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UREA -S

Presentacin

05409

2x 50ml

Reactivo para la determinacin Enzimtica


de Urea en suero, plasma y orina.

PRINCIPIO
La urea es el producto final mayoritario del metabolismo del
nitrgeno proteico en los seres humanos. Constituye la fraccin
ms abundante del nitrgeno no proteico. La urea se produce en
el hgado y es excretada por la orina. Su elevacin es producto
de trastornos en la funcin renal o heptica, problemas dietticos,
diabetes y otros.

PROCEDIMIENTO
Llevar el reactivo a la temperatura que se realizar el ensayo. Las
pipetas a utilizar deben estar limpias y libres de residuos para no
contaminar el reactivo.
Para la determinacin de Urea en Orina, diluir la muestra de Orina
1:50 (0.1 ml Orina + 4..9 ml agua desmineralizada) Multiplicar el
resultado por 50.

La urea presente en la muestra, es desdoblada a amonio por


accin de la enzima ureasa, segn la proposicin de Faucet y
Scott.
(NH2)2CO + 2 H20

Cdigo

UREASA

2NH3 + C02 + H20

El amonio producido reacciona con salicilato e hipoclorito en


ambiente alcalino, formndose un complejo de color verde. La
intensidad del color producido es directamente proporcional a la
cantidad de urea presente en la muestra, y su absorbancia se lee
a 578 nm (560-620).

PATRON

MUESTRA

Ureasa

50 l

50 l

50 l

Reactivo
Salicilato

1 ml

1 ml

1 ml

Mezclar.
Patrn

--

10 ul

--

Muestra

--

--

10 ul

Incubar 3 minutos a 37C o 10 minutos a temperatura


ambiente.

CONTENIDOS
UREASA Suspensin
Ureasa
Estabilizantes y preservantes no reactivos

Reactivo
Hipoclorito

>50 mM
c.s.

Acido Saliclico
Nitroprusiato de Sodio
Tampn Fosfato pH 6.9

5 mM
5 mM
100 mmol/l

200 mM
10 mM

UREA
BUN

1 ml

1 ml

Leer las absorbancias a 578 nm (560620nm) llevando a cero el


espectrofotmetro con el blanco de reactivo. El color resultante es
estable por lo menos 60 minutos.

REACTIVO HIPOCLORITO
Sodio Hidrxido
Sodio Hipoclorito

1 ml

Mezclar, incubar 5 minutos a 37C o 10 minutos a temperatura


ambiente.

REACTIVO SALICILATO

PATRON
Solucin estabilizada equivalente a:

BLANCO

CLCULOS

66 mg/dl
30 mg/dl

SUERO, PLASMA u ORINA


PRECAUCIONES Y ADVERTENCIAS

Conservado entre 2C y 8C y protegido de la luz, estable


hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta.

Los reactivos contienen menos del 0.1% de azida sdica. La


azida sdica puede reaccionar con tuberas de cobre y plomo
formando compuestos explosivos. Las regulaciones locales
para el desecho de compuestos peligrosos deben ser
respetadas, descartar con abundante agua.

FACTOR =

____

66

_______

Absorbancia Estndar
Urea (mg/dl)= Factor x Abs. Muestra
CONCENTRACION DE UREA EN ORINA DE 24 HORAS

MATERIALES
ADICIONALES
REQUERIDOS
NO
SUMINISTRADOS

Bao termoregulado.

Espectrofotmetro o foto colormetro de filtros capaz de medir


absorbancia a 578nm. (rango 560-620 nm)

Pipetas automticas.

Cronometro y/o timer.

Urea en Orina = mg/dl en Orina X Vol. De Orina en 24 horas X 0.01


(mg / 24 horas)

NOTA: Para expresar los valores obtenidos como Nitrgeno Ureico


(mg/dl) multiplicar el valor obtenido por 0.455.

VALORES DE REFERENCIA

MUESTRAS
Suero, Plasma u Orina (diluida 1:100). El plasma debe obtenerse
utilizando anticoagulantes libres de amonio. No utilizar fluoruro
pues inhibe la accin de la enzima ureasa. La urea es estable en
el suero por lo menos 24 horas a temperatura ambiente, varios
das entre 2 y 8C, y hasta 3 meses a -20C.
La orina de 24 horas debe ser recogida en un frasco que
contenga 2.0 ml de Acido Clorhdrico (HCL) Solucin al 50% y
centrifugar antes de su uso como muestra.

Suero o plasma:

Urea:
10 a 50 mg/dl
Nitrgeno Ureico: 4.5 a 22.7 mg/dl

Orina:

Urea:
15 a 30 mg/24 hrs
Nitrgeno Ureico: 7 a 14 mg/24 hrs

Nota: Se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios


intervalos de referencia.

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2007-06v4.0

UREA -S

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Reactivo para la determinacin Enzimtica


de Urea en suero, plasma y orina.

CONTROL DE CALIDAD
Pueden ser empleados todos los sueros con valores de Urea
determinados por este mtodo. Nosotros recomendamos el uso
de nuestro suero de origen animal IHR Diagnstica para verificar
la funcionalidad del procedimiento de medida. Cada laboratorio
debe establecer su propio programa de control de calidad interno,
as como procedimientos de correccin en el caso de que los
controles no cumplan con las tolerancias aceptables.
CARACTERISTICAS DE DESEMPEO
LINEARIDAD
La reaccin es lineal hasta 300 mg/dl. Para valores superiores, diluir la
muestra con suero fisiolgico y el resultado obtenido se multiplica por el
factor de dilucin
REPETITIVIDAD
Concentracin media
14 mg/dl
50 mg/dl

S.D.
0.41
1.63

C.V.%
2.83
3.25

REPRODUCIBILIDAD
Concentracin media
14 mg/dl
50 mg/dl

S.D.
0.52
1.96

C.V.%
3.54
3.80

LIMITE DE DETECCION
El limite de deteccin fotomtrica hallado fue 0.001 Abs equivalente a 0.2
mg/dl.
EXACTITUD
Una comparacin entre este procedimiento y un reactivo similar usando
110 muestras entre 8.0 y 55 mg/dl produjo un ecuacin de regresin lineal
de y= 1.00x -0.47 con un coeficiente de correlacin (r) igual a 0.998.
INTERFERENCIAS
Valores elevados de hemoglobina hasta 80 mg/dl, Bilirrubina hasta 32
mg/dl, triglicridos hasta 700mg/dl producen interferencias significativas
(<5%) en este mtodo. Otros medicamentos y sustancias pueden
interferir4 .
BIBLIOGRAFA
1. Kaplan, A. and Teng, L.L. in Selected Methods of Clinical Chemistry, Vol. 9, Ed. By W.R. Faulkner and S. Meites,
AACC, Washington, pp 357-363 (1982).
2. Tietz, N.W., textbook of Clinical Chemistry, W.B. Saunders Co., Philadelphia, p.1270-1271 (1986).
3. Morin, L.G., Clin. Chem. 20:51 (1974).
4. Henry, R.J., Clinical Chemistry, Principles and Technics. 2 Ed. Harper and Row Publisher. New York, 1974.
5 Young D.S., et al., Clin Chem. 21:1D 1975.
th
6.Young D.S. Effects of drugs on clinical laboratory tests, 4 Ed AACC, 1995

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