Maa) MECANISMO DE LA FECUNDACION HUMAN Seveatza une resin actualized respect as concepts actuals basedosen eile el desalotemorano tho combinando concclnientos de bile celery gendica ‘molecule, de una fa accesible ynacendo consideraciones desze fa ceniebésice aa sis mpcacones con la clinica. El abao se desaroladivisendo el mecanismo ce Ia fecundacion numana en vais fases, confines ecactics (a acnacisnespematc, ‘corporacion del sperma hacia el citoplasma de wi, fa atvacion metab del Gy nf formacn de cs prondles, la migracién de os panicles, yla ncn de a primera dst celular yl desarao inal. Asi mismo, hace alguns consideaciones especiales lai cnelmecenismo derequeciénependtceen el desaolo tmpre 19 algunasimpcacioes del desarolobidica en fa cust teminoligcacentfica que dentilica estas tapes Palaras clave: Mecansros dea fecundacién, gametoshumatos, espeatozi, dao, enigénests ABSTRACT Wedoanupdatedrevsioninregardstothecur- rent concepts of bilogrbased early develop ‘ment combining knowledge ofcebicigy and ‘molecular genetics, in an accessible way and considering implications of base science on clinica practice. Didatcaly we divide the mechanism of human fertilization in several hase: sperm atvation, incorporation ofthe ‘sperm inthe ouum cytopesm, metabo act ‘ation ofthe ovum, pronucl! formation, pro- nuclei migration, and initiation of the ist cel. (utr dion and intial development. Some Special considerations ar also done regarding the machanisms of epigenetic reguation in early development and some implications on biological development in scientific names ‘identifying these stages. Key wari: Fertlization mechanisms, human gametes, sperm, ovum, epigeness INTRODUCCION Hace casi diez afios que apareci6é un articulo interesante sobre el mecanismo de fertilizacién en la Revista Peruana de Ginecologia y Obstetricia”. El propésito funda- mental de este trabajo es una puesta al dfa en algunos conoci- imientos al respecto. Ala luzde la genética y la biologia molecular, se ha podido compren- der cada vez mejor el proceso de la fecundacién, Una cuestién im- portante sobre la génesis de un ser hhumano es que la fecundacién no es un evento que surja en un solo Jorge Alberto Alvarez-Diaz ev Pt Ginecol Obstet, 2007 53045 2 Recepos Bc ra de 2007 ‘Acetacin: 2 deeb de 2007 Msc Sexing Ci Nar eB, Opiaran olla leary en fomeaina ulcsrUnatsano evel Poanade (ins Socosantasy Humans Mas, Unies Cagle de Maid Cesare: Or Joe Abr vrei, “eri Conpuane delat Cut Uist, Fact ees, Pare amon Cals Dna de sia dea Maia atin W Siam, Dsus, CP 260 Maite saa a o3)919 9005, Fax (9) 91394 ‘na totes epoducrastuial cam tun momento, sino un proceso lar- goenel tiempo y molecularmente complejo! La biologia de la reproduccién yla biologia del desarrollo han utiliza cdo muchas herramientas de biolo- gla celular, genética y biologia ‘molecular para poder comprender ‘mejor la fecundacién humana. La fecundacién podria ser definida como el proceso que culmina en la unién deun nticleo espermatico conel nicleo del évulo, dentro det citoplasma activado del dvulo. Para que esto ocurra adecuada- mente, algunos otros eventos de- ben de acontecer Vou s3 Niesoxnzono 45_—E———E eee Activacién espermatica, ‘¢ Incorporacién del esperma ha- cia el citoplasma del dvulo, lo ‘ual incluye la union yfusin de Jas membranas plasmaticas del ‘Ovulo y el espermatozoide. ‘¢ Activacion metabdlica del évu- loyylainiciacién del primer ci- clo celular. ‘« Formacién de los prondcleos y fusién nuclear. 4 Migracin de los proniicleos, lo ‘que permite la unin gendmica. « Iniciacion de la primera division celular y el desarrollo inicial Ademés, existen mecanismos de regulacién epigenética, descu- briéndose cada vez mas molécu- las producidas en las trompas que son indispensables para el desa- rrollo ulterior ala fecundacién del 6uulo por el espermatozoide. Esto es, sin estas moléculas no es po- sible que un cigoto aleance su desarrollo a un embrién. En medi- cina teproductiva esto es bien co- nocido, ya quesila maduracion en el laboratorio de un évulo resulta fallida, se recomienda hacer un ‘cocultivo con células de la trom- a, loque crea las condiciones mas parecidas a la fisiolégicas para el desarrollo del cigoto. Hay que partir del conocido hecho de que tres un eyaculado de un va- r6nfértl, entendiendoentonces que existan un minimo de 20 millones de espermatozoides por mililitro eyaculado y un minimo de 3 mL eyaculados, no més de 200 esper- matozoides llegardn al tercio exter- no de la trompa de Falopio para in- tentar interactuar con el évulo, Por otto lado, es conocido actualmente ‘que el tamafo de! foliculo tiene re- lacién con acalidad del ovulo, yesto tiene repercusiones paraquese pro- duzca o no la fecundacién. E! liqui- do fliculertene varios agentes que pueden inducirla quimiotaxis delos espermatozoides, entre ellos la pro- gesterona (que podria tener enton- ‘ces una significacin clinica su uti- lizacién en ciclos de medicina repro- ductiva); pero, muy probablemente noesel principal agente quimiotéc tic. EVENTOS ESPERMATICOS Si bien es muy importante una serie de eventos espermaticos para que se dé el proceso de la fecun- dacién, ellos no ocurren de mane- ra aislada, sino siempre en comu- nicacién con el évulo, Se sabe que la matriz extracelular del cdmulus dphorus (estructura tinica de los 6uulos de mamiferos superiores) es esencial no solo para la ovulaci6n, sino también para todo el proceso de la fecundacion”. La capacitacién es necesaria para el desarrollo de la habilidad de la reaccién acrosémica en mamiferos. Durante la interaccién de los game- tos, la reaccin acrosémica induci- dda por el cdmulus odphorus, es un prertequisito para que el esperma- tozoide pase la zona pelicida, se funda con y penetre al 6vuio®. La Pa (progesterona) secretada por las células del ctimulus, es un cofactor importante para que ocurra este evento de exocitosis. La reaccién acrosémica resulta dela fusion en- tre las membranas acrosomal exter- nay celular, que llevan ala exposi- cién de la membrana acrosomal in- terna. La unién de agonistas (Pa 0 laglicoproteina 2P3) areceptores de la membrana plasmética activa se fiales intraespermaticasy viasenzi- ‘méticas relacionadas con lareaccién acrosémica 46 Revsta Prauana ot Gnecovogia y Oeste Entre las moléculas descritas como receptores espermaticos po- tenciales se incluye las proteinas ZP (dezona pelucida), proteina Gi Goy eceptores detirasinaquinasa, Los receptores espermaticos para Ps estén pobremente caracteriza- dos, excepto un receptor parecido a GABAA. La reaccién acrosémica promovida por ZP (y Pa) esta me- diada por un incremento obligato- rio en la concentracién de calcio intracelular, que aparece primero en el segmento ecuatorial del acrosoma y se esparce por toda la cabeza. Los canales iénicos de la membrana plasmatica relaciona- dos con la entrada de calcio son operados por una despolarizacién de la membrana plasmatica y fosforiaciones proteicas mediadas por la proteinaquinasa Cy una pro- teina tirosinaquinasa™. Parte del incremento del calcio intracelular puede ser debido a la liberacién delcalcioalmacenado, através de canales dependientes de IPs y CAMP. Ademés, la activacion dela adenilato ciclasa y la fosfolipasa C incrementan el calcio intra- celulary estimulan laactividad de PLA2 y la despolimerizacion de la actina, levando a la fusion de las. membranes, En la zona peldcida de los mamt- feros se encuentran varias glico- proteinas importantes para los eventos de reconocimiento y adhe- sidn celulares. Estas glicopro- teinas son la ZPi, ZP2y ZPs, sien- toesta altima la masestudiada™. Los residuos de carbohidratos de lasglicoproteinas ZP tienen un rol clave en este paso temprano de la fecundacién. La imagen delazona pelticida a la microscopia electro- nica ofrece una apariencia de una especie de malla, ZP2 y ZPs tie-nen filamentos, ZP1 entrecruza estos filamentos como una malla tridimensional y ZP3 acta como un receptor del espermatozoide, La unién espectfica de una espe cie de espermatozoide a la zona peluicida es mediada por una mo- I6cula(galactosiltransferasa) en ia superficie de la cabeza del esper- matezoide, que une el oligo- sacérido de unién O de la ZP3 a tuna proteina tirosinaguinasa™. Una vez localizada la unién, ocu- rreenel espermatozoide la reaccién acrosomal. La ZP3 funciona como molécula de adhesién y como secretagoga para la exocitosis acrosomal’. Se ha encontrado 30 000sitios de uniénen laZP3. Esto sugiere una unién compleja, en la que participan miiltipies recepto- resen la superficie del espermato- zoide, sugiriéndose cada vez mas que se trata de moléculas dela fa- rmilia del complemento expresadas a nivel de membrana®® La familia de glicoproteinas ZP ha sido ampliamenteestudiada desde \as década de los 80's, en modelos de raton, y extrapolados sus resul- tados a los seres humanos. Sin em- bargo, parece ser que otras espe- cies de mamiferos (entre ells los seres humans) producen una cuar- taglicoproteina de esta familia, una P4115, que estaria involucrada junto con la ZP3 en la activacién espermética y la induccién de la reaccién acrosomal 70". De aqui que no estén claros estos even tos aiin en seres humans, requi- rigndose un mayor estudio al res- pecto'!. Esta serie de hechos, entre otros, ha hecho que se cues- tione seriamente si el modelo de raton es adecuado para el estudio de las fallas en la fecundacién y extrapolarlas a seres humanos” TT Alcompletarse la reaccién acrosé- mica, se liberan enzimas (como la acrosina, una proteasa tripsino de- pendiente, y la neuraminidasa) que causan lisis de la zona peltici- da"), teniendo importancia para ello laactividad del proteesomaes- permatico™? Antes de continuar, es importante aclarar dos aspectos que tienen relevancia para la clinica. Por un lado, ya se ha mencionado la baja proporcién deespermatozoides que alcanzan el tercio externo de la trompa, aludiendo por tanto a su buena motilidad. Sin embargo, es- ‘tudios recientes muestran que mas de 75% de los espermatozoides de hombres fértlesnottiene capacidad de interactuar con la zona pelici- da, Esto tiene repercusiones im- portantes en entender loque signi- fica la fetilidad oa infetilidad, asi ‘como en los estudios de andlisis seminal. Por otro lado, varones aligospérmicos, a pesar de tener glicoproteinas ZP normales, tienen interacciones defectuosas con la zona pelicida, por lo que cada vez se recomienda més que si acuden a tratamientos de medicina repro- ductiva, no se pierda tiempo y di- nero en inserninacién y ni siquiera en una fecundacién in vitro, sino que se llegue directo al ICS1#" INCORPORACION DEL ESPERMATOZOIDE HACIA EL CITOPLASMA DEL OVULO La incorporacién fisica del esper- matozoide hacia el citoplasma del ‘évulo ocurre simulténeamente con la activacién del duulo y la reac- cidn cortical, Al fundirse el esper- matozoide con el oolema {mem- brana del 6vulo) se da origen a la singamia, es decir, al englo- bamiento del espermatozoide en el ovulo. Un grupo especifico de moléculas es relacionado con un anclaje tipo integrina entre ambos gametos, para que se dé la fu- sién", sugiriéndose también que puede estar mediada por molécu- las con actividad de metalo- proteinasa®”. Esto no esté total- mente estudiado, teniendo Ia fertilina un papel importante atin por definir. Los microfilamentos de actina se ensamblan en la corteza del dvulo, evento fundamental para a incorporacién del esperma- tozoide, cuyo estudio se sugiere cada vez en modelos de primate y no en modelos de rato” ACTIVACION METABOLICA DEL 6VULO Los 6vulos son células metabé- licamente quiescentes. La unién del espermatozoide y el 6vulo ini- cia una cascada de eventos que transforman esta célula quiescente en una metabdlicamente muy ac- tive, dinamica, animada: el cigoto. ‘Aunque hay todavia opiniones muy diversas sobre la manera precisa comoesto ocurre, esta claro queen todas los sistemas de fecundacién una elevacién de las concentracio- nes del calcio intracelular es el ‘mensajero principal en la comuni- caci6n de la sefial de activacién. Unmecanismo paraesta elevacién de las concentraciones de calcio podria ser la entrada de calcio ex- tracelular, luego de interaccién entre integrinas del évulo con ligandos para estas proteinas, en la membrana del esperma, como lafertlina*', aunque podrian es- tar involucrades otras moléculas, como P-selectina, receptores Fe y moléculas CD por parte del évulo, asi comoalgunas otras especificas por parte del espermatozoide. Vou s3 Nmerowarzo 9007 47Altemativamente, el espermatozoi- man Reproduction, 200 145}1046-, Vous Nneomazoso 51