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LaATPasadeSodioPotasio

La ATPasa de sodiopotasio es una bomba impulsada por ATP tipo P (sufre una
fosforilacin reversible durante el proceso de transporte), que est implicada en el
establecimiento de los gradientes de sodio y potasio a travs de las membranas
plasmticas. Est formada por dos subunidades, alfa y beta, que forman un tetrmero
integrado en la membrana. La subunidad alfa est compuesta por ocho segmentos
transmembranayenellaseencuentraelcentrodeunindelATPqueselocalizaenellado
citoslicodelamembrana.Tambinposeedoscentrosdeuninalpotasioextracelularesy
tres centros de unin al sodio intracelulares que se encuentran accesibles o no para los
iones en funcin del estado de fosforilacin de la protena. La subunidad beta contiene
una sola regin helicoidal transmembrana y no parece ser esencial para el transporte ni
paralaactividadATPasa.

Mecanismo:

Elfuncionamientodelabombadesodiopotasiosedebeauncambiodeconformacinen
la protena que se produce cuando se fosforila. Como el resultado de la catlisis es el
movimiento transmembrana de cationes en contra de gradiente electroqumico, y se
consumeenergaenformadeATP,sufuncinsedenominatransporteactivo.Lademanda
energtica es cubierta por la molcula de ATP, que al ser hidrolizada libera la energa
necesariaparaeltransporteencontradegradiente.Laenergaliberadainduceuncambio
enlaconformacindelaprotenaunavezunidoslostrescationesdesodioasuslugares
deuninintracelular,loqueconllevasuexpulsinalexteriordelaclula.Estohaceposible
launindedosionesdepotasioenlacaraextracelularqueprovocaladesfosforilacinde
laenzimaylaposteriorrecuperacindelestadoconformacionalinicial,liberandolosdos
iones de potasio al medio intracelular. Los pasos que tienen lugar en el transporte se
describenacontinuacin.

1. UnindetresNa+asussitiosactivos.

2. Fosforilacin de la cara citoplasmtica de la bomba que induce a un cambio de


conformacin en la protena. Esta fosforilacin se produce por la transferencia del
grupoterminaldelATPaunresiduodecidoasprticodelaprotena.

3. ElcambiodeconformacinhacequeelNa+sealiberadoalexterior.

4. UnavezliberadoelNa+,seunendosmolculasdeK+asusrespectivossitiosdeunin
enlacaraextracelulardelaprotena

5. La protena se desfosforila producindose un cambio conformacional de esta, lo que


produceunatransferenciadelosionesdeK+alcitosol(6).

La bomba de sodiopotasio est implicada en el transporte de glucosa desde el lumen del


intestinohaciaeltorrentesanguneo(veresquemadeabajo).Enesteproceso,unsimportador
de2Na+/1glucosaimportalaglucosaencontradesugradientegraciasalgradientefavorable
desodio.Elgradientedesodioesmantenidoporlabombadesodiopotasiolocalizadaenlas
membranas basolaterales de las clulas del epitelio, la cual expulsa el sodio intracelular en
contradesugradientegraciasalaaportacinenergticadelahidrlisisdeATP.Enunsegundo
paso, la glucosa concentrada en el interior celular es exportada a favor de gradiente por las
protenasGLUT2,quesonuniportadoresdebajaafinidad.
El resultado neto es el movimiento de Na+ y glucosa desde el lumen del intestino al medio
extracelularenlacarabasolateraldelepitelio.Lasunionesfuertesentrelasclulasepiteliales

sellan el epitelio de forma que se impide el retorno de las sustancias importadas, las cuales
acabarnportransportarsealtorrentesanguneo.Porotraparte,elincrementodelapresin
osmticageneradaporeltransportedesales,glucosayaminocidosentrelasclulasatodolo
largodelepitelio,arrastraelaguadesdeellumendelintestinoalmedioextracelularquerodea
lasuperficiebasolateral.Endefinitiva,lassales,laglucosaylosaminocidossellevanelagua
conellos.

Ouabana
Glicsido cardioactivo compuesto de ramnosa y ouabagenina, obtenido de semillas de
Strophantus gratus y otras plantas de las apocynaceae. Se usa como las digitalis. Se emplea
comunmenteenestudiosdebiologacelularcomoinhibidordelabombadesodiopotasio.

Cuestion3tema2.(Lodish)
Imagina que ests investigando el transporte transepitelial de glucosa radiactiva. Las clulas
epitelialesdelintestinosecultivaninvitrohastaqueformanunalminacompleta,deforma
que el fluido que baa el domino apical de las clulas (medio apical) est completamente
separado del fluido que baa el dominio basolateral de las clulas (medio basolateral). Se
aadeglucosaradiactiva(marcadacon14C)almedioapicalylaaparicinderadiactividaden
el medio basolateral se mide en cuentas por mililitro (cpm/ml), como una medida de la
radiactividadporlaunidaddevolumen.
Tratamiento1:Losmediosapicalybasolateralcontienen150mMNa+(cuerva1)
Tratamiento2:Elmedioapicalcontiene1mMNa+ yelmediobasolateralcontiene150mM
Na+(curva2).
Tratamiento3:Elmedioapicalcontiene150mMNa+yelmediobasolateral1mMNa+(curva
3).

a) Cul es la explicacin ms razonable para explicar las diferencias de los resultados


obtenidosconlostratamientos1y3encomparacinconeltratamiento2.
Enlossiguientesexperimentosseutiliza,segnseindica,ladrogaOuabana,lacualinhibelas
ATPasasdeNa+/K+.
Tratamiento4:losmediosapicalybasolateralcontienen150mMNa+ysloelmedioapical
contieneOuabana(curva4).
Tramiento 5: los medios apical y basolateral contienen 150 mM Na+ y slo el medio
basolateralcontieneOuabana(curva5).


b) Cul es la explicacin ms razonable para explicar las diferencias de los resultados
obtenidosentrelostratamientos4y5.
c) Unapoblacindelasclulasutilizadasenlosexperimentosanterioressehadiseadoy
modificadoparaqueexpresenenlamembranabasolateraleltransportadorGLUT1en
lugardelGLUT2.Estasclulasmodificadasparecenmenosrobustasquelasparentales
(originales sin modificar) y no sobreviven por mucho tiempo en el cultivo. Da una
explicacinrazonableparaestosresultados.

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