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ANLISIS CLNICO I FCCB B
MATERIALES Y EQUIPOS DE LABORATORIO
I.
OBJETIVO: Identificar materiales y equipos que conformen el laboratorio de anlisis clnico. Aprender el verdadero uso de los materiales y equipos de laboratorio. Aprender algunas recomendaciones por parte del profesor.
II.
MARCO TEORICO:
A.
PIPETAS La pipeta es un instrumento volumtrico de laboratorio que permite medir alcuota de lquido con bastante precisin. Suelen ser de vidrio. Est formada por un tubo transparente que termina en una de sus puntas de forma cnica y tiene una graduacin !una serie de marcas grabadas" indicando distintos vol#menes. Algunas son graduadas o de simple aforo es decir que se enrasa una ve$ en los cero mililitros y luego se de%a vaciar &asta el volumen que se necesite' aforo mientras que otras las denominadas de doble enrase o de doble se enrasa en la marca o aforo superior se de%a escurrir el lquido con precaucin &asta enrasar en el aforo inferior. Si bien poseen la desventa%a de medir un volumen fi%o de lquido las pipetas de doble aforo superan en gran medida a las graduadas en que su precisin es muc&o mayor ya que no se
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modifica el volumen medido si se les rompe o deforma la punta cnica. B. MICROPIPETA AUTOMTICA REGULABLE Es un instrumento de alta precisin que permite transferir vol#menes de lquidos en forma rpida sencilla y e(acta. Su principio de funcionamiento est basado en el sistema de )despla$amiento de aire* con lo cual se reducen al m(imo los problemas de contaminacin de lquido. +or la misma causa se elimina la rutina de limpie$a mantenimiento y lubricacin como en las micropipetas que utili$an el funcionamiento por despla$amiento positivo.
C.
MICROPIPETA AUTOMATICA FIJA 100 UL Es una micropipeta la cual carece de regulacin pues la medida es constante.
D.
PIPETAS DE THOMA Son unas pipetas especiales de cristal que constan de un largo tubo capilar graduado y de una dilatacin ampular o bulbo. El tubo capilar termina en punta a nivel de uno de sus e(tremos y se contin#a con el bulbo a nivel del otro de sus e(tremos. Adems est dividido en ,- partes iguales y en su superficie estn especialmente bien marcadas la .a divisin !con un - ." y la ,-/ !con un ,". El bulbo contiene una perla de vidrio para facilitar la me$cla de la sangre con el lquido de dilucin y acaba en un tubo capilar corto. La
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perla de vidrio es ro%a en las pipetas empleadas para el recuento de &emates y blanca en las usadas para el recuento de leucocitos. Adems en las pipetas para &emates la capacidad del bulbo es ,-veces superior a la del tubo capilar largo por lo que en el tubo capilar corto &ay una marca de ,-, 0 en las pipetas para leucocitos la capacidad del bulbo es ,- veces mayor que la del tubo capilar largo por lo que en el tubo capilar corto &ay una marca de ,,. +I+E1A 2E 2IL34I56 +A7A E7I1784I18S !+ipeta de 1&oma" Es una pipeta de vidrio que tiene un bulbo en la parte superior y dentro de ella una perlita ro%a me$cladora permite una dilucin de sangre ,9:--. La parte ms larga !parte inferior de bulbo" est dividido en ,- partes una a la mitad del tubo de -.. y el otro al final del tallo cerca al bulbo representada por el ,' posterior al bulbo &ay una marca de ,-, que indica la dilucin total de eritrocitos +I+E1A 2E 2IL34I56 +A7A LE3484I18S +ipeta similar a la de eritrocitos con la diferencia de que e(iste una perlita blanca el bulbo es ms peque;o y la marca es de ,, da una dilucin #nica de ,9:-.
E.
TUBO DE WINTROBE
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1ubo de vidrio graduado &ematcrito para la determinacin de la velocidad de sedimentacin eritroctica.1ubo de vidrio normal nuevo de ,,cm. de longitud la escala graduado con doble escala es decir de - <,- de aba%o &acia arriba lado derec&o para medir el =44 &ematocito se utili$a para la sedimentacin de las clulas sanguneas !determinacin del volumen celular compacto !344" o &ematocito sta sedimentacin es muy lenta.
F.
AGUJA ERITROCITICA
G.
TUBOS CAPILARES Son peque;os tubos desec&ables que se utili$an para la
determinacin de micro&ematocito !sedimentacin sangunea en forma slida por accin de la centrfuga".
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H.
AGUJAS DESCARTABLES CON CDIGO DE COLOR 2iversos e%es de para el reconocimiento del tama;o. Agu%a >ipodermica ,?@ Agu%a >ipodermica ,?@ ,A: Agu%a >ipodermica :,@ Agu%a >ipodermica :,@ ( , ,A:' Agu%a >ipodermica ::@ ( , Agu%a >ipodermica :B@ ( , ,AC' Agu%a >ipodermica :B@ ( , ,A: (, (, (, fcil color
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I.
LANCETAS Instrumento quir#rgico de corte en uno o ambos lados y punta agudsima.
J.
URODENSMETRO Se utili$a el densmetro o urodensmetro para determinar la densidad de la orina el cual tiene una graduacin de , --- a , -D-.
K.
CMARA DE NEWBAWER 1ambin se llama cmara cuentaglbulos o &emocitmetro. 4onsiste en una placa gruesa de cristal con forma de porta cuya porcin central est dividida en B e%es perpendiculares al e%e longitudinal de la cmara. 2e ellas las dos laterales se &allan
sobreelevadas -., mm con respecto a la central y en esta #ltima &ay grabado un retculo cuadrangular !cmara simple". La banda central puede estar a su ve$ subdividida en : semi bandas idnticas y separadas por un surco paralelo al e%e longitudinal de la cmara !cmaras dobles". En cada una de estas dos semibandas &ay grabado un retculo idntico que facilitar el recuento celular.
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6o todas las cmaras de recuento son iguales la ms utili$ada en &ematologa es la cmara de neubauer. Se trata de una cmara doble cuyos retculos !: al tratarse de una cmara doble" se denominan retculos de neubauer. cada retculo se divide en nueve cuadrados grandes de ,mm de lado. Siendo los cuadrados de las esquinas los destinados al recuento de leucocitos ! al e(istir stos en menor n#mero que &emates se precisa menor n#mero de lneas de referencia" a su ve$ dic&os cuadrados se subdividen en ,D cuadrados denominados medianos de -.:. mm de lado. El cuadrado central es el destinado al recuento de &emates y plaquetas. 2ic&o cuadrado se subdivide en :. cuadrados medianos !-.:mm de lado" y a su ve$ stos se subdividen en ,D cuadros denominados peque;os. +or tanto el n#mero total de cuadraditos constituyentes del cuadro central es de C-- cuadrados.
L.
LAMINA EXCAVADA +LA4A de vidrio con ,: anillos e(cavados de ,D mm. E +87 ,.F. mm.de profundidad para aglutinacin microscpica. La superficie de la +LA4A esta esmerilada.
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M.
KIT PARASITOLGICO SERIADO
N.
CONTOMETROS E(isten manuales simples y especiales de mesa. El contmetro para eritrocitos es un peque;o instrumento manual con una o dos llaves. El contmetro para el recuento diferencial de leucocitos tiene una llave para cada tipo de clula9 6uetrfilos !abastonados y segmentados" de leucocitos. eosinfilos basfilos linfocitros monocitos. >ay contmetros con . y ? llaves y determina D y G unidades diferentes
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O.
AGITADOR DE PIPETAS DE THOMA Es un aparato elctrico son dispositivos para fi%ar &ori$ontalmente las pipetas de 1&oma con muestras de sangre. Este aparato sirve para &omogeni$ar las muestras ya diluidas en las pipetas 1&oma para leucocitos y eritrocitos.
P.
HORNO La desecacin o des&idratacin a la que son sometidas algunas frutas frescas es una operacin destinada a reducir al m(imo su contenido de agua. Este tipo de &orno tambin se usa en la esterili$acin de material de laboratorio.
REFRIGERADOR 4ada laboratorio requiere amplios servicios de refrigeracin para el almacenamiento de los medios de cultivo sueros y reactivos perecederos. Se necesitan congeladores para el almacenamiento ms prolongado de sueros y para reactivos ms delicados.
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R. ESTUFA Ideal para aplicaciones como secado curado condiciones de
&orneado y cocimiento en donde se requiere un flu%o de aire suave en el laboratorio de industrias educacin bacteriologa y clinicos. E(ceptuado reacciones con vapores peligrosos. Alcan$an temperaturas de &asta :C- H4.
S.
CENTRIFUGA Es un aparato dise;ado para acelerar la separacin por gravedad de partculas slidas suspendidas en lquidos. La velocidad a la cual se sedimentaran las partculas en un lquido depende de varios factores. En una centrifuga la fuer$a gravitacional !@" es incrementada mecnicamente se mide el grado de incremento de la fuer$a gravitacional por comparacin de una fuer$a centrfuga relativa.
T.
ESPECTROFOTMETRO 3no de los instrumentos principales del laboratorio de biologa celular es el espectrofotmetro. Este instrumento tiene la capacidad de proyectar un &a$ de lu$ monocromtica !de un largo de onda particular" a travs de una muestra y medir la cantidad de lu$ que es absorbida por dic&a muestra. Esto le permite al fisilogo reali$ar dos funciones9
INTRODUCCION El ob%eto de cualquier traba%o analtico es proporcionar resultados de anlisis con un alto nivel de e(actitud reproducible y con un alto nivel de precisin de
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tal manera que se puedan sacar conclusiones y tomar decisiones con base en una informacin que tenga niveles aceptables de error y ambigIedad. 4omo se mencionar en la parte del desarrollo en la fase analtica se reali$an las mediciones y observaciones en las diversas reas que cubre el laboratorio. 4ada procedimiento de anlisis debe describir no slo las mediciones y observaciones implementadas en el laboratorio sino tambin la verificacin de las caractersticas de e%ecucin que pretende el autor del procedimiento o el fabricante del sistema analtico adems los procedimientos de control que corresponden a cada medicin y observacin deben describirse incluyendo los aspectos de control interno y evaluacin e(terna de la calidad. Los procedimientos y materiales de control varan seg#n la especialidad y en todos los casos en la fase analtica deben considerarse una medicin u observacin y un procedimiento control. 2e esta manera el rea de uroanlisis no est e(enta de 4ontrol de 4alidad. 2urante siglos las caractersticas visuales de la orina fueron utili$adas por los mdicos como piedra angular del diagnstico. 4on el progreso de la ciencia mdica estudios qumicos y microscpicos permiten a&ora una interpretacin mas detallada de la orina.
PRCTICA N! 0": #CARACTERSTICAS FSICAS DE LA ORINA$ 1. OBJETIVOS: 7econocer la correcta obtencin de las muestras para uroanlisis. 2escubrir con anticipacin las enfermedades renales y diabetes. 8bservar las caractersticas de un resultado de e(amen de uroanlisis. ". FUNDAMENTO TEORICO:
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La orina es el producto de desec&o lquido e(cretado por los ri;ones. Jsta se almacena en la ve%iga &asta el momento de ser vaciada a travs de la uretra. La orina esta constituida por agua y numerosos sustancias !creatinina cido #rico urea fosfatos sulfatos magnesio calcio sodio potasio cloro etc". Estas sustancias son e(cretadas a diario es decir cada :C &oras. 1ambin se puede encontrar glucosa cuerpos cetnicos protenas porfirinas y bilirrubina en diferentes procesos patolgicos. En el sedimento de la orina es decir en el residuo que se obtiene despus de centrifugar la orina se encuentran cilindros eritrocitos clulas epiteliales y leucocitos. UROANALISIS Los trminos )uroanlisis* )urianlisis* )anlisis de la orina* )citoqumico de orina* )parcial de orina* describen un perfil o grupo de pruebas tami$ con capacidad para detectar enfermedad renal del tracto urinario o sistmica. 2esde el punto de vista de los procedimientos mdicos la orina se &a descrito como una biopsia lquida obtenida de forma indolora y para muc&os la me%or &erramienta de diagnstico no invasiva de las que dispone el mdico. 1% FASE PRE&ANALTICA EN EL EXAMEN GENERAL DE ORINA ORECOLECCIN DE UNA MUESTRA DE ORINA
+ara el correcto diagnstico es de gran importancia una buena muestra. E(isten muestras de orina tomadas como primera matinal en sta los elementos se encuentran en mayor concentracin. Se deben desec&ar las primeras gotas tomar el volumen siguiente y descartar la parte final. En la mu%er se deben separar los labios en el momento de la miccin evitando en esta forma agregarle contaminacin vaginal. +ara estudios bacteriolgicos !e%emplo urocultivo" la orina se recoge en un frasco estril desec&ando el primer c&orro y guardando la porcin de la mitad para el cultivo. En los ni;os que no controlan esfnter se utili$a un recolector peditrico el que se ad&iere a sus genitales y donde la orina se va depositando lentamente. Este mtodo si bien resulta #til presenta varios inconvenientes siendo el principal la alta contaminacin de la muestra.
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3na muestra de orina debe anali$arse lo mas rpido posible. Si esto no es posible debe guardarse en refrigeracin &asta el momento de su procesamiento. 4uando se de%a alg#n tiempo se inicia la descomposicin de la muestra por la presencia de bacterias9 se degrada la urea se produce amoniaco y se incrementa el p> que desintegra los cilindros y si e(iste glucosuria esta desaparece por usarse la glucosa como alimento de las bacterias. 0a que el control de calidad en la seccin de anlisis de orina !o en cualquier otra seccin del laboratorio" es una integracin de muc&os factores se describe primeramente para esta fase lo siguiente9 ,. Las muestras de orina se toman siguiendo instrucciones estrictas. :. Los recipientes adems de estar muy limpios deben cumplir con las siguientes condiciones9
Ser de plstico transl#cido y desec&able y no volverse a utili$ar. La tapa debe cerrar &ermticamente de tal manera que el contenido no se derrame independientemente de la posicin del recipiente. En todo estudio microbiolgico el recipiente debe &aberse esterili$ado previamente. El dise;o del recipiente debe permitir que la etiqueta quede pegada a#n en condiciones de refrigeracin o de congelacin. Es importante pegar la etiqueta en el recipiente no en la tapa para evitar equivocaciones por cambios de tapas.
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B A
E
T'() *+ (,+-./) +0 (,1+/+-. A. Lvese las manos con agua y %abn durante B- segundos. Abra el paquete que contiene las toallitas desec&ables que la enfermera le dio y pngalas en un lugar limpio y seco cercano a usted. B. 2estape el frasco para recoger la muestra y coloque la tapa con el lado plano &acia aba%o. 6o toque el interior del recipiente o de la tapa. C. Sintese en el inodoro lo ms &acia atrs que pueda. Separe los labios vaginales con una mano y mantenga los pliegues separados. D. 3sando las toallitas limpie bien la $ona entre los labios y alrededor de la uretra vaya de adelante &acia atrs. 3se una toallita nueva en cada pase. E. 8rine una peque;a cantidad de lquido en el inodoro. 2espus de pasar , o : segundos coloque el frasco deba%o del flu%o urinario y reco%a apro(imadamente , on$a de orina !B- mL" en el recipiente. 6o de%e que el frasco toque la piel en ning#n momento.
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B A
C
T'() Abra *+ (,+-./) el paquete +0 2'(3/+- . A. que contiene las
D
Lvese toallitas
lasmanos con agua y %abn durante B- segundos. desec&ables que la enfermera le di y pngalas en un lugar limpio y seco cercano a usted. B. 2estape el frasco para recoger la muestra y coloque la tapa con el lado plano &acia aba%o. 6o toque el interior del recipiente o de la tapa. C. +represe para orinar !si no est circuncidado deslice el prepucio &acia atrs". 3sando una toallita limpie la cabe$a del pene empe$ando por la abertura uretral y contin#e en direccin a usted como muestra la ilustracin. 4uando termine bote la toallita usada. D. 8rine una peque;a cantidad de lquido en el inodoro. 2espus de pasar , o : segundos reco%a apro(imadamente , on$a de orina !B- mL" en el recipiente.
2) FASE ANALTICA EN EL EXAMEN GENERAL DE ORINA. El anlisis de orina de rutina comprende el e(amen de9 las caractersticas fsicas9 color aspecto y densidad' las caractersticas qumicas incluyendo el p> el contenido de protenas glucosa cetonas sangre oculta nitritos leucocitos bilirrubina urobilingeno etc' y las estructuras microscpicas presentes en el sedimento.
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EXAMEN FSICO
48L87 R'1' ) 4)-.)5' R'1' ) 67/6,/) +A18L8@I4AS +orfobilina +orfobilingeno 3roporfirina C)-.)5' ) 0+8/' Kcido &omogentsico Kcido pL&idro(ipir#vico Milirrubina Nenol Oelanina Oeta&emoglobina Oioglobina +orfirinas A9,: ) ;+/*+ 4ompuestos de &ierro 4loroquina >idroquinona Levodopa Oetronida$ol 6itrofurantona Puinina 7esorcinol Miliverdina Infeccin por pseudomonas Aciflavina Amitriptilina A$ul de Evans A$ul de metileno A$ur A 4omple%o de vitamina M 4erosota 68 +A18L8@I4AS
2urante siglos las caractersticas visuales de la orina fueron utili$adas por los mdicos como piedra angular del diagnstico. 4on el progreso de la ciencia mdica estudios qumicos y microscpicos permiten a&ora una interpretacin mas detallada de la orina. A% ASPECTO La orina normal &abitualmente es clara pero puede tornarse turbia por precipitacin de partculas de fosfato amorfo en orinas alcalinas o urato amorfo en orinas cidas. El fosfato amorfo constituye un precipitado blanco que se disuelve cuando se agrega un cido. El urato amorfo con frecuencia posee un color rosado por los pigmentos y se disuelve al calentar la muestra.La orina puede ser turbia por la presencia de leucocitos o de clulas epiteliales y esto puede confirmarse mediante el e(amen microscpico del sedimento. Las bacterias pueden causar turbide$ en especial si la muestra queda en el recipiente a temperatura ambiente. El moco puede dar a la orina un aspecto a&umado o turbio. La grasa y el quilo dan un color lec&oso. la presencia prolongada de cualquier olor inusual y fuerte en la orina de un lactante debe &acerse una investigacin bioqumica completa.
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B% COLOR La orina presenta una amplia gama de colores por lo cual est determinado por su concentracin. El color puede variar de un amarillo plido a un mbar oscuro seg#n la concentracin de los pigmentos urocrmicos y en menor medida la urobilina y de la uroeritrina. 4uanto ms pigmento tenga mayor ser la intensidad del color sin embargo e(isten muc&os factores que pueden alterar el color normal de la orina incluyendo medicaciones y dietas as como diversos productos qumicos que pueden estar presentes en situaciones patolgicas. En el cuadro se presentan algunas de las sustancias que pueden influir en el color de la orina. La orina normal tiene un color mbar!amarillo claro" caracterstico. El color de laorina depende de los urocromos que normalmentese encuentran all presentes comoporfirinas bilirrubina y uroeritrina. Es importanteaclarar que un color diferente al normalno necesariamente indica enfermedadpues esta situacin puede presentarse por algunas drogas o alimentos.
C% OLOR El olor normal de la orina es Qsui generisR se describe como urinoide este olor puede ser ms fuerte en muestras concentradas sin que esto implique infeccin. En la tabla se resumen algunas de las variaciones ms significativas del olor de la orina. V)/<)4<'0+- *+ <(6'/.)04<) 4:=0<4) +0 +: ':'/ *+ :) '/<0) En el e(amen fsico tambin se considera el p> y la densidad parmetros que son medidos con cintas para orinas.
D% P2 Es el refle%o de la acide$ de la orina. El p> normal va de ... L D... Influyendo el rgimen diettico de cada paciente. Este se determina utili$ando una cinta lectora de p> la que se sumerge en una muestra de orina por dos o tres segundos y luego se compara el color obtenido con una carta patrn de colores. La prueba se basa en la combinacin detres indicadores9 el ro%o de metilo el a$ul debromotimol y la fenolftalena que reaccionancon los iones de &idrgeno
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presentesen la muestra de orina. Las reacciones producencambios cromticos que van del naran%aal verde amarillo y al a$ul que el bacterilogomediante una tabla de comparacinpuede leer o el lector de tirillas detectarpara determinar el p> de la orina. Antes deinterpretar el p> de la orina vale la penarecordar que los ri;ones normales producenorina con p> de C D a ? - usualmente stese encuentra alrededor de . . a D ..La orinase torna ms alcalina despus de las comidas'debido a la secrecin de cido por lamucosa gstrica su p> es mas ba%o en estadosde ayuno. Las protenas causan disminucindel p> y los ctricos lo aumentan.Adems en los ni;os usualmente es alcalina relacionado con el consumo de lec&e. Enla figura se esquemati$a el principio sobreel cual se basa la prueba.
F<8,/). +rincipio de la determinacin del p> en orina. V):'/+- *+ /+>+/+04<): C ? a F C a lo largodel da y . . a D . en la orina de la primeramuestra de la ma;ana. 3na de las principalesfunciones del ri;n es mantener el equilibriocidoLbase del organismo de tal maneraque el p> sanguneo se mantenga estable.En trminos generales a e(cepcin de lospacientes con acidosis tubular renal el p>de la orina refle%a el p> srico. La incapacidadpara acidificar la orina a un p> menorde ... a pesar de un ayuno prolongado y dela administracin de una carga de cido esconsiderado como el sello caracterstico de laacidosis tubular renal. En la acidosis tubularrenal tipo I !distal" el p> srico es cido perola orina es alcalina esto es secundario a laincapacidad de secretar los protones en laorina. La acidosis tubular renal tipo II !pro(imal"se caracteri$a por una in&abilidad en laabsorcin del bicarbonato. Esta situacin producela orina alcalina inicialmente pero comola carga de filtracin de bicarbonato disminuye la orina se torna ms cida.
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U.<:<*)* 4:=0<4)9El p> de la orina es #til en la evaluacindel estado cidoL bsico de un determinadopaciente por e%emplo9+acientes p> S F debido a una acidosismetablica por ayuno prolongado acidosisdiabtica insuficiencia renal acidosis tubularrenal algunas sustancias qumicas y medicamentos!salicilatos etilenLglicol alco&ol biguanidas anfotericina espironolactona AI6ES" o a una acidosis respiratoria porretencin de 48: como puede ocurrir enpacientes con enfisema. +acientes con p> T F debido a alcalosis metablica por deficiencia grave de potasio ingestin e(cesiva de lcalis diurticos y vmito o a alcalosis respiratoria por &iperventilacin. El p> de la orina tambin es de utilidaden el diagnstico y mane%o de las infeccionesy clculos del tracto urinario. La orina alcalinaen un paciente con infeccin del tractourinario sugiere la presencia de un organismoque degrada la urea la cual puede estarasociada con cristales de fosfato de amonio ymagnesio que pueden formar clculos coraliformes.Los valores de p> reiteradamentealcalinos evidencian una infeccin del tracto urogenital a pesar de la disminucin de lasobrevida de los leucocitos. Los clculos decido #rico estn asociados con la acidificacinde la orina. R+-,:.)*'- >):-'- 6'-<.<;'- ' 0+8).<;'- 9 Si la muestra no se procesa en el tiempoadecuado la orina puede tornarse alcalinacomo consecuencia de la descomposicinbacteriana de la urea y en este caso la determinacindel p> carecera de valor diagnstico. L<(<.)4<'0+- *+ :) 6/,+3)9 El p> urinario puede modificarse seg#nlos &bitos nutricionales del individuo9 lasprotenas animales y las frutas cidas acidificanla orina y las dietas vegetarianas yricas en citrato la alcali$an. 4uandoel p> urinario se encuentra en e(tremos alto o ba%o puede &aber destruccin prematurade leucocitos y eritrocitos lo quee(plica la combinacin de resultados negativosen el sedimento con una reaccin positivapara alguna de estas clulas en la tirilla.
E% ESPUMA 6ormalmente la orina es blanca abundante y fuga$. Si la espuma es blanca abundante y persistente pueden sugerir presencia de protenas. 1ambin podemos encontrar orina de color verde escasa y fuga$ cuando &ay presencia de pigmentos biliares. F% GRAVEDAD ESPECIFICA ?PESO ESPECIFICO O DENSIDAD%
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La prueba mediante reaccin con un formadorde comple%os y deteccin de los protonesliberados mide las concentraciones inicasen orina. 4omo resultado de las reaccionesse producen cambios cromticos queel bacterilogo mediante una tabla de comparacinpuede leer o el lector de tirillas detectar.2ependiendo de la marca de tirillasutili$adas se determina o no los componentesno inicos de la orina tales como la glucosao la urea. V):'/+- *+ /+>+/+04<): ,.-,. a ,.-:.. Adiferencia de la osmolaridad que dependeslo del n#mero de partculas en la orina lagravedad especfica depende tanto del pesocomo del n#mero de ellas. Es as como sustanciasde alto peso molecular pueden aumentarsignificativamente la gravedad especficasin mayor modificacin de la osmolaridad.2esde el punto de vista de los valoresde la gravedad especfica de la orina &ay trminosque se definen con ella9 isostenuriacuando constantemente est en ,.-,e &ipostenuriacuando est por deba%o de estevalor' en tanto que el trmino de &iperstenuria no se utili$a. En estado normal la gravedadespecfica de la orina puede oscilarentre ,.--B y ,.-B- pero en la prctica unvalor menor de ,.-,indica una relativa &idrataciny un valor mayor de ,.-:- sugiere una relativa des&idratacin. @. MATERIALES:
+robetas 4intas de +& A. PROCEDIMIENTO:
3rodecmetro Ouestra de orina
8btencin de muestra
8bservacin del color y espuma.
aspecto
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3rodecmetro utili$ado para la medicin de densidad de la orina
Oedicin de p>
B. RESULTADOS:
En la muestra de orina estudiada observamos lo siguiente9
4A7A41E7US1I4A
ASPECTO COLOR
7ES3L1A28
Limpio y ligeramente turbio. Amarillo
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OLOR ESPUMA DENSIDAD PH TEMPERATURA :CV
Sui generis. Mlanca escasa y fuga$. ,.-,: F
C. CONCLUSIONES: & Es importante una correcta obtencin de la muestraas como su manipulacin conservacin y transporte.1ambin una buena metodologa de traba%o por parte del personal encargado asegura la fiabilidad de los datos obtenidos reduciendo al mnimo errores que conllevan el rec&a$o de las muestras. & El e(amen general de orina es una prueba #til como apoyo para el diagnostico temprano de enfermedades renales.
PRCTICA N! 0@:#EXAMEN UMICO DE ORINA$
1. OBJETIVOS: 4ontemplar el estudio cualitativo semicuantitativo o cuantitativo de algunas sustancias que pueden estar presentes en una muestra de orina y cuya presencia a niveles elevados es indicador de alguna patologa. L 7econocer los valores de protenas &emoglobina glucosa cetonas Milirrubina y urobilingeno que contiene la muestra de orina. ". FUNDAMENTO TERICO:
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El e(amen qumico &abitualmente sereali$a con tiras reactivas !Labsti( Oultisti(y otras" que contienen espacioscon diferentes reactivos especficos indicadoresy buffers !p> glucosa &emoglobina etc.".
DENSIDAD La densidad generalmente se obtiene mediante las tiras reactivas aunque la medicin con el densmetro !e(amen fsico" es un mtodo ms e(acto. Indica la cantidad relativa de solutos que contiene un volumen definido de orina. El F-W a ?-W de estos solutos corresponde a la urea. El rango del valor normal en pediatra es muy amplio9 ,.--BgAl a ,.-B- gAl. Los valores inferiores corresponden a los recin nacidos ylactantes que generalmente oscilan entre ,.--. gAl a ,.-,- gAl y para los ni;os mayores de ,.-,- gAl a ,.-:. gAl. Los valores de,.-:B indican una capacidad de concentracin urinaria normal. Los valores X ,.--. gAl corresponden a &ipostenuria que puede producirse por una alteracin de los mecanismos de concentracin tubular o t#bulointersticial como ocurre en la pielonefritis en las nefritis t#bulointersticiales tubulopatas diabetes inspida nefrognica o en la insuficiencia renal' otra situacincorresponde a la respuesta que ofrece el ri;n cuando tiene la capacidad de concentracin urinaria normal y e(iste sobrecarga&drica' en este caso e(iste poliuria e &ipostenuria !ingesta abundantede %ugos diluidos potomana o into(icacin &drica".
PH La orina es normalmente cida. Los valoresde p> oscilan entre . y D con un rangode C . a ? .. Los p> alcalinos son los quepresentan ms conflicto para su interpretacin.La causa ms com#n de &allar un p> YFes que la muestra no &a sido procesada inmediatamente &a permanecido a temperaturaambiente se &a producido el escapede 48: la urea se &a convertido en amonacoy &a aumentado el p>. Si se sospec&a acidosis tubular el p> sedebe determinar usando un electrodo especficoy al mismo tiempo obtener un estadocido base !EAM" sanguneo.La infeccin urinaria producida por Proteus!organismo productor de urea" se asociaa EAM normal y p> alcalino.La acidosis tubular distal se acompa;ade acidosis metablica y p> YF porque elmecanismo de acidificacin renal se encuentraalterado.
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PROTENAS En pediatra el valor normal de proteinuriaes S,-- mgAm:A:C &oras o tirareactiva Z -. Si el resultado es positivo ele(amen debe repetirse para confirmar eldiagnstico de proteinuria. En ni;os se puede &allar proteinuria nosignificativa !tra$as a [" en los estadosfebriles e(posicin prolongada al fro o alcalor secundaria a e%ercicio fsico u ortosttica. Es transitoria y no indica patologa.Los mismos valores pueden estar presentesen cistitis uretritis secreciones vaginaleso balanopostitis. Los valores que corresponden a proteinuriamasiva. El resultado positivo en la tira reactivadebe confirmarse con una proteinuria cuantitativade :C &oras o con el ndice proteinuriaAcreatininuria !+r3 mgAdlA4r3 mgAdl". Este ndice es #til en pediatra fundamentalmenteen los peque;os que no regulanesfnteres ya que se reali$a en una muestraaislada de orina. Su valor normal es X- :'valores mayores a B indican proteinuria enrango nefrtico !YC- mgAm:A&ora". En las enfermedades renales e(iste unperodo latente asociado principalmente a la&iperfiltracinglomerular y a otros factores Sin color o color amarillo claro 2iluida. 2iabetes inspida. Abundante ingesta de lquidos diluidos.1urbia Nosfatos amorfos uratos clulas bacterias contaminacin fecal.Lec&osa Lpidos !nefrosis" piuria. 4olor amarillo naran%a a marrn 4oncentrada pigmentos biliares nitrofuranos dipirona.4olor ro%o a marrn >ematuria &emoglobinuria mioglobinuria porfirina rifampicina teofilina ingesta de remolac&a. 4olorante !ingesta de golosinas".4olor marrn oscuro Oetronida$ol imipenem fenoles.4olor amarillo verdoso Milirrubina. 4olor a$ul verdoso +seudomonas. A$ul de metileno rivoflavina. 4lorofila !dentfricos".7osada Acido #rico !recin nacido". Interpretacin del anlisis de orina A comprometidos con la progresin a la insuficienciarenal crnica. En este perodo e(isteaumento de la e(crecin de alb#mina que nopuede ser detectada por los mtodos comunes. +or esta ra$n debe ser dosada comomicroalbuminuria. El valor normal es de B-\gAminuto. El dosa%e debe reali$arse en orinade :C &oras. Ser necesario investigarlaespecialmente en los pacientes que &ayansufrido sndrome urmico &emoltico con&ipertensin o con diabetes.
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La proteinuria puede ser la e(presinde una enfermedad renal como ocurre enlos sndromes nefrtico y nefrtico en lanefropata por reflu%o o en la insuficienciarenal. 8tras veces puede ser secundaria auna sobrecarga renal como ocurre en elmieloma o en la leucemia situaciones enlas cuales el aumento de las protenas filtradaspor el ri;n sobrepasa la capacidadde reabsorcin tubular. La b: microglobulina es una protenasrica de ba%o peso molecular que se filtpor el ri;n en un porcenta%e inferior al ,Wdel valor de su nivel plasmtico se reabsorbey metaboli$a en el t#bulo pro(imal' porlo tanto constituye un buen marcador dedisfuncin tubular si la concentracin urinariasupera los B.- \gAdl.
GLUCOSA El valor normal de la glucosa en orina esde,-- mgAdl !tira reactiva Z -". Su aparicinpuede deberse a dos factores9 ," disminucinde la reabsorcin tubular !tubulopatapro(imal" y :" niveles sanguneos que superanel umbral renal como la diabetesmellitus u otros estados &iperglucmicos.
CETONAS Las cetonas aparecen en la orina cuando e(iste un metabolismo anormal o disminuidode carbo&idratos por lo cual es muy com#n &allarlas durante el ayuno el e%ercicioprolongado o cuando e(isten vmitosreiterados.La #nica patologa en la cual la cetonuriatiene importancia prctica es la diabetesmellitus.
SANGRE La tira reactiva positiva indica tres posibilidades9 ," &ematuria :" &emoglobinuria oB" mioglobinuria. La observacin del sedimentoen la muestra de orina centrifugadaorientar el diagnstico. Si &ay eritrocitosestamos en presencia de &ematuria' en caso contrario deber reali$arse el diagnsticodiferencial entre &emoglobinuria y mioglobinuriapara el cual podr utili$arse cualquierade los mtodos que se enumeran acontinuacin9 ," se centrifuga una muestrade sangre y si el plasma es rosado
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e(iste&emlisis' por lo tanto en orina &ay &emoglobina!>b"' si el plasma es claro en orina &aymioglobina' :" agregando sulfato de amonio!: ? g" a . ml de orina centrifugada se espera. minutos y se filtra. La >b precipita y quedaen el papel' la mioglobina no precipita por lotanto pasa libremente a travs del filtro. La patologa asociada a mioglobinuriaes el da;o muscular severo que puede sercausado por convulsiones e%ercicio prolongado s&oc] elctrico politraumatismosseveros e &ipertermia maligna en especialsi e(iste una miopata pree(istente. La mioglobinaes liberada por los m#sculos y eslibremente filtrada por el ri;n.4uando la cantidad filtrada de >b omioglobina es importante puede desarrollarseinsuficiencia renal aguda por obstruccintubular.La &emoglobinuria es secundaria a crisis&emolticas de cualquier etiologa.
BILIRRUBINA La reaccin positiva para la bilirrubinaindica la presencia de enfermedades &epticas.La lectura de tra$as de bilirrubina essuficiente para reali$ar una investigacinen sangre con en$imas &epticas.
UROBILINGENO El urobilingeno est presente en orinacuando en la sangre &ay aumento de bilirrubinano con%ugada como ocurre en las anemias &emolticas o en la &epatitis grave aunque ya casi no se toma en cuentaporque el urobilingeno se o(ida rpidamentecon el aire.
LEUCOCITURIA Se detecta por la accin de la estearasacitoplasmtica leucocitaria que produce la&idrlisis del reactivo de la tira y cambia elcolor. +uede diagnosticarse un n#mero anormalde leucocitos con un rango de sensibilidad de F-WL?-W. En orinas muy alcalina e(iste &emlisis de leucocitos obtenindosefalsos positivos.
NITRITOS
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La en$ima reductasa bacteriana metaboli$alos nitratos urinarios en nitritos. Si laorina contiene un n#mero importante debacterias por este mtodo se podr detectarbacteriuria con una sensibilidad del .-W.Sin duda el e(amen microscpico es elme%or mtodo para diagnosticar leucocituriay bacteriuria.Falsos positivos y negativosde las tiras reactivas Los factores ms comunes que puedenalterar los resultados de las tiras reactivasson los siguientes9 valores e(tremos de p>y densidad urinarios o(idantes antibiticos cido ascrbico proteinuria antispticosy %abones.
@. MATERIALES: L L L L L 1ubos de ensayo Ouestra de orina Oec&ero Acido ntrico concentrado 7eactivo de Menedict L L L L L 6itropruciato de sodio .W >idr(ido de sodio .-W Acido actico glacial Lugol 1iras reactivas
A. EXPERIENCIAS: )% DETERMINACIN CUALITATIVA DE PROTENAS ?MDTODO DEL ANILLO DE HELLER% +rueba de laboratorio para la determinacin de proteinuria en la que la orina se coloca en capa sobre cido ntrico. La aparicin de un anillo de precipitado proteico en la interfase de los dos lquidos es un signo positivo. Este mtodo puede ser #til cuando slo se dispone de una cantidad peque;a de orina pero no es tan sensible como las dems pruebas de precipitacin. 1ambin es muy difcil semicuantificar los resultados.
PROCEDIMIENTO:
4olocar , ml de cido ntrico concentrado en el fondo de un tubo de ensayo. 4ubrir el cido con , ml de orina centrifugada pero cuidado que sta se deslice lentamente por al pared del tubo de este modo se forman dos capas de lquido.
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La formacin de un precipitado blanco en la unin de ambos lquidos al cabo de tres minutos indica la presencia de protena. +ude intentarse cuantificar la densidad del anillo formado.
7ES3L1A28S +8SI1I=8S NALS8S Esta prueba resulta afectada por los frmacos que interfieren las pruebas de calor y con cido.
4oncentraciones elevadas de cido #rico y de urea pueden dar resultados positivos falsos pero estos obstculos pueden salvar diluyendo la orina y repitiendo la prueba.
7ES3L1A28S 6E@A1I=8S NALS8S 4omo esta prueba es muy sensible las orinas diluidas pueden dar resultados negativos. El uso de rutina de cido ntrico concentrado en esta prueba puede constituir una desventa%a.
Elprocedimiento para la reaccin del anillo de 7obert es idntico al de la reaccin de >eller salvo que el reactivo para la primera esta formada por una parte de cido ntrico concentrado y . partes de sulfato de magnesio saturado.
SIGNIFICACIN CLNICA La orina de personas sanas no contiene protenas slo peque;as cantidades' normalmente el glomrulo evita el paso de estas de la sangre al filtrado glomerular. Alteraciones glomerulares causan el aumento de la permeabilidad de las protenas plasmticas lo que ocasiona la protein#ria que indica presencia de protenas en orina. La presencia persistente de protein#ria indica enfermedad renal. 4oncentraciones elevadas de protenas en liquido cefalorraqudeo !L47" pueden ser debidas a infecciones o a presin intracraneal elevada. El diagnostico clnico debe reali$arse teniendo en cuenta todos los datos clnicos y de laboratorio.
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B.& RESULTADOS: En la muestra estudiada se observ lo siguiente9
La formacin de un precipitado blanco en la unin de ambos lquidos lo que indica la presencia de protenas.
3% DETERMINACIN SEMICUANTITATIVA DE GLUCOSA ?MDTODO DE BENEDIT% El fundamento de esta reaccin radica en que en un medio alcalino el ion c#prico !otorgado por el sulfato c#prico" es capa$ de reducirse por efecto del grupo Alde&do del a$#car !4>8" a su forma de 4u [. Este nuevo ion se observa como un precipitado ro%o ladrillo correspondiente al (ido cuproso !4u:8". El medio alcalino facilita que el a$#car est de forma lineal puesto que el a$#car en solucin forma un anillo de piransico o furansico. 3na ve$ que el a$#car est lineal su grupo alde&do puede reaccionar con el ion c#prico en solucin. En estos ensayos es posible observar que la fructosa !una cetopentosa" es capa$ de dar positivo. Esto ocurre por las condiciones en que se reali$a la prueba9 en un medio alcalino caliente esta ceto&e(osa se tautomeri$a !pasando por un intermediario enlico" a glucosa !que es capa$ de reducir al ion c#prico". Los disacridos como la sacarosa !enlace ^!, _ :"8" y la tre&alosa !enlace ^!,_,"8" no dan positivo puesto que sus 8> anomricos estn siendo utili$ados en el enlace glucosdico.
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En resumen se &abla de a$#cares reductores cuando tienen su 8> anomrico libre y stos son los que dan positivo en la prueba de Menedict.
PROCEDIMIENTO: En un tubo de ensayo colocar :.. ml de reactivo de Menedic agregar I= gotas de orina me$clar bien luego llevar a ba;o mara de agua &irviente por . minutos posteriormente de%ar enfriar espontneamente.
CC COLOR APARIENCI A
-.A$ul !L"
GLUCOSA 8E 100(: -.:. -.. ,.=erde =erde cA Amarillo pp a =erde amarillo oliva !`" 
