PROPAGACION CLONAL DE CARICA PAPAYA L. MARADOL.

MATERIALES Y METODOS.TABLA DE TRATAMIENTOS

La presente investigacin se realizara con la variedad de papaya Maradol Roja.
Como material vegetal se emplearon semillas para la germinacin.
El experimento se desarrollara en dos fases:
a) Germinacin in vitro;
b). Propagacin clonal mediante Meristemos
En la primera fase se utilizara semillas de papaya cv. Maradol, con 60 das de
poscosecha, esterilizadas con hipoclorito de sodio al 4 %; adems del medio MS,
3 % de sacarosa, 0.6 % de agar, pH 5.8 0.01, fotoperodo de 16 horas luz y
28C. La segunda fase consistir en la induccin de brotes mltiples procedentes
de plntulas germinadas in vitro.
Establecimiento de material vegetal in vitro
Desinfeccin de las semillas.
Para la desinfeccin se empleara el procedimiento reportado por Vegas et al.
(2003), lavando primero los frutos con jabn lquido. En la cmara de flujo laminar
horizontal se realiz la desinfeccin superficial de los frutos mediante la aspersin
de alcohol isoproplico 70%. Sobre papel aluminio estril se hizo un corte
longitudinal a cada fruto, eliminando previamente los extremos con un cuchillo
para extraer las semillas con ayuda de pinzas. Luego de colocar estas semillas en
cpsulas de Petri estriles se les retirara la sarcotesta usando pinzas, para lograr
la escarificacin. Las semillas fueron desinfectadas sumergindolas en hipoclorito
de sodio 2% durante 20min y luego en alcohol isoproplico 70% (5min). A las
semillas desinfectadas se le realizaran tres lavados de 5min con agua destilada
estril y se colocaran sobre servilletas estriles para su secado con el aire de la
cmara de flujo laminar.
Siembra de semillas en medio de cultivo semislido.
Para el establecimiento de las semillas in vitro se realizara un corte en cada
extremo y otro longitudinal a cada semilla, con la finalidad de exponer el embrin
al medio de cultivo (Vegas et al., 2003), y se sembrara en tubos de ensayo, con
20ml de medio MS semislido, esterilizado a 121C y 15 lbs de presin por 20min.
Los tubos fueron tapados con tapas plsticas, y se colocaron en oscuridad a 25

2C. Despus de 15 das se descartaran las plntulas contaminadas con

bacterias u hongos. Se realizara una siembra, de 100 semillas.
Anlisis estadstico
Se registraran los porcentajes de semillas germinadas in vitro.
Una vez obtenida las plntulas con un tamao adecuado se proceder a las
fases:
Fase de establecimiento de meristemos.Luego de desinfectar las yemas apicales, con la ayuda de un microscopio
estereoscopio se realizara la diseccin de meristemos. Los explantes vegetales se
colocaran sobre una placa Petri (148 x 120 mm.), se sujetaran con pinzas y con
ayuda del bistur se eliminaran los primordios foliares hasta dejar el meristemo
descubierto. Despus se realizara un corte en la base del meristemo y se
introducir al tubo de ensayo que contenga el medio de cultivo. Con la finalidad de
obtener el medio de cultivo adecuado que nos permita la diferenciacin de los
meristemos se formularon diversos tratamientos considerando los resultados
obtenidos por Alvarado (1992) y Baca (2002), empleando el medio de cultivo basal
Murashige y Skoog (MS-1962) con diferentes concentraciones de BAP, ANA, AIA,
AG3 y adenina (Tabla 1).
El pH del medio de cultivo fue ajustado a 5,6. Se realizarn evaluaciones cada 7
das y la evaluacin final se realizara 49 das despus de la siembra.

Fase de multiplicacin.Para determinar el medio de cultivo ms adecuado para la multiplicacin de las

plntulas, los tratamientos planteados consistieron en medio de cultivo base MS
con diferentes concentraciones de BAP, KIN, ANA, AIA,
AG3 y adenina (Tabla 2). Se realizaran evaluaciones cada 7 das y la evaluacin
final se realizara 35 das despus de la siembra.

Fase de enraizamiento.Para determinar el medio de cultivo adecuado para el enraizamiento de las

plntulas se formularon diversos tratamientos empleando el medio base MS con
diferentes concentraciones de IBA, BAP, ANA y adenina (Tabla 3). La evaluacin
se realizara 21 das despus de la siembra.

TABLA DE TRATAMIENTOS
Tabla 1. Medios de cultivo para la fase de establecimiento de meristemos.
Tratamiento Medio + Hormonas
TR0 MS
TR1 MS + BAP 0,5 mg.L-1 + ANA 0,3 mg.L-1
TR2 MS + BAP 0,5 mg.L-1 + ANA 0,3 mg.L-1 + AG3 0,3 mg.L-1
TR3 MS + BAP 0,5 mg.L-1 + ANA 0,3 mg.L-1 + Adenina 10 mg.L-1
TR4 MS + BAP 0,5 mg.L-1 + AIA 0,5 mg.L-1
TR5 MS + BAP 0,5 mg.L-1 + AIA 0,5 mg.L-1 + AG3 0,3 mg.L-1
TR6 MS + BAP 0,5 mg.L-1 + AIA 0,5 mg.L-1 + Adenina 10 mg.L-1
Tabla 2. Medios de cultivo para la fase de multiplicacin.
Tratamiento Medio + Hormonas
TA 0 MS
TA 1 MS + BAP 0,5 mg.L-1 + AIA 0,3 mg.L-1 + AG3 0,3 mg.L-1 + Aden. 5 mg.L-1
TA 2 MS + BAP 0,5 mg.L-1 + AIA 0,5 mg.L-1 + AG3 0,3 mg.L-1
TA 3 MS + BAP 0,5 mg.L-1 + ANA 0,3 mg.L-1 + AG3 0,3 mg.L-1+ Aden. 5 mg.L-1
TA 4 MS + BAP 0,5 mg.L-1 + ANA 0,5 mg.L-1 + AG3 0,3 mg.L-1
TA 5 MS + KIN 1 mg.L-1 + AIA 0,3 mg.L-1 + AG3 0,3 mg.L-1 + Adenina 5 mg.L-1
TA 6 MS + KIN 1 mg.L-1 + AIA 0,5 mg.L-1 + AG3 0,3 mg.L-1
TA 7 MS + KIN 1 mg.L-1 + ANA 0,3 mg.L-1 + AG3 0,3 mg.L-1 + Adenina 5 mg.L-1
TA 8 MS + KIN 1 mg.L-1 + ANA 0,5 mg.L-1 + AG3 0,3 mg.L-1
Tabla 3. Medios de cultivo para la fase de enraizamiento.
Tratamiento Medio + Hormonas
TM0 MS
TM1 MS + IBA 3 mg.L-1 + ANA 0,5 mg.L-1
TM2 MS + ANA 1 mg.L-1
TM3 MS + IBA 3 mg.L-1
TM4 MS + IBA 3 mg.L-1 + Adenina 5 mg.L-1
TM5 MS + IBA 2 mg.L-1 + BAP 0,5 mg.L-1 + AIA 0,5 mg.L-1
TM6 MS + IBA 2 mg.L-1 + BAP 0,5 mg.L-1 + ANA 0,5 mg.L-1

BIBLIOGRAFIA

Propagacin clonal de plantas lite de Carica papaya L. usando

microinjertacin in vitro e in vivo Rutsarai Nava, Ariadne Vegas Garca,

Carlos Marn R. y Zaith Villegas

Propagacin in vitro de Carica papaya var. PTM-331 a partir de meristemos

apicales; Reynaldo Solis L.1*, Julio Olivera S.2 y Rafael S. La Rosa L.1
GERMINACIN IN VITRO Y PROPAGACIN CLONAL DE PAPAYA
MARADOL; Jorge A. Romero R1; Jos A. Rangel L2: Ral Rodrguez G3;
Francisco Chabl M2: Estefana Alvarado B1; Maria

MICROPROPAGACIN A PARTIR DE EMBRIONES CIGTICOS DE LA

PAPAYA

(Carica papaya L.) var. 'MARADOL ROJA'; Vctor R. Medero

Vega*, Yanelis Bravo Corrales, Milagros Basail Prez