kAC1ICA No.

2: Ley de 8eer-Lambert II
1
.
Curvas de Ca||brac|n y Mtodo Lstad|st|co de M|n|mos Cuadrados.

a|abras C|ave: !"#$% '( !%)*+#%,*-./ 0)%.,1 2.%)34*,1/ 5641'1 '( 53.*718 !"%'#%'18/ !1(9*,*(.4( '( !1##()%,*-. :*.(%);

Introducc|n:
La gran mayorla de meLodos lnsLrumenLales requleren una callbracln, proceso que
relaclona la senal anallLlca medlda con la concenLracln del anallLo. Los Lres meLodos ms
frecuenLemenLe uLlllzados son: la reallzacln y el uso de una curva de callbracln, el meLodo de
la adlcln esLndar y el del paLrn lnLerno
1
.
ara reallzar el MeLodo de la Curva de Ca||brac|n se procede a reallzar una serle de
soluclones de concenLracln conoclda de anallLo, los cuales se lnLroducen en el lnsLrumenLo y se
reglsLra la senal lnsLrumenLal. normalmenLe esLa senal se corrlge por medlo de la senal de un
8|anco Ana||t|co en el que se esLablece el cero de absorbancla, esLe blanco conLlene Lodos los
componenLes de la maLrlz del anllsls (L[emplo: agua desLllada, agua/eLanol) a excepcln del
anallLo que se desea medlr. Ll blanco es preparado en el lnsLanLe en que se preparan las dems
muesLras a deLermlnarse ya debe lmlLar las condlclones de anllsls a las que se comeLen esLas
ulLlmas.

Iundamento:
La absorcln de la luz por una solucln dllulda, vlene dada por la ley de 8eer, que
relaclona la concenLracln de la fase absorbenLe con la radlacln. La relacln enLre la absorcln
de la luz y el camlno recorrldo por esLa (o sea, el espesor de la cubeLa, vlene dado por las leyes
de LamberL. La fusln de esLas leyes emplrlcas nos da la absorbancla LoLal por un cuerpo,
cuando lnLeracclona con un haz monocromado.
MedlanLe un meLodo que obedezca la ley de 8eer-LamberL se puede reallzar un anllsls
cuallLaLlvo de cualquler especle en solucln, conoclendo por supuesLo la longlLud de onda de
mxlma absorbancla del anallLo, esLo por medlo de la deLermlnacln de la absorbancla en
funcln de soluclones de concenLracln conoclda a Lraves de la elaboracln de una curva de
callbracln que las relaclone de manera proporclonal y llnealmenLe, para lo que se requlere de
un meLodo esLadlsLlco. Ll meLodo esLadlsLlco clslco y que se adecua a las caracLerlsLlcas para la
reallzacln de dlcha acLlvldad es el de los M|n|mos Cuadrados en los que se graflca la ordenada
(la varlable lndependlenLe) con los daLos de la respuesLa del aparaLo y la absclsa (varlable
dependlenLe) en donde se coloca la concenLracln o el LanLo por clenLo del anallLo, lo ms
hablLual (y deseable) es que la grflca se aproxlme a una llnea recLa, sln embargo puede darse el
caso de que los valores no colncldan en una recLa debldo a errores aleaLorlos del proceso de
medlda, el meLodo de los mlnlmos cuadrados nos slrve para lnLenLar a[usLar la me[or" llnea
recLa que conecLe los punLos. La ecuacln cannlca de la recLa se expresa maLemLlcamenLe
como:
! # $% & '
y en el meLodo de mlnlmos cuadrados esLos valores se obLlenen reallzando las slgulenLes
operaclones manuales:
7 < y, + <


1
Elaborada por Jorge Reyes y William Quiroa.
uonde n, lndlca el numero de daLos y _ las sumaLorlas correspondlenLes de los Lermlnos
Labulados. LsLo se slmpllflca con el uso de calculadoras clenLlflcas en cuyas opclones esLadlsLlcas
se encuenLra por lo regular la opcln de calculo de regresln llneal, al lgual que en programas de
ordenador como Lxel y oLras ho[as elecLrnlcas. La vlabllldad del meLodo de curva de callbracln
queda esLableclda por el valor del cuadrado del Coef|c|ente de Corre|ac|n L|nea| (r
2
), que debe
ser superlor a 0.998, para reallzar un esLudlo cuallLaLlvo adecuado.


Cb[et|vos
1. Llaborar una curva de callbracln para relaclonar la senal anallLlca medlda con la
concenLracln del anallLo.
2. Conocer la lmporLancla de la elaboracln de un blanco para la reallzacln de un anllsls
especLrofoLomeLrlco.
3. Apllcar meLodos esLadlsLlcos esenclales e lnherenLes a los meLodos lnsLrumenLales.

roced|m|ento:
L|aborac|n de una Curva de Ca||brac|n.
reparac|n de So|uc|ones de 1raba[o.
1. 1ransvasar los 100 mL de solucln coloreada de la prcLlca 1 (o lo que queda de las
mlsmas) y Lransvasar cuanLlLaLlvamenLe a un baln aforado de 230 mL, aslgnar un valor
nomlnal de concenLracln arblLrarlo a cada una (por e[emplo: 0.03 n). [Solucln Madre]
2. ue esLa solucln madre Lomar 4 allcuoLas de 1, 2, 3, 3, 10 respecLlvamenLe y dllulrlas en
balones de 100 mL (o del volumen que aslgne el lnsLrucLor) con agua desLllada.
[Soluclones LsLndar]
3. ueLermlnar las concenLraclones de esLos esLndares medlanLe la ecuacln C
1
v
1
= C
2
v
2
.

roceso de Ca||brac|n.
1. L[ecuLar la callbracln del SpecLronlc 20 empleando el procedlmlenLo descrlLo en la
seccln de 1ecnlcas ComplemenLarlas.

kesu|tados.
1. Craflcar respuesLa del aparaLo (Absorbancla promedlo) en e[e ?, conLra unldades de
concenLracln del coloranLe en el e[e x.
2. lngresar los valores a una calculadora de calculo de regresln llneal para deLermlnar la
pendlenLe m y el lnLercepLo en e[e x: b segun la ecuacln cannlca de la recLa: y = mx +
b. 8ecuerde borrar las lecLuras esLadlsLlcas de clculos pasados de la memorla de su
calculadora anLes de lngresar nuevos daLos.
3. Calcular el cuadrado del coeflclenLe de regresln llneal [r
2
], el valor deber esLar
comprendldo enLre 0.990 a 0.999. Ll valor no puede ser mayor a 1. 8ecordar que esLo
lndlca que la senal o respuesLa del lnsLrumenLo puede asoclarse de un 99 a 100 con la
concenLracln del anallLo.

An||s|s de kesu|tados.
La Ley de 8eer-LamberL se demuesLra con el experlmenLo que se reallz?, Se logr deLermlnar
la concenLracln de la muesLra desconoclda por medlo del meLodo?, Segun el coeflclenLe de
correlacln deLermlnado para el anllsls cree que es conflable el valor de concenLracln de
muesLra desconoclda, y sl no se cree asl por que razn exlsLe clerLo error? or que es
lmporLanLe la ley de 8eer?
Los meLodos lnsLrumenLales lncluyen procesos esLadlsLlcos, A la hora de medlr el valor de la
absorbancla de los esLndares y la muesLra desconoclda cree que es suflclenLe llevar a cabo solo
una vez la medlcln..? odrla medlrse 2 o Lres veces y reallzar un promedlo de absorbancla
para lncremenLar la reproduclbllldad o conflabllldad del meLodo?

Cuest|onar|o.
1. Sl en lugar del color aslgnado en el laboraLorlo se hublese Lenldo que Lraba[ar con una
solucln de oLro color como un color secundarlo como el vloleLa, serla necesarlo hacer
un barrldo para deLermlnar el mxlmo de absorbancla?
2. Sl la solucln sLock fuese lncolora cree que se puede llevar a cabo una deLermlnacln
en el SpecLronlc 20?
3. Sl la solucln sLock esLuvlera coloreada pero al mlsmo Llempo exLremadamenLe Lurbla
como afecLarla esLo el anllsls?


4. Cue es un cromforo y como se apllca en anllsls cuanLlLaLlvos por la Lecnlca
especLrofoLomeLrlca?

8|b||ograf|a.
1. Skoog, u. A., Poller, l.!. & 1. A. nleman (2001) rlnclplos de Anllsls lnsLrumenLal. 3La
Ldlcln, LdlLorlal McCraw-Plll, Mexlco. 1028 pp.
2. Amerlcan ubllc PealLh (AP) eL. al. MeLodos LsLndar para el Lxmen de Aguas y
Aguas de uesecho, lncluyendo SedlmenLos 8enLables y Lodos. (1963) 11 Ld. 1rad.
l.C.edro Caballero. LdlLorlal lnLeramerlcana S. A. Mexlco, 609 pp.


lnLerneL: ara ms lnformacln puede vlslLar:
1. 8eer's Law. AuLor: Sheffleld Pallam unlverslLy. lLlma AcLuallzacln: uesconoclda.
[hLLp://Leachlng.shu.ac.uk/hwb/chemlsLry/LuLorlals/molspec/beers1.hLm]
2. 8eer-LabmberL CalculaLor. AuLor: Chang 8losclence. lLlma AcLuallzacln: 2004.
[hLLp://www.changblosclence.com/calculaLor/8eerLamberL.hLml]
3. use of Lhe SpecLronlc 20
1M
aL a llxed WavelegLh. AuLor: ueparLamenL of ChemlsLry of unlverslLy
of Wlsconsln-Madlson. lLlma acLuallzacln: 1997.
[hLLp://lnsL.sfcc.edu/chemscape/caLofp/measurea/concenLr/spec20/spec20b.hLm]















Lstndar Concentrac|n Med|da de 1 1
romed|o
Absorbanc|a Absorbanc|a
romed|o


1







2







3







4







S