Procariotas

La replicacin empieza en un nico punto tambin llamado origen de

replicacin
2 horquillas de replicacin
Fragmentos de Okazaki poseen entre 1000 y 2000 nucleotidos
Por ser ADN circular no se produce acortamiento en los extremos
No se necesita desempaquetamiento complejo para replicacion

Eucariotas
La replicacin inicia desde centenares o miles de sitios
Muchas horquillas de replicacion
Fragmentos de Okazaki poseen entre 100 y 200 nucleotidos
Por ser ADN lineal se acorta el extremo de las hebras en cada ciclo de
replicacin al eliminarse el ARN cebador terminal
Requiere desempaquetamiento para su replicacin
Principios de la PCR La PCR se basa en el mecanismo de la replicacin in
vivo del ADN: el ADN bicatenario se desenrolla y pasa a ADN
monocatenario, se duplica y se vuelve a enrollar. Esta tcnica consiste
en ciclos repetitivos de: desnaturalizacin del ADN por fusin a
temperatura elevada, a fin de convertir el ADN bicatenario en ADN
monocatenario; unin (anillamiento) de dos oligonucletidos, utilizados
como cebadores, al ADN diana; extensin de la cadena de ADN por
adicin de nucletidos a partir de los cebadores utilizando ADN
polimerasa como catalizador, en presencia de iones Mg2+. Los
oligonucletidos consisten normalmente en secuencias relativamente
cortas, que son diferentes entre s y complementarias de los sitios de
reconocimiento que flanquean el segmento de ADN diana que debe
amplificarse. Las fases de desnaturalizacin del ADN molde, anillamiento
del cebador y extensin del cebador constituyen un ciclo del mtodo
de amplificacin por PCR. La figura 5 ilustra las tres fases principales del
proceso de amplificacin por PCR.