CTEDRA DE BIOQUMICA FACULTAD DE MEDICINA U.N.N.E.

Principios de Endocrinologa
Hormonas - Receptores

2008
Brandan, Nora
Profesora Titular. Ctedra de Bioqumica. Facultad de Medicina. UNNE.

Llanos, Cristina
Jefa de Trabajos Prcticos. Ctedra de Bioqumica. Facultad de Medicina. UNNE.

Mio, Claudia
Jefa de Trabajos Prcticos. Ctedra de Bioqumica. Facultad de Medicina. UNNE.

Ragazzoli, Maximiliano A.
Ayudante Alumno por Concurso. Ctedra de Bioqumica. Facultad de Medicina. UNNE.

Ruiz Daz, Daniel A. N.

Ayudante Alumno por Concurso. Ctedra de Bioqumica. Facultad de Medicina. UNNE.

http://med.unne.edu.ar/catedras/bioquimica/

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INTRODUCCIN A LA ENDOCRINOLOGA.............................................................................................. 1 HORMONAS............................................................................................................................................ 2

NATURALEZA QUIMICA ................................................................................................................... 2 PROPIEDADES GENERALES .............................................................................................................. 3 TIPOS DE ACCIONES PROMOVIDAS POR HORMONAS .................................................................... 3 SECRECIN HORMONAL .................................................................................................................. 4 CIRCULACIN Y TRANSPORTE HORMONAL .................................................................................... 5 REGULACION DE LA SECRECIN HORMONAL ................................................................................. 5 RECEPTORES ........................................................................................................................................... 6 CLASIFICACIN ................................................................................................................................ 7 Receptores Nucleares (RN)......................................................................................................... 7 Receptores de Membrana ........................................................................................................ 12 RECEPTOR DE TIROSINA QUINASA......................................................................................... 14 RECEPTOR SERINA QUINASA................................................................................................. 15 RECEPTOR GUANILATO CICLASA ............................................................................................ 16 RECEPTORES ACOPLADOS A PROTENA G (GPCR) ................................................................. 17 RECEPTORES DE CITOQUINAS (receptores asociados a TQ extrnseca) ................................ 19 SISTEMAS DE TRANSDUCCIN DE SEALES CORRIENTE ABAJO ...................................................... 20 Sistema Ras-quinasa y MAP-quinasa ....................................................................................... 20 Sistema de la Protena-Quinasa A ............................................................................................ 21 Sistema de la Protena-Quinasa C............................................................................................. 22 Sistema de la Protena-Quinasa G. ........................................................................................... 23 COMUNICACIN CRUZADA (CROSS-TALK) ....................................................................................... 24

BIBLIOGRAFA ....................................................................................................................................... 24

INTRODUCCIN A LA ENDOCRINOLOGA
La especialidad de la endocrinologa abarca el estudio de las glndulas y de las hormonas que stas producen, en sus diferentes aspectos fisiolgicos y patolgicos. El trmino endcrino fue acuado por Starling para marcar el contraste entre las hormonas de secrecin interna (endcrinas) y las de secrecin externa (excrinas) o secretadas hacia una luz como por ejemplo las del aparato digestivo. Su nombre proviene del griego, y significa ciencia de las secreciones internas. El sistema endcrino (SE) comprende el conjunto de rganos y tejidos que forman hormonas. El sistema endcrino y nervioso regulan casi todas las actividades metablicas y homeostticas del organismo, determinan el ritmo del crecimiento y desarrollo, influyen sobre muchas formas de conducta y controlan la reproduccin. Un tercer sistema que media la comunicacin intercelular es el sistema inmunolgico, ste se halla sujeto a una modulacin nerviosa y hormonal, y las citoquinas producidas por los linfocitos pueden modificar la funcin endcrina. Glndula endcrina es todo rgano o tejido con cierta individualidad anatmica que secreta una o varias hormonas. El trmino hormona proviene tambin del griego y significa "poner en movimiento" y describe las acciones dinmicas de estas sustancias circulantes que despiertan respuestas celulares y regulan los procesos fisiolgicos a travs de mecanismos de retroalimentacin o feedback.

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No existe relacin anatmica entre las diversas glndulas endcrinas, pero entre algunas existen ciertas relaciones hormonales de interdependencia, control o servomecanismos, por lo que hablamos de ejes endocrinos, por ej.: eje sistema nervioso central (SNC)-hipotlamo-hipfisisgnada. La histologa de las glndulas endcrinas es muy diversa pero, por lo general, poseen caractersticas parecidas.

HORMONAS
Las hormonas son autnticos mensajeros qumicos, y se considera a cualquier sustancia de un organismo que acte como una seal capaz de producir un cambio a nivel celular. Las hormonas endcrinas se originan en una glndula y realizan un trayecto considerable a travs de la sangre para alcanzar la clula blanco (target cell). Las hormonas funcionan como un sistema mayor de comunicacin entre diferentes rganos y tejidos (comunicacin intercelular), permitiendo a las clulas, responder en forma coordinada a los cambios en los ambientes interno y externo. En las ltimas dcadas, la consideracin de hormona como mensajero qumico de accin distante ha sobrepasado su concepto clsico, surgiendo las siguientes definiciones: Endocrinia: proceso por el cual una hormona es liberada desde un rgano endcrino, vertida a la circulacin y alcanza luego la clula blanco, a distancia de su origen. Paracrinia: proceso por el cual la hormona, luego de ser liberada, ejerce su accin en clulas o tejidos vecinos. Autocrinia: proceso por el cual la hormona, post-liberacin acta como ligando de receptores a nivel de la misma clula que le dio origen. Neuroendocrinia: Sntesis hormonal a nivel neuronal con posterior accin a distancia va sangunea. Neurocrinia: sntesis hormonal a nivel neuronal con posterior accin parcrina. Neurotransmisin: Sealizacin intercelular a nivel neuronal. Ferocrinia: sntesis hormonal con posterior liberacin al medio ambiente y efecto sobre organismos ajenos.

Dado que los factores parcrinos y las hormonas pueden compartir la maquinaria de sealizacin, no debe sorprender que las hormonas puedan, en algunos escenarios, actuar como factores parcrinos.

NATURALEZA QUIMICA
De acuerdo a sto pueden clasificarse las hormonas en 5 categoras: 1. Estereoides: derivan del colesterol. A este grupo pertenecen los glucocorticoides, aldosterona y andrgenos de la corteza suprarrenal, estrgeno y progesterona del ovario, testosterona del testculo, y 1,25-dihidroxi-D3. (metabolito activo de la vitamina D3). Debido a su carcter poco polar, estas hormonas atraviesan con facilidad (difusin simple) las membranas celulares. 2. Derivados de aminocidos: adrenalina o epinefrina y noradrenalina o norepinefrina (catecolaminas) de la mdula suprarrenal, tiroxina y triiodotironina de tiroides son derivados de tirosina y la melatonina de la glndula pineal es producida a partir de triptfano. No penetran en las clulas blanco.

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3. Derivados de cidos grasos: prostaglandinas, tromboxanos y leucotrienos, llamados genricamente eicosanoides, se originan de cidos grasos poliinsaturados. El cido araquidnico es el precursor ms importante. Sus acciones primarias son de tipo autcrino o parcrino. 4. Pptidos: en esta categora se incluyen los factores reguladores y las hormonas antidiurtica y oxitocina del hipotlamo, adrenocorticotrofina y hormona melanocito estimulante, glucagn del pncreas, gastrina, secretina, pancreozimina y otras hormonas del tracto gastrointestinal y calcitonina de la glndula tiroides. 5. Protenas: hormonas paratiroidea, insulina, prolactina, foliculoestimulante, luteinizante, hormona de crecimiento y tirotrfica de adenohipfisis son de naturaleza proteica. Todas estas poseen un peso molecular igual o superior a 6000 Daltons o un nmero de residuos aminoacdicos igual o superior a 50 aminocidos.

PROPIEDADES GENERALES
Actividad: actan en concentraciones muy pequeas dado que una nfima cantidad es capaz de generar respuestas notablemente intensas. Los niveles de hormonas circulantes en sangre suelen ser muy bajos. Vida media: es el tiempo en que la concentracin de la hormona desciende a la mitad. Debido a su actividad biolgica las hormonas deben ser degradadas y convertidas en productos inactivos, pues su acumulacin en el organismo tiene efectos perniciosos. El tiempo promedio de duracin de las hormonas en sangre vara de una a otra y puede oscilar desde segundos hasta das. Ser ms corta cuanto ms rpidamente sea metabolizada y ms prolongada si su metabolismo es lento. Velocidad y ritmo de secrecin: la secrecin hormonal se produce de forma pulstil, con perodos de secrecin (pulsos) y otros de reposo. Frecuentemente responden a estmulos del ambiente y del medio interno. Por ejemplo la secrecin de insulina es promovida por el incremento de la glucosa en sangre. Especificidad: una de las propiedades ms notables de las hormonas es su gran especificidad de accin. Una hormona determinada solo acta sobre las clulas que constituyen su blanco, objetivo o diana. La hormona es vertida a la circulacin general y alcanza a todos los tejidos, sin embargo, su accin se ejerce nicamente a nivel de un nmero limitado de clulas en las cuales provoca un tipo definido de respuesta. Esta propiedad indica la existencia de un mecanismo por el cual la hormona reconoce a sus clulas efectoras y las distingue de las dems.

TIPOS DE ACCIONES PROMOVIDAS POR HORMONAS

La funcin hormonal se desarrolla en 4 mbitos generales: reproduccin; crecimiento y desarrollo; mantenimiento del medio interno; y produccin, utilizacin y almacenamiento de energa. Los efectos de las hormonas son complejos. Una sola hormona puede tener efectos distintos en diferentes tejidos, e inclusive en un mismo tejido en momentos distintos de la vida, y del mismo modo, ciertos procesos biolgicos son regidos por una nica hormona, mientras que otros requieren interacciones complejas entre varias de ellas. Por ejemplo la testosterona promueve la formacin de eritropoyetina y sta a su vez estimula la eritropoyesis y origina las diferencias que existen en los niveles de hemoglobina entre los hombres y las mujeres.

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Los distintos procesos metablicos que se hallan bajo regulacin endcrina son influidos por ms de una hormona, un ejemplo clsico es el mantenimiento de los niveles de glucosa dentro de determinados lmites: lmites: lo suficientemente altos como para prevenir la disfuncin del sistema nervioso central, pero lo bastante bajos bajo como para evitar los efectos nocivos. Esta regulacin (control) no se podra cumplir con exactitud por influencia de una sola hormona por potente te que fuera. Por lo tanto, podemos decir que la presencia de estos complejos mecanismos de control tiene 2 implicancias fundamentales: primero, permite un extraordinario grado de regulacin fina, como en el caso de la glucosa sangunea, que puede mantenerse mantenerse dentro de lmites normales en condiciones nutricionales variadas; segundo, pueden proveer un amplio margen de seguridad, en la medida en que otros mecanismos alternativos entren en accin cuando la hormona de la serie es deficitaria (sistema de autoproteccin). autopro Las acciones hormonales se pueden agrupar en 3 categoras relacionadas y que no son excluyentes entre s y se asocian con: Mecanismo de trasporte en membranas celulares: algunas hormonas modifican el flujo de metabolitos o iones a travs de membranas membranas por su accin sobre sistemas de trasporte o canales inicos. Modificacin de la actividad enzimtica: se ejerce principalmente a nivel de enzimas regulatorias cuya actividad es aumentada o disminuida por modificacin covalente. Modificacin sobre la sntesis de protenas: muchas hormonas modulan la sntesis de enzimas y otras protenas, actan predominantemente a nivel del ADN nuclear, regulando el proceso de transcripcin gnica. Esta accin requiere ms tiempo para manifestarse que la anterior y tiene tiene efectos ms sostenidos.

SECRECIN HORMONAL
La secrecin hormonal no tiene lugar de forma continua y uniforme, sino pulstil, con perodos de secrecin (pulsos) y otros de reposo. En los pulsos se distingue un pico, un nadir, , una amplitud y una frecuencia frecuen (Fig. 1). Las caractersticas de los pulsos pueden variar a lo largo del da o en diversas circunstancias fisiolgicas o patolgicas. Cuando la secrecin vara ostensiblemente a lo largo del da se habla de ritmo circadiano, que puede presentar su punto mximo en uno u otro momento del da (Fig. 2). Cuando el perodo es mayor a 28 horas, se habla de ritmo infradiano y cuando los ciclos ocurren varias veces en un da, con perodos menores a 19 horas se habla de ritmo ultradiano. Conocer que las hormonas nas tienen distintos ritmos de secrecin es importante para realizar una correcta determinacin hormonal dado que estos ritmos determinarn el momento

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adecuado para la toma de muestra. No obstante, debemos aclarar que algunas hormonas cuyos ritmos son pulstiles, tiles, muchas veces es necesario hacer pruebas de estimulacin o inhibicin dado que una determinacin aislada no aporta ningn dato clnico de valor.

CIRCULACIN Y TRANSPORTE HORMONAL

Por lo general, las hormonas peptdicas pueden circular libremente por po el plasma o dbilmente unidas a la albmina, mientras que las hormonas esteroideas, por ser hidrofbicas, necesitan protenas transportadoras que facilitan su circulacin en el medio acuoso que es el plasma sanguneo. Algunas hormonas peptdicas utilizan tambin protenas transportadoras, as la GH (grow hormone) se une a la GH-BP GH (GH-binding protein). El transporte tambin impide su pronta metabolizacin o su rpida filtracin renal aumentando as su vida media plasmtica (t1/2). Generalmente una pequea fraccin de la hormona circula en forma libre, siendo sta la autntica hormona funcionalmente activa.

REGULACION DE LA SECRECIN HORMONAL

Regulacin por el SNC-SE SE: una multitud de factores influyen en el SE a travs fundamentalmente del SNC. Estas Es as relaciones se establecen principalmente entre el SNC y el hipotlamo, pero tambin mediante el aporte sanguneo a las glndulas endcrinas mediante la regulacin nerviosa de la presin arterial. Otra forma de regulacin se realiza a travs s de la inervacin directa de diversas glndulas endcrinas, ya que las terminaciones nerviosas liberan neurotransmisores que influyen modulando las mismas; estimulando o inhibiendo a las secreciones endcrinas. Regulacin por hormonas trficas: Las hormonas trficas son aquellas que controlan el crecimiento y funcin de las glndulas endcrinas perifricas relacionadas, estas hormonas trficas son controladas a su vez por las propias hormonas cuya secrecin regulan (Fig. 3). Este mecanismo es conocido nocido como sistemas de servomecanismo, retrocontrol, retroalimentacin o Feed Back; ack; y puede clasificarse en: Directo: entre glndula perifrica (ej. glndula tiroides) e hipfisis. Indirecto o largo: con la glndula perifrica y el hipotlamo. Corto: rto: entre hormonas hipofisiarias e hipotalmicas Ultracorto: entre hormonas hipotalmicas y el propio hipotlamo Hipotlamo-SNC. Habitualmente, los servomecanismos suelen ser negativos. Cuando una hormona perifrica aumenta, umenta, induce la disminucin de la hormona hipotalmica, y sta de la hipofisiaria, provocando una menor produccin de la hormona perifrica regulando el sistema. Lo contrario ocurre si sta disminuye. En ocasiones, el servomecanismo es positivo, como cuando ndo el estradiol aumenta al final del

Figura 3. Mecanismo de Feed Back Bac

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perodo folicular e induce un estmulo de la secrecin de la LH que provocar la ovulacin. As sucede con los diferentes sistemas hipotlamo-hipofisario-glndula perifrica. Regulacin por metabolitos: Existen hormonas cuya regulacin principal tiene lugar por vas diferentes a los servomecanismos mencionados. As sucede con las hormonas que intervienen en el metabolismo del Ca2+: parathormona (PTH), calcitonina y vitamina D. Tambin ocurre con la insulina y glucagn respecto a la glucemia. Para que la respuesta endcrina sea efectiva es necesario adecuar el proceso de sntesis proteica a las necesidades del organismo. Este acoplamiento depender, entre otras cosas, de la cantidad de hormona almacenada por la clula, y de la intensidad y frecuencia de la demanda. Por ejemplo, la regulacin de la sntesis de la proinsulina tiene lugar fundamentalmente a nivel de la traduccin del ARNm de insulina, que en unos minutos se incrementa cinco o diez veces, cuando aumentan los niveles de glucosa en sangre. Sin embargo, la liberacin de PTH permanece prcticamente constante a lo largo del tiempo, reflejando la necesidad del organismo de mantener constantes los niveles de Ca2+, dentro de un intervalo muy estrecho. Existen mecanismos de regulacin en cada uno transmisin de la informacin gentica. de los pasos que participan en la

El objetivo de la regulacin es que las hormonas disponibles en cada momento sean las adecuadas a cada estmulo a los que se enfrenta el organismo. La regulacin fisiolgica de la expresin de los genes que codifican las hormonas est mediada por dos grandes grupos de macromolculas: las protenas susceptibles de fosforilacin y los receptores de hormonas esteroides, que son los intermediarios de las hormonas peptdicas y de las hormonas esteroides, respectivamente.

RECEPTORES
Son macromolculas o asociaciones macromoleculares, responsables del reconocimiento de la hormona, ya que proveen el sitio de fijacin para la misma, de manera selectiva en virtud de una estrecha adaptacin conformacional o complementariedad estructural. La especificidad de las hormonas y su capacidad para identificar sus clulas efectoras es posible gracias a la presencia de receptores. No solo es necesario que la hormona sea reconocida sino que la combinacin de la hormona con el receptor tiene que iniciar una serie de acontecimientos bioqumicos (transduccin de seal) que conduzcan a una accin biolgica. La hormona (H) y su receptor (R) forman un complejo (H-R), que presenta las siguientes caractersticas: 1. Adaptacin inducida: la fijacin de la hormona al receptor implica una adaptacin estructural recproca de ambas molculas, similar a lo que sucede a la unin sustrato enzima.

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2. Saturabilidad: el nmero de receptores existentes en una clula es limitado; si se representa en un sistema de coordenadas la cantidad de hormona fijada a receptores en una porcin determinada de tejido en funcin de la concentracin de hormona, se obtiene una curva hiperblica. 3. Reversibilidad. La unin hormona-receptor es reversible. 4. Afinidad. Es la capacidad de fijacin de un ligando al receptor, que es determinada por las propiedades moleculares del receptor.

Los tejidos diana o blanco son aquellos que contienen los receptores especficos y resultan afectados por una hormona. El carcter y naturaleza de la respuesta dependen de la especializacin funcional de la clula blanco. A veces una misma hormona desencadena respuestas diferentes en clulas distintas. Por ejemplo, la adrenalina produce activacin de la glucogenlisis en msculo esqueltico y estimula la liplisis en adipocitos. Se denominan agonistas a los compuestos de estructura semejante a la del agente fisiolgico (hormona, neurotransmisor) con capacidad para unirse al receptor y provocar una respuesta. Esta puede ser de igual, mayor, o menor intensidad que la inducida por el agente natural. Los antagonistas se fijan al receptor, pero no producen respuesta, comportndose como inhibidores competitivos. No es necesario que la totalidad de los receptores de la clula est unida a hormona para obtener una respuesta mxima. Comnmente esto ocurre cuando alrededor del 20% de los receptores est ocupado por hormona. El resto corresponde a los llamados receptores de reserva. La membrana no es un dispositivo rgido sino que dotado de un alto grado de fluidez, gracias a la cual las protenas asociadas a la membrana tienen libertad para desplazarse en todas direcciones, por ello se habla de receptores mviles. El nmero de receptores de un tipo determinado en la superficie de una clula puede variar entre 10.000 y 20.000. La cantidad de receptores intracelulares es generalmente mucho menor.

CLASIFICACIN
Algunos receptores estn localizados dentro de la clula y stos funcionan como factores de transcripcin (por ejemplo receptores para hormonas esteroides), actuando a nivel nuclear regulando la expresin gnica. Otros receptores estn localizados sobre la superficie celular y funcionan primariamente para transportar los ligandos dentro de la clula por un proceso llamado endocitosis mediada por receptor, que tambin actan a nivel nuclear regulando la expresin gnica. Tambin en la superficie celular se localizan receptores que desencadenan caminos de sealizacin intracelular (transduccin de seal) mediante la formacin de segundos mensajeros.

Receptores Nucleares (RN)

Son receptores intracelulares que funcionan en el ncleo de la clula blanco para regular la expresin gnica (independientemente de su ubicacin original que puede ser nuclear, citoplasmtica o incluso mitocondrial, como es el caso de un subtipo de receptores de hormonas tiroideas).

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CARACTERISTICAS GENERALES Todos los ligandos de receptores nucleares son pequeos, lipoflicos siendo posible su entrada a la clula a travs de un mecanismo pasivo, pero en algunos casos se necesita una protena transportadora de membrana, como sucede en el transporte de hormonas tiroideas al interior de la clula. SUBCLASE DE LIGANDOS DE RN Hormonas clsicas: las clsicas hormonas que utilizan receptores nucleares son las hormonas tiroideas y esteroideas. Estas ltimas incluyen al cortisol, aldosterona, estradiol, progesterona, y testosterona. Vitaminas: las vitaminas A y D (liposolubles) son importantes molculas de sealizacin que funcionan como ligandos de receptores nucleares. La vitamina A es activada a cido trans-retinoico, que tiene alta afinidad por los Receptores del Acido Retinoico (RARs). Este ligando es convertido a su ismero 9-cis, el cual es ligando para otro receptor nuclear llamado Receptor Retinoide X (RXR). Estos retinoides son esenciales para el desarrollo de mltiples rganos y tejidos. Metabolitos intermedios y productos: ciertos cidos grasos poliinsaturados sirven de ligando, activando a receptores denominados Receptores Activados para la Proliferacin de los Peroxisomas (PPAR). Es posible que estos receptores funcionen como integradores de la concentracin de un cierto nmero de cidos grasos. En la biosntesis del colesterol los intermediarios oxiesteroles son ligandos de otro receptor nuclear denominado Receptor Heptico X (LXR). La falta del mismo trae aparejado la incapacidad para metabolizar el colesterol. Receptores hurfanos: las hormonas y vitaminas recin descriptas aportan a la funcin de slo una fraccin del total de receptores nucleares. El resto han sido designados como receptores hurfanos, porque sus ligandos no son conocidos. Est claro que muchos de estos receptores se requieren para la vida y el desarrollo de rganos especficos, desde el ncleo cerebral hasta las glndulas endcrinas. Es probable que en un futuro se descubran funciones adicionales como receptores para ligandos fisiolgicos, farmacolgicos y ambientales. ESTRUCTURA Los receptores nucleares son protenas, en algunos casos hay mltiples genes que codifican para mltiples receptores. Adems hay mltiples receptores para una misma hormona que pueden derivar de un solo gen, ya sea por utilizacin de un promotor alternativo o por splicing (corte y empalme) alternativo. Finalmente, algunos receptores pueden mediar la seal de ms de una hormona, por ejemplo, el receptor de mineralocorticoides (aldosterona) tiene igual afinidad por el cortisol y probablemente funciona como receptor de glucocorticoides en algunos tejidos, como el cerebro.

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Los receptores nucleares, que poseen una serie comn de dominios funcionales denominados de la A a la F (Fig. 4). Esta representacin lineal es til para describir y comparar rar los receptores pero no muestra el rol de los plegamientos proteicos y de la estructura terciaria que median la funcin de varios receptores. Dominio A/B: posee una funcin activadora independiente del ligando, lo que le confiere una cierta autonoma, esta sta regin se denomina tambin AF-1 AF 1 (activation function-1). function Dominio C: es el dominio de unin al ADN, contiene una estructura denominada dedos de zinc, consiste en una cadena polipeptdica que contiene cuatro cistenas unidas a un tomo de zinc y contiene la informacin necesaria para el reconocimiento de las secuencias especficas en el ADN. ADN Los os receptores nucleares poseen dos dedos de zinc, zinc uno es determinante de la especificidad espe de unin, y el otro es determinante determ de la funcionalidad. Tambin aqu se encuentra un subdominio denominado caja P que se une a secuencias hexamricas de nucletidos del ADN llamados half-sites, half que es otro de los factores determinantes de la especificidad de la unin. Por ltimo, este dominio contiene parte de la seal de localizacin nuclear (NLS; (NLS nuclear localization signal). Dominio D: representa la regin bisagra. Contiene adems el resto de la NLS. Dominio E: representa el dominio de unin al ligando (LBD; (LBD ligand binding domain), as como la funcin activadora de la transcripcin dependiente de ligando AF-2 AF (activation function-2), 2), y una funcin represora. Dominio F: es un centro de interaccin con protenas coactivadoras.

El transporte del RN al ncleo depende Figura 4. de la NLS Estructura receptores nucleares situada entre los dominios C y D. La mayora de los RN residen siempre en el ncleo en presencia o en ausencia del ligando. Un caso diferente es el receptor de glucocorticoides glucocorticoide (GR) que en ausencia de la hormona se asocia a un conjunto de chaperonas formando ormando un complejo en el citosol. citosol MECANISMO DE SEALIZACION DE LOS RN Los receptores nucleares son protenas multifuncionales que transducen las seales de sus respectivos ligandos. Todos estos receptores actan facilitando o dificultando la trascripcin de los genes, algunos residen fundamentalmente en el citoplasma, mientras que otros estn siempre en el ncleo. Se hallan formando complejos con protenas de shock trmico (heat shock protein; Hsp90, Hsp70, del tipo de las chaperonas) que los mantienen en estado inactivo.

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Primero y principal, el ligando y el receptor nuclear deben alcanzar el ncleo. El receptor debe unirse a su ligando con alta afinidad. Debido a que la funcin mayor del receptor es regular selectivamente la transcripcin gnica, debe reconocer y ligar a los os elementos del promotor en genes diana apropiados. Un mecanismo discriminatorio es la dimerizacin del receptor eceptor con una segunda copia de s mismo o con otro receptor nuclear (homo o heterodimerizacin respectivamente). El receptor unido al ADN debe trabajar traba tambin en el contexto de la cromatina para sealizar la maquinaria basal de transcripcin para incrementar o disminuir la transcripcin del gen diana. Secuencia cuencia del mecanismo de accin (Fig. 5):

Figura 5. Mecanismo sealizacin RN

Ingreso de la hormona al interior celular. Unin de la hormona a su receptor especfico (en citosol o ncleo), con desplazamiento de las Hsp: H formacin del complejo Hormona-Receptor Receptor (H-R). Cambio conformacional del receptor con formacin de dmeros (homo o heterodmeros). Traslocacin del complejo H-R H al ncleo eo (si antes se hallaba en citosol). Unin del complejo H-R a secuencias especficas del ADN denominadas Elementos de Respuesta a Hormona (HRE ( ; hormon receptor element), generalmente ubicados corrientes arriba del promotor del gen blanco. Interaccin del l complejo H-R H con factores de transcripcin unidos al sitio promotor. Esta unin influye sobre el complejo de iniciacin para ubicar correctamente a la ARN Polimerasa II. Iniciacin o represin de la trascripcin del gen blanco. REGULACIN DE LA TRANSCRIPCIN PCIN DE GENES 1) El reclutamiento de enzimas que modifican la estructura de la cromatina: las ms importantes son las Acetil-transfererasas de Histonas (HATs, (HAT Histone Acetyl Transferase), ya que la acetilacin de las histonas abre y desenreda la estructura estructur cromatnica. 2) Interacciones con cofactores de la transcripcin: que son un grupo de protenas; las cuales pueden ser de accin positiva denominndose coactivadores o de accin negativa llamndose entonces correpresores. 3) Modificacin de la actividad de la ARN polimerasa II: a travs del reclutamiento de los Factores de Transcripcin Generales (GTF), inducido por la unin del complejo HH R al gen diana. En este caso, la unin del ligando al receptor incrementa la trascripcin de genes. La trascripcin de genes es mediado por un complejo de factores (factores de trascripcin basal) que en ltima instancia regulan la actividad de la ARN polimerasa II (enzima encargada de la sntesis de ARN mensajero). Esta enzima utiliza un grupo de GTF, incluidos factores de la transcripcin basal.

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Figura 6. Reclutamiento de coactivadores

Activacin de la expresin gnica dependiente del ligando: unin al ADN y reclutamiento de coactivadores. (Fig. 6) El complejo H-R R se encuentra unido al ADN activndose la transcripcin transcripcin del gen diana. Para esta activacin se reclutan protenas coactivadoras (CBP y p300 especialmente). Las protenas coactivadoras poseen actividad acetilasa, por lo que su reclutamiento por los receptores activados origina la acetilacin de las histonas histonas en los residuos de lisina y facilita la transcripcin gnica, al hacer que la cromatina adopte una conformacin desenrollada. En este modelo, entonces, el mecanismo es la activacin de las enzimas HATs, responsables de dicha acetilacin. Represin de la expresin gnica independiente del ligando: unin al ADN y reclutamiento de correpresores. (Fig. 7) Algunos RN estn unidos al ADN en ausencia de la hormona reprimiendo negativamente la transcripcin del gen diana. Esta represin no solo anula al gen diana, sino que tambin amplifica la magnitud de la posterior activacin del gen al unirse la hormona. El RN no unido a la hormona recluta a cofactores de accin negativa, llamados correpresores hacia el gen diana, como ser el NN CoR (Correpresor del Receptor Nuclear) y el SMRT (Mediador para silenciar a los receptores de retinoides y de hormona tiroidea; Silencing lencing Mediator for Retinoid and Tiroid receptors) principalmente. El mecanismo de accin es la inhibicin de la actividad de la enzima HAT, mediante el reclutamiento de enzimas Desacetilasas de Histonas (HDACs), llevando a la compactacin de la cromatina. Regulacin negativa de la expresin gnica dependiente del ligando (Transrepresin): unin al ADN y reclutamiento de correpresores o coactivadoras. Es la represin de la transcripcin en presencia de hormona ligada a su receptor. Uno de los mecanismos incluye la unin del RN a sitios del ADN que revierten la activacin llamados elementos de respuesta negativa (NRE; Negative Response Elements), en este caso el complejo H-R H recluta correpresores y HDACs a estos sitios.

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Figura 7. Reclutamiento de correpresores rrepresores

Receptores de Membrana
Son receptores localizados en la superficie celular que funcionan ya sea para transportar sus ligandos al interior celular (endocitosis mediada por receptor) o bien gatillando vas o cascadas de sealizacin intracelular, intracelular desde su ubicacin en la membrana plasmtica. REGULACIN DE LA SENSIBILIDAD IBILIDAD A HORMONA: Se realiza por diversos mecanismos: Sobre el nmero de R: la a cantidad de receptores para un determinado determina ligando vara en distintos estados fisiolgicos. Generalmente la concentracin de hormona presente sente regula la cantidad de receptores especficos especfi en las clulas blanco. Un aumento sostenido del nivel de hormona provoca disminucin del nmero de receptores disponibles o su inactivacin. Este fenmeno fenme es denominado regulacin "hacia abajo" ("down regulation") o "desensibilizacin". El fenmeno contrario, aumento del nmero de receptores en la membrana externa, regulacin "hacia arriba" o "up regulation", se produce cuando do hay h deficiencia del ligando especfico. Las variaciones en nmero de los receptores se producen ya sea por exocitosis o bien endocitosis mediada por receptor; en tanto que la activacin o inactivacin puede mediarse por modificaciones covalentes (como fosforilaciones rilaciones o desfosforilaciones) que alteran su conformacin. La disminucin absoluta o relativa de la actividad actividad de receptores puede obedecer a causas patolgicas, lgicas, ya sean alteraciones genticas (mutaciones) que afectan la protena del receptor o de algunos algunos de los eslabones del sistema de transduccin de seales ms all del receptor, o a procesos autoinmunes autoinmunes en los cuales se producen anticuerpos contra un receptor determinado.

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Modificaciones post-traduccionales del R: que aumentan o disminuyen la eficacia de la unin. Modificaciones de los mecanismos post R: que modifican la va final comn y la respuesta celular.

La transduccin de seal es el conjunto de procesos o etapas que ocurren de forma encadenada por el que una clula convierte una determinada seal o estmulo exterior, en otra seal o respuesta especfica. Este mecanismo es detonado cuando algn ligando se une a su receptor presente en la membrana plasmtica de la clula producindose la activacin del receptor que es transmitida a modo de cascada corriente abajo. En el proceso de transduccin de seal; mediante una cadena de pasos (cascada de sealizacin), estn implicados cada vez ms un nmero mayor de sustancias y enzimas (segundos mensajeros y protenas seales) cuyo resultado es la amplificacin de la seal, es decir, que un pequeo estmulo provoca una gran respuesta celular. La seal de transduccin que se desarrolla corriente abajo en el interior celular es llevada a cabo en gran parte por molculas denominadas segundos mensajeros, siendo el primer mensajero, la propia hormona que desencaden este proceso. Estas molculas se caracterizan por poseer un bajo peso molecular y por su facilidad para variar en un rango de concentraciones amplio, dependiendo de la presencia o no de seales que estimulen su presencia, hasta inducir un cambio fisiolgico en un efector, como, por ejemplo, una quinasa o un factor de transcripcin. Los segundos mensajeros ms usuales son: el 3',5'AMP cclico (AMPc), 3',5'-GMP cclico (GMPc), 1,2-diacilglicerol (DAG) e inositol 1,4,5trifosfato (IP3), el calcio (Ca2+) y diversos fosfolpidos denominados fosfoinostidos, presentes en las membranas celulares. Las protenas seales son protenas que se encuentran en el citosol de la clula y se encargan de llevar la informacin desde la superficie de la clula hasta el ncleo. Una protena seal activa a otra, y as sucesivamente hasta llegar a activar protenas reguladoras de genes en el ncleo (llamadas factores de transcripcin) y as provocar la transcripcin del ADN a ARNm, con la consiguiente sntesis de protenas. La activacin de la protena seal es mediante fosforilacin en distintos aminocidos, generalmente tirosina, serina o treonina (protena-quinasa). Una protena-quinasa es una enzima que modifica a otras protenas (sustratos), mediante fosforilacin, y por tanto activndolas o desactivndolas. Unas dependen de AMPc, otras de GMPc, de DAG, de Ca2+ y de receptores tirosina quinasa. Mediante las protenas quinasas se produce modificaciones covalentes de enzimas y otras protenas de variada naturaleza y funciones. La fosforilacin juega un papel importante en la regulacin de sistemas de transporte de membranas, en la multiplicacin celular, en la modulacin de la actividad de la sntesis de nucletidos y protenas. Por lo tanto, las protenas quinasas ocupan un lugar central en la transduccin de seal: sirven de puente entre un segundo mensajero, y las respuestas celulares al estmulo (activacin o desactivacin de factores de transcripcin, por ejemplo). Del mismo modo las protenas fosfatasas son reconocidas como componentes esenciales en los sistemas de transduccin de seales; a travs de su accin de desfosforilacin ocupan un lugar de igual importancia que el de las fosforilaciones en procesos de activacin-inactivacin covalente de protenas.

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Las protenas seales ms destacadas son algunas MAP Quinasas: ERK1/2, p38 y JNK. Las MAP quinasas son protenas quinasa activadas por mitgenos. Un mitgeno es un inductor de proliferacin y diferenciacin celular, como por ejemplo la insulina, o factores de crecimiento como IGF-1, y otras protenas seal como AMP quinasa, Akt, GSK3 y p70S6K. Estas MAP quinasas, son activadas por una gran variedad de seales (insulina, factores de crecimiento, factores de stress ambiental) y transmiten estas seales fosforilando numerosos substratos, obtenindose como resultante varios efectos biolgicos. Algunos de ellos son induccin de proliferacin, diferenciacin celular, hipertrofia, inflamacin, apoptosis, metabolismo de carbohidratos y transcripcin de genes. La activacin de estas protenas, es mediada por receptores del tipo tirosina quinasa, como el receptor de insulina. CLASIFICACIN DE LOS RECEPTORES DE MEMBRANA Los receptores de superficie celular pueden ser clasificados en: 123456Canales Inicos Dependientes de Ligando. Receptor Tirosina-Quinasa. Receptor Serina-Treonina-Quinasa. Receptor Guanilato Ciclasa. Receptor Acoplado a Protena G (GPCR; G Protein Coupled Receptor) Receptores de Citoquinas.

Los receptores de la clases 1 a 4 son molculas bifuncionales que unen hormona y sirven a su vez como efectores al actuar como canales inicos o enzimas. En cambio, los receptores 5 y 6 ligan hormona pero deben reclutar otra molcula para catalizar su funcin.

RECEPTOR DE TIROSINA QUINASA

Estructuralmente estn constituidos por una cadena polipeptdica cuyo extremo N-terminal posee el sitio de unin del ligando; sigue una hlice transmembrana y la porcin citoslica correspondiente al extremo C-terminal donde se encuentra el sitio activo de funcin cataltica de Tirosin-Quinasa (TQ). El receptor de insulina, que pertenece a esta clasificacin, es algo ms complejo; est formado por dos heterodmeros y unidos entre s por puentes disulfuro. La fijacin del ligando al dominio extracelular de estos receptores, produce un cambio conformacional que induce dimerizacin (excepto en el de insulina, formado por dos heterodmeros) y activacin de la TQ del dominio citoslico. Se produce fosforilacin cruzada de una cadena a otra en varios restos de tirosina de este dominio; se habla de autofosforilacin del receptor. Como resultado de estas fosforilaciones, aumenta la actividad de la quinasa y se crean sitios a los cuales pueden unirse otras protenas seales que actan como eslabones en la cadena de transmisin de la seal corriente abajo, como lo son las que constituyen los sistema Ras y MAP Quinasa (ver ms adelante). Existen por lo menos dos mecanismos donde la fosforilacin de tirosina regula la funcin proteica. a) Induciendo un cambio conformacional en la protena. b) Regulando las interacciones protena-protena (mecanismo indirecto).

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Algunos de los sustratos proteicos fosforilados por este receptor son: a) IRS (sustrato del receptor de insulina, insulina Insulin Receptor Substrate) 1,2,3 y 4. b) Dominios SH2 (consisten en una secuencia secuencia de aproximadamente 100 aminocidos que ligan residuos de tirosina. Los dominios SH2 varan con respecto a su ligando especfico, por ejemplo: PI3K (fosfatidil-inositol (fosfatidil inositol 3 quinasa) y Grb-2 Grb (Growth factors binding 2, ligando 2 de factores de crecimiento). crecimiento) c) Dominios SH3 (que consisten en una secuencia de aproximadamente 50 aminocidos que ligan secuencias ricas en prolina). Por lo tanto, a modo de ejemplo, las IRS sirven como protenas de anclaje, muelle o docking que en general ligan dominios SH2, y entre entre estos, a PI3K y Grb-2. Grb Esta unin desencadena mltiples vas de sealizacin corriente abajo, de las cuales algunas de las ms importantes son la cascada Ras, JAK-STAT, MEK y MAP-quinasa, encadenadas entre s, partiendo corrientes abajo a partir de Ras. Estas cascadas contribuyen a la habilidad de las tirosina-quinasas quinasas para promover el crecimiento celular y regular la expresin de varios genes. Los ligandos que utilizan este tipo de receptor son los siguientes: Factor de crecimiento epidrmico (EGF), Factor tor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGF), Factor de crecimiento recimiento derivado de gliomas (GDGF), Factor de crecimiento similar a insulina I y II (IGF I e IGF II) y la Insulina. Para la activacin de la funcin TQ de estos receptores es importante el papel pap que juega la dimerizacin. Hay tres mecanismos: 1) Por ligando dimrico: cada subunidad del ligando se une a un R, por un lado y por otro lado a otra subunidad del mismo ligando. o. En total se ligan dos R. (Fig (Fig. 8; izquierda).

Figura 8. Receptores Tirosina Quinasa. Activacin por Dimerizacin.

2) Dos sitios de unin al R dentro de un mismo ligando: ligando: El ligando posee en su estructura dos sitios de unin al R, cada uno de los cuales se une a un R. Ej Tyr-quinasa y GH. (Fig. (Fig 8; derecha).

3) Dmero de R preexistente: El R en este caso ya est dimerizado, an en ausencia de ligando, pero dispuesto y orientado de tal forma que no puede activarse antes de unin con el ligando, ej R de insulina. (Fig. 9).

Figura 9. Receptor de Insulina

RECEPTOR SERINA QUINASA

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Figura 10. Receptores Serina-Treonina Quinasa. Mecanismo de Accin.

Estructuralmente estos receptores poseen un dominio N N-terminal extracelular, donde se une el ligando; un simple dominio transmembrana y un dominio C-terminal C intracelular que es la que posee actividad quinasa. Estos receptores fosforilan residuos de d serina y treonina en sus protenas sustrato. Hay 2 tipos de receptores serina quinasa: tipo I y tipo II.

El receptor de serina quinasa media las acciones biolgicas de la familia de ligandos del TGF (transforming growth factor)factor) y de la familia de citoquinas MIS/BMP (Mllerian Inhibitory Substance /Bone Morphogenic Protein). Estos receptores contienen actividad serina-treonina serina treonina quinasa en su dominio citoplasmtico y forman heterodmeros os para ser activados. El receptor tipo II tiene una actividad serina treonina quinasa constitutiva, no modulada por la unin a su ligando. Sin embargo, la unin del ligando al receptor tipo II es reconocida por el receptor tipo I, unindose a aqul para formar un complejo. A continuacin el receptor tipo I es fosforilado por el II. Esta fosforilacin activa la protena-quinasa protena del receptor I, lo que conduce a la fosforilacin de los factores de transcripcin Smad. Estas protenas fosforiladas se unen a otro ot miembro de la familia Smad y como resultado, se produce su translocacin al ncleo para finalmente regular la expresin gnica. (Fig. (Fig 10).

RECEPTOR GUANILATO CICLASA

Estos receptores estn constituidos por una cadena polipeptdica con un dominio extracelular al cual se une el ligando, una hlice transmembrana y un dominio citoslico con actividad enzimtica. As, una sola cadena polipeptdica proporciona el sitio de unin de hormona, el dominio transmembrana y la actividad guanilato ciclasa. ciclasa (Fig. 11). Esta enzima cataliza la formacin de GMPc a partir de GTP. La fijacin del ligando estimula la ciclasa y genera en el citosol GMPc que acta como segundo mensajero. A esta sta clase de receptores pertenecen los de pptidos natriurticos atriales. Existe un tipo de guanilato ciclasa solubles (que no son receptores de membrana) citoslicas que son activadas por pequeas molculas que atraviesan raviesan las membranas como

Figura 11. Receptor Guanilato Ciclasa

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el xido ntrico (NO) y el monxido de carbono (CO).

RECEPTORES ACOPLADOS A PROTENA G (GPCR)

Es una numerosa familia de receptores de superficie, que presentan siete hlice transmembranas. El extremo N-terminal, extracelular, posee varias cadenas de oligosacridos; la hormona se une a un nicho formado por los extremos externos de varias de las hlices transmembrana; el extremo C-terminal se encuentra en el lado citoslico e interaccionan, cuando el receptor es activado por la hormona, con protenas G ubicadas en la cara interna de la membrana plasmtica. Las Protenas G, as llamadas por su propiedad de unirse a nucletidos de guanina (GDP o GTP), juegan un papel esencial en sistemas de transduccin de seales. Sirven de nexo entre los receptores y protenas efectoras dentro de la clula. Las protenas G constan de tres tipos de subunidades: , y . Este heterotrmero est anclado a la cara interna de la membrana plasmtica, a travs de uniones covalentes con los fosfolpidos. La subunidad es el componente de fijacin del nucletido de guanina, las subunidades forman un conjunto estrechamente asociado que funciona como una unidad (dmero ).

Figura 12. Activacin de GPCR

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La subunidad fija con alta afinidad nucletidos de guanina (GDP o GTP). Mientras est unido a GDP se mantiene firmemente asociada al dmero para integrar el heterotrmero que es inactivo. La unin de la hormona al receptor de membrana produce en ste un cambio conformacional que determina su interaccin con la protena G inactiva, se produce entonces la liberacin del GDP e ingreso del GTP a la subunidad . El complejo -GTP se disocia del dmero y adquiere actividad moduladora sobre la protena efectora (ej: adenilato ciclasa, fosfolipasas) que le sigue en el sistema de seales, en donde en general se forman segundos mensajeros. Adems, la subunidad tiene actividad GTPasa; es decir que es capaz de hidrolizar el GTP fijado para dar GDP + Pi libre. Este complejo subunidad -GDP vuelve a fijarse al dmero y reconstituye el heterotrmero inactivo. (Fig. 12). En realidad existen varias formas de la subunidad , dos de ellas designadas s (estimuladora, stimulating) y i (inhibidora), ambas actan con la adenilato ciclasa, y una tercera, denominada q, involucrada en la accin de la Fosfolipasa C, que mencionaremos ms adelante. Mecanismo de Activacin de los GPCR Paso 1: La hormona se une al receptor en la membrana. Paso 2: se produce un cambio conformacional en el receptor que deja expuesto un sitio para la fijacin del dmero . Paso 3: la subunidad intercambia el GDP unido por GTP Paso 4: la disociacin de GDP provoca la separacin de la subunidad del dmero . Paso 5: en la superficie del complejo subunidad GTP se origina un sitio de unin para la interaccin con la Protena Efectora que sigue en el sistema de transmisin de seal. Paso 6: el GTP se hidroliza a GDP por la actividad GTPasa de la subunidad , devolvindola a su conformacin original y permitiendo de nuevo su interaccin con el dmero retornando el sistema al estado no estimulado en espera de otro ciclo de actividad. En el caso en que una protena G inhibidora se acople al receptor, los fenmenos son similares, pero la inhibicin de la actividad de la protena efectora puede producirse aqu por interaccin directa de la subunidad inhibidora con la misma, o alternativamente la subunidad inhibidora puede interaccionar directamente con la subunidad estimuladora del otro lado y evitar as indirectamente la estimulacin de la actividad de la protena efectora. Las arrestinas son una familia de protenas que son importantes para regular la transduccin de seal dentro de la clula. Son parte de un mecanismo de 2 pasos para regular la actividad de GPCR. En respuesta a un estimulo, el GPCR activa a una protena G, para desactivar esta respuesta o adaptarse a un estimulo constante, los receptores activados necesitan ser bloqueados. El primer paso consiste en una fosforilacin por una clase de serina-treonina quinasa llamada GRK (G protein Receptor Kinase). Esta fosforilacin marca especficamente al receptor activado para que pueda ligar a la arrestina. Una vez que la arrestina ha sido ligada el receptor es incapaz de continuar transduciendo la seal.

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Diversos experimentos imentos han permitido identificar al menos 15 genes distintos que codifican las subunidades en mamferos. Tambin parece existir diversidad entre las formas y de mamferos. Se han descripto al menos 4 ADNc de subunidades y probablemente un nmero igual en las .

RECEPTORES TORES DE CITOQUINAS (receptores asociados a TQ extrnseca)

Son semejantes en estructura a los receptores TQ descriptos, sin embargo estos se componen generalmente de 2 o ms m subunidades, con un mximo de 6. Aunque no presentan en su dominio inio citoslico la funcin cataltica, sino que tienen la capacidad para asociarse a protenas TQ citoplasmticas. Hay ms de 25 ligandos conocidos incluyendo: hormona de crecimiento, prolactina, leptina, eritropoyetina, la mayora de las interleuquinas e interferones , y . Cuando el ligando se fija al dominio extracelular, se produce dimerizacin y la porcin citoslica interacciona con TQ citoplasmticas, , que pertenecen a una familia denominada Familia Janus de Tirosinas Quinasas (JAKs; (JAKs Just Another Kinase). Existen xisten 4 miembros miemb conocidos: JAK1, JAK2, JAK3 y Tyk2. En la mayora de los casos las JAKs se asocian al receptor incrementando su actividad, su afinidad por el ligando o ambas. Un vez activadas las JAKs estas se fosforilan a si mismas y al receptor en mltiples tirosinas tirosina constituyendo el complejo Receptor de Citoquina-JAK, Citoquina esto genera sitios de unin para diversas protenas seales que contienen dominios de unin a fosfotirosinas como por ejemplo los Figura 13. Receptor de citoquinas. SH2. Las protenas seales reclutadas al complejo receptor de citoquinas-JAK citoquina JAK son generalmente las mismas que para la va de la tirosina quinasa antes descripta (IRS, Grb2; que llevan a la activacin de la cascada RasRas MAP quinasa, fosfolipasa C e IP3-K). IP3 Sin embargo existe una familia de protenas seales importantes para la funcin f de citoquinas, denominadas STATs (Signal Transducers and Activators of Trascription), estas STATs son factores de trascripcin citoplasmticos latentes que se unen a travs de sus dominios SH2 a una o ms fosfotirosinas del Complejo Receptor Citoquina-JAK Citoqui activado. Luego, las STATs se autofosforilan y se disocian de este complejo y se dimerizan con otras STATs, traslocndose al ncleo y unindose a elementos del promotor dentro de los genes de respuesta a citoquinas. (Fig. (Fig 13).

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Las protenas SOCSs (Suppressors Of Cytokine-Signaling) Cytokine Signaling) juegan un rol importante en la terminacin de la seal de las citoquinas a travs de un bucle de feed-back feed back negativo. Son generalmente sintetizadas en respuesta a las citoquinas, y se unen a travs de su dominio SH2 a las fosfotirosinas del complejos receptor citoquina-JAK citoquina JAK inhibiendo la posterior sealizacin.

SISTEMAS DE TRANSDUCCIN DE SEALES CORRIENTE ABAJO

Sistema Ras-quinasa y MAP-quinasa quinasa
Esta va de transduccin de seales pone en accin una cascada de protenas quinasas muy importantes en la regulacin de numerosas funciones celulares. Todos sus componentes son protenas, no se generan segundos mensajeros de molcula pequea.
Figura 14. Sistema RAS Quinasa y MAP Quinasa.

Las protenas Ras forman una familia de unos 50 miembros. Son protenas pequeas que unen nucletidos de guanina, integrantes de sistema de transmisin de seales relacionado con la modulacin de la multiplicacin y desarrollo celular. A esta familia pertenecen tambin n las protenas ARF y Rab, vinculadas a la regulacin del trnsito vesicular de protenas, las Ran, relacionadas con la importacin de protenas en el ncleo y las Rho, involucradas en la organizacin del citoesqueleto. En realidad, existen diversas vas activadas por Ras, una de ellas comienza con la activacin por Ras-GTP GTP de la protena Raf (MAPKKK), la que a su vez fosforila y estimula a MEK (MAPKK), esta ltima a restos serina-treonina ser y tambin tirosina, activando a miembros de la familia de quinasa reguladas por seales extracelulares, denominadas ERK (MAPK).Estas quinasas fosforilan una variedad de protenas blanco que incluyen otras protenas quinasa y factores de transcripcin en el ncleo, modulando la actividad gnica. (Fig. (Fig 14).

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Sistema de la Protena-Quina asa A

Este sistema es gatillado a partir de la unin de un ligando a un GPCR, donde el complejo subunidad -GTP GTP formado acta sobre la protena efectora llamada Adenilato Ciclasa, activndola. Esta ultima es una enzima, protena integral de membrana; membrana; el segmento citoslico de esta enzima posee el sitio cataltico. La adenilato ciclasa activada cataliza la formacin de AMPc a partir del ATP y eleva la concentracin de ese segundo mensajero en la clula. La formacin de AMPc en la clula normalmente normalment activa la Protena-Quinasa Quinasa A, lo que se denomina ruta de la protena-quinasa protena A. El mecanismo de activacin es el siguiente: la protena-quinasa A en ausencia de AMPc se encuentra inactiva, formando un tetrmero constituido por 2 subunidades catalticas (C) y 2 subunidades reguladoras (R). Cuando aumenta el nivel de AMPc en la clula, dos molculas de nucletido se fijan a sitios de unin especficos cos en cada una de las subunidades reguladoras, se produce un cambio conformacional que las obliga a desprenderse de las catalticas. Las subunidades catalticas de protena-quinasa quinasa A liberadas son capaces de transferir fosfatos desde el ATP para fosforilar protenas nas y producir un efecto celular. La fosforilacin de enzimas (modificacin covalente) promovida por la protena-quinasa A produce, estimulacin o inhibicin y constituye un importante mecanismo regulador del funcionamiento de vas metablicas. Tambin mbin intervienen como modulador de la actividad de sistemas de transporte de membrana. A nivel nuclear puede influir sobre la transcripcin; en efecto, existen secuencias especficas en el ADN, llamadas CRE (cAMP response elements). La protenaquinasa A tambin fosforila a una u protena llamada CREB (cAMP Response Element Binding Protein) que entonces se une a las mencionadas secuencias CRE y activa la transcripcin de genes. Fig. 15.

Figura 15. Sistema Protena-Quinasa Protena A. Regulacin de Transcripcin Gnica.

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Sistema de la Protena-Quinasa C
Este sistema es tambin gatillado a partir de la unin de un ligando a un GPCR, donde el complejo subunidad q-GTP formado acta sobre la protena efectora llamada Fosfolipasa C, activndola. Esta ltima es una enzima, protena integral de membrana; el segmento citoslico de esta enzima posee el sitio cataltico. En realidad, se distinguen 2 tipos principales de Fosfolipasa C. Una forma y una forma . La forma se asocia a receptores de TQ, y no ser tratada aqu. La forma cataliza la hidrlisis de fosfatidilinositol 4,5-bifosfato (PIP2) para formar dos segundos mensajeros, diacilglicerol (DAG) e inositol-1,4,5-trisfosfato (IP3). El IP3 difunde hacia el citoplasma y se une a un receptor de IP3 en la membrana de un depsito de Ca2+, que puede estar separado del retculo endoplasmtico, o bien formar parte del mismo. Esta unin da como resultado la liberacin de Ca2+, que contribuye a un gran incremento del Ca2+ citoplasmtico. Los niveles de Ca2+ citoslicos pueden modificarse tanto por ingreso del Ca2+ extracelular como por la liberacin desde su deposito. Por otro lado, el IP3 se metaboliza por eliminacin progresiva de grupos fosfato hasta formar inositol que se combina con cido fosfatdico (PA) para formar fosfatidilinositol (PI) en la membrana celular. Este ltimo es fosforilado doblemente por una quinasa para formar PIP2, que bajo estmulo hormonal ya puede entrar en otra ronda de hidrlisis y formacin de segundos mensajeros (DAG e IP3). Si el receptor todava est ocupado por una hormona, pueden producirse varias rondas del ciclo antes de que se disocie el complejo hormonareceptor. Por ltimo, es importante destacar que no todo el IP3 es desfosforilado durante la estimulacin hormonal. Parte del IP3 es fosforilado mediante la IP3 quinasa para dar lugar a inositol 1,3,4,5-tetrafosfato (IP4), que puede mediar en algunas de las respuestas hormonales ms lentas o prolongadas (a travs de la activacin de cascadas de quinasas/fosfatasas) con la modificacin final de la expresin gnica. El DAG activa una importante protena-quinasa de serina/treonina denominada ProtenaQuinasa C por su dependencia de Ca2+. El aumento inicial del Ca2+ citoplasmtico inducido por IP3 parece alterar de algn modo la protena-quinasa C, de modo que sta es translocada desde el citoplasma hacia la cara citoplasmtica de la membrana plasmtica. Una vez translocada, es activada por una combinacin de Ca2+, DAG y el fosfolpido negativo de la membrana, fosfatidilserina. Tras su activacin, la protena-quinasa C fosforila protenas especficas en el citosol o, en ocasiones, en la membrana plasmtica. (Fig. 16). Estas protenas fosforiladas llevan a cabo funciones especficas que no pueden realizar en el estado desfosforilado. Por ejemplo, una protena fosforilada podra migrar hasta el ncleo e incrementar la mitosis y el crecimiento. Adems, el sitema IP3-DAG puede modificar la actividad de una familia de enzimas llamadas genricamente fosfodiesterasas, de las cuales es ms abundante la fosfodiesterasa 1, cuya activacin permite la destruccin de molculas de AMPc. De este modo, hormonas cuyo segundo mensajero es el IP3 pueden reducir los niveles de AMPc en forma indirecta.El descubrimiento del regulador de la actividad de la fosfodiesterasa dependiente de Ca2+ proporcion la base para comprender la manera en que el Ca2+ y el AMPc interactan dentro de la clula. El trmino con el que se conoce ahora a la protena reguladora dependiente del Ca2+ es calmodulina, una protena de 17 KDa.

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La calmodulina tiene cuatro sitios para fijacin del Ca2+ Ca y la ocupacin total de estos sitios conduce duce a un cambio notable de la conformacin, de modo que la mayor parte de la molcula asume una estructura de hlice . Se presume que este cambio de conformacin confiere a la calmodulina la propiedad para activar o inactivar enzimas (por ejemplo, adenilato ciclasa, fosfolipasa A2, A glicerol-3 3 fosfato deshidrogenasa, piruvato carboxilasa, piruvato dashidrogenasa, protena-quinasa protena dependiente Ca2+/fosfolpido /fosfolpido entre otras). La interaccin de Ca2+ con la calmodulina (con el cambio resultante de actividad de la ltima) es conceptualmente anloga a la fijacin f del AMPc a la protena-quinasa quinasa A y la activacin subsiguiente de esta molcula. Con frecuencia, la calmodulina es una de las subunidades reguladoras de protenas oligmeras, entre ellas varias quinasas y enzimas, participando en el metabolismo de combustibles como en la generacin y degradacin de nucletidos cclicos y el transporte de iones. Adems de estos efectos, el complejo Ca2+/calmodulina Ca /calmodulina regula la actividad de numerosos elementos estructurales en en las clulas. Entre otros el complejo actina-miosina miosina del msculo liso, que est bajo control adrenrgico, y varios procesos
Figura 16. Sistema Protena-Quinasa Quinasa C.

mediados por microfilamentos en las clulas no contrctiles inclusive la movilidad de la propia clula, los cambios conformacionales, conformaciona la mitosis, la liberacin de grnulos y la endocitosis.

Sistema de la Protena-Quinasa Quinasa G.

Este sistema es activado por el aumento de GMPc citoplasmtico. Este ste segundo mensajero biolgico es sintetizado por la guanilato ciclasa a partir de GTP. Una na sola cadena polipeptdica proporciona el sitio de unin de hormona, el dominio transmembrana y la actividad guanilato ciclasa. El GMPc producido activa una Protena-Quinasa G, que posteriormente fosforila protenas
Figura 17. Sistema Protena-Quinasa Protena G.

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celulares para que se expresen muchas de las acciones de esta ruta. Una de las formas de inactivacin de este sistema es a travs de la hidrlisis del GMPc, mediante la enzima fosfodiesterasa 5, transformndose el segundo mensajero en GMP-5. (Fig. 17). Es necesario conocer ms datos acerca de la protena-quinasa G. Otras molculas capaces de activar la ruta de la proten-quinasa G es el oxido ntrico, producido por ejemplo, por las clulas endoteliales; o tambin las molculas de monxido de carbono. El GMPc tambin es el mediador de la respuesta a la luz en los procesos de la visin. Aunque en estos casos no se trata de seales del sistema endocrino.

COMUNICACIN CRUZADA (CROSS-TALK)

Este concepto, de mucha importancia, se refiere a la forma en que diferentes hormonas activan varias vas de transduccin de la seal. Involucran tanto a receptores nucleares como de membrana, interrelacionando dichas vas entre s. De esta forma, se logra la coordinacin de las vas de transduccin corriente abajo, a travs de conexiones entre los distintos sistemas, asegurando as su intercomunicacin e integracin. A modo de ejemplo, las quinasas pueden tambin fosforilar receptores nucleares, llevando a cambios conformacionales que regulan su funcin. La fosforilacin, mediada por las cascadas de receptores de membrana, puede asimismo llevar a cambios en la capacidad de unin al ADN de los receptores nucleares, o de unin al ligando, o de unin a los coactivadores.

BIBLIOGRAFA
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