SERIE: TCNICA DE INMUNOFLUORESCENCIA (IF)

Es una prueba de diagnstico serolgico que tiene dos variedades principales: a)

Inmunofluorescencia directa (IF) aplicada fundamentalmente a la deteccin de
antgenos en una muestra clnica y b) Inmunofluorescencia indirecta (IFI)
aplicada a la deteccin de anticuerpos especficos en el suero del paciente frente
a un determinado antgeno o a la deteccin de un antgeno en una muestra
clnica.
- Inmunofluorescencia directa: sobre un porta depositamos una muestra en la
que buscamos la presencia de un determinado antgeno. Aadimos un suero
especfico del antgeno problema marcado con isotiocinato de fluorescena
(conjugado). Si el antgeno problema se encuentra presente en la muestra, se une
el conjugado. En caso contrario el conjugado se elimina con un lavado del porta.
- Inmunofluorescencia indirecta: sobre un porta que lleva pegado un antgeno
conocido, aadimos el suero problema. Si ste contiene anticuerpos especficos,
se unen al antgeno. Los anticuerpos del suero no especficos del antgeno del
porta se eliminan mediante un lavado. Posteriormente se aade un suero antiinmunoglobulina humana marcada con isotiocianato de fluorescena (conjugado).
El conjugado se une a los anticuerpos especficos o se elimina mediante lavado
haba anticuerpos especficos en el suero.
La lectura de ambas modalidades de IF se hace con un microscopio de
fluorescencia cuya luz excita al isotiocianato de fluorescena haciendo que emita
luz fluorescente de color verde. La observacin de luz verde fluorescente
tiendo un objeto del porta indica la presencia del antgeno en la muestra o de
anticuerpos especficos en el suero, segn el caso.