Manual de Química Biorgnánica

Manual de Practicas Laboratorio de Qumica- Bioorgnica
Alejandro Cruz, Itzia I. Padilla Martnez, Efrn V. Garca Bez
INSTITUTO POLITCNICO NACIONAL
UNIDAD PROFESIONAL INTERDISCIPLINARIA DE

BIOTECNOLOGA
ACADEMIA DE QUMICA
LABORATORIO DE QUMICA BIOORGNICA
MANUAL DE PRCTICAS
Autores:
Alejandro Cruz
Itzia I. Padilla Martnez
Efrn V. Garca Bez
Mxico D.F. Octubre-2009
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Manual de Practicas Laboratorio de Qumica-Bioorgnica

CONTENIDO
PRLOGO
GUA PARA EL TRABAJO DE LABORATORIO
ORGANIZACIN DE LOS INFORMES DEL LABORATORIO
COMPORTAMIENTO PERSONAL EN EL LABORATORIO
PRCTICA 1. Separacin y purificacin de compuestos orgnicos. Punto de fusin y

cristalizacin.
PRCTICA 2. Extraccin y Cromatografa
13
PRCTICA 3. Propiedades quimicas de halogenuros de alquilo y Alcoholes
28
PRCTICA 4. Medicin de la densidad, indice de refraccin y punto de ebullicin de

una serie homologa de hidrocarburos alifticos (C6,C8,C10,C12)
40
PRCTICA 5. Sntesis del cloruro de terc-butilo a partir de terc-butanol
48
PRCTICA 6. Aldehidos y cetonas. Sntesis de dibenzalacetona
51
PRCTICA 7. Acidos carboxilico. Sntesis del acido acetil saliclico (aspirina)
65
PRCTICA 8. Aminas, propiedades qumicas y sntesis de acetanilida
71
PRCTICA 9. Sntesis de la benzocaina I
79
PRCTICA 10. Sntesis de la benzocaina II
84
PRCTICA 11. Reacciones de identificacin de aminocidos y protenas
95
PRCTICA 12. Reacciones de identificacin de carbohidratos
102
PRCTICA 13. Cintica de la hidrlisis de la sacarosa mediante rotacin ptica
117
PRACTICA 14. Reconocimiento de lpidos
121
-2-

PRLOGO
El objetivo principal de compilar este conjunto de prcticas de LABORATORIO DE

QUMICA BIOORGANICA es que stas apoyen y complementen el programa terico que
se imparte de la asignatura.
La seleccin de las prcticas se hizo con la intencin de ilustrar algunos de los
mtodos de obtencin de los diferentes tipos de compuestos aromticos y no aromticos y
mostrar tambin las diferentes tcnicas de aislamiento y purificacin de los productos de
reaccin obtenidos biomolculas para uso de inters farmacutico.
Con este manual de prcticas se pretende que el alumno maneje algunos reactivos
tanto orgnicos como inorgnicos para la obtencin de compuestos que contengan nuevos
grupos funcionales y que conozca sus aplicaciones, alcances y limitaciones en su
preparacin. Adems, se pretende que el alumno compruebe las caractersticas de algunos
de los mtodos ms comunes en la sntesis de compuestos orgnicos.
Las prcticas se presentan explcitamente, de tal forma que el alumno sea capaz de
proceder por s solo. Adems, el profesor proporcionar informacin complementaria para
lograr la exitosa realizacin de la prctica.
Con la finalidad de facilitar la comprensin y el desarrollo del tema involucrado, cada
prctica contiene una breve introduccin sobre la naturaleza de los compuestos a obtener y
una serie de cuestiones que involucra la revisin de material adicional.
Se anexa a esta serie de prcticas una prctica relacionada con el reconocimiento de los
lpidos que son molculas con funcin de RESERVA ENERGTICA. Se consumen para
producir energa cuando se han agotado los Glcidos. Se acumulan en las clulas del Tejido
Adiposo Subcutneo, o en el que rodea a algunos rganos o incrustndose en las paredes
arteriales en forma de Colesterol.
-3-

I.
GUA PARA EL TRABAJO DE LABORATORIO.
El programa experimental aqu esbozado requiere de mucha actividad y organizacin.

El logro de su exitosa realizacin depende de que el alumno revise cuidadosamente los
protocolos escritos, as como los antecedentes tericos, antes de que inicie su trabajo en el
laboratorio.
Todos los experimentos estn probados y optimizados para consumir la menor
cantidad de reactivos posibles, respete las cantidades utilizadas y evite el desperdicio de
sustancias qumicas.
La mayora de los experimentos se harn en grupos pequeos de tres a cinco
personas. Independientemente del trabajo en equipo, todos los estudiantes son
particularmente responsables de colectar el total de datos obtenidos y de hacer su reporte
individual.
ORGANIZACIN DE LOS INFORMES DE LABORATORIO
Un buen reporte (cuaderno de trabajo) debe mostrar:

- Que se han entendido los principios bsicos del experimento.
- La habilidad para seguir el protocolo.
- La habilidad para realizar las manipulaciones prcticas de tal manera que se obtengan los
resultados esperados.
- La habilidad para describir en forma ordenada y lgica los resultados obtenidos.
- La capacidad para obtener conclusiones razonables de los resultados obtenidos.
Su reporte se calificar de forma individual en este manual de trabajo de acuerdo a: los
Resultados, el Anlisis, el Cuestionario y las Conclusiones. Los mismos deben
presentarse con pulcritud, claridad y sin faltas de ortografa. Si el reporte requiere de la
presentacin de grficas, recuerde que todos los ejes deben estar perfectamente rotulados,
con unidades claramente definidas, cada grfica o tabla deber llevar su pie de figura. Por
ltimo, toda informacin obtenida de referencias bibliogrficas que usted incluya en su
-4-

reporte deber ser citada en el texto en los espacios correspondientes a las referencias
adicionales.
COMPORTAMIENTO PERSONAL EN EL LABORATORIO

Tratar todos los reactivos como si fueran custicos o txicos, si se derrama cualquiera
de ellos limpie inmediatamente el sitio en el que ocurri. Si los reactivos se derraman en su
piel, limpie inmediatamente y lave la zona de contacto. Familiarcese con la localizacin y
uso de extinguidores as como con las regaderas de emergencias. Precauciones especiales
se sealan en las instrucciones particulares de cada prctica, ponga atencin en ellas.
Los estudiantes debern portar una bata blanca para proteger sus ropas, as como
guantes y lentes de seguridad para proteccin de manos y ojos.
Cualquier accidente que resulte en un dao personal, no importa que tan leve sea,
reprtelo a la brevedad con el profesor encargado del laboratorio. Esto es para su propia
proteccin.
Ciertos instrumentos estarn presentes, otros no. No utilice el equipo si tiene usted
dudas o dificultades para operarlo, solicite el apoyo de su profesor.
Si usted deja material para ser almacenado en el laboratorio, deber estar
adecuadamente identificado, indicando fecha, contenido y propietario, de no ser as ser
desechado.
Parte de su responsabilidad en el laboratorio es su seguridad, no introduzca alimentos, ni
utilice equipo de sonido que pueda distraer su atencin. Deje limpia el rea de trabajo, esto
incluye desechar los materiales qumicos en el lugar o depsito adecuado. Pregunte a su
profesor el lugar en el que se colocarn los residuos obtenidos durante la experimentacin.
-5-

PRCTICA No. 1
SEPARACION Y PURIFICACION DE COMPUESTOS ORGANICOS.
PUNTO DE FUSIN Y CRISTALIZACIN
1.
OBJETIVOS
Que el alumno:
1.1. Separ y purifique una sustancia orgnica mediante de la tcnica de cristalizacin.
1.2. Mida el punto de fusin de sustancias puras y de mezclas y utilice el punto de
cmo medida de pureza.
2.
INTRODUCCIN
El fundamento de la separacin de una mezcla qumica, se basa en la diferencia de
solubilidad del componente a separar en el disolvente de la mezcla y el disolvente

extrayente. En la prctica es muy utilizada para separar compuestos orgnicos de races,
semillas, hojas, etc.
La cristalizacin es un proceso tpico de laboratorio en el que un slido cristalino en
solucin se separa de una mezcla a travs de cambios en su solubilidad. La disminucin en
este parmetro conlleva a la produccin de soluciones saturadas y sobresaturadas que
resultan en la formacin de cristales a partir de la solucin. El proceso de cristalizacin
depende del grado de sobresaturacin que se logre en la solucin, formacin de ncleos y el
crecimiento de cristales partculas amorfas.
La sobresaturacin se puede alcanzar por: evaporacin del disolvente de la solucin,
el enfriamiento de la solucin por la adicin de otros solutos, o el cambio en la polaridad de
los disolventes.
Dependiendo de las condiciones de la cristalizacin, es posible controlar o modificar
la naturaleza de los cristales obtenidos.
Una variante a la cristalizacin simple es el proceso fraccionado que tambin es muy
til. La disolucin de slidos similares puede evaporarse hasta que empieza la
cristalizacin. Los cristales sern ms ricos en un slido que en otro. Cristalizaciones
repetidas (recristalizacin) conducen a la preparacin de cristales ms puros del
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componente menos soluble y a una disolucin que contiene solamente disolvente con el
componente ms soluble.
Frecuentemente el uso de una mezcla de dos disolventes en el proceso de
cristalizacin es ms satisfactorio que un solo disolvente, esta mezcla debe ser homognea
totalmente, es decir, los componentes deben ser miscibles y uno de los disolventes debe
disolver fcilmente al compuesto a separar, mientras que el otro slo debe disolverlo
ligeramente.
El proceso de cristalizacin consta de los siguientes pasos:
* Disolver la sustancia en el disolvente a una temperatura elevada.
* Filtrar la solucin caliente para remover las impurezas insolubles.
* Dejar enfriar la solucin para que se depositen los cristales de la sustancia.
* Filtrar la solucin fra para separar los cristales de la solucin sobrenadante
(conocido como licor o lquido madre).
* Lavar los cristales para remover el licor madre adherido.
* Secar los cristales para remover las trazas del disolvente.
Existen varios factores que se deben considerar para seleccionar un disolvente para la
cristalizacin. Un buen disolvente para este proceso es aquel que disuelva una moderada
cantidad de la sustancia a elevadas temperaturas, pero que solo disuelva una pequea
cantidad de este a bajas temperaturas; el disolvente deber disolver fcilmente a las
impurezas (excepto a las impurezas mecnicas) an a bajas temperaturas, el disolvente no
debe reaccionar con la sustancia a purificar, de preferencia debe tener baja flamabilidad,
baja toxicidad y bajo costo.
Las impurezas pueden colocarse en las siguientes categoras: impurezas mecnicas
(partculas insolubles en la mayora de los disolventes comunes, se pueden eliminar
filtrando la solucin caliente), impurezas coloridas (el color puede eliminarse por la adicin
de algn adsorbente como el carbn activado y filtrando la solucin en caliente) y las
impurezas solubles (compuestos que se remueven por cristalizacin, dado que al ser
altamente solubles en el disolvente se retienen en el licor o lquido madre).
Una sustancia cristalina pura presenta generalmente un punto de fusin caracterstico
y un rango de la temperatura de fusin muy pequeo, aproximadamente de 0.5 a 1.0 C.
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La presencia de impurezas producen generalmente una disminucin de la temperatura

de fusin, es decir, el compuesto empieza a fundir a temperaturas inferiores a la esperada,
esto trae como consecuencia que el rango de fusin se incremente, mientras mayor es la
cantidad de impurezas mayor es la depresin del punto de fusin y por tanto mayor tambin
el rango de fusin.
La depresin en el punto de fusin producida por las impurezas es una consecuencia
de los efectos que estos compuestos producen en la presin de vapor de la mezcla slida, la
presencia de contaminantes solubles produce una disminucin en la presin de vapor de la
mezcla y simultneamente un descenso en la temperatura de fusin.
Tomando como base este fenmeno, la determinacin de esta constante fsica se usa
frecuentemente como criterio de identidad y de pureza.
3 SECCION EXPERIMENTAL
3.2 PRIMERA PARTE: Determinacin del Punto de Fusin

3.2.1 Material y equipo
Cubreobjetos
Equipo para determinar el punto de fusin Fisher-Johns
Equipo para la determinacin del punto de fusin Fisher-Johns
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3.2.3 Procedimiento experimental

1. Limpiar perfectamente la platina metlica del aparato para determinar puntos de fusin.
2. Colocar aproximadamente 0.05 g (3 4 cristales pequeos) de la sustancia a probar en
un cubre objetos limpio, y llevarlo a la superficie de la platina metlica.
3. Ajustar la lupa a la altura de los ojos para observar los cristales e iniciar el calentamiento,
tomar la lectura de las temperaturas en el termmetro del aparato, cuando se inicie y
finalice la fusin del compuesto.
NOTA: Conservar la velocidad de calentamiento entre 3 y 5 o C por minuto
4. Bajar la temperatura de la platina antes de repetir la operacin.
5. Determinar la temperatura y rango de fusin de los siguientes compuestos y mezclas.
a) cido benzico; b) 75% de cido benzico y 25% de anhdido ftlico; c) 50% de
cido benzico y 50% de anhdido ftlico; d) 25% de cido benzico y 75% de anhdido
ftlico; e) anhdrido ftlico.
NOTA: En una misma corrida, se pueden colocar varias muestras.
3.3 SEGUNDA PARTE. Purificacin de acetanilida por recristalizacin
3.3.1 Material y equipo
2 Vasos de precipitados de 250 mL
3 Matraces Elenmeyer de 125 mL
1 Embudos de filtracin de vidrio
1 Agitador
1 Soporte universal
Cubreobjetos
1 Pinza de tres dedos
1 Probeta de 100 mL
1 Anillo
Euipo para medir el punto de fusin
1 Bao mara
Parrilla de calentamiento
3.3.2 Reactivos
Anhdrido ftlico
Carbn activado
Acetanilida grado tcnico
cido benzico
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3.3.3
Procedimiento experimental
a). Pesar 0.5 g de muestra de acetanilida grado tcnico.

b). Observar su color y determinar su punto de fusin.
c). Transferir el resto de la muestra a un matraz Erlenmeyer de 125 mL, adicionar 20 mL de
agua destilada y calentar la mezcla hasta ebullicin.
d). Si no se ha disuelto, adicionar pequeas porciones de agua caliente y agitar hasta que la
acetanilida se disuelva completamente.
e). Adicionar 5 mL ms de agua caliente y dejar enfriar.
f). Adicionar con mucho cuidado 0.1 g de carbn activado.
g). Volver a calentar durante 5 minutos para facilitar la eliminacin de impurezas coloridas.
h). Filtrar la solucin en caliente y recibir el filtrado en otro matraz Erlenmeyer de 125 mL.
Si en el transcurso de la filtracin se solidifica el compuesto, agregar un poco de agua
caliente.
i). El filtrado se deja enfriar para que cristalice la acetanilida.
j). Filtrar para recuperar los cristales en un pedazo de papel filtro previamente pesado.
k). Lavar los cristales dos veces con una pequea cantidad de agua fra, ya que la
acetanilida es soluble an en agua fra (0.5 g /100 mL).
3.4. Instrucciones particulares
3.4.1. No pipetear los reactivos con la boca. Usar probeta para medirlos.
3.4.2. En el procedimiento de cristalizacin de acetanilida, disolver el compuesto en la
mnima cantidad de agua caliente posible, si durante la filtracin en caliente se forman
cristales, calentar nuevamente la solucin hasta su disolucin.
4. RESULTADOS Y DISCUSIN
4.1.
Reportar la masa en gramos de cido benzico y acetanilida obtenidos en la
extraccin. Calcular el rendimiento porcentual y reportar los puntos de fusin del cido
benzico, de la acetanilida.
Clculos:
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4.2. Indicar los clculos realizados para determinar el volumen de NaOH requerido para
extraer el cido benzico.
4.3. Reportar los puntos de fusin obtenidos para el cido benzico, el anh. ftlico y las
mezclas en la siguiente tabla y compararlos con los reportados en la literatura.
Rango de fusin Rango de

fusin terico.
experimental
Substancias
a) cido benzico
b) 75% de cido benzico y 25% de anhdrido ftlico.
c) 50% de cido benzico y 50% de anhdido ftlico.
d) 25% de cido benzico y 75% de anhdrido ftlico.
e) Anhdrido ftlico
4.4.
Haga una grfica de punto de fusin contra el % de composicin para las mezclas
anteriores. Discuta el resultado.

4.5 Reportar las temperaturas de fusin de la acetanilida antes y despus de cristalizar.
Investigar en la bibliografa a que se debe la variacin del punto de fusin de la acetanilida
4.6.
Hacer el clculo de rendimiento en el proceso de recristalizacin.
5. CONCLUSIONES
Los integrantes de equipo, analizaran su informacin prctica con la teora y concluirn
sobre el resultado de su practica.
6. CUESTIONARIO
6.1 Se podr extraer el cido benzico de su mezcla con acetanilida usando solo agua
destilada en vez de NaOH? Por qu?
6.2 Que ventajas y desventajas tiene la cristalizacin con respecto a la extraccin como
mtodos de purificacin?
6.3 Definir el concepto de punto de fusin.
6.4 Qu se entiende por solvatacin?
6.5 Por qu algunas sustancias se disuelven en un disolvente y otras no?
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6.6 Cmo se elige el disolvente adecuado para efectuar una cristalizacin?

6.7 Cundo y para que se utiliza el carbn activado?
6.8 Qu precauciones deben tomarse con los disolventes inflamables y txicos?
6.9 Cules son los mtodos que se emplean para inducir la cristalizacin?
7.
BIBLIOGRAFIA
7.1.
Abbott, D. y Andrews, R. S., Introduccin a la Cromatografa, 3 Ed., Alhambra,
Espaa, 1983.
7.2.
Brewster, R.Q., Curso Prctico de Qumica Orgnica, 2 Ed.., Alhambra, Espaa,
1979.
7.3
Wilcox, C.F., Experimental Organic Chemistry a Small-Scalle Approach, Mc
Millan, U.S.A., 1976.

7.4.
McKay, D.C., Dale G. H., and Weedman J. A., Ind. Eng.Chem. 52, 197-198 (1960).
7.5.
Vogel, A. I., Elementary Practical Organic Chemistry Part I, Small Scale
Preparations, Longmans, (1978).

7.6.
Wilcox, C.F., Experimental Organic Chemistry. A Small Scale Aproach, Mc Millan
Jr, (1988).
7.7.
Barrow, Gordon M. Qumica Fsica, Reverte(1976).
7.8.
Pomilio, A. y Vitale, A. Mtodos Experimentales de Laboratorios en Qumica
Orgnica Serie de Qumica Monografa No. 33. OEA.
8. BIBLIOGRAFIA ADICIONAL.
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PRCTICA No. 2
EXTRACCION Y CROMATOGRAFIA
1. OBJETIVOS
Que el alumno:
1.1. Separe los componentes de una mezcla mediante la aplicacin de las tcnicas de
extraccin y purificacin de compuestos orgnicos.
1.2. Realice una cromatografa de adsorcin mediante la aplicacin de los conceptos
fundamentales.
1.3 .Elija el eluyente apropiado para extraer y separar una mezcla de colorantes
mediante una cromatografa en capa fina.
1.4 .Separe una mezcla de colorantes mediante una cromatografa en columna.
2. INTRODUCCIN
La gran mayora de los compuestos orgnicos, ya sean naturales o sintticos no se
encuentran puros, y para determinar sus propiedades fsicas y qumicas o poderlos usar
como medicamentos, conservadores, edulcorantes, intermediarios de reaccin, etc. es
necesario que lo sean. La extraccin y la cromatografa son tcnicas muy importantes, ya
que permiten separar y purificar sustancias qumicas.
La extraccin es la tcnica ms empleada para separar un producto orgnico de su
mezcla de reaccin o aislarlo de sus fuentes naturales. Puede definirse como la separacin
de un componente de una mezcla por medio de un disolvente. Si el compuesto a separar se
encuentra en una mezcla lquida, la extraccin se llama lquido-lquido, si se encuentra en
una mezcla slida, la extraccin se llama slido-lquido.
La cromatografa es una tcnica que permite separar los componentes de una mezcla. Esta
separacin se logra utilizando un sistema bifsico: fase estacionaria donde se retienen los
compuestos a separar y fase mvil que desplaza de forma diferencial los compuestos a
travs de la fase estacionara.
(A) Dependiendo de la naturaleza de las fases, se pueden distinguir distintos tipos de

cromatografa:
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Cromatografa slido-lquido: la fase estacionaria es un slido y la mvil un lquido.

Cromatografa lquido-lquido: ambas fases son lquidos y en la estacionaria el lquido
se ancla a un soporte slido.
Cromatografa lquido-gas: la fase estacionaria es un lquido no voltil sobre soporte
slido y la fase mvil un gas.
Cromatografa slido-gas: la fase estacionaria es un slido y la mvil un gas.
La mezcla a separar se deposita sobre la fase estacionaria y la fase mvil atraviesa el

sistema desplazndo los componentes de la mezcla a distintas velocidades que dependen de
la afinidad de los mismos por cada una de las fases (Figura 1). Se denomina elucin a la
migracin de los componentes de la mezcla a lo largo de la fase estacionaria impulsados
por la mvil.
Existen otras clasificaciones para los distintos tipos de cromatografa:
(B) En funcin de la interaccin que se establece entre los componentes de la mezcla y

las fases mvil y estacionaria:
Cromatografa de adsorcin: se producen interacciones de tipo polar siendo la fase
estacionaria un slido.
Cromatografa de particin: la separacin se basa en las diferencias de solubilidad de
los componentes de la mezcla entre las dos fases siendo ambas lquidas. Cuando la fase
estacionaria es menos polar que la mvil se denomina cromatografa en fase inversa.
Cromatografa de intercambio inico: se producen intercambios entre iones presentes
en la fase estacionaria y los del compuesto orgnico solubilizado e ionizado en la fase
mvil.
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Figura 1. Elucin de los componentes de una mezcla
(C) En funcin del tipo de soporte empleado para la fase estacionaria:

Cromatografa en columna: utiliza como soporte una columna de vidrio.
Cromatografa en capa fina: el soporte es una placa de vidrio, aluminio o plstico.
La cromatografa se puede emplear para:

Conocer el nmero de componentes de una mezcla e identificarlos por comparacin con
patrones, a este tipo de cromatografa se le conoce como Cromatografa Analtica.
Separar mezclas de compuestos y como mtodo de purificacin, con este fin se le conoce
como Cromatografa Preparativa.
Cromatografa de adsorcin
La cromatografa de adsorcin emplea una fase estacionaria slida de carcter polar,
adsorbente y una fase mvil lquida, eluyente. Se utiliza tanto con fines analticos como
preparativos y la separacin de los componentes de la mezcla viene determinada por las
interacciones polares de los componentes de la misma con las fases estacionaria y mvil.
Por lo tanto, los compuestos ms difciles de separar mediante este tipo de cromatografa,
sern aquellos que tengan una polaridad muy similar.
Fase estacionaria: adsorbente
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Est constituida por un slido poroso, finamente granulado, con centros activos polares en
su superficie donde se adsorben las molculas de los compuestos que se van a
cromatografiar. Cuanto menor sea el tamao de partcula de este material mayor ser la
capacidad de adsorcin.
La adsorcin se debe a interacciones intermoleculares del tipo dipolo-dipolo, dipolo-dipolo
inducido o enlaces de hidrgeno entre el adsorbente y el soluto. El adsorbente ms utilizado
es la gel de slice (Figura 2) donde las interacciones tienen lugar entre los grupos SiOH y
SiOSi; tambin se emplea con relativa frecuencia almina (Al2O3).
Figura 2. Estructura del gel de slice e interacciones

con algunos compuestos polares
El adsorbente debe ser inerte con las sustancias a cromatografiar. La gel de slice presenta
carcter cido y la almina puede adquirirse con carcter neutro, cido o bsico.
Fase mvil: eluyente

Es un disolvente en el que los componentes de las mezcla son, al menos, parcialmente
solubles. Al aumentar la polaridad del disolvente aumenta la velocidad de elucin de los
compuestos de la mezcla. Se puede utilizar un nico disolvente o una mezcla de disolventes
e incluso llevar a cabo la elucin con un gradiente de polaridad aumentando
progresivamente la proporcin del disolvente ms polar.
Retencin
Las molculas de soluto S se adsorben en los centros polares de la fase estacionaria X y, a
medida que se produce la elucin, van siendo desplazadas por las molculas de disolvente/s
que constituyen la fase mvil M. La retencin de un soluto se puede justificar por la
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competencia que se establece entre S y M por adsorberse a los centros polares X, es decir,
depende de los valores de las constantes de los equilibrios:
X + S XS
X + M XM
que estn en funcin de:

La polaridad del compuesto a eluir que depende de sus grupos funcionales.
La naturaleza del adsorbente.
La naturaleza del disolvente.
Orden de polaridad de los compuestos orgnicos:
cidos carboxlicos > Fenoles > Alcoholes y Tioles > Aminas > steres > Aldehdos y
Cetonas > Hidrocarburos Aromticos > Hc. Halogenados > teres > Hc Insaturados >
Alcanos
Cuanto ms polar sea un compuesto mas se retendr en la fase estacionaria. Por ejemplo, se
retiene ms un alcohol que un hidrocarburo.
Orden de polaridad de los eluyentes ms habituales:

H2O > CH3-OH > (CH3)2CH-OH > CH3-CN > Dioxano > CH3COOEt > THF > CH2Cl2
(Cloruro de metileno) > CHCl3 (Cloroformo) > CCl4 (Tetracloruro de carbono) >
CH3(CH2)4CH3
Para un mismo compuesto, un aumento en la polaridad de la fase mvil hace que se
desplace con ms facilidad de la fase estacionaria. Por ejemplo, se eluir ms rapidamente
una amina en acetonitrilo que en hexano.
Para compuestos poco polares, que se retienen poco en el adsorbente, se utilizan eluyentes
apolares o poco polares como, por ejemplo, hexano. Para compuestos muy polares, que
quedan muy retenidos en el adsorbente, se emplean eluyentes muy polares como, por
ejemplo, metanol o mezclas metanol-diclorometano.
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Para compuestos de polaridad media se emplean eluyentes de polaridad intermedia y son

muy aconsejables en estos caso las mezclas en distintas proporciones de hexano acetato de
etilo
Cromatografa analtica en capa fina (CCF)

La fase estacionaria (adsorbente) se encuentra depositada, formando una capa fina de un
espesor uniforme sobre una placa de vidrio, plstico o una lmina metlica. La mezcla a
analizar se deposita con un capilar a una pequea distancia del borde inferior de la placa (3
mm) (Figura 3) y se introduce en una cubeta donde est la fase mvil (eluyente), que
ascender a lo largo de la capa por capilaridad eluyendo a los componentes de la mezcla a
distintas velocidades, lo que provoca su separacin (Figura 4). Cuando el frente del
disolvente se encuentra a 3 mm del borde superior, se saca la placa de la cubeta, se marca
hasta donde ha llegado el eluyente y se deja secar para, a continuacin, proceder al la
visualizacin de las manchas correspondientes a los productos cromatografiados.
Figura 3. Aplicacin de la muestra.
Figura 4. Desarrollo de la placa
Determinacin del Rf
Se conoce como Rf (rate factor) la relacin entre las distancias recorridas por un
compuesto y por el disolvente desde el origen del cromatograma.
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Rf = Distancia recorrida por el compuesto/ Distancia recorrida por el disolvente
Cada compuesto en unas condiciones cromatogrficas determinadas: adsorbente,

disolvente, temperatura, etc., tiene un valor constante y caracterstico de Rf. Sin embargo,
solo se pueden establecer comparaciones entre los Rf de dos compuestos cuando los dos se
eluyan juntos en la misma placa. La distancia recorrida por el compuesto se mide desde el
centro de la mancha (Figura 5).
Figura 5.- Determinacin del Rf de dos compuestos A y B.
Visualizacin del Cromatograma

Con luz UV (ultravioleta). Las placas suelen llevar incorporado un indicador
fluorescente que absorbe luz UV y emite luz visible, generalmente verde. Cuando se
cromatografan sustancias que absorben en el UV donde se encuentra el compuesto
no absorbe el indicador y como resultado vemos una mancha que indica su
presencia.
Con un agente revelador. Se emplea cuando las sustancias no absorben radiacin
UV. El revelador reacciona con los productos absorbidos dando lugar a compuestos
coloreados y por tanto se utilizar uno u otro en funcin del compuesto que se
quiera visualizar. Algunos ejemplos: H2SO4 concentrado en etanol para azcares,
ninhidrina para aminocidos y yodo para compuestos insaturados y aromticos.
Aplicaciones de la CCF
La CCF es una tcnica cualitativa muy utilizada en los laboratorios de Qumica Orgnica
para:
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Determinar el nmero de componentes de una muestra: Precaucin si solo hay una

mancha muy retenida o aparece junto al frente del disolvente hay que probar otro
eluyente (Figura 6).
Figura 6.- Separacin de dos componentes A y B de una mezcla. (a) Eluyente poco polar
(b) Eluyente de polaridad adecuada (c) Eluyente muy polar
Comprobar la pureza de un compuesto: aparecer una sola mancha. Se debe
comprobar que solo hay una mancha utilizando distintos eluyentes.
Determinar la identidad de dos compuestos: Hay que tener precaucin, pues valores
deRf iguales (o prcticamente iguales) para dos compuestos en una misma placa no
garantizan inequvocamente su identidad. En la misma placa hay que cromatografiar
una mezcla de los compuestos cuya identidad se quiere comprobar (Figura 7).
Figura 7. Comprobacin de la no
identidad de dos compuestos A y B.
M, Mezcla de ambos.
Seguir la evolucin de una reaccin: cada cierto tiempo se cromatografan en una

misma placa los reactivos y la mezcla de reaccin (Figura 8).
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Figura 8. Evolucin de una reaccin

entre dos compuestos A y B (reactivos)
para
dar lugar a un compuesto C. Mezcla de
reaccin = MR.
Determinar el disolvente ms apropiado para llevar a cabo una separacin

mediante una cromatografa preparativa (en columna o en placa).
Seguir el progreso de una cromatografa en columna (CC).
Cromatografa en columna (CC)

Es el mtodo ms utilizado para la separacin y purificacin de compuestos orgnicos,
slidos o lquidos, a escala preparativa. La fase estacionaria (adsorbente) se coloca en una
columna de vidrio que termina en un estrechamiento con una llave y se impregna con el
eluyente (fase mvil). La mezcla a separar se deposita en la parte superior de la columna y
la fase mvil atraviesa el sistema (Figura 9). Los compuestos se van eluyendo disueltos en
el eluyente, se van recogiendo ordenadamente en fracciones de pequeo volumen (1,2,.....)
y se analizan por CCF (Figura 8). Los productos van saliendo de la columna segn su
polaridad, primero salen los menos polares que son los menos retenidos por el adsorbente y
los ltimos los ms polares por su mayor retencin en la fase estacionaria. El adsorbente
ms utilizado para este tipo de cromatografa es la gel de slice y en segundo lugar la
almina. El tamao de partcula del adsorbente es importante para la separacin y su
eleccin depende en gran medida de que la elucin de la cromatografa se realice por
gravedad o a media presin (flash chromatography). En una elucin a media presin se
pueden emplear tamaos de partcula ms pequeos, que permiten una separacin ms
eficaz. Sin embargo, en una elucin por gravedad el uso de tamaos de partcula pequeos
impediran el flujo del disolvente. Antes de realizar una separacin en cromatografa de
columna hay que elegir adecuadamente el disolvente haciendo ensayos en CCF.
- 21 -

Figura 9.- Esquema de montaje de una

Cromatografa en Columna
3..SECCIN EXPERIMENTAL
EXTRACCION
3.1 Material y equipo para la extraccin
3.1.2 Reactivos
1 Propipeta (jeringa)
cido benzico
1 Matraz erlenmeyer de 125 mL.
Solucin de NaOH 0.1 N
3 Pipetas graduadas de 1mL (1), 5mL (2) y 10mL (1)
Acetanilida
2 Vasos de precipitados de 100 mL
HCl conc.
1 Soporte universal
Cloruro de Metileno
1 Pinza de tres dedos con nuez

Equipo para medir el punto de fusin
Balanza granataria y analtica
3.1.1 Procedimiento experimental

Separacin de una mezcla de cido benzico-acetanilida (1:1) por extraccin slidolquido
1. Agregar 0.5 g de la mezcla en un matraz erlenmeyer de 125 mL.
2. Calcular el volumen de NaOH 0.1 N necesario para que reaccione completamente el
cido benzico.
3. Adicionar el volumen calculado de NaOH 0.1 N al matraz erlenmeyer y agitar
vigorosamente.
- 22 -

4. Filtrar con papel filtro para separar el slido que no se disolvi.

5. Regresar el slido retenido en el papel filtro al matraz y extraer una vez ms con igual
volumen de NaOH.
6. Filtrar, recibiendo el lquido en el mismo recipiente donde se tiene el primer filtrado.
7. Adicionar HCl concentrado al filtrado hasta llegar a pH = 2.
8. Separar el slido precipitado por filtracin (en un papel previamente pesado).
9. Dejar secar el slido obtenido, pesarlo y calcular el % de rendiniento de la reaccin.
10. Medir el punto de punto de fusin del producto.
CROMATOGRAFIA
3.2.1. Materiales
1
Soporte universal
Vaso de precipitados de 100 mL
Pinzas de tres dedos con nuez
Pipeta de 1 mL
Bureta de 25 mL
Matraces erlenmeyer
Probeta de 100 mL
Tubos de ensaye de 5 mL
Placa cromatogrfica de gel de slice 1
Cubeta para cromatografa o un vaso de
sobre alumninio de 2 x 5 cm
precipitdos de 50 mL y un vidrio de reloj
Embudo pequeo
Varilla de vidrio de 15 cm
3.2.2, Sustancias
1g
Arena
Algodn
5g
Silica gel
100 mL
Etanol 96
5 mL
Hexano
5 mL
Acetato de etilo
5 mL
Metanol
5 mL
Agua destilada
5 mL
Acetona
5 mL
Trietilamina
20 mg
Violeta cristal
20 mg
Anaranjado de metilo
- 23 -

3.3. Determinacin del eluyente apropiado para separar una mezcla de violeta cristal
(VC) y anaranjado de metilo(AM).
3.3.1. Preparacin de la cromatoplaca.

Se marca una lnea recta sobre la placa coromatogrfica con lpiz, a 3-5 mm del borde
inferior mas corto, debe cuidarse de no estropear la superficie. Se disuelve un cristal de VC
en 1 mL de etanol (disolucin de V), un cristal de anaranjado de metilo en 1 mL de etanol
(disolucin de A) y un cristal de cada uno de ellos en 2 mL de etanol (M). Se tienen tres
disoluciones: V, A y M. Se introduce un tubo capilar en la disolucin V, tomando una
pequea cantidad de la misma y por su extremo se coloca en la placa de cromatografa,
sobre la lnea de origen, a unos 2 mm del borde izquierdo de la placa. A la misma altura y a
unos 2 mm del borde derecho se coloca con otro capilar una mancha de la solucin A y en
la parte central de la placa una mancha de la solucin M de nuevo con un capilar diferente
(Cuidado, no confundir los capilares de cada disolucin!). Se puede utilizar el mismo
capilar para hacer la aplicacin, siempre y cuando se lave con etanol agua 1:1 antes de
volver a usarse (ver Figuras 3 y 4).
3.3.2 Elucin de la cromatoplaca.

Las aplicaciones (manchas) se dejan secar y se introducen en el interior de una cubeta de
cromatografa conteniendo de 3-5 mL del disolvente a probar, de modo que el disolvente no
toque la zona en la que se encuentran las aplicaciones (Figura 4). Se tapa la cubeta y
cuando el disolvente ha ascendido a alcanzar 5 mm del borde superior se saca la placa y se
marca, con lpiz, el nivel del disolvente en un extremo de la misma. Es importante que
mientras dure la elucin, el sistema permanezca sin perturbaciones. Se deja secar y se
miden las distancias recorridas por el frente del disolvente y para cada aplicacin para
calcular el valor de Rf ( Figura 5). Los eluyentes a probar son: cloroformo, acetato de etilo,
etanol, agua, metanol, y etanol-trietilamina en una proporcin 9:1. Un equipo puede utilizar
un eluyente diferente y despus comparar todos los cromatogramas.
- 24 -

A partir de los resultados obtenidos, seleccionar el eluyente ms adecuado o la combinacin

de eluyentes adecuada para separar la mezcla de colorantes VC y AM. Haga el anlisis de
los resultados y seleccione el eluyente ms adecuado para esta separacin.
3.3.3 Separacin por cromatografa en columna de una mezcla de VC y AM.
3.3.3.1 Preparacin de la columna y de la muestra.

Se sujeta la columna, en posicin vertical, a un soporte utilizando dos pinzas: una cerca de
la llave y otra en la parte superior y se introduce un pequeo copo de algodn en su
extremo inferior sin apretar y luego 1 cm aproximadamente ade arena o tierra de
diatomceas.. Se coloca un erlenmeyer debajo de la columna y un embudo en la parte
superior (Figura 9).
En un vaso de precipitados se prepara una suspensin con 5g de gel de slice (adsorbente) y
50 mL del eluyente seleccionado. Se aade un poco de etanol a la columna y luego se vierte
la suspensin previamente preparada en su interior. Se abre la llave, se golpean suavemente
las paredes de la columna mientras dura la sedimentacin del adsorbente para que este se
compacte adecuadamente procurando que no se formen burbujas y evitando que se seque la
gel de slice. El eluyente que se va recogiendo de la columna se incorpora al vaso donde se
prepar la suspensin adsorbente-eluyente para as recuperar la gel de slice que hubiera
podido quedar y se transvasa todo de nuevo a la columna.
3.3.3.2 Elucin de la columna

Se deja que el eluyente baje hasta una altura sobre el adsorbente de 1-2 mm, se cierra la
llave de la columna se quita el embudo y con una pipeta se aade cuidadosamente 1 mL de
una solucin preparada de violeta cristal y naranja de metilo en etanol. Se abre la llave de la
columna para que esta disolucin quede inmersa en la gel de slice y se vuelve a cerrar
cuando la disolucin de colorantes alcanza una altura de 1 mm sobre el adsorbente.
Se aade con una pipeta 0.5 mL del eluyente con mucho cuidado y muy lentamente para no
perturbar el frente de la columna. A continuacin, se abre la llave y de deja que el nivel del
eluyente alcance 1 mm por encima del adsorbente. Se coloca un copo de algodn sobre la
superficie de adsorbente y se aaden 5 mL del eluyente, se abre la llave y se contina
- 25 -

aadiendo eluyente para desarrollar la columna hasta que se recoja el primer colorante.
Despus se utiliza una mezcla de disolventes: etanol/trietilamina en proporcin 9:1 como
eluyente para el segundo colorante ( Figura 10).
Figura 10.- Esquema de separacin de dos componentes por Cromatografa en Columna
3.4. Instrucciones Particulares

No permitir que el nivel del lquido eluyente sobrepase el nivel de la fase mvil (slica)
durante todo el proceso.
4.1 A partir de los resultados obtenidos por CCF:
4.1.1 Dibuje todos los cromatogramas obtenidos.
4.1.2 Calcule el Rf para cada compuesto.
4.1.3 Cul de los dos colorantes es el compuesto ms polar?
4.1.4 Cul es el disolvente ms adecuado para esta separacin?
4.1.5 Sera adecuado utilizar metanol en esta separacin?
4.2 A partir de los resultados obtenidos por CC:
4.2.1 Haga seis dibujos que muestren el desarrollo de la columna durante el transcurso del
experimento.
4.2.2 Se separaron los colorantes de acuerdo con lo previsto por CCF? Explique.
4.2.3 Cul es la funcin de aadir trietilamina al etanol para eluir al segundo colorante?
Explique.
- 26 -

4.2.4 Qu ventajas tiene la CC con respecto a la CCF?

4.2.5 Que esperara si se utiliza una slica gel de menor tamao de partcula (mayor
mallaje)?
5. CONCLUSIONES
sobre el resultado de su practica
6. CUESTIONARIO
5.1. Por qu los derivados halogenados suben ms que los alcoholes en una cromatografa
encapa fina?
5.2. Al cambiar un eluyente menos polar por otro ms polar cmo se afecta la velocidad de
elucin de un alcohol? y la de una cetona?
5.3. El valor del Rf depende del adsorbente utilizado? y del eluyente?
5.4. Sugerir un ensayo para determinar la pureza de un compuesto por CCF
5.5. Investigue las estructuras qumicas y los usos de los colorantes VC y AM, a qu grupo
genrico pertenecen c/u?
5.6. Investigue cinco referencias bibliogrficas sobre cromatografa existentes en la
biblioteca de UPIBI y ctelas.
7.- BIBLIOGRAFA
7.1 Manual de prcticas de laboratorio de qumica orgnica, Departamento de qumica
orgnica,
Facultad
de
Farmacia,
Universidad
de
Alcal,
Espaa:
www2.uah.es/quimica-organica/docencia/
7.2 Harris, C. Daniel, Anlisis qumico cuantitativo, 2 Edicin, Ed. Revert, 2001, p.
628.
7.3 Douglas A. Skoog, F. James Holler, and Timothy A. Niewman, Principios de
anlisis instrumental, Quinta ed. 1992, Ed. Mc Graw Hill.
8. BIBLIOGRAFIA ADICIONALES.
- 27 -

PRCTICA No. 3
PROPIEDADES QUIMICAS DE HALOGENUROS DE ALQUILO Y
ALCOHOLES
1. OBJETIVOS
Que el alumno:
1.1. distinga los hidrocarburos: alcanos, alquenos y aromticos, mediante reacciones
qumicas,
1.2.Identifique halogenuros de alquilo, mediante reacciones qumicas especficas.
1.3.Identifique los alcoholes, mediante reacciones qumicas especficas.
1.4.Compare halogenuros de alquilo y alcoholes mediante sus propiedades fsicas y
qumicas.
2. INTRODUCCIN
Halogenuros de alquilo
Los compuestos orgnicos halogenados pueden ser considerados como derivados de
los hidrocarburos (por la sustitucin de uno o ms hidrgenos por un halgeno).
De acuerdo a sus caractersticas qumicas, se pueden clasificar en las siguientes categoras.
Alquilo
Halogenuros
Primarios
Secundarios
R2
CH X
Terciarios
R3
Allicos
CH2
Benclicos
Vinilo
CH2
CH
CH CH2
CH2
X
X
X
X
Arilo
Los halogenuros de alquilo son en general molculas relativamente reactivas y sufren

reacciones de sustitucin y eliminacin. Los halogenuros de arilo y de vinilo generalmente
- 28 -

son inertes a las reacciones de sustitucin y eliminacin debido a la influencia que ejercen
las insaturaciones sobre el enlace carbono halgeno de estos compuestos. El enlace CX es
un enlace muy polarizado que conduce a la asociacin de las molculas por atraccin de
dipolos permanentes. En los alcoholes las asociaciones atractivas entre molculas ocurren
por enlaces del tipo puente de hidrgeno (un tipo particular de interaccin dipolo-dipolo),
lo que ocasiona que los puntos de ebullicin de los halogenuros de alquilo sean ms bajos
que los alcoholes correspondientes
La reaccin principal de los R-X es la sustitucin nucleoflica, las reacciones de los
halogenuros de alquilo primarios usualmente sigue un mecanismo SN2 (substitucin
nucleoflica de segundo orden) y sus reactividades relativas presentan el siguiente orden:
metlico >> primario > secundario. En muchas reacciones tpicas que se efectan por este
mecanismo la velocidad de reaccin para el Me-X puede ser de 10 a 20 veces ms rpida
que para su anlogo de etilo (Et-X). Este tipo de reaccin se evidenciar en esta prctica con
el reactivo de KI en acetona.
Las reacciones de los derivados terciarios siguen un mecanismo del tipo SN1
(sustitucin nucleoflica unimolecular): el paso determinante de la reaccin es el
rompimiento heteroltico del enlace carbono-halgeno para formar el intermediario
(carbocatin). Los halogenuros de alquilo secundarios pueden reaccionar por mecanismos
del tipo SN1 y SN2 o un hbrido de ambos, esto depender de las condiciones de reaccin.
El proceso SN2 se ve favorecido por nuclefilos fuertes, alta concentracin del reactivo y
solventes poco polares. El mecanismo SN1 es favorecido por nuclefilos dbiles y baja
concentracin, y especialmente en solventes altamente polares.
Hidrocarburos
Los hidrocarburos pueden clasificarse bsicamente en tres tipos: a) los saturados que
incluyen alcanos y los cicloalcanos, b) los insaturados dentro de los que se encuentran los
alquenos (olefinas) y los alquinos (acetilenos), c) los aromticos.
Los alcanos y cicloalcanos son prcticamente inertes desde el punto de vista qumico,
a causa de esta baja reactividad, se les denomina parafinas (compuestos de poca afinidad).
No existen pruebas qumicas simples para identificar a los hidrocarburos saturados, estos
- 29 -

deben en general ser detectados indirectamente al dar negativas las pruebas qumicas de
insaturacin o aromaticidad. Para el caso de los alquenos, cicloalquenos y alquinos, la
presencia de insaturaciones se puede confirmar por medio de reacciones de cishidroxilacin, con una solucin acuosa de permanganato de potasio (prueba de Baeyer) y
por la adicin de una molcula de Br2, entre otras pruebas. Casi todos los alquenos y
alquinos reaccionan con estos reactivos. El nmero de dobles enlaces se puede determinar
cuantitativamente si se mide la cantidad de bromo consumido.
Prueba de Baeyer:
R
2 KMnO4
R
HO
R
R
OH
2 MnO2
2 KOH
Los alquenos son fcilmente oxidados por ciertos reactivos, incluyendo

permanganato de potasio acuoso. El producto orgnico depende de las condiciones de
reaccin, la cis-hidroxilacin se favorece bajo condiciones suaves y el rompimiento a un
cido dicarboxlico se favorece bajo condiciones ms vigorosas:
La prueba de permanganato de Baeyer es ms selectiva que la reaccin con Bromo;
sin embargo, tambin presenta sus limitantes, puesto que casi todas las molculas que se
pueden oxidar, como los aldehdos y fenoles, dan positiva esta reaccin. Afortunadamente,
los dos procesos son complementarios, se recomienda realizar primero la prueba de Baeyer
y si es positiva, continuar con la prueba del bromo. Los alquenos y los alquinos son los
nicos hidrocarburos que son solubles en cido sulfrico fro.
Adicin de Br2
R
CCl4
+
R
Br2
R
R
+ Br
- Br
Br
R
- 30 -
R
R
Br
Br
R
R

La excepcin a la reaccin del bromo son aquellas molculas que contienen grupos
fuertemente atractores de electrones cerca del enlace mltiple; otra complicacin de esta
prueba es la tendencia de los enlaces C-H adyacentes al doble enlace a reaccionar con el
bromo a travs de una reaccin de sustitucin (va radicales libres) que produce la
formacin de cido bromhdrico. Estas reacciones de sustitucin se pueden detectar por la
formacin de niebla cida, cuando se sopla en la parte superior del tubo de reaccin.
Por otro lado, los compuestos aromticos constituyen una familia de especies
qumicas muy extensa y variada; todos sus integrantes guardan una estrecha relacin con el
benceno, miembro ms sencillo del grupo de los hidrocarburos aromticos. La presencia de
la estructura electrnica aromtica, estabilizada por la deslocalizacin de los electrones pi,
les confiere un comportamiento qumico singular si se les compara con otras especies
anlogas. Los compuestos aromticos no sufren las reacciones tpicas de alquenos. Sin
embargo, distan de ser inertes y en condiciones adecuadas, experimentan fcilmente
reacciones de sustitucin electroflica aromtica (reacciones en las que un electrfilo
sustituye a uno de los hidrgenos del anillo aromtico).
Alcoholes
Los alcoholes son derivados de los hidrocarburos saturados o insaturados a los que se
les ha reemplazado un tomo de hidrgeno por un grupo hidroxilo (-OH). La qumica de los
alcoholes tambin dependen del tipo de grupo R al que est unido el OH, con base en esto se
les puede clasificar en las siguientres especies: alqulicas, arlicas, vinlicas y benclicas.
Los alcoholes alqulicos pueden ser: primarios (RCH2OH), secundarios (R2-CH-OH),
terciarios (R3C-OH) y allicos (CH2=CH2-CH2-OH). Si el OH est unido directamente a un
doble enlace se denomina vinlico. Los alcoholes reaccionan como cidos con bases fuertes,
sin embargo tambin pueden comportarse como bases con cidos fuertes o de Lewis.
Las principales reacciones qumicas de los alcoholes involucran la ruptura heteroltica
de la unin C-OH por lo que pueden sufrir reacciones de sustitucin o eliminacin de
manera anloga a los halogenuros de alquilo.
Algunas de las reacciones caractersticas de los alcoholes permiten distinguir
alcoholes primarios y secundarios de los alcoholes terciarios. La prueba de Lucas
- 31 -

proporciona cierta informacin de la estructura del alcohol, puesto que se basa en la

conversin del alcohol al cloruro de alquilo correspondiente (insoluble en agua). La
facilidad de dicha reaccin depende de la estabilidad del carbocatin que se forma y
permite diferenciar los alcoholes primarios y secundarios de los terciarios. Los alcoholes
allicos se comportan como los terciarios (puesto que pueden estabilizar la carga del catin
por deslocalizacin).
Si el grupo -OH est unido a un anillo aromtico los compuestos se denominan
fenoles. El efecto que el grupo hidroxilo ejerce sobre la molcula es el de proporcionar una
polaridad considerable, les permite asociarse por medio de enlaces por puente de
hidrgeno, presentan adems caractersticas hidroflicas (afinidad por el agua) y les
confiere propiedades cidas (ej. fenoles). Sus puntos de ebullicin y de fusin son ms altos
que los de los alcanos y alquenos correspondientes debido a las fuerzas de atraccin que se
presentan entre los hidroxilos.
Por otro lado, los fenoles poseen dos grupos funcionales importantes: el anillo
bencnico y el grupo hidroxilo, por lo que las propiedades qumicas de estos compuestos
incluyen las caractersticas de ambos. El protn del grupo hidroxilo aromtico es ms cido
que el protn de los alcoholes alifticos, as mismo el anillo bencnico es ms susceptible al
ataque por reactivos electroflicos. Dos de las reacciones qumicas que permiten identificar
en forma rpida un fenol es su reaccin con lcalis y su reaccin con cloruro frrico.
Muchos fenoles y algunos compuestos relacionados (enoles) forman complejos de
coordinacin con el in frrico de colores rojos, azules, prpuras o verdes.
3. SECCIN EXPERIMENTAL.
3.1 Materiales
20
Tubos de ensayo
Gradilla
Pipetas de 5 mL
Bao mara
- 32 -

3.2 Reactivos
3.2.1. Halogenuros de alquilo
Sustancias de prueba: clorobenceno,
Solucin de nitrato de plata
cloruro de bencilo, diclorometano, cloruro de t-butilo y
en etanol al 2%
cloruro de sec-butilo
KI al 15% en acetona
Solucin cido ntrico

diluido (1:20)
3.2.2. Hidrocarburos
Solucin de Br2 en CCl4 al
Acetona
3%
Sustancias de prueba: Ciclohexano, ciclohexeno,
Tetracloruro de carbono
aceite comestible, benceno y tolueno.

Solucin de KMnO4 al 1%
-Solucin acuosa de Br2 al

3%
3.2.3. Alcoholes
Reactivo de Lucas
solucin acuosa de cloruro

frrico al 3%
Sustancias de prueba: metanol, n-butanol, t-butanol, sec-
Sodio metlico
butanol, fenol y resorcinol
Reactivo de Lucas: Enfriar 21 mL de HCl concentrado y adicionar 27.2 g de ZnCl2

anhidro, agitar hasta disolucin y colocarla a temperatura ambiente.
3.3 Procedimiento experimental

3.3.1. Propiedades Qumicas de los halogenuros
3.3.1.1 Reaccin con nitrato de plata.
-Se colocan en diferentes tubos de ensayo 0.2 mL de los siguientes halogenuros:
clorobenceno, cloruro de bencilo, diclorometano, cloruro de t-butilo y cloruro de secbutilo. Rotular cada tubo previamente.
- 33 -

-Adicionar 1 mL de una solucin etanlica de AgNO3 al 2%, agitar y dejar en reposo los
tubos bien tapados.
-Se tiene una prueba positiva si se presenta un precipitado del haluro de plata (blanco)
dentro de los primeros cinco minutos. Si no se presenta reaccin en este tiempo, abrir los
tubos y calentar ligeramente en bao mara, hasta que la solucin empiece a ebullir,
durante dos minutos. Anotar sus observaciones.
-Si se forma un precipitado, ya sea a temperatura ambiente o por calentamiento, verifique
que se trata del haluro de plata y no de una sal de plata proveniente de un cido orgnico,
adicionar 1 gotas de cido ntrico diluido. Las sales de plata se disuelven, el haluro de
plata no.
3.3.1.2 Reaccin con yoduro de potasio.
-Se colocan en diferentes tubos de ensayo 0.2 mL de los halogenuros probados en el
procedimiento anterior.
-Adicionar 1 mL de una solucin de KI al 15% en acetona, agitar y dejar reposar.
-Se obtiene una prueba positiva cuando se presenta un precipitado blanco dentro de los
primeros cinco minutos. Si no ocurre la reaccin, calentar los tubos en bao de agua a
50, despus de cinco minutos enfriar a temperatura ambiente. Anotar las observaciones.
3.3.2. Reacciones Qumicas de Insaturacin.

3.3.2.1 Prueba de Permanganato o de Baeyer.
Colocar en un tubo de ensayo 3 gotas del lquido (30 mg del slido) a probar ms 1
mL de acetona. Adicionar unas gotas de solucin acuosa de permanganato de potasio al
1%, agitar vigorosamente y observar el tubo. Se tendr una prueba positiva cuando en el
lapso de 1 minuto se pierda el color prpura y se forme un precipitado caf insoluble.
3.3.2.2 Prueba de Bromo en Solucin Orgnica.
En un tubo de ensayo colocar 3 gotas del lquido (o 30 mg del slido) a probar,
adicionar 1 mL de tetracloruro de carbono y de 5 a 6 gotas de una solucin de bromo al 3%
- 34 -

en tetracloruro de carbono y agitar. La desaparicin del color proporciona una prueba

positiva, exponer el tubo a la luz y observar si existe la aparicin de niebla en la parte
superior del lquido.
NOTA: Todos los experimentos anteriores hacerlos con ciclohexano, ciclohexeno, aceite
comestible, benceno y tolueno.
3.3.3. Propiedades Qumicas de Alcoholes y Fenoles.

3.3.3.1 Propiedades cidas.
-Se colocan en un tubo de ensaye 1.0 mL de etanol y en otro tubo de ensaye 1.0 mL de tbutanol.
-A cada tubo se le aade un trozo muy pequeo de sodio metlico.
-Observe y tome el tiempo que tarda en llevarse a cabo cada reaccin.
-Una vez terminada la reaccin, vace el contenido de cada tubo en sendos vidrios de reloj,
deje que se evapore el disolvente.
-Aada 1 mL de agua destilada y mida el pH con papel indicador.
3.3.3.2 Prueba de Lucas.

-Se colocan en un tubo de ensaye 1.5 mL del reactivo de Lucas
-Se adicionan 5 gotas del alcohol a analizar (n-butanol, t-butanol y sec-butanol), se agita
vigorosamente y se deja reposar.
-Se anota el tiempo requerido para la formacin del cloruro de alquilo, que aparece como
una capa insoluble o una emulsin. Los alcoholes terciarios presentan una separacin de
fases inmediata, los secundarios requieren cerca de 5 minutos para reaccionar y los
primarios aproximadamente una hora.
3.3.3.3 Reaccin del Complejo Frrico.
-Se colocan aproximadamente 10 mg (fenol, resorcinol y n-butanol) de la sustancia a
analizar en un tubo de ensayo y se disuelve en 2 mL de etanol.
- 35 -

-Se adicionan unas gotas de solucin acuosa de cloruro frrico al 3%, y se agita
vigorosamente.
-Se compara el color de la solucin con un tubo testigo al que solo se le debe agregar etanol
y el cloruro frrico. Anotar sus observaciones.
3.4. INSTRUCCIONES PARTICULARES.
3.4.1 Varios de los reactivos utilizados en esta prctica son txicos, el bromo puede adems
causar quemaduras.
3.4.2 Manejar las soluciones con especial cuidado y en la campana de extraccin.
3.4.3 Las pruebas qumicas se realizarn con pequeas cantidades que pueden ser
manejadas fcilmente en frascos de reactivos por lo que la posibilidad de inhalacin es
mnima.
3.4.4 Manejar los reactivos en una rea ventilada y con precaucin, puesto que a los
hidrocarburos aromticos se consideran txicos y carcingenos.
3.4.5 Los compuestos fenlicos en estado puro o soluciones concentradas son txicos y
causan quemaduras, evite el contacto con la piel.
3.4.6 Evitar la inhalacin de los vapores de los halogenuros de alquilo que se producen en
la prueba de Lucas. Recuerde que son txicos.
3.4.7 La solucin de FeCl3 3% debe prepararse el da de la prctica.
4.1. Complete la siguiente tabla en base a reactividad observada de los Halogenuros
Compuesto
Reacciones
Tipo de halogenuro
AgNO3
T. amb.
KI
calor T. amb.
Diclorometano
Clorobenceno
- 36 -
calor

Cloruro de bencilo
Cloruro de ter-butilo
Cloruro de sec-butilo
4.1.2. Escriba las ecuaciones qumicas que representen la reactividad observada.

4.1.3. Discuta la reactividad observada de los diferentes tipos de halogenuros probados con
AgNO3 y KI.
4.1.4. Comente la reactividad en funcin del tipo de halogenuro empleado. Explique.
4.2. Reacciones Qumicas de Insaturacin

Nombre del
REACCIONES
Compuesto
Br2/CCl4
KMnO4
Ciclohexano
Ciclohexeno
Aceite comestible
Benceno
Tolueno
4.2.1 Escriba las ecuaciones qumicas que representen la reactividad observada.
4.2.2 Discuta la reactividad observada de los alcanos, los alquenos y los hidrocarburos
aromticos con Br2/CCl4 y con KMnO4.
4.3. Reacciones Qumicas de Alcoholes y Fenoles
Propiedades cidas
Compuesto
Tiempo de reaccin (Observaciones)
metanol
t-butanol
Prueba de Lucas
n-butanol
- 37 -

t-butanol
sec-butanol
Reaccin con FeCl3
Compuesto
Observaciones
Fenol
n-butanol
Resorcinol
4.3.2. Escriba las ecuaciones qumicas que representen la reactividad observada.

4.3.3. Discuta la reactividad observada de los alcoholes con sodio y con ZnCl2 (reactivo
de Lucas). Comente el porqu los alcoholes no reaccionan como cidos con
hidrxido de sodio.
4.3.4. Comente la reactividad en funcin del tipo de alcohol empleado. Explique.
5. CONCLUSIONES
sobre el resultado de su practica
6. CUESTIONARIO
6.1. Describa el mecanismo de reaccin de un halogenuro de alquilo con AgNO3.
6.2. Describa el mecanismo de reaccin de un halogenuro de alquilo con KI.
6.3. Escriba el mecanismo general para una reaccin de eliminacin E1 y E2.
6.4. Describa el mecanismo de reaccin de los alcoholes en la reaccin de substitucin
nucleoflica con el reactivo de Lucas. Explique a partir de esto la diferencia en la velocidad
de reaccin de los alcoholes probados.
6.5. Qu prueba qumica utilizara para diferenciar entre: 1-butanol y terbutanol, fenol y
alcohol undeclico, 1-butanol y cloruro de butilo? Explique su respuesta.
- 38 -

6.6. Investigue cules de los siguientes hidrocarburos son saturados y cuales insaturados,
seale que tipo de pruebas le permiten diferenciarlos: Pineno, Aceite de parafina, Gasolina
y Ciclohexano.
Hidrocarburo
saturado insaturado
Prueba(s) qumica (s)
Pineno
Aceite de parafina
Gasolina
Ciclohexano
6.7. Qu alqueno es el producto principal cuando cada uno de los siguientes alcoholes son
deshidratados con cido? Escriba las estructuras: a) 2-metil-2-butanol; b) 3-metil-2-butanol.
7.
BIBLIOGRAFA.
7.1 Fessenden R. J., y Fessenden J.S., Qumica Orgnica. Grupo Editorial
Interamericano(1983).
7.2 Solomons. T. W. G., Qumica Orgnica, Ed. Limusa, (1983).
7.3 Wingrove, A. S. y Caret, R. L., Qumica Orgnica, Harla, (1984).6.4. Hart, H. and
Schuetz, R. D., Organic Chemistry, Hounghton Mifflin Company (1986).
7.4 Shriner, R. L., Fuson, R.C., and Curtin, D., Systematic Identification of Organic
Compounds, John Wiley and Sons, (1964).
7.5 Wilcox, C. F., Experimental Oraganic Chemistry, A Small Scale Aproach., Mc.
Millan Jr. (1988).
7.6 Wilcox, C.F., Experimental Organic Chemistry. A Small Scale Aproach, M. Millan
Jr. (1983).
7.7 Vogel, A.I., Elementary PRCTICAl Organic Chemistry part I. Small Scale
Preparations, Longmono (1978).
7.8 Pine, S. H. Hendrickson, J. B. Craw, D. J. y Hammond, G. S., Qumica Orgnica,
Ed. Mc. Graw Hill (1985).
8. BIBLIOGRAFIA ADICIONAL
- 39 -

PRACTICA No. 4
MEDICION DE LA DENSIDAD, INDICE DE REFRACCION Y PUNTO DE
EBULLICION DE SERIE HOMOLOGA DE HIDROCARBUROS ALIFATICOS
(C6,C8,C10 y C12)
1.
OBJETIVOS:
Que el alumno:
-Determine la densidad de la serie homologa de alcanos
-Discuta a partir de los resultados experimentales, algunas propiedades fisicoquiicas de
alcanos
-Analize, si la densidad se puede utilizar como criterio para establecer la pureza de un
lquido.
-Determine el ndice de refraccin de hexano, octano, decano, dodecano
-Determine el punto de ebullicin como criterio de pureza e identidad de substancias
qumicas.
2. INTRODUCCION
La densidad de los lquidos se mide de una manera similar a como se midi la densidad de
los slidos. En este caso tambin se emplearn tres mtodos: el del picnmetro, el de la
probeta y el del principio de Arqumedes. Es necesario tener en cuenta la temperatura
porque sta influye en el valor de la densidad: a medida que aumenta la temperatura, la
densidad del lquido se hace ligeramente menor. Por qu?
Un picnmetro (figura 1) es un pequeo frasco de vidrio de volumen exacto y conocido
(Vp). Se pesa vaco (wp), luego se llena completamente (includo el capilar) con el lquido
cuya densidad se desea determinar y finalmente se pesa (wpl). Con estos datos se puede
calcular la densidad del lquido:
(1)
- 40 -

Soluciones Una solucin es una mezcla homognea de dos o ms componentes. A aqul

componente que se encuentra en mayor cantidad se conviene en llamarlo solvente y a los
dems solutos. Cuando uno de los componentes es el agua, entonces la solucin se
denomina acuosa y el solvente es el agua. Cuando la solucin tiene nicamente dos
componentes se llama binaria.
Figura 1.
Picnmetro
La concentracin de un soluto en una solucin es la cantidad relativa del soluto con

respecto a una determinada cantidad de solvente o de solucin. Una de las formas ms
usadas para expresar la concentracin es el porcentaje peso a peso que se calcula como:
Porcentaje p/p =
(2)
As por ejemplo, una solucin de NaCl de concentracin 2.5% p/p indica que por cada
100 g de la solucin hay 2.5 g de NaCl. La densidad de una solucin acuosa se mide del
mismo modo como se mide la densidad de un lquido puro. El sentido de la vista es en
extremo importante para el hombre en la observacin , ya que proporciona una gran parte
de informacin en torno al mundo. Cuando la luz pasa de un medio a otro, parte de la luz
incidente se refleja en la frontera. El resto pasa al nuevo medio. Si un rayo de luz incide a
cierto ngulo respecto de la superficie(no perpendicularmente), el rayo se desva cuando
entra al nuevo medio. Esta desviacin se denomina refraccin. La figura 2 muestra un rayo
que pasa de un medio a otro. El ngulo 1 es el ngulo de incidencia y es el ngulo de
refraccin. El rayo se desva hacia la normal cuando entra al lquido, esto siempre sucede
cuando el resto entra en un medio en el que la velocidad de luz es menor que en el aire.
- 41 -

La refraccin es la causa de varias ilusiones pticas comunes. Por ejemplo una persona
que permanece en pie en aguas pocos profundas parece como si tuviera piernas mas cortas.
El ngulo de refraccin depende de la velocidad de la luz en los dos medios as como el
ngulo incidente. En tanto el ndice de refraccin de un lquido esta dado por la relacin
entre el seno del ngulo de incidencia de un rayo de luz en el aire, con respecto al seno del
ngulo de refraccin en el liquido, tal como lo muestra la figura 2.
Figura 2.
La aplicacin del ndice de refraccin en la Qumica es que permite determinar
caractersticas de los lquidos (en este caso sustancias orgnicas), como la pureza,
composicin, e igualmente caractersticas de las reacciones en la obtencin de sustancias
binarias a travs del uso del refractmetro, instrumento muy utilizado en procesos qumicos
en el laboratorio como la destilacin, rectificacin, nitracin y esterificacin entre otras,
porque permite analizar de una manera ms eficiente y experimental los resultados
obtenidos en los procesos anteriormente nombrados.
La pureza e identidad de una substancia orgnica queda establecida cuando sus
constantes fsicas (punto de fusin y de ebullicin, peso molecular, ndice de refraccin,
rotacin especfica, espectro de absorcin, etc.) y sus propiedades qumicas son idnticas a
las registradas en la bibliografa cientfica para dicha substancia.
Por la sencillez de la determinacin de los puntos de fusin y ebullicin, y sobre
todo porque son las constantes que con ms frecuencia se pueden encontrar en la
- 42 -

bibliografa, constituye su determinacin una de las operaciones de rutina en el laboratorio

de qumica orgnica.
Recordemos que el punto de fusin de una substancia se define como la temperatura
en que a la presin atmosfrica, se encuentra en equilibrio con los estados slido y lquido
de dicha substancia. Los puntos de fusin para una substancia pura no deben tener
variacin mayor de un grado (1oC).
El punto de ebullicin de una substancia se define como la temperatura a la cual su
presin de vapor es igual a la presin atmosfrica normal (760 mmHg). Una determinacin
exacta requiere el uso de aparatos complicados, en los cuales el termmetro est tan cerca o
en contacto con la fase lquida como con la gaseosa, cuando se ha alcanzado el equilibrio.
Pero en las determinaciones de rutina en qumica, se puede emplear un matraz de
destilacin ordinario y alguno de los mtodos semimicro (mtodo de Siweloboff) o
microqumico (Emich).
3.
SECCIN EXPERIMENTAL
3.1 Materiales y reactivos: Medicin de la densidad

Picnmetro
hexano
Balanza analtica
octano
Papel higinico
decano
decano
3.2 Materiales y reactivos ndice de refraccin

Tubos de ensayo.
Reactivos
Pipeta.
Etanol al 96%.
Refractmetro.
Agua destilada.
Termmetro.
hexano
Pao limpiador.
octano
Cetona.
decano
- 43 -

3.2 Materiales y reactivos punto de ebullicin
Equipo
Reactivos
Pinzas
Hexano
Mechero
Octano
Tubo de Thiele
Decano
Tubo de Ensaye (5x50
Tubos capilares
Termmetro
Fusmetro
Tapones monohoradado
3.4.1 Determinacin de la densidad por el mtodo del picnmetro

a) Mida en una balanza analtica el peso del picnmetro vacio, registre en su bitcora el
peso y la temperatura.
b) Enjuague primero el picnmetro con un poco del lquido de inters antes de llenarlo.
Mida el peso del picnmetro con el lquido de inters y registre en su bitcora el peso y la
temperatura.
La densidad se calcula por medio de la ecuacin 1.
Temperatura del lquido (T): __________ C
Peso del picnmetro vaco (wp): __________ g
Volumen del picnmetro (Vp): __________ mL
Anote los dems datos en la tabla 3.1.
3.4.2. Procedimiento ndice de refraccin

La medicin del ndice de refraccin se divide en dos partes:
La primera parte consiste en aprender a cuidar y manejar el refractmetro, y tomando
medidas precavidas se busca obtener el ndice de refraccin de el etanol en diferentes
concentraciones cuando esta combinado con agua. cada grupo determinado procede a
tomar dos medidas del ndice de refraccin de la sustancia en diferentes porcentajes de
etanol; para ello cada grupo debe hacer las concentraciones adecuadas de etanol en el agua
- 44 -

empleando alcohol etlico al 96% (ya que este es muy econmico), y por medio de clculos
buscar la manera ms apropiada para realizar dicha combinacin binaria aproximndose a
los porcentajes requeridos.
En la segunda parte, teniendo hexano, octano y decano se procede a medir el ndice de
refraccin empleando un refractmetro. Se mide la temperatura en la cual se obtuvieron las
lecturas y se comparan con las reportadas en la literatura.
3.4.3 Procedimiento: determinar el punto de ebullicin de la serie homologa

1
En un tubo pequeo (3 mm de dimetro de 6 a 8 cm de longitud), se colocan de 5 a 6

gotas de la muestra.
Se introduce un tubo capilar cerrado por un extremo y la seccin abierta dirigida al

fondo del primer tubo. Se liga al tubo, conteniendo el capilar, a un termmetro,
procurando que la columna del lquido quede pegada al bulbo.
Tubo y termmetro se introducen en un Thiele o en un bao de los que se emplean para

determinar puntos de fusin, se calienta el bao lentamente hasta que el capilar empiece
a desprender burbujas.
Se detiene el calentamiento y se anota la temperatura que registr el termmetro en el

momento en el que dejan de desprenderse burbujas. La temperatura leda corresponde al
punto de ebullicin de la muestra a la presin ambiente.
Todas las dems muestras se determinan de la misma manera
4. DISCUSION Y RESULTADOS
4.1 Datos obtenidos con el picnmetro
Mtodo del picnmetro
Lquido wpl (g)
wpl- wp (g)
pentano
hexano
octano
decano
- 45 -

4.2 Complete el cuadro.

PUNTO DE EBULLICION
Compuesto
Formula
Peso
P. Ebullicin P.
Molecular
terico
Ebullicin
experimental
pentano
hexano
octano
decano
4.3 INDICE DE REFRACCION

Indice de fraccin
Terico
Practico
pentano
hexano
octano
decano
5. CONCLUSIONES
El alumno concluir si los objetivos se cumplieron. Se oberva alguna tendencia en la serie
homologa?
6 CUESTIONARIO
6.1. Qu factores afectan el ndice de refraccin?
6.2. Es posible identificar un liquido conociendo nicamente su ndice de refraccin?
Justique su respuesta
6.3. Son el ndice de refraccin y la densidad de un liquido directa o inversamente
proporcional?
- 46 -

6.4 Cree usted que el ndice de refraccin se puede utilizar para determinar el fin de una
reaccin.
6.5. Por que es importante la determinacin de los puntos de fusin y de ebullicin ?
6.6 Como se determinan puntos de fusin mixtos ? (sustancias mezcladas)
6.7 Qu se entiende por curva de correccin ?
6.8 Defina lo que es Punto de ebullicin.
6.9 En que consiste el mtodo microqumico de Emich para determinar puntos de
ebullicin ?
6.10 Cite otras propiedades fsicas de las substancias que pueden ayudarnos a identificarlas.
7. BIBLIOGRAFIA
8.1http://docencia.udea.edu.co/cen/tecnicaslabquimico/02practicas/practica03.htm
8.2.http://www.google.com.mx/search?hl=es&q=practica+de+determinacion+puntos+de+e
bullicion&btnG=Buscar&meta=
- 47 -

PRCTICA No. 5
SINTESIS DEL CLORURO DE terc-BUTILO A PARTIR DE terc-BUTANOL
1.
OBJETIVOS
El alumno:
1.1.
Sntetizar del cloruro de terc-butilo mediante reaccin de susbstitucin
nucleoflica del terc-butanol.

1.2
Purificar y caracterizar el cloruro de tercbutilo.
2. INTRODUCCION
La conversin de alcoholes en cloruros de alquilo se puede efectuar por varios
procedimientos. Con alcoholes primarios y secundarios se usan frecuentement cloruro de
tionilo y haluros de fsforo;tambien se pueden obtener calentando el alcohol con acido
clorhidrico concentrado y cloruro de zinc anhidro. Los alcoholes terciarios s convierten al
haluros de alquilo con cido clorhidrico solo y en algunos casos sin calentamieno.
CH3
H3C
C OH
CH3
HCl
H3C
CH3
C Cl
+ H2O
CH3
Terc-butanol
Cloruro de terc-butilo
3. SECCION EXPERIMENTAL
Materiales
Reactivos
Parrilla calentamiento
tercbutanol
Balanza analtica
Acido clorhdrico
Sistema de destilacinsimple
Bicarbonato de sodio
Matraz esfrico 250 ml/junta 24/40
hielo
1.Embudo de separacin
2. Vasos de precipitados de 100ml
Barra de agitacin
termomentro
Bomba de agua
- 48 -

En un matraz de fondo redondo provisto de una barra magntica se aaden 18 mL de

alcohol terc-butlico y 60 mL de cido clorhdrico concentrado. Sin tapar, se agita la mezcla
suavemente. Despus de un minuto aproximadamente, se aumenta la agitacin y se agita
vigorosamente durante cinco minutos ms. Finalmente la mezcla se transvasa a un embudo
de decantacin y se deja en reposo hasta que las dos capas se separen completamente.
La capa acuosa se saca del embudo y se desprecia. El cloruro de terc-butilo se lava con
unos 25 mL de disolucin saturada de bicarbonato sdico. El embudo de llave, destapado,
se agita suavemente mediante un ligero movimiento circular hasta que cese el fuerte
desprendimiento gaseoso. Entonces se tapa el embudo, se invierte cuidadosamente y se abre
la llave para igualar la presin. A continuacin se agita, primero con suavidad, luego
enrgicamente, abriendo la llave con frecuencia para que salgan los gases. Por ltimo se
saca y se desprecia la capa de bicarbonato y el cloruro de terc-butilo se lava una vez ms
con unos 20 mL de agua. Tras decantar la capa acuosa, se transvasa el cloruro de terc-butilo
bruto a un erlenmeyer pequeo y se deja secar con cloruro clcico escoriforme (como el
cloruro de terc-butilo es muy voltil, conviene mantener tapado el erlenmeyer y agitar ste
de vez en cuando, para acelerar el secado). El lquido del erlenmeyer se decanta a un
matraz de fondo redondo y se destila recogiendo la fraccin que destila entre 48-52C(es
aconsejable enfriar el matraz de recogida en un bao de agua-hielo). Determinar el
rendimiento de la reaccin.
4.1 Anote las propiedades fisicoquimicas observadas del producto de reaccin y comparelas
con las reportadas en la literatura.
4.2 Calcule el rendimiento de la reaccin
5. CONCLUSIONES
El alumno concluir en base a su experimentacin si se alcanzaron los objetivos de la
prctica.
6. CUESTIONARIO
6.1 Cul es el mecanismo de reaccin para la obtencin del cloruro de terbutilo
- 49 -

6.2 Consulte la toxicidad del cloruro de terbutilo, del terbutanol, acido clorhidrico
6.3 Los residuos de la reaccin contienen agua,cloruro de calcio y terbutanol. Qu es
necesario hacer antes de desecharlos por el drenaje?
6.6 Reporte los espectros de IR del terbutanol y del cloruro de terbutilo, asignado las
bandas caractersticas de los grupos funcionales.
7. BIBLIOGRAFIA
7.1 "Curso Prctico de Qumica Orgnica" R. Brewster, C.A. Vanderwert y W.E. McEwen.
Ed. Alhambra, Madrid, 1965.
7.2 "Qumica Orgnica Experimental". H.D. Durst y G.W. Gokel. Ed. Revert, Barcelona,
1985
7.3.http://search.conduit.com/Results.aspx?q=SINTESIS+DEL+CLORURO+DE+TERTBUTILO&ctid=CT2
126482&octid=CT2126482
- 50 -

PRACTICA No. 6
ALDEHIDOS Y CETONAS; SINTESIS DE DIBENZALACETONA
1. OBJETIVOS
1.1. Identificar el grupo carbonilo mediante reacciones qumicas.

1.2. Demostrar la influencia de los sustituyentes del carbono carbonlico en los aldehdos y
cetonas mediante reacciones qumicas especficas.
1.3. Sintetizar la dibenzalacetona mediante una reaccin de condenzacin aldolica cruzada
2.
INTRODUCCION
Uno de los grupos funcionales ms importantes en qumica orgnica es el grupo

carbonilo (C=O), figura 1. Existen muchas clases de compuestos carbonlicos,
dependiendo de que grupos R2 estn unidos a la unidad C=O, sin embargo, la qumica de
los grupos carbonilo es muy similar, independientemente de su estructura exacta. Cuando
un grupo R1 es un grupo alquilo, alquenilo, alquinilo o arilo, al grupo R1-C=O se le conoce
como grupo acilo. El grupo acilo forma parte de la estructura de un gran nmero de
compuestos, por ejemplo, los cidos carboxlicos (R2 = OH), steres R2 = OR), tiosteres
(R2 = SR), amidas (R2 = NHR), anhdridos (R2 = O(O=)CR), halogenuros de cidos (R2 =
Cl), que conjuntamente con los aldehdos (R2 = H) y cetonas [R2 = alquilo o fenilo],
participan como intermediarios fundamentales en la biosntesis de molculas de
importancia biolgica en los organismos vivos.
Figura 1. Grupo carbonilo

- 51 -

Reactividad qumica de los compuestos carbonlicos

Particularmente la conducta qumica y espectroscpica de de los compuestos
carbonlcos dependen principalmente del grupo carbonilo, adems de algunas variaciones
que se manifiestan por las diferencias en la naturaleza qumica de los grupos R unidos a l.
El doble enlace carbono-oxgeno del grupo carbonilo se encuentra polarizado
debido a la alta electronegatividad del oxgeno respecto a la del carbono, por tanto los
compuestos carbonlicos tienen momento bipolar grande. En consecuencia, el carbono
carbonlico tiene carga parcial positiva por lo que es un sitio electrfilo y es atacado por
nuclefilos. A la inversa, el oxgeno carbonlico tiene carga parcial negativa y es u sitio
nuclefilo. As, una de las reacciones ms generales para esta clase de compuestos son las
adiciones de agentes nucleflicos.
En los aldehdos y cetonas, los grupos H y R que estn unidos al grupo acilo, no
pueden estabilizar una carga negativa y por tanto no pueden actuar como grupos salientes.
Sin embargo, en los cidos carboxlicos y sus derivados, los grupos acilo que estn
unidos a sustituyentes G que contienen tomos de oxgeno, halgeno o nitrgeno, pueden
estabilizar una carga negativa y por tanto pueden funcionar como grupos salientes en
reacciones de sustitucin nucleoflica.
- 52 -

Ionizacin de los cidos carboxlicos.
Los cidos carboxlicos, como su nombre lo indica, tienen la capacidad ionizarse en

agua y producir iones hidronio (H3O+), por lo que sus soluciones tienen pH menor que 7.0.
Para la mayora de los cidos carboxlicos, la constante de acidez Ka es del orden de

10-5. Por ejemplo, el cido actico tiene Ka = 1.8 x 10-5 que corresponde a un pKa de 4.72.
En trminos prcticos, los valores de Ka del orden de 10-5 significan que solo estn
disociadas alrededor de 1 % de las molculas en una solucin 0.1 M, en contraste con el
100 % de disociacin encontrado para los cidos minerales como el HCl y H2SO4.
Aunque mucho mas dbiles que los cidos minerales, los cidos carboxlicos son
mucho mas fuertes como cidos que los alcoholes. Por ejemplo, la Ka para el etanol es
aproximadamente de 10-16, lo que hace al etanol un cido ms dbil. La mayor acidz del
cido actico con respecto del etanol, se debe a que el anin carboxilato que resulta de la
ionizacin se estabiliza por resonancia.
- 53 -

Los cidos carboxlicos reaccionan con bases como:

a) hidrxidos de metales alcalinos o alcalinoterreos como el hidrxido de sodio (NaOH); b)
carbonatos (Na2CO3) o bicarbonatos (NaHCO3) de metales alcalinos o alcalinoterreos para
formar las sales carboxlicas (carboxilatos) de los metales correspondientes.
c) con amoniaco (NH3) o aminas (RNH2) para formar carboxilatos de amonio o

alquilamonio.
Reactividad de hidrgenos y condenzacin aldlica.

Muchas de las reacciones de importancia de los compuestos carbonlicos, tienen
lugar sobre el tomo de carbono adyacente al grupo carbonilo (carbono ). Un ejemplo, es
la enolizacin, proceso en el cual, un tomo de hidrgeno unido al carbono de un
compuesto carbonlico (hidrgeno ) se desplaza al oxgeno carbonlico, a este proceso
tambin se le conoce como TAUTOMERIA CETO-ENOLICA.
- 54 -

Los hidrgenos al grupo carbonilo de aldehdos y cetonas, poseen una acidz

considerablemente mayor que sus hidrocarburos anlogos. Eso es atribudo a la capacidad
del grupo carbonilo de para deslocalizar la carga negativa de la base conjugada, mejor
conocido como el equilibrio CARBANION-ENOLATO, especie que participa tambin en
el proceso de enolizacin catalizada por bases.
Los iones enolato participan en algunos procesos sintticos de la qumica orgnica

que son de mayor importancia. La mayora de las reacciones del in enolato, tiene lugar a
travs del carbanin como nuclefilo, y no a travs del oxgeno del enolato, tambin
sabemos que el tomo de carbono carbonlico es electrfilo.
La combinacin de ambas especies, la nucleoflica del carbanin enolato y la
electroflica del carbono carbonlico, conduce a un importante grupo de mtodos sintticos
conocidos como REACCIONES DE CONDENSACION DEL CARBONILO. Un ejemplo
de estas reacciones es la CONDENSACION ALDOLICA, que es el resultado de combinar
dos molculas de aldehdo (monmeros) para generar un aldol (dmero).
Por otra parte, los aldehdos que no contienen hidrgenos , no pueden formar iones
enolato, por lo que no pueden dimerizarse en una condenzacin aldlica. Sin embargo,
estos aldehdos se pueden hacer reaccionar con otros aldehdos o cetonas que contengan
hidrgenos
producindose
una
condenzacin
CONDENZACION ALDOLICA CRUZADA.

- 55 -
entre
ambos,
conocida
como

Una condenzacin aldlica cruzada es ms til cuando solo uno de los carbonos
vecinos al grupo carbonilo tiene hidrgenos . Por ejemplo, las metilcetonas pueden ser
usadas en las condenzaciones aldlicas cruzadas con aldehdos que no contienen
hidrgenos (aldehdos aromticos o formaldehdo), ejemplo:
O
O
H
H3C
BENZALACETOFENONA
Pruebas de identificacin de aldehidos y cetonas
a) Centraremos nuestra atencin en aquellas reacciones que permiten diferenciar los

aldehdos y cetonas de otro tipo de compuestos y que proporcionan un esquema til
de identificacin qumica, as como un criterio qumico esencial. Por ejemplo, la
reaccin de aldehdos y cetonas con aminas primarias da lugar a la formacin de
iminas, conocidas como bases de Schiff, y constituyen intrmediarios importantes en
la biosntesis de aminocidos. Algunos productos del tipo imnicos como las
oximas, hidrazonas, fenilhidrazonas, 2,4-dinitrofenilhidrazonas y semicarbazonas,
se forman a partir de aldehdos o cetonas con los compuestos nitrogenados
hidroxilamina, hidracina, fenilhidrazina, 2,4-dinitrofenilhidrazina y semicarbazina
respectivamente, constituyen derivados estables que se pueden caracterizar con
relativa facilidad. En especial las 2,4-dinitrofenilhidrazonas (DNFH) son derivados
slidos de alto peso molecular, cuyo color depende del grado de conjugacin de los
aldehdos o cetonas, por lo que se les emplea como medio de identificacin qumica
de compuestos que tienen la funcin aldehdo o cetona.
b) Otro tipo de reaccin que proporciona informacin valiosa es la oxidacin. Las
cetonas no se oxidan con facilidad como ocurre con los aldehdos que forman
rpidamente cidos carboxlicos. El permanganato de potasio (KMnO4) y el
dicromato de potasio (K2Cr2O7) son los compuestos ms empleados, pero no son los
nicos que se pueden utilizar, tambin agentes oxidantes suaves como las sales de
plata y cobre son muy empleadas.
- 56 -

c) El reactivo de Tollens (solucin alcalina de hidrxido de plata amoniacal), se utiliza

para la identificacin qumica de aldehdos, formandose un espejo de plata al
oxidarse el compuesto en prueba.
d) El reactivo de Benedict (solucin alcalina de citrato o tartrato cprico), tambin es
til , sin embargo es ms sensible el reactivo de Tollens.
e) Por otro lado, la prueba de la Fucsina de Shifft amoniacal, muestra la fcil
formacin de aductos de SO2 de aldehdos pero no de cetonas. Algunas otras
reacciones se utilizan para distinguir a los aldehdos de las cetonas como lo es la
prueba del Yodoformo, bisulfito, etc.
3.
SECCION EXPERIMENTAL.
3.1. Material y equipo.
15 tubos de ensayo
2 pipetas graduadas de 1 mL
1 embudo de filtracin
1 matraz erlenmeyer de 125 mL
1 agitador devidrio
2 vasos de precipitados de 250 mL
1 Bao mara.
1 parrilla de calentamiento
1 pinza para tubo de ensayo
3.2. Reactivos
Reactivos
de
prueba:
Benzaldehdo,
Glucosa, Solucin etanlica de verde de
Acetaldehdo, Ciclohexanona, acetona, etanol, cido bromocresol al 0.02%

actico y cido benzoico.
Solucin de nitrato de plata al 5 %
Agua destilada
Solucin de hidrxido de amonio al 2 %
Etanol 96 %
Solucin acuosa de CuSO4 al 7 %
Solucin de KMnO4 al 0.3 %
Solucin de NaOH 0.5 N
Acido sulfrico concentrado
Solucin de NaOH al 10 %
Solucin de HCl concentrado
Papel filtro
- 57 -

Solucin de 2,4-dinitrofenilhidrazina.
a) Colocar 0.3 g de 2,4-dinitrofenilhidrazina en u vaso de precipitados de 50 mL.

b) Adicionar 1 mL de agua y 1 mL de H2SO4 concentrado.
c) Agitar, dejar enfriar y adicionar 15 mL de etanol.
Solucin alcalina de tartrato de sodio y potasio.
a) Disolver 4 g de tartrato de sodio y potasio y 14 g de NaOH en 100 mL de agua.
Solucin de yodo al 10 % en yoduro de potasio.
a) Disolver 10 g de yodo en una solucin que contenga 20 g de yoduro de potasio
3.3. Procedimiento experimental
3.3.1. Reacciones del grupo carbonilo.
3.3.1.1 Reaccin con la 2,4-dinitofenilhidracina
a) A 1.0 mL de reactivo de 2,4-dinitrofenilhidracina, adicionar unas gotas del

compuesto a identificar (glucosa, benzaldehdo o acetona) o si es slido, 50 mg
disuelto en una mnima cantidad de etanol del 95 %.
b) Una prueba positiva se obtiene con la formacin de un precipitado de color amarillo
a rojo.
c) Si no aparece un precipitado dentro de los primeros 15 minutos, calentar
ligeramente por 5 minutos, dejar reposar y observar.
- 58 -

3.3.1.2. Reaccin de Tollens, identificacin del grupo aldehdo (formacin del espejo
de plata.
a) Colocar en un tubo d ensayo 1.0 mL de una solucin de nitrato de plata al 5 %.

b) Adicionar gota a gota 1.0 mL de solucin de NaOH al 10 % (observar la formacin
de un precipitado)
c) Con agitacin constante, adicionar gota a gota una solucin diluida de amoniaco
(aproximadamente al 2 %) hasta que se disuelva el precipitado (no exceder la
cantidad de amoniaco).
d) Agregar unas gotas de la sustancia a identificar (benzaldehdo o acetona), agitar y
dejar reposar 10 minutos.
e) Si no se observa ninguna reaccin, calentar los tubos en un bao de agua a 40C
durante 10 minutos y dejar reposar.
f) La prueba es positiva cuando se forma un espejo de plata. Hacer esta prueba con los
5 reactivos.
Nota: los compuestos orgnicos insolubles en agua, se pueden disolver en alcohol.
3.3.1.3. Reaccin con permanganato de potasio.
a) En un tubo de ensayo, colocar 6 gotas del reactivo a evaluar (benzaldehdo o

acetona)
b) Agregar 1 o 2 gotas de solucin de permanganato de potasio al 0.3 % y agitar.
c) Si en el transcurso de 1 minuto no se observa alguna reaccin, adicionar 1 gota de
solucin de hidrxido de sodio al 10 %.
3.3.1.4. Reaccin de Fehling (para aldehdos o azcares reductores)
a) En un tubo de ensayo adicionar:

a) 1 mL de solucin acuosa al 7 % de CuSO4
b) 1 mL de solucin alcalina de tartrato de sodio y potasio
c) 0.5 mL (0.5 g) de la muestra a analizar (glucosa o acetona).
- 59 -

b) Colocar los tubos en un bao de agua hirviendo durante 10 minutos

c) Anotar sus observaciones
3.3.1.5. Reaccin del haloformo (identificacin de metilcetonas)
En un tubo de ensayo mezclar:

a) Tres gotas del lquido a probar (benzaldehdo y acetona)
b) 2 mL de agua
c) 2 mL de hidrxido de sodio al 10 %.
d) Adicionar gota a gota y con agitacin, una solucin de yodo al 10 % en yoduro de
potasio hasta que un color caf persista (esto indica un exceso de yodo).
Con algunos compuestos, el precipitado de yodoformo (color amarillo) aparece casi de
inmediato y en fro. Si esto no ocurre en los primeros 5 minutos:
a) Calentar la solucin a 60 C.
b) Si desaparece el color caf, adicionar ms solucin de yodo hasta que el color persista
mnimo por dos minutos.
c) En este momento, adicionar algunas gotas de la solucin de hidrxido de sodio para
eliminar el exceso de yodo y diluir la mezcla con 5 mL de agua.
d) Dejar reposar 5 minutos a temperatura ambiente.
3.3.2. Reaccin de neutralizacin de los cidos carboxlicos (formacin de una sal)
a) En tres tubos de ensayo que contienen 2 mL de agua y 2 gotas de bromocresol, adicionar:

b) En el primero, dos gotas de agua (control).
c) En el segundo, dos gotas de cido actico.
d) En el tercero, un cristal de cido benzoico y solubilizar.
e) A cada uno de los tres tubos anteriores, adicionar gota a gota una solucin de NaOH 0.5
M hasta el vire del indicador bromocresol. Anotar observaciones.
- 60 -

3.3.3. Sntesis de dibenzalacetona.

En un matraz erlenmeyer de 125 mL colocar:
a) 0.4 g de hidrxido de sodio y disolver con 2 mL de agua destilada.
b) 2 mL de alcohol etlico al 95 %.
c) Enfriar a 0C la solucin formada sobre un bao de hielo-sal
d) Adicionar 0.3 mL de acetona
e) Adicionar 0.8 mL de benzaldehdo
f) Agitar la mezcla de reaccin durante 15 minutos, tiempo en el cual se forma un
slido amarillo que posteriormente se convierte en un precipitado floculento.
g) Filtrar sobre un embudo Buchner.
h) Lavar el slido resultante con agua fra.
i) Recristalizar de alcohol etlico
j) Filtrar, secar y determinar el punto de fusin y sacar el rendimiento de la reaccin.
Nota: Si al recristalizar el producto presenta una coloracin rojiza, neutralizar el exceso de
hidrxido de sodio con una solucin de cido clorhdrico al 50 % hasta obtener un pH de 78.
a) El material de vidrio que se utiliza en cada prueba, debe estar perfectamente limpio
para evitar interferencia de contaminantes que lleven a una falsa interpretacin.
b) No oler directamente ningn reactivo ni mezcla de reaccin y evitar el contacto de
los reactivos con la piel, particularmente tener especial cuidado con la 2,4dinitrofenilhidrazina porque es cancergena y los cidos carboxlicos son corrosivos.
c) En la reaccin de Tollens, el reactivo de hidrxido de plata amoniacal, debe
prepararse justo en el momento de usarse. Una solucin en reposo de ste
compuesto puede descomponerse y depositar un precipitado explosivo de nitruro de
plata (Ag3N). Para asegurar la eliminacin total de trazas de este reactivo, adicionar
al trmino de la prueba cido ntrico concentrado a los tubos de ensayo y colocar
esta solucin en un frasco de desecho.
- 61 -

4.
RESULTADOS Y DISCUSIN
4.1. Resumir las observaciones de cada prueba en las tablas siguientes:
4.1.1 Reaccin con la 2,4-dinitrofenilhidrazina

Compuesto
Observaciones
Glucosa
Benzaldehdo
Acetona
4.1.2 Diga que tipo de compuestos caracteriza esta prueba y cuales son sus limitantes:
4.1.2 Reaccin de Tollens

Compuesto
Observaciones
Benzaldehdo
Acetona
4.1.3 Diga que tipo de compuestos caracteriza esta prueba y cuales son sus limitantes
4.1.3 Reaccin con permanganato de potasio
Compuesto
Observaciones
Benzaldehdo
Acetona
4.1.4 Reaccin de Fehling
Compuesto
Observaciones
Glucosa
Acetona
62

4.1.5 Reaccin del haloformo

Compuesto
Observaciones
Benzaldehdo
Acetona
4.1.6 Reaccin de cidos carboxlicos con NaOH
Compuesto
Observaciones
Control
cido actico
cido benzoico
4.2. Reportar el punto de fusin del compuesto sintetizado y compararlo con el de la

literatura.
4.3. Anexar copia de los espectros infrarrojos reportados en la literatura para un

aldehdo y una cetona, (se discutir al final del curso).
5.
CONCLUSIONES
El alumno concluir si los objetivos se cumplieron
6.
CUESTIONARIO
6.1. Escriba las ecuaciones de las reacciones qumicas que tienen lugar en cada
experimento.
5.2. Explicar:
a) a que se debe la reactividad del grupo carbonilo?
b) que tipo de reacciones pueden presentar?
63

5.3 Investigar en que tipo de compuestos de origen natural se encuentran presentes el

grupo aldehdo y cetona.
7.
BIBLIOGRAFA
7.1. Mayo, D. W. and P. Ke, R. M. Microscale Organic Laboratory. Jhon Wiley and
Sons, 1977.
7.2.Wilcox, C. F. Experimental Organic Chemistry. A Small-Scale Approach. Ed. Mc.
Millan, 1978.
7.3.Pavia, D. L., Lampan, G. M., Kriz, S. G. Introduction to Organic Laboratory
Technique. W. B. Saunders Company. London, 1976.
7.4. Voguel, A. I. A Text book of Practical Organic Chemistry. Ed. Longmans, London,
1982.
7.5. Pasto, D., Jonson, C. R., Determinacin de Estructuras Orgnicas. Ed. Revert, S.
A. Mxico, 1974.
64

PRCTICA No. 7
ACIDOS CARBOXILICOS-SINTESIS DEL CIDO ACETILSALICLICO
1. OBJETIVOS
Que el alumno:
1.1 Sintetice cido acetilsaliclico (un analgsico) mediante reaccin del cido saliclico y
anhdrido actico en un proceso no contaminante.
1.2 Analice la pureza de los principios activos obtenidos mediante las tcnicas: purificacin
por cromatografa y punto de fusin.
1.3 Identifique la formacin del cido acetilsaliclico mediante la tcnica espectroscpica de
IR y RMN
1.4 Analice mediante comparacin las dos metodologas de sntesis y concluya.
2. INTRODUCCIN
El cido acetilsaliclico se utiliza ampliamente como analgsico, para mitigar el dolor, y como
antipirtico, para bajar la fiebre. Mejor conocido como aspirina, tambin reduce la
inflamacin y an es capaz de prevenir ataques cardiacos. No obstante que para algunas
personas presenta efectos secundarios, se le considera lo bastante segura para ser vendida sin
prescripcin mdica. Debido a que es fcil de preparar, la aspirina es uno de los frmacos
disponibles menos costosos. Es producida en grandes cantidades. De hecho la industria
farmoqumica produce cerca de 200 toneladas de ste farmoqumico cada ao. Una tendencia
actual dentro de la qumica es el desarrollo de tecnologas qumicas benignas al medio
ambiente, que utilicen en forma eficiente las materias primas, de preferencia renovables,
eliminando la generacin de desechos y evitando el uso de reactivos y disolventes txicos y/o
peligrosos en la manufactura y aplicacin de productos qumicos. A esta nueva rama de la
qumica se le ha denominado qumica verde.
En esta prctica se sintetizar la aspirina utilizando anhdrido actico para acetilar el grupo
fenlico del denominado cido saliclico, utilizando un procedimiento libre de disolventes.
- 65 -

O
O 1) NaOH (TA)
OH
O
OH
2) HCl
COOH
OH
3.1 Materiales y equipos
3.2 Reactivos
1 Vaso de precipitados de 100 mL cido saliclico
0.560 g
1 Pipeta graduada de 10 mL
Anhdrido actico
1.2 mL
1 Matraz kitazato c/manguera
Acetato de etilo
10 mL
1 Esptula de acero inoxidable
Hexano
10 mL
1 Embudo buchner
Carbonato de sodio
1g
1 Matraz erlenmeyer de 125 mL
cido clorhdrico 1:1 en agua 10 mL
1 Agitador de vidrio
1 Papel filtro
1 Mortero con pistilo
1 cromatoplaca
1 Vaso de precipitados de 10 mL
3.3 Procedimiento Experimental

3.3.1 Sntesis de la aspirina
En un vaso de precipitados de 100 mL coloque 0.560 g (4 mmol) de cido saliclico y 1.2 mL
(1.3 g, 12.68 mmoles) de anhdrido actico. Con una varilla de vidrio mezcle bien los dos
reactivos. Una vez que se obtenga una mezcla homognea, adicione 4 lentejas de NaOH (o
KOH) previamente molidas y agite nuevamente la mezcla con la varilla de vidrio por 10
minutos. Adicione lentamente 6 mL de agua destilada y posteriormente una solucin de cido
clorhdrico 1:1 gota a agota, hasta que el pH de la solucin sea de 3. La mezcla se deja enfriar
en un bao de hielo. El producto crudo se asla por medio de una filtracin al vaco. Los
cristales del cido acetilsaliclico se bajan con agua bien fra (el cido acetil saliclico se
redisuelve en agua tibia). Purifique el producto crudo por medio de una recristalizacin con 9
- 66 -

mL de una mezcla de acetato de etilo:hexano (6:4). Aisle los cristales por medio de una
filtracin al vaco. Determine el rendimiento y el punto de fusin.
4.1 Escriba el mecanismo para la transformacin del cido saliclico en el cido
acetilsaliclico.
4.2 Indique la funcin de cada una de las sustancias utilizadas en la sntesis.
4.3
Calcule el rendimiento con base en el cido cido saliclico
4.4 Dibuje la cromatoplaca, indicando los valores de Rf para el cido saliclico y el cido
acetilsaliclico.
4.5 Obtenga sus conclusiones acerca de la pureza del producto obtenido, as como de la
idoneidad del mtodo de sntesis, con base en el punto de fusin (comparado con el punto
de fusin reportado para el producto puro), el anlisis del cromatrograma y el rendimiento
obtenido.
4.6 Asigne las principales bandas de adsorcin de los espectros de IR para el cido saliclico y
la aspirina.
OH
COOH
MeO
O
O
COOH
- 67 -

5. CONCLUSIONES
El alumno en base al trabajo experimental, concluir si los objetivos de la prctica se
alcanzaron en base a los resultados obtenidos.
6. CUESTIONARIO
6.1 Investigue las diferencias entre el los alcoholes y los fenoles.
6.2 Investigue si es posible obtener la aspirina a partir de cido saliclico por reaccin con
cloruro de acetilo.
6.3 Qu prueba qumica utilizara para diferenciar entre el cido saliclico y la aspirina?
Explique su respuesta..
6.4 Cmo se identifica por IR la presencia de un ster? Explique.
7. BIBLIOGRAFA.
7.1 Fessenden, R.J. y Fessenden. J. S., Qumica Orgnica, Ed. Interamericana (1983).
7.5 Wilcox, C. F., Experimental Oraganic Chemistry, A Small Scale Aproach., Mc. Millan
Jr. (1988).
7.6 Wilcox, C.F., Experimental Organic Chemistry. A Small Scale Aproach, M. Millan Jr.
(1983).
7.7 Vogel, A.I., Elementary PRCTICAL Organic Chemistry part I. Small Scale
Preparations, Longmono (1978).
7.8 Pine, S. H. Hendrickson, J. B. Craw, D. J. y Hammond, G. S., Qumica Orgnica, Ed.
Mc. Graw Hill (1985).
7.9 Curzons, A.D.; Constable, D.J.C.; Mortimer, D.N; and Cunningham, V.L.; Green
Chemistry, 2001, 3, 1-6.
- 68 -

PRACTICA No. 8
IDENTIFICACIN Y REACTIVIDAD DE AMINAS
1.- OBJETIVOS.
Que el alumno
1.1. Identificar los tipos de aminas alifticas mediante reacciones qumicas cido-base.
1.2. Identificar aminas aromticas mediante reaccin con cido nitroso.
1.3. Sintetizar acetanilida mediante reaccin de anhdrido actico y anilina.
2.- INTRODUCCION.
Las aminas son sustancias moderadamente polares; poseen puntos de ebullicin

mayores que los compuestos no polares, pero menores que los alcoholes o cidos carboxlicos
de peso molecular comparable. Las aminas primarias y secundarias forman enlaces de
hidrgenos fuertes entre si y con el agua. Las aminas terciarias no forman enlaces de
hidrgenos entre ellas, pero si lo hacen con molculas de agua u otros disolventes prticos.
R
H
R
H
H
R
R
H
H
H
Puentes de hidrgeno entre si
Puentes de hidrgeno con el agua
Las aminas son menos bsicas que los iones hidrxido o etxido, pero ms bsicas que
los alcoholes, teres y esteres, por la misma razn que el amoniaco es ms bsico que el agua,
por lo tanto forma soluciones acuosas ligeramente alcalinas por formacin del hidrxido de
amonio.
Acido 2
Base
2
_
+
NH4(H2O) + OH (H2O)
Base 1 Acido 1
NH3 + H2O
Base 1
Acido 2
+
N
H
Acido 1
Base 2
H
H
Solucin
Alcalina
Conjugados
Conjugados
- 69 -

a)Aminas Alifticas
Una amina aliftica es ms bsica que el amoniaco, porque los grupos alquilo donan
densidad electrnica hacia el nitrgeno (efecto inductivo), dejando as mas disponible al par
de electrones libres para ser compartido con un cido. Por otro lado, cuando las aminas se
convierten en su correspondiente in amonio, los grupos alquilo liberadores de electrones
tienden a dispersar la carga positiva, estabilizndola, del mismo modo que es estabilizado un
carbocatin. Las diferencias en basicidad entre aminas alifticas primarias < secundarias >
terciarias se deben a una combinacin de efectos inductivos (favorece) y estricos
(desfavorece).
Aminas alifticas
N
N
R
Primaria
a)
R
R
Secundaria
Terciaria
Aminas Aromticas
Las aminas aromticas son menos bsicas que las aminas alifticas debido a que el par
de electrones del nitrgeno se encuentra comprometido parcialmente por resonancia con el

anillo aromtico, por lo que est menos disponible para ser compartido con un in hidrgeno.
Los sustituyentes (G) en la parte aromtica tienen un efecto determinante en la basicidad, es
decir sustituyentes electrodonadores (
electroatractores (
) la incrementan, de lo contrario, sustituyentes
) la disminuyen. En la medida en que el grupo G sea mas electroatractor
de densidad electrnica, la amina ser menos bsica, sin embargo, los hidrgenos sern ms
cidos.
N
H
H
Estas aminas se asemejan en muchas reacciones a las aminas alifticas, pero difieren
en el comportamiento qumico con respecto al cido nitroso.
- 70 -

b)
Aminas Heterocclicas
Un tipo de amina muy importante es aquel donde el nitrgeno forma parte de un anillo. Estas
aminas heterocclicas pueden ser saturadas o no, alifticas o aromticas. En algunos casos, el
par de electrones del nitrgeno est en conjugacin con los electrones del anillo, lo que lo
hace aromtico y el nitrgeno pierde su bacicidad, haciendo a su hidrgeno ms cido como el
pirrol, imidazol e indol.
H
N
Piperidina
Pirrolidina
imidazol
Pirrol
Aromticos (6 e )
Piperazina
Piridina
Pirimidina
Indol H
Quinolina
d) Basicidad de aminas
La manera ms conveniente de medir la basicidad de una amina, consiste en considerar

la acidez (pKa) de la sal de amonio correspondiente. Puesto que una amina muy bsica retiene
con fuerza a un protn, su in amonio correspondiente es relativamente poco cido (pKa alto).
Por el contrario, una amina dbilmente bsica retiene a un protn con menos fuerza, y por
tanto su in amonio correspondiente es relativamente ms cido (pKa bajo).
Las aminas pueden separarse de compuestos no bsicos por su solubilidad en cidos;

una vez separados puede regenerarse alcalinizando la solucin acuosa.
- 71 -

e) Aminas naturales
Las aminas se encuentran ampliamente distribuidas en la naturaleza, tanto en plantas
como en animales y muchas de ellas tienen actividad biolgica. Por ejemplo, la trimetilamina
se halla en los tejidos animales y es en parte la causa del olor caracterstico de muchos peces;
la epinefrina (adrenalina) y la norepinefrina son catecolaminas y se conocen como aminas
SIMPATOMIMETICAS, debido a que, en cierta medida, imitan la accin fisiolgica de la
ADRENALINA, como neurotransmisores en el sistema nervioso.
OH
OH
N
HO
HO
H
CH3
H
HO
HO
NOREPINEFRINA
EPINEFRINA (ADRENALINA)
Las aminas naturales de origen vegetal alguna vez fueron conocidas como lcalis
vegetales, ya que sus soluciones acuosas son bsicas, pero ahora se les conoce como
alcaloides. Por ejemplo, la quinina es un antipaldico importante aislado de la corteza del
rbol sudamericano Cinchona; La cafena es una sustancia aislada del caf que se usa como
estimulante del sistema nervioso central; la morfina fue el primer alcaloide puro aislado del
opio (zumo de la adormidera) y se ha utilizado para aliviar el dolor; la herona es un derivado
de la morfina y se obtiene por sntesis qumica por diacetilacin de la morfina.
HO
OCH3
O
H
OH
H3C
N
N
N
CH3
Qinina (antipaldico)
Cafena
O
H
CH3
H N
CH3
HO
H
Morfina (analgsico)
O
O H
O
H
H N
CH3
Herona
f) Reactividad de las aminas
La qumica de las aminas est dominada por el par de electrones no compartido del
nitrgeno. Debido a este par, las aminas son bsicas y nuclefilas. Reaccionan con:
- 72 -

a) cidos de Bronsted para formar sales de amonio
b) cidos de Lewis (cationes metlicos) para formar compuestos de coordinacin.
c) halogenuros de alquilo para formar alquilaminas
d) cloruros o anhdridos de cidos carboxlicos] para formar amidas (acilamidas)
Una reaccin caracterstica de las aminas aromticas es con cido nitroso para la formacin de
sales de diazonio, azocompuestos que son base de los colorantes orgnicos.
- 73 -

e) Identificacin de aminas
Es posible identificar a las aminas primarias y secundarias de las terciarias por la
preparacin de derivados slidos que tienen puntos de fusin conocidos. Por ejemplo, los
derivados acetilados, que se obtienen rpidamente por la reaccin con anhdrido actico,
cloruro de benzoilo o cloruro de bencen sulfnilo.
La caracterizacin de aminas terciarias es posible mediante la formacin de sus
correspondientes picratos de amonio y metilyoduros que son tambin derivados slidos de
puntos de fusin caractersticos.
En el caso particular de aminas primarias aromticas, es posible diferenciarlas por su
reaccin con el cido nitroso para formar sales de diazonio, clase de compuestos que se
caracterizan por su gran versatilidad en la sntesis de colorantes.
3. SECCION EXPERIMENTAL.
3.1. Material y equipo
10 tubos de ensaye
1 refrigerante
1 termmetro
1 Balanza analtica
2 pinzas univerzales
1 embudo de filtracin
1 soporte universal
1 barra magntica
1 parrilla de calentamiento
1 bao mara
1 bomba de recirculacin H2O
2 vasos de precipitados de 50 ml
2vasos de precipitados de 200 ml
2 matraces erlenmeyer de 100ml
1 matraz erlenemyer de 100 ml
1 balanza granataria
1 determinador de puntos de fusin
.
3.2. REACTIVOS
Solucin acuosa de HCl al 10%
Anilina
Solucin acuosa de NaOH al 10%
Trietilamina
Solucin acuosa de NaOH 3N
o-toluidina
Solucin acuosa de nitrito de sodio al 20%
-naftol
Acetato de sodio trihidratado
agua destilada
cido acetico
Anhdrido acetico
- 74 -

cico acetico glacial
dietilamina
3.3. Reacciones de aminas

3.3.1. Basicidad
Colocar en diferentes tubos de ensayo unas 3 gotas de las siguientes aminas: otoluidina, anilina, etilamina, dietilamina y trietilamina. A cada uno de los tubos:
1) Adicionar 1m de agua, agitar y tomar el valor del pH.

2) Calentar ligeramente la mezcla y observar la solubilidad del compuesto.
3) Agregar cido clorhdrico al 10 % hasta disolver (calentar si es necesario).
4) Finalmente, adicionar unas gotas de solucin de hidrxido de sodio al 10% hasta
que se formen dos fases.
5) Anotar las observaciones de los pasos 1) al 4).
3.3.2. Reaccin con cido nitroso.
1) Preparacin de la solucin 1.
a) En un vaso de precipitados de 50 mL disolver 0.1 g de -naftol en 6.3 mL de
hidrxido de sodio 3N.
b) Enfriar la solucin a una temperatura entre 0 - 5 C.
2) Preparacin de la solucin 2.
a) En un segundo vaso de precipitados de 50 mL colocar 1.0 mL de anilina, 3.0 mL de
cido clorhdrico concentrado y 5.0 mL de agua.
b) Enfriar la mezcla en un bao de hielo-sal hasta una temperatura entre 0 - 5 C.
c) Adicionar a esta solucin fra, 5.0 mL de solucin acuosa fra y recientemente
preparada de nitrito de sodio al 20%.
d) Agitar vigorosamente y mantener la temperatura entre 0 5 C, anotar
observaciones.
- 75 -

3) Adicionar lentamente y con agitacin la solucin 2 a la solucin 1, dejar reposar el

producto en el bao de hielo durante 15 minutos, y anotar sus observacio
nes.
3.3.3. Sntesis de acetanilida.
En un matraz baln de 100 mL:
a) Adicionar 3.0 mL de cido actico glacial

b) Disolver 1.4 mL de anilina
c) Adicionar 1.8 mL de anhdrido actico.
d) Colocarle un refrigerante y la mezcla de reaccin se calienta a reflujo en un bao mara
durante 15 minutos.
e) Enfriar el matraz a temperatura ambiente
f) Adicionar con precaucin por la parte superior del refrigerante1.0 mL de agua destilada
(para hidrolizar el exceso de anhdrido actico o cualquier derivado bisacetilado)
g) Calentar a reflujo durante 5.0 minutos y enfriar
h) Verter con agitacin la mezcla de reaccin a un vaso de precipitados que contenga 7.08.0 mL de agua fra.
i) Dejar reposar 15 minutos con agitacin ocasional.
j) Filtrar los cristales y lavarlos con un poco de agua fra.
k) Dejar secar, pesar y determinar su punto de fusin
76

3.4.1 Las aminas son txicas al contacto con la piel

3.4.2 Realice cada reaccin para los tres tipos de aminas.
4.1. Reportar las diferencias en la solubilidad de las aminas cuando se encuentran en medio
cido y bsico.
4.2. Reportar las diferencias observadas para las aminas primarias, secundarias y terciarias
al formar derivados slidos y acetilados.
4.3. Anexar copias de los espectros infrarrojos reportados en la literatura de una amina
primaria, secundaria y terciaria, as como una amina aromtica (se analizarn al final
del curso)
4.4. Calcular el rendimiento de la acetanilida
5. CONCLUSIONES
sobre el resultado de su practica.
6. CUESTIONARIO.
5.1. Escribir las reacciones que tienen lugar en cada experimento.
Basicidad.
Reaccin con cido nitroso.
5.2. Cmo podra distinguir fcilmente entre muestras de -naftilamina y acetanilida?
5.3. Se puede concluir que una sustancia es una amina terciaria porque forma un picrto?,
Explique.
5.4. como podra preparar anilina a partir de clorhidrato de anilina?. Escriba la reaccin.
5.5. Qu derivado preparara para distinguir entre 4-metil anilina y metilanilina?. Escriba
la reaccin.
- 77 -

7. BIBLIOGRAFA
7.1. Wingrove, S. A. y Carret, R. L. Qumica Orgnica, Ed. Harla, 1981.
7.2. Gould, E. S., Mechanism and Structure in Organic Chemistry, Ed. Holt Rinehart.
7.3. Wilcox, C. F., Experimental Organic Chemistry a Small-Scale Approach. MacMillan
Publishing Company, 1988.
7.4. Fessenden R. J. Fessenden J. S., Qumica Orgnica, Ed. Iberoamericana, 1989.
7.5. March, J., Advanced Organic Chemistry, 5 Edition, Ed. Wiley, 1988.
- 78 -

PRCTICA No. 9
OBTENCIN DE BENZOCANA I
1. OBJETIVOS
Que el alumno:
1.1 Sintetice steres mediante dos metodologas diferentes.
1.2 Sintetice benzocana (un anestsico local) mediante reaccin del cido paminobenzoico con etanol en medio cido.
1.3 Analice la pureza de los principios activos obtenidos mediante las tcnicas:
purificacin por cromatografa y punto de fusin. la benzocana mediante la tcnica
espectoscpica de IR.
1.4 Analice mediante comparacin las dos metodologas de sntesis y concluya.
2. INTRODUCCIN
Los fundamentos en cuanto a la reactividad de los cidos carboxlicos se han planteado en
la prctica anterior. En esta prctica se realizan dos procedimientos diferentes para
esterificar. La sntesis de la benzocana implica la esterificacin de un cido carboxlico con
etanol en medio cido.
La sntesis de la benzocaina a partir de la p-Toluidina involucra cuatro reacciones, la
primera consiste en transformar al grupo amino en la amida correspondiente, para
protegerlo. El producto resultante se trata con KMnO4 para oxidar al metilo al cido
benzico. En una tercera reaccin, se desprotege al grupo amino mediante la hidrlisis de la
amida, para generar al cido p-amino benzoico (PABA), en cual finalmente es esterificado
para dar como producto final el anestsico local benzocaina.
A continuacin se describen las distintas reacciones para la obtencin de la benzocaina a
partir de la p-toluidina.
- 79 -

Formacin de la amida. Esta reaccin implica la conversin de la comercialmente

disponible p-Toluidina es su correspondiente amida, la N-acetil-p-toluidina. El
procedimiento empleado para la preparacin de esta amida, es el tratamiento de la ptoluidina con anhdrido actico. La razn por la cual de realiza la acetilacin es para
proteger algrupo amino (-NH2) frente a la oxidacin con KMnO4 que es el siguiente paso,
de no ser protegido el grupo amino este se oxidara hasta el grupo nitro (-NO2). En esta
reaccin se utiliza un grupo protector, este grupo protector es el grupo acilo. Un grupo
protector es un grupo funcional que adherido durante una serie de reacciones protege una
posicin un grupo funcional de una molcula, un buen grupo protector es aquel que es
fcilmente adherido al sustrato de la molcula y que es fcilmente extrado de la misma,
una vez que halla cumplido su papel de protector.
O
H
NH2
CH3
p-toluidina
OH
CH3
anhdrido
actico
N-acetil-p-toluidina
cido actico
Como resultado la amida formada es de gran estabilidad para las siguientes reacciones y el
grupo metilo puede ser oxidado en el siguiente paso sin destruir la funcin del grupo amino
durante el proceso.
Oxidacin con permanganato de potasio. En esta reaccin de lleva a cabo la oxidacin del
grupo metilo al correspondiente grupo carboxlico, empleando para ello un agente oxidante
fuerte, el KMnO4. Durante la oxidacin, la solucin de color violeta del in permanganato
se convierte en una precipitado de color marrn que es el dixido de manganeso (MnO2),
esto es porque durante el proceso de oxidacin el in Mn(VII) es reducido al in Mn(IV).
- 80 -

O
H
O
H
1) OH-
2 KMnO4
2) H3O+
CH3
2 MnO2
COOH
cido-p-acetamidobenzico
N-acetil-p-toluidina
Hidrlisis de la amida. En este procedimiento se hidroliza el grupo funcional amida, es

decir, es retirado el grupo protector acilo, obtenindose as el cido p-Amino benzoico
(PABA). El producto puede ser recristalizado en cido actico diluido.
O
H
NH2
H3O+
COOH
COOH
cido-p-acetamidobenzico
cido p-aminobenzico
Esterificacin. Finalmente, la benzocaina se prepara por la esterificacin directa del cido

p-amino benzoico, empleando para ello etanol y H2SO4 concentrado.
NH2
NH3
1) H3O+
OH
2) Na2CO3
COOH
cido p-aminobenzico
p-aminobenzoato de etilo
- 81 -

3.2 Reactivos
1 Matraz bola de 50 mL juntas 19/23
0.560 g
cido p-aminobenzico 500 mg
1 Refrigerante 19/23
1.2 mL
Alcohol etlico al 96%
50 mL
1 Bao de hielo
10 mL
H2SO4 concentrado
0.5 mL
1 Parrilla con calentamiento
10 mL
NaHCO3
1g
2 Pinzas de tres dedos con nuez
1g
Acetato de etilo
10 mL
1 Soporte universal
10 mL
Hexano
10 mL
Papel pH
1 Papel filtro
1 Cromatoplaca
1 Vidrio de reloj de 5 cm
1 Bomba de vaco
3.3 SECCION EXPERIMENTAL

3.3.1 Sntesis de la benzocana parte 1
En un matraz baln de 50 mL, coloque 500 mg del cido p-aminobenzoico y adicione 10
mL de etanol al 95 %, enfre la solucin en un bao de hielo para luego adicionar 0.5 mL
de H2SO4 concentrado, someta la mezcla a reflujo por 2 horas. Una vez transcurrido el
tiempo del reflujo, la disolucin se transfiere a un vaso de precipitados de 100 mL, el
matraz se enjuaga con 5 mL de agua destilada y se transfiere el contenido al vaso de
precipitados. Enfre la solucin en un bao de hielo-agua y aada poco a poco y con
agitacin NaHCO3 en forma slida hasta que la solucin deje de efervecer (pH = 9).
Induzca a la cristalizacin por enfriamiento y filtre. El slido resultante se recristaliza de
una mezcla de etanol-agua y se determina su punto de fusin. Haga una cromatoplaca
comparativa con el PABA, utilizando como eluyente una mezcla de hexano:acetato de etilo
4:6. Reporte los Rf de cada una.
- 82 -

4. RESULTADOS Y DISCUSION
4.1. Escriba el mecanismo para la transformacin del cido p-aminobenzico en el paminobenzoato de etilo.
4.2. Indique la funcin de cada una de las sustancias utilizadas en la sntesis.
4.3. Calcule el rendimiento con base en el cido p-aminobenzico.
4.4. Dibuje la cromatoplaca, indicando los valores de Rf para el PABA y la benzocana
cada sustancia.
4.
CONCLUSIONES
El alumno concluir sobre los objetivos alcanzados en esta prctica

5.
CUESTIONARIO
6.1 Calcule el rendimiento de la reaccin para la obtencin de la benzocaina

6.1 Reporte todas las propiedades fisicoquimicas de la benzocaina
7. BIBLIOGRAFIA
7.5 Wilcox, C. F., Experimental Oraganic Chemistry, A Small Scale Aproach., Mc.
Millan Jr. (1988).
7.6 Wilcox, C.F., Experimental Organic Chemistry. A Small Scale Aproach, M. Millan
Jr. (1983).
- 83 -

PRCTICA No 10
OBTENCIN DE BENZOCANA II
1. OBJETIVOS
Que el alumno:
1.5 Purifique y mida las propiedades fisicoqumicas de la benzocaina.
1.6 Analice la pureza de los principios activos obtenidos mediante las tcnicas: purificacin
por cromatografa y punto de fusin. la benzocana mediante la tcnica espectoscpica
de IR y RMN.
.
2. INTRODUCCIN
La benzocana o p-aminobenzoato de etilo es el ster etlico del cido p-aminobenzoico
(PABA). Es un anestsico local, empleado como calmante del dolor. Acta bloqueando la
conduccin de los impulsos nerviosos al disminuir la permeabilidad de la membrana
neuronal a los iones sodio.
La benzocana es hidrolizada por las colinesterasas plasmticas y, en un grado mucho
menor, por las colinesterasas hepticas, a metabolitos que contienen PABA. Se elimina
principalmente por metabolismo, seguido de la excrecin renal de los metabolitos.
Est habitualmente indicada para la anestesia local previa de un examen, endoscopia o
manipulacin con instrumentos u otras exploraciones de esfago, laringe, intervenciones
dentales y ciruga oral. Adems, es incorporada a algunos preservativos masculinos
(condones) con el objetivo de retardar la eyaculacin debido a que reduce la sensibildad del
glande, aunque tambin puede llegar a dificultar la ereccin y posteriormente la
eyaculacin.
Adems de los frmacos diseados con la ayuda de mtodos computacionales se ha
determinado la estructura tridimensional de diversos frmacos en uso clnico, obtenidos o
diseados por otros mtodos, y de sus respectivos blancos moleculares. Algunos ejemplos
son la aspirina unida a la enzima cycloooxigenasa I (aunque se sabe que tambin se une a la
cycloooxigenasa II; de ah sus efectos secundarios de irritacin del estmago, gastritis y
- 84 -

dao renal), el imatinib (Gleevec) empleado en el tratamiento de ciertos tipos de

enfermedades malignas (especficamente la leucemia mieloide crnica y los tumores del
estroma gastrointestinal) y la atorvastatina (Lipitor), usada en el tratamiento de la
hiperlipidemia. Esta informacin est siendo de gran utilidad para el diseo de nuevos
frmacos. La Resonancia Magnetica Nuclear es importante para determinar las poibles
estructuras de los frmacos, asi como las interacciones intermoleculares entre frmaco y
receptor.
3.2 Reactivos
1 Bao de hielo
0.560 g
cido p-aminobenzico
500 mg
1 Parrilla con calentamiento
1.2 mL
Alcohol etlico al 96%
50 mL
2 Pinzas de tres dedos con nuez
10 mL
H2SO4 concentrado
0.5 mL
1 Soporte universal
10 mL
NaHCO3
1g
1g
Acetato de etilo
10 mL
10 mL
Hexano
10 mL
Papel pH
1 Papel filtro
1 Cromatoplaca
1 Vidrio de reloj de 5 cm
1 Bomba de vaco
1 equipo de RMN
1
1 Equipo de IR
3.1 Sntesis de la benzocana parte 2.
Una vez transcurrido el tiempo del reflujo, la disolucin se transfiere a un vaso de

precipitados de 100 mL, el matraz se enjuaga con 5 mL de agua destilada y se transfiere el
contenido al vaso de precipitados. Enfre la solucin en un bao de hielo-agua y aada poco
a poco y con agitacin NaHCO3 en forma slida hasta que la solucin deje de efervecer (pH
= 9). Induzca a la cristalizacin por enfriamiento y filtre. El slido resultante se recristaliza
de una mezcla de etanol-agua y se determina su punto de fusin. Haga una cromatoplaca
- 85 -

comparativa con el PABA, utilizando como eluyente una mezcla de hexano:acetato de etilo
4:6. Reporte los Rf de cada una.
Al polvo seco se toma un espectro de IR en KBr y un espectro de RMN para comprobar el
producto obtenido.
4.1 Sntesis de la benzocana
4.1.1
Obtenga sus conclusiones acerca de la pureza del producto obtenido, as como de la

idoneidad del mtodo de sntesis, con base en el punto de fusin (comparado con el
punto de fusin reportado para el producto puro), el anlisis del cromatrograma y el
rendimiento obtenido.
4.1.2
Asigne las principales bandas de adsorcin de los espectros de IR para el PABA y la

benzocana.
5. CONCLUSIONES
El alumno concluir sobre el desarrollo de la prctica, si se alcanzaron los objetivos y metas
iniciales.
6. CUESTIONARIO
6.1 Asigne las principales bandas de adsorcin de los espectros de IR para el PABA y la
benzocana , figuras a y b
Figura a
- 86 -

Figura b
6.2 Asigne los espectros de RMN de 1H y 13C figuras c y d.
Figura c
Figura d
Figura d
- 87 -

7. BIBLIOGRAFA.
7.10
Shriner, R. L., Fuson, R.C., and Curtin, D., Systematic Identification of
Organic Compounds, John Wiley and Sons, (1964).

7.11
Wilcox, C. F., Experimental Oraganic Chemistry, A Small Scale Aproach.,
Mc. Millan Jr. (1988).

7.12
Wilcox, C.F., Experimental Organic Chemistry. A Small Scale Aproach, M.
Millan Jr. (1983).

- 88 -

PRCTICA No. 11
REACCIONESDE IDENTIFICACIN DE AMINOCIDOS Y PROTENAS
1. OBJETIVOS
Que el alumno:
1.1 Identifique los aminocidos mediante el ensayo de ninhidrina y otras pruebas
colorimtricas.
1.2 Precipite las protenas mediante diversos procedimientos fisicoqumicos.
1.3 Identifique cualitativamente la presencia de protenas mediante la reaccin del
biuret.
1.4 Cuantifique la cantidad de protenas como SAB (seroalbmina bobina) presente en
una muestra mediante el uso del mtodo de Folin-Lowry.
2. INTRODUCCIN
Estructura y clasificacin de los aminocidos.
Como su nombre indica los aminocidos son compuestos que poseen un grupo
amino (-NH2) y un grupo cido carboxlico (-COOH) en su estructura. Los aminocidos
son los precursores de los pptidos y de las protenas, y en ellos el grupo amino y el grupo
carboxilo, se encuentran unidos al mismo tomo de carbono, conocido como carbono-
(-aminocidos). La estructura general de los -aminocidos (a excepcin de la prolina,
que es cclica) se muestra en la Figura.
- 89 -

Como se puede apreciar, el carbono- (a excepcin de la glicina) es un carbono

quiral y como tal presentan dos enantimeros (l- y d-). Los 20 -aminocidos presentes en
las protenas son de la serie L- y en su representacin de Fischer poseen el grupo amino
hacia la izquierda. La diferencia entre los aminocidos viene dada por el resto -R, o cadena
lateral, unida al carbono-. Atendiendo a la naturaleza del grupo -R los -aminocidos
pueden clasificarse en:
Neutros o apolares
Polares sin carga
Polares con carga negativa
Polares con carga positiva
Neutros o Apolares. Son 8 los aminocidos que se clasifican como poseedores de

cadenas laterales no polares. La alanina, valina, leucina e isoleucina, poseen cadenas
laterales de hidrocarburos alifticos. La metionina posee una cadena lateral de ter tilico
(C-S-C). La prolina es el nico aminocido cclico, pues el grupo -R se cierra sobre el N
del grupo -amino (realmente es un amina secundaria). Por su parte, la fenilalanina y el
triptfano contienen grupos aromticos.
Polares sin carga. Siete son los -aminocidos cuyo resto -R es polar pero sin
carga. La glicina posee la cadena ms simple, un tomo de hidrgeno. La serina y la
treonina son portadores de un grupo hidroxilo (-OH). La asparragina y la glutamina,
poseen cadenas laterales portadoras de un grupo amida, y por hidrlisis dan lugar,
respectivamente, a aspartato y glutamato, dos aminocidos con carga negativa. La tirosina
posee un grupo fenlico y la cistena debe su polaridad a la presencia de un grupo tilico (SH).
Polares con carga negativa. Existen dos -aminocidos cuyo resto polar posee
carga negativa a pH fisiolgico, debida a la presencia de un grupo carboxilo (-COOH) , el
cido glutmico y el cido asprtico.
Polares con carga positiva. Tres son los -aminocidos que poseen restos -R
cargados positivamente a pH fisiolgico. La lisina posee una cadena lateral de butilamonio,
- 90 -

la arginina presenta un grupo -R de guanidina y la histidina es portadora de un grupo -R

de imidazolio.
Dentro del conjunto de los aminocidos naturales, existen unos que pueden ser
sintetizados por las clulas humanas a partir de otras sustancias, pero tambin hay
aminocidos que debemos tomarlos en la dieta, ya que nuestras clulas no pueden
sintetizarlos o, cuando menos, no en cantidad suficiente para satisfacer la demanda del
organismo; se conocen con el nombre de aminocidos esenciales y son valina, leucina,
isoleucina, treonina, metionina, fenilalanina, triptfano y lisina.
Propiedades cido-base de los aminocidos y los pptidos

El pH del medio en el que se encuentre el aminocido es esencial para determinar
sus propiedades cido-base, aspecto importante pues de ello dependen las propiedades
qumicas y la funcionalidad biolgica de los pptidos y protenas que forman.
Las propiedades cido-base de un aminocido vienen determinadas por los grupos
protonables que posea. Un aminocido puede actuar bien como cido o como base
(sustancias anfteras), pudiendo tener hasta tres grupos con carcter cido-base: el amino, el -carboxilo y, en algunos casos, el resto -R. Lo importante es que estos grupos
poseen un carcter cido-base dbil, lo que hace que, dependiendo del pH, el
correspondiente equilibrio pueda desplazarse en un sentido o en otro (hacia la forma
protonada o hacia la desprotonada.
El enlace peptdico
Los aminocidos se encuentran unidos en los pptidos y las protenas
mediante un enlace amida (-CO-NH-) Este enlace se forma por reaccin entre el grupo - 91 -

COOH de un aminocido y el -amino del siguiente (con prdida de una molcula de agua)
y recibe el nombre de enlace peptdico.
Entre los aos 1930-1940, Pauling y Corey, mediante el estudio de Rayos X

de cristales de aminocidos, dipptidos y triptidos, dilucidaron la estructura tridimensional
del enlace peptdico. As, descubrieron que la unin C-N del enlace peptdico era ms corta
que en la mayor parte de los dems enlaces C-N y llegaron a la conclusin de que el enlace
deba tener algn carcter de doble enlace, por la aparicin de dos formas resonantes.
Luego dedujeron que los 4 tomos que rodeaban al enlace peptdico C-N (O, C, C, H)
estaban situados en el mismo plano, de tal manera que el oxgeno del grupo carbonilo y el
hidrgeno del N-H estaran en posicin trans. Esta ordenacin es rgida, y es el resultado de
la estabilizacin por resonancia de las formas anteriormente citadas.
Partiendo de estos dos hechos, puede describirse el armazn de una cadena
polipeptdica como constituido por una serie de planos, con posibilidad de giro en los C-.
De esta forma se puede escribir la estructura de un pptido como una sucesin de planos en
la que los grupos -R se van alternando.
Niveles estructurales de las protenas

La conformacin que presenta una protena va a depender directamente de
los distintos niveles estructurales que posee, niveles que a continuacin se detallan:
a) Estructura primaria. Se refiere a la posicin que ocupa cada aminocido en la cadena
polipeptdica, es decir nos da idea de la secuencia de la protena. La importancia de este
- 92 -

nivel radica en que la posicin que ocupa cada aminocido dentro de la cadena va a
condicionar enormemente el resto de los niveles estructurales y en ltimo trmino la
funcin que desempea la protena.
b) Estructura secundaria. Se refiere a la ordenacin regular y peridica de la cadena
polipeptdica en una direccin determinada. Bsicamente, podemos encontrar dos tipos de
estructura secundaria, la hlice- y la conformacin-.
c) Estructura terciaria. Hace referencia al modo en que se curvan o pliegan en el espacio
los segmentos de hlice- y/o conformacin-, que presenta una cadena polipeptdica de
los protenas globulares. La conformacin espacial de las protenas depende lgicamente
de su estructura primaria, as las cadenas laterales de los aminocidos en las protenas
globulares se hallan distribuidas espacialmente de acuerdo con sus polaridades.
d) Estructura cuaternaria. Muchas protenas globulares son oligomricas, es decir estn
formadas por ms de una subunidad polipeptdica. La posicin espacial que ocupa cada una
de estas subunidades respecto a las otras queda determinada por la estructura cuaternaria.
Propiedades fisicoqumicas de las protenas

Las protenas son coloides y poseen las caractersticas propias de estos. Las protenas son
solubles en agua y en disoluciones acuosas de sustancias polares. El proceso de disolucin
de las protenas est ntimamente ligado con la hidratacin de las macromolculas, as que
cualquier factor que altere esta propiedad, disminuir la solubilidad de las protenas en agua
y favorecer la precipitacin. La disminucin de la hidratacin de las partculas se logra
fcilmente agregando sustancias deshidratantes como el alcohol, acetona o sales de metales
alcalinos, que producen una precipitacin reversible, mientras que las sales derivadas de
metales pesados producen una precipitacin irreversible por la prdida de la carga elctrica.
Las protenas son tambin electrolitos anfteros esto es que poseen simultneamente
propiedades cidas y bsicas. En disolucin, las partculas protenicas pueden variar su
carga de positiva a negativa, dependiendo del pH del medio, pudiendo llegar al punto
isoinico. En consecuencia, los factores principales en la estabilizacin del estado de
agregacin de los coloides protenicos son la hidratacin de las partculas y la aparicin de
la carga elctrica del mismo signo debido a la disociacin de los grupos bsicos y cidos.
- 93 -

3. SECCIN EXPERIMENTAL
Identificacin de aminocidos
20 Tubos de ensaye de 10 mL
Identificacin de protenas
1
Mortero con pistilo
Matraz aforado de 250 mL
Gasas
Matraz aforado de 100 mL
Espectrofotmetro a 750 nm
Celda para el espectrofotmetro
3.2 Reactivos
Preparacin de las muestras
SAB
10 mg
NaOH al 0.5%
30 mL
Acido actico al 5%
Identificacin de aminocidos
Precipitacin de protenas
Sol. de ninhidrina al 1% en etanol
2 mL
Sol. saturada de (NH4)2SO4
Sol. de glicina al 0.2% en agua
2 mL
Sol. de NaOH al 10%
Sol. de cistena al 0.2% en agua
2 mL
(NH4)2SO4 cristalino
Sol. de leucina al 0.2% en agua
2 mL
H2SO4 conc.
Sol. de cido asprtico al 0.2% en agua
2 mL
HCl conc.
Sol. de fenilalanina al 0.2% en agua
4 mL
HNO3 conc.
Clara de huevo
Etanol absoluto
Grenetina
1g
acetona
- 94 -

Vacuna de toxoide tetnico
Etiln glicol
Sol. de fenol al 0.1 % en agua
2 mL
CuSO4 al 1% en agua
Sol de NaOH saturada
Sol de NaOH al 10%
Sol. de sacarosa al 10%

Sol. de acetato de plomo al 0.5%
0.1 mL
Determinacin cuantitativa de
protenas
Albmina bobina (100 g/mL)
2.0 mL
Solucin A (2g de NaOH , 10 g

de Na2CO3 y 0.1 g de tartrato de
sodio y potasio en 500 mL)
Solucin B ( 0.5 g de CuSO4-5H2O
Reactivo C (mezclar, justo antes
disolver y aforar a 100 mL con agua
de usar, 100mL de solucin A y
destilada)
2.0 mL de solucin B)
Reactivo D (se toman 25 mL del reactivo

de Folin (2N) con una pipeta volumtrica
y se afora a 50 mL con agua destilada)
3.3. Procedimiento Experimental

3.3.1 Preparacin de las muestras.
3.3.1.1 Preparacin de la muestra de albmina de huevo. Se separa una clara de huevo y
se le adicionan 100 mL de agua destilada y 75 mL de una disolucin saturada de
NaCl. Se homogeneiza sin provocar espuma y se filtra a travs de varias capas de
gasa, se enjuaga la gasa con 20 mL ms de agua destilada. La disolucin se
transfiere a un matraz aforado de 250 ml y se afora con agua destilada.
3.3.1.2 Preparacin de la muestra de gelatina. Se prepara una disolucin de grenetina
comercial al 1% p/v. Se pesan 100 mg de grenetina y se aaden en 50 mL de
agua destilada fra, se agita y deja reposar por 10 min. La disolucin se calienta a
ebullicin, se enfra y se afora a 100 mL con agua destilada.
- 95 -

3.3.1.3 Preparacin de la muestra de vacuna. Se toman 1.0 mL de la vacuna y se diluyen

a un volumen de 100 mL con agua destilada.
3.3.2 Reacciones de identificacin de aminocidos.

3.3.2.1 Reaccin con ninhidrina. En sendos tubos de ensayo se vierten 2 mL de las
disoluciones de glicina, cistena, leucina, cido asprtico, fenilalanina, clara de
huevo, grenetina y vacuna. A cada tubo se le aaden cinco gotas de la disolucin
de ninhidrina y se calienta a bao mara hasta la aparicin de una coloracin
violeta.
_
O
O
H
OH
+ NH2
OH
COOH
_
HO
O
+ CO2
RCH
R
O
O
( color prpura)
a-aminocido
O
Ninhidrina
3.3.2.2 Ensayo xantoproteico (amarillo). Esta reaccin es positiva para aminocidos

aromticos. En diferentes tubos de ensayo se vierten 2 mL de las disoluciones de
fenol, fenilalanina, albmina, clara de huevo, grenetina y vacuna. Se aade 1 mL
de HNO3 concentrado (cuidado!). Se calienta en bao mara hasta la aparicin de
un color amarillo. Los tubos con las protenas y la fenilalanina se dejan enfriar y
se neutralizan con una disolucin saturada de NaOH (colocar los tubos en el
hielo), esto hace que la coloracin amarilla se convierta en anaranjada. La base de
esta reaccin se explica de acuerdo con el esquema siguiente para el fenol:
NaO
NO2
HO
HNO3 HO
NaOH
-H2O
Fenol
-H2O
Nitrofenol
amarillo
- 96 -
Sal nitroquinoidal
anaranjada

3.3.2.3 Reaccin del triptofano. En diferentes tubos de ensayo se vierte 1 mL de las

disoluciones de protena: albmina, clara de huevo, grenetina y vacuna. Se les
aaden 2 gotas de la disolucin de sacarosa y se homogeneiza. En el fondo de
cada tubo de ensaye de deja bajar 1 mL de H2SO4 no se agite, se deja reposar y en
presencia de triptofano, en la regin interfacial aparece una coloracin rojo
guinda en forma de un anillo. Esta reaccin se basa en el hecho de que la sacarosa
se hidroliza en medio cido hasta hidroximetilfurfural que al combinarse con el
triptofano forma un complejo de color rojo guinda.
HOH2C
HO
HO
O
OH O
CH2OH
O
HO
Sacarosa HO
OH
+
H
CH2OH
H
H2
C C
COOH
Complejo Rojo-guinda
N
NH2
H
Triptfano
CHO
Hidroximetilfurfural
3.3.2.4 Reacciones para aminocidos con azufre. En sendos tubos de ensayo se vierten 2
mL de las disoluciones de glicina, cistena, albmina, clara de huevo, y vacuna. A
cada tubo se le aaden 0.5 mL de la disolucin saturada de NaOH, se calienta a
ebullicin, despus de enfriar se agregan 2 gotas de la disolucin de
Pb(CH3COO)2. Observe la aparicin o no de PbS como un precipitado negro.
- 97 -

3.3.3 Reacciones de precipitacin de las protenas.

3.3.3.1 Precipitacin con sulfato de amonio. En dos tubos de ensayo se vierte 1 mL de la
disolucin de clara de huevo. Al primer tubo se le agregan de 1 a 2 mL de la
disolucin de sulfato de amonio saturada, hasta observar la precipitacin de la
protena, en ese momento se detiene la adicin y se aade de 1 a 2 mL de agua
destilada hasta la desaparicin paulatina del precipitado. Al segundo tubo, se le
aade 1 mL de la disolucin saturada de sulfato de amonio hasta observar la
precipitacin de las globulinas. Dejar reposar durante 5-10 minutos, las
disoluciones se decantan o filtran a otros tubos de ensayo y se les aade
(NH4)2SO4 cristalino poco a poco hasta la precipitacin de las albminas.
3.3.3.2 Precipitacin con cido mineral. En tres tubos de ensaye se colocan 1 mL de HCl,
H2SO4 y HNO3 concentrados. A cada tubo se le aade 1 mL de la disolucin de
clara de huevo, resbalando por la pared y sin agitar, de tal manera que se formen
dos fases. En la interfase aparece el precipitado en forma de un anillo blanco.
Homogeneizar con cuidado y observar si permanece o no el precipitado.
3.3.3.3 Precipitacin con disolventes orgnicos. En tres tubos de ensayo se vierte 1 mL
de la disolucin de clara de huevo y se aade 200 mg de NaCl. Al primer tubo se
le aaden 2-3 mL de acetona, al segundo 2-3 mL de etanol y al tercero 2-3 mL de
etilnglicol, los tubos se agitan y se dejan en reposo en un bao de hielo-agua.
Hacer las observaciones pertinentes despus de 5 min. En los tubos donde
aparezca un precipitado, decantar y dejar la protena en el tubo, aadir 2 mL de
agua destilada, agitar y observar si la protena se redisuelve o no.
3.3.4 Reacciones de identificacin de protenas.
3.3.4.1 Reaccin de Biuret. En tres tubos de ensaye se vierte 1 mL de las soluciones de
protena: clara de huevo, grenetina y vacuna. En otros cuatro tubos de ensaye se
vierte 1 mL de las disoluciones de aminocidos: glicina, cistena, leucina, cido
asprtico y fenilalanina. A cada tubo se le aade 1 mL de la disolucin saturada
de NaOH, se mezcla y se aaden 3-5 gotas de la disolucin de CuSO4. Se
homogeniza y se observa la aparicin o no de una coloracin violeta-rojizo.
- 98 -

3.3.5 Determinacin cuantitativa de protenas utilizando el mtodo de Lowry.

3.3.5.1 Preparacin de la curva patrn. Preparar siete tubos de ensayo y numerarlos.
Aadir las cantidades de disolucin patrn de albmina bobina (100 g/mL) y
de reactivos C y D que se indican en la tabla siguiente. Se aade la disolucin
de albmina, el agua y el reactivo C, se homogeneiza y se mantiene a
temperatura ambiente por 10 minutos. Transcurrido ese tiempo se aade el
reactivo D, se homogeneiza y se deja a temperatura ambiente por 30 minutos.
Se registra la absorbancia a una longitud de onda de 750 nm.
Tubo Patrn
Reactivo
Agua/mL E
albmina/L C/mL
Reactivo
A 750 protena
D/mL
nm
0.0
3.0
0.7
0.3
100
3.0
0.6
0.3
200
3.0
0.5
0.3
300
3.0
0.4
0.3
400
3.0
0.3
0.3
500
3.0
0.2
10 0.3
700
3.0
0.0
0.3
100
3.0
0.6
0.3
200
3.0
0.5
0.3
10
500
3.0
0.2
0.3
g/mL
30
3.3.5.2 Preparacin de las muestras. Las muestras para cuantificar el contenido de

protena se preparan de la forma en que se indica en la tabla anterior con los
volmenes de la disolucin de protena que se indica para los tubos 8 (clara de
huevo), 9 (grenetina) y 10 (vacuna).
- 99 -

4.1 Reacciones de identificacin de aminocidos

4.1.1 Elabore una tabla en la que se sistematicen los resultados obtenidos de las pruebas
para identificar aminocidos.
4.1.3 Indique los posibles aminocidos presentes en cada una de las protenas de prueba.
4.2 Reacciones de precipitacin de las protenas
4.2.1 Elabore una tabla en la que sistematice los resultados obtenidos con los diferentes
agentes precipitantes.
4.2.2 Explique por qu precipitan primero las globulinas y luego la albmina de la clara
de huevo utilizando el (NH4)2SO4.
4.2.3. Sistematice las diferencias en cuanto a la precipitacin de las protenas presentes en
la clara de huevo utilizando sales, cidos minerales y disolventes orgnicos.
Explique las diferencias encontradas.
4.3 Reacciones de identificacin de protenas.
Elabore una tabla en la que sistematice los resultados obtenidos la prueba del biuret.
4.3 Determinacin cuantitativa de protenas utilizando el mtodo de Lowry.
4.3.1 Elabore una curva patrn de concentracin de SAB (g/mL) (eje x de las abscisas)
contra la absorbancia (eje y de las ordenadas).
4.3.2 De acuerdo con la absorbancia medida para cada muestra de protena (clara de
huevo, grenetina y vacuna), determine la concentracin de la misma en g/mL de
protena.
4.3.3 Tomando en cuenta las diluciones hechas para preparar la muestra, calcule el
contenido de protena por huevo, por gramo de grenetina o por mL de vacuna.
Desarrolle los clculos explcitamente.
- 100 -

5. CUESTIONARIO
5.1 La presencia de aminocidos se puede determinar mediante la reaccin con ninhidrina
para formar un producto de color prpura intenso. Explique la formacin de este
producto con un mecanismo de reaccin detallado y comente la razn por la cual esta
prueba es especfica para -aminocidos.
5.2 Haga un esquema que de la reaccin xantoprotica con el triptofano. Mencione el
nombre de otros aminocidos dan positiva esta reaccin.
5.3 Explique la razn por la cual las protenas dan reaccin positiva con la ninhidrina si se
trata de polmeros en los que tanto los grupos amino como los cidos carboxlicos se
han convertido en enlaces peptdicos.
5.4 Mencione los fundamentos para la precipitacin fraccionada de las protenas presentes
en la clara de huevo utilizando sales como el (NH4)2SO4.
5.5 Mencione los fundamentos para la precipitacin de las protenas utilizando cidos y
disolventes orgnicos.
5.6 Investigue la reaccin qumica que se lleva a cabo en la prueba del biuret con
protenas.
5.7 En que rango de concentracin la absorbancia es lineal con respecto a la concentracin
de protena en la curva patrn.
6. CONCLUSIONES
7. BIBLIOGRAFA.
7.1. Fox, M. A., Whitesell, J. K., Qumica Orgnica, 2 Ed. Addison Wesley Longman,
Mxico (2000).
7.4 Chechetkin, A. V., Voronianski, V. I., Pokusay, G. G., Prcticas de bioqumica del
ganado y aves de corral, Mir, Mosc (1984).
7.5 Henry, R. J., Cannon, D. C., Winkelman, J. W., Quimica Clnica, Bases y Tcnicas,
Tomo I, JIMS, Barcelona 1986.
- 101 -

PRCTICA No. 12
REACCIONES DE IDENTIFICACIN DE CARBOHIDRATOS
1. OBJETIVOS
Que el alumno:
1.1 Distinga a los azcares reductores de los no-reductores mediante la prueba de

Fehling y Tollens.
1.2 Reconozca efmeros mediante la formacin de ozazonas.
1.3 Identifique almidn mediante la prueba del lugol.
1.4 Realice la hidrlisis enzimtica de almidn mediante el uso de amilasa.
1.5 Hidrolice celulosa en medio cido.
1.6 Identifique los productos de la hidrlisis de polisacridos mediante la prueba de
Fehling.
1.7 Identifique los grupos funcionales presentes en los azcares mediante el uso de la
tcnica espectroscpica de IR.
2. INTRODUCCIN
Los carbohidratos, tambin llamados glcidos, se pueden encontrar casi de manera
exclusiva en alimentos de origen vegetal. Constituyen uno de los tres principales grupos
qumicos que forman la materia orgnica junto con las grasas y las protenas. Los
carbohidratos son los compuestos orgnicos ms abundantes de la biosfera y a su vez los
ms diversos. Normalmente se los encuentra en las partes estructurales de los vegetales y
tambin en los tejidos animales, como glucosa o glucgeno. Estos sirven como fuente de
energa para todas las actividades celulares vitales. Aportan 4 kcal/gramo al igual que las
protenas y son considerados macro nutrientes energticos al igual que las grasas. Los
podemos encontrar en una innumerable cantidad y variedad de alimentos y cumplen un rol
muy importante en el metabolismo. Por eso deben tener una muy importante presencia de
nuestra alimentacin diaria. En una alimentacin variada y equilibrada aproximadamente
- 102 -

unos 300gr./da de hidratos de carbono deben provenir de frutas y verduras, las cuales no
solo nos brindan carbohidratos, sino que tambin nos aportan vitaminas, minerales y
abundante cantidad de fibras vegetales. Otros 50 a 100 g. diarios deben ser complejos, es
decir, cereales y sus derivados. Siempre preferir a todos aquellos cereales que conservan su
corteza, los integrales. Los mismos son ricos en vitaminas del complejo B, minerales,
protenas de origen vegetal y obviamente fibra. La fibra debe estar siempre presente, en una
cantidad de 30 gr. diarios, para as prevenir enfermedades y trastornos de peso como la
obesidad. En todas las dietas hipocalricas las frutas y verduras son de gran ayuda, ya que
aportan abundante cantidad de nutrientes sin demasiadas caloras.
Las funciones que los glcidos cumplen en el organismo son, energticas, de ahorro de
protenas, regulan el metabolismo de las grasas y estructural.
Energticamente, los carbohidratos aportan 4 KCal (kilocaloras) por gramo de
peso seco. Esto es, sin considerar el contenido de agua que pueda tener el alimento en el
cual se encuentra el carbohidrato. Cubiertas las necesidades energticas, una pequea parte
se almacena en el hgado y msculos como glucgeno (normalmente no ms de 0,5% del
peso del individuo), el resto se transforma en grasas y se acumula en el organismo como
tejido adiposo. Se suele recomendar que minimamente se efecte una ingesta diaria de 100
gramos de hidratos de carbono para mantener los procesos metablicos.
Ahorro de protenas: Si el aporte de carbohidratos es insuficiente, se utilizarn las

protenas para fines energticos, relegando su funcin plstica.
Regulacin del metabolismo de las grasas: En caso de ingestin deficiente de

carbohidratos, las grasas se metabolizan anormalmente acumulndose en el
organismo cuerpos cetnicos, que son productos intermedios de este metabolismo
provocando as problemas (cetosis).
Estructuralmente, los carbohidratos constituyen una porcin pequea del peso y

estructura del organismo, pero de cualquier manera, no debe excluirse esta funcin
de la lista, por mnima que sea su contribucin.
Los carbohidratos son los compuestos ms abundantes en la naturaleza, cuya frmula

molecular Cn(H2O)m indica que los tomos de carbono estn combinado con molculas de
- 103 -

agua, de ah el nombre de carbohidratos o hidratos de carbono. Casi todas las plantas y

animales los sintetizan y emplean para almacenar energa. Las plantas almacenan energa
convirtiendo la glucosa en almidn, mientras que los animales almacena energa
convirtiendo la glucosa en glucgeno. La celulosa constituye las paredes celulares de las
plantas y forma su armazn estructural, es el principal constituyente de la madera, un
material resistente y muy flexible. En la mayor parte de los organismos vivos, la glucosa se
oxida a dixido de carbono y agua para suministrar la energa que requieren las clulas. Los
carbohidratos se utilizan en la industria alimentaria, para la fabricacin de materiales de
construccin, en la industria textil y farmacutica, entre otras. Recientemente, su uso se ha
extendido a la fabricacin de biocombustibles. Los azcares o carbohidratos pueden ser
monosacridos, disacridos, trisacridos, oligosacridos y polisacridos.
Monosacridos.
Los monosacridos o azcares simples son carbohidratos que no se pueden hidrolizar a
compuestos ms sencillos como la glucosa y la fructuosa. La glucosa es un
polihidroxialdehdo, mientras que la fructuosa es una polihidroxicetona. A los
polihidroxialdehdos se les llama tambin aldosas (ald = aldehdo, osa = azcar) mientras
que a las polihidroxicetonas se les llama cetosas (ceto = cetona, osa = azcar). Los
monosacridos reaccionan de acuerdo a los grupos hidroxilo y carbonilo que poseen por lo
tanto son compuestos bifuncionales.
Las aldosas contienen un grupo aldehdo y varios grupos hidroxilo por lo que forman
hemiacetales cclicos. La glucosa forma ciclo de seis miembros con un enlace hemiacetal
- 104 -

entre el carbono del aldehdo y el grupo hidroxilo en la posicin C5. A este tipo de
hemiacetales cclicos de seis miembros tambin se les conoce como piranosas.
Muchas aldopentaosas y cetohexosas forman anillos de cinco miembros, como en el caso

de la fructosa. A este tipo de hemiacetales cclicos de cinco miembros tambin se les
conoce como furanosas.
Disacridos.
Los disacridos o azcares simples son carbohidratos que no se pueden hidrolizar a
compuestos ms sencillos. Los disacridos se producen cuando se combinan qumicamente
dos monosacridos. Consideremos tres de los ms importantes disacridos: la maltosa, la
lactosa y la sacarosa. La hidrlisis de estos tres disacridos produce diferentes
combinaciones de monosacridos:
- 105 -

maltosa
glucosa + glucosa
lactosa
glucosa + galactosa
sacarosa
glucosa + fructosa
Sacarosa
Pruebas qumicas de monosacridos y disacridos.
Los monosacridos y la mayora de los disacridos poseen poder reductor, que deben al
grupo carbonilo que tienen en su molcula. Este carcter reductor puede ponerse de
manifiesto por medio de una reaccin redox llevada a cabo entre ellos y el sulfato de Cobre
(II). Las soluciones de esta sal tienen color azul. Tras la reaccin con el glcido reductor se
forma xido de Cobre (I) de color rojo. De este modo, el cambio de color indica que se ha
producido la citada reaccin y que, por lo tanto, el glcido presente es reductor.
La sacarosa es un disacrido que no posee carbonos anomricos libres por lo que carece de
poder reductor y la reaccin con el licor de Fehling es negativa. Sin embargo, en presencia
de HCl y en caliente, la sacarosa se hidroliza, es decir, incorpora una molcula de agua y se
descompone en los monosacridos que la forman, glucosa y fructosa, que s son reductores.
La prueba de que se ha verificado la hidrlisis se realiza con el licor de Fehling y, si el
- 106 -

resultado es positivo, aparecer un precipitado rojo. Si el resultado es negativo, la hidrlisis

no se ha realizado correctamente y si en el resultado final aparece una coloracin verde en
el tubo de ensayo se debe a una hidrlisis parcial de la sacarosa.
Los azcares no forman derivados simples con la fenilhidrazina, cada molcula de

monosacrido condensa a dos molculas de fenilhidrazina para formar una osazona, en la
ue tanto C1 como C2 se han convertido en fenilhidrazonas. Por lo tanto, una cetosa forma
la misma osazona que se aldosa relacionada, perdiendo la estereoqumica en C2. Por lo
tanto los efmeros en C2 producen la misma osazona.
Polisacridos.
Son compuestos formados por la unin de muchos monosacridos. Pertenecen al grupo de
los glcidos y cumplen funciones tanto de reserva energtica como estructurales. Los
polisacridos son polmeros cuyos monmeros son los monosacridos, que se unen
- 107 -

repetitivamente mediante enlaces glucosdicos. Estos compuestos llegan a tener un peso

molecular muy elevado, que depende del nmero de residuos o unidades de monosacridos
que participen en su estructura. Pueden descomponerse en polisacridos ms pequeos, as
como en disacridos o monosacridos, mediante hidrlisis, que en la materia viva es
catalizada por enzimas llamadas glucosidasas. Los polisacridos tienen la frmula general:
-[Cx(H2O)y)]n- donde y es generalmente igual a x - 1.
Celulosa es un polisacrido
Segn la funcin biolgica, los polisacridos se clasifican en los siguientes grupos:
Polisacridos de reserva: la principal molcula proveedora de energa para las clulas de
los seres vivos es la glucosa. Cuando sta no es descompuesta en el catabolismo energtico
para extraer la energa que contiene, es almacenada en forma de polisacridos de tipo (1>4), representado en las plantas por el almidn y en los animales por el glucgeno.
Polisacridos estructurales: se trata de glcidos que participan en la construccin de
estructuras orgnicas. Entre los ms importantes tenemos a la celulosa que es el principal
componente de la pared celular en las plantas y a la quitina, que cumple el mismo papel en
los hongos, adems de ser la base del exoesqueleto de los artrpodos y otros animales
emparentados.
Otras funciones: la mayora de las clulas de cualquier ser vivo suelen disponer este tipo de
molculas en su superficie celular. Por ello estn involucrados en fenmenos de
reconocimiento celular (ejemplo: Complejo Mayor de Histocompatibilidad), proteccin
frente a condiciones adversas (Ejemplo: Cpsulas polisacardicas en microorganismos) o
adhesin a superficies (ejemplo: la formacin de biofilmes o biopelculas, al actuar como
una especie de pegamento.)
Se distinguen dos tipos de polisacridos segn su composicin:
Homopolisacridos:
estn
formados
por
la
repeticin
de
un
monosacrido.
Heteropolisacridos: estn formados por puro bodyboarding y la repeticin ordenada de un

- 108 -

disacrido formado por dos monosacridos distintos (o, lo que es lo mismo, por la
alternancia de dos monosacridos). Algunos heteropolisacridos participan junto a
polipptidos (cadenas de aminocidos) de diversos polmeros mixtos llamados
peptidoglucanos, mucopolisacridos o proteoglucanos. Se trata esencialmente de
componentes estructurales de los tejidos, relacionados con paredes celulares y matrices
extracelulares.
El almidn. Es un polisacrido vegetal formado por dos componentes: la amilosa y la
amilopectina. La primera se colorea de azul en presencia de yodo debido no a una reaccin
qumica sino a la adsorcin o fijacin de yodo en la superficie de la molcula de amilosa, lo
cual slo ocurre en fro. Como reactivo se usa una solucin denominada lugol que contiene
yodo y yoduro potsico. Como los polisacridos no tienen poder reductor, la reaccin de
Fehling da negativa. Las disoluciones de almidn tienen numerosas propiedades tpicas; la
ms conocida es la reaccin con el yodo. Las disoluciones de yodo-yoduro potsico
reaccionan con la amilosa y generan un fuerte color azul caracterstico en la superficie de
los grnulos de almidn. Esto se debe al complejo que se establece entre una molcula de
yodo con cada 6-8 glucosas. Es decir, en presencia del yodo las cadenas de amilosa se
estabilizan en una configuracin helicoidal con seis restos de glucosa por vuelta de hlice, y
las molculas de yodo forman un complejo situndose en el eje.
Como para desarrollar perfectamente la coloracin se requiere un mnimo de 40
monosacridos, las cadenas muy cortas de amilosa en lugar de azul, producen un color rojo.
Esto significa que el color azul del complejo depende de la longitud de la cadena implicada.
Aparentemente el complejo amilosa-yodo se establece por la inclusin del I2 en la hlice.
Por otra parte, la amilopectina slo acompleja una pequea cantidad de I2 y desarrolla una
coloracin roja.
- 109 -

3.1 Materiales
20
Tubos de ensaye de 10 mL
Gradilla
Pinzas para tubo de ensaye
Pipetas de 5 mL
Vaso de precipitaddos de 100 mL
Bao Mara
Tira papel pH
3.2 Sustancias
10 mL
Sacarosa al 1% en agua
10 mL
Glucosa al 1% en agua
10 mL
Fructuosa al 1% en agua
10 mL
Almidn
al
1%
en
agua
previamente hervido
10 mL
Solucin de Fehling Aa
5 mL
Solucin de NaOH al 10%
2 mL
Solucin de lugolc
6 mL
Solucin de AgNO3 al 2.5%
5 mL
NH4OH al 5%
10 mL
NaOH al 5%
100 mL
Fenilhidrazina
12 mL
Solucin de resorcinold
1 mL
Solucin de sulfato de cobalto 100 mg

al 2%
10 mL
Solucin de Fehling Bb
Solucin de HCl al 5%
Algodn
3 mL
Acetona
3 mL
Solucin de H2SO4 al 72%
3 mL
Hexano
(a) Fehling A: 34.65 g de CuSO45H2O en 500 mL de agua.

(b) Fehling B: 173 g de tartrato de sodio y potasio y 62.5g de NaOH en 500 mL de agua.
(c) En 100 mL de agua se disuelven 20 g de yoduro de potasio y 10 g de yodo, se afora a
500 mL con agua. Esta disolucin debe mantenerse en la oscuridad.
(d) Se prepara al 0.05% en 100 mL de cido clorhdrico al 20%.
(d) Se prepara al 2% en agua.
- 110 -

3.3.1 Identificacin de monosacridos.

3.3.1.1 Prueba de Fehling. Ponga en los tubos de ensayo 3 mL de la solucin de glucosa,
fructosa y sacarosa. Aada 1 mL de solucin de Fehling A y 1 mL de Fehling B.
Caliente los tubos en un bao de agua hirviendo por 10 min. La reaccin ser
positiva si la muestra se torna de color rojo y ser negativa si queda azul o cambia
a un tono azul-verdoso. Observe y anote los resultados obtenidos en una tabla.
3.3.1.2 Prueba de Tollens. Coloque en un tubo de ensayo limpio 1 mL de solucin de
nitrato de plata al 2.5%, agregue una gota de hidrxido de sodio al 5% y despus
gota a gota y con agitacin una solucin de hidrxido de amonio al 5% justo hasta
que se disuelva el xido de plata que precipit, evitando cualquier exceso de
NH4OH. Este reactivo debe usarse recin preparado y debe destruirse con un
exceso de cido ntrico al terminar de utilizarlo, ya que forma compuestos
explosivos. Agregue al reactivo recin preparado 3mL de solucin del azcar
(glucosa, fructosa y sacarosa), agite y caliente brevemente en bao mara, sin dejar
de agitar durante el calentamiento. La aparicin de un espejo de plata indica
prueba positiva para azcar reductor. Una vez terminada la prueba el tubo de
ensayo se deber limpiar con cido ntrico para destruir el espejo de plata.
3.3.1.3 Formacin de ozazonas. Coloque en un tubo de ensayo limpio 10 gotas de la
solucin del azcar y agregue tres gotas de fenilhidrazina. Caliente la mezcla en
bao de agua durante 10-20 minutos. Decante y seque con papel adsorbente los
cristales, obsrvelos en un microscopio y determine su punto de fusin. El tiempo
de formacin de la osazona y la apariencia de los cristales ser diferente para los
distintos azcares, excepto para los epmeros en C-2.
3.3.1.4 Reaccin con resorcinol. Coloque 2 mL de una disolucin de resorcinol preparada
con 0.05 g de resorcinol disueltos en 100 mL de cido clorhdrico al 20% y
adale 3 mL de la disolucin del azcar y caliente 3 min a bao Mara. Observe.
3.3.2 Identificacin de disacridos.

3.3.2.1 Tome 3mL de solucin de sacarosa. Realice la prueba de Fehling como se indica
en el experimento anterior. Observe y anote los resultados en una tabla.
3.3.2.2 Tome 3mL de solucin de sacarosa y aada 10 gotas de HCl diluido (5%).
Caliente a ebullicin en un bao Mara durante 15 min. Deje enfriar y neutralice
- 111 -

aadiendo 3mL de solucin alcalina de NaOH. Realice la prueba de Fehling como

se indica en el experimento anterior. Observe y anote los resultados en una tabla.
3.3.2.3 Tome 3mL de solucin de sacarosa y aada 10 gotas de disolucin de sulfato de
cobalto. Aada 1 mL de disolucin de hidrxido de sodio al 10%. Observe y anote
los resultados en una tabla.
3.3.3 Identificacin de polisacridos.

3.3.3.1 Coloque en un tubo de ensayo 3mL de la solucin de almidn. Aada 3 gotas de la
solucin de lugol. Observe y anote los resultados. Caliente suavemente, sin que
llegue a hervir, hasta que pierda el color. Enfre el tubo de ensayo al grifo y
observe cmo, a los 2-3 minutos, reaparece el color azul.
3.3.3.2 Coloque en un tubo de ensayo 3mL de la solucin de almidn. Aada 1 mL de
saliva humana, mantenga el tubo entre 37 a 40 C durante 15 minutos. Enfre el
tubo al chorro del agua. Divida el contenido en dos porciones iguales en sendos
tubos de ensaye, al primero adale tres gotas de la solucin de lugol; al segundo
hgale la prueba de Fehling como se indica en el experimento 1.1. Observe y
anote los resultados.
3.3.3.3 Coloque un poco de algodn en tres tubos de ensaye y aada 3 mL de agua al
primero, 3 mL de acetona al segundo y 3 mL de hexano al tercero, observe.
3.3.3.4 Coloque un poco de algodn en un tubo de tal manera que ocupe sin compactar
aproximadamente 1 mL, aada 3 mL de H2SO4 (72%) y espere hasta que el
algodn se haya disuelto completamente (15-20 min), vace el contenido del tubo
sobre 30 mL de agua (con precaucin!) y se hierve. La disolucin se neutraliza
con una disolucin de NaOH concentrada y se realiza la prueba de Fehling de
acuerdo con el experimento 1.1, observe y anote los resultados.
3.3.4 Identificacin de la muestra problema.

3.3.4.1 Realice las pruebas de identificacin para monosacridos a 3 mL de la muestra
problema.
3.3.4.2 Realice las pruebas de identificacin para sacarosa a 3 mL de la muestra
problema.
3.3.4.3 De acuerdo con los resultados anteriores realice, si as lo estima conveniente, las
pruebas para la identificacin de polisacridos.
- 112 -

4.1 Determinacin colorimtrica de los carbohidratos
Azcar
Resultado
Resultado
Resultado
Feheling
Tollens
Fenilhidrazina
Resorcinol
Resultado
Lugol
Glucosa
Fructosa
Sacarosa
Sacarosa
hidrolizada
Almidn
Almidn
hidrolizado
Celulosa
Celulosa
hidrolizada
Problema
4.2 Formulas qumicas de los azucares empleados

AZCAR
FORMULA MOLECULAR
GLUCOSA
FRUCTOSA
- 113 -

CELULOSA
SACAROSA
ALMIDN
5. CONCLUSIONES
El alumno en base a su desarrollo experimental concluir si los objetivos planteados al inicio
de la prctica se realizaron con xito, si no, explicar de una forma breve los inconvenientes
en el desarrollo del experimento.
6. CUESTIONARIO
5.1 Presentar los datos obtenidos en la tabla 1.(resultado positivo negativo de la prueba,
tipo de color, intensidad y tiempo en cada reaccin).
5.2 Representar la frmula estructurales de cada uno de los azucares ensayados en el
recuadro que aparece en la tabla 2.
5.3 Sobre la base de la estructura qumica de cada azcar, explicar.
5.4 por qu cada uno de ellos da o no da positivo en las distintas pruebas
5.5 las diferencias observadas en el desarrollo de la reaccin para cada uno de ellos.
5.6 Investigue si el resorcinol dar prueba positiva para los azucares (justifique su
respuesta).
- 114 -

5.7 En base a los ensayos realizados a la muestra de problema, de que carbohidrato se

trata?
5.8 El anlisis de los espectros de IR de la glucosa y la fructuosa, muestra la ausencia de
la banda caracterstica para el grupo carbonilo, explique la razn de sto.
7. BIBLIOGRAFA.
7.1 Wade, Qumica Orgnica, Prentice Hall (2006).
- 115 -

Schuetz,
R. D., Organic Chemistry, Hounghton Mifflin Company (1986).
7.5 Wilcox, C. F., Experimental Oraganic Chemistry, A Small Scale Aproach., Mc. Millan
Jr. (1988).
7.6 Vogel, A.I., Elementary Practical Organic Chemistry part I. Small Scale Preparations,
Longmono (1978).
8. REFERENCIAS ADICIONALES
- 116 -

PRACTICA No.13
CINTICA DE HIDRLISIS DE LA SACAROSA MEDIANTE ROTACIN

OPTICA
1. OBJETIVOS:
El alumno:
Realizara la hidrlisis e inversin de la sacarosa y comprobara la identificacin de sta
mediante pruebas qumicas y utilizando un polarmetro
2. INTRODUCCION
Para calcular la rotacin especfica de azcares tome en cuenta la siguiente informacin: el
ngulo de rotacin especfica depende del espesor y concentracin de la muestra, de la
longitud de onda del rayo incidente y tambin, aunque en menor grado, de la temperatura
del disolvente utilizado. De modo que la rotacin especfica [] de una sustancia se expresa
de la siguiente forma:
[ ]t
100
l c
Donde representa los grados de rotacin medidos en el polarmetro; t es la temperatura;

es la longitud de onda, generalmente se usa la lnea D del sodio; l es el largo del tubo en dm
y c la concentracin de la sustancia expresada en g/100 mL de disolucin.
3. SECCION EXPERIMENTAL
3.1 Materiales
15
Tubos de ensayo.
Pipeta de 5 mL.
Probeta de 25 mL.
Erlenmeyer de 125 mL.
Vaso de pp. de 400 mL.
Gradilla.
Pinzas p/tubo de ensayo.
Vidrio de reloj.
Mechero c/manguera.
Anillo metlico.
Tela de alambre c/asbesto.
Recipiente elctrico Bao Mara.
Pinza de 3 dedos c/nuez.
- 117 -
Esptula.

Recipiente de peltre.
Polarmetro.
Pipeta de 1 mL.
3.2 Reactivos
10 mL
Solucin de sacarosa al 10 %.
1 mL
1 mL
Solucin de HCl al 20% preparada 5 mL
Fenolftalena en solucin.
Reactivo de Fehling.
por el profesor.
5 mL
Solucin de NaOH al 2 %.
10 mL
Reactivo de Benedict.
2 mL
Reactivo de yodo-yoduro.
2g
Almidn soluble.
3mL
HCl concentrado.
2 mL
NAOH al 2%.
NOTAS
Nota 1: El alumno preparar la disolucin de HCl al 20% a partir de HCl concentrado.
Nota 2: La formacin de un precipitado rojo y la decoloracin de la disolucin, indica
prueba positiva para azcar reductora.
Nota 3: Una decoloracin de la disolucin y formacin de un precipitado que va de amarillo
hasta rojo, indica prueba positiva.
Nota 4: Debido a la lentitud de la inversin del azcar se recomienda preparar estas
disoluciones al iniciar la sesin de laboratorio.
Nota 5: Salmuera: disolucin saturada de NaCl.
Nota 6: Para efectuar la prueba del yodo deber enfriar la muestra ya que el complejo yodoalmidn se disocia en caliente.
Es muy importante verificar que las disoluciones tienen las concentraciones deseadas.
3.3
3.3.1- Hidrlisis de la sacarosa (inversin)
Coloque en un tubo de ensaye 3 mL de una disolucin de sacarosa al 10 %, agregue 0.5 mL
cido clorhdrico al 20 % (Nota1) y caliente en bao mara durante 10 minutos.
Enfre la disolucin y neutralice con cuidado y lentamente con NaOH al 2% usando
Fenolftalena como indicador (o bien puede utilizar papel pH).
Divida la disolucin en 2 partes iguales y haga las siguientes pruebas:
- 118 -

-Prueba de Fehling. Mezcle 1 mL de la disolucin A* y 1 mL de la disolucin B* en un

tubo de ensayo, agregue una parte de la disolucin de sacarosa invertida y caliente a
ebullicin (Nota2). Haga la misma prueba para una muestra de la disolucin de sacarosa al
10%.
Observe y anote sus resultados.
-Prueba de Benedict. Coloque 1 mL de la disolucin de Benedict y agregue 3 gotas de la

disolucin de sacarosa invertida, caliente a ebullicin y deje enfriar a temperatura ambiente,
(Nota3).
Haga la misma prueba para una muestra de la disolucin de sacarosa al 10%, observe y
anote sus resultados.
3.4- Determinacin de la rotacin especfica de la sacarosa y del azcar invertido
Prepare una disolucin con 1 g de sacarosa en 10 mL de agua destilada, y sela para llenar
el tubo del polarmetro de modo que no queden burbujas. Identifique este tubo con la letra A
y mida su rotacin ptica.
Prepare otra disolucin con 1g de sacarosa en 10 mL de agua destilada y 4 mL de HCl al 20
%, y sela para llenar otro tubo del polarmetro identificado con la letra B. Posteriormente
determine su rotacin ptica (Nota4).
Por ltimo, llene un tercer tubo con una mezcla de las disoluciones A y B en proporcin de
40:60 y mida la rotacin ptica.
4. RESULTADOS Y DISCUSION
Con los datos de rotacin especfica [] calculados llene la tabla 1, compare sus resultados
con los reportados en la literatura y saque sus conclusiones:
Tabla 1. Valores de rotacin especfica
Sustancia
[]20 reportada
Sacarosa.
+ 66.5
Glucosa.
+ 52
Fructosa.
-92
Azcar Invertido.
-19.9
[] experimental
5. CONCLUSIONES
El equipo concluir en base a sus datos experimentales lo importante de la prctica
- 119 -

6. CUESTIONARIO
6.1Por qu el azcar invertido es ms dulce que la sacarosa?
6.2Explique por qu se le llama inversin a la hidrlisis de la sacarosa.
6.3Por qu no se pueden desechar libremente los afluentes lquidos al drenaje?
6.4Diga qu tratamiento debera drsele en cada uno para poder desecharlos.
6.5En la hidrlisis del almidn qu resultados espera de la prueba e Benedict, de la prueba
yodo-yoduro efectuadas al inicio de la reaccin de la hidrlisis y al final de la reaccin.
6.6 Defina los siguientes conceptos: actividad ptica, rotacin especfica y luz polarizada
7. BIBLIOGRAFA
7.1. Moore J. A. y Dalrympe D. L. Experimental Methods in Organic Chemistry 2, Ed.
W. B. Saunders Co. Pg 259-269.
7.2. Jacobs T.L., Truce W. E. Y Robertson G. Ross., Laboratory Practice of Organic
Chemistry, 5 Ed., Mac Millan Pub. Co. Inc., U.S.A. 1974. Pg. 311-316
7.3 Hudlicky, Experiments in Organic Chemistry, 3 Ed. Avery Publishing Group, Inc.
U.S.A., 1985, Pg. 104-106
7.4 Streitwieser A., Heathcok H. C., Introduction to Organic Chemistry, Mac Millan Pub.
Co. Inc., U.S.A. 1976, Pg. 693-732.
7.5 Royston M. Roberts, John C. Gilbert, Stephen F. Martin, Experimental Organic
Chemistry (A miniscale approach). U.S.A., Ed. Saunders College Publishing, 1994, Pg.
641-651.
7.6 Devore G, Qumica Orgnica, Editorial Publicaciones Cultural, S. A, Mxico 1969.
- 120 -

PRACTICA No. 14
RECONOCIMIENTO DE LPIDOS
1. OBJETIVOS
Que el alumno:
1.1 Identifique algunos lpidos mediante el uso de algunas propiedades de los lpidos.
1.2 Reconozca a los lpidos mediante sus propiedades fisicoqumicas
1.3 Identifique cualitativamente a los lpidos mediante tincin con Sudan II.
1.4 Elabore un jabn mediante la reaccin de saponificacin de una grasa.
1.5 Obtenga colesterol a partir de tejido nervioso.
1.6 Identifique el colesterol mediante pruebas colorimtricas cualitativas.
2. ANTECEDENTES
Los lpidos, son un grupo de compuestos qumicamente diversos, solubles en solventes

orgnicos (como cloroformo, metanol o benceno), y casi insolubles en agua. La mayora de
los organismos, los utilizan como reservorios de molculas fcilmente utilizables para
producir energa (aceites y grasas). Los mamferos, los acumulamos como grasas, y los peces
como ceras; en las plantas se almacenan en forma de aceites protectores con aromas y sabores
caractersticos. Los fosfolpidos y esteroles constituyen alrededor de la mitad de la masa de
las membranas biolgicas. Entre los lpidos tambin se encuentran cofactores de enzimas,
acarreadores de electrones, pigmentos que absorben luz, agentes emulsificantes, algunas
vitaminas y hormonas, mensajeros intracelulares y todos los componentes no protecos de las
membranas celulares.
Los lpidos, pueden ser separados fcilmente de otras biomolculas por extraccin con
solventes orgnicos y pueden ser separados por tcnicas experimentales como la
cromatografa de adsorcin, cromatografa de placa fina y cromatografa de fase reversa.
La funcin biolgica ms importante de losa lpidos es la de formar a las membranas
celulares, que en mayor o menor grado, contienen lpidos en su estructura. En ciertas
membranas, la presencia de lpidos especficos permiten realizar funciones especializadas,
como en las clulas nerviosas de los mamferos. La mayora de las funciones de los lpidos, se
deben a sus propiedades de autoagregacin , que permite tambin su interaccin con otras
biomolculas. De hecho, los lpidos casi nunca se encuentran en estado libre, generalmente
- 121 -

estn unidos a otros compuestos como carbohidratos (formando glucolpidos) o a protenas

(formando lipoprotenas).
Estas importantes biomolculas se clasifican generalmente en: Lpidos saponificables
y no saponificables.
Adems de los anteriores, existen lpidos anfipticos en cuya molcula existe una
regin polar opuesta a otra apolar. Estos lpidos forman las bicapas lipdicas de las
membranas celulares y estabilizan las emulsiones (liquido disperso en un lquido).
Los cidos grasos de importancia biolgica, son cidos monocarboxlicos (ej. c
laurico: CH3(CH2)10COOH) de cadenas alifticas de diverso tamao y que pueden contener o
no insaturaciones:
Los cidos grasos naturales insaturados (lquidos a temperatura ambiente), son
ismeros geomtricos cis que pueden ser monoinsaturados (ej. cido oleco (cido 9octadecenoco) CH3(CH2)7CH=CH(CH2)7COOH) o poliinsaturados (ej. cido araquidnico
(cido 5,8,11,14-eicosatetraenoico) CH3(CH2)4(CH=CHCH2)4(CH2)2COOH).
Figura: representacin del cido oleico.
Los cidos grasos poliinsaturados, desde el punto de vista nutricional se consideran

como esenciales pues no son sintetizados por los mamferos; fisiolgicamente, se encuentran
formando sales o jabones (formando micelas).
Los cidos grasos de cadena larga, insolubles en agua, forman steres con alcoholes y
tiosteres con la coenzima A. Compuestos de importancia biolgica como las prostaglandinas,
tromboxanos y leucotrienos, son derivados de cidos grasos poliinsaturados de 20 carbonos
como el cido araquidnico.
En los acilgliceroles (o acilglicridos), uno o ms de los grupos hidroxilo (OH) de la
molcula de glicerol, estn esterificados de ah que se dividan en monoacil, diacil y
triacilgliceroles; en estos ltimos, todos los hidroxilos del glicerol (3), estn esterificados con
cidos grasos. Estos cidos grasos pueden ser iguales entre ellos o diferentes y dependiendo
de la longitud de las cadenas que esterifican al glicerol y de su grado de insaturacin, los
- 122 -

triacilgliceroles (triacilglicridos), se dividen en grasas (slidas) o aceites (lquidos). Estas

molculas, son hidrofbicas y no forman micelas.
Glicerofosfolpidos, fosfogliceridos, fosfolipidos, fosfoacilgliceroles

Componentes principales de las membranas, consisten de un glicerol-3-fosfato
esterificado en C1 y C2 por cidos grasos y en el grupo fosforil con un grupo X polar que es
generalmente un derivado de un alcohol (X= agua: cido fosfatdico; X= etanolamina:
fosfatidiletanolamina; X= colina: fosfatidilcolina (lecitina); X= serina: fosfatidilserina; X=
myo-inositol: fosfatidilinositol; X= glicerol: fosfatidilglicerol y X= fosfatidilglicerol:
difosfatidilglicerol (cardiolipina)).
Figura: representacin del glicerol-3-fosfato y glicerofosfolpido.
El grupo X polar derivado de un alcohol puede ser igual a: X= agua: cido fosfatdico;
X= etanolamina: fosfatidiletanolamina; X= colina: fosfatidilcolina (lecitina); X= serina:
fosfatidilserina; X= myo-inositol: fosfatidilinositol; X= glicerol: fosfatidilglicerol y X=
fosfatidilglicerol: difosfatidilglicerol (cardiolipina)).
Los plasmalgenos son fosfoglicridos en los que el glicerol fosfato tiene unido en el
C1, mediante un enlace tipo ter, un alcohol de cadena larga. Comnmente, la parte polar de
los plasmalgenos es etanolamina, colina o serina.
- 123 -

Los esfingolpidos, son componentes importantes de las membranas, derivados del

aminoalcohol insaturado esfingosina o dihidroesfingosina (C18).
Este alcohol, se une a un cido graso de cadena larga por medio de un enlace amina
para formar una ceramida.
Las ceramidas, se encuentran en pequeas cantidades en los tejidos de plantas y
animales, pero dan origen a los esfingolpidos ms abundantes:
Las esfingomielinas, son los esfingolpidos ms comunes; son ceramidas esterificadas

con fosforilcolina o fosforiletanolamina. Aunque las esfingomielinas difieren qumicamente
de la fosfatidilcolina y la fosfatidiletanolamina, sus conformaciones y distribuciones de carga
son muy similares. La mielina que rodea y asla elctricamente a muchos axones en las
neuronas del tejido nervioso, es particularmente rica en esfingomielinas.
- 124 -

Cuando las ceramidas se combinan con un azcar forman a los glucoesfingolpidos,

que se dividen en: cerebrsidos (o glucoesfingolpidos), son los esfingolpidos ms simples,
su cabeza polar consiste de una unidad de azcar.
Los galactocerebrsidos, que se encuentran en las membranas celulares neuronales
del cerebro, tienen una cabeza polar de -D galactosa.
Los glucocerebsidos, que tambin tienen un residuo de -D galactosa se encuentran

en membranas celulares de otros tejidos. A diferencia de los fosfolpidos, los cerebrsidos
carecen de grupos fosfato y por lo tanto, son frecuentemente compuestos no ionicos. Los
residuos de algunos galactocerebrsidos estn sulfatados en la posicin 3 formando
compuestos conocidos como sulftidos.
Los ganglisidos son el grupo ms complejo de los esfingolpidos. Son oligosacridos
de ceramidas que incluyen entre sus residuos de azcar al menos un residuo de cido silico
(cido Nacetilneuramnico (NAM) y sus derivados). Los ganglisidos son componentes
primarios de la superficie de las membranas celulares y constituyen una fraccin significativa
(aproximadamente 6%) de los lpidos del cerebro, en otros tejidos, estn presentes en
cantidades mucho menores.
- 125 -

Ceras
Las ceras son lpidos completamente insolubles en agua; se encuentran en la superficie
de plantas y animales, donde funcionan como impermeabilizante, estn constituidas por
cidos grasos esterificados (generalmente con nmero par de tomos de carbono) a alcoholes
de cadena larga (de 10 a 30 carbonos). Los cidos grasos que forman parte de estos lpidos,
pueden ser ramificados, insaturados o formar anillos.
Terpenos
Se encuentran en la mayora de los organismos, pero constituyen el grupo ms
abundante de los aceites vegetales, de hecho son los responsables de los aromas y sabores
especficos de las plantas, mientras mayor sea la cantidad de oxgeno en la molcula, mayor
ser su aroma. Estos compuestos, se forman a partir del ispreno (unidad de 5 tomos de
carbono); pueden contener desde una hasta ocho unidades. Las unidades pueden arreglarse
linealmente (como en el escualeno) o cclicamente (como en la limonina). Dentro de los
terpenos se clasifica a los carotenoides que son tetraterpenos muy importantes en los
mamferos, especialmente el -caroteno que es precursor de la vitamina A (11-cis-retinal).
Tambin las vitaminas liposolubles D (colecalciferol) y K son consideradas como terpenos.
Esteroides
Los esteroides, son lpidos simples no saponificables, en su mayora de origen
eucarionte, derivados del ciclopentanoperhidrofenantreno
El colesterol es el esteroide ms abundante en los animales, se clasifica como un esterol por

la presencia de un hidroxilo (OH) en el C3 y su cadena lateral aliftica de 8 a 10 tomos de
carbono.
- 126 -

El colesterol, es un componente mayoritario de las membranas plasmticas animales y

se encuentra en menor cantidad en las membranas de los organelos. El grupo OH en la
molcula, le da un dbil carcter anffilo y el ncleo esteroide, es una estructura no polar,
rgida y planar. Por lo tanto, es un determinante importante de las propiedades de la
membrana. Este esteroide, es abundante tambin en lipoprotenas del plasma sanguneo, en
donde aproximadamente el 70% de este es esterificado por cidos grasos de cadena larga para
formar steres de colesterol.
EL colesterol es el precursor metablico de las hormonas esteroides, que son
substancias que regulan una gran variedad de funciones fisiolgicas, que incluyen el
desarrollo sexual y el metabolismo de los carbohidratos. El papel del colesterol en
enfermedades cardiovasculares (link hormonas esteroides).
Las plantas contienen muy poco colesterol. Entre los esteroles que se encuentran
comnmente en sus membranas se encuentran el estigmasterol y el -sitosterol, que difieren
del colesterol solo en las cadenas alifticas. Las levaduras y hongos contienen otros esteroles
en sus membranas como el ergosterol que tiene un doble enlace (C7-C8). Los procariontes no
contienen en sus membranas ningn esterol, excepto los micoplasmas.
Los derivados del colesterol son: los cidos biliares, las hormonas esteroides
estrgenos, progestgenos, glucocorticoides, mineralocorticoides y andrgenos- y la vitamina
D, que deriva del colesterol aunque propiamente no es un esteroide.
3.1 Materiales
3.2 Reactivos
Tubos de ensayo
Solucin de NaOH al 20%
Gradilla
Solucin de Sudn III
Varillas de vidrio
Tinta china roja
Mechero parrilla
ter, cloroformo o acetona
Vasos de precipitados
Aceite de oliva
Pipetas
Yeso
Morteros de porcelana limpios y secos
50 g de sesos de animal desmenuzados
Esptula
Cloroformo
Placa de vidrio
cido slfurico concentrado
Embudos de vidrio
cido actico
Papel filtro
Anhdrido acetico
- 127 -

3.3 Procedimiento experimental

3.3.1 Saponificacin
3.3.1.1Fundamento
Las grasas reaccionan en caliente con el hidrxido sdico o potsico
descomponindose en los dos elementos que las integran: glicerina y cidos grasos. stos se
combinan con los iones sodio o potasio del hidrxido para dar jabones, que son en
consecuencia las sales sdicas o potsicas de los cidos grasos. En los seres vivos, la
hidrlisis de los triglicridos se realiza mediante la accin de enzimas especficos (lipasas)
que dan lugar a la formacin de cidos grasos y glicerina.
3.3.1.2 Tcnica
a)Colocar en un tubo de ensayo 2ml de aceite y 2ml de NaOH al 20%.
.
Agitar enrgicamente y colocar el tubo al bao Mara de 20 a 30 minutos.
Pasado este tiempo, se pueden observar en el tubo 3 fases: una inferior clara que contiene
la solucin de sosa sobrante junto con la glicerina formada, otra intermedia semislida que
es el jabn formado y una superior lipdica de aceite inalterado.
3.3.2 Tincin
3.3.2.1 Fundamento
Los lpidos se colorean selectivamente de rojo-anaranjado con el colorante Sudn III.
3.3.2.2 Tcnica
.
Disponer en una gradilla 2 tubos de ensayo colocando en ambos 2ml de aceite.
Aadir a uno de los tubos 4-5 gotas de solucin alcohlica de Sudn III.
Al otro tubo aadir 4-5 gotas de tinta roja.
Agitar ambos tubos y dejar reposar.
- 128 -

Observar los resultados: en el tubo con Sudn III todo el aceite tiene que aparecer teido,
mientras que en el tubo con tinta, sta se ir al fondo y el aceite no estar teido.
3.3.3 Solubilidad
3.3.3.1.Fundamento
Los lpidos son insolubles en agua. Cuando se agitan fuertemente en ella se
dividen en pequesimas gotas formando una emulsin de aspecto lechoso, que es transitoria,
pues desaparece en reposo por reagrupacin de las gotitas de grasa en una capa que, por su
menor densidad, se sita sobre el agua.
Por el contrario, las grasas son solubles en disolventes orgnicos, como el ter,
cloroformo, acetona, benceno, etc.
3.3.3.2.Tcnica
.
Poner 2ml de aceite en dos tubos de ensayo.
Aadir a uno de ellos 2ml de agua y al otro 2ml de ter u otro disolvente orgnico,
Agitar fuertemente ambos tubos y dejar reposar.
Observar los resultados: Se ver cmo el aceite se ha disuelto en el ter y, en cambio no lo

hace en el agua y el aceite subir debido a su menor densidad.
3.3.4 Aislamiento de Colesterol del Tejido Nervioso

3.3.4.1 Tcnica
3 gramos de cerebro desmenuzado se tritura cuidadosamente en un mortero con 6 g de yeso.
La masa espesa obtenida se aplica con ayuda de una esptula sobre la placa de vidrio en una
capa fina y seca en el armario secador a 40C sobre la llama de un mechero. La masa reseca
se separa de la placa con un escarpelo en un mortero seco y se tritura convirtindola en polvo.
El polvo se traslada a un tuvo de ensayo, se le vierten 6 ml de cloroformo, se agita
cuidadosamente durante 5 ml y se filtra. El filtrado obtenido se utiliza para las reacciones
coloreadas de reconocimiento del colesterol.
3.3.5 Reacciones coloreadas del colesterol

El principio del mtodo. Bajo la accin de los agentes deshidratantes el colesterol se
transforma en un hidrocarburo con dobles enlaces conjugados: el colesterileno, que al
interaccionar con el cido sulfrico y el anhdrido actico, da compuestos complejos
- 129 -

intensamente coloreados. Reacciones semejantes son caractersticas tambin para otros

esteroles.
3.3.5.1 Reaccin con el acido sulfurico
Reaccin de Schiff: en un tuvo de ensayo seco se vierte 1 ml de extracto de colesterol
en cloroformo y con cuidado, por la pared, se hace deslizar 1ml de cido sulfrico
concentrado. En el contacto de los lquidos se observa la aparicin de un anillo de color rojo.
Reaccin de Salkovsky: En un tubo de ensayo seco se vierte 1ml de extracto de
colesterol en cloroformo y 1ml de cido sulfrico. Los lquidos se mezclan agitando el tubo
de ensayo. Al separarse las capas, el extracto superior de cloroformo resulta coloreado de rojo
y el inferior de un color rojo amarillento con fluorescencia verde. Si al extracto inferior del
liquido se le aade 1ml de cido acetico, aparece una coloracin roja rosada, mientras que la
fluorescencia se mantiene.
3.3.5.2 Reaccin con anhdrido acetico y acido sulfurico
Reaccin de Liebermann-Burkhardt:En un tubo de ensayo se vierten 2 ml de
extracto de colesterol en cloroformo, se aaden gota a gota 10 ml de anhdrido actico, 2
gotas de cido sulfrico, y se mezcla todo cuidadosamente. El lquido adquiere primero una
coloracin roja, luego una violeta, azul y, por ltimo, verde.
Reportar en su bitcora los resultados de todos y cada uno de los ensayos obtenidos.
5. CONCLUSIONES
El alumno concluirn en base a la experiencia adquirida en el laboratorio sobre el desarrollo
de esta prctica si los objetivos se cumplieron.
6. CUESTIONARIO
7.1 Qu son los jabones?
7.2 Cmo se pueden obtener los jabones?
7.3 Por qu en la saponificacin del aceite la glicerina aparece en la fase acuosa?
7.4 Qu enzima logra en el aparato digestivo la hidrlisis de las grasas?
7.5 Indica lo que ocurre con la mezcla aceite-Sudn III y aceite-tinta y explica a qu se debe
la diferencia entre ambos resultados.
7.6 Qu ocurre con la emulsin de agua en aceite transcurridos unos minutos de reposo?, Y
que ocurre con la de benceno y aceite?A qu se deben las diferencias observadas entre
- 130 -

7. BIBLIOGRAFIA:
7.1 V. Chechetkin, V.I. Voronianski, G.G. Pokusay, Practicas de Bioqumica del ganado y
aves de corral, Editorial Mir-Moscu, 1994, paginas 128-149.
7.2 E. Vazquez-Contreras, Bioqumica y Biologoga Molecular en lnea. Instituto de
Qumica-UNAM. http://laguna.fmedic.unam.mx/~evazquez/0403/tipos%20lipidos.html.
8. BIBLIOGRAFIA ADICOIONAL
- 131 -

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Manual de Practicas Laboratorio de Qumica- Bioorgnica

Alejandro Cruz, Itzia I. Padilla Martnez, Efrn V. Garca Bez

INSTITUTO POLITCNICO NACIONAL

UNIDAD PROFESIONAL INTERDISCIPLINARIA DE

LABORATORIO DE QUMICA BIOORGNICA

Mxico D.F. Octubre-2009

Manual de Practicas Laboratorio de Qumica-Bioorgnica

GUA PARA EL TRABAJO DE LABORATORIO

ORGANIZACIN DE LOS INFORMES DEL LABORATORIO

COMPORTAMIENTO PERSONAL EN EL LABORATORIO

PRCTICA 1. Separacin y purificacin de compuestos orgnicos. Punto de fusin y

PRCTICA 2. Extraccin y Cromatografa

PRCTICA 3. Propiedades quimicas de halogenuros de alquilo y Alcoholes

PRCTICA 4. Medicin de la densidad, indice de refraccin y punto de ebullicin de

PRCTICA 5. Sntesis del cloruro de terc-butilo a partir de terc-butanol

PRCTICA 6. Aldehidos y cetonas. Sntesis de dibenzalacetona

PRCTICA 7. Acidos carboxilico. Sntesis del acido acetil saliclico (aspirina)

PRCTICA 8. Aminas, propiedades qumicas y sntesis de acetanilida

PRCTICA 9. Sntesis de la benzocaina I

PRCTICA 10. Sntesis de la benzocaina II

PRCTICA 11. Reacciones de identificacin de aminocidos y protenas

PRCTICA 12. Reacciones de identificacin de carbohidratos

PRCTICA 13. Cintica de la hidrlisis de la sacarosa mediante rotacin ptica

PRACTICA 14. Reconocimiento de lpidos

Manual de Practicas Laboratorio de Qumica-Bioorgnica

El objetivo principal de compilar este conjunto de prcticas de LABORATORIO DE

Manual de Practicas Laboratorio de Qumica-Bioorgnica

GUA PARA EL TRABAJO DE LABORATORIO.

El programa experimental aqu esbozado requiere de mucha actividad y organizacin.

ORGANIZACIN DE LOS INFORMES DE LABORATORIO

Un buen reporte (cuaderno de trabajo) debe mostrar:

Manual de Practicas Laboratorio de Qumica-Bioorgnica

COMPORTAMIENTO PERSONAL EN EL LABORATORIO

Manual de Practicas Laboratorio de Qumica-Bioorgnica

solubilidad del componente a separar en el disolvente de la mezcla y el disolvente

Manual de Practicas Laboratorio de Qumica-Bioorgnica

Manual de Practicas Laboratorio de Qumica-Bioorgnica

La presencia de impurezas producen generalmente una disminucin de la temperatura

3.2 PRIMERA PARTE: Determinacin del Punto de Fusin

Equipo para la determinacin del punto de fusin Fisher-Johns

Manual de Practicas Laboratorio de Qumica-Bioorgnica

3.2.3 Procedimiento experimental

3 Matraces Elenmeyer de 125 mL

1 Embudos de filtracin de vidrio

1 Pinza de tres dedos

Euipo para medir el punto de fusin

Acetanilida grado tcnico

Manual de Practicas Laboratorio de Qumica-Bioorgnica

a). Pesar 0.5 g de muestra de acetanilida grado tcnico.

Reportar la masa en gramos de cido benzico y acetanilida obtenidos en la

Manual de Practicas Laboratorio de Qumica-Bioorgnica

Rango de fusin Rango de

anteriores. Discuta el resultado.

Hacer el clculo de rendimiento en el proceso de recristalizacin.

Manual de Practicas Laboratorio de Qumica-Bioorgnica

6.6 Cmo se elige el disolvente adecuado para efectuar una cristalizacin?

Abbott, D. y Andrews, R. S., Introduccin a la Cromatografa, 3 Ed., Alhambra,

Brewster, R.Q., Curso Prctico de Qumica Orgnica, 2 Ed.., Alhambra, Espaa,

Wilcox, C.F., Experimental Organic Chemistry a Small-Scalle Approach, Mc

Millan, U.S.A., 1976.

Vogel, A. I., Elementary Practical Organic Chemistry Part I, Small Scale

Preparations, Longmans, (1978).

Wilcox, C.F., Experimental Organic Chemistry. A Small Scale Aproach, Mc Millan

Barrow, Gordon M. Qumica Fsica, Reverte(1976).