Determinacin de cenizas en carne.

Seminario: Algo ms sobre la evaluacin

de la incertidumbre de medicin

Resumen del mtodo:

Pesar un crisol vaco

Colocar en el mismo aproximadamente

2 gramos de muestra

Pesar nuevamente.

Calcinar a 525C durante 8 horas.

Enfriar en desecador.

Pesar nuevamente.

Calcular el porcentaje de cenizas

obtenido segn la siguiente frmula:

Docentes:
Dra.
Lic.

Celia Puglisi
Enrique Vivino

W% =

z x
100
yx

Z= masa del crisol + ceniza

X= crisol vaco
Y= crisol + muestra

INTI - Instituto Nacional de Tecnologa Industrial (Argentina).

Clculo de incertidumbre en la determinacin de nitrgeno

Mensurando:
Ejercicio:
Enve a travs del chat las fuentes de incertidumbre que
usted considere que influyen en esta medicin.

Lo que se determina es la cantidad de nitrgeno

contenido en la muestra.
Este se transforma en NH4+por accin del cido
sulfrico a temperatura elevada. Se agrega
hidrxido de sodio y posteriormente se destila
como NH3 y se recoge sobre cido brico.
Finalmente se titula con cido sulfrico.
Mtodo: "Nitrogen in meat" AOAC 39.1.15

Clculo de incertidumbre en la determinacin de nitrgeno

Expresin matemtica para el clculo:

%nitrgeno =

Vt N PA 100
mm 1000

Vt= Volumen de titulante en ml.

N= Concentracin del cido sulfrico (normalidad)
PA= 14
mm = Masa de muestra

Posibles fuentes de incertidumbre

Muestreo:
El laboratorio trabaja sobre muestras que,
generalmente, son remitidas por el cliente.

Condiciones de almacenamiento:
Se mantiene la muestra en fro y en envase
cerrado, dado que la carne puede sufrir
alteraciones.
El laboratorio cuenta con procedimientos para el
manipuleo de la muestra.

Posibles fuentes de incertidumbre

Efectos instrumentales:
Los instrumentos de medicin que se utilizan
son la balanza y la bureta. Para la primera
debe mantenerse un adecuado control. La
segunda debe ser adecuadamente calibrada.
El equipo para mineralizar las muestras debe
controlarse para asegurar que las temperaturas y
los tiempos sean los requeridos por el mtodo.
Igualmente debe controlarse el equipo destinado a
destilar el amonaco

Reactivos:
Deben cumplir con las condiciones especificadas por el
mtodo.

Posibles fuentes de incertidumbre

Influencia de los clculos o modelo

matemtico utilizado:
En el clculo intervienen volumen y
concentracin de soluciones adems de la masa
de muestra. La frmula antes mencionada se
aplica solamente si se mantienen las
especificaciones del mtodo.
Correccin por blanco:
En general se controla que los reactivos no
provoquen blancos apreciables. De ser necesario
se introduce una correccin en la frmula,
teniendo en cuenta el volumen de titulacin
requerido para el blanco.

Cuantificacin de los componentes de la incertidumbre

De acuerdo con la frmula mencionada anteriormente,

tratndose de una expresin multiplicativa,
la incertidumbre en la concentracin de nitrgeno (%N)
se debe calcular sumando las incertidumbres relativas de
cada parmetro que figura en la frmula.
Ur(%N) = [(UrV)2 + (UrN) 2 + (mm)2 ]

Posibles fuentes de incertidumbre

Estequiometra:
Las reacciones qumicas que intervienen en
este ensayo son suficientemente conocidas
como para asegurar el resultado.
Para que sta se cumpla deben controlarse las
condiciones experimentales.
Condiciones de medicin:
Las mismas deben ser controladas para que se
mantengan dentro de lo especificado por el
mtodo.
Efecto de la muestra o matriz:
El mtodo se aplica estrictamente a las
matrices crnicas.

Posibles fuentes de incertidumbre

Efecto del operador:

Es importante que el operador sea bien
entrenado en la lectura de volmenes de la
bureta y sobretodo en la apreciacin del punto
final de la titulacin.

Aspectos aleatorios no controlables:

Se intenta evaluarlos a travs del clculo de
repetitividad del mtodo.

Cuantificacin de los componentes de la incertidumbre

La incertidumbre propia de la balanza, de acuerdo
con su certificado de calibracin, es de 0,13 mg
para el rango entre 10g y 210g.
El mtodo establece una masa de muestra de
aproximadamente 1 g.
La incertidumbre relativa de la pesada de la masa
resulta entonces 0,13/1000 = 0,00013.

A continuacin se calcularn los elementos

de esta expresin

Cuantificacin de los componentes de la incertidumbre

Incertidumbre

debida a la titulacin:

Se consider:
1) Volumen medido con la bureta
Lectura: la mnima divisin es 0,1 ml Se estima
que puede apreciarse 0,05 ml, considerando
distribucin rectangular la incertidumbre por
lectura.

Cuantificacin de los componentes de la incertidumbre

3) Por diferencias entre la temperatura de calibracin
y la de medicin (suponiendo la falta de control en
3C) puede tomarse como incertidumbre 0,006 ml.
La incertidumbre debida al volumen de una medicin
ser

= 0,032 + 0,014 2 + 0,0062 = 0,033ml

0,05
Ul =
= 0,03ml
3
2) Valores obtenidos al calibrar la bureta
dan una desviacin standard de 0,014 ml
(para un dado volumen)

Cuantificacin de los componentes de la incertidumbre

Incertidumbre

Cuantificacin de los componentes de la incertidumbre

debida a la apreciacin del punto final

Para estudiar la incertidumbre estadstica se

utilizaron los valores del volumen de cido sulfrico
necesario para neutralizar cantidades conocidas de
borx de alta pureza.
La frmula utilizada es:

c=

En general para el clculo de la concentracin se

utilizan alrededor de 20 ml, resultando entonces en
valor relativo 0,033/20 =0,00165.

m
vM

donde c es la concentracin de brax

medida
m es la masa de brax (utilizado
como patrn)
V es el volumen utilizado para titular
M peso equivalente del Brax

Cuantificacin de los componentes de la incertidumbre

Si se considera la incertidumbre en la pureza
del brax. El certificado del fabricante
expresa 99,5% 100,5% de pureza para a/b.

Las titulaciones se realizaron por triplicado,

en cada caso se calcul la desviacin
standard y se la dividi por el promedio para
calcular la desviacin standard relativa.
El desvo stndard relativo de 27 triplicados
fue 0,0035.
Este valor se tom como incertidumbre
estadstica relativa en la apreciacin del
punto final.

Cuantificacin de los componentes de la incertidumbre

La incertidumbre relativa en la concentracin
de cido sulfrico ser entonces la
combinacin de la incertidumbre
en el volumen, la incertidumbre
en la determinacin del punto final,
y la incertidumbre en la pureza del brax
( se desprecia la incertidumbre
en la masa de brax)

Si se supone una distribucin rectangular

resultar en valor relativo:

Urp =

0,05
= 0,0029
3

Urc = 0,00165 2 + 0,0035 2 + 0,0029 2 = 0,0048

Cuantificacin de los componentes de la incertidumbre

Al titular la solucin proveniente de la
muestra se considera incertidumbre en el
volumen usado, determinacin del punto
final y concentracin
Combinado las incertidumbres relativas se
tendr una incertidumbre debida a la
titulacin, que determina la concentracin de
nitrgeno en la muestra.

Componente estadstica de la incertidumbre

Se calcul la desviacin estndar relativa

intramuestra sobre 50 muestras analizadas
por duplicado (correspondientes a
muestras recibidas por el laboratorio),
obtenindose el valor 0,015
La concentracin de nitrgeno en las
muestras se encontraban entre 1,5g/100g y
5 g/100g.

Urt = 0,00165 2 + 0,0035 2 + 0,0048 2 = 0,00619

Componente estadstica de la incertidumbre

Evaluacin del sesgo

Se realizo sobre el mismo material de referencia.

Utilizando material de referencia

el valor obtenido sobre 25
duplicados fue 0,012
(se supone que la diferencia se
debe principalmente a una mayor
homogeneidad del material)

El valor certificado era 1,68 g/100g.

Se obtuvo un promedio de 1,67 con un desvo estndar de
0,02 g/100g.
Esto representa una desviacin estndar relativa de
0,012.
El material de referencia fue certificado por medio de un
ejercicio interlaboratorio y el certificado indicaba la
desviacin estndar interlaboratorio 0.052 g/100g.
Sobre la base de estos datos se concluy que el mtodo
no presenta desvo sistemtico apreciable.

Componente estadstica de la incertidumbre

Se combinaron ambas incertidumbres para el clculo

final.
2

Urc = 0,015 + 0,0062 = 0,016

La evaluacin de la incertidumbre indica que
la incertidumbre relativa para la repetitividad es
igual a 0,015, mostrando que
la mayor componente proviene
de las componentes aleatorias del proceso,
por ejemplo del proceso de mineralizacin,
destilacin, entre otras

Frmulas utilizadas en los clculos

La desviacin standard para una muestra analizada por
duplicado es

si =

d2i
2

donde di es la diferencia
entre los dos valores

La desviacin standard relativa es:

s ir =

si
xi

donde x i es el valor
promedio para esa muestra

Frmulas utilizadas en los clculos

Para k muestras puede calcularse una desviacin standard relativa
global
s2ir
srg =
k
Esta frmula se utiliz para calcular la desviacin standard relativa
para los duplicados y para los clculos sobre el factor en la titulacin.
Para una misma muestra analizada varias veces por duplicado se
encontr que

s
srg

2
i

k
x

Otra metodologa
En caso de no contar con un material de
referencia, se trata de utilizar una muestra de
control de contenido de nitrgeno conocido.
En este ejemplo se utiliz glicina, un aminocido
dnde se supone que el nitrgeno se comportar
de manera similar que el de la protena.
Por tratarse de una sustancia con pureza
certificada se conoce la concentracin de
nitrgeno

Dado que el valor del promedio es el mismo, es de esperar que resulte

una igualdad, pero la pequea diferencia numrica encontrada puede
atribuirse a que los valores de promedio utilizados para calcular las
distintas sir no son siempre coincidentes con el promedio general.

Otra metodologa
Se evalu la recuperacin utilizando la
glicina, obtenindose una recuperacin
media de 99,77%.
Con sta muestra se construyeron los
grficos de control que se muestran a
continuacin.
Con este mecanismo se comprueba que
el proceso est bajo control estadstico.

Ejemplo

Debe demostrarse que los resultados obtenidos evaluando la

incertidumbre con cualquier metodologa son adecuados.

Se comparan aqu los valores obtenidos

por el laboratorio organizador
con los de los participantes.

Una manera de demostrarlo es

participando en interlaboratorios o bien
cotejando los resultados con los obtenidos por otros
laboratorios, para lo cual ser necesario
contar con los correspondientes informes.

Ejemplo

Ejemplo

Ensayo interlaboratorio para anlisis de carne - Determinacin de nitrgeno

Resumen de los resultados obtenidos

Datos enviados por los participantes
5
4,8

Parmetro

4,6
4,4

Valor
referencia
(g/100g)

Incert

Valor medio
interlab
(g/100g)

Desv
est.interlab

Valor medio informado (g/100g)

4,2
4
3,8

Humedad

53,96

0,74

54,36

0,79

Ceniza

3,01

0,13

3,12

0,11

Grasa

17,14

0,38

17,06

1,2

Nitrgeno

3,69

0,11

3,66

0,11

3,6
3,4
3,2
3
2,8
2,6

Valor medio
2,4

Valor de referencia
v ref interlab +/- sL

2,2

Valor medio interlaboratorio

2
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74
nparticipante

Grfico de control o grfico de Shewhart

Ejemplos de situaciones fuera de control

Combinacin de incertidumbres estndar

Use of uncertainty information in compliance

assessment
Todas las fuentes de incertidumbre son
proporcionales a la concentracin del mesurando
y entonces pueden ser tratadas como una
desviacin estndar relativa

http://www.eurachem.org/guides/Interpretation_with_expanded%20u
ncertainty_2007_v1.pdf

DECISIN DE LA COMISIN DE LAS COMUNIDADES

EUROPEAS
(12 de agosto de 2002)
Por la que se aplica la Directiva 96/23/CE del Consejo
en cuanto al funcionamiento de los mtodos analticos
y la interpretacin de los resultados
http://www.cde.ua.es/dsi/elpdf/l_22120020817es00080036.pdf

Comunidad Europea

Antes de establecer cualquier especificacin debe

tenerse en cuenta que el valor de un parmetro
especfico:

Regulacin EEC N 315/93

Directiva 2002/32/EC
http://ec.europa.eu/food/food/chemicalsafety/contaminan
ts/report-sampling_analysis_2004_en.pdf

Puede depender del mtodo de anlisis usado

Siempre depende del mtodo de muestreo utilizado
para verificar el cumplimiento con las
especificaciones.

Nmero de cifras significativas:

Es necesario tener en cuenta el n de cifras significativas que
especifica cualquier legislacin y el n de cifras significativas usadas
cuando se expresa un resultado analtico.
Algunos analistas expresan el resultado con el mismo n de cifras
significativas que la especificacin.
Es necesario establecer un criterio uniforme. Ejemplo:

Especificacin

Rango donde debe

caer un resultado
satisfactorio

1
1,0
1.00

0 a 1,4
0 a 1,04
0 a 1,004

Cuando se desarrolla una legislacin debe tenerse en cuenta

como mnimo:

Las unidades en que debe expresarse un resultado

El n de cifras significativas que debe contener el informe
La interpretacin de un resultado analtico en relacin con
el lmite de la especificacin
La exactitud esperada para el mtodo que probablemente
se use y por lo tanto evaluar si el n de cifras significativas
expresadas en la legislacin es realista

En caso de alguna accin judicial solo se

tomarn acciones si el analista est seguro (ms
all de dudas razonables), que el lmite ha sido
excedido.

La legislacin que contiene niveles mximos debe

siempre tener en cuenta como deben expresarse e
interpretarse los resultados analticos.

INCERTIDUMBRE
Significa duda.
Cuando se aplica a una medicin es un parmetro
que caracteriza la dispersin de valores que pueden
ser atribuidos razonablemente al mesurando.
Definida de esta manera, la incertidumbre indica
un intervalo de valores que, segn el criterio
del operador, pueden ser razonablemente
atribuidos al mesurando.

Resultados precisos
pero no justos
El error se define como la diferencia entre un
resultado individual y un valor verdadero y es
por lo tanto un valor nico.

NO HAY
EXACTITUD !

Resultados ni precisos
ni justos

Resultados justos
pero no precisos

NO HAY EXACTITUD !

NO HAY EXACTITUD !

Resultados precisos
y justos

HAY EXACTITUD !

desviaci
desviacin standard
2

Algunos conceptos estadsticos bsicos

Nmero de determinaciones independientes es el nmero

de valores que se utilizaron para calcular el promedio

s=

(x x )
i

n 1

promedio = 1/n xi
La estimacin de la desviacin estndar se define por
en Excel

s =

(xi x )2
n 1

en las calculadoras de
bolsillo

desvest

n-1

10

DISTRIBUCION NORMAL

16%

+
68%

2
16%

Desviacin estndar del promedio de n mediciones

El promedio de n mediciones es el mejor estimador de

la magnitud a medir y si se le quiere asignar una
incertidumbre resulta:

sx = s

2,25%

95,5%

+2
2,25%

Incertidumbre de medicin y cumplimiento de

las especificaciones

Lmite de
control
superior

Resultado e
incertidumbre
fuera del lmite

Resultado fuera
del lmite
Incertidumbre
dentro

Resultado
dentro del
lmite pero
incertidumbre
fuera

Resultado e
incertidumbre
dentro del
lmite

www.ILAC.org Guia G8

Ensayos cualitativos
En un sentido amplio proveen un declaracin de aptitud
o una categorizacin del producto que se analiza.
A partir de los resultados por lo general se toman
decisiones.

Si existe un lmite permitido para alguna

propiedad de un determinado producto y se
lo clasifica como que pasa y esta
clasificacin es incorrecta esto constituye un
riesgo.
Es necesario poder asegurar que los
mtodos de ensayo producen resultados con
bajo riesgo de clasificacin incorrecta
Por lo general se puede dar una indicacin
de la probabilidad de que una clasificacin
sea correcta.

11

Incertidumbre en ensayos cualitativos

Los ensayos cualitativos por lo general conducen a

aseveraciones como pasa / no pasa o presente /
ausente

En estos casos puede suceder que haya falsos
positivos o falsos negativos

Pueden distinguirse dos situaciones cuando se habla de

proporcin de falsos negativos
La probabilidad o frecuencia de respuestas negativas
cuando la respuesta debiera ser positiva. Es decir, la
fraccin de positivos verdaderos que dan respuestas
negativas.
La frecuencia de respuestas negativas incorrectas en una
serie de ensayos, es decir, la fraccin de la poblacin de
ensayos que dan resultados falsos negativos

Error beta ()
Probabilidad de que la muestra analizada sea
realmente no conforme aunque se haya obtenido
una medicin conforme (decisin de falso
conforme)

Error alfa (
)

Lmite de decisin (CC

)
Lmite en el cual y a partir del cual
se puede concluir con una
probabilidad de error que una
muestra no es conforme

Probabilidad de que la muestra analizada sea

realmente conforme aunque se haya obtenido una
medicin no conforme ( decisin de falso no
conforme)

Capacidad de deteccin (CC)

Contenido mnimo de un analito que puede ser detectado,
identificado o cuantificado en una muestra, con una
probabilidad de error
En el caso de analitos para los que no se ha establecido un
lmite permitido, la capacidad de deteccin es la
concentracin mnima en la que un mtodo puede
detectar muestras que contengan ese analito con una
certeza estadstica de 1-.
En el caso que se haya establecido un lmite permitido, la
capacidad de deteccin es la concentracin en la que un
mtodo puede detectar lmites de concentracin
permitido con una certeza estadstica de 1-

12

En una medicin analtica existe un umbral

de concentraciones por debajo del cual
la identificacin positiva se hace no confiable:

El conocimiento de la incertidumbre de los resultados

de una medicin es esencial para la interpretacin de
los resultados.

Concentracin
gg-1

No. de
replicados

resultados
positivos/negativos

Si no hay una declaracin cuantitativa de la

incertidumbre es imposible decidir :

200

10

10/1

100

10

10/1

Si las diferencias observadas entre resultados refleja

algo ms que una variabilidad experimental

75

10

5/5

50

10

1/9

25

10

0/10

Si las muestras cumplen o no con leyes que estn

basadas en lmites.

Decisiones incorrectas tomadas sobre esta base

pueden resultar en innecesarios gastos en la
industria, aplicacin incorrecta de una ley o
consecuencias adversas en la salud de la
sociedad.

Frasco
1
2
3

pH
6,25
6,25
6,26

promedio

6,25

0,01

Especificacin: entre 5,0 y 7,5

Comprimido

Contenido
(mg)

% sobre el valor Promedio

declarado
(%)

101,1

101,1

102,0

102,0

101,6

101,6

98,7

98,7

100,6

100,6

96,3

96,3

99,0

99,0

102,2

100,2

101,5

101,5

10

100,9

100,9

100,2

s (%)

s relativa

1,74

1,74

96,74

100,2

103,6

Especificacin: La cantidad de principio activo en cada una de las 10

unidades de dosificacin debe encontrarse en el intervalo 85,5 a 115,0 del
valor declarado. Desviacin estndar relativa menor o igual al 6%

13