intensidades.
Tienen al menos un par de electrones
n capaces de interaccionar con los
electrones del anillo.

En la tabla 14-4 se ve que OH y NH2

tienen un efecto auxocrmico sobre el
cromforo benceno, en relacin con la
banda B particularmente.

Absorcin por aniones

inorgnicos
Presentan picos de absorcin UV que son
consecuencia de transiciones
.
Ejemplos:
- Nitrato
313 nm
- Carbonato
217 nm
- Nitrito
360 y 280 nm
- Azida
230 nm
- Tritiocarbonato: 500 nm

Absorcin por los elementos

de la 1era. y 2da. serie de
los metales de transicin
Los iones y complejos de los 18 elementos
de 1era. serie de los metales de transicin
tienden a absorber radiacin VIS en uno o
en todos sus estados de oxidacin.
Transiciones de electrones entre los
distintos niveles de energa de los orbitales
d (3d en la 1era. serie y 4d en la 2da).

 Las bandas de absorcin son anchas,

influenciadas por los factores
qumicos del entorno.
Ejemplo: In cobre II acuoso es azul
plido; in cobre II con amonaco
forma un complejo azul oscuro.

Absorcin por iones

lantnidos y actnidos
Absorben en la regin UV/VIS.
Transiciones de electrones entre los
distintos niveles de energa de los
orbitales f (4f en los lantnidos y 5f
en los actnidos).

 Espectros formados por picos de

absorcin caractersticos, bien definidos y
estrechos, muy poco afectados por los
factores qumicos del entorno, o por el
tipo de ligando asociado con el in
metlico.
Difieren de la mayora de los espectros de
los absorbentes inorgnicos y orgnicos.

http://chrom.tutms.tut.ac.jp/JINNO/DRUGDATA/35diazepam.html#UV

http://webbook.nist.gov/chemistry/

diazepam

Resultados de anlisis por HPLC

Tiempo de retencin: 12.33min
Longitud de onda ptima: 240nm
Sensibilidad : 5.63ng
Absorbancia / 100ng : 0.3851 abs.sec
Aparato y condiciones de anlisis
Fase mvil: (10mM HClO4 + 10mM NaClO470%) +
(CH3CN30%)
Velocidad de flujo: 1.0mL/min.
Columna : FineSIL C18T (25cm x 4.0mm i.d.)
(monomericODS, particle size 5 x 10-6 m ) (Jasco).
Longitud de onda : 210-350nm.
Temperatura de columna: 50c
880 PU LC pump (Jasco, Hachioji, Japan)
System controller 801-SC
Gradient device 880-02
Detector MULTI-320
Sistema de procesamiento de datos: DPL320/98(Jasco, Hachioji, Japan)
(Tiempo Acumulacin 0.8sec.)

Propiedades Fsicas
Frmula Molecular : C16H 13ClN2O
Peso Molecular : 284.75
Nombre qumico: 7-chloro-1,3-dihydro1-methyl-5-phenyl-2H-1,4benzodiazepin-2-one
Propiedades : White, Light yellow
crystalline powder. Non smell. Taste is
slightly bitter.
Punto de fusin: 130-134c
log P : 2.80 ( Experimentally
determined value ) 3.18 ( Calculated
value )
Constante de ionizacin pKa : 3.3
Solubilidad
Chloroform : easily soluble
acetic anhydride, Ethanol :
partially soluble
Ether : hardly soluble
Water : almost insoluble
Administracin oral / 1day : 30-60mg
Clasificacin Actividad de la Droga:
Tranquilizer

Diazepam

cido acetilsaliclico

Resultados de anlisis por HPLC

Tiempo de retencin: 4.14min

Longitud de onda ptima: 230nm
Sensibilidad : 4.59ng
Absorbancia / 100ng : 0.1853abs.sec

Aparato y condiciones de anlisis

Fase mvil: (10mM HClO4 + 10mM NaClO470%) +
(CH3CN30%)
Velocidad de flujo: 1.0mL/min.
Columna : FineSIL C18T (25cm x 4.0mm i.d.)
(monomericODS, particle size 5 x 10-6 m ) (Jasco).
Longitud de onda : 210-350nm.
Temperatura de columna: 50c
880 PU LC pump (Jasco, Hachioji, Japan)
System controller 801-SC
Gradient device 880-02
Detector MULTI-320
Sistema de procesamiento de datosDPL320/98(Jasco, Hachioji, Japan)
(Tiempo Acumulacin 0.8sec.)

Propiedades Fsicas
Frmula Molecular : C9H 8O4
Peso Molecular : 180.16
log P : 1.19 ( Experimentally
determined value ) 1.10 ( Calculated
value )
Constante de ionizacin pKa : 3.5
Administracin oral / 1day : 5001000mg
Clasificacin Actividad de la Droga:
Analgesic; antipyretic

cido acetilsaliclico

Barbital

Resultados de anlisis por HPLC

Tiempo de retencin: 3.00min

Longitud de onda ptima: 210nm
Sensibilidad : 3.95ng
Absorbancia / 100ng : 0.1833 abs.sec

Aparato y condiciones de anlisis

Fase mvil: (10mM HClO4 + 10mM NaClO470%) +
(CH3CN30%)
Velocidad de flujo: 1.0mL/min.
Columna : FineSIL C18T (25cm x 4.0mm i.d.)
(monomericODS, particle size 5 x 10-6 m ) (Jasco).
Longitud de onda : 210-350nm.
Temperatura de columna: 50c
880 PU LC pump (Jasco, Hachioji, Japan)
System controller 801-SC
Gradient device 880-02
Detector MULTI-320
Sistema de procesamiento de datosDPL320/98(Jasco, Hachioji, Japan)
(Tiempo Acumulacin 0.8sec.)

Propiedades Fsicas
Frmula Molecular : C8H 12N2O3
Peso Molecular : 184.20
Nombre qumico: 5,5-diethyl barbituric
acid
Propiedades : colourless or white
crystalline powder. Non smell. Taste is
slightly bitter.
Punto de fusin: 189-192c
pH : 5.0-6.0
log P : 0.65 ( Experimentally
determined value ) 0.65 ( Calculated
value )
Constante de ionizacin pKa : 7.97
Solubilidad
Acetone, Ethanol : soluble
Water, Chloroform, Ether : hardly
soluble
Administracin oral / 1day : 300mg
Clasificacin Actividad de la Droga:
Hypnotic

Barbital

Acetaminofn

Resultados de anlisis por HPLC

Tiempo de retencin: 2.41min

Longitud de onda ptima: 245nm
Sensibilidad : 2.81ng
Absorbancia / 100ng : 0.3225 abs.sec

Aparato y condiciones de anlisis

Fase mvil: (10mM HClO4 + 10mM NaClO470%) +
(CH3CN30%)
Velocidad de flujo: 1.0mL/min.
Columna: FineSIL C18T (25cm x 4.0mm i.d.)
(monomericODS, particle size 5 x 10-6 m ) (Jasco).
Longitud de onda: 210-350nm.
Temperatura de columna: 50c
880 PU LC pump (Jasco, Hachioji, Japan)
System controller 801-SC
Gradient device 880-02
Detector MULTI-320
Sistema de procesamiento de datosDPL320/98(Jasco, Hachioji, Japan)
(Tiempo Acumulacin 0.8sec.)

Propiedades Fsicas
Frmula Molecular : C8H 9NO2
Peso Molecular : 151.17
Nombre qumico: N-(4hydroxyphenyl)acetamide
Propiedades : White crystal or
Crystalline powder. Non smell. Taste is
slightly bitter.
Punto de fusin: 169-172c
log P : 0.51 ( Experimentally
determined value ) 0.49 ( Calculated
value )
Constante de ionizacin@pKa : 9.71
Solubilidad
aceton : easily soluble
ether,benzene : hardly soluble
Saturated solution : slight acidity
Administracin oral / 1day : 300500mg
Clasificacin Actividad de la Droga:
Analgesic; antipyretic

Acetaminofn

Titulaciones fotomtricas