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Aplicaciones teraputicas
productos farmacuticos:
antibiticos
vacunas
hormonas
terapias gnicas
Diagnsticos
diagnsticos para salud humana
diagnsticos para agricultura y ganadera
ensayos para calidad de alimentos
ensayos para calidad ambiental
Alimentacin
mejora de procesos tradicionales de obtencin de alimentos y bebidas
nuevos alimentos y bebidas
nutracuticos: alimentos con perfiles determinados de nutrientes, y para
la mejora de la salud
aditivos alimentarios
Medio ambiente
tratamiento de residuos urbanos, agrcolas e industriales
biorremedio y biorreparacin
produccin de energa a partir de biomasa
No podemos olvidar que muchas de las biotecnologas de las que nos
beneficiamos son muy antiguas, y que en ellas se est logrando una fase de
madurez auspiciada por los nuevos adelantos tcnicos (p. ej., la tecnologa de
las fermentaciones). De hecho, muchas de las innovaciones que se estn
produciendo no son tanto de nuevos productos cuanto de mejoras en los
procesos. De cualquier manera, ya estamos viendo la entrada de nuevos
productos, en forma de nuevos frmacos y de plantas transgnicas con
caractersticas novedosas.
Dejando aparte las tecnologas de fabricacin de vacunas, la mayor parte de
las otras reas biotecnolgicas requieren producir grandes cantidades de
sustancias, del orden de kilogramos a toneladas, por lo que uno de los
principales aspectos es el del "escalado" a esas grandes cantidades. Esto
supone un gran reto a los ingenieros, ya que deben disear fermentadores de
gran tamao, donde hay que controlar diversos parmetros, como pH,
temperatura, oxgeno y otros gases, etc. La tecnologa de fermentacin cobr
mpetu a partir de los aos 40 del siglo XX, cuando se comenzaron a fabricar
antibiticos y otras molculas (cidos orgnicos, hormonas, enzimas,
polisacridos, etc) por medio de microorganismos.
Por lo tanto, aunque la atencin pblica se ha centrado en la moderna
biotecnologa que usa tcnicas de ADN recombinante, no podemos olvidar que
ya antes exista otra biotecnologa, que hoy sigue pujante, y que se puede
beneficiar de los nuevos enfoques.
Las biotecnologas, al usar catalizadores biolgicos que funcionan a bajas
temperaturas y materias primas renovables, pueden contribuir a una
economa ms "verde" (ecolgicamente sustentable). Se espera que puedan
sustituir a procesos qumicos contaminantes.
En los paises con condiciones climticas apropiadas (p.ej., en los trpicos),
la produccin y uso de biomasa puede presentar muchas ventajas. La
obtencin de energa de biomasa (p ej. residuos celulsicos) es una gran
promesa para evitar la dependencia de combustibles fsiles en ciertas
menudo complicadas.
en los protocolos de seleccin, se suele aplicar una presin selectiva que
favorece el crecimiento del tipo de mutantes buscados, en detrimento del
resto de microorganismos
en los protocolos de rastreo (screening, en ingls) crecen todos los
microorganismos, pero se pueden identificar las variantes deseadas sobre
la base de que presentan ciertas caractersticas que las diferencian de las
dems
la mezcla de genomas mediante fenmenos de sexualidad, o parasexualidad
(las bacterias no tienen sexo, pero algunas tienen fenmenos parasexuales
como la conjugacin, que se pueden aprovechar para transferir material
gentico de unas cepas a otras).
Algunos inconvenientes de estas tcnicas tradicionales de mejora:
los programas de mejora suelen ser muy largos y tediosos, y a menudo no
dan los resultados deseados
el efecto principal de la mutagnesis es originar mutaciones aleatorias en el
organismo, la mayor parte de las cuales son negativas para su
supervivencia, o empeoran algunas de sus caractersticas originales.
Raramente se dan mutaciones que conducen a la aparicin de propiedades
nuevas positivas, y en todo caso, el proceso de su bsqueda es a menudo
muy complicado. Adems, incluso cuando se selecciona un tipo estimado
adecuado, a menudo presenta otras mutaciones que son negativas (p. ej.,
haciendo que crezca ms lentamente, o que sea ms sensible a factores
ambientales)
lo anterior obliga a trasladar la mutacin "positiva" a un fondo gentico
distinto (normalmente una cepa silvestre o que ya haba sido seleccionada
como buena en un programa anterior). Esto complica y alarga la mejora
gentica, e incluso en algunos organismos no se logra la adecuada
introgresin de ese rasgo en la cepa deseada.
frecuentemente los organismos seleccionados para la produccin acumulan
mutaciones desconocidas que no se caracterizan
mucho tiempo, hasta que entre los aos 40 y primeros 50 una serie de
autores (Avery y colaboradores, Hershey y Chase, etc.) establecen
firmemente que el material de la herencia reside en el cido
desoxirribonucleico (ADN; DNA).
Por esos mismos aos, Beadle y Tatum proponen la teora conocida como "un
gen-una enzima", que correlaciona cada unidad gentica con el producto de
su expresin, es decir cada gen se expresa como una determinada protena.
Desde entonces, se produce la definitiva unin de la gentica con la
bioqumica.
En 1945, Schrdinger escribe su influyente libro Qu es la vida?, una
visionaria fusin de la Teora de la Informacin con la Biologa, que iba a
contribuir poderosamente a la naciente biologa molecular, inspirando a
profesionales procedentes del campo de las ciencias qumico-fsicas.
En los 40 y 50 se produce, en efecto, un "desembarco" de fsicos y
cristalgrafos en el abordaje de cuestiones biolgicas. Es la poca del
florecimiento de tcnicas como la difraccin de rayos X, la
ultracentrifugacin y la cromatografa.
En 1951 un joven bilogo estadounidense, James Watson, llega al
laboratorio Cavendish de la Universidad de Cambridge, para pasar una
estada postdoctoral. All se une al ingls Francis Crick, y 18 meses ms
tarde (primavera de 1953) publican en Nature su modelo tridimensional de
la doble hlice del ADN.
El modelo explicaba simultneamente la herencia y la expresin del
material gentico. ste consiste en un lenguaje basado en cuatro "letras",
las cuatro bases nitrogenadas adenina (A), guanina (G), citosina (C) y
timina (T).
Se abra en principio una nueva manera de estudiar la base gentica de
los seres vivos: de dentro (genotipo) a fuera (fenotipo), al revs de lo que
se vena haciendo desde Mendel (la observacin de la transmisin del
genotipo permita inferencias sobre el genotipo).
A continuacin se abre un decenio llamado a menudo la "Edad de Oro de la
Biologa Molecular", que pone las bases de la comprensin de los procesos
bsicos de la herencia y de la expresin gentica:
As, pues, el "retrato robot" de un experimento de I.G. podra ser como sigue:
1. Se corta por separado el ADN del organismo a estudiar y el ADN del
vector con la misma restrictasa, de modo que se generan extremos
compatibles entre s (mutuamente cohesivos).
2. Se juntan ambos ADNs y se les aade ADN-ligasa: de esta forma, las
uniones entre ADN pasajero y ADN del vector se sellan covalentemente,
generndose molculas hbridas (quimricas o recombinantes).
3. Ahora hay que introducir las molculas generadas en el organismos
husped. En el caso de bacterias se recurre a una tcnica sencilla
denominada transformacin, que permite la entrada del ADN a travs
de las envueltas del microorganismo.
4. Finalmente, hay que localizar las bacterias que han captado y han
establecido establemente las molculas hbridas. A menudo este es el
paso ms laborioso, pero el hecho de que el vector posea uno o varios
genes de resistencia favorece al menos la eliminacin de las bacterias
que no han recibido ADN del vector: basta aadir al medio de cultivo el
antibitico para el que el vector confiere resistencia. Para localizar los
transformantes recombinantes, muchos vectores incorporar un gen
marcador que produce alguna sustancia coloreada. Si insertamos el gen
a aislar dentro de ese marcador, lo rompemos, por lo que las colonias
bacterianas no producirn la sustancia coloreada, sino que permanecen
incoloras o blancas.
5. El resultado del experimento es la obtencin de al menos una colonia
(clon) de bacterias que portan la combinacin buscada de vector con el
inserto de ADN pasajero. Se dice entonces que hemos clonado
(=aislado) dicho ADN.
El primer experimento de este tipo lo realizaron en 1973 Stanley Cohen y
Herbert Boyer en la Universidad de California. Se vio que era factible hacer
toda clase de experimentos en los que se recombina ADN de organismos
totalmente diferentes (bacterias, plantas, animales).
visibles bajo luz UV. A partir de los tamaos de las bandas generadas por las
distintas enzimas y combinaciones de enzimas, es posible ensamblar el
rompecabezas del fragmento, determinando un mapa donde se van
colocando las localizaciones relativas de las distintas dianas de las
restrictasas.
A partir de la subclonacin de fragmentos del trozo original, es posible, en
algunos casos, ir adjudicando funciones a cada subfragmento, lo cual va
generando en paralelo un "mapa gentico".
El ltimo nivel (el ms detallado) de caracterizacin fsica es la misma
secuenciacin del ADN.
En los primeros tiempos se usaba sobre todo el "mtodo qumico" de
Maxam y Gilbert
Pero el ms usado actualmente es el mtodo de terminacin de cadena
mediante didesoxinucletidos (mtodo enzimtico de Sanger).
Una modificacin del mtodo de Sanger permite la secuenciacin
automtica mediante lectura fluorimtica computerizada.
2.2.4 Otros mtodos bsicos
2.2.4.1 Sntesis qumica de ADN
Novartis.
Aventis.
Suponen el 60%_________________del mercado de pesticidas.
23%_________________del mercado de semillas.
100%_________________del mercado de semillas transgnicas.
Entre los cultivos transgnicos autorizados en la Unin Europea:
Producto Empresa
Tabaco Selta
Soja Monsanto
Colza PGS
Maz Novartis
Colza AgrEvo
Maz (T25) AgrEvo
Maz (MON 810) Monsanto
Maz (MON 809) Ploneer
Achicoria Bejo Zaden
Colza AgrEvo
Maz Novartis
Colza PGS
Patata AVEBE
Remolacha DLF-Trifolium
Clavel Florigene
Tomate Zeneca
Algodn Monsanto
Maz DeKalb
Patata Amylogene
Clavel Florigene
Fuente.Unesco, Emst & Young, SEBIOT.
En Europa, los casos de Soja y Maz transgnicos resultan de especial
relevancia. La soja se utiliza en un 40 a 60% de los alimentos procesados:
aceite, margarina, alimentos dietticos e infantiles, cerveza, etc. Espaa
importa de EEUU 15 millones de toneladas, el cuarto pas importador
detrs de Japn, Taiwan y Holanda.
La comercializacin del maz transgnico est autorizada en EEUU, Canad,
Japn y tambin en la Unin Europea desde Enero de 1997.
Qu consecuencias puede traer el consumo de plantas y alimentos
transgnicos?
China planea plantar tomates, arroz, pimientos y patatas por lo menos en la
mitad de todas sus tierras de labor (500.000 kilmetros cuadrados) en el
plazo de cinco aos. Sus investigadores analizaron el efecto de los
pimientos y los tomates transgnicos en ratas de laboratorio, comparando
el peso y el estado de los mismos con los de otros no alimentados, y no
observaron diferencias significativas.
La creacin o elaboracin de este tipo de alimentos depende del nivel de
desarrollo del pas, de los intereses polticos del mismo y del grado de
presin que ejerzan las grandes industrias privadas del sector. Hay un gran
debate en torno a la conveniencia o no de este tipo de organismos.
Entre los posibles beneficios que sus defensores alegan podemos sealar:
Alimentos con ms vitaminas, minerales y protenas, y menor contenido en
grasas.
Cultivos ms resistentes al ataque de virus, hongos insectos sin la
necesidad de emplear productos qumicos, lo que supone un mayor ahorro
econmico y menor dao al medio ambiente.
Mayor tiempo de conservacin de frutas y verduras.
Cultivos tolerantes al sequa y estrs (Por ejemplo, un contenido alto de sal
en el suelo).
Hay quien asegura que estos alimentos ponen en peligro la salud humana,
provocando la aparicin de alergias insospechadas. Por ejemplo, se han
citado casos de alergia producida por soja transgnica manipulada con
genes de la nuez de Brasil o de fresas resistentes a las heladas por llevar
incorporado un gen de pescado (un pez que vive en aguas rticas a bajas
temperaturas) En este caso, las personas alrgicas al pescado podran sufrir
una crisis alrgica al ingerir las fresas transgnicas.
Estas situaciones motivaron que organizaciones de consumidores y
ecologistas pidieran que los productos elaborados con plantas transgnicas
lleven la etiqueta correspondiente. Esta peticin fue concedida con la
aprobacin el 15 de Mayo de 1997 del Reglamento CE n 258/97 "sobre
nuevos alimentos y nuevos ingredientes alimentarios" aprobado por el
Parlamento Europeo y el Consejo de la Unin Europea el 27 de Enero de
1997.
En principio este Reglamento consideraba fuera de su aplicacin a los
productos derivados de la soja y maz transgnicos, cuya comercializacin
haba sido permitida con anterioridad, el 26 de Mayo de 1998 se aprob el
Reglamento n1139/98/CE del Consejo por el que se exige el etiquetado de
los alimentos e ingredientes alimentarios fabricados, total o parcialmente, a
partir de maz y de semillas de soja modificados genticamente.
Sin embargo esta regulacin es muy necesaria, ya que calmar, en cierto
modo la alarma social existente en torno a las plantas y alimentos
transgnicos. La sociedad conocer poco a poco las caractersticas de estos
productos y su temor ya no podr basarse en el desconocimiento y temor a
lo desconocido y novedoso, pudiendo entonces, aceptarlos o rechazarlos.