Guevara Fonseca J, Matuz Mares D, Vzquez Meza H

(eds.) Mensaje Bioqumico, Vol. XXXVI, 65 81, Depto

de Bioqumica, Facultad de Medicina, Universidad
Nacional Autnoma de Mxico. C. Universitaria, Mxico,
DF. (http://bq.unam.mx/mensajebioquimico)
ISSN-0188-137X

LA MITOCONDRIA EN EL CENTRO DEL UNIVERSO CELULAR

THE MITOCHONDRIA IN THE CELLULAR UNIVERSE CENTER
Marietta tuena de Gmez-Poyou y Concepcin Jos-Nuez
Departamento de Bioqumica y Biologa Estructura, Instituto de Fisiologa Celular, UNAM.
Ciudad Universitaria, CP 04510, Mxico, DF.
mtuena@ifc.unam.mx

Resumen.
Inicialmente las mitocondrias se estudiaron en funciones relacionadas con la
bioenergtica como la fosforilacin oxidativa, el ciclo de los cidos tricarboxlicos, la oxidacin y la oxidacin de ciertos aminocidos. En 1960 se describi que contena
DNA y que haba enfermedades relacionadas con mutaciones de ste; adems se
acept que su origen era por endosimbiosis. Posteriormente se descubri su
importante papel en la muerte celular por apoptosis y la mitofagia. Sus funciones en
localizaciones fuera de la mitocondria abrieron un nuevo y excitante campo de
investigacin.
Su relacin con la regulacin de la maquinaria epigentica y la expresin
gnica y su efecto primario sobre procesos patolgicos como el envejecimiento y el
cncer ocupan ahora una parte muy importante de los trabajos de investigacin sobre
las mitocondrias.
Abstract
The initial studies of mitochondria dealt with functions related to bioenergetic
processes, such as oxidative phosphorylation, operation of the tricarboxylic acid cycle,
oxidation of fatty acids and amino acid oxidation. In 1960, it was discovered that
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mitochondria have ADN and that there are diseases related to alterations of this ADN. It
was also proposed that mitochondria arose from endosymbiotic events. In later years it
was found that mitochondria play important roles in apoptosis and mitophagy. The
functions of mitocondria on events that occur on the outside of mitochondria has
opened a new and exciting field of research.
The relation of mitochondria with the epigenetic machinery, genetic expression
and its participation on aging processes and some pathological process, such as
cancer, is now an active field of research.
Introduccin.
La mitocondria es un organelo que controla los destinos de las clulas mas all
de la sntesis del ATP. Distribuye la energa y el poder reductor e integra los caminos
metablicos. Regula la maquinaria epigentica, la expresin gnica, los factores de
transcripcin y las vas de sealizacin.
La mitocondria es una planta de energa autoregulable. Acta como un centro de
recepcin de seales finas del universo celular y responde a las necesidades
metablicas de todos los componentes de la clula de una manera integrada y
eficiente.
En este trabajo se intenta revisar las mltiples funciones que realiza la mitocondria que
se han ido descubriendo a medida que las investigaciones han progresado,
demostrando su gran capacidad de integracin de todas las funciones vitales de la
clula normal y en numerosas condiciones patolgicas.
El origen de las mitocondrias. El big-bang evolutivo.
La teora de la endosimbiosis implica la fusin de una arqueobacteria anaerbica
o protoeucarionte, el husped, con una -proteobacteria capaz de respirar, el
simbionte. Este hecho represent el big-bang en la evolucin de los eucariotes.
Durante este evento hubo desaparicin de genes redundantes en el simbionte y su
transferencia al husped. El simbionte, ancestro de las mitocondrias, es un procarionte
que perdi su libertad, pero gan muchas cosas a cambio. Se ahorr la energa de
producir el 90% de sus protenas que son codificadas en el ncleo por el DNA nuclear,
traducidas en los polirribosomas citoplsmicos e introducidas a las mitocondrias por
sistemas de transporte activo y acarreadores especficos, su entrada a la mitocondria
es seleccionada a travs de un pptido seal, que es procesado por proteasas
especficas y ya maduro es insertado en los diferentes compartimentos y membranas
del organelo, su transporte depende de ATP y del potencial de membrana.
En resumen, la mitocondria experiment una evolucin reductiva de su genoma
ancestral que dio como resultado un microgenoma, mantenido por el proteoma del
eucarionte husped.
La integracin de los genes del simbionte al ncleo, fue paulatino y sigue
existiendo an en especies actuales. A esto se debe que los genes nucleares que
codifican a las protenas mitocondriales se encuentren con frecuencia repartidos en el
genoma nuclear y no formando operones.
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El evento de fusin del simbionte solo ocurri una vez en la evolucin, el proceso
se denomina monofiltico. Las clulas de eucariontes que carecen de mitocondrias, las
perdieron en el curso de la evolucin. En la naturaleza existen ejemplos: los mitosomas
y los hidrogenosomas que evolucionaron a partir de las mitocondrias.
Dinmica mitocondrial.
Estructuralmente, las mitocondrias estn formadas por dos envolturas
membranales: la membrana externa y la interna. La composicin de lpidos y protenas
es diferente para cada una de ellas. Las dos membranas limitan tres espacios acuosos:
el intermembranal, el intracrestal y la matrz mitocondrial.
La membrana externa contiene, entre otras protenas, una permeasa
caracterstica, la porina canal aninico dependiente de voltaje (VDAC) que permite la
entrada y salida de protenas y solutos. Durante la muerte celular por apoptosis y en
condiciones de estrs oxidativo se asocia a la translocasa de ADP-ATP y a un
acarreador de calcio formando el poro de transicin de permeabilidad (PTP)
producindose una salida masiva de protenas, depolarizacin de la membrana y la
muerte celular.
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La membrana interna contiene protenas especializadas para el transporte de

electrones: el complejo I (NADH /ubiquinonona xidorreductasa), el complejo II
(succinato /ubiquinona xidorreductasa), el complejo III bc1 (ubiquinol/citocromo c
xidorreductas) y el complejo IV (citocromo c oxidasa). Todos ellos se asocian entre s
formando supercomplejos llamados respirosomas.
Las protenas asociadas al complejo V (ATP sintasa) del complejo de la
fosforilacin (F1F0) se asocian a los acarreadores de ADP/ATP y de fosfato formando
una unidad: el ATP sintasoma. El complejo V se oligomeriza formando dmeros y
oligmeros de stos (tetrmeros, hexmeros, etc.) que estructuran las crestas
tubulares, de preferencia en las puntas de stas.
Las crestas tubulares estn unidas a la membrana interna por una zona estrecha
o pi de cresta. Dentro de las crestas tubulares la distribucin de protenas es variable
y dinmica. En su interior se compartamentaliza el ADP y los H +.
Por otro lado, se ha estudiado la funcionalidad de los oligmeros del complejo V
y si ste acta como monmero oligmero durante su funcin cataltica. Se han
encontrado protenas que oligomerizan y que residen en el segmento hidrofbico de la
enzima, por ejemplo: las subunidades e y g y una protena localizada en el pi de
la cresta: la mitofilina que monomeriza el complejo V [1]. Esto parece sugerir que la
dinmica de conversin de oligmeros a monmeros puede influir en la funcionalidad
de la enzima. Esta membrana tiene un alto contenido de cardiolipina y bajo en
colesterol. La membrana interna tiene la mayor proporcin de protenas/lpido que
cualquier otra membrana de la clula: 2.85 en la interna y 1.66 en la membrana
externa. Con 75% de protena y 25% de lpidos. Se ha calculado que la superficie
membranal que ocupan las crestas tubulares en una mitocondria de corazn es de 250
metros cuadrados por gramo de protenas mitocondriales.
Los compartimentos acuosos entre las membranas interna y externa: el espacio
intermembranal, contiene protenas acarreadoras de sustratos entre otras, el
intracrestal, que es el espacio interior de las crestas tubulares, complejos acarreadores
de protenas y sustratos como el ADP y el fosfato que se requieren para la funcin de
sntesis de ATP. La matrz, que es el espacio limitado por los pliegues de las crestas,
muestra cambios drsticos de volumen durante los estados funcionales de la
mitocondria. En el estado 4, en presencia de fosfato y sustratos oxidables (malato,
succinato, piruvato, etc.) con la cadena funcionando y el potencial de membrana al
mximo, la mitocondria expande la matrz mitocondrial y reduce el espacio intracrestal,
a este macroestado estructural se le conoce como una conformacin ortodoxa [2], si se
aade ADP se obtiene una aceleracin del consumo de oxgeno y un descenso en el
potencial de membrana que se utiliza para sintetizar el ATP. A este estado se le
denomina estado 3 y se acompaa de un macroestado estructural conocido como
condensado, la matrz mitocondrial se contrae y el espacio intracrestal se expende
permitiendo el libre flujo de sustratos para obtener la mxima capacidad de sntesis del
ATP. Esta compartamentalizacin y especializacin del contenido de protenas de las
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membranas permite que la mitocondria lleve a cabo con gran eficiencia sus numerosas
funciones.
Formacin de redes por fusin y fisin.
Las mitocondrias pueden interaccionar entre ellas formando redes dinmicas:
por fusin, divisin y tubulacin. Una posible funcin de estos eventos es la
homogenizacin del material gentico heteroplsmico heredado despus de la
fecundacin a uno homoplsmico con material gentico menos heterogneo o
completamente homogneo. Adems, puede funcionar como una medida de proteccin
del DNA mitocondrial contra el dao oxidativo y durante la muerte celular por apoptosis.
Tambin se ha supuesto que contribuye a seleccionar nuevas funciones que sean
evolutivamente ms favorables y a desaparecer otras que resulten obsoletas.
La tubulacin, que es la formacin de las crestas tubulares para obtener la
mxima eficiencia cataltica del complejo V, est ligada a la distribucin de los
nucleoides mitocondriales [3] y se ha asociado a la importacin de las protenas
codificadas por el DNA nuclear. Es la forma funcional de las crestas mitocondriales que
proporcionan mayor superficie membranal dentro del volumen mitocondrial. Mediante
estos continuos cambios se forma un retculo dentro de la clula movindose adosadas
al citoesqueleto, por los microtbulos lo que les permite distribuirse dentro de la clula
haciendo ms eficiente la utilizacin del gradiente de H + y manteniendo la homeostasis
del calcio.
Las mitocondrias presentan distintas morfologas dependiendo de la estirpe
celular a la que pertenezcan. Su nmero de mitocondrias vara por clula dependiendo
de los requerimientos de energa de la misma clula, siendo los tejidos ms ricos en
mitocondrias el msculo cardaco, el msculo esqueltico y el cerebro. La
permeabilidad de la membrana interna es limitada y muy selectiva, por lo que se
requieren de sistemas especializados de transporte de sustratos, iones y para la
continua y activa importacin de protenas.
Actan como osmmetros, se hinchan expandiendo el espacio de la matrz, con
la consecuente contraccin del espacio intracrestal, y se contraen reduciendo el
espacio de la matrz y expandiendo los espacios intracrestales. En los hepatocitos las
mitocondrias presentan una especializacin funcional, son ms glicolticas cuando
estn rodeando los espacios periportales y ms oxidativas las que rodean a la arteria
heptica. Por otro lado, durante el ciclo celular, las perinucleares tienen un potencial
membranal menor que las adosadas a la membrana plasmtica.
Las membranas de las mitocondrias establecen una comunicacin estrecha con
las membranas de otros organelos, que junto con el retculo sarcoplsmico regulan las
pozas de calcio intracelulares e intercambio de lpidos con las membranas del aparato
de Golgi.
Protenas moonlight del complejo V en condiciones normales y patolgicas.
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Existen protenas, cuyos ejemplos han aumentado notablemente, que se
originan de un mismo gene pero que en la clula pueden desempear distintas
funciones, estas protenas se conocen como moonlighting a semejanza de los
trabajadores que desempean distintos trabajos durante el da y la noche. Muestran el
ingenio de que es capaz la naturaleza, porque diversifican las funciones de las
protenas sin expandir el genoma, son un motor de la evolucin para desarrollar nuevas
funciones utilizando las viejas estructuras [4].
Son la consecuencia de una interaccin entre las protenas vecinas que se
encuentran muy concentradas en los distintos compartimentos celulares. Mostrando
que la clula moderna ha evolucionado a un sistema altamente sofisticado, organizado
y con un nuevo nivel de complejidad, capaces de establecer relaciones entre vas
metablicas y caminos de regulacin totalmente insospechadas.
La primera sospecha de su existencia fue la observacin de que el genoma
humano codifica para pocas protenas y tiene que cumplir con las enormes funciones
que requiere un organismo tan complejo. Una opcin era pensar que sus protenas
pudieran realizar ms de una funcin, sin relacin con su funcin original, actuando de
manera autnoma y utilizando los mismos dominios o subunidades de la protena
original, pero en sitios de la protena fuera del sitio cataltico, que estuvieran expuestos
al solvente, en nuevos sitios de fijacin para nuevos ligandos o para otras protenas.
Los mecanismos que emplean son mltiples, frecuentemente se localizan en
diferentes compartimentos celulares, organelos o en diferentes membranas. Pueden
ser expresados constitutivamente en diferentes cantidades dependiendo del
compartimento celular. Generalmente son protenas con estructuras complejas,
oligomricas y multifuncionales, formadas por diferentes subunidades y que han sido
conservadas durante la evolucin en toda la escala filogentica.
El segmento F1F0 de la H+ ATP sintasa, cumple con creces las caractersticas
requeridas para ser un candidato a moonlitgh. Es un complejo proteico presente en
casi todos los organismos, de gran complejidad estructural, compuesto, en los
eucariotes, por cuando menos 16 subunidades, con estructuras que realizan dos
funciones diferentes: el segmento F0, de naturaleza hidrofbica, est embebido en la
bicapa de la membrana interna mitocondrial y realiza la funcin elctrica del complejo:
transporta cargas positivas de la cara externa de la membrana interna a la matrz (H+
Na+) y el segmento F1, hidroflico, es el componente cataltico de la enzima y sintetiza el
ATP.
En el F1 existen dos ejemplos de localizacin ectpica que han sido ampliamente
estudiados: en la membrana plasmtica de las clulas endoteliales se localizaron todas
las subunidades del complejo F1: 3/3/// y la protena reguladora de la catlisis, la
IF1. Con estudios de protemica se identificaron el resto de las subunidades de F 0 y se
ha medido su capacidad para sintetizar ATP, que como se sabe es nula. Sin embargo,
la enzima hidroliza ATP exgeno, ya que mira hacia el espacio extracelular. Su funcin
principal es ser el receptor de la angiostatina, un inhibidor de la angiognesis, que
bloquea la hidrlisis de ATP del complejo [6]. Se ha supuesto que la llegada del
complejo y su fusin a la cara externa de la membrana plasmtica se hizo a travs de
las llamadas balsas lipdicas resistentes a detergente, que son complejos de lpido70

protena que tienen la capacidad de fundirse a la membrana plasmtica de las clulas

endoteliales, probablemente a partir de la membrana interna mitocondrial. Sin embargo
no hay datos slidos experimentales que lo demuestren [5, 6].
El segundo ejemplo reportado fue la localizacin del complejo F1 en la
membrana plasmtica del hepatocito, actuando como un receptor de la apolipoprotena
A1 (Apo A1), que forma parte de las lipoprotenas de alta densidad (HDL) que protegen
contra la ateroesclerosis estimulando el transporte reverso del colesterol de las clulas
perifricas al hgado, para su posterior metabolismo y su excrecin. Se ha medido la
hidrlisis de ATP y la generacin de ADP de la que depende la fijacin de la Apo A-1
[7].
El citocromo c, componente de la cadena trasportadora de electrones, cumple
con la funcin de moonlight, ya que adems de trasportar electrones del complejo III
al complejo IV, puede ser liberado al citoplasma por la mitocondria a travs del poro de
transicin de permeabilidad (PTP), formado en la membrana mitocondrial, siendo uno
de los factores importantes en la cascada de las caspasas que dirige y dispara la
muerte celular por apoptosis [8].
Existen varios ejemplos de subunidades de la F1 con funcin moonlithg en
condiciones normales: la subunidad del segmento F1 puede actuar como chaperonina
[9]. Adems, forma parte del complejo de importacin de un RNA de transferencia a la
mitocondria. Finalmente se ha reportado su actividad como receptor de citosina, p43
factor en la inflamacin [10].
Por otro lado, en el segmento F1 la subunidad se ha reportado como receptor de la
hormona enterostatina [11]. En el segmento F0 se ha descrito que la subunidad F6
puede funcionar como un vasoconstrictor [12]. La subunidad c en la membrana del
sinaptosoma interviene en la liberacin de la acetilcolina.
Se ha descrito que la IF1 acta como una protena reguladora de la actividad
del complejo F1F0. Tomando como modelo a Caenorhabditis elegans, por la grandes
similitudes con los eucariotes, se describi que la F1 se sintetiza en compartimentos
mitocondriales (Mai 2). Es sintetizada en los polirribosomas citoplsmicos con su
pptido seal en el amino terminal que hace que sea transportada a la mitocondria y
otro citoplsmico (Mai 1), con igual secuencia sin pptido seal [13]. Esta protena
moonlitgh se desconoce su funcin en el citoplasma.
En colaboracin con el grupo de Dra. Rosa Navarro de nuestro Instituto, experta
en C. elegans, hemos iniciado experimentos para dilucidar su funcin en distintas
estirpes celulares utilizando RNA de interferencia para cada una de las protenas y
estudiando los respectivos fenotipos. Recientemente se public la existencia de la IF1
mitocondrial en el suero de humanos normales [14], por lo que quedan otras funciones
que descubrir de sta multifactica protena.
Protenas moonlight del complejo F1F0 en condiciones patolgicas:

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Se han descrito algunos ejemplos de componentes del complejo F 1F0 que se pueden
describir como moonligth en condiciones patolgicas. Uno de estos ejemplos es la
subunidad ; que forma parte de los agregados en el cerebro de enfermos con
Alzheimer [15]. La subunidad , que se acumula en la membrana de los linfocitos
citotxicos implicados en la induccin de la destruccin de los tumores. La subunidad
c en la enfermedad denominada lipofuscinosis ceroide, que afecta los canales de Na+ y
Ca2+ en los cardiocitos y las neuronas [16]. Con estos ejemplos el campo de las
protenas moonlight se ha enriquecido y nos ha mostrado que este tipo de
observaciones no son tan infrecuentes como se pensaba.
El genoma mitocondrial el cromosoma 24.
El genoma mitocondrial ha sido extensamente estudiado, es de herencia
materna, ya que en la formacin del cigoto despus de la fecundacin, solo se heredan
las mitocondrias del vulo que contiene aproximadamente 100,000 copias del DNA y
las de la cabeza del espermatozoide que aporta unas 100 copias de su DNA.
El DNA mitocondrial de humano es circular, de doble cadena, superenrrollado,
formado por 16,569 pares de bases. La cadena externa pesada y la interna ligera
codifican para diferentes protenas y la separacin de los genes no es clara, se
intercalan genes de protenas con genes que codifican para RNAs de transferencia y
existe con frecuencia sobrelapamiento de genes, que se traducen como un policistrn.
Como no existe una secuencia que indique el sitio de iniciacin, se han descrito
protenas que actan como activadores de la traduccin y ayudan a localizar el sitio de
iniciacin [17].
Hay diferencias claras entre el DNA nuclear y el DNA mitocondrial: el
mitocondrial se duplica de manera autnoma independiente del nuclear, una vez por
cada ciclo celular, carece de histonas y forma complejos llamados nucleoides con
protenas especficas relacionadas con la duplicacin del DNA, su transcripcin a RNA
mensajero y su traduccin a protenas. Cada nucleoide se adosa a la membrana
interna mitocondrial y contiene 6 copias de DNA. Los nucleoides son unidades
dinmicas que responden a las condiciones metablicas de la clula. Presentan una
frecuencia de mutaciones de 7 a 10 veces mayor que el DNA nuclear y un sistema de
reparacin deficiente. La traduccin de ambas cadenas pesada y ligera
es
bidireccional y asincrnica. Los codones para los aminocidos difieren del cdigo
universal.
Durante la fecundacin y la herencia de las mitocondrias del vulo y del
espermatozoide existe heterogeneidad en los genes que contiene cada mitocondria lo
que se conoce como heteroplasma a diferencia de la homoplasma en que todas las
copias del DNA son iguales, esto ocasiona que se hereden en forma no mendeliana.
El genoma mitocondrial funciona como un reloj molecular en la evolucin de las
poblaciones humanas [18].
Como se duplica y muta a mayor velocidad que el DNA nuclear funciona como
un reloj molecular y ha sido utilizado para estudios de evolucin reciente. Utilizando
secuencias del DNA de humanos llamadas polimrficas, en las que se encuentran
variaciones silenciosas o neutras y estudiando distintas poblaciones se encontr una
72

correlacin entre el nmero de nucletidos cambiados en el genoma y el tiempo

transcurrido.
Comparando las mismas secuencias del DNA en organismos de las mismas o
de diferentes especies, a travs de sus polimorfismos, se forman los haplotipos o
grupos que se heredan de una generacin a otra y que han servido como marcadores
genticos que caracterizan las diferentes poblaciones humanas, y han servido para
formar grupos por su origen tnico o por su ubicacin geogrfica . Estos estudios
identificaron a la primera Eva, que vivi hace 200 000 aos en frica, como la
madre de la especie humana. Ests secuencias polimrficas permitieron seguir el
rastro de la migracin humana a todos los continentes que fue el resultado de oleadas
migratorias mltiples. En las poblaciones de los amerindios hay los que provienen de
origen materno asitico o los que provienen de las migraciones siberianas.
Con esta metodologa fue posible concluir que el Homo sapiens se origin en frica
hace aproximadamente 130 000 aos, que emigr a Asia hace 70 000 aos, y que 12
000 aos despus coloniz Europa y el Oriente Medio. Posteriormente debido a tres
oleadas migratorias diferentes a los 34 000, 15 000 y 9 500 aos, coloniz el centro,
sur y norte de Amrica. Siendo los esquimales los mas recientes que emigraron de
Asia hace 3 000 aos y poblaron Alaska [18].
Sistemas de traduccin e insercin de las protenas codificadas por el DNA
mitocondrial.
El DNA mitocondrial humano codifica para 13 protenas: 6 del complejo I de la
cadena respiratoria o NADH deshidrogenasa, el citocromo b del complejo III ubiquinol
citocromo c xidorreductasa, las 4 subunidades de la citocromo oxidasa y dos
subunidades de la ATP sintasa. Adems, codifica para dos especies de RNA
ribosomal, 16S y 12S y para 22 RNAs de transferencia. La traduccin de las protenas
codificadas por el DNA mitocondrial est diseada para subunidades hidrofbicas, con
numerosos cruces transmembranales. Por lo que su traduccin est coordinada a su
insercin membranal, por lo que depende del potencial transmembranal y de ATP [17].
No existe recombinacin, lo que garantiza la fidelidad de la traduccin de
protenas que son vitales para el funcionamiento correcto de la cadena de transporte
de electrones y la sntesis del ATP. Todos los factores de transcripcin son de origen
nuclear. Los sitios de iniciacin de la traduccin no tienen la secuencia seal del
extremo 5 prima no traducido y para comenzar la traduccin se requieren activadores
de la traduccin que localizan el sitio de iniciacin.
Acoplada a la traduccin en los mitorribosomas se inicia la insercin a la
membrana coordinada por chaperonas. Existen factores de elongacin y codones de
paro, pero es en la maquinaria de traduccin en la que con frecuencia se observan
mutaciones que son las causas mas frecuentes de las enfermedades clasificadas como
de origen mitocondrial.
El 90% de las protenas mitocondriales es codificado por el DNA nuclear
traducidas en los ribosomas citoplsmicos como preprotenas, con un pptido seal
que las .dirige a los diferentes compartimentos mitocondriales: membrana externa,
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espacio intermembranal, membrana interna, espacio intracrestal, pi de crestas y
matrz mitocondrial. Utilizando sistemas especficos de transporte codificados por el
DNA nuclear. Las protenas son translocadas y desenrolladas con chaperonas
asociadas; su maduracin se lleva a cabo por proteasas que cortan el pptido seal y
permiten su insercin coordinada con el resto de las protenas codificadas por ambos
DNAs, el nuclear y el mitocondrial ya que la mayora de los complejos es de origen
bigenmico.
Las mitocondrias realizan una gran variedad de funciones que responden a
todas las necesidades de la clula; esto se debe a que mantienen un alto grado de
organizacin y tienen una gran complejidad estructural. Es capaz de extraer y procesar
la energa de los nutrientes y sintetizar su propio acarreador de energa: el ATP que
es universalmente utilizado para realizar trabajo.
Funciones cannicas:
Fosforilacin oxidativa y sntesis de ATP.
Sobre este tema las investigaciones han mostrado enormes progresos:
1.

La sntesis de ATP en el complejo F1F0 es el resultado de la funcin acoplada de dos

rotores uno de componente elctrico que conduce iones positivos, H+ o Na+,
estructuralmente representado por un carrusel de 8 a 15 subunidades c al que se
adosa la subunidad a que es el conductor de los H+ a travs de la formacin de dos
hemicanales de entrada o de salida de los iones. El segundo componente coordina la
funcin qumica de la sntesis o hidrlisis del ATP en los 3 sitios catalticos de un
hexmero compuesto por 3 heterodmeros de las subunidades / en el centro del
cual gira el segundo rotor compuesto por las subunidades , , en la enzima de los
Eucariotes. Existen adems subunidades que son estabilizadores del complejo durante
la rotacin y que forman la parte perifrica o cuello lateral formado por los
componentes estructurales OSCP, subunidad b, subunidad d y subunidad a(F6).
Funcionalmente la enzima se ha dividido en rotor: compuesta por las subunidades: c, ,
y . Estator: compuesto por los 3 dmeros / mas las subunidades del cuello lateral. El
sector membranal se ha visto enriquecido con nuevas subunidades: e, f, g, h, i, j y k.,
cuya funcin especfica comienza a ser descubierta. Las subunidades e y g estn
implicadas en la oligomerizacin del complejo F1F0 y en la remodelacin de las crestas
tubulares.
Su regulacin por una protena supernumeraria descrita inicialmente como un
inhibidor de la hidrlisis (IF1). Ha continuado activamente en diferentes grupos de
investigacin y conocemos su estructura en solucin y en el complejo F1-IF1,
utilizando una preparacin de F1 reconstituda con un exceso de IF1 exgena [19], que
funcionalmente difiere de la endgena [20] por lo que su funcin y su interaccin con la
enzima sigue siendo motivo de investigacin.
Es una protena de 84 aminocidos que presenta diferentes dominios de
interaccin con la enzima: en el extremo amino terminal los residuos del 1 al 22 actan
como un estabilizador del complejo [22]; el segmento comprendido entre los
aminocidos 23 al 45 contiene los elementos que producen la inhibicin,
interaccionando con la interfase / y con la subunidad , interrumpiendo la interaccin
de un segmento elstico del carboxilo terminal de la subunidad (DELSEED) con la

74

subunidad que funcionalmente parece ser el sitio para detener la rotacin del complejo
// e inhibir la catlisis reversiblemente en ambos sentidos de la reaccin [21].

Los residuos del carboxilo terminal 46-52 forman una bisagra [23] que separa el
segmento intra F1 con el exterior de la enzima que contiene los residuos 53-84, que con
otro complejo IF1-F1 forma una estructura de hlices superenrrolladas y dimeriza a la
enzima, que se supone es la unidad oligomerizante del complejo: dmeros, tetrmeros ,
hexmeros , etc. En la forma monomrica el complejo IF1-F1 y por la flexibilidad que le
confiere la bisagra, el carboxilo terminal de la IF 1 puede interaccionar con las
subunidades del cuello lateral como la OSCP [24].
Nuestro grupo de trabajo contina activamente investigando estas nuevas facetas de la
protena reguladora en su forma endgena. En colaboracin con las Dras. Adela
Rodrguez y Alejandra Hernndez, cristalgrafas del Instituto de Qumica, se han
obtenido cristales del complejo IF1-F1 con la protena reguladora endgena, los
resultados muestran diferencias en la ubicacin de la protena con respecto al
reconstitudo.
2. La correlacin estructura-funcin de este extraordinario complejo protico
cuya
eficiencia cercana al 100%, supera el de otros motores procesivos como en la actinamiosina. El secreto de su alta eficiencia es que posee en su compleja estructura zonas
elsticas que almacenan la energa y son capaces de transmitirla a los sitios catalticos.
La energa o torca de rotacin del rotor central aplicado a la subunidad por el
componente elctrico, representado por el gradiente de H +, se transmite a distancia a
los sitios catalticos en las 3 interfases asimtricas por su diferente contenido de
nucletidos; un sitio vaco, un sitio con ADP y un sitio con ATP. Los contactos entre la
subunidad gamma del rotor y la parte elstica de las subunidades catalticas, permite la
reversibilidad del complejo en la sntesis consumiendo el gradiente elctrico o
generndolo durante la hidrlisis.
3. La gran versatilidad cintica y estructural de este complejo ,sigue siendo material de
investigacin y una nueva explicacin de cmo funciona es compararla con la
transformacin que han sufrido las computadoras de analgicas a digitales sealando
que acta como un transformador analgico-digital de energa que integra seales
analgicas: el gradiente elctrico del H +, con otras formas de energa: mecnica,
elstica y magntica generadas por la rotacin, dando como resultado una seal digital
representada por la estequiometra H+-ATP sintetizado [25].

Regulacin mitocondrial del epigenoma.

El epigenoma es la informacin heredable durante la divisin celular, a travs
del cdigo de las histonas, adems de la herencia por el DNA. En el epigenoma, las
histonas se modifican postraduccionalmente, remodelan la cromatina y regulan la
expresin de los genes [27, 28].

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MENSAJE BIOQUMICO, VOL. XXXVI (2012)

El DNA nuclear est empacado formando nucleosomas, esta protegido por un
conjunto de diferentes histonas H2A, H2B ,H3 y H4. En los nucleosomas los genes
se organizan en territorios estructurales y funcionales que forman fbricas de
transcripcin que facilita la expresin de genes que se encuentran repartidos en
diferentes cromosomas, como sucede con los genes de las protenas mitocondriales
que se encuentran dispersos en diferentes cromosomas, resultado de su incorporacin
paulatina al genoma nuclear. Las regiones inactivas durante la transcripcin se
localizan en zonas LOCKS.
Un componente muy importante de la maquinaria epigentica son las diferentes
histonas asociadas a la cromatina, que reciben seales del medio externo a travs de
los sustratos generados en las mitocondrias y exportados al ncleo, en el que las
enzimas nucleares las modifican covalentemente dando como resultado la apertura o
el cierre de la expresin de los genes y estableciendo vas especficas de traduccin
que son heredables, se perpetan durante la divisin celular en la fase posterior a la
mitosis y establecen cambios fenotpicos sin variaciones genticas.
Existen diferentes sustratos provistos por la mitocondria que son utilizados para
modificar el cdigo heredable de las histonas nucleares que remodelan la cromatina e
inducen la expresin de los genes.
ATP. EL ATP es el sustrato de las fosforilasas de las histonas, que al introducir un
grupo cargado negativamente tienden a abrir la cromatina y reposicionar los
nucleosomas a travs de activadores y silenciadores. Por otra parte, a travs de
reacciones dependientes de ATP la maquinaria
epigentica acta directamente
sobre protenas efectoras de diferentes vas de sealizacin
y factores de
transcripcin.
Acetil CoA. Las histonas son acetiladas por acetilasas especficas (HATs) que
requieren Acetil-CoA como sustrato, actun aadiendo un grupo acetilo a las lisinas
que disminuye su carga positiva abren la expresin de los genes y estimulan la
transcripcin y secundariamente a los factores de transcripcin y vas de sealizacin.
NAD. Las histonas nucleares son desacetiladas por desacetiladas especficas
llamadas sirtunas que utilizan como coenzima al NAD
proporcionada por la
mitocondria a travs de la exportacin del poder reductor.
Ambas la Acetil-CoA y el NAD son
proporcionadas por la mitocondria
formando parte de la llamada respuesta retrgrada (RT) de la mitocondria al ncleo.
S-adenosil metionina (SAM). La S-adenosil metionina se produce en el citoplasma a
partir de L-metionina y ATP dando como productos SAM+pirofosfato y fosfato. La
produccin de metionina
a partir de homocistena es producto de enzimas
mitocondriales. Por lo que la produccin de ambos sustratos depende de la funcin
mitocondrial.
Las metilaciones de las histonas que dependen de SAM aumentan las fuerzas
de Van der Waals resultando en cambios en la metilacin de las citocinas en el DNA y
de las lisinas y argininas de las histonas. Estas modificaciones resultan ms verstiles
que las fosforilaciones o las acetilaciones , su efecto sobre la expresin de los genes es
aumentar la interaccin y cerrar la cromatina.
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Estas modificaciones de las histonas son ms frecuentes en las clulas

proliferantes inmortales, como las clulas germinales , las clulas madre (stem) y las
clulas neoplsicas que tienen la cromatina abierta a diferencia de las clulas
somticas especializadas y no proliferantes que tienen la cromatina cerrada. (LOCK).
Son dependientes del buen funcionamiento mitocondrial y en conjunto ,forman parte
de la respuesta retrgrada (RT) mitocondrial al ncleo. Regulando el ciclo celular , la
diferenciacin y la plasticidad celular. Existen otras modificaciones de las histonas
como ubiquitinacin, sumoylacin y desamidacin de las argininas en las histonas.
Todas estas modificaciones postraduccionales constituyen el Cdigo de las histonas
que es heredable y modifica la expresin de los genes.
En conclusin la expresin coordinada de genes nucleares de protenas
mitocondriales depende de los requerimientos de energa del DNA nuclear y su
regulacin transcripcional por enzimas y sustratos (ATP,NAD,AcetilCoA y Sadenosil
metionina) generados directa o indirectamente por las mitocondrias que establecen
una cooperacin energtica/epigentica que es un proceso dinmico que responde a
las variaciones del medio y en las cuales la mitocondria es el intermediario para las
modificaciones posteriores del epigenoma y su respuesta. ( 27)
Papel de las mitocondrias en diferentes condiciones patolgicas.
Envejecimiento es una enfermedad degenerativa, irreversible de origen
mitocondrial causada por estrs oxidativo y produccin de especies reactivas de
oxgeno (ROS) en los sitios I y III de la cadena, con acumulacin progresiva de
mutaciones del DNA mitocondrial y posteriormente productos de oxidacin en
protenas, lpidos estructurales, carbohidratos y al DNA nuclear. Este es el mecanismo
que parece ser el ms aceptado hasta ahora [29, 30].
La proteccin de las funciones mitocondriales con antioxidantes no ha
modificado sensiblemente la mxima vida media de ninguna especie que est
genticamente determinada, con el fin de mantener los miembros de una especie hasta
la edad reproductiva y garantizar la sobrevida de la especie. Sin embargo, los cambios
degenerativos inevitablemente progresivos del envejecimiento pueden ser paliados
disminuyendo la produccin de especies reactivas de oxgeno; por ejemplo por
restriccin calrica y previniendo las enfermedades asociadas a este proceso como las
enfermedades cardiovasculares y el cncer.
Cncer: una enfermedad metablica previsible originada por disfuncin
mitocondrial [31].
Existen en la actualidad numerosos estudios en modelos animales que parecen
afirmar la idea de que es la disfuncin mitocondrial la causa primaria de las
alteraciones que ocurren en todos los tejidos neoplsicos, y que la inestabilidad
gentica es secundaria a los cambios metablicos primarios de la disfuncin
mitocondrial.
Etapa metasttica. Produccin de metstasis: se ha observado que la
desdiferenciacin de las clulas de tumores metastsicas presentan un fenotipo
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MENSAJE BIOQUMICO, VOL. XXXVI (2012)

semejante a los macrfagos o a las clulas mesenquimatosas que les permite
emigrar a travs de los vasos sanguneos y hacer siembras a distancia.
Prevencin: Las principios de prevencin requieren un cambio de estilo de vida
que parece necesario para prevenir el cncer y muchas otras enfermedades
degenerativas que predisponen a su aparicin.
Evitar los cancergenos que daan la fosforilacin oxidativa, como los procesos
inflamatorios crnicos, las radiaciones, los cancergenos ambientales, la hipoxia, las
infecciones virales, el uso del tabaco, el abuso del alcohol y la obesidad. Prevenir la
formacin excesiva de ROS con antioxidantes, como el glutatin y polifenoles.
Mantener una dieta de restriccin calrica sana y una actividad fsica moderada.
Tratamiento: Un tratamiento barato, efectivo y menos traumtico que los
utilizados en la actualidad consiste en mantener una dieta balanceada de restriccin
calrica peridica, bajando el consumo de glucosa que estimula la gliclisis aerbica y
la sobrevida del tumor. Adicionar en la dieta cidos grasos omega 3 para dar un golpe
metablico a las clulas indiferenciadas. Adicionar inhibidores de la gliclisis como la
2-deoxiglucosa o factores que mejoren la carga energtica, como la adenosina de vida
media larga que ha sido utilizada como un hepatoprotector, que previene el deterioro
mitocondrial [34].
En colaboracin con Dra. Victoria Chagoya, se ha estudiado en modelos
animales el efecto de la adenosina como hepatoprotector del dao mitocondrial en la
cirrosis heptica y en la prevencin y reversin de la produccin de cncer
hepatocelular experimental en ratas.
En nuestro laboratorio hemos estandarizado una tcnica rpida de extraccin
del los complejos de F1F0, por un detergente, la digitonina, su separacin en geles
nativos y su capacidad de hidrolizar ATP por una tcnica de tincin en el gel. Estas
tcnicas han sido ampliamente empleadas para determinar actividades de enzimas en
clulas aisladas o en tejidos y obtener datos semiquantitativos por densitometra con
un grado de incertidumbre aceptado de un 20%. Resultados preliminares de nuestro
laboratorio, utilizando estas tcnicas a partir de mitocondrias de hgado de rata de los
tres grupos experimentales estudiados y caracterizados en el laboratorio de la Dra.
Chagoya evaluamos el contenido de enzimas F1F0 activas en: controles, cancergeno
por 18 semanas y en un programa de prevencin consistente en la administracin
simultnea del cancergeno y un derivado de la adenosina (IFC 305) por las mismas
18 semanas. Las muestra adems fueron evaluadas por otros mtodos para medir el
grado de malignizacin del DEN y su reversin por el derivado de la adenosina. Los
resultados sugieren que es posible utilizar la tcnica para evaluar el grado de dao
mitocondrial por el cancergeno y su prevencin por el tratamiento con el derivado de
la adenosina, midiendo el % de enzimas activas en los geles nativos. El aceptar que el
origen de las neoplasias es una enfermedad metablica producida por una disfuncin
primaria de las mitocondrias, es un concepto revolucionario que cambia totalmente los
actuales procedimientos de tratamiento y abre la puerta a medidas de prevencin no
contempladas con anterioridad.

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Figura 1. (A) Clculo densitomtrico de bandas de actividad de ATPasa en geles nativos

en gradiente, (B) correspondientes a la forma monomrica, en extractos de digitonina
de mitocondrias de hgado de rata medidas en geles nativos azules de gradiente de un
promedio de 6 determinaciones , tomando el control de cada experimento como 100% y
calculando una desviacin estndar. Las ratas fueron tratadas en las siguientes
condiciones: Control (C): ratas wistar macho de 200 g de peso mantenidas en
condiciones normales por 18 semanas. (D): Ratas a las que se les administr por
inyeccin intraperitoneal 50 mg por Kg de peso de un cancargeno (DEN: dietil
nitrosamina) inyectadas por 18 semanas, 1 vez por semana. (P): Ratas sometidas a un
programa de prevencin: inyectadas con la misma dosis de DEN y simultneamente con
un derivado de adenosina (IFC 305) a una dosis de 50 mg por kilo de peso 1 vez por
semana por 18 semanas.

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Semblanza de la Dra Marietta Tuena de Gmez-Puyou:

La Dra Tuena estudio la carrera de Mdico

Cirujano en la Facultad de Medicina de la UNAM. Su Doctorado en Bioqumica lo
realiz en la Facultad de Qumica de la UNAM. Es Investigador Emrito del Instituto
de Fisiologa Celular. Adems, es Investigador Emrito del SIN-Conacyt. A sido
galadonada con el Premio Universidad Nacional en el rea de Biologa.
Sus lneas de investigacin son:
1. Mecanismo y Regulacin de la sntesis de ATP por la ATP sintasa mitocondrial.
2. Protena inhibidora de la F1F0 (IF1) :
3. Estructura del complejo IF1F1 endgeno.
4. Papel en la oligomerizacin de F1F0
5. Papel como protena moonlight en C .elegans.

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