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2013 Volumen 15 N 01 - http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n010114.html
REDVET - Revista electrnica de Veterinaria - ISSN 1695-7504

Deteccin de aflatoxina b1 en alimentos balanceados para

conejos Aflatoxinas detection b1 in balanced food for rabbits
Florencia Garca Segura DIN: GASF521016MPLRGL00 ; Villarreal
Espino Barros Oscar Agustn; Franco Guerra Francisco Javier DIN:
FAGF540130HPLRRR064; Jorge Hernndez Hernndez DIN: HEHJ600918HPLRRR04; Karina Avelar Avelar ; David Correa Mendoza
Facultad de Medicina Veterinaria. Benemrita Universidad Autnoma
de Puebla. Km 7 Carret. Tecamachalco-Caada Morelos, Puebla. Col.
El Salado. CP 75492. Mxico. E mail: sersocialflorencia@hotmail.com

Resumen
Este proyecto tuvo como objetivo detectar la aflatoxina B1, en alimento
balanceado para conejo en diferentes marcas comerciales, utilizando como
mtodo de investigacin la cromatografa en capa fina, mediante el uso de
acetonitrilo para obtener el sustrato del alimento. Una vez preparada la placa
se procedi a sumergirla en una mezcla que comprende de 98 ml de
Tetracloruro de Carbono (CHCl3) + 2ml de Metanol (Ac2O). Se realiz por el
mtodo ascendente, esto permite que el diluyente ascienda por la placa casi
en vertical por la accin de capilaridad. Se revel la placa con una lmpara de
luz ultravioleta a una onda de excitacin de 254 nm.
Al observar la placa, los resultados obtenidos en los primero 6 puntos se
present la aflatoxina B1 ya que fueron expuestos a diferentes
concentraciones de aflatoxina B1, para que nos sirvieran como testigos y en
los tres ltimos puntos que corresponden a nuestras muestras no se encontr
la aflatoxina B1.
Por lo tanto nuestro resultado es negativo a aflatoxina B1 para las tres
diferentes marcas comerciales analizadas de alimento balanceado para
conejo.
Palabras clave: Aflatoxina, alimento balanceado, conejo, cromatografa en
capa fina, luz ultravioleta.

Abstract
This is the abstract, this project had as aim to detect the B1 Aflatoxin , in
balanced food for rabbit in different commercial brands, using as method of
investigation the chromatography in fine layer, by means of the use of
acetonitrilo to obtain the substratum of the food. Once prepared one
proceeded the plate, it was immerse in a mixture of 98 ml of Tetrachloride of

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Carbon (CHCl3) + 2 ml of Methanol (Ac2O). It was done by the ascending

method, this allows that the thinner ascend for the plate almost vertically for
the action of capillarity. The plate was revealed by a lamp of ultraviolet light
to a wave of excitation of 254 nm.
Observing the plate, the results obtained in the first 6 points, the B1 aflatoxin
appeared since they were exposed to different concentrations of B1 aflatoxin,
in order that they were serving us as witnesses and in the last three points
that correspond to our samples there was not the B1 aflatoxin.
Therefore our result is negative to B1 aflatoxin for three different commercial
brands analyzed of balanced food for rabbit.
Key words: Aflatoxin, balanced food, rabbit, chromatography in fine layer,
ultraviolet light.

Introduccin
Se menciona en algunos estudios que la carne de conejo es una carne con
menor contenido de micotoxinas porque el alimento balanceado es
principalmente de forraje y los lpidos, almidones son los sustratos para el
crecimiento de hongos, y la posibilidad de su presencia es baja y en ocasiones
nulos. Pero existen pocos estudios realizados para conocer la inocuidad, y con
la finalidad de comprobar la ausencia de la contaminacin por micotoxinas en
esta especie, este trabajo tuvo como objetivo realizar un estudio para conocer
el estado de contaminacin por Aflatoxina B1 en alimentos balanceados en
diferentes marcas comerciales empleando el mtodo de Cromatografa en
capa fina para su deteccin (DIRECTRIZ 2002/32/EC).
Las Aflatoxinas son metabolitos secundarios producidos por algunas de las
especies de Aspergillus que crecen en productos alimenticios, y que por su
consumo pueden afectar el metabolismo de casi todos los seres vivos. Las
Aflatoxinas son consideradas como el carcingeno ms potente producido en
la naturaleza as como tambin son considerados agentes mutagnicos,
teratognicos y hepatotxicos para muchas especies vivas incluyendo tanto a
los seres humanos como a los animales, por lo cual debemos ser protegidos al
mximo de su consumo o contacto con estas micotoxinas (Mariscal Q. 1997 y
Cornejo Jaime, 2004).
Las Aflatoxinas se han asociado a varias enfermedades, tales como
aflatoxicosis, en ganado, animales domsticos y seres humanos. Las
Aflatoxinas han recibido ms atencin que cualquier otra micotoxicosis debido
a su potente efecto carcingeno, donde se ha encontrado susceptible en
animales de laboratorio as como sus efectos toxicolgicos agudos en seres
humanos (cncer primario del hgado) (Avila. 2000).)

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Existen cuatro Aflatoxinas importantes: B1, B2, G1, G2. La Aflatoxina B1 es el

agente carcingeno ms potente de entre todas las Aflatoxinas; la mayora de
los datos toxicolgicos disponibles se relacionan con la Aflatoxina B1 (Alberto
G., 2009).
Objetivo
Determinar por cromatografa de capa fina los alimentos balanceados para conejo, de
diferentes marcas comerciales de la regin, estn contaminadas por la aflatoxina B1.
Justificacin
En cunicultura se menciona que la carne de conejo es de las ms sanas porque no tiene
klenbuterol y su alimento es libre de micotoxinas siendo de las ms confiables en
productos crnicos por esta razn se dise esta investigacin para conocer el nivel de
contaminacin por Aflatoxina B1 en alimento comercial para conejos.
Materiales y mtodos
El mtodo empleado se basa respetando la NORMA OFICIAL MEXICANA NOM-188SSA1-2002, PRODUCTOS Y SERVICIOS. CONTROL DE AFLATOXINAS EN
CEREALES PARA CONSUMO HUMANO Y ANIMAL. ESPECIFICACIONES
SANITARIAS. (5)
Acudimos a expendios comerciales localizados en Tehuacn Puebla, para comprar
bolsas de 5 Kg. de alimento para conejo, con la finalidad de recolectar la mayor cantidad
de marcas comerciales de alimento balanceado para conejo.

Figura 1. Expendios de alimento

En nuestra recolecta obtuvimos las diferentes marcas comerciales; NUTREL,

PABSA y PURINA.
Posterior a la recolecta de las muestras se procedi a su preparacin para
poder hacer la tcnica de Cromatografa en capa fina.

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Preparacin de las muestras

Se molieron las muestras hasta que quedaran totalmente en polvo,
Se peso 50 gr. de cada muestra ya molida,
Se les agreg 200 ml Acetronitrilo como solvente,
Se mezclaron perfectamente, y
Se filtraron las mezclas para obtener los extractos.
Figura 2. Muestras de alimento y su filtrado

Este procedimiento se repiti exactamente igual y por triplicado en las tres

muestras de cada alimento.
Preparacin de las placas

Figura 3. Puntos en placa

En cada placa se procedi a hacer una lnea en la parte inferior y a dividir la

lnea en 9 puntos, Como se muestra en la imagen.
Los nueve puntos fueron identificados

Figura 4. Maca de 9 puntos

En los puntos 1, 2 y 3 se coloc con una micro jeringa el extracto de la

muestra de Nutrel, de Pabsa y de Purina + 20 ng de aflatoxina B1
respectivamente.
En los puntos 4, 5 y 6 se coloc con una micro jeringa 30 ng, 20 ng y 10 ng
de aflatoxina B1 respectivamente.

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En los puntos 7, 8 y 9 se coloco con una micro jeringa el extracto de la

muestra de Nutrel, de Pabsa y de Purina respectivamente.

Figura 5. Aplicacin en placa del alimento balanceado

Una vez preparada la placa se procedi a sumergirla en una mezcla que

comprende de 98ml de Tetracloruro de Carbono (CHCl3) + 2ml de Metanol
(Ac2O), se realiz por el mtodo ascendente, esto es al permitir que el
diluyente ascienda por la placa casi en vertical por la accin de capilaridad.

Figura 6. Placas sumergidas en CHCl3

Lectura de las placas

Posteriormente al sacar las placas del diluyente, se hizo la lectura por medio
del revelado con luz ultravioleta (UV) a una longitud de onda de excitacin de
254 nm

Figura 7.
Revelado de placas con luz ultravioleta.

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El revelado se realiz en un cuarto oscuro para observar la aflatoxina B1, que

es de nuestro inters, la cual se observa de un color azul.

Figura 8. Revelado de placas.

Resultados
Al observar la placa tenemos como resultado que en los primero 6 puntos,
corri la aflatoxina B1, ya que estos puntos fueron expuestos con
concentraciones de aflatoxina B1 y en los tres ltimos puntos que
corresponden a nuestras muestras, no corri la aflatoxina.
Por lo tanto, nuestro resultado es negativo a aflatoxina B1 para las diferentes
marcas comerciales de alimento balanceado para conejo analizadas con
cromatografa de capa fina.
PUNTO
S

1
2
3
4
5
6
7
8
9

CONTIENE

RESULTADO

Nutrel + 20 ng de Aflatoxina B1
Pabsa + 20 ng de Aflatoxina B1
Purina + 20 ng de Aflatoxina B1
30 ng de Aflatoxina B1
20 ng de Aflatoxina B1
10 ng de Aflatoxina B1
Nutrel
Pabsa
Purina

Positivo
Positivo
Positivo
Positivo
Positivo
Positivo
Negativo
Negativo
Negativo

Figura 9.Resultados y revelado.

Discusin
ESPECIES
OVOVEJAS

LATINO
AMERICA

EL
SALVADOR
CHILE
COLOMBIA
MEXICO
NORMA
OFICIAL
MEXICANA
NOM-188SSAI-2002

AVES

CERDOS

20

CABRA
S
20

20

20

10
---------

30
-------

30
20
---

10
50
200
25-45 kg.
100
Mayor 45
kg. 200
Reproduct
ores 100

100 Excepto
pollos
de
engorda

(ug/kg) Microgramos/ kilogramos

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BOV.
LECHE
20

BOV. CARNE

10
50
-----

30
50
200
Maduros
destinados
a
reproductores
100
De engorda en
etapa
de
finalizacin 300

20

TERNE
RAS
---

CONEJO
S
?

---------

?
10
?
?

(3), (5)

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La tabla anterior nos indica que no hay estudios realizados de la aflatoxina B1

en la alimentacin para el conejo, por tal motivo se realiz ste estudio, ya
que la carne de conejo es una alternativa para el consumo humano.
Conclusin
De acuerdo a las normas, reglamentos e investigaciones consultados que
hicieran referencia a la concentracin de aflatoxina B1 en alimento balanceado
para conejo, se concluye que las marcas Nutrel, Pabsa y Purina, las cuales
fueron analizadas con el mtodo de cromatografa en capa fina estn libres de
aflatoxina B1.
Bibliografia
AVILA. Qumica Orgnica: experimentos con un enfoque ecolgico. UNAM, 2000:
http://depa.pquim.unam.mx/~fercor/dqo/manuales/1311/p7.pdf
Cornejo Jaime, Villarroel Orialis: Antecedentes generales sobre las aflatoxinas y otras
micotoxinas y elementos a tener en cuenta para el diseo de prcticas correctas de
cultivo y elaboracin de nueces: 2004:
http://www.minsal.gob.cl/portal/url/item/72fd6274dad8792ee04001011f0109e4.pdf
Alberto Gimeno. Albitar Veterinaria 2009 REVISIN DE LAS CONCENTRACIONES
MXIMAS TOLERABLES PARA CIERTAS MICOTOXINAS EN EL ALIMENTO
*Experto en el campo de las micotoxinas, consultor tcnico de Special Nutrients, Inc.,
2766 Douglas Road, Miami, Florida, 33133 USA.
DIRECTRIZ 2002/32/EC DEL PARLAMENTO EUROPEO Y DEL CONSEJO DEL 7 DE
Mayo de 2002 sobre sustancias indeseables en el alimento animal: 2002:
http://www.knowmycotoxins.com/es/regulations.htm
Mariscal Quintanar Mnica G., Garcia Escamilla Rosa Ma.: Efectos por la ingestin de
inculos de A. flavus y F. moniliforme en la citomorfologuia de la sangre, de medula
sea y concentracin de albuminas y globulinas sricas en conejos: 1996:
http://www.medigraphic.com/pdfs/vetmex/vm-1997/vm972a.pdf
NORMA Oficial Mexicana NOM-188-SSA1-2002, Productos y Servicios. Control de
aflatoxinas en cereales para consumo humano y animal. Especificaciones sanitarias:
2002 http://www.salud.gob.mx/unidades/cdi/nom/188ssa12.html
Cromatografa en capa fina: http://goo.gl/IBFODO
REDVET: 2013, Vol. 15 N 1
Recibido 25.10.2013 / Ref. prov.NOV1302antesJUN1215_REDVET
Aceptado 28.12.2013 / Ref. def. 011409_REDVET / Publicado: 01.01.2014
Este artculo est disponible en http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n010114.html
concretamente en http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n010114./011410.pdf
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