Revista Mdica del IMSS

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43

2005

Artculo:

Factores que intervienen en la reaccin

antgeno-anticuerpo y clasificacin
antignica eritrocitaria

Derechos reservados, Copyright 2005:

Instituto Mexicano del Seguro Social

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Primera versin: 9 de agosto de 2005

Versin definitiva: 11 de agosto de 2005
Aceptado: 11 de agosto de 2005

Javier
Bautista-Jurez

Factores que intervienen

en la reaccin antgeno-anticuerpo
y clasificacin antignica
eritrocitaria
La reaccin antgeno-anticuerpo (Ag-Ac) es la piedra angular de la respuesta inmune y se pone de
manifiesto in vitro por la formacin de un precipitado o aglutinacin de partculas (eritrocitos). El
acoplamiento estructural entre las macromolculas
est dado por varias fuerzas dbiles que disminuyen con la distancia, como los puentes de hidrgeno, las fuerzas de Van Der Waals, las interacciones
electrostticas y las hidrofbicas. El reconocimiento
Ag-Ac es una reaccin de complementariedad, por
lo que se efecta a travs de mltiples enlaces no
covalentes entre una parte del antgeno y los
aminocidos del sitio de unin del anticuerpo. La
reaccin se caracteriza por su especficidad, rpidez, espontaneidad y reversibilidad:1,2

Especficidad: capacidad de los anticuerpos

para distinguir entre dos ligandos de estructura similar. La unin dada por la especificidad es muy precisa y permite distinguir entre
grupos qumicos con diferencias mnimas.
Rapidez: la velocidad con que ocurre la primera etapa de la reaccin Ag-Ac es del orden
de milsimas de segundo, y est limitada nicamente por la difusin. La segunda etapa,
que es ms larga, incluye todas las manifestaciones que se presentan como consecuencia
de la interaccin, tales como precipitacin,
aglutinacin, neutralizacin, etctera.
Espontaneidad: la reaccin Ag-Ac no requiere
energa adicional para efectuarse y es factible
explicarla en trminos de la ley de accin de
masas:
K
Ab+H
AbH
K-1
Keq = (AbH)
(Ab)(H)

Rev Med Inst Mex Seguro Soc 2005; 43 (Supl 1): 9-12

Donde el valor de la constante de equilibrio

es una medida de afinidad del anticuerpo por
el antgeno, y desde un punto de vista termodinmico permite conocer la energa libre de
Gibbs mediante la ecuacin siguiente:

Qumico farmacobilogo,
Banco Central de Sangre,
Centro Mdico Nacional
Siglo XXI,
Instituto Mexicano
del Seguro Social

Comunicacin con:
Javier Bautista-Jurez.
Tel.: 5639 3616.
Direccin electrnica:
javier_bautista_juarez@hotmail.com
javier.bautista@ammtac.org

E Gibbs = -RT ln Keq

Reversibilidad: dado que la reaccin se debe a

fuerzas no covalentes, es reversible y, en consecuencia, se ve afectada por factores como
la temperatura, la proporcin de Ag-Ac, el pH
y la fuerza inica. En pruebas de laboratorio
que usan la aglutinacin como punto final, la
alteracin de las condiciones fsicas del sistema puede incrementar o reducir la sensibilidad de la prueba.1-5

Figura 1. La zona de equivalencia es el estadio

donde existe mayor grado de aglutinacin
con las proporciones ideales de suero
y eritrocitos. La prezona equivale a las condiciones
cuando existe exceso de suero o baja concentracin
de eritrocitos. La poszona equivale a las
condiciones de exceso de eritrocitos o baja
concentracin de suero

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Palabra clave

antgenos eritrocitarios
Key word

red cell antigens

S9

Javier Bautista-Jurez et al.

Factores que intervienen
en la reaccin
MG antgeno-anticuerpo

La temperatura tiene efectos

pro:rop inversamente
odarobale FDP
porcionales con la constante de equilibrio y la velocidad de reaccin siVC
uno
alejacidemihparG
de los puntos
edseAS,
ideales de trabajo. En inmunohematologa los
anticuerpos eritrocitarios reaccionan dentro de
un
arap
margen restringido de temperatura. En general, los
anticuerpos
IgM
reaccionan:cihpargideM
a temperaturas entre
acidmoiB
arutaretiL
4 y 27 C, mientras que los anticuerpos IgG reaccionan mejor a 37 C, por eso los procedimientos
sustradode-m.e.d.i.g.r.a.p.h.i.c
para la deteccin de anticuerpos pueden efectuarse a diferentes temperaturas, de ah que se debe
tener cuidado de diferenciar los anticuerpos
clnicamente significativos, los que actan en un
amplio margen trmico, los que fijan complemento, etctera.
Si bien no existe un pH ptimo exacto, se dice
que entre 6 y 7.3 se detecta a la mayora de los
antgenos eritrocitarios clnicamente significativos,
con excepcin del anti-M, el cual acta mejor a

pH
ms bajo. Uno de los puntos ms importantes
sustradode-m.e.d.i.g.r.a.p.h.i.c
es
el almacenamiento de reactivos, entre los que
cihpargidemedodabor
figura principalmente la solucin salina isotnica,
la cual despus de un largo periodo de almacenamiento el pH baja a 5.0, por lo que algunos
tcnicos prefieren la utilizacin de soluciones
amortiguadas en las pruebas serolgicas.

Cuadro II
Colecciones de antgenos

Nmero
205

Cost

207

Ii

208

Er

209

Cuadro I
Sistemas de grupos sanguneos

S10

210

Nmero

Nombre

Producto gnico

1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23

ABO
MNS
P
Rh
Lutheran
Kell
Lewis
Duffy
Kidd
Diego
Cartwrigth
Xg
Scianna
Dombrock
Colton
Landstainer-Weiner
Chido-Rodgers
Hh
Kx
Gerbich
Cromer
Knops
Indian

Glicosiltransferasa
Glicoforinas AB
Glicosiltransferasa
Polipptidos CE y D
Glicoprotena
Glicoprotena
Glicosiltransferasa
Receptor
Protena de transporte
Banda 3
Acetilcolinesterasa
Glicoprotena
Glicoprotena
Glicoprotena
CHIP 28
Glicoprotena
C4
Glicosiltrasferasa
Glicoprotena
Glicoforinas CD
DAF (CD55)
CR1 (CD35)
H-CAM (CD44)

Nombre

Smbolo Incidencia (%)

Csa
Csb
I
I
Era
Erb
P
Pk
LKE
Lec
Led

95
34
+99
+99
-1
+99
98
1
6

La fuerza inica est directamente relacionada

con el potencial Z. En la solucin salina isotnica
normal, los iones de Na+ y Cl- se renen alrededor de los antgenos y los anticuerpos, neutralizando parcialmente las cargas opuestas, lo que
impide la asociacin del anticuerpo con el
antgeno, pero puede disminuirse de diferentes
formas. La eliminacin, neutralizacin o disminucin de estas cargas ayuda a conseguir una constante de equilibrio mejor y a incrementar la
velocidad de reaccin.
Cuando se habla de tiempo de incubacin se hace
alusin al tiempo necesario para alcanzar el equilibrio; vara para la mayora de los anticuerpos y
su medio de reaccin. En algunos casos los agentes potenciadores pueden incrementar la cantidad de anticuerpos que se fija al antgeno en los
primeros 15 minutos y, en consecuencia, disminuyen el tiempo de incubacin necesario para
alcanzar el equilibrio. En medios como la solucin salina fisiolgica y la albmina, es necesario
el suero de Coombs para demostrar la fijacin de
los anticuerpos; se requieren 30 minutos a 37 C
para detectar la mayora de los anticuerpos clnicamente significativos. No obstante, con algunos
anticuerpos con constantes de equilibrio muy

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Rev Med Inst Mex Seguro Soc 2005; 43 (Supl 1): 9-12

Cuadro III
Antgenos de baja incidencia

Nmero

Nombre

700002
700003
700004
700005
700006
700008
700010
700013
700014
700015
700017
700018
700019
700021
700022
700026
700027
700028
700029
700030
700034
700037
700039
700040
700041
700043
700044
700045
700046
700047
700049
700050
700051
700052
700053
700054
700055

Batty
Christiansen
Swan
Biles
Box
Traversa
Bishop
Wulfsberg
Nunhart
Radin
Torkildsen
Peters
Reid
Jensen
Moen
Froese
Redelberger
Livesay
Van Vugt
Waldner
Hughes
New-Foundland
Milne
Rasmussen
SW1
Oldeide
JFV
Katagiri
Bowyer
Jones
HJK
HOFM
ELO
SARA
LOCR
REIT
Warrior

bajas, la asociacin no alcanza el equilibrio a los

30 minutos, por lo que la extensin del tiempo
de incubacin incrementa la sensibilidad de la
prueba. En general para todos los anticuerpos, el
aumento en el tiempo de incubacin en estos
medios tiene mayores ventajas.
Concentracin de antgeno-anticuerpo: aunque est
muy relacionada, un exceso de anticuerpos puede
inhibir la aglutinacin, como en la precipitacin
en el efecto prezona de la curva de equivalencia
(figura 1). Una relacin comn es la de dos gotas
de suero con una gota de eritrocitos resuspendidos a 2 o 3 % en solucin fisiolgica, que sera
Rev Med Inst Mex Seguro Soc 2005; 43 (Supl 1): 9-12

la zona de equivalencia en la curva, por lo que el

nmero de anticuerpos en el sistema y el nmero
de sitios antignicos por el eritrocito afectan la
velocidad con que se lleva a cabo una reaccin de
aglutinacin, vindose que una relacin de sueroclula aumentada puede detectar anticuerpos dbilmente reactivos.2,6-8

Javier Bautista-Jurez et al.

Factores que intervienen
en la reaccin
antgeno-anticuerpo

Cuadro IV
Antgenos de alta incidencia

Nmero
901001
901002
901003
901005
901006
901007
901008
901009
901011
901012
901013
901014

Nombre

Incidencia (%)

Vel
Langereis
August
Jr
Ok
JMH
Emm
Antn
Raph
Sid
Duclos
PEL

+99
+99
+99
+99
+99
+99
+99
+99
92
91
+99
+99

Clasificacin de antgenos
eritrocitarios
Despus de 105 aos del descubrimiento de los
antgenos A, B y H del sistema ABO por el doctor Landstainer, existen actualmente ms de 750
grupos eritrocitarios humanos.1 De stos, han
sido aceptados y clasificados 254 antgenos (definidos serolgicamente y con herencia demostrada).
Muchos de estos antgenos son productos de un
gen o de una familia de genes que se heredan
independientemente unos de otros, constituyendo
los sistemas de grupo sanguneo (cuadro I). Las
colecciones son antgenos definidos serolgica,
bioqumica y genticamente, si bien no ha podido
demostrarse que se hereden independientemente
de otros antgenos (cuadro II).
Existen otros antgenos que no pueden ser
incluidos en ningn sistema o coleccin.3 Han
sido definidos 23 sistemas que agrupan a 194
antgenos; 11 antgenos estn agrupados en cinco

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S11

Javier Bautista-Jurez et al.

Factores que intervienen
en la reaccin
MG antgeno-anticuerpo

Cuadro V
Clasificacin de antgenos segn su produccin de anticuerpos

Regulares: anticuerpos presentes casi durante toda nuestra

vida, son clase IgM y son de amplio espectro trmico;
su produccin est relacionada con bacterias (sistema ABO).
Naturales

Irregulares: pueden producirse en cualquier etapa de nuestra

vida, su periodo serolgico es variable y estn relacionados
con alimentos y antgenos bacterianos; son anticuerpos IgM
que actan entre 4 y 22 C (H, I, i, M, N, P, Le, A1, E nat)

Anticuerpos

Inmunes

Son los producidos por transfusiones o embarazos, su duracin

serolgica es variable, y el anticuerpo que lo caracteriza es de
clase IgG que acta normalmente a 37 C y el cual puede o no
activar la cascada del complemento (Sistema Rh, Diego, Dffy,
Kell, Kidd, y otros)

colecciones y 49 antgenos no pertenecen a ninguna de las categoras mencionadas (cuadros III

y IV).9 De otra forma es indispensable tener una
clasificacin que ayude en el laboratorio de inmunohematologa a ubicar a los anticuerpos de importancia clnica (cuadro V).2,7,9

Referencias
1. Glyan LE, Steward MW. Inmnochemistry: an advanced textbook. Chichester, Brisbane, Londres,
Toronto: J Wiley and Son; 1977.
2. Bautista JJ. Factores que intervienen en la reaccin
antgeno-anticuerpo. Gac Med Mex 2004;140 (Supl
3):S28-S30.

3. Heidelberger M. Lectures in immunochemistry.

Londres, Nueva York: Academic Press; 1956.
4. Klotz LM. Number of receptor sites from Scatchard
graphs: facts and fantasies. Science 1982;217:1247.
5. Roitt LJ, Brostoff D. Male. Immunology. Londres,
Nueva York: Gower Medical Publishing Ltd; 1985.
6. Watson JD. Molecular biology of the gene. Third
edition. Menlo Park: WA Benjamin; 1976.
7. Mollison PL, Engelfriet FP, Contreras M. Blood
transfusion in clinical medicine. Ninth edition.
Oxford: Blackwell Scientific; 1993.
8. Coombs RRA, Mourant AE, Race RR. A new test
for the detection of weak and incomplete Rh
agglutinins. Br J Exp Pathol 1945;26:255-266.
9. Rivera A. Sistemas de grupo sanguneos eritrociarios
humanos. Seminario de Inmunohematologa. Resolucin de problemas serolgicos complejos. Barcelona,
Espaa: Menarini Diagnostics; 1995. p. 5-16.

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