PROCEDIMIENTO PARA DETERMINAR

HIERRO EN HARINAS Y ALIMENTOS.

Mtodo Espectrofotometra de Absorcin
Atmica/Llama
Seccin Qumica de
Alimentos y Nutricin
1.

PRT-711.02-159

Fecha emisin:
09/01/ 2008
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OBJETIVO

Cuantificacin de hierro en harinas y alimentos slidos por espectrofotometra de absorcin

atmica y va seca.
2.

CAMPO DE APLICACIN Y ALCANCE

Aplicar este procedimiento a muestras de harinas o alimentos slidos con bajo contenido graso
recepcionadas en la Seccin Qumica de Alimentos y Nutricin.
3.

FUNDAMENTO

La determinacin del contenido de iones metlicos totales, tales como hierro, calcio, cobre,
magnesio y zinc se realiza por espectrofotometra de absorcin atmica con aspiracin en llama
aire/ acetileno, tratando previamente la muestra para reducir la materia orgnica va seca y
convertir el metal unido orgnica o inorgnicamente, as como disuelto o particulado a su forma
de metal libre.
4. REFERENCIAS
4.1. Official methods of analysis AOAC 15 th edition, vol 2, pg 1106,1107, ao 1990
5.

TERMINOLOGA
Va seca: Tratamiento de muestras a altas temperaturas en una mufla para destruccin de
materia orgnica.

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MATERIALES, INSUMOS Y EQUIPOS

6.1. Materiales
6.1.1 Cpsulas de porcelana para digestin de 25cm de dimetro
6.1.2 Matraces aforados de 50 mL
6.1.3 Piseta
6.1.4 Esptula, toalla absorbente, plumn permanente
6.1.5 Elementos de seguridad como guantes y anteojos
6.1.6 Balanza analtica sensibilidad 0.1 mg
6.1.7 Campana de extraccin de gases
6.1.8 Espectrofotmetro de absorcin atmica con llama
6.1.9 Homogeneizador de muestras
6.1.10 Plancha calefactora
6.1.11 Agua para anlisis, desionizada
6.1.12 cido clorhdrico 37 % p.a.
6.1.13 cido ntrico 65% p.a
6.1.14 Estndar de Hierro.
6.1.15 Lmpara de hierro
6.1.16 Micropipeta de 100ul a 1000 ul
7.

DESARROLLO

El ingreso de la muestra para su anlisis debe cumplir con el Instructivo de Aceptacin o

Rechazo de muestras IT 711-02-065.
Profesional del laboratorio es el encargado de realizar el anlisis HPLC, realiza los clculos e
informa resultados.
Tcnico del laboratorio efecta el resto del procedimiento.
7.1.
7.1.1
7.1.2
7.1.3
7.1.4
7.1.5

Preparacin de la Muestra
Homogeneizar la muestra y pesar + 3 g de la muestra en cpsula de porcelana.
Tapar la cpsula con vidrio reloj.
Colocar y precalcinar en la placa calefactora a una temperatura inicial de + 100C
Luego incrementar la T a 250C, hasta que la muestra se encuentre carbonizada.
Llevar la cpsula con la muestra precalcinada a la mufla y someterla por 8 horas a T
550C hasta cenizas blancas.

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7.1.6 Retirar de la mufla, enfriar y agregar 5 mL de cido clorhdrico 1+1 a la cpsula con
cenizas blancas y poner en bao Maria hasta casi sequedad.
7.1.7 Luego redisolver el residuo con 5mL de cido clorhdrico 1+1 y dejar 5 min., enseguida
adicionar agua desionizada, enfriar y aforar a 50 mL.
7.1.8 La solucin de la muestra esta lista para medir.
7.2. Curva de calibracin de estndares
7.2.1 Estndares de hierro solucin concentrada de 1000 mg/L.
7.2.2 Estndar de 5 mg/L: tomar 0,5 mL del estndar concentrado de 1000 mg/L + 5 mL de
HCL concentrado y aforar a 100 mL con agua desionizada.
7.2.3 Estndar de 2 mg/L: tomar 0,2 mL del estndar concentrado de 1000 mg/L + 5 mL de
HCL concentrado y aforar a 100 mL con agua desionizada.
7.2.4 Estndar de 1 mg/L: tomar 0,1 mL del estndar concentrado de 1000 mg/L + 5 mL de
HCL concentrado y aforar a 100 mL con agua desionizada.
7.3 Determinacin por espectrofotmetro de llama
Condiciones espectrofotomtricas
7.3.1 Tipo de llama aire/acetileno
7.3.2 Longitud de onda 248,3 nm
7.3.3 Ancho de slite 0.2 nm
7.3.4 T de ignicin 800C
7.3.5 T de atomizacin 2300 C
7.3.6 Corrector de background on
Realizar la curva de calibracin utilizando el mtodo de clculo con estndar externo integrado
en el equipo.
7.4

Cuantificacin de Hierro en muestras

Ingresar al equipo de Absorcin Atmica en mtodo Hierro en harinas que contiene la curva de
calibracin obtenida de concentracin (C) en ug/mL, calcular el coeficiente de correlacin lineal
e intercepto e interpolar la muestra para cuantificar el resultado de la absorbancia vs
concentracin. Valor C (ug/mL).
7.4.1

Leer en triplicado cada muestra y cada punto de los estndares y promediar las lecturas.

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Clculo e informe de resultados

cxv
Hierro mg /Kg = -------------a
Donde: c = concentracin en ug/mL obtenidos por la interpolacin en la curva de calibracin de
la muestra.
v = volumen de la muestra final

a = masa de la muestra en gramos

Limite de deteccin: 0,11 ug/mL
Limite de cuantificacin: 0,38 ug/mL
Informar mg/Kg de Hierro sin decimal.
Control de Calidad
Se efectuarn controles sistemticos y peridicos para comprobar la validez de los ensayos
realizados con el mtodo analtico recogido en este procedimiento.
a) Nivel I:

Ensayos de intercomparacin, utilizacin de materiales de referencia certificados y

patrones de referencia certificados, segn disponibilidad.

b) Nivel III. Durante el desarrollo de la serie de trabajo se incluye:

- Ajuste del cero del equipo
- Control de blanco al inicio de las lecturas
- Control de estndar de concentracin conocida
- Lectura del estndar como control por cada diez muestras inyectadas

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REGISTROS

Identificacin
del registro

Almacenamiento Proteccin

Recuperacin Tiempo
retencin y
disposicin
Libro de Registro de En estante del Acceso
Restringido
Papel
5 aos
anlisis Vitaminas Laboratorio
Tcnico y Profesional
RG-711.00-037
Nutrientes,
de
Laboratorio
Aditivos
y Nutrientes, Aditivos y
Contaminantes. Contaminantes
Archivador
de En
estante Acceso
Restringido
Papel
5 aos
Registro anlisis de Laboratorio
Tcnico y Profesional
hierro
Nutrientes,
Laboratorio Nutrientes,
Aditivos
y Aditivos
y
Contaminantes
Contaminantes
Laboratorio
Nutriente
Registro
de En
estante Acceso
Restringido
Papel
5 aos
temperatura
Laboratorio
Tcnico y Profesional
estufas/baos
Nutrientes,
Laboratorio Nutrientes,
termorregulados
Aditivos
y Aditivos
y
RG-711.00-045
Contaminantes
Contaminantes
Base
datos En computador Acceso a Tcnico y
computacional
del Laboratorio Profesional Laboratorio
Programa Ministerial de
Nutrientes, de Nutrientes, Aditivos
Harinas
Aditivos
y y Contaminantes
Contaminantes
Registro
de En Estante del Acceso a Tcnico y
temperaturas
Laboratorio
de Profesional Laboratorio
refrigeradores RG- Nutrientes,
de Nutrientes, Aditivos
711.00-001
Aditivos
y y Contaminantes
Contaminantes
Registro preparacin En estante del Acceso a Tcnico y
de soluciones de Laboratorio
de Profesional Laboratorio
estndares
puros Nutrientes,
de Nutrientes, Aditivos
RGG-700.00-034
Aditivos
y y Contaminantes
Contaminantes

Papel

5 aos

Papel

5 aos

Papel

5 aos

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Recuperacin Tiempo
retencin y
disposicin
Registro preparacin En estante del Acceso a Tcnico y
Papel
5 aos
de
mezclas
de Laboratorio
de Profesional Laboratorio
soluciones
Nutrientes,
de Nutrientes, Aditivos
estndares
RGG- Aditivos
y y Contaminantes
700.00-035
Contaminantes y
Jefatura
de
seccin
9.

Almacenamiento Proteccin

TABLA DE MODIFICACIONES

Revisin N

Pg.
Modificada

10.
ANEXOS
No Aplica

Motivo del cambio

Fecha Aprobacin