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Flav Ono Ides 2001
Flav Ono Ides 2001
Presentacin
En la larga historia de la ciencia muchas personas, ideas y sueos han ido aportando su
grano de arena en la bsqueda de la comprensin de la naturaleza y el mismo misterio
enigmtico de la vida. Muchos de ellos han pasado de ser despreciados y despus alabados y
ensalzados. Esto tambin ha ocurrido con el caso de las sustancias naturales. En la
actualidad es bastante publicado en los medios de comunicacin, en particular por la prensa
y la televisin, el hallazgo de nuevas sustancias naturales, que resaltan como panaceas para
la cura de enfermedades como el cncer, o para el adelgazamiento, etc. Muchas son buenas
pero muchas tambin entran ya hacen parte de la lista negra de las indeseables como los
alcaloides txicos y que generan dependencia (cocana, herona, etc.). Casi podra hacerse
un escalafn de las sustancias buenas (la clorofila, fundamental para la vida de las plantas e
indirectamente para todos los dems seres vivos del planeta; la hemoglobina, una molcula
con una bella estructura arquitectnica y que participa en un proceso simple pero
fundamental para los mamferos: la respiracin; las penicilinas y su importante accin contra
los microenemigos; la artemisinina de los chinos y su utilidad para el tratamiento de la
malaria severa; los cidos nucleicos y su importante aporte para el desarrollo evolutivo de la
vida, etc.). En el caso de las sustancias malas1, que son muy pocas, estn entre otras: los
alcaloides que generan dependencia (cocana, herona, etc.), las sustancias que generan
cianuro (como son los glicsidos cianognicos presentes en diferentes plantas). Sin
embargo, esta discriminacin entre sustancias malas y sustancias buenas, se acaba cuando se
considera es su utilidad. De acuerdo con esto, hyy tres clases de sustancias naturales: Unas
con una utilidad reconocida y demostrada, otras con una utilidad potencial y otras poco
tiles inclusive peligrosas. Dentro de estas tres categoras se podran hacer diferentes
listados, dependiendo de la persona que las haga. Por ejemplo, para un botnico resultan
ms tiles aquellas sustancias que le permiten desarrollar su trabajo de clasificacin, mientras
para un qumico farmacutico resultan ms tiles otras sustancias (poco o nada interesantes
1 Es de anotar que no necesariamente son sustancias malas en el sentido estricto de la palabra, sino que el
calificativo de malas se refiere al uso que se les ha dado.
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para el botnico) que le sirven para producir medicamentos, y para un agrnomo pueden ser
ms interesantes las sustancias que tienen mayor valor nutritivo y agrcola. Con el propsito
de convencer a estos y otros profesionales, y a usted amigo lector, a continuacin tratar de
presentar un grupo de sustancias que a medida que vaya avanzando en la lectura, notar que
no son tan desconocidas, sino que tal vez anteriormente no se las haban presentado, y al
final espero convencerlo de que resultan no solo unas sustancias buenas, sino tiles, muy
bellas y bastante romnticas, sino tambin que resulta saludable en nuestra alimentacin
consumir ms repollo morado que blanco, menos remolacha, ms vino rojo, ms alimentos
derivados de soya, etc.
En buena parte de esta obra se utiliza un lenguaje especializado, esto con el fin de que
adems de divulgar al pblico en general algunos aspectos de estas sustancias, esta pueda
servir de apoyo a profesionales y estudiantes relacionados con el conocimiento y
aprovechamiento de los productos naturales, en especial a profesionales qumicos, qumicos
farmacuticos, bilogos y mdicos.
Alejandro Martnez M.
1. Introduccin
Las plantas mediante el proceso de la fotosntesis producen las sustancias necesarias para
todos los ciclos vitales de la naturaleza. Mediante intrincados y cada vez ms conocidos
mecanismos bioqumicos se constituyen en verdaderas factoras qumicas de carbohidratos,
protenas, grasas, vitaminas y oligoelementos como el hierro y el magnesio; y adicionalmente
mantienen la atmsfera rica en oxgeno y deficiente en dixido de carbono, permitindonos
respirar. Son la base de la cadena alimenticia que soporta todas las dems formas de vida en
nuestro planeta. En la actualidad, gracias a la visin ecologista que se ha dado a las nuevas
generaciones de personas, existe una tendencia a mantener y conservar las especies de
plantas mediante la conservacin de los bosques, las selvas, los parques naturales, los
estuarios marinos, los humedales, etc. Para toda persona indistintamente de su profesin u
oficio, no hay duda de que las plantas son importantes para la vida. Pero adems de producir
sustancias como los carbohidratos, las protenas y las grasas, que los investigadores han
denominado METABOLITOS PRIMARIOS, dado que se encuentran en prcticamente
todas las formas de vida y cumplen funciones bsicas para la misma, existen otras que no se
encuentran tan distribuidas y que se hallan restringidas solo a ciertas especies, gneros o
familias como son los alcaloides, las saponinas esteroides, los aceites esenciales, los
terpenoides, etc., a los cuales se les denomina METABOLITOS SECUNDARIOS. Dentro
de este ltimo grupo estn los FLAVONOIDES, unas sustancias bautizadas as porque las
primeras que se lograron aislar eran de color amarillo, pero que como ms adelante veremos
las hay incoloras con otros colores diferentes del amarillo como son el rojo, el violeta y el
azul.
A continuacin se presentar una breve resea histrica y una definicin qumica de los
flavonoides, luego se hablar de su origen biolgico, algunos aspectos sobre su aislamiento y
caracterizacin, y finalmente se destacar su utilidad real y potencial para ayudar a preservar
nuestra salud.
Alejandro Martnez M.
2. A manera de historia
Los flavonoides son un gran grupo de sustancias vegetales que fueron descubiertas por el
premio Nobel en Bioqumica Dr. Albert Szent-Gyorgi, quien les denomin como "vitamina
P". El Dr. Szent-Gyorgi descubri que los flavonoides favorecen la funcin de la vitamina C,
mejorando su absorcin y protegindola de la oxidacin. Los flavonoides comprenden varias
clases de sustancias naturales, entre las cuales estn muchas de las que les confieren colores
amarillo, naranja, rojo, violeta y azul, a muchas flores, hojas y frutos, especialmente. Cuando
usted amigo lector est observando una rosa roja, adems de disfrutar la gracia artstica de
su diseo, est disfrutando de su color, ese color es debido a los flavonoides; cuando
observe una fresa jugosa, una uva roja morada, una flor amarilla, usted est observando ni
ms ni menos a sustancias flavonoides. Esos colores que disfruta nuestro cerebro al
percibirlos son en su gran mayora debidos a los flavonoides. Entonces, usted ahora puede
comprender que esas aparentemente desconocidas sustancias han estado presentes en buena
parte de su vida, y tambin en buena parte de la historia de la humanidad.
En todas partes de la historia de la humanidad los flavonoides han sido testigos y actores de
muchas desgracias, momentos heroicos, alegras, etc. Al leer a los antiguos filsofos, poetas
y escritores, se pone de manifiesto que en el enamoramiento de la mujer siempre han
participado las flores de agradable aroma y de hermosos colores, esto quiere decir sin ms
prembulos que no ha existido mujer alguna sobre la tierra que no haya sucumbido ante la
presencia de los flavonoides de unas bonitas rosas rojas, un ramo de violetas o un
pensamiento. No hay nada que ms agrade a una mujer que las flores, parece ser que ellas
tienen una percepcin cerebral ms desarrollada que nosotros hacia este tipo de sustancias.
Alejandro Martnez M.
Las casas y palacios ms bellos han sido no los que ostentan grandes desarrollos
arquitectnicos, sino los que poseen los ms variados, coloridos y exticos jardines. En este
sentido, los flavonoides han sido privilegiados al ocupar los sitios ms importantes para un
rey, un noble un plebeyo. Si se mira bien una flor es tan bella en un palacio como en un
comedor humilde.
Los flavonoides han sido testigos indirectos de momentos como el 20 de Julio de 1810,
cuando en la entonces ciudad de Santaf de Bogot (Colombia), una ria entre un espaol y
un criollo por un florero, sirvi de punto de partida para que se diese el grito de
independencia. Aunque los flavonoides de las flores que iban a adornar este florero nunca lo
llegaron a tocar, all estaban listos para cambiar la historia de un pas.
Los flavonoides siempre han estado de alguna manera en sitios privilegiados, y bien podran
ufanarse de ello. Para las plantas adems del encantador adorno que dan a su ropaje, les
sirven de cosmtico. Las plantas como todo lo bello son vanidosas. Estas sustancias adems
de cambiar de colores y adornar las plantas durante toda su vida, son un maquillaje sutil para
protegerse de los rayos solares dainos. S, las plantas usan flavonoides para eliminar ciertas
radiaciones indeseables y filtrar otras que junto con las clorofilas trabajan en llave en el
proceso de la fotosntesis.
Los flavonoides han estado en todas las mesas y comedores desde los primeros hombres y
animales en el planeta. En mesas de reyes y plebeyos. Quin no se ha quedado mirando
algn momento una mesa revestida y adornada con uvas rojas y verdes, con fresas, con
moras, con manzanas, con bananos, con jugosas sandas. Pero ellos no solo estn en
hermosas flores y agradables frutas, estn en alimentos de pobres y ricos como las verduras.
Aunque no los vemos con sus festivos colores porque sus parientes ms famosas como son
las clorofilas con su manto verde las opacan, pero si nuestra visin lograse filtrar y eliminar
el color verde que apreciamos cuando miramos una planta verde, sin duda podramos
reconocerlos. S amigo lector, esta es otra buena razn para preferir las comidas a base de
vegetales, las espinacas adems de hierro contienen vitaminas y flavonoides. Los jugos de
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frutas como moras, fresas, uvas negras o rojas, cerezas, etc., todos contienen flavonoides, y
los hemos consumido casi a diario, y ms adelante tratar de mostrar lo bueno que es
consumir flavonoides para mantener nuestra salud, y hasta donde he ledo, para prevenir y
tratar varias enfermedades, y espero convencerlo de que esas bebidas con colorantes y
saborizantes artificiales no son tan saludables como las bebidas naturales con flavonoides.
A continuacin se presentan algunos aspectos qumicos y biolgicos de los flavonoides, los
cuales le sugiero al lector que si tiene inconvenientes en la comprensin del lenguaje
cientfico pase al numeral 4, donde se hace nfasis en la utilidad potencial de los flavonoides
para el mantenimiento de la salud y para la prevencin de algunas enfermedades (pgina 37,
numeral 10).
3. Aspectos qumicos
Para los qumicos los flavonoides tienen una estructura qumica muy definida como se
muestra en la figura 1. Puede observarse que de manera general son molculas que tienen
dos anillos bencnicos ( aromticos, para los qumicos orgnicos) unidos a travs de una
cadena de tres tomos de carbono, puesto que cada anillo bencnico tiene 6 tomos de
carbono, los autores los denominan simplemente como compuestos C6C3C6. La Figura 2
muestra la estructura qumica de uno de los flavonoides ms comunes: La quercetina.
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OH
OH
HO
O
OH
OH
La Figura 2 muestra una de las maneras ms utilizadas por los qumicos para representar las
molculas de los flavonoides en dos dimensiones, sin embargo existen otras maneras de
representarlas de manera ms real, esto es en tres dimensiones como se ilustra por ejemplo
en la Figura 3.
Figura 3. Estructura qumica en tres dimensiones del flavonoide quercetina. Representacin en esferas:
tomos de carbono de color gris, tomos de oxgeno en color rojo y tomos de hidrgeno en color blanco
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O
H
O
FLAVANONAS
O
H
OH
O
FLAVANONOLES
Alejandro Martnez M.
10
OH
OH
(-)-EPICATEQUINAS
(+)-CATEQUINAS
O
ISOFLAVONAS
11a
7
8
6
6a
10
12
6a
12a
4
8
11
11
10
PTEROCARPANOS
ROTENOIDES
La mayora de flavonoides poseen nombres triviales con la terminacin INA u OL. Estos
nombres les han sido asignados por los investigadores que los han ido descubriendo uno a
uno en la naturaleza. Por ejemplo la acacetina (Figura 5) se identific por primera vez en una
planta del gnero Acacia y se clasifica como una flavona. La quercetina es un flavonol
identificado inicialmente en una planta del gnero Quercus. La naringenina es una flavanona
aislada inicialmente en la naranja. El eriodictiol es una flavanona y se aisl inicialmente en
una planta del gnero Eriodictyon. Sin embargo, esta clase de nombres no es muy til
cuando se requiere informacin sistemtica de estas sustancias, por lo cual los qumicos han
convenido llamarlos con nombres que representen su estructura qumica. As por ejemplo la
Alejandro Martnez M.
11
Hasta ahora hemos visto aspectos relacionados con la estructura simple de los flavonoides,
sin embargo dentro de las plantas los estudios han mostrado que estas sustancias se
encuentran la mayora de las veces, ligados a molculas de carbohidratos. A este tipo de
combinacin ncleo flavonoide bsico + una o varias unidades de carbohidratos, se les
denomina GLICOSIDOS, y cuando no tienen ligadas molculas de carbohidratos se las
denomina
AGLICONAS
FLAVONOIDES.
Por
ejemplo
los
que
mencionamos
a. Ejemplos de flavonas
R1
R2
R5
R4
R3
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12
NOMBRE TRIVIAL
R1
R2
R3
R4
R5
Fuente
Crisina
OH
OH
Populus
Baicalena
OH
OH
OH
Scutellaria
Apigenina
OH
OH
OH
Petroselinum
Acacetina
OMe OH
OH
Robinia
Escutelarena
OH
OH
OH
OH
Scutellaria
Hispidulina
OMe OH
OH
OH
Ambrosia
Luteolina
OH
OH
OH
OH
Reseda
Crisoeriol
OMe
OH
OH
OH
Eriodictyon
Diosmetina
OH
OMe OH
OH
Diosma
b. Ejemplos de flavonoles:
R1
R2
R6
R5
R4
OH
R3
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NOMBRE TRIVIAL
R1
R2
R3
Galangina
Fisetina
OH
Kaemferol
R4
R5
R6
Fuente
OH -
OH
Alpinia
OH
OH
Rhus
OH
OH -
OH
Delphinium
Herbacetina
OH
OH -
OH
OH
Gossypium
Quercetina
OH
OH
OH -
OH
Quercus
Ramnetina
OH
OH
OH -
OMe
Rhamnus
Quercetagetina
OH
OH
OH OH OH
Tagetes
Gossipetina
OMe OH
OH -
OH
OH
Gossypium
Isorramnetina
OH
OMe OH -
OH
Cheiranthus
c. Ejemplos de antocianidinas:
R1
X-
R2
R5
R6
R4
R3
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NOMBRE TRIVIAL
R1
R2
Apigenidina
R3
R4
R5
R6
Fuente
OH OH -
OH
Rechsteineria
Luteolinidina
OH OH OH -
OH
Rechsteineria
Pelargonidina
OH OH OH OH
Pelargonium
Cianidina
OH OH OH OH OH
Centaurea
Peonidina
OMe OH OH OH OH
Paeonia
Delfinidina
OH OH OH OH OH
OH
Delphinium
Petunidina
OMe OH OH OH OH
OH
Petunia
Malvidina
OMe OH OMe OH OH
OHe
Malva
d. Ejemplos de flavanonas:
R1
R2
R5
R4
R3
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NOMBRE TRIVIAL
R1 R2
R3 R4
R5
Fuente
Pinocembrina
OH
OH
Pinus
Liquiritigenina
OH
OH
Glycyrrhiza
Naringenina
OH OH
OH
Prunus
Sakuranetina
OH OH
OMe Prunus
Eriodictiol
OH OH OH
OH
Eriodictyon
Hesperetina
OH OMe OH
OH
Prunus
5. Propiedades fsicas
Las propiedades fsicas dependen de la clase de flavonoide considerado y su forma (libre,
glicsido sulfato). Por ejemplo las flavonas, flavonoles y auronas, debido al sistema
conjugado son compuestos slidos con colores que comprenden desde el amarillo muy tenue
hasta el rojo. Las antocianidinas son de colores rojo intenso, morado, violeta y azul. Las
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6. Biognesis
Como se mencion anteriormente los flavonoides son metabolitos secundarios vegetales de
origen biosinttico mixto: el anillo A proviene de la ruta de la malonilcoenzima A y el anillo
B y la cadena C3 provienen de la ruta del cido shikmico. Un trictido se cicliza y se
condensa con una molcula de cido p-cumrico. La enolizacin del ciclo proveniente de la
ruta de la malonilCoA da origen al anillo aromtico A en las chalconas y flavanonas. Estas a
su vez son los precursores de las dems clases de flavonoides. Es importante recalcar que
este proceso de biosntesis sustenta el hecho de que en la mayora de flavonoides el anillo A
sea meta-oxigenado, es decir como es caracterstico de los anillos aromticos originados por
la va de la malonilCoA; y por otro lado, el anillo B proveniente de la ruta del cido
shikmico, generalmente es orto-oxigenado.
Para el caso de la biognesis de los isoflavonoides tales como las isoflavonas, pterocarpanos
y rotenoides, los experimentos realizados por diversos investigadores sugieren que hay un
proceso de migracin 2,3. Por ejemplo se ha demostrado que la (2S)-naringenina (una
Alejandro Martnez M.
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OH
HO
O 2
HO
3
OH
(2S)-Naringenina
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Isoflavonasintasa
OH
Genistena
OH
18
AcetilCoA
Acido shikimico
OH
OH
CH3
HO
O
O
OH
O
OH
H
HO
O
O
OH
O
OH
OH
HO
OH
OH
CHALCONA
OH
HO
OH
(-)-FLAVANONA
a. Extraccin y aislamiento
Los flavonoides en general se extraen de muestras secas y molidas. La muestra se
desengrasa inicialmente con ter de petrleo n-hexano, y el marco se extrae con etanol
puro o del 70%. Este ltimo es recomendado para garantizar la extraccin de los ms
polares. El extracto obtenido se evapora con calentamiento no superior a los 50C y se le
hacen particiones sucesivas con ter etlico, acetato de etilo y n-butanol. Los flavonoides
apolares quedan en la fase etrea, los medianamente polares en la fase acetato de etilo y los
ms polares en el n-butanol. Cada una de estas tres fracciones se puede analizar por
Alejandro Martnez M.
19
cromatografa en capa fina (CCF) y HPLC en fase reversa. Para el anlisis por CCF de las
agliconas se pueden utilizar mezclas n-hexano/acetato de etilo y cloroformo/acetato de etilo
en diferentes proporciones, por ejemplo la mezcla cloroformo/acetato de etilo 60:40
utilizada por Wagner y col. para el anlisis de drogas vegetales5. Para el anlisis de
glicsidos flavonoides Wagner y col. utilizan una mezcla acetato de etilo/cido
frmico/cido actico/agua 100:11:11:27.
Para el anlisis por HPLC de los glicsidos pueden utilizarse columnas RP-18, detectando a
254 nm y eluyendo con mezclas cido actico al 2% acuoso/acetonitrilo en diferentes
proporciones. El cido actico previene la formacin de picos asimtricos en el
cromatograma. Para el anlisis cuantitativo HPLC de las agliconas tambin se usan columnas
RP-18, deteccin a 254 nm y elucin con mezclas de acetonitrilo/agua con cido actico al
1%6,7. Para el caso de flavonas metoxiladas y glicsidos de flavanonas en plantas del
gnero Citrus se puede consultar el trabajo de Mouly y col.8
Las antocianinas se pueden extraer de tejidos frescos (p. ej. ptalos) por maceracin con un
solvente cido como por ejemplo la mezcla metanol-cido actico-agua (MAW) (11:1:5)
la mezcla MFW, es decir metanol/cido frmico/agua por ejemplo 10:1:9. El extracto
obtenido se concentra y se somete a cromatografa en papel unidimensional eluyendo con la
mezcla t-BuOH:AcOH:H2O (3:1:1). En estas condiciones las antocianinas presentan Rf bajo
y se pueden separar de otros tipos de flavonoides como los glicsidos de flavonoles los
cuales presentan un Rf alto. Una vez eludo del papel el extracto con las antocianinas se
puede purificar a travs de un cartucho RP-8 eluyendo con AcOH al 7% acuoso y con
AcOH al 7% metanlico. Tambin se pueden analizar por cromatografa en capa fina con
placas de celulosa y eluyendo con la mezcla HCl conc./cido frmico/agua 19.0/39.6/41.49.
Las antocianinas se pueden separar a escala analtica por HPLC [(columna RP-18, 25 cm de
long., 5 m); eluente: una mezcla 1:1 de A (H3PO4 al 1.5% acuoso) y B
(H2O:MeCN:AcOH:H3PO4 107:50:40:3) a un flujo de 0.8 ml/min; detectando a 352 y 530
nm]. A nivel preparativo puede usarse una columna RP-18 de 25 cm de long., los mismos
solventes citados arriba pero en una proporcin 43:57 respectivamente, a un flujo de 2
Alejandro Martnez M.
20
ml/min y detectando a 440 nm. A las fracciones obtenidas luego de concentrarlas al vaco,
se les puede eliminar el cido fosfrico pasndolas a travs de un cartucho RP-8 lavando con
AcOH al 8% acuoso. Luego, las antocianinas se eluyen con AcOH al 8% metanlico, se
concentran a sequedad y se liofilizan para obtener los compuestos puros para su
caracterizacin qumica10. Existen mtodos para estabilizar las antocianinas en micelias11.
8. Mtodos de identificacin
a. Ensayos de coloracin
Los flavonoides se pueden reconocer experimentalmente mediante diferentes ensayos de
coloracin. A continuacin se describen un ensayo general de reconocimiento como es el
ensayo de Shinoda, y otros ensayos ms especficos para varias clases de flavonoides.
Ensayo de Shinoda
Los flavonoides con el ncleo benzopirona (p. ej. flavonas, flavonoles, flavanonas, etc.)
producen coloraciones rojizas cuando a sus disoluciones acuosas o alcohlicas se les
adiciona magnesio seguido de HCl concentrado. Aunque no se conoce el mecanismo de esta
prueba, es muy utilizada para reconocer esta clase de compuestos.
Alejandro Martnez M.
21
Ensayo de Pacheco
El slido flavonoide se calienta sobre una llama con unos pocos cristales de AcONa y 0.1 ml
de anhdrido actico. Luego con 0.1 ml de HCl conc. Los dihidroflavonoles producen un
color rojo caracterstico. Las flavonas, chalconas, auronas, flavonoles y flavanonas dan una
respuesta negativa.
Este ensayo se utiliza para distinguir entre flavonas y flavonoles-3-O-sustitudos 5,6dihidroxilados y 5-hidroxil-6-metoxilados14.
Reconocimiento de antocianinas
HO
OHOGli
O
O
OH
+
OH
OH
HO
H+
OGli
catin de cianina
(pH =3, rojo)
O
OH-
OGli
HO
H+
OGli
Base de la cianina
(pH=8.5, violeta)
OGli
OGli
Anin de la cianina
(pH=11, azul)
b. Espectroscopa ultravioleta-visible
Los espectros UV de los flavonoides en metanol presentan bandas caractersticas debidas a
los sistemas conjugados de los anillos aromticos.
Alejandro Martnez M.
22
Las flavonas y flavonoles muestran dos bandas definidas: La banda I, de mayor longitud de
onda en el rango 300-390 nm asociada con la funcionalidad cinamolo, y la banda II, entre
250-280 nm debida al anillo aromtico A (funcionalidad benzolo), aunque a veces se
observan otras bandas de absorcin. La posicin de la banda I depende del tipo de
flavonoide: las flavonas la muestran en 310-350 nm, los flavonoles 3-O-sustituidos en 330360 nm, y los flavonoles en 350-385 nm.
La presencia de hidroxilos fenlicos en diferentes posiciones de la molcula puede
establecerse estudiando el comportamiento del espectro UV metanlico al aadirle los
denominados reactivos de desplazamiento: metxido de sodio (NaOMe), acetato de sodio
(NaOAc), cloruro de aluminio (AlCl3) con y sin HCl, y cido brico (H3BO3).
El NaOMe es una base fuerte que ioniza los hidroxilos fenlicos presentes en la molcula y
particularmente permite reconocer la existencia de grupos hidroxilo en 3 y 4'. Las flavonas
4'-hidroxiladas y los flavonoles 3-O-sustituidos presentan desplazamiento batocrmico de
45-65 nm para la banda I al aadir NaOMe, y la intensidad de la banda no decrece. Los
flavonoles ( 3-hidroxiflavonas) sin hidroxilo en 4', tambin presentan el mismo
desplazamiento batocrmico de 45-65 nm, pero la intensidad de la banda se ve disminuida.
En los flavonoles 3,4'-dihidroxilados, orto-dihidroxilados y diorto-trihidroxilados, el
espectro se descompone en pocos minutos luego de aadir el NaOMe. La aparicin de una
banda alrededor de 330 nm (banda III) es caracterstica de flavonas 7-hidroxiladas17.
El NaOAc es una base ms dbil que el NaOMe, y ioniza solo los hidroxilos fenlicos ms
cidos: 3, 4' y 7. La ionizacin del hidroxilo en 7 afecta la banda II y por lo tanto el NaOAc
es un reactivo til para determinar la presencia de dicho hidroxilo. Si al aadir el NaOAc se
observa un desplazamiento batocrmico de 5-20 nm en la banda II se trata de una flavona o
flavonol 7-hidroxilado. Las flavanonas 5-hidroxiladas presentan un desplazamiento
batocrmico de 35 nm. Los flavononoles (sin 5-OH) presentan un desplazamiento
batocrmico de 60 nm. Sin embargo, Heinz y col. han reportado que se debe tener
precaucin en la obtencin del espectro con NaOAc18.
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23
El H3BO3 en medio alcalino forma quelatos con hidroxilos fenlicos en posicin relativa
orto:
Cl
O Al
OH
HO
HO
OH
HO
AlCl3
OH
OH
O
OH
HCl
Al
Cl
Cl
Al
Cl
O
Cl
OH
OH
HO
H3BO3 (exc.)
O
-
HO
R
O
OH-
B
O
R
O
El AlCl3 anhidro tambin forma quelatos con flavonoides orto-dihidroxilados, 3hidroxilados y 5-hidroxilados19. En el caso de los orto-dihidroxilados el quelato es inestable
a pH cido, mientras que los quelatos formados con 3- y/o 5-hidroxilados son estables:
Por lo anterior, si al determinar el espectro con AlCl3 y HCl se mantiene un desplazamiento
batocrmico de 35-55 nm en la banda I (comparando con el espectro metanlico) se trata de
una flavona o un flavonol 5-hidroxilado. Si el desplazamiento es de 17-20 nm se puede tratar
de una flavona o un flavonol 5-hidroxilado y 6-oxigenado. Si el desplazamiento es de 50-60
nm se trata de una flavona o un flavonol 3-hidroxilado (con o sin 5-OH).
Alejandro Martnez M.
24
En el caso de flavonoides (flavonas y flavonoles) orto-dihidroxilados en el anillo B (sin 3OH ni 5-OH) al aadir el cloruro de aluminio se obtiene un desplazamiento batocrmico de
la banda I de 30-40 nm, el cual se pierde al aadir el HCl. Los orto-dihidroxilados en A (sin
3-OH ni 5-OH) muestran un desplazamiento de la misma banda de 20-25 nm, el cual se
pierde tambin al aadir el HCl.
Otros
flavonoides
como
las
flavanonas,
isoflavonas
flavanonoles
presentan
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25
Tipos de protones
0.0
Tetrametilsilano
0.0-0.5
Trimetilsililo
1.0-1.2
1.7
1.9-2.0
2.2-2.4
2.7-3.1
3.0-4.8
Protones de azcares
3.5
3.7-4.1
Metoxilos aromticos
4.1-4.6
Protones 2 y 3 de isoflavanonas
4.2-6.0
doblete)
5.4
5.9-6.0
Metilndioxi
6.0-6.8
Protones 3, 6 y 8 de flavonas
6.8-8.0
7.5-8.0
Protn 2 de isoflavonas
8.9
Protn 4 de antocianinas
12.0-14.0
Las antocianinas23 se pueden reconocer en sus espectros RMN-1H por la seal en 8.9 (s,
H-4)24 y las seales caractersticas de otros protones aromticos como en los glicsidos de la
delfinidina25:
Alejandro Martnez M.
26
7.0d, 2 Hz
H
7.7s
H
OH
O+
HO
OH
H
OR2 7.7s
H
6.9d, 2Hz
OH
OR 1
H
8.9s
R1, R 2: Carbohidratos
Las flavanonas se reconocen por las seales dd en 5.4 (H-2, J=13 y 2-3 Hz), 3.1 (H-3
trans, J=13 y 2-3 Hz) y 2.8 (H-3 cis, J=17 y 2-3 Hz) 26. Las isoflavanonas se pueden
reconocer por RMN-1H por las seales: 4.1 (H-2a, dd, J=5 y 8 Hz), 4.5 (H-2b, dd, J=5 y
12 Hz) y 4.6 (H-3, dd, J=8 y 12 Hz)27.
Los protones de los grupos hidroxilos generalmente no se observan en los espectros cuando
estos se determinan en solventes prticos, sin embargo existen mtodos para observarlos no
solo en los flavonoides sino en cualquier producto natural28.
Vese a manera ejemplo el espectro de la flavanona:
Alejandro Martnez M.
27
Tipos de carbonos
18
C-6 de ramnosa
30
C-4 de flavan-3-oles29
42-46
C-3 de flavanonas30,31
56-61
Metoxilos32
60-80
C-OH de carbohidratos
70-75
C-3 de flavanonoles
80
C-2 de flavanonas33
85
C-2 de flavanonoles
100-115
115-128
aromticos con H
130-140
aromticos sulfatados
145
150-165
175-178
182
190-196
197-200
Alejandro Martnez M.
28
d. Espectrometra de masas
Las agliconas flavonoides presentan fragmentos caractersticos en su espectro de masas de
impacto electrnico IE40. Por ejemplo, las flavonas y flavonoles presentan generalmente los
fragmentos M+., [M-H]+, y [M-CO]+. uno o varios de los fragmentos A1+., [A1+H]+,
B1+. y B2 + los que se originan por rompimientos Retro-Diels-Alder:
Alejandro Martnez M.
29
R4 '
R7
R4 '
O
O
R3
R5
B2 +
R7
R4 '
O
+
R5
R3
A1+
B1 +
Las flavonas e isoflavonas generalmente muestran los fragmentos A1+., [A1+H]+, B1+. y
B2+. Los flavonoles muestran [A1+H]+ y B2 +; adems el fragmento [M-CHO]+. Las 3metoxiflavonas muestran A1+., [A1+H]+ y B1 +.. Adems se observa el fragmento [M-COMe]+.
Las flavanonas muestran A1+., [A1+H]+, [B1+2H]+. y los fragmentos [M-anillo B] + y
B3+.:
R7
R4'
R7
R5
OH
[M-B] +
R5
R4'
M+.
B3 +.
Alejandro Martnez M.
30
R4'
R7
R4'
R4'
R4'
O
+
OH
R5
OH
CH2
B6 +
B5 +.
B4 +.
M +.
Las chalconas tienden a producir fragmentos originados por ruptura a cada lado del
carbonilo:
R4'
R7
R4'
R5
R7
R7
R7
R5
[M-28] +.
O
R5
R5
R4'
A2 +
[A2-28] +
R4'
B7 +.
[B7-28] +.
En general las agliconas flavonoides con uno o varios grupos metoxilo presentan el
fragmento [M-Me]+ , el cual es especialmente intenso en flavonoides 6- y 8-metoxilados.
En los flavonoides 2'-hidroxilados tambin se aprecia a veces el fragmento [M-OH]+,
mientras que los 2'-metoxilados presentan el fragmento [M-OMe]+.
Alejandro Martnez M.
31
5-hidroxi-,
6,7-dimetoxi-,
7,8-dimetoxi-,
5,6,7-trimetoxi-
5,7,8-
OH H
OMe
OH
OMe
105
120
121
135
136
150
151
152
153
165
166
167
168
169
180
Alejandro Martnez M.
32
181
182
183
184
185
195
196
197
198
199
210
211
212
213
226
227
240
241
255
33
S O 3H
OH
OM e
M eO
O
O
S O 3H
OM e O
3,3'-disulfato de gossipetina-7,8-dimetilter
Para el caso de los glicsidos flavonoides el espectro de masas FAB permite determinar el
nmero de unidades y la clase de carbohidratos ligados, por ejemplo52:
OH
OMe
HO
O
Li+
Glu
Glu
m/z 345
m/z 675
m/z 513
Alejandro Martnez M.
34
e. Difractometra de Rayos-X
La asignacin de la estereoqumica y la determinacin de la estructura espacial de algunos
flavonoides se ha realizado mediante los estudios de los espectros de Difraccin de RayosX. Un ejemplo es el 12a-hidroxidalpanol, un rotenoide aislado de las partes areas de
Amorpha fruticosa (leguminosas) y que es citotxico a seis lneas celulares de cncer
humano 54.
Alejandro Martnez M.
35
HO
H
O
H
O
OH
OMe
OMe
f. Espectroscopia infrarrojo
Aunque el espectro infrarrojo de los flavonoides no se usa mucho actualmente, a manera de
ilustracin se presentan a continuacin los espectros infrarrojo de la quercetina y la
flavanona:
Alejandro Martnez M.
36
g. Hidrlisis55
Los O-glicsidos flavonoides se pueden hidrolizar en presencia de cidos para liberar los
carbohidratos ligados y la correspondiente aglicona flavonoide. En general se utiliza HCl
2N: metanol 1:1 reflujando durante 1 hora.
Los O-glucurnidos flavonoides requieren condiciones ms fuertes para su hidrlisis y sta
se realiza con HCl 2N reflujando a 100C durante 2 horas.
Los C-glicsidos no se hidrolizan en estas condiciones pero pueden sufrir el reordenamiento
de Wessely-Moser, como en el caso de la vitexina:
OH
Glu
HO
OH
HO
H+
Glu
OH
Vitexina
OH
Isovitexina
En condiciones alcalinas fuertes (p. ej. reflujo con NaOH 2N, 100C, 1 hora) el ncleo
flavonoide se rompe liberando sustancias de menor peso molecular:
Alejandro Martnez M.
37
OH
HO
OH
HO
OH
NaOH 2M
OH
100C, 60 min
N2
+
R
OH
(R=CH2OH o COOH)
Alejandro Martnez M.
38
Los flavonoides son importantes para la salud de los vasos sanguneos. Regulan la
permeabilidad del capilar, por eso detienen el flujo de protenas y clulas de sangre, pero
permiten el flujo de oxgeno, dixido del carbono y otros nutrientes. Muchos flavonoides
incrementan la fortaleza de los vasos capilares, previnindolos de cerrarse fcilmente. Esto
es en parte debido a que ciertos flavonoides tienen una accin similar a la de la vitamina C.
Esto puede ayudar a proteger los vasos sanguneos contra las infecciones y las
enfermedades.
Los flavonoides tambin puede relajar el msculo liso del sistema cardiovascular,
disminuyendo as la presin de la sangre. Esto tambin mejora la circulacin en el propio
corazn. Los flavonoides son antioxidantes y tambin pueden prevenir la oxidacin del
colesterol LDL, previniendo el aumento de placa arterioesclertica. Tambin pueden detener
Alejandro Martnez M.
39
Efectos Anti-inflamatorios
Los farmaclogos son personas profesionales en los medicamentos y quienes estudian todos
los procesos que ocurren en nuestro organismo cuando ingerimos o se nos inyecta un
medicamento, para ellos las sustancias que son fundamentales en los medicamentos las
clasifican de acuerdo a su accin, por ejemplo hay medicamentos antimicrobianos,
anticancergenos, antinicticos, antigripales, etc. Una de estas clases son las sustancias
antiinflamatorias, que como su nombre lo indica sirven para desinflamar. A los flavonoides
se les ha asociado con la accin antiinflamatoria, y es de las ms estudiadas. Existen varios
ejemplos que demuestran con evidencia experimental entre ellos estn por ejemplo: Algunos
dmeros flavonoides (biflavonoides) como el diinsininol58, isoflavanquinonas59, etc.
En Colombia varias plantas medicinales han sido aprobadas por el Ministerio de Salud como
antiinflamatorias, entre ellas estn:
Flores de Arnica: Las flores de Arnica montana (Asteraceae) contienen quercetrina-3-Oglucsido, luteolina-7-O-glucsido y kaemferol-3-O-glucsido entre otros. Esta droga es de
venta libre en Colombia y se usa como antiinflamatorio de uso externo 60,61.
Existen en Colombia otras plantas que aunque no estn aprobadas por el Ministerio de
Salud, s se han usado como antiinflamatorios, como el caso el caso del Chuchugas. Esta
corresponde a la corteza de Maytenus aelevis (Celastraceae), que contiene proantocianidinas
con actividad antiinflamatoria (artritis)65.
Alejandro Martnez M.
40
Sistema cardiovascular
Los flavonoides son importantes para mantener sanos los conductos sanguneos. Regulan la
permeabilidad capilar. Muchos de ellos incrementan la resistencia de los capilares evitando
que se plieguen o aplanen. Esto es debido en parte a que ciertos flavonoides mejoran la
accin de la vitamina-C. Estos efectos ayudan a proteger contra infecciones y enfermedades
de los vasos sanguneos.
Los flavonoides tambin ejercen una accin relajante del msculo liso del sistema
cardiovascular, lo que lleva a la disminucin de la presin sangunea. Esta accin mejora
tambin la circulacin del mismo corazn. Por su efecto autoxidante y pueden evitar la
oxidacin del colesterol LDL, lo que a su vez previene la formacin de la denominada placa
arterioesclertica. Tambin pueden evitar la acumulacin excesiva de las plateletas, evitando
as el dao de los vasos sanguneos y la coagulacin de la sangre.
Accin antiinflamatoria
Aunque los flavonoides tienen muchas propiedades comunes a muchos de ellos, algunos de
ellos tienen propiedades especficas. Algunos tienen actividad estrognica mientras otros
inhiben el crecimiento de tumores.
Absorcin
Los flavonoides se absorben fcilmente desde el instestino, y los metabolitos y excesos se
excretan en la orina.
Alejandro Martnez M.
41
Deficiencia
No existen hasta ahora estudios experimentales que demuestren que en las personas puedan
existir deficiencias en cuanto a la ingestin de los flavonoides y se cree que la mayora de la
gente consume en su dieta alimenticia la cantidad requerida. Es posible tambin que mucha
gente, especialmente las personas que consumen menos alimentos de origen vegetal no
consuman lo suficiente para mantener una salud ptima.
Por lo anterior, no existen recomendaciones dietarias respecto al consumo de los
flavonoides, sin embargo en el comercio se consiguen algunos suplementos de diferentes
tipos y dosis. Los extractos de corteza de pino y de semillas de uvas son fuentes de
proantocianidinas. La proporcin de estos flavonoides, como otros nutrientes, vara de una
especie vegetal a otra. Ambas fuentes pueden utilizarse de manera alterna, pero el extracto
de semillas de uvas contiene un mayor porcentaje de proantocianidinas (92-95%), mientras
que los extractos de corteza de pino contienen 80 a 85% de tales compuestos. Adems las
semillas de uvas contienen flavonoides que se encuentran tambin presentes en el t verde, el
cual como se muestra adelante tambin es benfico para la salud.
Efectos txicos
No se han reportado hasta ahora efectos txicos cuando se consumen relativamente grandes
cantidades de flavonoides.
Alejandro Martnez M.
42
Desrdenes cardiovasculares
Debido a sus propiedades antioxidantes, los flavonoides protegen contra enfermedades del
corazn, lo que explica la denominada paradoja francesa. Esta se refiere al hecho de que
como los franceses consumen dietas ms ricas en grasas saturadas, y tienen mayores niveles
de colesterol y presin arterial ms alta que por ejemplo los norteamericanos, tienen 2.5
veces menos incidencias de enfermedades coronarias.
El vino tinto es una buena fuente de flavonoides y muchas personas han sugerido que el
amplio consumo de vino tinto por parte de los franceses, los protege de enfermedad
coronaria. Existen varios estudios que demuestran que el consumo diario de uno dos vasos
de vino tinto, protegen contra el infarto cardaco y parece probable que precisamente el
vino tinto es ms efectivo que el vino blanco, lo que de alguna manera descarta que la accin
benfica sea debida al alcohol.
Una investigacin que involucr a 805 hombres de 65 a 84 aos de edad en 1985, y con un
seguimiento clnico durante 5 aos, demostr que de ellos, los que ms consumieron t,
cebolla y manzanas, presentaron menos incidencia de riesgo de ataques cardacos, que los
que consumieron menores cantidades de tales vegetales.
El consumo de dietas ricas en flavonoides al parecer tambin protege contra el riesgo de
paro cardaco. Algunos estudios demuestras que el consumo de dietas ricas en flavonoides,
especialmente quercetina, y ms de 3 tazas de t negro al da, presentaron hasta un 75% de
menor riesgo, comparados con aquellos que ingirieron menores cantidades. El t negro
Los flavonoides son tiles el el tratamiento de la hipertensin arterial debido a su efecto
fortificante y tonificante en los vasos capilares. Tambin en desrdenes circulatorios de la
Alejandro Martnez M.
43
T verde
El t verde contiene varias sustancias polifenlicas que tienen efectos benficos, incluyendo
la proteccin contra enfermedades del corazn. Adems se ha demostrado que disminuye los
niveles de colesterol, por ejemplo en una investigacin realizada en Japn, donde se
consume habitualmente.
Cncer
Los flavonoides tambin ayudan a proteger contra el cncer. Muchas investigaciones han
demostrado que varios flavonoides pueden inhibir la proliferacin de clulas cancerosas. En
una investigacin en el estado de Iowa, EE.UU., se encontr que de 35000 mujeres postmenopasicas, aquellas que bebieron habitualmente ms de dos tazas de t al da, el 32%
present menos probabilidad de desarrollar cncer de boca, esfago, estmago, colon y
recto, y el 60% menor probabilidad de desarrollar cncer del tracto urinario.
La cebolla es tambin rica en el contenido de flavonoides y hay estudios que demuestran que
hombres y mujeres que consumen habitualmente la cebolla presentaron menor riesgo de
cncer estomacal.
T verde
Alejandro Martnez M.
44
Alergias y autoinmunidad
Adems de sus efectos antioxidantes, la capacidad de los flavonoides para afectar enzimas
involucradas en la produccin de sustancias antiinflamatorias significa que son tiles para el
tratamiento de asma, alergias, artritis, etc.
Quercetina
Alejandro Martnez M.
45
habitualmente productos a partir de soya. Adems la soya contiene los fitoesteroles, los
cuales han demostrado que disminuyen el colesterol sanguneo, posiblemente por un
mecanismo competitivo con el colesterol dietario.
Los productos de la soya tambin pueden reducir la oxidacin del colesterol LDL e inhibir el
acumulamiento excesivo de las plateletas, dos procesos que disminuyen el proceso
arterioesclertico. Adems mejoran el funcionamiento de las arterias.
El consumo de soya tambin disminuye el riesgo de cncer, particularmente los dependientes
de hormonas como el de seno y el de prstata. Tambin se ha encontrado relacin entre el
alto consumo de productos a base de soya y la menor incidencia de sntomas menopasicos
y osteoporosis, por ejemplo en mujeres japonesas. En el caso del cncer de prstata, existe
controversia sobre su efecto benfico, pues existen autores que asocian los isoflavonoides
con la promocin de tumores.
Otros estudios
Los flavonoides se han aislado de muchas drogas vegetales debido a que son productos
naturales muy comunes. Su presencia en una droga vegetal no necesariamente explica sus
propiedades farmacolgicas. Se les ha atribuido una cantidad de propiedades
farmacolgicas,
incluyendo
actividades
inhibidoras
de
enzimas
(hidrolasas,
Alejandro Martnez M.
46
accin
antimictica,
antibacteriana,
citotxica
antimittica84,85,
la
3-
Alejandro Martnez M.
47
2 Matsuda, H., et al., Bioorganic & Medicinal Chemistry 10 (2002) 3123 3128
3 Zhang, S., et al., Biochemical Pharmacology 70 (2005) 627639.
4 Lien, E. J., et al., Free Radic. Biol. Med. 26 (1999) 285-294.
5 Alves, C. N., et al., J. Mol. Struct. (Theochem), 541 (2001) 81-88.
Alejandro Martnez M.
48
b) Sus variados colores y su presencia en tejidos como los de las flores, sugieren que
participan en procesos como la reproduccin favoreciendo la atraccin de insectos
polinizadores.
Alejandro Martnez M.
49
13. Metabolismo
La mayora de flavonoides son degradados en condiciones alcalinas fuertes rompindose el
anillo C. Por esta razn resultan no txicos para el hombre y los mamferos pues son
degradados en las condiciones alcalinas a nivel del intestino. Por ejemplo la quercetina es
degradada segn el siguiente esquema:
OH
OH
OH
OH
HO
HO
OH
O
OH
+
OH
OH
OH
OH
pH alcalino
-CO 2
OH
OMe
OH
OH
HO
OH
OH
OH
Flores de Acacia
Flores de Cactus
Alejandro Martnez M.
50
Flores de Calndula
Espino
La droga la constituyen las hojas, flores y frutos de Crataegus sp. (Rosaceae). Contiene
glicsidos de quercetina y apigenina102.
Tuslago
Alejandro Martnez M.
51
Manzanilla Chiquita
Primavera
Endrino
Saco
Alejandro Martnez M.
52
Pi de gato
Tilo
Las flores de Tilia sp. (Tiliaceae) contienen glicsidos de quercetina, kaemferol y miricetina.
La especie medicinal est aceptada en Colombia corresponde a Tilia sylvestris y sus hojas se
utilizan como sedante menor. Para el anlisis HPLC de los glicsidos flavonoides del tilo se
puede consultar el trabajo de Pietta y col.106
Abedul
Alejandro Martnez M.
53
Nogal
Bodas de Plata
Cola de caballo
Herniaria
Alejandro Martnez M.
54
Infusin madre
Ruda
Retama
Vernica
Bastoncillo dorado
Alejandro Martnez M.
55
Pensamiento
Sofora
Naranja amarga
Cscara de limn
Adems del aceite esencial el cual ha sido utilizado en la elaboracin de diferentes fragancias
y saborizantes, el pericarpio del fruto de Citrus limon (Rutaceae) contiene hesperidsido el
cual se utiliza en el tratamiento de hemorroides. Otros flavonoides con actividad
antioxidante tambin ha sido aislados108
Cscara de cidra
El pericarpio del fruto de Citrus medica (Rutaceae) contiene eriocitrina, rutina, etc.
Yerbasanta
Ortosifonis
Alejandro Martnez M.
56
Cardo de Mara
Trigo sarraceno
Eucalipto
Alejandro Martnez M.
57
Gingko
Lespedeza
Pycnogenol
El pycnogenol es un extracto de la corteza del pino marino francs Pinus maritima Lamk.
(Pinceas), que contiene bioflavonoides, catequina, cidos fenlicos y procianidinas (tambin
denominadas leucoantocianidinas). Entre sus efectos estn la inhibicin de la agregacin
plaquetaria y la inhibicin de formacin de trombos. Es comparativamente ms activo contra
Alejandro Martnez M.
58
los radicales libres, que el t verde y el gingko. Existen estudios sobre su accin benfica en
pacientes con insuficiencia venosa crnica, con manifestaciones como las venas vrices115.
Fuentes de antocianinas
Las antocianinas debido a sus propiedades como verdaderos pigmentos vegetales y a que
son fcilmente degradados en el intestino, se utilizan principalmente como colorantes de
medicamentos y alimentos. Se extraen de plantas comestibles como las uvas negras (Vitis
vinifera, Ampelidaceae)116, la mora, la fresa, el repollo morado, el pericarpio del rbano
rojo117, el grosellero negro (Ribes nigrum, Saxifragaceae), etc. Las antocianinas de los
frutos y hojas del arndano, Vaccinium myrtillus L., Ericaceae, presentan propiedades
vasoprotectoras y contra desrdenes oftalmolgicos, y se vende el extracto con el nombre
comercial de Myrtocyan118. Las flores de albahaca Ocimum basilicum, contienen varias
antocianinas119.
Alejandro Martnez M.
59
Arnica
Cerraja
Botn de oro
Flor de muerto
Chaparro
Alejandro Martnez M.
60
ame
Angucho
Uva caimarona
Uva de pramo
Maz de perro
Algayubo
Contra-rayo
Ceiba
Corresponde a Hura crepitans de la familia Euphorbiaceae. Las semillas son venenosas. Las
hojas contienen kaemferol.
Alejandro Martnez M.
61
Frailecillo
Chuchugas
Alejandro Martnez M.
62
RMN-1H (CDCl3, 360 MHz): 3.90 (s, 3H), 4.02 (s, 3H), 4.04 (s, 3H), 6.59 (s, 1H), 7.03
(2H, d, J=8.9 Hz), 7.89 (2H, d, J=8.9 Hz), 11.82 (s, 1H).
RMN-13C (CDCl3, 90 MHz): 55.6, 60.2, 61.2, 103.0, 103.1, 114.7, 123.0, 128.0, 128.2,
131.6, 145.4, 148.4, 150.9, 162.4, 163.1, 182.3 ppm.
Determine la estructura ms probable y el nombre IUPAC de esta sustancia.
3. Una sustancia vegetal presenta las siguientes caractersticas espectrales:
Espectro de masas de impacto electrnico:
m/z = 300 (100%), 299 (12), 272 (4), 257 (10), 155 (3), 121 (13), 93 (4).
Espectro de RMN-1H (60 MHz, CCl4):
3.83 (3H, s); 6.18 (d, 1H, J=2 Hz); 6.47 (d, 1H, J=2 Hz); 6.85 (d, 2H, J=8 Hz), 8.00 (d,
2H, J=8 Hz).
Espectros UV
MeOH: 366, 266 nm
NaOMe: 418 nm (descompone)
AlCl3: 423, 270 nm
AlCl3/HCl: 426, 267 nm
NaOAc: 369, 265 nm
H3BO3/NaOAc: 366, 265 nm
Determine la estructura ms probable para esta sustancia, asigne las seales de RMN y el
correspondiente nombre IUPAC.
4. Una sustancia vegetal presenta las siguientes caractersticas espectrales:
Espectro de masas de impacto electrnico:
m/z = 316 (100%), 301 (24), 288 (19), 285 (27), 273 (28), 271 (28), 166 (5), 137 (15), 109
(11).
Espectro de RMN-1H (60 MHz, DMSO-d6):
3.90 (3H, s); 6.33 (d, 1H, J=2 Hz); 6.65 (d, 1H, J=2 Hz), 6.85 (d, 1H, J=8 Hz); 7.62 (dd,
1H, J=8 y 2 Hz); 7.58 (d, 1H, J=2 Hz); 12.45 (s, 1H).
Espectros UV
MeOH: 372, 255 nm
NaOMe: 418, 294 nm
AlCl3: 455, 275 nm
AlCl3/HCl: 425, 268 nm
Alejandro Martnez M.
63
Alejandro Martnez M.
64
Alejandro Martnez M.
65
Alejandro Martnez M.
66
Compuesto 1:
Polvo amorfo amarillo desde metanol, P.F. 180-190C desc., []20D -78 (DMSO, c 0.001).
UV mx (MeOH, nm, log E): 254 (3.3), 286 (1.0), 373 (3.5). AlCl3: 268, 298, 386.
AlCl3/HCl: 270, 300, 376. NaOMe: 271, 328, 414. NaOMe/H3BO3: 252, 282, 370. IR
(KBr): 3400, 1651, 1600, 1560, 1506, 1289, 1205, 1166, 1129, 1050, 1030, 980 cm -1.
LSIMS Negativo m/z: 623 [M-H-] (30%), 315 (100), etc.
Alejandro Martnez M.
67
RMN-1H (200 MHz, DMSO-d6): 0.68 (d, 1H, J=6.2 Hz), 3.83 (s, 3H), 5.06 (1H, bs), 5.80
(1H, d, J=7.2 Hz), 6.22 (1H, d, J=1.8 Hz), 6.48 (1H, d, J=1.8 Hz), 6.86 (1H, d, J=8.54 Hz),
7.54 (1H, dd, J=8.4 y 1.82 Hz), 7.98 (1H, d, J=1.8 Hz), 12.52 (1H, s), etc.
RMN-13C (50 MHz, DMSO-d6): 17.00, 55.74, 60.60, 68.29, 69.73, 70.20, 70.62, 71.90,
76.56, 77.13, 77.34, 93.71, 98.77 (2 carbonos), 100.75, 104.05, 113.56, 115.59, 121.08,
121.89, 132.60, 146.88, 149.38, 156.32, 156.34, 161.24, 164.19, 177.30 ppm.
El compuesto 1 (40 mg) se refluj con HCl 2M (5 ml) durante 2 horas. La aglicona se
extrajo con acetato de etilo, y se recristaliz en metanol obtenindose la tamarixetina (18
mg). La fase acuosa se ajust a pH 6 con NaHCO3, se liofiliz. Despus de la liofilizacin
los azcares se disolvieron en piridina y se analizaron por Cromatografa en Capa Fina
(CCF). Despus de rociar las placas, la rhamnosa se observ como una mancha de color
verde de Rf 0.75, y la glucosa como una mancha azul de Rf 0.70.
Compuesto 2
Polvo amorfo amarillo desde metanol, P.F. 170-180C desc., []20D -85 (DMSO, c 0.001).
UV mx (MeOH, nm, log E): 252h, 266 (3.0), 353 (3.5). AlCl3: 254, 270, 418. AlCl3/HCl:
256, 270, 355. NaOMe: 280, 323, 411. NaOMe/H3BO3: 254, 268, 355. IR (KBr): 3438,
1650, 1600, 1558, 1504, 1287, 1203, 1163, 1127, 1048, 1029, 975 cm -1. LSIMS Negativo
m/z: 607 [M-H-] (27%), 299 (100), etc.
RMN-1H (200 MHz, DMSO-d6): 0.76 (d, 1H, J=6.2 Hz), 3.87 (s, 3H), 5.08 (1H, bs), 5.68
(1H, d, J=7.2 Hz), 6.22 (1H, d, J=1.8 Hz), 6.46 (1H, d, J=1.8 Hz), 6.92 (2H, d, J=8.4 Hz),
8.06 (2H, d, J=8.4 Hz), 12.53 (1H, s), etc.
RMN-13C (50 MHz, DMSO-d6): 17.25, 55.95, 60.58, 68.28, 69.71, 70.18, 70.62, 71.88,
76.54, 77.13, 77.32, 93.70, 98.37, 98.72, 100.60, 104.03, 115.13 (2 carbonos), 120.93,
130.77 (2 carbonos), 132.74, 156.06, 156.08, 159.91, 161.23, 164.20, 177.29 ppm.
El compuesto 2 (40 mg) se refluj con HCl 2M (5 ml) durante 2 horas. La aglicona se
extrajo con acetato de etilo, y se recristaliz en metanol obtenindose el kaempferido (18
mg). La fase acuosa se ajust a pH 6 con NaHCO3, se liofiliz. Despus de la liofilizacin
Alejandro Martnez M.
68
Compuesto 3
El compuesto 3 se someti a hidrlisis cida como se describi para los dos compuestos
anteriores y se obtuvo quercetina, glucosa y ramnosa.
33. (Espectros proporcionados por Marn L., Juan C., "Fitoqumica y Evaluacin Biolgica
de Polygonum punctatum", Tesis de Maestra, Instituto de Qumica, Universidad de
Antioquia, Medelln, 2001)
Del extracto en acetato de etilo de Polygonium punctatum, y mediante procedimientos
cromatogrficos se aislaron 4 sustancias, una de ellas con las siguientes caractersticas
espectrales:
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71
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Espectro HMBC
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EMIE: 330 (100%), 315 (4), 301 (8), 287 (11), etc.
Determine la estructura ms probable para esta sustancia
Marn L., Juan C., "Fitoqumica y Evaluacin Biolgica de
Polygonum punctatum", Tesis de Maestra, Instituto de
Qumica, Universidad de Antioquia, Medelln, 2001)
Agradecimientos
A Juan C. Marn L., por los datos y espectros del ltimo
ejercicio planteado. Por los otros espectros a: SDBSWeb :
http://www.aist.go.jp/RIODB/SDBS/ (National Institute of
Advanced Industrial Science and Technology, Sep. 28 2005)
Las imgenes de plantas en blanco y negro fueron escaneadas en
su mayora del libro:
Hernando Garca-Barriga, Flora Medicinal de Colombia, Tomo
II, 1978, Instituto de Ciencias Naturales, Universidad Nacional,
Bogot.
RMN-1H (DMSO-d6): 3.84 (s, 6H), 6.33 (d, 1H, J=1.7 Hz),
6.75 (d, J=1.4 Hz), 6.94 (d, 1H, J=8.5), 7.74 (dd, 1H, J=8.5
Hz), 7.76 (d, 1H, J=1.7 Hz), 9.52 (bs, 1H), 9.75 (bs, 1H), 12.44
(s, 1H).
UV (MeOH): 371, 254, 205 nm
Alejandro Martnez M.
74
20Markham, K. R.; "Techniques of Flavonoid Identification", Academic Press, LondonNew York-Paris, 1982, Captulo 3.
21Saito, N.; Harborne, J. B.; PHYTOCHEMISTRY 22 (8) 1735-1740 (1983).
22Jay, M. y col.; PHYTOCHEMISTRY 14, 1605-1612 (1975).
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26HaO, H., Handono, S.; Shouxun, Z.; PHYTOCHEMISTRY 42 (4) 1247-1248 (1996).
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31Breitmaier, E.; Voelter, W.; "Carbon-13 NMR Spectroscopy", VCH Publish., Weinheim
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32Shi, Q. et al.; J. NAT. PROD. 42 (4) 475-482 (1995).
33Hao, H., Handono, S.; Shouxun, Z.; PHYTOCHEMISTRY 42 (4) 1247-1248 (1996).
34Terahara, N. et al.; PHYTOCHEMISTRY 42(1) 199-203 (1996).
35Liu, Y., et al.; PHYTOCHEMISTRY 42(4) 1203-1205 (1996).
36Hao, H., et al.; PHYTOCHEMISTRY 42(4) 1247-1248 (1996).
37Markham, K. R.; "Techniques of Flavonoid Identification", Academic Press, LondonNew York-Paris, 1982, Captulo 6.
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40Markham, K. R.; "Techniques of Flavonoid Identification", Academic Press, LondonNew York-Paris, 1982, Captulo 6.
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Lee, S-J., y col., J. AGRIC. FOOD CHEM. 46, 3325-3329 (1998).
42Goudard, M. et al.; PHYTOCHEMISTRY 18, 186-187 (1979).
43Un valor m/z par corresponde al fragmento A +., si es impar corresponde a A +H+.
1
1
44El valor m/z corresponde al fragmento B +.
2
45Bouillant, M. L. et al.; PHYTOCHEMISTRY 14, 2267-2274 (1975).
46Bouillant, M. L. et al.; PHYTOCHEMISTRY 17, 527-533 (1978).
47Bouillant, M. L., et al.; PHYTOCHEMISTRY 19, 1755-1759 (1980).
48Echeverri, L. F.; "Espectroscopa de Productos Naturales", Universidad de Antioquia,
Departamento de Qumica, Medelln, 1986, Captulo V.
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122Garca-Barriga, H.; "La Salud con las Plantas"; en: "Memorias del
sobre Plantas Medicinales", Pontificia Universidad Javeriana, Santaf de
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123Garca-Barriga, H.; "La Salud con las Plantas"; en: "Memorias del
sobre Plantas Medicinales", Pontificia Universidad Javeriana, Santaf de
pp. 49-71.
124Garca-Barriga, H.; "La Salud con las Plantas"; en: "Memorias del
1er. Simposio
Bogot, 1992,
1er. Simposio
Bogot, 1992,
1er. Simposio
sobre Plantas Medicinales", Pontificia Universidad Javeriana, Santaf de Bogot, 1992,
pp. 49-71.
125
Nota : A esta droga vegetal se la denomina comnmente como qinghaosu o QHS.