UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN ANTONIO ABAD

DEL CUSCO

FACULTAD DE INGENIERA QUMICA, INGENIERA

PETROQUMICA E INGENIERIA METALRGICA
C.P. DE INGENIERA QUMICA
PRCTICA DE LABORATORIO N2:
Esterilizacin

CURSO: Microbiologa Industrial

ALUMNO: lvaro Michel Castillo Quispehuanca
DOCENTE: Blgo. Ruth Lazarte Lovatn
CODIGO: 110240
SEMESTRE: 2013-II
Esterilizacin

1. Objetivos
-

Comprender el fundamento del mtodo de esterilizacin fsico: calor a vapor

presin, su importancia y utilidad dentro de procesos industriales.
Aprender el funcionamiento bsico del autoclave y del horno Pasteur.

2. Fundamento terico
Esterilizacin significa la eliminacin de toda forma de vida de un medio o material,
lo que se lleva a cabo generalmente por medios fsicos, por ejemplo, filtracin, o
por muerte de los organismos por calor, productos qumicos u otra va. Esta
definicin excluye por lo tanto cualquier tcnica que resulte solamente en un dao
a los microorganismos o atenuacin de la actividad de cualquier tipo.
Mtodos de esterilizacin:
a) Agentes fsicos

El calor se puede aplicar como agente esterilizante de dos formas: el calor

hmedo el cual destruye a los microorganismos por desnaturalizacin de las
protenas y el calor seco que destruye a los microorganismos por oxidacin de sus
componentes celulares. El calor es considerado como el mtodo de esterilizacin
por excelencia siempre y cuando el material a esterilizar
soporte altas temperaturas sin sufrir ningn tipo de dao.

La radiacin, o emisin y propagacin de la energa a

travs de un medio, puede ser utilizada como agente
para la eliminacin de microorganismos. As tenemos que
las radiaciones ionizantes se pueden utilizar para la
esterilizacin de materiales termolbiles, como por
ejemplo materiales plsticos, y las radiaciones no
ionizantes, como la luz ultravioleta, puede ser empleada en el control de reas
cerradas.
b) Agentes mecnicos
La filtracin permite la remocin de todos los microorganismos presentes en un lquido
o un gas retenindolos sobre la superficie de un material.

c) Agentes qumicos
Algunas sustancias qumicas pueden ser usadas como
agentes esterilizantes porque tienen la capacidad de
promover una o ms reacciones qumicas capaces de
daar los componentes celulares de los microorganismos
(protenas, membranas,etc).
Almacenamiento de material estril

Una vez que un material est estril puede mantener esta condicin si est
protegido en la forma apropiada. Es decir, la duracin de la esterilidad de un
material no est relacionada directamente con el tiempo, sino con factores que
comprometen su exposicin al medio ambiente.
Los materiales estriles pierden su esterilidad:
Cuando se produce cualquier ruptura, accidental o no, del material que lo recubre
durante su transporte o almacenamiento.
Al humedecerse el material de empaque.
Es importante no manipular los materiales estriles con las manos hmedas, ni
colocarlos sobre superficies mojadas.
Al almacenar los materiales estriles se deben tomar una serie de precauciones,
tales como:
Controlar el acceso a las reas de almacenamiento de materiales estriles.
Mantener el rea de almacenamiento limpia, libre de polvo, sucio e insectos.
Controlar la temperatura y la humedad de las reas de almacenamiento.
La temperatura ideal debe estar por debajo de los 26C y la humedad relativa
entre 30 y 60%.
Los periodos prolongados de almacenamiento en lugares tibios y hmedos,
pueden producir condensacin de humedad sobre el material de empaque.
Utilizar, preferiblemente, estantes cerrados para colocar el material.
Dejar que los materiales que salen del horno o el autoclave alcancen la
temperatura ambiente antes de ser almacenados; de esta forma se evita la
condensacin dentro del empaque.

PREPARACION DE MATERIAL DE VIDRIO PARA SU ESTERILIZACIN POR

CALOR SECO
1. Confeccin de tapones de algodn

2. Preparacin de tubos de
prueba

3.
4. Preparacin de matraces

5.
6.
7.
8.

9. Preparacin de pipetas

10.
11. Preparacin de placas Petri

12.
13.
14.
15.

16. CUESTIONARIO
1. Qu finalidad tiene utilizar papel craff y tapones de algodn en la
esterilizacin?
17. El papel craff es usado por su bajo costo y porque posee caractersticas
que hacen de el un buen protector de material que se va esterilizar
protegindolo de los agentes contaminantes despus del proceso, las
caractersticas que posee es una elevada resistencia mecnica, porosidad
baja es decir es una buena barrera antimicrobiana, adems presenta un
lado spero y otro atinado de modo que no libera pelusas.
2. Se podra taponar y envolver el material de vidrio sin estar totalmente
seco? Por qu?
18. No, ya que al estar hmedo podra mojar el papel craff deteriorndolo y
hacindolo ms susceptible a la ruptura, aunque en el caso del mtodo de
calor seco puede ser de ayuda ya que coopera para que la transferencia de
calor sea ms rpida.
19.
3. Diferencias entre esterilizacin por calor seco y calor hmedo
20.
21.
CALOR SECO
23.
- Utiliza como fluido de trabajo
aire caliente.
24.
- Trabaja a temperaturas altas y
tiempos prolongados
25.
- Esteriliza por oxidacin de las
protenas celulares vitales
26.
- El aire no es buen conductor
del calor en comparacin con el agua
27.
- Horno Pasteur

22.
CALOR HMEDO
28.
- Utiliza como fluido de trabajo
vapor de agua
29.
- El rango de temperatura no es
muy elevado y tiempos cortos
30.
Acta
coagulando
las
protenas del protoplasma microbiano
31.
- El agua es un buen conductor
de calor
32.
- Autoclavado
33.
- Ebullicin
34.
- Tyndalizacin
35.
- Vapor fluente
36.

37.
4. Cmo conseguimos vapor saturado en el autoclave? Y Por qu es
necesario?
38. Se consigue vapor saturado bajo condiciones de presin y temperatura que
para este caso el fluido es agua a 121 c y 15 lb de presin, el tiempo es
una variable que se maneja y puede ir desde 15 minutos hasta 30 minutos.
39. Es necesario ya que a estas condiciones y por el periodo de tiempo al que
es sometido las endoesporas presentes en el material de vidrio son
eliminadas.
40.
5. Indique a qu tipo de esterilizacin corresponde :
a. Guantes quirrgicos: ebullicin

b.
c.
d.
e.
f.

Protenas: vapor fluente

Placas Petri: calor seco
Medios de cultivo: autoclave
Ambientes: radiacin ultravioleta y agentes qumicos
Productos lcteos: vapor fluente

41.
42.
6. Indique los cuidados que se deben tener
para el manejo de la autoclave y cul es su
importancia
43.
- Fase de purgado: A medida que la
resistencia calienta el agua del fondo del
caldern, se va produciendo vapor que
desplaza el aire, hacindolo salir por la
vlvula de purgado que est abierta. Esta fase termina cuando se alcanza
la temperatura de esterilizacin.
- Fase de esterilizacin: Una vez cerrada la vlvula de purgado y alcanzada
la temperatura de esterilizacin previamente seleccionada se inicia el
proceso de esterilizacin.
- Fase de descarga: Terminado el proceso de esterilizacin, deja de funcionar
la resistencia calefactora, con lo que deja de producirse vapor y la presin y
temperatura del caldern empieza a bajar poco a poco.
44.
45.