Mecanismos Genticos Bsicos: Replicacin del DNA

C it l 4 +5
Capitulo
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/bookshelf/br.fcgi?book=mboc4

(Capitulo 1 + 4 + 10)

www.whfreeman.com/lodish

DNA y cromosomas

Ciclo celular en eucariota

Figure 4-19 Molecular Biology of the Cell ( Garland Science 2008)

Estructura de las cromosomas en la clulas

Figure 4-1 Molecular Biology of the Cell ( Garland Science 2008)

Figure 4-72 Molecular Biology of the Cell ( Garland Science 2008)

Como se puede demostracin que la ADN es el material gentica?

Experimento: demostracin que la ADN es el material gentica

Figure 4-2 Molecular Biology of the Cell ( Garland Science 2008)

Experimento: demostracin que la ADN es el material gentica

Figure 4-2 Molecular Biology of the Cell ( Garland Science 2008)

Relacin entre la informacin g

gentica y p
protenas

Figure 4-6 Molecular Biology of the Cell ( Garland Science 2008)

DNA / ADN

Figure 4-3 Molecular Biology of the Cell ( Garland Science 2008)

Panel 2-6 Molecular Biology of the Cell ( Garland Science 2008)

Dos hebras complementarias

Figure 4-4 Molecular Biology of the Cell ( Garland Science 2008)

El doble helix de DNA

Figure 4-5 Molecular Biology of the Cell ( Garland Science 2008)

1953: James Watson y Francis Crick

1.- Dos hebras complementarias

2.-Complementariedad se basa en interacciones especificas entre bases nitrogenadas
de los nucletidos que componen cada hebra
3.-Postulan mecanismo bsico para la replicacin de esta doble hebra de ADN

En su postulado consideran:
-Estudios de estructura por difraccin por rayos X de Maurice Wilkins y Rosalind Franklin
-Anlisis del contenido total de A, T, G y C hecho por Erwin Chargaff

1962, Watson, Crick y Wilkins reciben el Premio Nobel en Medicina y Fisiologa

El DNA funcione como molde para producir las hembras complementarios

Figure 4-8 Molecular Biology of the Cell ( Garland Science 2008)

Figure 1-4 Molecular Biology of the Cell, Fifth Edition ( Garland Science 2008)

Figure 1-5 Molecular Biology of the Cell, Fifth Edition ( Garland Science 2008)

Figure 4-72 Molecular Biology of the Cell ( Garland Science 2008)

Se pueden pintar los cromosomas para facilitar su identificacin

Cariotipo

Hibridacin in situ fluorescente mltiple (M-FISH)

(M FISH)

Figure 4-10 Molecular Biology of the Cell ( Garland Science 2008)

Patrn de cromosomas humanos

Figure 4-11 Molecular Biology of the Cell ( Garland Science 2008)

Enfermedad de Ataxia: anomalas en cromosoma 12 de humanos

Crs 4

Crs 12

Crs 4

Crs 12

translocacin cromosomal

Figure 4-12 Molecular Biology of the Cell ( Garland Science 2008)

Diversidad de numero de cromosomas

Figure 4-14 Molecular Biology of the Cell ( Garland Science 2008)

Organizacin de los genes: cromosoma 12 humana (1999)

ATG

Figure 4-7 y 4-15 Molecular Biology of the Cell ( Garland Science 2008)

Diferencia entre humanos:

1/1000 nucleotidos

Diversidad del tamao de genoma

Figure 1-37 Molecular Biology of the Cell, Fifth Edition ( Garland Science 2008)

Ciclo celular en eucariota

Figure 4-19 Molecular Biology of the Cell ( Garland Science 2008)

Replicacin

Experimento de Meselson-Stahl (1958)

Propiedades generales de la replicacin del DNA: Es Semi-conservativa
Semi conservativa

Incubar E.coli con 15N (Pesado: H) Llavar crecer con 14N (Liviano: L) anlisis de DNA
Fig. 4-32 Lodish y Figure 5-5 Molecular Biology of the Cell ( Garland Science 2008)

Como ocurre un ciclo de replicacin del DNA?

dNTPs
2) Cebador (=primer)

3
3
5

5
5
3
3

1)) Hebra molde (=template)

(
p
)

Qumica de la sntesis de DNA

Cebador =

dNTPs

Figure 5-3 Molecular Biology of the Cell ( Garland Science 2008)

= Hebra molde

. cataliza la sntesis de DNA

dNTPs
2) Cebador / partidora (=primer)
DNA pol
5 3

3
3

5
5
3
3

1)) Hebra molde

DNA polimerasa cataliza la sntesis de DNA

Figure 5-4 Molecular Biology of the Cell ( Garland Science 2008)

Figure 5-4 Molecular Biology of the Cell ( Garland Science 2008)

Esquema de la sintesis de DNA de la hebra conductura y de la hebra

rezagada en la horquilla (=fork) de replicacin

: Punto de unin
: Hebra rezagada
g
DNA parental/ bicatenario

: Cebador corto de RNA

: Hebra
H b conductora
d t
Elongacion continuamente

Fig. 4-33 Lodish y Figure 5-8 Molecular Biology of the Cell ( Garland Science 2008)

Esquema de la sintesis de DNA de la hebra conductura y de la hebra

rezagada en la horquilla (=fork) de replicacin

: Punto de unin
: Hebra rezagada
g
DNA parental/ bicatenario

: Cebador/partidora
corto de RNA
: Hebra
H b conductora
d t

Fig. 4-33 Lodish y Figure 5-8 Molecular Biology of the Cell ( Garland Science 2008)

DNA Polimerasas
((DNA))n + dNTP

Caractersticas de la reaccin:

(DNA)n+1 + PPi

a) DNA molde
b) Mg2+
c) Elongacin en direccin 5
5 3
3
d) Presencia de los 4 dNTPs
e) Requiere de 3-OH- dador (Partidor)

DNA poll I
10 nucletidos por minuto en ensayos de replicacin in vitro

DNA poll I
Funcin: Reparacin del DNA

DNA Polimerasas II y III (De Luca y Cairns, 1969)

Caractersticas de la reaccin:

a) DNA molde
b) Mg2+
c) Elongacin en direccin 5
5 3
3
d) Presencia de los 4 dNTPs
e) Requiere de OH- dador (Partidor)

DNA p
pol III: 1,000 nucletidos p
por minuto

P i d d generales
Propiedades
l d
de lla replicacin
li
i d
dell DNA

-Semi-conservativa
Semi conservativa
-Origen especfico
-Bidireccional

Microscopia electrnica de la replicacin del DNA SV40 indica el crecimiento

bidireccional de la hebras de DNA a partir de un solo origen

Replicacin comienza en
una secuencia denominada origen

Bidireccional: 2 horquillos

Fig. 4-35 Lodish y Figure 5-6 Molecular Biology of the Cell ( Garland Science 2008)

Las DNA polimerasas no pueden desenrollar las hebras de DNA bicatenario

Adems de la DNA polimerasa, la helicasa, la primasa y otras protenas

participan en la replicacin del DNA

Hebra conductora

DNA parential

Hebra rezagada

DNA ligase:
union
i d
de d
de llas ffragmentos
t d
de Ok
Okazaki
ki
Fig. 4-34 Lodish y Figure 5-21 Molecular Biology of the Cell ( Garland Science 2008)

La helicasa y la primasa desenrollan las hebras de DNA bicatenario

ATP

Figure 5-15 Molecular Biology of the Cell ( Garland Science 2008)

Hebra conductora

lazo
Hebra
rezagada

Video: Alberts 05.4-replication_I