Yersinia pestis

Blgo. Carlos A. Fernndez Miope FernandezC4@gmail.com Enero, 2014

M.V. Nieves Vargas Machuca
Segunda Especialidad en Microbiologa Clnica
Hospital Regional Lambayeque - Universidad Nacional Pedro Ruiz Gallo
Fuente DGE-MINSA
NORMA TCNICA DE SALUD PARA LA VIGILANCIA,
PREVENCIN Y CONTROL DE LA PESTE EN EL PER RM
N 684-2010/MINSA-NTS N083 MINSA/DGSP.V.01
B
l
g
o
.

C
a
r
l
o
s

A
.

F
e
r
n

n
d
e
z

M
i

o
p
e

-


M
.
V
.

N
i
e
v
e
s

V
a
r
g
a
s

M
a
c
h
u
c
a

Mapa de pases con presencia conocida de
reservorios silvestres de peste (rojo)
B
l
g
o
.

C
a
r
l
o
s

A
.

F
e
r
n

n
d
e
z

M
i

o
p
e

-


M
.
V
.

N
i
e
v
e
s

V
a
r
g
a
s

M
a
c
h
u
c
a

Areas de riesgo 2010 segn OPS/OMS
Alta endemicidad:
Madagascar + Repblica Democrtica
del Congo
Actividad Regular:
Mongolia, Kazakhstan, USA, China,
Mozambique, Tanzania, Per,
Vietnam
Paises Emergentes / Reemergencia:
India, Algeria, Ecuador
B
l
g
o
.

C
a
r
l
o
s

A
.

F
e
r
n

n
d
e
z

M
i

o
p
e

-


M
.
V
.

N
i
e
v
e
s

V
a
r
g
a
s

M
a
c
h
u
c
a

B
l
g
o
.

C
a
r
l
o
s

A
.

F
e
r
n

n
d
e
z

M
i

o
p
e

-


M
.
V
.

N
i
e
v
e
s

V
a
r
g
a
s

M
a
c
h
u
c
a

Yersinia pestis
Gram
Cocobacilos Gram (-), pleomrficos, aislados o
en cadenas cortas.
Bipolares con tincin de Wright o Giemsa
Aerobios/anaerobios
Anaerobios facultativos
Temperatura de crecimiento
La ptima est debajo de 37 C (25-29 C)
Hemolisis
Negativo
Catalasa
Positivo
Oxidasa
Negativo
Motilidad
Negativo
Aerobios/anaerobios
Anaerobios facultativos
Ureasa
Negativo
Requerimientos
Hierro
B
l
g
o
.

C
a
r
l
o
s

A
.

F
e
r
n

n
d
e
z

M
i

o
p
e

-


M
.
V
.

N
i
e
v
e
s

V
a
r
g
a
s

M
a
c
h
u
c
a

Tincin de Gram
Tincin de Giemsa
o Wright
B
l
g
o
.

C
a
r
l
o
s

A
.

F
e
r
n

n
d
e
z

M
i

o
p
e

-


M
.
V
.

N
i
e
v
e
s

V
a
r
g
a
s

M
a
c
h
u
c
a

B
l
g
o
.

C
a
r
l
o
s

A
.

F
e
r
n

n
d
e
z

M
i

o
p
e

-


M
.
V
.

N
i
e
v
e
s

V
a
r
g
a
s

M
a
c
h
u
c
a

B
l
g
o
.

C
a
r
l
o
s

A
.

F
e
r
n

n
d
e
z

M
i

o
p
e

-


M
.
V
.

N
i
e
v
e
s

V
a
r
g
a
s

M
a
c
h
u
c
a

Scanning electron microscopy of Hms-positive (A) and Hms-negative (B) Yersinia pestis grown on
agar plates at 21 C
A, In vivo biofilm dissected from a flea. B, In vitro biofilm produced on a glass surface by Yersinia
pestis KIM6+(pGFP)
B
l
g
o
.

C
a
r
l
o
s

A
.

F
e
r
n

n
d
e
z

M
i

o
p
e

-


M
.
V
.

N
i
e
v
e
s

V
a
r
g
a
s

M
a
c
h
u
c
a

Biofilm-like growth of Hms-positive Yersinia pestis in the proventriculus of blocked fleas. A, Digestive tract
dissected from an uninfected Xenopsylla cheopis flea, indicating the location of the proventricular valve
(PV), which connects the esophagus (E) to the midgut (MG). (B) Scanning electron microscopy of the spines
lining the interior of a proventriculus from an uninfected flea, (C)a flea infected with Hms-negative Y. pestis,
(D) and a flea blocked with Hms-positive Y. pestis, showing bacteria embedded within an extracellular
matrix.
B
l
g
o
.

C
a
r
l
o
s

A
.

F
e
r
n

n
d
e
z

M
i

o
p
e

-


M
.
V
.

N
i
e
v
e
s

V
a
r
g
a
s

M
a
c
h
u
c
a

Factores de virulencia
B
l
g
o
.

C
a
r
l
o
s

A
.

F
e
r
n

n
d
e
z

M
i

o
p
e

-


M
.
V
.

N
i
e
v
e
s

V
a
r
g
a
s

M
a
c
h
u
c
a

B
l
g
o
.

C
a
r
l
o
s

A
.

F
e
r
n

n
d
e
z

M
i

o
p
e

-


M
.
V
.

N
i
e
v
e
s

V
a
r
g
a
s

M
a
c
h
u
c
a

Y. pestis defense mechanisms
against host innate immunity.
(a) Defense mechanisms at the
early stage of infection.
(b) Defense mechanisms after the
release of Y. pestis from
macrophages.
Componentes del Sistema de Secrecin de
Tipo III de Y. pestis
B
l
g
o
.

C
a
r
l
o
s

A
.

F
e
r
n

n
d
e
z

M
i

o
p
e

-


M
.
V
.

N
i
e
v
e
s

V
a
r
g
a
s

M
a
c
h
u
c
a

B
l
g
o
.

C
a
r
l
o
s

A
.

F
e
r
n

n
d
e
z

M
i

o
p
e

-


M
.
V
.

N
i
e
v
e
s

V
a
r
g
a
s

M
a
c
h
u
c
a

Infeccin de Glbulos rojos de mamferos por Y. pestis. a. GRs humanos control
cultivados in vitro; c. Diferentes etapas de dao a los GR humanos, bacteria alrededor
del GR, forma poros en sus membranas, invade y luego deja el GR y aparece
extracelularmente.
B
l
g
o
.

C
a
r
l
o
s

A
.

F
e
r
n

n
d
e
z

M
i

o
p
e

-


M
.
V
.

N
i
e
v
e
s

V
a
r
g
a
s

M
a
c
h
u
c
a

Infeccin de Glbulos rojos de mamferos por Y. pestis. b GRs humanos control
cultivados in vitro; d. Dao al GR humano, formacin de poros, localizacin
intracelular de la bacteria, con cadenas de microorganismos fuera del GR.
B
l
g
o
.

C
a
r
l
o
s

A
.

F
e
r
n

n
d
e
z

M
i

o
p
e

-


M
.
V
.

N
i
e
v
e
s

V
a
r
g
a
s

M
a
c
h
u
c
a

Infeccin de Glbulos rojos de mamferos por Y. pestis. e. Destruccin total de los
GRs de ratn por una cepa virulenta, mostrando localizacin intracelular y aparente
multiplicacin de Y. pestis dentro del GR
B
l
g
o
.

C
a
r
l
o
s

A
.

F
e
r
n

n
d
e
z

M
i

o
p
e

-


M
.
V
.

N
i
e
v
e
s

V
a
r
g
a
s

M
a
c
h
u
c
a

Y. pestis
Oxidasa
Catalasa
Siderforo
Glucosa
Inhibicin del crecimiento
H
2
O
2
Regula[ ]
Hemoglobina

Grupo Hem

Fe
2+
+

Fe
3+
Separacin
Prdida de la capacidad de
Oxigenacin
Sntomas de envenenamiento
Hipoxia = Cianosis = Peste Negra
Carencia G6PDH
B
l
g
o
.

C
a
r
l
o
s

A
.

F
e
r
n

n
d
e
z

M
i

o
p
e

-


M
.
V
.

N
i
e
v
e
s

V
a
r
g
a
s

M
a
c
h
u
c
a

Simplified model of Yersinia species evolution based on
present knowledge of genome data.
Patogenia de Peste Bubonica
Aguda y dolorosa de los ganglios linfticos (bubn)
Frecuentemente al sitio de picadura por una pulga infectante.
Localizaciones ms frecuentes: inguinal, crural o femoral, axilar y
cervical; tambin puede localizarse en la regin post - auricular, popltea,
epitroclear y otros.
La Yersinia pestis se multiplica en gran medida, causando la necrosis de
los tejidos del ganglio, formndose abscesos que en algunos casos se
fistulizan y drenan hacia el exterior,
Los bacilos logran vencer la resistencia de los ganglios llegando a pasar a
la sangre (bacteremia) con localizaciones secundarias en otros rganos,
tales como el bazo, hgado, pulmonesy meninges (septicemia).
B
l
g
o
.

C
a
r
l
o
s

A
.

F
e
r
n

n
d
e
z

M
i

o
p
e

-


M
.
V
.

N
i
e
v
e
s

V
a
r
g
a
s

M
a
c
h
u
c
a

Peste Septicemica

Es la invasin del bacilo al torrente sanguneo
en forma masiva (bacteremia).
Con localizacin en otros rganos, tales como
bazo, hgado, pulmones, meninges. Esta
forma clnica puede ser:
Peste septicmica secundaria: Cuando se
deriva de la forma bubnica, tiene un mayor
compromiso del estado general, toxemia,
pequeas hemorragias de la piel y
deshidratacin.
Peste septicmica primaria: Cuando el
compromiso de ganglios no es evidente, la
Yersinia pestis se multiplica en la sangre,
pudiendo identificarse por hemocultivo
Peste Neumnica
El enfermo al toser elimina los bacilos
pestosos incluidos en las gotitas de Flgger,
Clnicamente la peste neumnica se
caracteriza por tener un comienzo brusco
con fiebre alta, disnea, tos, taquicardia,
cefalea, mialgias intensas, temblores y
postracin.
la muerte en un lapso de uno a tres das.
La Peste Neumnica puede ser:
Peste neumnica secundaria: es muy grave y
con alta letalidad.
Puede ser consecuencia de un retraso en el
diagnstico y/o por inadecuado tratamiento
de la peste bubnica o peste septicmica
primaria.
Peste neumnica primaria: Cuando el
enfermo con peste neumnica secundaria al
toser elimina al bacilo pestoso
transmitindolo a sus contactos
directamente a travs de las gotas de
secreciones respiratorias, pudiendo producir
brotes localizados o epidemias devastadoras.
El paciente puede fallecer dentro de 48
horas.
B
l
g
o
.

C
a
r
l
o
s

A
.

F
e
r
n

n
d
e
z

M
i

o
p
e

-


M
.
V
.

N
i
e
v
e
s

V
a
r
g
a
s

M
a
c
h
u
c
a

DIAGNOSTICO DE PESTE
Muestras biologicas para diagnostico de peste (1)
1- Fase Aguda * :
* bubonica : Aspirado de bubon
pneumonica : Esputo
septiceamica: Sangre
muerte : higado, bazo, pulmon, medula osea y
otros
* Sangre
Cultivo - Immunologia Tecnicas Moleculares
Pruebas para diagnstico de peste
1. Pruebas Microbiolgicas:
Cultivo en Agar Sangre, CIN, BHI, Inoculacin en ratones
Susceptibilidad antibitica

2. Pruebas Microscopia :
Gram, Wayson (bipolar)
Inmunofluorescencia Directa IFD

3. Pruebas inmunolgicas :
ELISA IgG para humano, canes, roedores.
Prueba rapida inmunocromatografica Ag F1

4. Pruebas moleculares :
PCR Convencional.
PCR Tiempo Real
PFGE y secuenciamiento
DIAGNOSTICO DE PESTE HUMANA
B
l
g
o
.

C
a
r
l
o
s

A
.

F
e
r
n

n
d
e
z

M
i

o
p
e

-


M
.
V
.

N
i
e
v
e
s

V
a
r
g
a
s

M
a
c
h
u
c
a


B
l
g
o
.

C
a
r
l
o
s

A
.

F
e
r
n

n
d
e
z

M
i

o
p
e

-


M
.
V
.

N
i
e
v
e
s

V
a
r
g
a
s

M
a
c
h
u
c
a


B
l
g
o
.

C
a
r
l
o
s

A
.

F
e
r
n

n
d
e
z

M
i

o
p
e

-


M
.
V
.

N
i
e
v
e
s

V
a
r
g
a
s

M
a
c
h
u
c
a

B
l
g
o
.

C
a
r
l
o
s

A
.

F
e
r
n

n
d
e
z

M
i

o
p
e

-


M
.
V
.

N
i
e
v
e
s

V
a
r
g
a
s

M
a
c
h
u
c
a


B
l
g
o
.

C
a
r
l
o
s

A
.

F
e
r
n

n
d
e
z

M
i

o
p
e

-


M
.
V
.

N
i
e
v
e
s

V
a
r
g
a
s

M
a
c
h
u
c
a


B
l
g
o
.

C
a
r
l
o
s

A
.

F
e
r
n

n
d
e
z

M
i

o
p
e

-


M
.
V
.

N
i
e
v
e
s

V
a
r
g
a
s

M
a
c
h
u
c
a


B
l
g
o
.

C
a
r
l
o
s

A
.

F
e
r
n

n
d
e
z

M
i

o
p
e

-


M
.
V
.

N
i
e
v
e
s

V
a
r
g
a
s

M
a
c
h
u
c
a

Diferencia entre Yersinia pestis y Yersinia
pseudotuberculosis. 25 C en 24 horas

B
l
g
o
.

C
a
r
l
o
s

A
.

F
e
r
n

n
d
e
z

M
i

o
p
e

-


M
.
V
.

N
i
e
v
e
s

V
a
r
g
a
s

M
a
c
h
u
c
a

B
l
g
o
.

C
a
r
l
o
s

A
.

F
e
r
n

n
d
e
z

M
i

o
p
e

-


M
.
V
.

N
i
e
v
e
s

V
a
r
g
a
s

M
a
c
h
u
c
a


B
l
g
o
.

C
a
r
l
o
s

A
.

F
e
r
n

n
d
e
z

M
i

o
p
e

-


M
.
V
.

N
i
e
v
e
s

V
a
r
g
a
s

M
a
c
h
u
c
a

B
l
g
o
.

C
a
r
l
o
s

A
.

F
e
r
n

n
d
e
z

M
i

o
p
e

-


M
.
V
.

N
i
e
v
e
s

V
a
r
g
a
s

M
a
c
h
u
c
a

Lisis de Yersinia por bacteriofago.
La Yersinia pestis es
sensible a ser lisada por
un bacteriofago
especifico y esta
actividad depende de la
temperatura. El
bacteriofago de Y. pestis,
especficamente, lisa su
clula husped a
temperatura ambiental
(22-25 C) y a 37 C
Yersinia
pseudotuberculosa, es
tambin lisada por el
bacteriofago solo a 37 c
B
l
g
o
.

C
a
r
l
o
s

A
.

F
e
r
n

n
d
e
z

M
i

o
p
e

-


M
.
V
.

N
i
e
v
e
s

V
a
r
g
a
s

M
a
c
h
u
c
a

B
l
g
o
.

C
a
r
l
o
s

A
.

F
e
r
n

n
d
e
z

M
i

o
p
e

-


M
.
V
.

N
i
e
v
e
s

V
a
r
g
a
s

M
a
c
h
u
c
a

B
l
g
o
.

C
a
r
l
o
s

A
.

F
e
r
n

n
d
e
z

M
i

o
p
e

-


M
.
V
.

N
i
e
v
e
s

V
a
r
g
a
s

M
a
c
h
u
c
a

Y. pestis Antigeno F1
Glicoprotena Capsular - codificadas por el ADN
plasmdico (PFRA)
Y. pestis especifico
Abundante (secretada at 37C), resistente al calor
Muestras de diferentes tipos (humanos, roedores)
No influenciada por los contaminantes
B
l
g
o
.

C
a
r
l
o
s

A
.

F
e
r
n

n
d
e
z

M
i

o
p
e

-


M
.
V
.

N
i
e
v
e
s

V
a
r
g
a
s

M
a
c
h
u
c
a

Fallecido sin tratamiento
ATB
Paciente recuperado
Fallecido sin
tratamiento ATB
Fallecido sin
tratamiento
ATB
Paciente
recuperado
Y. Pestis
F1 antgeno
Anticuerpos
Days
Punto de
corte
F1
dipstick
D0 D6
Paciente
recuperado
D8
F1 Antgeno bubn / esputo F1 Antgeno sangre/ orina
Y. pestis bubo n/ esputo Anti-F1 anticuerpo
ATB
Evolucin de Y. pestis y concentracin del
antgeno F1
recuperado
Inicio enfermedad
B
l
g
o
.

C
a
r
l
o
s

A
.

F
e
r
n

n
d
e
z

M
i

o
p
e

-


M
.
V
.

N
i
e
v
e
s

V
a
r
g
a
s

M
a
c
h
u
c
a

Dipstick para deteccin
de antgeno F1
- Principio:
Inmunocromatografia
partculas de oro coloidal
(Flujo vertical)

- Muestras:
Bubn, esputo, suero, orina,
etc
- Tiempo:
15 minutos
B
l
g
o
.

C
a
r
l
o
s

A
.

F
e
r
n

n
d
e
z

M
i

o
p
e

-


M
.
V
.

N
i
e
v
e
s

V
a
r
g
a
s

M
a
c
h
u
c
a

Inmunocoloracin Especfica Buscando
Yersinia pestis
Ensayo de fluorescencia directa (DFA)
Usar como prueba rpida (30 minutos),
prueba presuntiva durante el examen inicial
Como ayuda para la identidad de un
aislamiento recuperado

Coloracin Inmunohistoqumica (IHC)
Usar como examen forense de material
biopsiado y preservado como ayuda para la
identificacin

Inoculacin de Ratn
B
l
g
o
.

C
a
r
l
o
s

A
.

F
e
r
n

n
d
e
z

M
i

o
p
e

-


M
.
V
.

N
i
e
v
e
s

V
a
r
g
a
s

M
a
c
h
u
c
a

GRACIAS
B
l
g
o
.

C
a
r
l
o
s

A
.

F
e
r
n

n
d
e
z

M
i

o
p
e

-


M
.
V
.

N
i
e
v
e
s

V
a
r
g
a
s

M
a
c
h
u
c
a